KR102210655B1 - Cosmetic Composition For Heavy Metal Chelation And Particulate Matter Removal Comprising Extract Of Inulae Flos As Active Ingredient - Google Patents
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Abstract
본 발명은 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물에 관한 것으로, 선복화 용매 추출물, 분배추출물 또는 발효 추출물을 유효 성분으로 함유한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과, 염증성 사이토카인 발현 억제 효과, 콜라겐 생합성 저해 억제효과, 히아루론산 분해 억제효과 및 피부손상 회복효과를 갖는다.The present invention relates to a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dust, and contains a sunbokhwa solvent extract, a distribution extract or a fermented extract as an active ingredient.
The cosmetic composition according to the present invention has an effect of inhibiting apoptosis by fine dust, an effect of inhibiting the expression of inflammatory cytokines, an effect of inhibiting the inhibition of collagen biosynthesis, an effect of inhibiting the degradation of hyaluronic acid, and an effect of recovering skin damage.
Description
본 발명은 선복화 추출물을 유효 성분으로 함유하는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과, 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과, 미세먼지에 의한 콜라겐 생합성 저해 억제효과, 미세먼지에 의한 히알루론산 분해 억제효과 및 미세먼지에 의한 피부손상 회복효과를 갖는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dust containing sunbokhwa extract as an active ingredient, and more particularly, an effect of inhibiting apoptosis by fine dust, an effect of suppressing the expression of inflammatory cytokines by fine dust, fine dust It relates to a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dust having an effect of inhibiting collagen biosynthesis by inhibiting, inhibiting hyaluronic acid decomposition by fine dust, and recovering skin damage by fine dust.
미세먼지는 우리 눈에 보이지 않는 아주 작은 물질로 대기 중에 오랫동안 떠다니거나 흩날려 내려오는 직경 10㎛ 이하의 입자상 물질을 의미한다. 구체적으로, 석탄, 석유 등의 화석연료가 연소될 때 또는 제조업ㆍ자동차 매연 등의 배출가스에서 나오며, 기관지를 거쳐 폐에 흡착되어 각종 폐질환을 유발하는 대기오염물질이다.Fine dust is a very small substance that is invisible to our eyes and means particulate matter with a diameter of 10㎛ or less that floats or scatters in the air for a long time. Specifically, it is an air pollutant that occurs when fossil fuels such as coal and petroleum are burned or from exhaust gases such as manufacturing and automobile exhaust, and adsorbed to the lungs through the bronchi, causing various lung diseases.
먼지는 입자의 크기에 따라 총 먼지(TSP, Total Suspended Particle), 지름이 10㎛ 이하인 미세먼지(PM 10), 지름이 2.5㎛ 이하(PM 2.5)인 초미세먼지로 나뉜다. 미세먼지는 질산염(NO3 -), 암모늄(NH4 +), 황산염(SO4 2-) 등의 이온 성분과 탄소화합물(carbon compounds), 금속(elements) 화합물 등으로 이루어져 있는데 세계보건기구(WHO)는 미세먼지 중 디젤에서 배출되는 BC(black carbon)를 1급 발암물질로 지정한 바 있다. 장기간 미세먼지에 노출될 경우 면역력이 급격히 저하되어 감기, 천식, 기관지염 등의 호흡기 질환은 물론 심혈관 질환, 피부질환, 안구질환 등 각종 질병에 노출될 수 있다. 특히 직경 2.5㎛ 이하의 초미세먼지는 인체 내 기관지 및 폐 깊숙한 곳까지 침투하기 쉬워 기관지, 폐 등에 붙어 각종 질환을 유발한다(PM 2.5). 황사는 중국의 고비사막과 몽골에서 주로 3월 봄철에 날아오는 모래를 말한다. 반면 세계보건기구(WHO)에서 1급 발암물질로 정한 미세먼지는 중국 상하이와 칭다오 지역의 매연과 자동차 배기가스 등이 포함된 고농도의 대기오염물질이다.Dust is divided into total dust (TSP, Total Suspended Particle), fine dust with a diameter of 10 μm or less (PM 10), and ultrafine dust with a diameter of 2.5 μm or less (PM 2.5). Fine dust is nitrate (NO 3 -), ammonium (NH 4 +), sulfate (SO 4 2-) there consists of ions, such as carbon compounds (carbon compounds), metal (elements) compound such as the World Health Organization (WHO ) Has designated BC (black carbon) emitted from diesel among fine dust as a first-class carcinogen. When exposed to fine dust for a long period of time, immunity is rapidly lowered, leading to exposure to various diseases such as cardiovascular disease, skin disease, and eye disease, as well as respiratory diseases such as colds, asthma, and bronchitis. Particularly, ultrafine dust with a diameter of 2.5㎛ or less easily penetrates deep into the bronchi and lungs in the human body and attaches to the bronchi and lungs, causing various diseases (PM 2.5). Yellow sand refers to the sand that comes mainly from the Gobi Desert in China and Mongolia in the spring of March. On the other hand, fine dust, which has been designated as a first-class carcinogen by the World Health Organization (WHO), is a high-concentration air pollutant in Shanghai and Qingdao, China, including soot and automobile exhaust.
미세먼지는 건선, 아토피성 피부염, 여드름과 같은 염증성 피부질환뿐 아니라 피부노화, 탈모, 피부암에도 영향을 미친다. 미세먼지는 모공의 크기보다 최대 20배 정도 작기 때문에 피부 내로 쉽게 침투할 수 있으며 지속적인 미세먼지의 공격은 피부장벽의 보호 기능을 상실시킴으로써 심각한 질병을 초래할 수 있다. 또한 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인의 증가와 체내 활성산소의 증가가 피부 세포에서 염증 반응, 주름 생성, 색소 침착을 증가시키며 심각하게는 피부암 발병에도 영향을 준다고 알려져 있다. 미세먼지는 단기적으로 조기 노화, 수분 부족, 색소 침착, 잔주름과 주름을 증가시키고, 장기적으로는 되돌릴 수 없는 피부 손상으로 인해 피부가 환경적 요소들로부터 몸을 보호하는 기능을 상실하면서 피부암과 같은 심각한 병을 초래할 수 있다.Fine dust affects not only inflammatory skin diseases such as psoriasis, atopic dermatitis, and acne, but also skin aging, hair loss, and skin cancer. Since fine dust is up to 20 times smaller than the size of pores, it can easily penetrate into the skin, and continuous attack of fine dust may cause serious diseases by losing the protective function of the skin barrier. In addition, it is known that the increase of inflammatory cytokines and the increase of free radicals in the body caused by fine dust increase the inflammatory response, wrinkle formation, and pigmentation in skin cells, and seriously affect the development of skin cancer. Fine dust increases premature aging, lack of moisture, pigmentation, fine lines and wrinkles in the short term, and in the long term, irreversible skin damage causes the skin to lose its ability to protect the body from environmental factors, leading to serious problems such as skin cancer. May cause illness.
