KR101834758B1 - 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR101834758B1
KR101834758B1 KR1020160106299A KR20160106299A KR101834758B1 KR 101834758 B1 KR101834758 B1 KR 101834758B1 KR 1020160106299 A KR1020160106299 A KR 1020160106299A KR 20160106299 A KR20160106299 A KR 20160106299A KR 101834758 B1 KR101834758 B1 KR 101834758B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
bee venom
bee
venom
composition
bees
Prior art date
Application number
KR1020160106299A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20180021569A (ko
Inventor
한상미
홍인표
우순옥
김세건
장혜리
Original Assignee
대한민국
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 대한민국 filed Critical 대한민국
Priority to KR1020160106299A priority Critical patent/KR101834758B1/ko
Publication of KR20180021569A publication Critical patent/KR20180021569A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101834758B1 publication Critical patent/KR101834758B1/ko

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56Materials from animals other than mammals
    • A61K35/63Arthropods
    • A61K35/64Insects, e.g. bees, wasps or fleas
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/56Materials from animals other than mammals
    • A61K35/63Arthropods
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/16Fluorine compounds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/20Halogens; Compounds thereof
    • A61K8/21Fluorides; Derivatives thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/987Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of species other than mammals or birds
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/30Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/312Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on dental health
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00Food ingredients
    • A23V2250/20Natural extracts
    • A23V2250/204Animal extracts

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

본 발명은 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독봉독을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 상기 조성물은 치주염의 원인균인 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)에 대한 항균 효과가 우수하여 치주염의 예방과 개선을 위한 치료제로서 용이하게 이용될 수 있다.

