KR101883543B1 - 알레르기-억제 모자반 추출물, 이의 제조 방법 및 이의 응용 - Google Patents

알레르기-억제 모자반 추출물, 이의 제조 방법 및 이의 응용 Download PDF

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Abstract

본 발명은 알레르기-억제 모자반 추출물, 이의 제조 방법 및 이의 응용에 관한 것이다. 상기 제조 방법은 하기의 단계를 포함한다: 모자반을 1:1 내지 20의 중량비로 증류수에서 블렌딩하고, 완전히 혼합하고, 20 내지 100℃에서 30 내지 120 분 동안 교반한다. 제1 여과 후 수득된 유체는 모자반 추출물이다. 상기 모자반 추출물은 EW, PW 및 DK 막을 사용함에 의해 제2 여과에 적용할 수 있고, 동결 건조하여 정제된 모자반 추출물을 수득한다. 본 발명은 보다 우수한 알레르기 억제 효과를 나타내고; 더욱이, 상기 제조된 추출물은 알레르기를 유발하지 않고 화장품 및 식품에 사용될 수 있다.

Description

알레르기-억제 모자반 추출물, 이의 제조 방법 및 이의 응용{An allergy-inhibiting sea grape extract, its preparation method and application thereof}
본 발명은 알레르기를 억제할 수 있고 알레르기 반응을 유발하지 않는 모자반 추출물, 특히 모자반 추출물을 제조하기 위한 방법 및 이의 응용에 관한 것이다.
알레르기는 일부 환경 물질(또한, 알레르겐으로서도 호칭됨)에 과반응성인, 면역계의 기능부전이다. 신체에 침입 한 후, 알레르겐은 IgE Ab와 결합하고 이어서 비만세포로부터 히스타민과 같은 염증 물질의 방출을 유발하고 다양한 조직에서 염증 반응을 유도한다. 알레르기 증상은 콧물, 눈물 젖은 눈, 가려움증, 숨가쁨 및 건조 피부, 심지어 심한 경우에는 생명을 위협하는 쇼크를 포함하고 히스타민을 방출하는 조직에 따라 다양하다. 항히스타민과 같은 약물은 통상적으로 알레르기 성향 사람들에서 알레르기를 치료하기 위해 사용되지만, 거의 모든 항-알레르기 약물은 특정 부작용을 갖는다. 따라서, 알레르기 활성을 억제하기 위해 천연 식물 또는 식물로부터 추출된 알레르기 억제 성분들을 사용하는 것이 또한 대중의 관심 대상이다.
모자반은 녹조류에 속하고 풍부한 해초 폴리사카라이드를 함유할 뿐만 아니라 저지방 및 저칼로리를 함유한다. 또한, 이의 캐비아와 같은 바삭바삭한 맛을 갖는 모자반은 많은 일본인 및 전문의 및 또한 일본 요리를 위한 고급 성분을 위한 최상의 천연 건강 식품이다. 더욱이, 모자반은 노화 방지 효과를 갖는 막대한 양의 미량원소를 함유한다. 결과로서, 모자반 추출물은 세계 화장품 협회에 의해 화장품에 사용하기에 적합한 성분으로서 등재되었다.
과거에, 모자반 추출을 위한 기술은 통상적으로 추출을 위해 알코올 또는 다른 유기 용매를 사용한다. 타이완 특허 I484966은 모자반 분말의 조 추출을 위해 알코올을 사용하고 이어서 n-헥산 및 에틸 아세테이트를 사용함에 의해 활성 물질(들)을 분리하는 모자반 추출을 위한 추출 방법을 기재하고 있다. 상기 추출된 물질은 항암 활성을 갖는다. 대한민국 특허 KR101252149에서, 물 및 C1-C4 알코올은 모자반 추출물을 제조하기 위해 사용되고 상기 추출물은 항산화 효과, 소염 효과 및 습윤화 효과를 갖는다. 선행 기술에 의해 수득된 모든 모자반 추출물은 어떠한 알레르기 억제 효과를 나타내지 않고; 더욱이, 모자반 추출을 위해 유기 용매를 사용하면 신체에 해로울 수 있는 잔사 유기 용매가 잔류할 것이다.