한국등록특허 제10-1629706호는 진귤 과피 추출물, 고사리삼 추출물 및 백기생 추출물로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 추출물을 유효성분으로 포함하는 황사 또는 미세먼지로부터 유발되는 피부 염증 완화용 조성물에 관하여 기재되어 있다. 또한, 한국공개특허 제10-2016-0108015호는 구아바, 조릿대, 울금, 백수오 및 섬오가피의 복합 식물 추출물을 유효성분으로 함유하는 중금속에 의한 피부 손상의 예방 또는 치료용 조성물에 관하여 기재되어 있다.Korean Patent Registration No. 10-1629706 describes a composition for relieving skin inflammation caused by yellow dust or fine dust, comprising as an active ingredient at least one extract selected from the group consisting of a Tangerine peel extract, a bracken ginseng extract, and a white parasitic extract. . In addition, Korean Patent Laid-Open Publication No. 10-2016-0108015 describes a composition for preventing or treating skin damage caused by heavy metals containing complex plant extracts of guava, chorizo, turmeric, baekshou, and island Ogapi as active ingredients. .
본 발명자들은 이제까지 알려지지 않은 여러 천연물들에 있어서 화장품으로의 응용 가능성을 연구한 결과, 선복화를 선정하고 이로부터 선복화 추출물, 분배추출물 및 발효추출물을 제조하여 중금속 및 미세먼지 흡착효과, 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과, 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인 억제효과, 미세먼지에 의한 콜라겐 합성 저해 억제효과, 미세먼지에 의한 히아루론산 분해 억제효과, 미세먼지에 의한 피부손상 회복효과를 측정한 그 효능이 매우 우수하다는 것을 발견하게 되었다.As a result of researching the possibility of application to cosmetics in various natural products, the inventors of the present invention selected Seonbokhwa and prepared Seonbokhwa extract, distribution extract, and fermented extract from it to prevent heavy metal and fine dust adsorption effect and fine dust. The effect of measuring the effect of inhibiting apoptosis due to apoptosis, the effect of inhibiting inflammatory cytokines by fine dust, the effect of inhibiting the inhibition of collagen synthesis by fine dust, the effect of inhibiting the decomposition of hyaluronic acid by the fine dust, and the effect of recovering skin damage by the fine dust is very effective. I found it to be excellent.
본 발명의 목적은 선복화 추출물, 분배추출물 및 발효추출물을 함유하여 중금속 및 미세먼지 흡착효과, 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과, 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인 억제효과, 미세먼지에 의한 콜라겐 합성 저해 억제효과, 미세먼지에 의한 히아루론산 분해 억제효과, 미세먼지에 의한 피부손상 회복효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.The object of the present invention is to contain the extract, distribution extract and fermentation extract, so as to adsorb heavy metals and fine dust, inhibit apoptosis by fine dust, inhibit inflammatory cytokines by fine dust, inhibit collagen synthesis by fine dust. It is to provide a cosmetic composition that exhibits an inhibitory effect, an effect of inhibiting the decomposition of hyaluronic acid by fine dust, and an effect of recovering skin damage by fine dust.
따라서, 상기와 같은 본 발명의 목적은 선복화(Inulae Flos) 추출물을 유효 성분으로 함유하는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물에 의해 달성된다.Accordingly, the object of the present invention as described above is achieved by a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dust containing an extract of Inulae Flos as an active ingredient.
바람직하게는, 상기 선복화 추출물은 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 추출용매로 추출된 용매추출물, (b) 선복화를 용매추출법으로 추출한 추출물을 N-헥산(N-hexane), 염화메틸렌(methylene chloride), 에틸아세테이트(ethyl acetate) 및 물로 순차적으로 분획하는 단계로 얻어지는 분배 추출물 또는 (c) 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum ATCC 10012)로 발효시켜 얻은 발효 추출법을 사용하여 추출된 발효 추출물인 것을 특징으로 하는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.Preferably, the sunbokhwa extract is (a) water, anhydrous or water-containing lower alcohol having 1-4 carbon atoms, propylene glycol, butylene glycol, glycerin, acetone, ethyl acetate, chloroform, butyl acetate, diethyl ether, dichloromethane , Hexane, and a solvent extract extracted with an extraction solvent selected from the group consisting of mixtures thereof, (b) the extract extracted by solvent extraction method of sunbokhwa, N-hexane, methylene chloride, ethyl acetate (Ethyl acetate) and a partitioned extract obtained by sequentially fractionating with water or (c) a fermented extract extracted using a fermentation extraction method obtained by fermentation with Lactobacillus plantarum ATCC 10012; and It is characterized in that it is a cosmetic composition for removing fine dust.
바람직하게는, 상기 선복화 추출물은 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과, 콜라겐 생합성 저해 억제효과, 히아루론산 분해 억제효과 및 피부손상 회복효과를 갖는, 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.Preferably, the sunbokhwa extract is characterized in that it is a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dust having an effect of inhibiting apoptosis by fine dust, an inhibitory effect of inhibiting collagen biosynthesis, an effect of inhibiting decomposition of hyaluronic acid, and an effect of recovering skin damage.
바람직하게는, 상기 선복화 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.0001 ~ 30.0 중량% 함유되는, 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.Preferably, the sunbokhwa extract is characterized in that it is a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dust containing 0.0001 to 30.0% by weight based on the total weight of the cosmetic composition.
바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 클렌징, 오일, 분말파운데이션, 유탁액파운데이션, 왁스파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는, 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물인 것을 특징으로 한다.Preferably, the cosmetic composition is a group consisting of a solution, a suspension, an emulsion, a paste, a gel, a cream, a lotion, a powder, a soap, a cleansing, an oil, a powder foundation, an emulsion foundation, a wax foundation, a pack, a massage cream and a spray. It is characterized in that it is a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dust having a formulation selected from.
