KR101845517B1 - 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 폴리감마글루탐산을 함유하여 보습 효과가 있는 특성을 가지면서, 감마올리고펩타이드를 함유하여 주름개선 효과가 있는 특성을 가진다. 또한 고함량의 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 리포좀화를 통해 안정적으로 함유하는 것이 특징이다. 이와 같이 리포좀화 된 복합체는 W/O, W/Si 또는 무수 제형에 적정량 첨가하여 보습 및 주름개선 효과가 있는 장점을 가진다. 따라서 본 발명의 화장료 조성물은 화장료 제품으로서 다양하게 적용될 수 있을 것으로 보인다.

Description

폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물 {COSMETIC COMPOSITION COMPRISING LIPOSOME COMPLEX CONTAINING GAMMA POLYGLUTAMIC ACID AND GAMMA OLIGOPEPTIDE}
본 발명은 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 석출 현상 없이 안정적으로 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 함유한 리포좀 복합체에 의한 보습 효과 및 주름개선 효과가 있는 화장료 조성물에 관한 것이다.
폴리감마글루탐산(화학식 1)은
[화학식 1]
Figure 112016027384870-pat00001
글루탐산이 감마-펩타이드 결합으로 이어진 음이온성 고분자 펩타이드로서 특허 미생물인 바실러스 서브틸리스 청국장(Bacillus subtilis chungkookjang) 발효에 의해서 생성된다 (대한민국 특허 공개 10-2002-0079889). 또한 음식, 의약품, 수처리에 이르기까지 많은 잠재적 이용 범위를 가지고 있다. 현재 암 치료에서 약물 전달 시스템에 널리 이용되고 있으며, 제1형 당뇨 치료에 적용 및 에이즈 백신의 생산에 있어 잠재적으로 이용에 관한 연구가 진행 중이다.
한편, 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드는 각각 보습과 주름개선 기능을 가지고 있는 원료이지만, 그 효과를 나타내기 위한 적절한 함량을 함유하고 있어야 화장료로서 기능을 할 수 있다. 이들은 수용성 파우더로 존재하고 있기 때문에 특히 W/O 제형이나 W/Si, 무수 제형에 적절한 함량을 함유하기에 어려움이 있었다.
대한민국 특허 공개 10-2002-0079889호
종래 기술의 문제점을 해결하고자, 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드의 석출 및 분리 현상 없이 유중수(W/O)형, 실리콘중수(W/Si)형 또는 무수형의 제형에서 보습 및 주름 개선 효과가 있는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 과제를 해결하고자, 본 발명은 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
일 구현예는 리포좀 복합체에 함유되는 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드의 함량이 리포좀 복합체의 총 함량을 기준으로 0.01 내지 8중량%인 것일 수 있다.
다른 일 구현예는 리포좀 복합체의 총 함량을 기준으로, 폴리감마글루탐산 4 내지 6중량%, 및 감마올리고펩타이드 2 내지 4중량%로 함유되는 것일 수 있다.
또 다른 일 구현예는 리포좀 복합체가 화장료 조성물의 총 함량을 기준으로 0.1 내지 10 중량% 포함되는 것일 수 있다.
또 다른 일 구현예는 화장료 조성물이 보습용 또는 주름 개선용인 것일 있다.
또 다른 일 구현예는 화장료 조성물이 수중유(O/W)형, 유중수(W/O)형, 실리콘중수(W/Si)형 및 무수형으로 이루어진 형태로 제형화되는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 화장료 조성물을 포함하는 화장품을 제공하며, 상기 화장품은 보습 및 주름 개선효과가 우수한 것이 특징이다.
또한, 본 발명은 상기 화장료 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는 화장 방법을 제공한다.
본 발명의 화장료 조성물은 폴리감마글루탐산을 함유하여 보습 효과가 있는 특성을 가지면서, 감마올리고펩타이드를 함유하여 주름개선 효과가 있는 특성을 가진다. 또한 고함량의 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 리포좀화를 통해 안정적으로 함유하는 것이 특징이다. 이와 같이 리포좀화 된 복합체는 W/O, W/Si 또는 무수 제형에 적정량 첨가하여 보습 및 주름개선 효과가 있는 장점을 가진다. 따라서 본 발명의 화장료 조성물은 화장료 제품으로서 다양하게 적용될 수 있을 것으로 보인다.
도 1은 시험예 1의 농도에 따른 폴리감마글루탐산의 가용성 및 석출 유무 평가 실험 결과를 나타낸 것이다.