Description

봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물 {COMPOSITION CONTAINING A BEE VENOM FOR PREVENTION OR TREATING PERIODONTAL DISEASES}
본 발명은 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
꿀벌의 종류는 일반적으로 서양종꿀벌(Apis mellifera), 동양종꿀벌(Apis cerana), 인도최대종(Apis dorsata), 인도최소종(Apis florea) 등 4개의 종이 알려져 있다. 이 중 현재 우리나라에는 서양종꿀벌과 동양종 꿀벌이 서식하고 있다. 특히 동양종꿀벌은 고려시대부터 사육되기 시작하였으며, 민간과 한방에서 봉침요법으로 사용되어져 왔다. 그러나 서양종꿀벌은 이탈리안 계통 일벌로서 조선시대 고종황제시기에 독일인 선교사에 의해 1892년경에 우리나라에 도입되어 사육되고 있다.
봉독은 벌의 독낭에 들어있는 것으로, 약 40여 가지의 물질로 이루어져 있으며 기원전부터 인체의 질병치료에 이용되어 왔다. 봉독은 벌의 종류에 따라 그 성분에 차이를 보이며, 동일한 벌이라도 일령에 따라 성분의 차이가 발생한다. 현재 봉독 성분에 따른 작용과 기전, 봉독의 과민성과 독성, 면역요법 및 관절염, 단순포진, 다발성 경화증, 종양 등의 질병 치료 등에 대한 연구가 보고되고 있으며 특히 항균작용과 세포 손상개선효과를 갖고 있는 것으로 알려져 있다.
사람의 구강 내에는 여러 종류의 미생물들이 살고 있으며, 구강질환을 일으키는 구강 미생물은 대부분 치아와 잇몸 사이에 형성되는 세균막인 프라그에 존재하는 것으로 알려져 있다. 상기 구강 미생물들은 프라그에서 독소를 생성하고 이들이 생산한 독소는 치주조직 내로 침입하여 치은의 염증, 치조골의 파괴 및 감염을 일으키면 치주염이 되며, 이들 세균이 산(酸)을 생성하면, 치아우식증의 원인이 되기도 한다. 이와 같이 구강 내에 분포하는 미생물들은 구치, 치주질환 등을 유발하며, 이들 미생물들의 일부는 기회성 병원체로서 질병 발병의 가능성을 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 구강 내에 상재하면서 치주염을 발생시키는 병원성 미생물로 여러 종들이 알려져 있으나, 그 중 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia), 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans)와 포피로모나스 진지바리스(Porphyromonas gingivalis)가 치주염을 발생시키는 주 병원체인 것으로 알려져 있다.
치주염은 발병요인도 복잡하고 증상도 다양하다. 이중 치주염의 주요 발생원인의 하나가 구강 내 미생물에 의한 것으로 이들은 일차적으로 당류등을 이용하여 불용성 글루칸을 생성하고 이들이 각종 균체와 같이 치아표면에 부착하여 치석을 형성하게 된다. 이러한 치석에 의해 충치 및 치주염이 발생하게 된다. 따라서, 치주염을 예방하기 위한 가장 효과적인 방법은 이러한 미생물들의 활성을 억제하고, 염증이 발생한 잇몸의 혈류를 좋게하는 물질을 사용함으로써 이루어 질 수 있다. 즉, 치주염의 예방을 위해 구강 내 청결을 적절히 행하는 것과 함께 예방치료를 목적으로 여러 가지 약제를 배합시킨 구강용 조성물이 제안되고 있다.
한편, 치주염의 예방치료를 목적으로 사용되고 있는 약제 중 페니실린, 에리스로마이신, 테트라사이클린과 같은 항생제는 살균 및 생육 억제에는 효과적이기는 하나 내성균의 출현을 유발하는 등의 부작용이 크다. 또한, 클로르헥시딘과 같은 항균제는 충치 형성을 저해하는 효과는 있으나, 독성이 강한 것으로 알려졌다. 따라서, 최근에는 상기의 문제점을 해결하기 위해 종래의 구강용 세정작용 더해 약리작용 및 안정성이 우수한 구강용 조성물이 개발되고 있다.
이러한 배경 하에, 본 발명자들은 정제봉독이 갖는 다양한 생리활성을 연구하던 중, 동양종꿀벌의 봉독이 서양종꿀벌의 봉독과는 함량과 성분에 있어 많은 차이를 갖고 있음을 확인하고, 상기 동양종꿀벌 일벌에서 분리한 정제봉독이 치주염을 일으키는 주요 원인균인 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)에 대한 항균효과가 우수함을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
대한민국 등록특허 제10-1202302호 (발명의 명칭 : 봉독을 함유하는 치주질환, 충치 예방 및 치료용 조성물, 출원인 : 동성제약주식회사, 대한민국, 등록일 : 2012년11월12일) 대한민국 등록특허 제10-1061257호 (발명의 명칭 : 봉독과 생약추출물을 유효성분으로 하는 천연항생제 및 이의 제조방법, 출원인 : 대한민국, 등록일 : 2011년08월25일)
본 발명의 목적은 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 데에 있다.
본 발명은 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
상기 치주염은 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)를 원인균으로 하는 것을 특징으로 한다.
또 다른 형태에서 본 발명은 상기 조성물에 불소 화합물이 추가된 구강용 약학제제를 제공할 수 있다.
본 발명은 또한 상기 조성물을 함유하는 치약, 구강 청정제, 구강 세정제 및 구강 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 제형의 구강용 약학제제를 제공한다.
또한 상기 제형 내의 봉독 농도는 0.1~10 ㎎/㎖인 것이 바람직하다.