본 발명에 따른 선복화 추출물, 분배추출물 및 발효추출물은 중금속 및 미세먼지 흡착 효과(실험예 1), 미세먼지에 의한 세포사멸 억제 효과(실험예 2), 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제 효과(실험예 3), 미세먼지에 의한 콜라겐 생합성 저해 억제 효과(실험예 4), 미세먼지에 의한 히아루론산 분해 억제 효과(실험예 5) 및 미세먼지에 의한 피부손상 회복 효과(실험예 6)를 갖는다.Seonbokhwa extract, distribution extract, and fermentation extract according to the present invention have the effect of adsorbing heavy metals and fine dust (Experimental Example 1), inhibiting apoptosis by fine dust (Experimental Example 2), and inhibiting the expression of inflammatory cytokines by fine dust. (Experimental Example 3), the effect of inhibiting the inhibition of collagen biosynthesis by fine dust (Experimental Example 4), the effect of inhibiting the decomposition of hyaluronic acid by fine dust (Experimental Example 5), and the effect of recovering skin damage due to fine dust (Experimental Example 6). .
도 1은 본 발명에 따른 선복화 분배 추출물의 제조 과정을 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 선복화 추출물의 히알루론산 분해 억제 효과를 나타내는 그래프이다.Figure 1 shows the manufacturing process of the extract of Seonbokhwa distribution according to the present invention.
Figure 2 is a graph showing the hyaluronic acid decomposition inhibitory effect of the sunbokhwa extract according to the present invention.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기로 한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 하기의 정의를 가지며 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미에 부합된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다.All technical terms used in the present invention, unless otherwise defined, have the following definitions and correspond to the meanings as commonly understood by one of ordinary skill in the relevant fields of the present invention. In addition, although preferred methods or samples are described in the present specification, those similar or equivalent are included in the scope of the present invention.
용어 "약"이라는 것은 참조 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이에 대해 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1% 정도로 변하는 양, 수준, 값, 수, 빈도, 퍼센트, 치수, 크기, 양, 중량 또는 길이를 의미한다.The term “about” refers to 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, or 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, or relative to a reference amount, level, value, number, frequency, percentage, dimension, size, amount, weight or length. It means an amount, level, value, number, frequency, percentage, dimension, size, amount, weight or length varying by 4, 3, 2 or 1%.
본 명세서를 통해, 문맥에서 달리 필요하지 않으면, "포함하다" 및 "포함하는"이란 말은 제시된 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군을 포함하나, 임의의 다른 단계 또는 구성요소, 또는 단계 또는 구성요소들의 군이 배제되지는 않음을 내포하는 것으로 이해하여야 한다.Throughout this specification, unless otherwise required by the context, the terms “comprise” and “comprising” include the steps or components presented, or groups of steps or components, but any other step or component, or It is to be understood that a step or group of components is not excluded.
본 발명에 따른 화장료 조성물은 중금속 및 미세먼지 제거 위한 유효성분으로 함유하는 선복화 추출물, 분배추출물 또는 발효추출물을 함유하는 화장료 조성물이다. 선복화의 생약명은 Inulae Flos이며 국화과의 금불초(Inula britannica var. japonica(Thunb.) Franch. & Sav)의 꽃을 말린 약재이다. 생김새는 편구형 또는 구형이며 여러 개의 총포로 이루어져 기와 모양으로 배열되어 있다. 포의 조각은 작은 비늘 모양으로 회황색이다. 총포의 밑부분에는 꽃받침의 흔적이 있고 포의 조각과 꽃받침의 바깥 면은 백색 털로 덮여 있다. 씨방의 끝부분에는 백색 털이 많고 그 길이는 약 5mm이다. 여기에 타원형의 작은 씨가 있다. 선복화는 특이한 냄새가 있고 맛은 쓰고 맵고 짜며 성질은 약간 따듯하다. 선복화는 뭉친 기를 순환시켜 풀어주어 가래나 기침, 딸꾹질, 트림, 천식, 만성기관지염, 급성늑막염, 가슴이 항상 그득한 것처럼 답답한 증상에 쓰며 입덧, 유암, 유옹 등에 사용한다. 약리작용으로 기관지의 항경련작용, 이뇨작용 등이 보고되었다.The cosmetic composition according to the present invention is a cosmetic composition containing a sunbokhwa extract, a distribution extract, or a fermentation extract containing as an active ingredient for removing heavy metals and fine dust. The herbal name of Seonbokhwa is Inulae Flos, and it is the dried medicinal material of Inula britannica var. japonica(Thunb.) Franch. & Sav). The shape is flat or spherical and consists of several guns and is arranged in a tiled shape. Fragment of bract is grayish yellow in shape of small scales. There are traces of calyx at the bottom of the gun, and the fragment of bract and the outer surface of calyx are covered with white hair. There are many white hairs at the end of the ovary, and the length is about 5mm. Here is a small oval seed. Seonbokhwa has a peculiar smell, bitter taste, spicy and salty, and a little warm in nature. Seonbokhwa is used for sputum, cough, hiccups, belching, asthma, chronic bronchitis, acute pleurisy, and stuffy symptoms as if the chest is always full by circulating and releasing the lumps. As a pharmacological action, anticonvulsant and diuretic effects of the bronchi have been reported.
본 발명에 있어서, 선복화의 추출물은 선복화의 다양한 기관 또는 부분(예: 잎, 가지, 꽃, 뿌리, 줄기 등)으로부터 추출하여 얻은 것을 의미하고, 바람직하게는 전초 또는 뿌리로부터 얻은 추출물이고, 가장 바람직하게는 전초로부터 얻은 추출물을 의미한다. 선복화 추출물에는 용매 추출물, 분배 추출물 또는 발효 추출물을 포함한다.In the present invention, the extract of Seonbokhwa means obtained by extracting from various organs or parts of Seonbokhwa (eg, leaves, branches, flowers, roots, stems, etc.), and is preferably an extract obtained from outposts or roots, Most preferably, it means an extract obtained from outpost. The sunbokhwa extract includes a solvent extract, a distribution extract, or a ferment extract.
