KR101915304B1 - 아이스플랜트 추출물을 포함하는 식중독균 저해용 항균 조성물 - Google Patents
아이스플랜트 추출물을 포함하는 식중독균 저해용 항균 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은, 식중독균의 저해를 위한 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물의 신규한 용도 및 상기 추출물 등을 이용하는 식중독균에 대한 항균방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 항균 조성물은 황색포도상구균, 바실러스 세레우스, 리스테리아 모노사이토제니스, 대장균 O157:H7, 및/또는 쥐티푸스균에 대해 우수한 항균 활성을 나타내므로, 본 발명은 식품, 농업, 환경 산업 등에 적용하여, 식중독 원인균 저해를 통한 식중독의 예방에 유용하게 사용될 수 있을 것이다.
Description
본 발명은 아이스플랜트 추출물을 포함하는 식중독균 저해용 항균 조성물에 관한 것이다.
우리나라 식품위생법에 따르면, "식중독"은 식품 섭취로 인해 인체에 유해한 미생물 또는 유독 물질에 의하여 발생한 것으로 판단되는 감염성 질환 또는 독소형 질환을 일컬으며, 세계보건기구 (WHO)에서는 식품 또는 물의 섭취에 의해 발생된 또는 발생된 것으로 추정되는 감염성 또는 독소형 질환이라고 정의하고 있다. 최근 식품 산업의 급격한 발전, 식품의 세계화, 및 인스턴트 식품의 대량화 등으로 인해 식중독에 의해 발생하는 식품 안전사고가 세계적으로 증가하고 있으며, 우리나라에서도 단체 급식의 증가로 인해 집단 식중독 발생에 따른 피해가 증가하고 있는바, 효과적인 식중독균 저해 방안이 필요한 실정이다.
식중독을 발생시키는 대표적인 원인 중 하나로는 식품에 식중독을 일으키는 병원성 미생물을 들 수 있으며, 주로 식품에 오염된 세균 또는 세균이 생산한 독소의 섭취로 인해 발생하게 된다. 이에 따라, 현재, 벤조산, 소르빈산과 같은 인공 합성물과 같은 합성 첨가물이 미생물의 증식을 억제하는 보존제로 사용되고 있다. 그러나, 이와 같은 합성 첨가물들은 발암성 성분의 생성을 야기하고, 상피세포 손상, 및 간독성 등과 같은 부작용을 초래한다는 보고가 발표됨에 따라, 이들의 안전성에 대한 문제가 지속적으로 언급되고 있다. 또한, 식품 첨가물에 대한 소비자의 인식 증가에 따라 소비자들은 이와 같은 합성 첨가물에 대한 불신이 커지고 있다. 실제로, 합성 첨가물을 사용하지 않는 식품에 대하여 [녹색식품 인증제]를 추진하려는 식약청의 시도가 2010년에 있었으며, 웰빙 식품을 선호하는 사회적 분위기 속에서 합성 첨가물이 사용된 식품에 대한 소비자의 구매력은 점차 감소하는 추세를 보이고 있다.
한편, 식품의 보존성 연장을 위한 첨가제나 항균 물질의 사용은, 식품의 안전성을 급격하게 향상시킬 수 있으므로, 식품 가공 분야에서 식품 첨가물의 사용은 완전히 배제할 수 없다. 따라서, 기존의 식품 첨가물을 대체할 수 있는 천연 물질에 대한 연구가 활발히 진행 중에 있으나 (한국 등록특허 10-1784020), 아직은 미비한 실정이다.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 본 발명자들은, 천연물 유래 항균 물질을 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, 식중독균에 대한 아이스플랜트 유래 추출물 등의 우수한 항균 활성을 확인하고, 이에 기초하여 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은, 식중독균의 저해를 위한 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물의 신규한 용도 및 상기 아이스플랜트 추출물 등을 이용하는 식중독균에 대한 항균방법을 제공하는데 있다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 식중독균 저해용 항균 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 구현예로서, 상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올, 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 용매로 추출하여 얻어질 수 있다.