도 2는 시험예 2의 농도에 따른 감마올리고펩타이드의 가용성 및 석출 유무 평가 실험 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 시험예 3의 화장료 조성물에 따른 리포좀 복합체에 함유 가능한 최대 함량인 8 중량% 한도 내에서의 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드의 배합 비율 확인 및 분리 유무 평가 실험 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 시험예 3의 화장료 조성물에 따른 각 제형별 리포좀 복합체 함량 적용 및 분리 유무 평가 실험 결과를 나타낸 것이다.
본 발명은 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 함유한 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 화장료 조성물은 폴리감마글루탐산에 의한 보습 효과와 감마올리고펩타이드에 의한 주름개선 효과를 가지며, 리포좀 복합체를 이용함에 따라 W/O, O/W 또는 무수 제형에 첨가 가능하고 나아가 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드가 석출되지 않고 보습 및 주름개선 효과를 나타내는 것이 장점이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 리포좀(liposome) 복합체는 친유성 물질과 친수성 물질이 이루는 지질 이중층 구조가 연속적으로 나타나는 다층의 구형이나 타원형 구조체를 의미하며, 리포좀 복합체의 친수성 물질이 존재하는 부위에는 상기 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드가 함유된다.
상기 폴리감마글루탐산은 피부에 코팅되어 수분이 빠져나가는 것을 막아주어 보습 효과를 나타낸다. 상기 폴리감마글루탐산은 히아루론산과의 흡습성 및 보습 비교에서도 2.5 내지 4배의 더 많은 수분을 포착할 수 있다고 알려져 있다.
상기 감마올리고펩타이드는 저분자량으로 인하여 피부 투과율이 높으며, 히아루론산 분해효소 활성을 저해하여 표피층 아래의 히알루론산 농도를 증가시킨다. 또한, 감마올리고펩타이드는 세포 내 콜라겐 합성을 증가시키거나 콜라겐을 분해하는 효소인 콜라게나아제의 활성을 저해시킴으로써 피부의 탄력을 유지시켜 최종적으로 주름을 개선시키는 기능을 한다.
상기 리포좀 복합체에 함유되는 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드의 함량은 리포좀 복합체의 총 함량을 기준으로 각각 0.01 내지 8 중량%로 포함되는 것이 바람직하다. 상기 기준으로 0.01 중량% 미만이면 목적으로 하는 주름 개선 기능을 달성하기가 어려울 수 있으며, 8 중량%를 초과하면 리포좀 복합체를 안정화에 있어 분리현상이 발생한다는 문제점이 있다.
상기 리포좀 복합체의 총 함량을 기준으로 폴리감마글루탐산 4 내지 6중량%, 및 감마올리고펩타이드 2 내지 4중량%로 함유되는 것이 바람직하다. 상기 기준으로 상기 범위 내의 함량을 가질 경우, 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드이 분리 및 석출되지 않고 목적하는 효과를 달성할 수 있다.
상기 리포좀 복합체는 화장료 조성물의 총 함량을 기준으로 0.1 내지 10 중량% 포함되는 것이 바람직하다. 상기 기준으로 0.1 중량% 미만이면 목적으로 하는 보습 및 주름개선 기능을 달성하기가 어려울 수 있으며, 10 중량% 초과하면 기존 화장품 제형과 리포좀 복합체의 균일한 분산에 어려움을 주어 분리현상이 발생한다는 문제점이 있다.
상기 화장료 조성물은 당해 기술분야에서 공지된 "피부학적으로 허용된 담체"를 추가적으로 포함할 수 있다. 예컨대, 정제수, 오일, 왁스, 지방산, 지방산 알코올, 지방산 에스테르, 계면활성제, 흡습제, 증점제, 항산화제, 점도 안정화제, 킬레이팅제, 완충제, 방부제, 저급 알코올 들이 포함되지만 이에 제한되는 것은 아니며, 그 종류와 농도는 다양하다. 필요에 따라서는 미백제, 보습제, 항염증제, 항박테리아제, 자외선 차단제, 항생제, 향수, 염료가 포함될 수도 있으며, 이들은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 양으로 본 발명에 따른 화장료 조성물에 포함될 수 있다.