본 발명에 있어서, 선복화의 용매 추출물은 당업계에 공지된 통상의 방법에 따라서, 즉, 통상적인 온도와 압력의 조건 하에서, 통상적인 용매를 사용하여 제조될 수 있으나, 바람직하게는 (a) 물, 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올(예를 들면, 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올), 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 디에틸에테르, 에틸 아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 헥산 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 용매를 이용한 용매 추출법을 이용하여 추출한다. 본 발명에서는 바람직하게는 추출용매를 이용한 용매 추출법을 이용하였다. 바람직하게는 에탄올, 70%(v/v) 에탄올 또는 물을 사용하여 얻어진 것이고, 가장 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올을 사용하여 얻어진 것이다. 한편, 본 발명의 천연식물의 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.In the present invention, the solvent extract of sunbokhwa may be prepared according to a conventional method known in the art, that is, under the conditions of a conventional temperature and pressure, using a conventional solvent, preferably (a) Water, anhydrous or hydrated lower alcohols having 1-4 carbon atoms (e.g., methanol, ethanol, propanol and butanol), propylene glycol, 1,3-butylene glycol, glycerin, acetone, diethyl ether, ethyl acetate, butyl acetate , Dichloromethane, chloroform, hexane, and extracted using a solvent extraction method using a solvent selected from the group consisting of a mixture thereof. In the present invention, preferably, a solvent extraction method using an extraction solvent was used. It is preferably obtained using ethanol, 70% (v/v) ethanol or water, and most preferably, it is obtained using 70% (v/v) ethanol. On the other hand, it is apparent to those skilled in the art that the extract of the natural plant of the present invention can obtain an extract exhibiting substantially the same effect even by using not only the above-described extraction solvent but also other extraction solvents.
본 발명의 선복화의 분배추출물은 상기 용매 추출물을 N-헥산, 염화메틸렌, 에틸아세테이트 및 물로 극성에 따라 순차적으로 분획하여 제조한다. 상기 용매 추출물을 물에 재용해시킨 뒤 물과 동량의 N-헥산을 첨가하여 2~5회 분획하고 N-헥산층을 분리한 뒤 감압 농축하여 N-헥산 분획물을 제조한다. 다음으로 N-헥산을 제거한 후 남은 물층에 동량의 염화 메틸렌을 첨가하여 2~5회 분획하고 염화메틸렌을 분리한 뒤 감압 농축하여 염화메틸렌 분획물을 제조한다. 그 다음으로 염화메틸렌을 제거한 후 남은 물층에 동량의 에틸아세테이트를 첨가하여 2~5회 분획하고 에틸아세테이트를 제거한 뒤 감압 농축하여 에틸아세테이트 분획물을 제조한다. 남은 물층은 동결건조하여 물 분획물을 제조한다.The distribution extract of sunbokhwa of the present invention is prepared by sequentially fractionating the solvent extract with N-hexane, methylene chloride, ethyl acetate, and water according to polarity. The solvent extract was redissolved in water, and then fractionated 2 to 5 times by adding N-hexane in the same amount as water, and the N-hexane layer was separated and concentrated under reduced pressure to prepare an N-hexane fraction. Next, after removing N-hexane, the same amount of methylene chloride was added to the remaining water layer, fractionated 2 to 5 times, and methylene chloride was separated and concentrated under reduced pressure to prepare a methylene chloride fraction. Then, after removing methylene chloride, the same amount of ethyl acetate was added to the remaining water layer to fractionate 2 to 5 times, and after removing ethyl acetate, it was concentrated under reduced pressure to prepare an ethyl acetate fraction. The remaining water layer is freeze-dried to prepare a water fraction.
본 발명의 선복화의 발효추출물은 다음과 같이 제조할 수 있다. 선복화를 100~500메쉬 정도로 미세하게 파쇄한 다음 통상적인 미생물 배양액에 선복화를 1 ~ 30 중량% 첨가하고 유산균을 10,000 ~ 10,000,000 cfu/mL의 양으로 첨가한다. 배양온도는 30~37℃의 통상적인 미생물 배양조건으로 배양한다. pH는 5~7로 호기적 또는 통상 혐기(anaerobic)적인 조건으로 약 24 내지 72시간 배양한다. 이후 숙성 및 여과를 통해 얻을 수 있다 The fermented extract of Seonbokhwa of the present invention can be prepared as follows. After finely crushing the sunbokhwa to about 100-500 mesh, 1-30% by weight of sunbokhwa was added to a conventional microbial culture solution, and lactic acid bacteria were added in an amount of 10,000 ~ 10,000,000 cfu/mL. The culture temperature is 30~37℃ under normal microbial culture conditions. The pH is 5-7, and incubation is carried out for about 24 to 72 hours under aerobic or usually anaerobic conditions. It can then be obtained through aging and filtration.
본 발명에 따르면, 상기 선복화 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.0001 ~ 30.0 중량%함유되며, 더욱 바람직하게는, 상기 선복화 추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.01 ~ 10 중량%함유되는 것을 특징으로 한다. 상기 선복화 추출물의 함량이 0.0001 중량%미만인 경우에는 피부개선 효과가 나타나지 않으며, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 개선 효과 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며 경제적이지도 못하다.According to the present invention, the sunbokhwa extract is contained in 0.0001 to 30.0% by weight with respect to the total weight of the cosmetic composition, more preferably, the sunbokhwa extract is contained in 0.01 to 10% by weight with respect to the total weight of the cosmetic composition It is characterized. When the content of the sunbokhwa extract is less than 0.0001% by weight, the skin improvement effect does not appear, and when it exceeds 30.0% by weight, the degree of increase in the skin improvement effect due to the increase in content is insignificant, and there is a problem with the safety and stability of the formulation. And it is not economical.
따라서, 이러한 다양한 기능을 가진 선복화 추출물, 분배추출물 및 발효추출물을 포함하는 본 발명의 화장료 조성물은 중금속 및 미세먼지 제거에 효과적이다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 중금속 및 미세먼지로 인해 발생하는 피부 염증 예방하고 피부 손상을 회복시킨다. 구체적으로 상기 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물은 우수한 중금속 및 미세먼지 흡착효과, 세포사멸 억제효과, 항염효과, 피부손상 회복효과를 통해 이루어질 수 있다.Therefore, the cosmetic composition of the present invention including the extract of sunbokhwa, distribution extract, and fermentation extract having these various functions is effective in removing heavy metals and fine dust. In addition, the cosmetic composition according to the present invention prevents skin inflammation and recovers skin damage caused by heavy metals and fine dust. Specifically, the cosmetic composition for removing heavy metals and fine dust may be achieved through excellent heavy metal and fine dust adsorption effect, apoptosis inhibitory effect, anti-inflammatory effect, and skin damage recovery effect.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.Ingredients included in the cosmetic composition of the present invention may include ingredients commonly used in cosmetic compositions in addition to the active ingredients as an active ingredient. For example, conventional ingredients such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and fragrances It includes an adjuvant, and a carrier.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art, for example, solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing , Oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, pack, massage cream and spray may be formulated, but is not limited thereto. In more detail, it may be prepared in the form of a flexible lotion, nutritional lotion, nutritional cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracanth, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc, or zinc oxide may be used as carrier components. I can.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, a solubilizing agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 ,3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethyleneglycol or fatty acid ester of sorbitan.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, liquid diluents such as water, ethanol or propylene glycol as carrier components, ethoxylated isostearyl alcohol, suspending agents such as polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, microcrystals Sex cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, and the like can be used.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate, or polyamide powder may be used as a carrier component. In particular, in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane / May contain propellants such as butane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 계면활성제가 함유된 클렌징의 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.In the case of cleansing the formulation of the present invention containing a surfactant, as a carrier component, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid Amide ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters, and the like may be used.