본 발명의 다른 구현예로서, 상기 분획물은 헥세인, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 유기용매로 분획하여 얻어질 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예로서, 상기 조성물은 황색포도상구균 (Staphylococcus aureus), 바실러스 세레우스 (Bacillus cereus), 리스테리아 모노사이토제니스 (Listeria monocytogenes), 대장균 O157:H7 (Escherichia coli O157:H7), 및 쥐티푸스균 (Salmonella typhimurium)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 1종 이상의 식중독 균에 대해 항균 활성을 갖을 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는, 식중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는, 식중독균에 대한 항균용 의약외품을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는, 식중독의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는, 세정용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 항균 조성물을 처리하는 단계를 포함하는, 식중독균에 대한 항균방법을 제공한다.
본 발명에 따른 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물은 황색포도상구균, 바실러스 세레우스, 리스테리아 모노사이토제니스, 대장균 O157:H7, 및/또는 쥐티푸스균에 대해 우수한 항균 활성을 나타내므로, 본 발명은 식품, 농업, 환경 산업 등에 적용하여, 식중독 원인균 저해를 통한 식중독의 예방에 유용하게 사용될 수 있을 것이다.
도 1은 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물의 제조 과정을 개략적으로 나타낸 도이다.
도 2는 아이스플랜트 분획물의 처리에 따른 리스테리아 모노사이토제니스에 대한 항균 활성을 디스크 확산법을 이용하여 확인한 결과이다 (1: Chloroform fr., 2: Ethyl acetate fr., 3: Butanol fr., 4: Hexane fr.).
도 3은 아이스플랜트 분획물 (Chloroform fr.)의 처리에 따른 바실러스 세레우스에 대한 살균 활성을 현탁액 시험법을 이용하여 확인한 결과이다.
도 4는 아이스플랜트 분획물 (Hexane fr.)의 처리에 따른 대장균 O157:H7에 대한 살균 활성을 현탁액 시험법을 이용하여 확인한 결과이다.
도 2는 아이스플랜트 분획물의 처리에 따른 리스테리아 모노사이토제니스에 대한 항균 활성을 디스크 확산법을 이용하여 확인한 결과이다 (1: Chloroform fr., 2: Ethyl acetate fr., 3: Butanol fr., 4: Hexane fr.).
도 3은 아이스플랜트 분획물 (Chloroform fr.)의 처리에 따른 바실러스 세레우스에 대한 살균 활성을 현탁액 시험법을 이용하여 확인한 결과이다.
도 4는 아이스플랜트 분획물 (Hexane fr.)의 처리에 따른 대장균 O157:H7에 대한 살균 활성을 현탁액 시험법을 이용하여 확인한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다.
본 발명은 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는, 식중독균 저해용 항균 조성물을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "항균"은 미생물을 사멸시키거나 성장을 억제하는 것, 또는 미생물에 의해 야기된 독성을 감소키는 것을 의미하며, 본 발명의 목적상, 상기 미생물은 식중독균일 수 있다.
상기 "식중독균"은 식중독을 직접 또는 간접적으로 일으킬 수 있는 미생물을 총칭하는 용어로서, 예를 들어, 황색포도상구균 (Staphylococcus aureus), 바실러스 세레우스 (Bacillus cereus), 리스테리아 모노사이토제니스 (Listeria monocytogenes), 대장균 O157:H7 (Escherichia coli O157:H7), 또는 쥐티푸스균 (Salmonella typhimurium)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 사용되는 용어 "아이스플랜트"는 남아프리카가 원산지인 사막에서 자라는 내염성 다육식물 (염생식물)로서, 환경 스트레스를 통해 광합성 경로를 C3CAM으로 변환시켜 자신이 함유한 염분과 함께 기능성 물질을 표면 세포로 내보내며, 이들이 얼음 알갱이 모양으로 관찰되어 영문으로 "Iceplant"라고 불려왔다. 상기 아이스플랜트는 이노시톨류 등과 같은 기능성 물질을 함유한 작물로 알려져 있으며, 피부 개선 효과, 탈모 및 비듬 방지 효과, 및 미백 효과 등이 보고된 바 있으나, 식중독균에 대한 항균 활성에 대해서는 알려진 바가 없다. 따라서, 본 발명은 식중독균의 저해를 위한 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물의 신규한 용도를 제공한다는 측면에서 기술적 의의가 있다.