선행 기술에 언급된 기술 대부분은 모자반 추출을 위해 유기 용매를 사용한다. 특정 잔사 유기 용매는 건강상 유해하다. 각 용매의 극성이 상이하기 때문에, 추출 능력 또한 다양하다. 유기 용매를 사용하지 않는다는 전제하에, 알레르기를 억제할 수 있는 모자반 추출법이 본 발명의 중요한 과제이다.
선행 기술의 부재 관점에서, 본 발명자는 어떠한 유기 용매도 사용하지 않고 특정 시간 동안 특정 온도에서 추출을 위해 물을 사용하고 이어서 막 여과하여 모자반의 알레르기-억제 활성 물질(들)을 수득함에 의해 천연의 안전한 모자반 추출물을 제공하고자 하였다.
하나의 측면에서, 본 발명은 하기의 단계를 포함하는, 모자반 추출물을 추출하기 위한 추출 방법을 제공한다:
단계 1: 모자반을 증류수에서 블렌딩하고, 완전히 혼합하여 모자반 페이스트를 수득하는 단계로서, 여기서, 모자반 대 물의 중량비가 1:1 내지 20인, 단계;
단계 2: 20 내지 100℃의 교반 온도에서 30 내지 120분 동안 상기 모자반 페이스트를 연속적으로 교반하는 단계;
단계 3: 제1 여과 후 수득된 유체가 모자반 추출물인 단계.
본 발명에 따라, 단계 1에서, 모자반은 신선한 모자반, 건조된 모자반 또는 모자반 분말일 수 있다.
본 발명에 따라, 단계 2에서, 상기 교반 온도는 60 내지 90℃이고; 바람직하게, 상기 교반 온도는 85℃이고; 상기 교반 시간은 60 내지 105분이고; 바람직하게, 상기 교반 시간은 90분이다.
본 발명에 따라, 단계 3에서, 제1 여과를 위한 조건은 5마이크론 및 1마이크론이다.
본 발명에 따라, 제2 여과는 제1 여과 후 수행될 수 있고 상기 제2 여과는 막 여과이고; 상기 막 여과에 사용되는 제1 막은 GE에 의해 제조된 EW 막이고, 사용되는 제2 막은 GE에 의해 제조된 PW 막이고, 사용되는 제3 막은 GE에 의해 제조된 DK 막이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 모자반 추출을 위해 상기 언급된 추출 방법을 사용함에 의해 수득된 알레르기-억제 모자반 추출물을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 유효 수준의 알레르기-억제 모자반 추출물 및 화장학적으로 허용되거나, 식용가능하거나, 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 조성물을 제공하고, 여기서, 상기 조성물은 화장품 조성물, 식품 조성물 또는 약제학적 조성물이다.
본 발명에 따라, 상기 모자반 추출물의 유효량은 1 mg/ml 이상이고; 바람직하게, 상기 모자반 추출물의 유효량은 4 mg/ml이다.
본 발명에 따라, 화장품 조성물의 형태는 하기의 조성물로부터 선택된다: 크림, 다중 에멀젼, 무수 조성물, 수성 분산제, 오일, 에멀젼, 향유, 발포제(foam), 로션, 겔, 에멀젼, 수성 에탄올 용액, 하이드로글리콜릭 용액, 하이드로겔, 코팅 습포제(coating poultices), 슬러리, 비누, 샴푸, 컨디셔너, 투명 슬러리, 연고, 무쓰, 모발 크림, 분말, 바(bars), 연필, 스프레이, 에어로졸, 캡슐, 겔라틴 캡슐, 연질 캡슐제, 경질 캡슐제, 정제, 당의정, 입제, 츄잉검, 용제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 폴리사카라이드 필름, 젤리 및 겔라틴.