본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.When the cosmetic composition of the present invention is a soap, a cleansing formulation containing a surfactant, or a cleansing formulation containing no surfactant, it may be applied to the skin and then wiped off, removed, or washed with water. As a specific example, the soap is liquid soap, powder soap, solid soap and oil soap, the surfactant-containing cleansing formulation is a cleansing foam, cleansing water, cleansing towel and cleansing pack, and the cleansing formulation without surfactant is a cleansing cream , Cleansing lotion, cleansing water, and cleansing gel, but is not limited thereto.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. These examples are only for describing the present invention in more detail, and it will be apparent to those of ordinary skill in the art that the scope of the present invention is not limited by these examples according to the gist of the present invention. .
제조예 1: 선복화 추출물 제조Preparation Example 1: Preparation of sunbokhwa extract
세절하여 음건한 선복화 전초 100g을 70% (V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물을 50℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 건조하여 19.4g의 선복화 추출물을 얻었다.100 g of shredded and shaded outpost was refluxed three times for 5 hours each with 70% (V/V) ethanol aqueous solution, cooled, and then filtered through Whatman #4 filter paper. The filtered extract was concentrated under reduced pressure at 50° C. or lower and freeze-dried to obtain 19.4 g of sunbokhwa extract.
제조예 2 내지 5 : 선복화 추출물의 분획물Preparation Examples 2 to 5: Fractions of Seonbokhwa extract
상기 선복화 에탄올 추출물을 극성에 따라 분획하기 위해 유기용매를 이용해 도 1과 같이 계통적 분획을 실시하였다. 구체적으로는 상기 에탄올 추출물을 물에 다시 녹인 뒤 동량의 N-헥산(n-hexane)을 첨가하고 헥산층을 분리하여 헥산 분획물을 수득하였다 (제조예 2). 상기 헥산 분획물을 제거한 물층에 염화메틸렌(methylene chloride)을 동량 첨가하고 염화메틸렌 층을 분리하여 염화메틸렌 분획물을 수득하였다 (제조예 3). 상기 염화메틸렌 분획물을 제거한 물층에 에틸아세테이트(ethyl acetate)를 동량 첨가하고 에틸아세테이트 층을 분리하여 에틸아세테이트 분획물을 수득하였다 (제조예 4). 상기 에틸 아세테이트 분획물을 제거하고 남은 물층을 동결건조하여 물 분획물을 수득하였다(제조예 5). 상기 분획과정은 상온에서 수행하였으며 각 분획을 3시간 이상 정치하였다. 각 분획물을 얻는 과정은 2회 반복 수행되었으며 물층을 제외한 분획물은 여과 후 감압농축하고 건조시켰다. 상기 과정은 도 2에 기재되어 있다.In order to fractionate the ethanol extract according to polarity, a systematic fractionation was performed as shown in FIG. 1 using an organic solvent. Specifically, after dissolving the ethanol extract in water again, the same amount of N-hexane was added, and the hexane layer was separated to obtain a hexane fraction (Preparation Example 2). An equal amount of methylene chloride was added to the water layer from which the hexane fraction was removed, and the methylene chloride layer was separated to obtain a methylene chloride fraction (Preparation Example 3). An equal amount of ethyl acetate was added to the water layer from which the methylene chloride fraction was removed, and the ethyl acetate layer was separated to obtain an ethyl acetate fraction (Preparation Example 4). The ethyl acetate fraction was removed and the remaining water layer was lyophilized to obtain a water fraction (Preparation Example 5). The fractionation process was performed at room temperature, and each fraction was allowed to stand for at least 3 hours. The process of obtaining each fraction was repeated twice, and the fractions excluding the water layer were filtered, concentrated under reduced pressure, and dried. The process is described in Figure 2.
제조예 6 : 선복화 발효추출물 제조Preparation Example 6: Preparation of fermented extract of Seonbokhwa
제조예 6은 선복화 추출물의 발효추출물로서 제조예 1을 유산균 발효하여 제조하였다. 유산균용 배양배지는 락토바실러스 MRS 배지(Lactobacillus MRS Broth)(DIFCO, USA)를 사용하였으며 여기에 각각 상기 제조예 1의 선복화 추출물을 1 ~ 30 중량%, 바람직하게는 10 중량% 첨가하여 제조하였다. 상기 락토바실러스 MRS 배지에 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum ATCC 10012)를 10,000,000cfu로 접종 후 35℃에서 72시간동안 배양하였다. 배양 후, 배양액을 원심 분리하여 균을 제거하여 선복화 발효물을 얻은 뒤 여기에 에탄올을 최종 70%(V/V)가 되도록 첨가한 뒤 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하였다. 여과된 발효추출물을 다시 0.25 um 여과지로 여과한 후 이를 60℃ 이하에서 감압 농축 및 동결 하여 16.3g의 선복화 발효추출물을 얻었다.Preparation Example 6 was prepared by fermenting Preparation Example 1 as a fermented extract of Seonbokhwa extract. The culture medium for lactic acid bacteria was prepared by adding Lactobacillus MRS Broth (DIFCO, USA) to 1 to 30% by weight, preferably 10% by weight, respectively, of the Seonbokhwa extract of Preparation Example 1 . Lactobacillus plantarum ( Lactobacillus plantarum ATCC 10012) was inoculated with 10,000,000 cfu in the Lactobacillus MRS medium and cultured at 35° C. for 72 hours. After cultivation, the culture solution was centrifuged to remove bacteria to obtain a precipitated fermented product, and ethanol was added to the final 70% (V/V), followed by extraction under reflux 3 times for 5 hours, cooling, and then Whatman Filtered through (Whatman) #4 filter paper. The filtered fermented extract was filtered again with 0.25 um filter paper, concentrated under reduced pressure at 60° C. or lower, and then frozen to obtain 16.3 g of fermented fermented extract.