본 발명은 또한 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 상기 봉독은 정제봉독으로서, 채집하는 과정은 통상의 양잠농가에서 사용하는 방법을 사용할 수 있다. 특히, 봉독 외의 이물질인 당류와 휘발성물질을 제거하여 얻은 정제봉독인 것으로서, 자세하게는 상기 정제봉독은 동양종꿀벌의 15일령 이상 일벌의 독낭에서 봉독채집장치를 이용하여 분리한 봉독에서 봉독 외의 이물질인 당류와 휘발성물질을 제거하여 얻은 것일 수 있다. 상기 치주염은 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)를 원인균으로 하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 조성물의 제형이 액상일 경우, 봉독 농도는 0.1~10 ㎎/㎖인 것이 바람직하다. 봉독 농도는 0.1㎎/㎖ 미만이 되면, 봉독 내의 유효성분이 변화되어 약리학적 효과가 달라질 수 있으며, 10 ㎎/㎖을 초과할 경우에도 봉독 내의 유효성분이 안정적이지 않을 수 있다. 또한 사람 또는 동물의 체내외에서 고농도의 봉독이 분산되기에 어려울 수 있으므로 상기 봉독의 농도가 10 ㎎/㎖ 이하인 것이 더 적합하다. 한편 상기 봉독이 치주염을 억제하기에 바람직한 활성 농도는 0.1~5 ㎍/㎖ 인 것이 좋으며, 사용 직전에 이와 같은 농도로 희석되어 사용되는 것이 바람직하다.
본 발명은 또한 상기 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다. 상기 봉독은 본 발명의 약학 조성물에 0.001~99.9 중량%로 하여 첨가될 수 있다.
상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
이러한 제형은 특히 치약, 구강 청정제, 구강 세정제 및 구강 스프레이로 이루어진 군에서 선택되어 제조될 수 있다. 또 다른 형태에서 본 발명은 상기 조성물에 치주염 억제 효과를 상승시킬 수 있는 불소 화합물이 추가된 구강용 약학제제를 제공할 수 있다. 봉독을 함유한 본 발명의 조성물은 불소 화합물이 갖는 치주염 억제 효과를 더욱 상승시킬 수 있다.
상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 봉독 함유 약학조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물의 투여량은 치료받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 일반적으로 투여량은 0.01㎎/㎏/일 내지 대략 2000㎎/㎏/일의 범위이다. 더 바람직한 투여량은 1㎎/㎏/일 내지 500㎎/㎏/일이다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 주사에 의해 투여될 수 있다.
또한, 본 발명은 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 치주염의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다. 상기 건강식품에 봉독은 0.001~99.9 중량%로 하여 첨가될 수 있다. 본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제 등이 있다.
본 발명은 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독을 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것으로서, 상기 조성물은 치주염의 원인균인 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)에 대한 항균 효과가 우수하여 치주염의 예방과 개선을 위한 치료제로서 용이하게 이용될 수 있다. 대한민국 등록특허 제10-1202302호에 봉독을 함유하는 치주질환, 충치 예방 및 치료용 조성물이 개시되어 있지만, 이는 서양종꿀벌의 봉독에 관한 기술로서 본 발명의 동양종꿀벌 유래의 봉독이 갖는 치주염 치료 효과는 서양종꿀벌의 봉독보다 현저하게 높은 것으로 확인된다. 또한 대한민국 등록특허 제10-1061257호에도 봉독이 갖는 항균 효과가 개시되어 있기는 하지만 역시 설사유발균에 대한 서양종꿀벌 유래의 봉독이 갖는 항균효과만이 개시되어 있을 뿐이다.
도 1은 동양종꿀벌의 일벌에서 봉독을 채집하는 과정을 나타내는 사진이다.
도 2은 서양종꿀벌의 일벌에서 봉독을 채집하는 과정을 나타내는 사진이다.
도 3은 동양종꿀벌과 서양종꿀벌의 일벌에서 채취한 봉독 성분의 분포를 확인한 액체크로마토그램 결과이다(A-동양종꿀벌 봉독, B-서양종꿀벌 봉독).
도 4는 동양종꿀벌의 일벌에서 채취한 봉독의 히알루로니다아제 억제 활성을 나타내는 그래프이다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지도록, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.
<실시예 1. 정제봉독의 제조>
15일령 이상된 일벌에서 동양종꿀벌(Apis cerana L.)과 서양종꿀벌(Apis mellifera L.)을 봉독채집장치를 이용하여 봉독을 채집하였고, 봉독의 간이정제방법을 통해 당류와 휘발성물질을 제거하고 동결건조함으로써 순수한 수용성을 갖는 정제 봉독 건조물을 제조하였다. 15일령 이상된 일벌에서 봉독을 채집한 것은 기존의 연구를 통해 서양종꿀벌의 경우 15일령 이상된 일벌에서 봉독의 함량이 가장 많았던 것으로 확인되었기 때문이다. 도 1은 동양종꿀벌의 봉독 채집과정, 도 2에는 서양종꿀벌의 봉독 채집과정이 개시되어 있다.
<실시예 2. 정제봉독의 성분 확인을 위한 LC 분석>
실시예 1에서 채집된 봉독 함량을 확인한 바, 하기 표 1에 개시된 바와 같이 동양종꿀벌과 서양종꿀벌이 갖는 봉독의 함량이 다른 것으로 확인된다.
벌 종류 봉독 함량 (mg/마리)
동양종 꿀벌 일벌 0.2
서양종 꿀벌 일벌 0.3
꿀벌의 종류에 따라 봉독의 함량이 차이나는 것은, 봉독 내에 포함된 유효성분의 차이로 인한 것이 될 수 있기에, 실시예 1에서 채집된 정제봉독 40 ㎎을 3차 증류수 10 ㎖에 녹여 PTFE 0.2 μm 필터로 여과하였고, 액체크로마토그래피(LC)하여 봉독의 성분을 비교확인하였다. LC 분석기기는 AKTA Explorer 10 모델을 사용하였고, superdex G200 컬럼을 장착하였다. 이동상으로는 0.1M Ammonium formate, pH 4.5을 이용하였다. 상 검출한계는 ICH 가이드라인(International Conference on Harmonisation guideline)에 따라 산출하였다.