구체적으로 상기 오일로는 수소화 식물성유, 파마자유, 면실유, 올리브유, 야자인유, 호호바유, 아보카도유가 이용될 수 있고, 왁스로는 밀랍, 경랍, 카르나우바, 칸델릴라, 몬탄, 세레신, 액체 파라핀, 라놀린이 이용될 수 있다. 지방산으로는 스테아르산, 리놀레산, 리놀렌산, 올레산이 이용될 수 있고, 지방산 알코올로는 세틸 알코올, 옥틸 도데칸올, 올레일 알코올, 판텐올, 라놀린 알코올, 스테아릴 알코올, 헥사데칸올이 이용될 수 있으며, 지방산 에스테르로는 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 부틸 스테아레이트 등이 이용될 수 있지만, 이에 제한되는 것은 아니다.
계면활성제의 예로는 소듐 스테아레이트, 소듐 세틸설페이트, 폴리옥시에틸렌 라우릴에테르 포스페이트, 소듐 N-아실 글루타메이트와 같은 음이온 계면활성제; 스테아릴디메틸벤질암모늄 클로라이드 및 스테아릴트리메틸암모늄 클로라이드와 같은 양이온 계면활성제; 알킬아미노에틸글리신 하이드로클로라이드 및 레시틴과 같은 양성 계면활성제; 글리세린 모노스테아레이트, 소르비탄 모노스테아레이트, 프로필렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 올레일에테르, 폴리에틸렌 글리콜 모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노팔미테이트, 폴리옥시에틸렌 코코넛 지방산 모노에탄올아르니드(monoethaolarnide), 폴리옥시프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌 캐스터유, 폴리옥시에틸렌 라놀린과 같은 비이온성 계면활성제 등이 포함된다.
흡습제에는 글리세린, 1,3-부틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜이 이용될 수 있으며, 저급 알코올로는 에탄올, 이소프로판올이 이용 가능하다. 증점제의 예에는 알긴산 나트륨, 카제인산 나트륨, 젤라틴 한천, 크산탄 고무, 전분, 셀룰로오스 에테르 (예, 하이드록시에틸 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 카르복시메틸 셀룰로오스, 하이드록시 프로필메틸 셀룰로오스), 폴리비닐 피롤리돈, 폴리비닐 알코올, 폴리에틸렌 글리콜 및 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 항산화제로는 부틸레이티드 하이드록시톨루엔, 부틸레이티드 하이드록시아니솔, 프로필 갈레이트, 시트르산, 에톡시퀸(ethoxyquin)이 이용 가능하고, 킬레이팅제로는 디소듐 에데테이트, 에탄하이드록시 디포스페이트가 이용 가능하며, 완충제로는 시트르산, 소듐 시트레이트, 붕산, 보랙스(borax), 디소듐 하이드로젠 포스페이트가 이용 가능하고, 방부제로는 메틸 파라하이드록시벤조에이트, 에틸 파라하이드록시벤조에이트, 디하이드로아세트산, 살리실산, 벤조산이 이용 가능하지만, 이에 제한되는 것은 아니다
상기 화장료 조성물은 당해 기술분야에 공지된 다양한 제형에 적용되어 사용될 수 있다. 예컨대, 수중유(O/W)형, 유중수(W/O)형, 실리콘중수(W/Si)형 및 무수형으로 이루어진 형태로 제형화 될 수 있으며, 바람직하게는 유중수(W/O)형, 실리콘중수(W/Si)형 및 무수형으로 이루어진 형태로 제형화 될 수 있고, 특별히 제형이 이에 한정되지 않는다.
이하, 본 발명을 시험예를 이용하여 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 하기 시험예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명은 하기 시험예에 의해 한정되지 않고 다양하게 수정 및 변경될 수 있다.
시험예 1. 폴리감마글루탐산(γ-PGA)의 용해도 확인 및 석출 평가
폴리감마글루탐산의 용해도 및 석출유무를 평가하기 위해 하기 표 1에 기재된 조성 및 함량(단위: 중량%)으로 실시예 1 내지 5 및 비교예 1을 제조하였다.
구체적으로, 80℃ 조건 하에서, 폴라감마글루탐산을 정제수에 무색 투명해질 때까지 분산시켰으며, 다시 실온으로 냉각하여 투명 유리 용기에 충전하였다.
구분 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 실시예 5 비교예 1
폴리감마글루탐산 4 8 10 12 14 0
정제수 96 92 90 88 86 100
실시예 1 내지 5 및 비교예 1의 정제수를 각각 원심분리기를 이용하여 3,000rpm, 30분간 원심 분리 후 폴리감마글루탐산의 석출 및 용해 확인 후 시간이 지남에 따른 폴리감마글루탐산의 석출 유무를 조건별 (항온조 -10℃, 0℃, 25℃, 45℃, 55℃)로 보관하여 3개월 동안 관찰 확인하였으며, 그 결과를 표 2 및 도 1에 나타내었다.
표 2에 있어서, 용해 정도와 석출 유무에 따라 용액 상태가 불투명하고 석출 현상이 발생하였으면 "◎", 완전 용해되어 석출되지 않고 투명하면 "."로 표시하였다.
구분 실시예 1 실시예 2 실시예 3 실시예 4 실시예 5 비교예 1
용해정도 . . . . . .
표 2 및 도 1에 나타난 바와 같이, 실시예 1~5 및 비교예 1 모두 폴리감마글루탐산이 투명하게 완전히 용해되어 석출되지 않았음을 확인하였다.
시험예 2. 감마올리고펩타이드의 용해도 확인 및 석출 평가
감마올리고펩타이드의 용해도 및 석출유무를 평가하기 위해 하기 표 3에 기재된 조성 및 함량(단위: 중량%)으로 실시예 6 내지 10을 제조하였으며, 비교예로서 정제수인 비교예 1을 사용하였다.
구체적으로, 80℃ 조건 하에서, 감마올리고펩타이드를 정제수에 무색 투명해질 때까지 분산시켰으며, 다시 실온으로 냉각하여 투명 유리 용기에 충전하였다.
구분 실시예 6 실시예 7 실시예 8 실시예 9 실시예 10 비교예 1
폴리감마글루탐산 4 8 10 12 14 0
정제수 96 92 90 88 86 100
실시예 6 내지 10 및 비교예 1의 정제수를 각각 원심분리기를 이용하여 3,000rpm, 30분간 원심 분리 후 감마올리고펩타이드의 석출 및 용해 확인 후 시간의 지남에 따라 감마올리고펩타이드의 석출 유무를 조건별 (항온조 -10℃, 0℃, 25℃, 45℃, 55℃)로 보관하여 3개월 동안 관찰 확인하였으며, 그 결과를 표 4 및 도 2에 나타내었다.
표 4에 있어서, 용해 정도와 석출 유무에 따라 용액 상태가 불투명하고 석출 현상이 발생하였으면 "◎", 완전 용해되어 석출되지 않고 투명하면 "."로 표시하였다.
구분 실시예 6 실시예 7 실시예 8 실시예 9 실시예 10 비교예 1
용해정도 . . . . . .
표 4 및 도 2에 나타난 바와 같이, 실시예 1 내지 5 및 비교예 1 모두 감마올리고펩타이드가 투명하게 완전히 용해되어 석출되지 않았음을 확인하였다.
시험예 3. 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드 함량에 따른 리포좀 복합체 화장료 조성물의 제조 및 석출평가
시험예 1, 2의 분석 결과 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드 각각 14%중량까지는 용해가 가능함을 확인하였으며, 리포좀 복합체 제조와 안정화를 위한 최적 함량을 결정하기 위해 실시예 11, 12, 13 및 비교예 2를 제조하였다. 참고로 리포좀 복합체를 제조하기 위한 베이스의 함량에 제한이 있어서 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드를 적용할 수 있는 범위가 0 내지 8 중량%로 한정되었다.
(단위: 중량%)
구분 실시예 11 실시예 12 실시예 13 비교예 2
폴리감마글루탐산 4 6 2 0
감마올리고펩타이드 4 2 6 0
리포좀 베이스 88.5 88.5 88.5 88.5
기타 성분 3.5 3.5 3.5 11.5
합계 100 100 100 100
상기 시험예 1, 2와 동일한 방법으로 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드의 분리 유무를 평가하였으며, 그 결과를 하기 표 6 및 도 3에 나타내었다. 표 6에 있어서, 분리가 일어난 경우, "◎"로 표시하고, 분리가 일어나지 않은 경우, "."로 표시하였다.
구분 실시예 11 실시예 12 실시예 13 비교예 2
분리정도 . . . .
표 6 및 도 3에 나타난 바와 같이, 실시예 11, 12 및 비교예 2는 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드가 분리되지 않았으며, 실시예 13의 경우 리포좀화 된 베이스에 분리 현상이 일어남을 확인하였다. 이는 용해도에 따라 리포좀화에 주는 영향이 상이해 발생한 결과인 것으로 판단되며, 또한 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드가 각각 4 중량% 및 4 중량%로 배합되거나 6 중량% 및 2 중량%로 배합되는 경우에는 안정한 리포좀 복합체를 형성한다는 것을 확인하였다.