실험예 1: 중금속 및 미세먼지 흡착효과Experimental Example 1: Adsorption effect of heavy metals and fine dust
천연식물 추출물의 중금속과 미세먼지 흡착효과를 확인하기 위해, 각각 100ppm의 납, 카드뮴, 구리, 비소, 아연 및 미세먼지(PM2.5)를 10,000ppm 농도의 제조예 1 내지 6와 각각 1시간 동안 반응시킨 뒤 필터링하였다. 필터하고 남은 필터액의 잔존 중금속 및 미세먼지 함량을 원자흡수분광법(Atomic absorption spectrometry)을 통해 측정하였다. 대조군으로는 제조예 대신 정제수를 포함하는 군을 사용하였다. 흡착율은 중금속과 미세먼지 흡착 후 시료의 농도를 흡착 전 시료의 농도로 나눠 계산하였으며, 흡착율이 높을수록 중금속 및 미세먼지를 효과적으로 흡착하여 제거하는 것을 의미하였으며 그 결과를 표 1에 나타냈다.In order to confirm the adsorption effect of heavy metals and fine dust of natural plant extracts, 100 ppm of lead, cadmium, copper, arsenic, zinc, and fine dust (PM2.5) of 100 ppm were respectively added to Preparation Examples 1 to 6 at a concentration of 10,000 ppm for 1 hour, respectively. After reacting, it was filtered. The content of residual heavy metals and fine dust in the filter liquid remaining after filtering was measured by atomic absorption spectrometry. As a control, a group containing purified water was used instead of the preparation example. The adsorption rate was calculated by dividing the concentration of the sample after adsorption of heavy metals and fine dust by the concentration of the sample before adsorption. The higher the adsorption rate, the more effective it means to adsorb and remove heavy metals and fine dust, and the results are shown in Table 1.
상기 표 1의 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 선복화 추출물인 제조예 1에 의해 제조된 용매 추출물과 제조예 2 내지 5에 의해 제조된 분배 추출물 및 제조예 6에 의해 제조된 발효 추출물은 중금속 및 미세먼지 흡착효과가 우수함을 확인할 수 있었다. As can be seen from the results of Table 1, the solvent extract prepared by Preparation Example 1, which is the sunbokhwa extract of the present invention, the distribution extract prepared by Preparation Examples 2 to 5, and the ferment extract prepared by Preparation Example 6, are heavy metals And it was confirmed that the fine dust adsorption effect was excellent.
실험예 2: 미세먼지에 의한 세포사멸 억제효과Experimental Example 2: Effect of inhibiting apoptosis by fine dust
실험예 2는 제조예 1 내지 6에서 수득한 추출물의 미세먼지에 의한 세포사멸을 억제하는 효과를 측정한 것이다.Experimental Example 2 measures the effect of inhibiting apoptosis by fine dust of the extracts obtained in Preparation Examples 1 to 6.
인간 피부 각질형성 세포(한국 세포주 은행, 대한민국)를 48-웰 마이크로 플레이트(Nunc, 덴마크)에 각 웰당 1×104 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(Sigma, 미합중국)에서 37℃의 조건에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 미세먼지(100ppm) 또는 황사와 상기 제조예 1 내지 6의 추출물을 각각 500ppm을 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 미세먼지만 단독 포함된 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 동안 추가로 배양하였다. 사용된 미세먼지는 황사 또는 대기 중에 떠다니는 직경 0.001㎛에 이르는 모든 입자상물질인 TSP(total suspended particle), PM2.5(Particulate matter 2.5), PM10(Particulate matter 10) 및 urban dust(Standard Reference Material 1649b)이다. 배양 후 MTT시약을 첨가하고 4시간 동안 배양한 후, 배양액을 제거하고 1N NaOH/이소프로판올 용액을 첨가하여 20분간 교반한 후 흡광 광도계로 565nm에서 흡광도를 측정하고 세포의 생존율을 계산하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다.Human skin keratinocytes (Korea Cell Line Bank, Republic of Korea) were inoculated into 48-well microplates (Nunc, Denmark) to 1×10 4 cells per well, and 24 at 37°C in DMEM medium (Sigma, USA). Incubated for hours. After cultivation, fine dust (100 ppm) or yellow sand and the extracts of Preparation Examples 1 to 6 were further cultured for 24 hours in a serum-free DMEM medium containing 500 ppm, respectively, and a serum-free DMEM medium containing only fine dust as a control. The fine dust used is yellow sand or all particulate matter with a diameter of 0.001㎛ floating in the air, such as TSP (total suspended particle), PM2.5 (Particulate matter 2.5), PM10 (Particulate matter 10) and urban dust (Standard Reference Material). 1649b). After incubation, MTT reagent was added and incubated for 4 hours, the culture solution was removed, 1N NaOH/isopropanol solution was added, stirred for 20 minutes, absorbance was measured at 565 nm with an absorbance photometer, and the viability of cells was calculated. It is shown in Table 2.
상기 표 2의 결과에서 알 수 있듯이, 황사, TSP(total suspended particle), PM2.5(Particulate matter 2.5), PM10(Particulate matter 10) 및 urban dust에 의해 피부 각질형성세포의 세포사멸이 유발됨을 확인할 수 있었다. 발명의 제조예 1에 의해 제조된 추출물과 제조예 2 내지 5에 의해 제조된 분획물 및 제조예 6에 의해 제조된 발효추출물은 피부 각질형성세포에서 미세먼지에 의해 유발된 세포사멸을 억제시켜 세포생존율을 증가시킬 수 있음을 확인하였다.As can be seen from the results of Table 2, it was confirmed that apoptosis of skin keratinocytes was induced by yellow dust, TSP (total suspended particle), PM2.5 (Particulate matter 2.5), PM10 (Particulate matter 10), and urban dust. Could The extract prepared by Preparation Example 1 of the present invention, the fractions prepared by Preparation Examples 2 to 5, and the fermentation extract prepared by Preparation Example 6 suppress apoptosis caused by fine dust in skin keratinocytes It was confirmed that can be increased.
실험예 3: 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인 발현 억제효과Experimental Example 3: Inhibitory Effect of Inflammatory Cytokine Expression by Fine Dust
실험예 3은 제조예 1 내지 6을 통하여 수득한 추출물의 미세먼지 및 중금속에 의해 발현되는 염증성 사이토카인 발현 억제 효과를 평가하기 위한 것이다. 사람의 표피 조직에서 분리한 섬유아세포(fibroblast)를 24-웰 시험 플레이트에 5×104개씩 넣고 24시간 동안 부착시켰다. 각 웰을 PBS로 1회 세척하고 각 웰에 500 μl의 PBS를 넣었다. 이 섬유아세포에 미세먼지(100ppm) 또는 황사와 상기 제조예 1 내지 6을 각각 500ppm을 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 미세먼지만 단독 포함된 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 상층액을 150μl을 취하여 IL-1α를 정량함으로서 식물 추출물 및 혼합물의 염증성 사이토카인 발현 억제 효과를 판단하였다. IL-1α의 양은 효소 면역 분석법(Enzyme-linked immunosorbent assay)을 이용하여 정량화하였으며, 염증성 사이토카인(IL-1α)의 발현 억제율(%)은 하기 수학식 1에 의해 계산하였다.Experimental Example 3 is to evaluate the effect of inhibiting the expression of inflammatory cytokines expressed by fine dust and heavy metals of the extracts obtained through Preparation Examples 1 to 6. Fibroblasts isolated from human epidermal tissue were placed in a 24-well test plate each of 5×10 4 and adhered for 24 hours. Each well was washed once with PBS, and 500 μl of PBS was added to each well. The fibroblasts were further cultured for 24 hours in a serum-free DMEM medium containing 500 ppm of fine dust (100 ppm) or yellow dust and Preparation Examples 1 to 6, respectively, and a serum-free DMEM medium containing only fine dust as a control. By taking 150 μl of the culture supernatant and quantifying IL-1α, the inhibitory effect of plant extracts and mixtures on inflammatory cytokine expression was determined. The amount of IL-1α was quantified using an enzyme-linked immunosorbent assay, and the inhibition rate (%) of the expression of an inflammatory cytokine (IL-1α) was calculated by Equation 1 below.
Bo : 자외선 조사하지 않고 시료 처리하지 않은 웰의 IL-1α 생성량Bo: IL-1α production in wells without UV irradiation and sample treatment
Bt : 자외선 조사하고 시료 처리하지 않은 웰의 IL-1α 생성량 Bt: The amount of IL-1α produced in the well not subjected to UV irradiation and sample treatment
St : 자외선 조사하고 시료 처리한 웰의 IL-1α 생성량 St: IL-1α production amount of the sample-treated well after irradiation with ultraviolet rays
표 3에 따르면, 제조예 1에 의해 제조된 추출물과 제조예 2 내지 5에 의해 제조된 분획물 및 제조예 6에 의해 제조된 발효추출물은 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인인 IL-1α의 생성을 억제하는 것을 알 수 있었다. According to Table 3, the extract prepared by Preparation Example 1, the fractions prepared by Preparation Examples 2 to 5, and the fermented extract prepared by Preparation Example 6 inhibit the production of IL-1α, an inflammatory cytokine by fine dust. I could see that.
실험예 4: 미세먼지에 의한 콜라겐 생합성 저해 억제효과Experimental Example 4: Inhibitory effect of inhibiting collagen biosynthesis by fine dust
실험예 4는 제조예 1 내지 6에서 수득한 추출물의 미세먼지에 의한 콜라겐생합성 저해를 억제하는 효과를 측정하였다. 인간 정상 상피 세포인 섬유아세포를 48-웰 마이크로 플레이트에 각 웰당 1 x 104 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 24시간 동안 배양하였다. 배양 후 미세먼지(100ppm) 또는 황사와 상기 제조예 1 내지 6의 추출물을 각각 500ppm 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 미세먼지 또는 황사만 단독 포함된 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 콜라겐 키트(Takara, 일본)를 이용하여 프로콜라겐(procollagen) 타입 IC-펩타이드(PICP) 양을 측정하여 ng/㎖ 환산하였으며, 이에 의해 합성된 콜라겐 양을 측정하였다. 콜라겐 생합성 증가율(%)은 하기 수학식 2에 따라 계산하였으며, 그 결과를 표 4에 나타내었다.In Experimental Example 4, the effect of inhibiting the inhibition of collagen biosynthesis by fine dust of the extracts obtained in Preparation Examples 1 to 6 was measured. Fibroblasts, which are human normal epithelial cells, were inoculated into 48-well microplates at 1 x 10 4 cells per well, and cultured in DMEM medium for 24 hours. After cultivation, it was further cultured for 24 hours in a serum-free DMEM medium containing 500 ppm of fine dust (100 ppm) or yellow sand and the extracts of Preparation Examples 1 to 6, respectively, and a serum-free DMEM medium containing only fine dust or yellow sand as a control. . After incubation, the supernatant of each well was collected and the amount of procollagen-type IC-peptide (PICP) was measured using a collagen kit (Takara, Japan) and converted into ng/ml, and the amount of synthesized collagen was measured. I did. Collagen biosynthesis increase rate (%) was calculated according to Equation 2 below, and the results are shown in Table 4.
표 4에 따르면, 본 발명의 제조예 1에 의해 제조된 추출물과 제조예 2 내지 5에 의해 제조된 분획물 및 제조예 6에 의해 제조된 발효추출물이 미세먼지에 의해 저하된 콜라겐 생합성을 다시 회복시키는 것을 확인할 수 있었다. According to Table 4, the extract prepared by Preparation Example 1 of the present invention, the fractions prepared by Preparation Examples 2 to 5, and the fermented extract prepared by Preparation Example 6 restore collagen biosynthesis reduced by fine dust again. I could confirm that.
실험예 5: 미세먼지에 의한 히아루론산 분해 억제 효과Experimental Example 5: Effect of inhibiting hyaluronic acid decomposition by fine dust
상기 제조예 1 내지 6의 추출물이 미세먼지에 의해 히아루론산이 분해되는 것을 억제할 수 있는지 확인하기 위해 실험예 5를 실시하였다. 사람의 섬유아세포를 10% FBS가 포함된 DMEM에 배양하여 24웰 플레이트에 2x104 cells/웰의 농도로 첨가하여 배양하였다. 24시간 후 70-80%로 자란 세포의 배지를 Serum-free DMEM로 교체하고 5시간 배양하였다. 5시간 배양 후 제조예 1 내지 6의 추출물을 각각 500ppm을 처리하였다. 배양 3일 후 배지내 총 히아루론산의 양을 Hyaluronan Quantikine ELISA Kit(R&D biosystem)을 이용하여 합성된 히아루론산의 양을 측정하고, 그 결과를 도 1에 나타내었다.Experimental Example 5 was carried out to confirm whether the extracts of Preparation Examples 1 to 6 can suppress the decomposition of hyaluronic acid by fine dust. Human fibroblasts were cultured in DMEM containing 10% FBS, added to a 24-well plate at a concentration of 2×10 4 cells/well, and cultured. After 24 hours, the medium of the cells grown to 70-80% was replaced with Serum-free DMEM and cultured for 5 hours. After incubation for 5 hours, the extracts of Preparation Examples 1 to 6 were each treated with 500 ppm. After 3 days of culture, the total amount of hyaluronic acid in the medium was measured using the Hyaluronan Quantikine ELISA Kit (R&D biosystem), and the results are shown in FIG. 1.
도 1에 따르면, 발명의 제조예 1에 의해 제조된 추출물과 제조예 2 내지 5에 의해 제조된 분획물 및 제조예 6에 의해 제조된 발효추출물이 미세먼지에 의한 히아루론산 분해를 억제하는 것을 확인할 수 있었다.According to FIG. 1, it was confirmed that the extract prepared by Preparation Example 1 of the invention, the fractions prepared by Preparation Examples 2 to 5, and the fermented extract prepared by Preparation Example 6 inhibited the degradation of hyaluronic acid by fine dust. .
제형예 1: 미세먼지 제거용 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조Formulation Example 1: Preparation of a cosmetic composition containing an extract for removing fine dust
제조예 1 내지 6의 선복화 추출물 또는 분획물 또는 발효추출물을 각각 포함하는 화장료(제형예 1 내지 6)를 제조하였으며, 보습제로서 세라마이드를 포함하는 화장료 조성물(비교제형예 1), 추출물이나 보습제를 모두 포함하지 않는 화장료 조성물(비교제형예 2)을 하기 표 5에 나타내었다.To prepare a cosmetic composition (Formulation Examples 1 to 6) each containing the extract or fraction or fermentation extract of Preparation Examples 1 to 6, and a cosmetic composition containing ceramide as a moisturizer (Comparative Formulation Example 1), extracts or moisturizers all The cosmetic composition that does not contain (Comparative Formulation Example 2) is shown in Table 5 below.
실험예 6: 피부손상 회복효과Experimental Example 6: Skin damage recovery effect
TEWL(Trans-Epidermal Water Loss)은 피부를 통해 증발되는 수분 (땀은 제외)을 나타내는 지표로 각질층의 손상 정도와 피부장벽 기능을 평가하는데 이용된다. 높은 수준의 TEWL은 피부장벽이 손상됐다는 것을 나타낸다. TEWL의 측정은 항온(22℃) 및 항습(47%) 상태에서 이루어졌으며 단위는 g/h/m2이다. 측정방법은 다음과 같다. 우선, 테이프-스트립핑(tape-stripping)을 30회 실시하여 피부장벽의 손상을 유발시켰다. 피부장벽의 손상을 유발한 후 시험 제품을 도포하기 전 TEWL 수치를 Tewameter TM210 (Courage+Khazaka, 독일국)을 사용하여 측정하였다. 손상된 피부에 표 5의 제형예 1 내지 6과 비교제형예 1, 2를 1일 2회씩 3일 동안 도포한 뒤 TEWL 수치의 변화를 측정하여 수학식 3에 따라 경피수분 손실의 회복도를 측정하였다. 그 결과는 표 6에 나타내었다.TEWL (Trans-Epidermal Water Loss) is an index that indicates moisture evaporated through the skin (excluding sweat) and is used to evaluate the degree of damage to the stratum corneum and skin barrier function. A high level of TEWL indicates that the skin barrier is damaged. TEWL was measured at constant temperature (22°C) and humidity (47%), and the unit is g/h/m 2 . The measurement method is as follows. First, tape-stripping was performed 30 times to induce damage to the skin barrier. After inducing damage to the skin barrier and before applying the test product, the TEWL value was measured using Tewameter TM210 (Courage+Khazaka, Germany). Formulation Examples 1 to 6 of Table 5 and Comparative Formulation Examples 1 and 2 of Table 5 were applied to the damaged skin twice a day for 3 days, and then the change in TEWL value was measured, and the degree of recovery of transdermal moisture loss was measured according to Equation 3. . The results are shown in Table 6.
표 6과 같이 추출물 및 혼합물을 함유하는 제형예 1 내지 6과 세라마이드를 함유하는 비교제형예 1, 유효성분을 포함하지 않는 비교제형예 2을 피부에 도포한 후 TEWL을 측정하여 피부 손상 회복 효과를 확인한 결과, 제형예 1 내지 6을 함유하는 화장료 조성물이 피부손상을 빠르게 회복시키는 것을 알 수 있다. As shown in Table 6, after application of Formulation Examples 1 to 6 containing extracts and mixtures and Comparative Formulation Example 1 containing ceramide and Comparative Formulation Example 2 containing no active ingredient to the skin, TEWL was measured to determine the skin damage recovery effect. As a result of confirmation, it can be seen that the cosmetic composition containing Formulation Examples 1 to 6 rapidly recovers skin damage.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.As described above, specific parts of the present invention have been described in detail, and it is obvious that these specific techniques are only preferred embodiments for those of ordinary skill in the art, and the scope of the present invention is not limited thereto. Therefore, it will be said that the practical scope of the present invention is defined by the appended claims and their equivalents.
Claims (7)
상기 선복화 추출물은 선복화를 용매추출법으로 추출한 추출물을 N-헥산(N-hexane), 염화메틸렌(methylene chloride) 및 에틸아세테이트(ethyl acetate)로 순차적으로 분획하는 단계로 얻어지는 분배 추출물, 또는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum ATCC 10012)로 발효시켜 얻은 발효 추출법을 사용하여 추출된 발효 추출물이고,
상기 분배 추출물은 N-헥산(N-hexane)으로 분획하여 얻어진 분획물, 염화메틸렌(methylene chloride)으로 분획하여 얻어진 분획물, 또는 에틸아세테이트(ethyl acetate)로 분획하여 얻어진 분획물인 것을 특징으로 하는 중금속 및 미세먼지 제거용 화장료 조성물.As a cosmetic composition for removing heavy metals and fine dust containing Inulae Flos extract as an active ingredient,
The sunbokhwa extract is a distribution extract obtained by sequentially fractionating the extract obtained by extracting sunbokhwa by a solvent extraction method into N-hexane, methylene chloride, and ethyl acetate, or lactobacillus It is a fermented extract extracted using a fermentation extraction method obtained by fermenting with plantarum (Lactobacillus plantarum ATCC 10012),
The distribution extract is a fraction obtained by fractionation with N-hexane, a fraction obtained by fractionation with methylene chloride, or a fraction obtained by fractionation with ethyl acetate. Cosmetic composition for dust removal.
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