이렇게 분석한 동양종꿀벌의 정제봉독 수용액의 분석결과는 도 3A에, 서양종꿀벌의 정제봉독 수용액의 분석결과는 도 3B에 나타내었다. 도 3A 및 도 3B의 결과를 참고하면, 동양종꿀벌과 서양종꿀벌 내의 봉독이 갖는 유효성분이 갖는 피크가 각각 달라 상기 봉독에 포함된 각각의 성분과 함량에 차이가 있음이 확인된다.
<실시예 3. 정제봉독의 항세균 효과 확인>
15일령 이상된 동양종꿀벌의 일벌에서 채집한 정제봉독의 항세균 효과를 확인하기 위해 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)를 한국생명공학연구원에서 분양받아 헤민 메나디온(hemin menadione)이 첨가된 TSA(trypticase soy agar) 배지에 배양한 후, 최소생육억제농도(MIC) 및 최소살균억제농도(MBC)를 측정하였고 이를 표 3에 나타내었다.
최소생육억제농도 분석은 액체 배지 희석법(broth-dilution method)을 사용하여 수행하였다. 봉독 수용액을 0~20 ㎍/㎖ 농도로 희석하였고, 상기 각 균주(세균)는 O.D.600 = 0.2로 농도를 조절하여 사용하였다. 96-웰 플레이트(96-well plate, Falcon, USA)에 본 발명에 사용된 세균 배양용 헤민 메나디온이 첨가된 TSB(trypticase soy broth) 100 ㎖, 봉독 수용액 50 ㎖, 균주 희석액 50 ㎖를 순차적으로 첨가한 뒤 4 시간마다 UV-스펙트로포토미터(spectrophotometer)를 이용해 흡광도 값을 측정하면서 24 시간 동안 37 ℃에서 배양하였다. 이때, 세균의 생육 곡선상에서 균주의 생장(turbidity)이 검출되지 않는 최소농도를 최소생육억제농도로 설정하였다.
최소살균억제농도는 상술한 최소 저해 농도의 분석 과정에서 각 시간대 별 배양 세균 시료 50 ㎖를 취해 헤민 메나디온이 첨가된 TSA 플레이트에 도말하여, 48 시간 동안 37 ℃에서 배양한 후, 생성되는 콜로니(colony) 수를 관찰하였을 때 상기 세균이 완전히 사멸(99.9%)되는 최소농도를 최소살균억제농도로 설정하였다. 이에 대한 결과는 하기 표 2에 나타내었다.
조건 프레보텔라 인터메디아에 대한 MIC (㎍/㎖) 프레보텔라 인터메디아에 대한 MBC (㎍/㎖)
동양종꿀벌의 봉독 4.3 ± 0.3 23.5 ± 1.9
서양종꿀벌의 봉독 15.2 ± 0.6 85.4 ± 2.5
상기 표 2의 결과를 참고하면, 동양종꿀벌의 일벌에서 채집한 정제봉독이 치주염의 원인이 되는 프레보텔라 인터메디아에 대한 항균력이 우수한 것으로 확인된다.
또한, 동양종꿀벌의 일벌에서 채집한 정제봉독을 상기 MIC 농도의 2배(8.6㎍/㎖)로 프레보텔라 인터메디아에 처리하여 항균력 지속시간(PAE)도 확인하였는데, 하기의 표 3에 개시된 것처럼 8.6㎍/㎖의 낮은 농도에서도 약 4시간 가량 항균력이 유지되는 것을 확인할 수 있으며 서양종꿀벌보다 항균력 유지시간이 현저하게 긴 것을 알 수 있다.
조건 프레보텔라 인터메디아에 대한 PAE
동양종꿀벌의 봉독 3.9 ± 0.6 시간
서양종꿀벌의 봉독 1.2 ± 0.3 시간
<실시예 4. 정제봉독에 대한 히알루로니다아제 저해 활성 확인>
실시예 1에서 얻은 동양종꿀벌의 봉독 0.01~100 ㎍/㎖에서의 히알루로니다아제(hyaluronidase) 저해 활성을 hyaluronidase assay kit(amsbio)를 이용하여 측정하였고 이를 도 4에 나타내었다.
도 4를 참고하면, 동양종꿀벌의 봉독 함량이 0.1~5 ㎍/㎖ 일 경우에 히알루로니다아제 저해 활성이 매우 높은 것으로 확인되며, 봉독의 함량이 매우 낮거나 높아도 오히려 히알루로니다아제의 저해 활성이 낮아지는 것으로 나타난다. 한편 하기 표 4에서와 같이 0.1 ㎍/㎖에서의 히알루로니다아제 저해 활성을 동양종꿀벌의 봉독과 서양종꿀벌의 봉독에서 비교한 바, 역시 동양종꿀벌의 봉독이 갖는 히알루로니다아제 저해 활성이 더 우수한 것으로 확인된다.
조건 0.1 ㎍/㎖에서의 히알루로니다아제 저해 활성 (%)
동양종꿀벌의 봉독 61.4
서양종꿀벌의 봉독 15.2
<실시예 5. 정제봉독의 안정성 확인>
고형 생태에서의 봉독 성분은 매우 안정화 되어 있으나, 분말 또는 고체 형태의 정제봉독을 물 또는 생리식염수에 녹여 사용할 경우 유효성분의 변화없이 안정적으로 유지되어야 할 필요가 있다. 따라서, 수용액 상태의 봉독의 표준물질인 멜리틴의 농도가 시간별로 변화하는지 확인하였다.
실온에 보관된 동양종꿀벌의 봉독 수용액 50㎖(1 ㎎/㎖) 내 멜리틴의 농도를 확인한 결과, 상기 봉독 수용액 층의 '상층/중간층/하층' 내에서 시료를 채취하여 측정한 멜리틴의 농도는 24시간 동안 균등하게 유지되고 있는 것으로 확인된다(결과 그래프 미첨부). 따라서 1 ㎎/㎖의 봉독 수용액이 실온에서 안정적으로 보관됨을 알 수 있어, 약학적 조성물 또는 식품으로 사용되기에 봉독이 안정적인 약제임을 확인할 수 있다. 또한 추가적으로 정제봉독의 농도를 0.1에서 100 ㎎/㎖의 농도로 50 ㎖ 제조하여 동일한 방법으로 6시간 후 '상층/중간층/하층'에서의 멜리틴 함량 측정 결과를 확인한 바, 100 ㎎/㎖ 상태의 봉독은 오히려 그 상태가 가장 불안정하고, 0.1~10㎎/㎖의 봉독은 모두 안정적인 것으로 확인되며, 특히 1 ㎎/㎖에서 가장 안정한 것으로 나타난다. 따라서 봉독이 수용액 상으로 존재할 경우, 0.1~10 ㎎/㎖으로 제조하되 사용 직전에 적절하게 희석하여 사용하는 것이 바람직할 것이라 판단된다.
<제제예 1. 가글액제>
실시예 1의 동양종꿀벌의 정제봉독 100㎎, 염화나트륨 0.6g 및 아스코르브산 0.1g을 증류수에 용해시켜서 100㎖를 만들었다. 이 용액을 병에 넣고 20℃에서 30분간 가열멸균함으로써 물에 10배 이상 희석하여 사용할 수 있는 가글용 액체를 제조하였다.
<제제예 2. 치약 제조>
실시예 1의 동양종꿀벌의 정제봉독이 1 ㎎/㎖ 포함되도록 치약 조성물에 포함시켜 치주염 예방용 치약을 제조하였다.