시험예 4. 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물의 피부 안정성 평가
폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드의 분리 현상이 없는 상기 시험예 3의 실시예 11, 12 및 비교예 2의 피부 안전성 평가를 위해 인체 첩포 시험을 하였다. 알레르기성 접촉 피부염이나 아토피 피부염의 병력이 없고 현재 피부 질환이 없다고 판정된 건강한 성인 남녀 30명의 팔 상박부 안쪽에 처방된 시험예 3의 실시예 11, 12 및 비교예 2의 제형을 첩포한 후 24시간 후에 첩포를 제거하고, 첩포 제거직후, 1시간 후, 24시간 후의 피부 상태를 육안으로 관찰하여 자극의 강도에 따라 점수로 평가하였고, 그 결과를 하기 표 7에 나타내었다.
표 7에 있어서, 자극 정도에 따라 매우 자극이 심하면 "+++", 중간 정도의 자극이 있으면 "++", 약간의 자극이 있으면 "+", 자극이 없으면 "-"로 표시하였다.
구분 실시예 11 실시예 12 비교예 2
자극 정도 - - -
표 9에 나타난 바와 같이, 실시예 11, 12 및 비교예 2 모두 무자극으로 피부 부작용이 없는 안전한 화장료 조성물로 판명되었다.
시험예 5. 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물의 피부 보습 평가
폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드 리포좀 복합체의 분리현상이 없는 시험예 3의 실시예 11, 12 및 비교예 2의 보습 효과를 비교하기 위해 피부 수분 측정기(Corneometer)를 이용하여 피부전도도를 측정함으로서 평가하였다. 피부 수분 측정을 위해 항온항습(실내 온도 20 ~ 25℃, 상대 습도 40 ~ 60%) 조건에서 5명의 피검사자 팔 안쪽을 측정부위로 하여, 시험예 3의 실시예 11, 12 및 비교예 2를 도포하여 시간별로 측정하였다. 한 측정부위를 각 5회씩 측정하였고, 그 평균값을 사용 전 대비 사용 후 시간별 상대적인 보습 증가율(%)을 계산하여 수치화하였으며, 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.
시간(분) 피부 보습력 증가율(%)
실시예 11 실시예 12 비교예 2
사용 전 0 0 0
30분 33 39 28
1시간 24 34 16
3시간 19 26 10
5시간 13 18 8
표 8에 나타난 바와 같이, 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드의 배합비를 달리 함유한 리포좀 복합체를 피부에 적용했을 때의 보습 효과를 확인하기 위해 피부 보습력 증가율을 측정한 결과, 비교예 2와 비교하여, 실시예 11 및 12에서 피부 보습력 증가율이 증가하는 것을 확인함으로써, 실시예 11과 12 모두 피부 보습력의 증가에 효과가 있음을 관찰하였다. 또한 실시예 12에서 좀 더 높은 피부 보습력을 보인다는 것을 확인하였다.
시험예 6. 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물의 콜라겐 생합성 측정
폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드 리포좀 복합체의 분리현상이 없는 시험예 3의 실시예 11, 12 및 비교예 2의 주름개선 효과를 조사하기 위해 섬유아세포를 이용한 콜라겐 생합성 촉진 시험(SircolTM Soluble Collagen Assay Kit)을 실시하였다.
배양한 사람섬유아세포를 12웰 세포 배양접시에 1ⅹ105 세포/웰이 되도록 5% FBS를 포함하는 배지에 분주하여 24시간 배양하고, 2% FBS를 포함하는 배지에 처리 농도별로 희석하여 세포에 처리하고 48시간 배양하여 하기 실험에 사용하였다. 상기 섬유아세포(fibroblast)에서 실제적으로 콜라겐의 합성이 증가되었음을 확인하기 위하여 Biocolor 사의 SircolTM 용해 콜라겐 분석 키트(Soluble Collagen Assay kit)를 구입하여 제품 메뉴얼의 실험 방법에 따라 콜라겐 양을 측정하였다. SircolTM 용해 콜라겐 분석 키트는 세포를 배양 하는 동안 배양 배지로 분비된 콜라겐과 염색시약의 결합에 의한 방법으로 확인 할 수 있는 정량방법이다. 상세하게는, 배양 상등액 100㎕에 염색 시약(dye reagent, 피크릭산에 Sirius red reagent이 포함된 용액) 1㎖을 첨가하고 30분간 반응시켰다. 씨리어스 레드(Sirius red)는 음이온계 색소로서 콜라겐에 특이적으로 결합되며, 30분간 반응시킨 후 반응액을 12,000× g 이상에서 10분간 원심분리하여 콜라겐-색소 결합체를 침전시켰다. 침전물에 알칼리 시약 1.0㎖을 첨가하여 실온에서 5분 동안 용해시켰다. 상기 용액의 흡광도를 흡수분광광도계(UVmax, Molecular Device, USA)를 이용하여 540㎚에서 측정하여 하기 표 9에 나타내었으며, 이를 비시험군의 흡광도 비교하여 콜라겐 생합성 촉진 효과를 평가하였다.