본 발명에 따른 아이스플랜트 추출물은 천연물로부터 추출물을 추출하는 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라, 즉, 통상적인 온도, 압력의 조건 하에서 통상적인 용매를 사용하여 추출할 수 있다. 예컨대, 본 발명에서 아이스플랜트 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상 용매를 사용하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 에탄올을 사용할 수 있다. 또한, 아이스플랜트로부터 추출물을 추출하는 방법은 열수 추출, 냉침 추출, 환류 추출, 초음파 추출 등의 다양한 방법을 통하여 추출할 수 있지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 이후, 상기 제조된 추출물은 여과하거나 농축, 또는 건조과정을 수행하여 용매를 제거할 수 있으며, 여과, 농축 및 건조를 모두 수행할 수 있다. 예컨대, 여과는 여과지를 이용하거나 감압여과기를 이용할 수 있으며, 농축은 감압 농축기, 건조는 동결건조법 등을 수행할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 따른 아이스플랜트 추출물의 분획물은 (본 발명에서, 아이스플랜트 추출물의 분획물 및 아이스플랜트 분획물은 상호교환적으로 사용되었음.), 전술한 아이스플랜트 추출물을 유기 용매로 분획하는 단계를 통하여 제조될 수 있다. 예컨데, 상기 아이스플랜트 추출물은 헥세인, 에틸아세테이트, 클로로포름, 부탄올, 메틸렌클로라이드, 아세톤, 에틸 에테르, 물 또는 이들의 혼합물 등의 유기 용매로 분획 과정을 실시하며, 상기 분획 시 온도는 4℃ 내지 120℃일 수 있다. 예컨데, 상기 유기 용매는 헥세인, 에틸아세테이트, 클로로포름, 또는 부탄올일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 한 구체예로서, 본 발명에 따른 항균 조성물은, 특히, 절임 채소류의 상태 개선을 위해 사용될 수 있다. 절임 채소류는 많은 수분을 함유한 채로 저장 및 유통되기 때문에, 유해 미생물의 증식이 용이하고, 이에 따라, 2-5일의 짧은 품질 유지기한을 갖는 단점이 있었다. 기존의 단순 물 세척 방법은 유해 미생물 억제 효과가 미미하므로, 식품의 특성을 반영한 비가열 살균 처리 공정이 필요한 실정이다. 일반적으로 사용되는 화학적 살균제로 사용되는 염소는 살균 과정에서 식품 내 유기물과 반응하여 트리할로메탄 또는 클로로페놀과 같은 발암성 물질을 생성하는 등의 문제가 존재한다. 이러한 기술적 배경하에서, 본 발명에 따른 아이스플랜트 분획물은, 1) 천연물 유래 항균 물질로서 생체 안전성이 우수할 뿐만 아니라, 2) 염생식물로서 절임 채소류의 품질 저하를 최소화할 수 있다는 장점이 있다.
한편, 본 발명에 따른 항균 조성물은 항균 활성이 요구되는 다양한 목적 및 용도로 사용될 수 있으며, 구체적으로, 식중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 식중독균에 대한 항균용 의약외품, 식중독의 예방 또는 개선용 식품 조성물, 또는 세정제 용도로 사용될 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 식중독균에 의해 야기되는 질병 상태, 즉 식중독을 예방 또는 치료하기 위하여 사용되는 것으로서, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명에서, 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 포함되며, 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구투여 (예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 시간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명에 다른 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래 의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
구체적으로 본 발명의 약학적 조성물의 유효량은 환자의 연령, 성별, 상태, 체중, 체내에 활성 성분의 흡수도, 불활성율 및 배설속도, 질병종류, 병용되는 약물에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 1 kg 당 1 내지 500 mg을 매일 또는 격일 투여하거나, 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감 될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
또한, 본 발명에 따른 의약외품은 사람이나 동물의 질병을 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용되는 섬유, 고무제품 또는 이와 유사한 것, 인체에 대한 작용이 약하거나 인체에 직접 작용하지 않으며, 기구 또는 기계가 아닌 것과 이와 유사한 것, 감염 예방을 위하여 살균, 살충 및 이와 유사한 용도로 사용되는 제제 중 하나에 해당하는 물품으로서, 사람이나 동물의 질병을 진단, 치료, 경감, 처치 또는 예방할 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것 및 사람이나 동물의 구조와 기능에 약리학적 영향을 줄 목적으로 사용하는 물품 중 기구, 기계 또는 장치가 아닌 것을 제외한 물품을 의미한다. 구체적인 예로, 피부 외용제, 항균제, 방부제, 살균제, 소독제 또는 세척제일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 따른 식품 조성물은 기존의 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합량은 그의 사용 목적 (예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 99 중량% 이하, 바람직하게는 5 중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "식품"은, 배추 등을 포함하는 채소류, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합제, 건강기능식품 및 건강식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
본 발명에 다른 식품 조성물은 식품으로 인정될 수 있는 제형이라면 다양한 형태의 제형으로 제조할 수 있다. 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있으므로, 예를 들어, 항균 효과를 향상시키기 위한 보조제 또는 식품의 보존성 또는 안전성 향상을 위한 식품 첨가제 또는 식품 소독제 형태로 사용할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 식품 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있는데, 담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 또한, 상기 조성물은 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 포함할 수 있다. 예들 들어, 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신(niacin), 비오틴(biotin), 폴레이트(folate), 판토텐산(panthotenic acid) 등을 포함할 수 있다. 또한, 아연(Zn), 철(Fe), 칼슘(Ca), 크롬(Cr), 마그네슘(Mg), 망간(Mn), 구리(Cu), 크륨(Cr) 등의 미네랄을 포함할 수 있다. 또한, 라이신, 트립토판, 시스테인, 발린 등의 아미노산을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 세정용 조성물은 바람직하게 식기 세척제, 또는 식품 세정제일 수 있다. 상기 항균 조성물은 천연 유래 성분으로 인체에 유해하지 아니하므로, 더욱 바람직하게는 주방용품 또는 식품세척 등을 포함하는 각종 생활용품의 세척이나 항균성 부여를 목적으로 사용할 수 있다.
본 발명의 세정용 조성물은 그 사용 목적 및 용도에 따라 적의 선택된 첨가물을 추가로 포함할 수 있으며, 통상적으로 사용되는 세정제 등 다른 유효성분이나 색소, 계면활성제, 방부제 등의 첨가제와 혼합하여 사용할 수 있다. 상기 세정제는 그 사용 목적 및 용도에 따라 분말화, 과립화, 정제화 또는 액상화하여 제조될 수 있으며, 제품화를 위하여 포장을 위해 통상의 방법을 사용할 수 있다.
또한, 본 발명의 세정용 조성물 중 항균 조성물의 사용량은 사용목적과 적용형태, 적용부위, 적용대상물품 등에 따라 적절히 사용될 수 있으며, 예를 들면 전체 조성물 기준으로 0.01 중량부 내지 50 중량부를 포함할 수 있으나, 상기 항균 조성물의 함량은 이에 한정되는 것은 아니다.
.또한, 본 발명의 일 양태로서, 본 발명은 상기 항균 조성물을 처리하는 단계를 포함하는, 식중독균에 대한 항균방법을 제공한다.
본 발명의 항균방법은 전술한 항균 조성물의 기술적 구성을 그대로 이용하기 때문에, 이 둘 사이에 공통된 내용은 본 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여, 그 기재를 생략한다.
본 발명에서, 상기 처리하는 단계는, 본 발명에 따른 항균 조성물을 식중독균, 또는 식중독균이 존재하거나 존재할 것으로 추정되는 물질에 처리하는 것을 의미한다. 예를 들어, 상기 물질은 식품이나 식품의 유통 및 가공과 관련 시설 또는 장비일 수 있으며, 여기서, 식품은 배추 등을 포함하는 채소류, 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료, 비타민 복합제, 건강기능식품 및 건강식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
[
실시예
]
실시예
1. 아이스플랜트 추출물 및 이에 대한
분획물의
제조
본 실시예에서는, 도 1에 나타낸 바와 같이 아이스플랜트의 잎과 줄기를 이용하여 추출물을 제조하고, 상기 추출물로부터 각각의 분획물을 제조하였다. 구체적으로, 온라인을 통하여 구입한 아이스플랜트 시료를 동결건조한 후, 분쇄기를 이용하여 60 mesh 크기로 분쇄하였다. 이후, 상기 분쇄된 아이스플랜트 시료 (100g)에 70% 에탄올 (1L)을 첨가하고, 25℃에서 12시간 동안 총 3회 반복 추출한 후, 0.45μm (Adventec No. 2) 여과지로 여과하여 농축액을 제조한 뒤, 이를 동결건조하여 70% ethanol 조추출물을 제조하였다. 70% ethanol 조추출물을 물에 녹인 후, 용매의 극성에 따라 n-hexane, chloroform, ethyl acetate 및 n-butanol을 사용하여 순차적으로 용매 추출하여 각 용매별 분획물을 수득하였다. 상기 4개의 분획물 (n-hexane, chloroform, ethyl acetate 및 n-butanol)을 감압농축한 후, sodium sulfate를 이용하여 수분을 제거한 뒤, 이를 동결건조하여 사용하였다. 한편, 본 실험에서는 extra pure grade (Duksan Co. Ltd.) 수준의 용매들과 3차 증류수가 사용되었다.
실시예
2. 아이스플랜트 추출물 또는 이의
분획물의
항균 효과 확인
2-1. 디스크 확산법을 이용한 항균 활성 평가
본 실시예에서는, 식중독균에 대한 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물의 항균 활성을 확인하기 위하여, 디스크 확산법을 이용한 항균 활성 평가를 실시하였다. 식중독균으로는 Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus cereus ATCC 10876, Listeria monocytogenes ATCC 13932, Escherichia coli O157:H7 ATCC 43859, Salmonella Typhimurium ATCC 13311를 사용하였으며, 상기 식중독 균주들을 Nutrient broth (Difco Co., USA) 배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양한 후, 이들을 Nutrient agar (Difco Co., USA) 배지 또는 BHI agar (Difco Co., USA)를 포함하는 멸균 petri dish (90 × 15 mm, Green Cross Co., Ltd., Korea)에 6-7 logCFU/plate씩 도말하였다. 이후, 멸균된 disc-paper (지름 6.0 mm, Whatsman No.2)에 각각 10μl의 아이스플랜트 시료를 (EtOH extract, Hexane fr., Chloroform fr., Ethyl acetate fr., Butanol fr.; 최종농도: 400μg/disc) 로딩하고, 상기 disc-paper를 전술한 식중독균이 도말된 petri dish에 심은 뒤, 37℃에서 24시간 동안 배양한 후, 생육저지환 (Clear zone)의 크기를 측정하여 각각에 대한 항균 활성을 평가하였다.
아이스플랜트 추출물 또는 분획물에 대한 항균 활성 평가의 결과는 하기 표 1에 나타내었다.
상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 아이스플랜트 추출물 또는 분획물은 총 5 종의 식중독균에 대하여 항균 활성을 나타내었으며, 처리 방식, 분획 용매 등에 따른 항균 범위 및 활성의 차이를 확인할 수 있었다. 특히, 아이스플랜트 분획물 중에서, 클로로포름 및 에틸아세테이트 분획물은 상대적으로 광범위한 항균 활성을 보였으며, 이 중에서도, 도 2에 나타낸 바와 같이, Listeria monocytogenes에 대하여 가장 강한 항균 활성이 관찰되었다.
2-2. 현탁액 시험법을 이용한 살균 활성 평가
본 실시예에서는, 식중독균에 대한 아이스플랜트 분획물의 살균 활성을 확인하기 위하여 현탁액 시험법을 이용한 살균 활성 평가를 일부 변형하여 실시하였다 (CEN[European Committee for Standardization], EN 1040, 1276). 식중독균으로는 Bacillus cereus ATCC 10876, Escherichia coli O157:H7 ATCC 43859을 사용하였다. 분획물로는 상기 실시예 2-1에서의 항균 평가 실험에 기초하여, Bacillus cereus에 대해서는 아이스플랜트 클로로포름 분획물 (Chloroform fr.), Escherichia coli에 대해서는 아이스플랜트 헥세인 분획물 (Hexane fr.)을 사용하였다. 우선, Nutrient broth (Difco Co., USA) 배지 내 식중독균의 초기 균수를 3-4 log CFU/mL로 조정한 후, 여기에 각각의 아이스플랜트 분획물을 처리하였다 (최종농도: 100μg/m). 이후, 이들을 37℃ 조건에서 배양하면서 1시간 간격으로 총 12시간 동안 식중독균의 생존율 확인하였다. 상기 식중독균의 생존율은, 1시간 간격으로 채취한 각각의 시료를 Nutrient agar (Difco Co., USA) 배지에 도말한 뒤, 37℃에서 24시간 동안 배양한 후, 식중독균의 생균수를 측정하여 평가하였으며, 비교군으로는 암피실린 (ampicillin)이 처리된 군을 사용하였다.
그 결과, 도 3 및 도 4에 나타낸 바와 같이, Bacillus cereus는 아이스플랜트 클로로포름 분획물 처리 후 9시간째, Escherichia coli는 아이스플랜트 헥세인 분획물 처리 후 5시간째, 상기 균주들의 생육이 완전히 저해됨을 확인하였으며, 특히, 아이스플랜트 헥세인 분획물의 효과는 기존의 암피실린에 비해서도 매우 현저한 것이었다.
상기의 결과를 종합해 보면, 본 발명에 따른 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물은 식중독균에 대하여 유의적인 항균 활성를 보였으며, 이러한 항균 활성은 처리 방식 또는 분획 용매의 종류에 따라 항균 범위 및 활성의 차이를 나타내었는바, 상기 아이스플랜트 추출물 또는 이의 분획물은 광범위 또는 선택적 항균 조성물로서 폭넓게 활용될 수 있을 것이다.
전술한 본 발명의 설명은 예시를 위한 것이며, 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 지식을 가진 자는 본 발명의 기술적 사상이나 필수적인 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 쉽게 변형이 가능하다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다.
Claims (9)
- 아이스플랜트 에탄올 추출물을 n-헥세인(n-hexane), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate) 및 n-부탄올(n-butanol)로 순차적으로 분획하여 얻은 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하며, 황색포도상구균 (Staphylococcus aureus), 바실러스 세레우스 (Bacillus cereus), 리스테리아 모노사이토제니스 (Listeria monocytogenes), 대장균 O157:H7 (Escherichia coli O157:H7), 및 쥐티푸스균 (Salmonella typhimurium)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 1종 이상의 식중독균에 대해 항균 활성을 갖는, 식중독균 저해용 항균 조성물.
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- 제1항의 조성물을 포함하는, 식중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제1항의 조성물을 포함하는, 식중독균에 대한 항균용 의약외품.
- 제1항의 조성물을 포함하는, 식중독의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
- 제1항의 조성물을 포함하는, 세정용 조성물.
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