Claims (10)

  1. 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독을 유효성분으로 포함하여 히알루로니다아제(hyaluronidase) 저해활성이 있는 것을 특징으로 하는 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)를 원인균으로 하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 봉독은 봉독 외의 이물질인 당류와 휘발성물질을 제거하여 얻은 정제봉독인 것을 특징으로 하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물.
  3. 삭제
  4. 제1항 또는 제2항의 조성물에 불소 화합물이 추가된 구강용 약학제제.
  5. 제1항 또는 제2항의 조성물을 함유하는 치약, 구강 청정제, 구강 세정제 및 구강 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 제형의 구강용 약학제제.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 제형 내의 봉독 농도는 0.1~10 ㎎/㎖인 것을 특징으로 하는 구강용 약학제제.
  7. 동양종꿀벌(Apis cerana L.) 일벌의 독낭에서 분리한 봉독을 유효성분으로 포함하여 히알루로니다아제(hyaluronidase) 저해활성이 있는 것을 특징으로 하는 프레보텔라 인터메디아(Prevotella intermedia)를 원인균으로 하는 치주염의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 봉독은 봉독 외의 이물질인 당류와 휘발성물질을 제거하여 얻은 정제봉독인 것을 특징으로 하는 치주염의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
  9. 삭제
  10. 제7항에 있어서,
    상기 건강기능식품은 각종 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 캔디류, 스넥류, 면류, 아이스크림, 유제품, 스프, 이온음료, 음료수, 알코올 음료, 껌, 차 및 비타민 복합제로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 치주염의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
KR1020160106299A 2016-08-22 2016-08-22 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물 KR101834758B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160106299A KR101834758B1 (ko) 2016-08-22 2016-08-22 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160106299A KR101834758B1 (ko) 2016-08-22 2016-08-22 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20180021569A KR20180021569A (ko) 2018-03-05
KR101834758B1 true KR101834758B1 (ko) 2018-03-09