콜라겐 생합성 측정 평균 O.D.
(% of 대조군)
검액농도 (W/W%) 대조군 0.01 0.05
실시예 11 0.471
(100)		 0.518
(109.97)		 0.563
(119.53)
실시예 12 0.471
(100)		 0.511
(108.49)		 0.552
(117.19)

비교예 2
 0.471
(100)		 0.477
(101.27)		 0.489
(103.63)
상기 표 9에 나타난 바와 같이, 실시예 11 및 12는 비교예 2와 비교하였을 때, 실시예 11 및 12 모두에서 콜라겐 생합성 효과가 우수하다는 것을 관찰하였다. 또한 실시예 11이 실시예 12보다 콜라겐 생합성능이 우수하게 나타났지만 비교예 2와의 차이는 비슷한 것으로 나타났다. 따라서 시험예 3의 실시예 12가 보습력 및 주름개선에 더 효과가 좋은 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드 배합비를 가지고 있다는 것을 알 수 있다.
시험예 7. 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함한 화장품의 제형별 안정도 평가
수용성 물질인 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드의 비수계 화장품 제형으로의 적용을 위해서 시험예 3과 같이 리포좀 복합체(실시예 12)를 제조하였다. 이후, 본 발명의 주요한 관심사인 W/O, W/Si, 무수 화장품 제형, 즉 비수계 화장품 제형에 있어서 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드 리포좀 복합체의 적용 시험을 실시하였다.
실시예 14 내지 16에는 각각의 화장품 제형에 실시예 12의 리포좀 복합체를 10 중량%를 적용하였고, 비교예 3 내지 5에는 리포좀 복합체를 적용하지 않았다. 실시예 14 내지 16 및 비교예 3 내지 5를 각각 원심분리기를 이용하여 3,000rpm, 30분간 원심 분리 후 분리 유무를 확인함으로써 안정도를 평가하였고, 그 결과를 표 10 및 도 4에 나타내었다.
표 10에 있어서, 분리가 일어났으면 "◎"로 표시하고 분리가 일어나지 않았으면 "."으로 표시하였다.
도 4는 실시예 14(W/O 제형+리포좀), 실시예 15(W/Si 제형+리포좀), 실시예 16(무수제형+리포좀), 비교예 3(W/O 제형), 비교예 4(W/Si 제형) 및 비교예 5(무수제형)의 원심 분리 후 분리 유무 정도를 사진으로 나타낸 것이다.
구분 실시예 14
(W/O)		 실시예 15
(W/Si)		 실시예 16
(무수)		 비교예 3
(W/O)		 비교예 4
(W/Si)		 비교예 5
(무수)
분리정도 . . . . . .
표 10 및 도 4에 나타난 바와 같이, 실시예 14 내지 16의 화장품의 제형에 있어서 폴리감마글루탐산 및 감마올리고펩타이드가 분리되지 않음을 확인하였다.

Claims (6)

  1. 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드를 함유하는 리포좀 복합체를 포함하는 화장료 조성물로서,
    상기 리포좀 복합체의 총 함량을 기준으로,
    폴리감마글루탐산 4 내지 6중량%, 및
    감마올리고펩타이드 2 내지 4중량%로 포함되며,
    상기 리포좀 복합체에 함유되는 폴리감마글루탐산과 감마올리고펩타이드의 함량은 리포좀 복합체의 총 함량을 기준으로 0.01 내지 8중량%인 것을 특징으로 하며,
    상기 화장료 조성물은 수중유(O/W)형, 유중수(W/O)형, 실리콘중수(W/Si)형 및 무수형으로 이루어진 형태로 제형화되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 청구항 1에 있어서,
    상기 리포좀 복합체는 화장료 조성물의 총 함량을 기준으로 0.1 내지 10 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  5. 청구항 1에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 보습용 또는 주름 개선용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
  6. 삭제
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