본 발명에 따라, 상기 화장품 조성물은 아이크림, 파운데이션, 와싱 폼(크림), 메이크-업 리무버, 아이섀도우, 립스틱, 립 글로스, 립밤 및 파우더를 포함하는 제품과 혼합될 수 있다.
본 발명에 따라, 샴푸의 성분들은 계면활성제 10 내지 50%, 피부연화제 0.3 내지 2%, 모자반 추출물 0.01 내지 0.1%, 증점제 0 내지 2%, 향제 0.1 내지 1%, 보존제 0.3 내지 1% 및 물이다.
도 1은 알레르기-유도 반응을 보여준다. 칼슘 운반체 A23187은 세포의 탈과립화를 자극하여 β-헥소스아미니다제를 방출하고 이는 방출된 β-헥소스아미니다제의 양에 대한 모자반 추출물의 효과이다.
도 2는 모자반 추출물의 알레르기-억제 효과를 보여준다.
도 3은 모자반 추출물의 알레르기-억제 효과를 보여준다.
달리 특정되지 않는 한, 본 발명에 사용되는 모든 기술 및 과학 용어는 당업자에 의해 이해되는 통상적인 의미를 갖는다. 이전의 발명의 상세한 설명 및 특정 예는 단지 설명을 목적으로 제공되고 본 발명은 나타낸 바람직한 양태로 제한되지 않는다. 발명의 취지 내에서 임의의 변화 또는 변형이 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 이해되어야만 한다.
실시예 1
1. 모자반 추출물(I)의 제조 방법
모자반의 건조 분말 80g 및 증류수 1,600g을 취하고, 사용되는 모자반은 카울러파 렌틸리페라(Caulerpa lentillifera)이고, 완전히 블렌딩하고(온도는 80℃, 시간은 90분이다), 이어서 5㎛ 및 1㎛ 필터 막을 사용하여 여과하여 모자반 추출물(I)의 유체를 수득하고; 상기 수득된 유체는 이어서 제2 여과에 적용하고; 상기 제1 막은 GE에 의해 제조된 EW 막이고, 미세여과는 대형 입자를 제거하고; 제2 막은 GE에 의해 제조된 PW 막이고, 한외여과는 작은 입자를 제거하고; 제3 막은 GE에 의해 제조된 DK 막이고, 나노여과는 염을 제거하고; 상기 여과물을 이어서 여과 후 동결건조시켜 모자반 추출물(I)을 수득한다. 상기 언급된 카울러파 렌틸리페라는 카울러파 택시폴리아(Caulerpa taxifolia)와 같은 모자반의 다른 종으로 대체될 수 있다.
2. 모자반 추출물(I)은 알레르기를 유발하지 않는다
자극제(A23187(-))의 부재하에 단지 모자반 추출물(I) 또는 정제된 모자반 추출물(I)로 처리된 세포의 알레르기 매개체인 β-헥소스아미니다제의 방출(도 1). 단독의 모자반 추출물(I) 그룹, 단독의 정제된 모자반(I) 그룹 및 대조군 그룹의 비교. 단독의 모자반 추출물(I) 및 단독의 정제된 모자반(I)의 사용은 β-헥소스아미니다제의 방출을 증가시키지 못했고 이는 모자반 추출물(I) 및 정제된 모자반(I)은 알레르기를 유발하지 않음을 시사한다.
3. 알레르기 유도 실험
칼슘 운반체 A23187은 세포 탈과립화를 자극하여 알레르기 매개체인 β-헥소스아미니다제를 방출하고, β-헥소스아미니다제의 농도는 효소 결합된 면역흡착 검정(ELISA)에 의해 결정한다. 도 1의 Ctr 결과로부터, 칼슘 운반체 A23187은 β-헥소스아미니다제의 방출을 유도한다.
4. 모자반 추출물(I)은 알레르기를 억제한다
도 2의 결과에 따라, 모자반 추출물(I)은 칼슘 운반체 A23187(A23187(+) 그룹)에 의해 유도된 β-헥소스아미니다제의 방출을 억제할 수 있고, 2 mg/ml의 모자반 추출물(I)은 방출된 β-헥소스아미니다제의 8% 감소를 보여주었고. 4 mg/ml의 모자반 추출물(I)은 방출된 β-헥소스아미니다제의 25% 감소를 보여주었고; 정제된 모자반 추출물(I)의 β-헥소스아미니다제 억제 효과는 보다 유의적이고, 1mg/ml의 상기 정제된 모자반 추출물(I)은 β-헥소스아미니다제 방출의 45%를 억제하였고, 4 mg/ml의 정제된 모자반 추출물(I)은 세포 생존능에 영향을 주는 것 없이 β-헥소스아미니다제 방출의 82%를 억제하였다(도 1).
5. 정제된 모자반 추출물(I)의 화장품 응용
계면활성제의 첨가 전에 특정 양의 증류수를 50 내지 60℃로 비등시키고, 완전히 혼합하였다. 피부연화제를 첨가하고. 완전히 혼합하였다. 가열을 중지시킨다. 정제된 모자반 추출물(I)을 첨가하기 전에 30℃로 냉각시키고, 오렌지 시트루스 시넨시스(orange citrus sinensis), 아니스산나트륨을 완전히 혼합하여 정제된 모자반 추출물(I)을 함유하는 샴푸 무쓰를 수득하였다. 샴푸 무쓰의 조성은 표 1에 나타낸다.
정제된 모자반 추출물(I)을 함유하는 샴푸 무쓰의 조성
계면활성제 데실 글루코시드 5.5%
이나트륨 코코일 글루타메이트 6%
나트륨 코코일 글루타메이트 6%
코코-글루코시드 2%
피부연화제 글리세릴 올레에이트 1%
글리세릴 카프릴레이트 1%
글리세린 1%
글리세릴 운데실레네이트 0.5%
알레르기-억제제 모자반 추출물 (I) 0.02%
향제 오렌지 시트루스 시넨시스
(Orange Citrus sinensis)
0.3%
보존제 아니스산나트륨 0.5%
용매 100%까지 구성
6. 모자반 추출물(I)을 함유하는 화장품의 임상 시험
미국의 식품의약국(FDA)에 의해 인가된 연구소(The AMA Laboratories Inc.)는 정제된 모자반 추출물(I)을 함유하는 샴푸 무쓰(조성은 표 1에 나타낸다)의 피부 자극 및 민감성을 평가하기 위해 임상 시험을 수행하였고, 참여한 대상체의 수는 52명이고, 상기 시험을 완료한 대상체의 수는 50명이었고, 대상체는 20 내지 68세였고, 인종 및 성별은 표 2에 나타낸다.
Figure 112016007560649-pat00001
임상 시험 과정: 표 1의 샴푸 무쓰는 물에서 10배 희석시켰다. 0.2ml의 희석된 샴푸 무쓰 샘플은 반-폐쇄 저자극성 패치 상에 위치시킨다. 상기 패치는 이어서 중앙선의 우측 또는 좌측으로 등의 견갑골아래 영역의 피부에 직접 적용하고 상기 대상체는 시험 영역을 적시거나 직접 햇빛에 노출시키지 않도록 하는 지시와 함께 해산한다. 24시간 후, 상기 패치는 집에서 대상체가 제거한다. 상기 과정은 일련의 9회 연속 24시간 노출이 월요일, 수요일 및 금요일 마다 연속 3주 동안 수행될 때까지 반복한다. 역반응의 경우에, 홍반 및 부종의 면적을 측정한다. 표 3에 나타낸 바와 같이, 총 50명의 대상체가 상기 연구를 완료하였다. 모든 대상체는 정제된 모자반 추출물(I)을 함유하는 샴푸 무쓰에 대해 알레르기 반응을 갖지 않았고, 이는 정제된 모자반 추출물(I)을 함유하는 샴푸 무쓰가 피부 자극 및 알레르기를 나타내지 않음을 지적한다.
모자반 추출물(I)을 함유하는 샴푸 무쓰의 임상 시험 결과
번호 대상체
ID
인종
성별
반응 Chall.
1 2 3 4 5 6 7 8 9 24
시간
48
시간
Figure 112016007560649-pat00002
Figure 112016007560649-pat00003
C: 코카시안; H: 히스패닉; A: 아시안; F: 여성; M: 남성; 0: 어떠한 효과에 대해 입증되지 않음; Dc: 적용일자에 대상체의 결석으로 인해 중단됨
실시예 2
1.5kg의 신선한 모자반 및 1.5kg의 증류수를 취하고, 사용되는 모자반은 카울러파 렌틸리페라이고, 완전히 블렌딩하고 혼합하고(온도는 85℃이고/시간은 30분이다), 이어서 5㎛ 및 1㎛ 필터 막을 사용하여 여과하여 모자반 추출물(II)의 유체를 수득하고; 이어서 모자반 추출물(II)을 추가로 여과하고; 제1 막은 GE에 의해 제조된 EW 막이고, 미세여과는 대형 입자를 제거하고; 제2 막은 GE에 의해 제조된 PW 막이고, 한외여과는 작은 입자를 제거하고; 제3 막은 GE에 의해 제조된 DK 막이고, 나노입자는 염을 제거하고; 상기 여과물을 이어서 동결건조시켜 정제된 모자반(II)을 수득한다. 상기 언급된 카울러파 렌틸리페라는 카울러파 택시폴리아와 같은 모자반의 다른 종에 의해 대체될 수 있다.
도 3의 결과를 토대로, 상기 정제된 모자반 추출물(II)은 칼슘 운반체 A23187(A23187(+) 그룹)에 의해 유도된 β-헥소스아미니다제의 방출을 억제할 수 있고, 1 mg/ml의 정제된 모자반 추출물(II)은 β-헥소스아미니다제 방출의 40%를 억제할 수 있고, 2 mg/ml의 정제된 모자반 추출물(II)은 β-헥소스아미니다제 방출의 60%를 억제할 수 있고, 4mg/ml의 정제된 모자반 추출물(II)은 β-헥소스아미니다제 방출의 80%를 억제할 수 있다.
실시예 3
1.5kg의 신선한 모자반 및 1.5kg의 증류수를 취하고, 사용되는 모자반은 카울러파 렌틸리페라이고, 완전히 블렌딩하고(온도는 약 25℃이고/시간은 약 60분이다), 이어서 5㎛ 및 1㎛ 필터 막을 사용하여 여과하여 모자반 추출물(III)의 유체를 수득하고, 이어서 모자반 추출물(III)을 여과하고; 제1 막은 GE에 의해 제조된 EW 막이고, 미세여과는 대형 입자를 제거하고; 제2 막은 GE에 의해 제조된 PW 막이고, 한외여과는 작은 입자를 제거하고; 제3 막은 GE에 의해 제조된 DK 막이고, 나노입자는 염을 제거하고; 상기 여과물을 이어서 동결건조시켜 정제된 모자반(III)을 수득한다. 상기 언급된 카울러파 렌틸리페라는 카울러파 택시폴리아와 같은 모자반의 다른 종에 의해 대체될 수 있다.
도 3의 결과를 토대로, 상기 정제된 모자반 추출물(III)은 칼슘 운반체 A23187(A23187(+) 그룹)에 의해 유도된 β-헥소스아미니다제의 방출을 억제할 수 있고, 1 mg/ml의 정제된 모자반 추출물(III)은 β-헥소스아미니다제 방출의 33%를 억제할 수 있고, 2 mg/ml의 정제된 모자반 추출물(II)은 β-헥소스아미니다제 방출의 56%를 억제할 수 있고, 4 mg/ml의 정제된 모자반 추출물(II)은 β-헥소스아미니다제 방출의 75%를 억제할 수 있다.

Claims (18)

  1. 하기의 단계로 이루어진, 알레르기 억제 모자반 추출물을 추출하기 위한 추출 방법:
    단계 1: 페이스트가 되도록 모자반을 증류수에서 블렌딩하고, 완전히 혼합하여 모자반 페이스트를 수득하는 단계로서, 여기서, 모자반 대 물의 중량비가 1:1 내지 20인 단계;
    단계 2: 20 내지 100℃의 교반 온도에서 30 내지 120분 동안 상기 모자반 페이스트를 연속적으로 교반하는 단계;
    단계 3: 제1 여과 후 수득된 유체가 모자반 추출물인 단계;
    상기 모자반은 카울러파 렌틸리페라(Caulerpa lentillifera) 또는 카울러파 택시폴리아(Caulerpa taxifolia)의 종임.
  2. 제1항에 있어서, 단계 1에서 사용된 상기 모자반은 신선한 모자반, 건조된 모자반 또는 모자반 분말일 수 있는, 추출 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 교반 온도는 60 내지 90℃인, 추출 방법.
  4. 제1항에 있어서, 단계 2에서, 상기 교반 온도는 85℃인, 추출 방법.
  5. 제1항에 있어서, 단계 2에서, 상기 교반 시간은 60 내지 105분인, 추출 방법.
  6. 제1항에 있어서, 단계 2에서, 상기 교반 시간은 90분인, 추출 방법.
  7. 제1항에 있어서, 단계 3에서, 제1 여과를 위한 조건은 5마이크론 및 1마이크론인, 추출 방법.
  8. 제1항에 있어서, 단계 3에서, 제2 여과는 제1 여과 후 수행될 수 있고; 상기 제2 여과는 막 여과인, 추출 방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기 제2 여과는 제1 막, 제2 막, 제3막을 연속으로 사용하되, 제1 막은 대형 입자를 제거하는 미세여과막이고; 제2 막은 작은 입자를 제거하는 한외여과막이고; 제3 막은 염을 제거하는 나노여과막인, 추출 방법.
  10. 제1항에 기재된 추출 방법을 사용함에 의해 수득된 알레르기-억제 모자반 추출물.
  11. 제10항에 따른 유효량의 알레르기-억제 모자반 추출물 및 약제학적으로 허용되는 부형제를 포함하는 알레르기 억제용 약제학적 조성물.
  12. 제10항에 따른 유효량의 알레르기-억제 모자반 추출물 및 화장학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 알레르기 억제용 화장품 조성물.
  13. 제10항에 따른 유효량의 알레르기-억제 모자반 추출물 및 식용가능한 부형제를 포함하는 알레르기 억제용 식품 조성물.
  14. 삭제
  15. 삭제
  16. 제12항에 있어서, 상기 화장품 조성물의 형태는 크림, 다중 에멀젼, 무수 조성물, 수성 분산제, 오일, 에멀젼, 향유, 발포제(foam), 로션, 겔, 에멀젼, 수성 에탄올 용액, 하이드로글리콜릭 용액, 하이드로겔, 코팅 습포제(coating poultices), 슬러리, 비누, 샴푸, 컨디셔너, 투명 슬러리, 연고, 무쓰, 모발 크림, 분말, 바(bars), 연필, 스프레이, 에어로졸, 캡슐, 겔라틴 캡슐, 연질 캡슐제, 경질 캡슐제, 정제, 당의정, 입제, 츄잉검, 용제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 폴리사카라이드 필름, 젤리 및 겔라틴의 조성물로부터 선택되는, 조성물.
  17. 제12항에 있어서, 상기 화장품 조성물은 아이크림, 파운데이션, 와싱 폼(크림), 메이크-업 리무버, 아이섀도우, 립스틱, 립 글로스, 립밤 및 파우더를 포함하는 제품과 혼합될 수 있는, 조성물.
  18. 제16항에 있어서, 상기 샴푸의 성분들은 계면활성제 10 내지 50wt%, 피부연화제 0.3 내지 2wt%, 모자반 추출물 0.01 내지 0.1wt%, 증점제 0 내지 2wt%, 향제 0.1 내지 1wt%, 보존제 0.3~1wt% 및 나머지는 물인, 조성물.
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