Family

ID=61726981

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020160106299A KR101834758B1 (ko) 2016-08-22 2016-08-22 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101834758B1 (ko)

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
한상미 외 4인 저, "구강질환 원인균에 대한 정제봉독의 항균효과", 생약학회지, 47(1) 43-48 (2016.03.03)*

Also Published As

Publication number Publication date
KR20180021569A (ko) 2018-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101841181B1 (ko) 생약 추출물을 함유하는 치약 조성물
KR102041615B1 (ko) 원산지가 다른 프로폴리스 추출물을 혼합 사용하는 프로폴리스의 사용방법 및 프로폴리스를 유효성분으로 하는 건강기능식품용 조성물
KR20190133561A (ko) 유제놀 및 갈릭산을 유효성분으로 함유하는 항균 및 항진균 조성물
WO2005091937A2 (en) Compositions useful for the treatment of microbial infections
KR102217525B1 (ko) 치주염 예방 또는 치료용 유산균 및 그의 용도
KR20170141053A (ko) 치자나무 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물
KR102162661B1 (ko) 로즈힙을 활성성분으로 함유하는 치약 조성물
KR20170141034A (ko) 인삼 추출물을 포함하는 구강질환 예방 또는 치료용 조성물
KR20140031512A (ko) 오미자 추출물을 포함하는 구강질환 치료 및 구취 억제용 조성물
KR102158134B1 (ko) 오미자 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균용 조성물
KR101834758B1 (ko) 봉독을 유효성분으로 포함하는 치주염의 예방 또는 치료용 조성물
KR102594674B1 (ko) 생약 복합물을 함유하는 구강용 조성물
KR101634210B1 (ko) 캠페롤을 유효성분으로 함유하는 충치와 치주질환 예방 또는 치료용 조성물
KR101625412B1 (ko) 단풍잎돼지풀 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 충치와 치주질환 예방 또는 치료용 조성물
EP2349297B1 (en) Composition comprising aceriphyllum rossii extract and active compounds isolated from them for use in the treatment of bacterial infections
KR101561441B1 (ko) 도깨비가지 추출물을 유효성분으로 함유하는 치주질환 예방 또는 치료용 조성물
KR101574678B1 (ko) 가시상추 추출물을 유효성분으로 함유하는 치주질환 예방 또는 치료용 조성물
KR101548162B1 (ko) 황금 추출물, 황련 추출물 및 살리실산을 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 항균용 조성물
Al-Dabbagh et al. Comparison of antimicrobial activity of four herbal extracts against streptococcus mutans, isolated from dental diseases in vitro
KR102217518B1 (ko) 치주염 예방 또는 치료용 유산균 및 그의 용도
KR102340246B1 (ko) 광에 의해 활성화되는 클로렐라 추출물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물
KR101503503B1 (ko) 벌씀바귀 추출물 및 이로부터 분리한 활성물질을 포함하는 항균용 조성물
KR101627528B1 (ko) 미국자리공 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 충치와 치주질환 예방 또는 치료용 조성물
KR20190014873A (ko) 참가시나무 열매 및 바나바 잎의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항균용 조성물
KR20160059606A (ko) 아까시나무 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 충치와 치주질환 예방 또는 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant