KR101820104B1

KR101820104B1 - 신품종 아위느타리버섯

Info

Publication number: KR101820104B1
Application number: KR1020150089732A
Authority: KR
Inventors: 신평균; 유영복; 공원식; 오연이; 노형준
Original assignee: 대한민국
Priority date: 2015-06-24
Filing date: 2015-06-24
Publication date: 2018-01-19
Also published as: KR20170000603A

Abstract

본 발명은 신품종 아위느타리버섯에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 종래의 아위느타리버섯 균주들을 선발한 후, 선발된 균주와 다른 아위느타리버섯 균주를 교배 육종하여 얻어지는 에르고치오네인이 풍부한 신품종 아위느타리버섯에 관한 것이다. 본 발명에 따른 아위느타리 버섯 신품종에 따르면, 아위느타리 버섯을 교배 및 선발하여 시판하는 버섯 중 가장 많은 에르고치오네인 함량을 나타내고 재배시 수량성이 우수한 신품종을 제조하였고, 상기 에르고치오네인은 우수한 항산화효과를 나타내므로 상기 신품종 아위느타리 버섯을 이용하여 건강식품 및 화장료, 건강식품 등으로 제조하여 사용할 수 있을 것으로 기대된다.

Description

신품종 아위느타리버섯{new varieties of Pleurotus ferulae}

본 발명은 신품종 아위느타리버섯에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 종래의 아위느타리버섯 균주들을 선발한 후, 선발된 균주와 다른 아위느타리버섯 균주를 교배 육종하여 얻어지는 에르고치오네인이 풍부한 신품종 아위느타리버섯에 관한 것이다.

아위느타리버섯은 큰느타리버섯의 변종(Pleurotus eryngii var. ferulae) 또는 담자균류의 느타리버섯과(pleurototaceae) 느타리버섯속(pleurotus)의 독립된 종(Pleurotus ferulae)으로 분류 체계상 논란이 되고 있는 종으로서, 건조지대인 중국 신강지방의 아위나무에서 야생되기 때문에 아위느타리라고 불리게 되었다.

아위느타리버섯은 1958년부터 인도, 프랑스, 독일 등에서 인공재배에 대한 연구가 시작되었고, 1958년 Kalmer가 처음으로 인공재배에 성공하였으며, 1983년 중국에서 톱밥, 면실피, 밀기울을 섞어 인공재배에 성공하였으며 1990년에는 단포자 교잡으로 우수한 균주를 확보하여 복건성, 신강성, 등지에서 광범위하게 사용되고 있으며(이동희, 2005), 세계적으로 년간 1,000톤 정도로 소량 생산되고 있는 버섯이다(홍기형, 2004). 아위느타리버섯은 다른 버섯에 비하여 형태가 우수하고 향미가 풍부하여 식용가치가 높으면서, 항종양, 혈당강하 작용을 하는 것으로 알려져 있다(홍 등 2004). 또한 위와 신장 장애 및 기침을 멎게 하고 염증을 제거하여 산부인과 종류의 병을 방제하는 의약적 효능이 알려져 있으며(김대식, 2002), 이외에도 식이섬유, 아미노산 및 기타 비타민 등을 다량함유하고 있어 건강식품 및 기능성 약용버섯으로서의 가치가 높다.

한편, 에르고치오네인은 주로 버섯에서 생합성되는 물질로 세포노화를 억제하는 강력한 항산화 기능성을 나타낸다. 상기 에르고치오네인의 항산화 효과는 현재 건강식품 및 화장품 업계에서 항산화 원료로서 부각되고 있는 실정이며, 이에, 에르고치오네인의 함량이 풍부한 버섯 품종에 대한 개발이 요구되고 있는 실정이다.

이에, 본 발명자들은 시중의 다양한 종류의 버섯들에 비해 에르고치오네인 함량이 우수하고, 재배시 생산성이 우수한 아위느타리버섯 균주의 육종에 성공함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 에르고치오네인 함량이 우수하고, 재배시 생산성이 우수한 아위느타리버섯 신균주 및 그 균주의 재배를 통해 얻어지는 자실체를 제공하는 데 있다.

이를 위하여, 본 발명은 기탁번호 KCTC12799BP의 아위느타리버섯 신균주를 제공한다.

본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 상기 아위느타리버섯 신균주는 아위느타리버섯 균주 ASI 2803의 자실체에서 분리한 이핵균사;와 아위느타리버섯 균주 ASI 2778의 아위느타리버섯 균주 자실체에서 분리한 일핵균사;를 다이-모노(di-mono) 교배하여 얻어질 수 있다.

본 발명의 다른 태양은 상기의 균주로 형성된 아위느타리버섯 자실체를 제공한다.

본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 상기 자실체를 병 재배시 수확량이 140 g/병 이상일 수 있다.

본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 상기 자실체는 에르고치오네인 함량이 230 ~ 300 mg/100g 일 수 있다.

본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 상기 자실체의 갓은 직경이 약 33 ~ 40 mm이고, 두께가 28 ~ 35 mm이며, 상기 자실체의 대는 굵기가 약 33 ~ 40 mm이고, 길이가 약 80 ~ 90 mm 일 수 있다.

본 발명의 또 다른 태양은 상기의 아위느타리버섯 자실체로부터 얻어지는 것을 특징으로 하는 포자를 제공한다.

본 발명의 또 다른 태양은 상기의 포자간에 이루어지는 단포자 교배를 통해 얻어지는 것을 특징으로 하는 아위느타리버섯 균주를 제공한다.

본 발명의 또 다른 태양은 상기의 균주로 형성된 아위느타리버섯 자실체를 제공한다.

본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 상기 자실체는 에르고치오네인 함량이 233 ~ 278 mg/100g 일 수 있다.

본 발명에 따른 아위느타리 버섯 신품종에 따르면, 아위느타리 버섯을 교배 및 선발하여 시판하는 버섯 중 가장 많은 에르고치오네인 함량을 나타내고 재배시 수량성이 우수한 신품종을 제조하였고, 상기 에르고치오네인은 우수한 항산화효과를 나타내므로 상기 신품종 아위느타리 버섯을 이용하여 건강식품 및 화장료, 건강식품 등으로 제조하여 사용할 수 있을 것으로 기대된다.

도 1은 UPLC에 의한 Ergothioneine의 분석 결과 그래프이다.
도 2는 Q-TOF에 의한 Ergothioneine의 동정 결과 그래프이다.
도 3은 Q-TOF에 의한 GW10-41 계통 시료의 Ergothioneine의 동정 결과 그래프이다.
도 4는 에르고치오네인이 강화된 아위느타리 신균주 GW10-45를 나타낸다.
도 5는 본 발명에 따른 신균주 GW10-45의 ITS 염기서열에 의한 유연관계 분석 자료이다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

본 발명의 기술적 특징은 에르고치오네인 함량이 종래의 버섯에 비해 향상되고, 병재배시 수량성이 우수한 아위느타리버섯 신균주 및 그 균주의 재배를 통해 얻어지는 자실체에 있다.

이를 위하여, 본 발명은 아위느타리버섯 신균주를 제공한다.

이때, 상기 아위느타리버섯 신균주는 한국생명공학연구원 미생물자원센터에 기재된 아위느타리 균주인 ASI 2803의 자실체에서 분리한 이핵균사와 아위느타리버섯 균주 ASI 2778의 아위느타리버섯 균주 자실체에서 분리한 일핵균사를 다이-모노(di-mono) 교배하여 얻어질 수 있다. 이때, 상기 아위느타리 균주 ASI 2803 및 ASI 2778은 한국생명공학연구원 미생물자원센터에 등재된 버섯 균주로서, 국립원예특작과학원 버섯과에 수집보존중이며, 분양 가능한 아위느타리버섯 균주 중에서 우량 균주를 선발하여 사용하였다.

또한, 본 발명은 상기의 균주로부터 형성된 아위느타리버섯 자실체를 제공한다. 이때, 상기 자실체는 큰느타리 버섯을 병 재배조건을 통해 수확가능하며, 상기 자실체를 병 재배시 수확량이 140 g/병 이상일 수 있고, 바람직하게는 병 재배시 수확량이 140 g/병 ~ 160 g/병일 수 있다. 상기 큰느타리 버섯 병 재배조건은 다음과 같다. 톱밥 : 콘코브 : 소맥피 : 미강 : 옥수수분 : 비트펄프 : 대두피 : = 30 : 35 ~ 40 : 10 ~ 15 : 5 ~ 10 : 1 ~ 5 : 1 ~ 5 : 1 ~ 5(%)의 용적비로 혼합하여 제조한 배지를 함수율이 약 68 %가 되도록 조정하여 배지를 준비하고, 상기 배지를 입병한 후 멸균한다. 상기 배지에 1병당 15 ∼ 20cc 정도를 표준으로 종균을 접종한 후, 약 22℃에서 30 ∼ 35일간 배양한다. 상기와 같이 배양 완료한 후 균긁기 작업을 한 다음 발이 생육온도는 15 ~ 18℃으로 관리하고, 습도는 90 ∼ 95 %으로 5 ∼ 7일간 버섯을 물구나무서기 상태로 관리하고, 발이가 1 cm 정도의 어린 버섯의 원기로 형성되면 바로 물구나무서기 상태에서 정립상태로 되돌린 후 생육온도는 16℃에서 4 ∼ 7일간, 습도는 80 ~ 85%, 조도 100 ~ 200 lux, 이산화탄소 1,200 ∼ 1,500 ppm에서 후기생육을 관리하여 수확할 수 있다.

또한, 상기 자실체는 에르고치오네인 함량이 230 ~ 300 mg/100g 이고, 바람직하게는 230 ~ 280 mg/100g 이고, 더욱 바람직하게는 233 ~ 278 mg/100g 일 수 있다. 시판중인 종래의 버섯류의 에르고치오네인 함량은 하기 표 1과 같으며, 이때, 하기 표 1의 연구결과는 일본 시티팜(CityFarm) 연구소, 용매추출법에 의한 분석 결과를 나타낸다. 구체적으로, 표 1에 따르면 노랑느타리 버섯은 건조버섯 100g에 대하여 125.6 mg으로 가장 높은 에르고치오네인 함량을 나타내는 것을 알 수 있다. 그러나 본 발명에 따른 아위느타리버섯 자실체의 경우 233 ~ 278 mg/100g의 에르고치오네인 함량을 나타내어 종래의 버섯류 중 가장 우수한 에르고치오네인 함량을 나타내는 노랑느타리 버섯에 비해 약 2배의 에르고치오네인을 함유하고 있음을 알 수 있다.

단위 (mg/건조버섯 100g)	노랑느타리 버섯	느타리버섯	표고버섯	새송이버섯	양송이버섯	잎새버섯	느티만가닥 버섯	팽이버섯	꽃송이버섯	노루궁뎅이 버섯
함량	125.6	2.3	9.6	12.7	33.8	1.4	0.7	9.8	11.2	9.1

본 발명에 따른 아위느타리 버섯 신품종에 있어서, 상기 자실체의 갓은 직경이 약 33 ~ 40 mm이고, 두께가 28 ~ 35 mm이며, 상기 자실체의 대는 굵기가 약 33 ~ 40 mm이고, 길이가 약 80 ~ 90 mm 일 수 있고, 바람직하게는 상기 자실체의 갓은 직경이 약 35 ~ 40 mm이고, 두께가 30 ~ 35 mm이며, 상기 자실체의 대는 굵기가 약 35 ~ 40 mm이고, 길이가 약 85 ~ 90 mm일 수 있다.

또한, 본 발명은 상기의 균주로 형성된 아위느타리버섯 자실체를 제공할 수 있으며, 이때 상기 자실체는 에르고치오네인 함량이 230 ~ 300 mg/100g 일 수 있고, 바람직하게는 에르고치오네인 함량이 230 ~ 280 mg/100 g일 수 있고, 더욱 ㅂ바람직하게는 233 ~ 278 mg/100 g일 수 있다. 상기 표 1에 기재된 바와 같이 종래의 다른 버섯군들에 비해 에르고치오네인 함량이 현저히 향상되며, 구체적으로 상기 표 1에 개시된 에르고치오네인 함량이 가장 우수한 품종인 노랑느타리에 비해서 에르고치오네인 함량이 2배 이상이다. 즉, 본 발명에 따른 아위느타리버섯은 에르고치오네인 함량이 종래의 버섯에 비해 현저히 향상될 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 아위느타리 버섯 신균주는 느타리버섯속 아위느타리(Pleurotus eryngii var. ferulae)로서, 상기 신균주로부터 형성된 버섯 자실체는 하위 세대에서 지속적으로 에르고치오네인 함량이 향상된 자실체를 성장시킬 수 있다. 구체적으로, 본 발명에 따른 아위느타리버섯 신균주에 의해 형성된 자실체로부터 포자를 형성할 수 있으며, 상기 포자간에 이루어지는 단포자 교배를 통해 하위 세대의 아위느타리 버섯 균주를 얻는 경우, 이를 통해 성장시킨 아위느타리버섯 자실체는 에르고치오네인 함량이 230 ~ 300 mg/100g 일 수 있고, 바람직하게는 에르고치오네인 함량이 230 ~ 280 mg/100g , 더욱 바람직하게는 233 ~ 278 mg/100g일 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예들을 통해 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예들은 본원 발명을 예시하기 위하여 제시된 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예들에 의해 한정되는 것은 아니다.

[ 실시예 ]

실시예 1. 아위느타리버섯 신균주의 분리 및 신균주의 균학적 특성 조사

(1) 육종모본의 선발 및 특성평가

본 발명을 위해 농촌진흥청 버섯과에서 국내외 수집균주 34 균주를 가지고 수량 및 형태가 우수한 모본 6점을 선발하여 자실체 특성을 하기 표 2와 같이 조사하였다.

자실체 특성검정은 아위느타리가 큰느타리(새송이)의 변종이기 때문에 재배방법을 큰느타리버섯 일반적인 재배방법으로 하기와 같이 수행하였다. 배지재료는 톱밥 : 콘코브 : 소맥피 : 미강 : 옥수수분 : 비트펄프 : 대두피 : = 30 : 38 : 12 : 8 : 4 : 4 : 4(%)의 용적비로 혼합하여 배지 함수율이 약 68 %가 되도록 조정하였다. 배지의 충진량은 580 g씩 입병한 후 2 cm의 봉으로 가운데 위에 밑부분까지 타공하여 121℃에서 60분간 멸균하였다. 종균의 접종양은 1병당 15 ∼ 20cc 정도를 표준으로 접종하였다. 배양온도는 22℃에서 30 ∼ 35일간 종균이 밑둥까지 생장하도록 배양하였다. 배양 완료 후 균긁기 작업을 한 다음 발이 생육온도는 15 ~ 18℃으로 관리하고, 습도는 90 ∼ 95 %으로 5 ∼ 7일간 물구나무서기 상태로 관리하였다. 발이가 1 cm 정도의 어린 버섯의 원기로 형성되면 바로 물구나무서기 상태에서 정립상태로 되돌린 후 생육온도는 16℃에서 4 ∼ 7일간, 습도는 80 ~ 85%, 조도 100 ~ 200 lux, 이산화탄소 1,200 ∼ 1,500 ppm에서 후기생육을 관리하여 버섯 갓이 반반구형의 모양이 남아있는 상태에서 수확하였다. 수확한 자실체의 특성을 조사한 후 형태적으로 뛰어나고 수량성이 우수 균주인 ASI 2618, ASI 2778, ASI 2798, ASI 2800, ASI 2803 및 ASI 2850을 선발하였다. 이의 특성을 하기 표 2 및 표 3에 나타내었다.

균주번호	학명	국명	주요특성	수집년도	수집국	수집지역	비고
ASI 2618	*Pleurotus* *fuscus* var . *ferulae*	아위느타리	KCTC 26060, CBS 100.82	2001	한국	생명공학연구소 유전자은행
ASI 2778	*Pleurotus* *fuscus* var . *ferulae*	아위느타리	BFA05 (3.10 A2)	2002
ASI 2798	*Pleurotus* var. *ferulae*	아위느타리	CBS282 .32, KCTC26065	2004	한국	연암축산대학 생명공학연구소
ASI 2800	*Pleurotus* var. *fossulatus*	아위느타리	Taiwan 414	2004	대만	연암축산대학
ASI 2803	*Pleurotus* var. *ferulae*	아위느타리		2004	중국	연암축산대학	중국(땅속 발생)
ASI 2850	*Pleurotus* var. *ferulae*	아위느타리	915	2006	한국	연암대 교배균	김규현

균주 번호	초발이소요일수(일)	수확량 (유효) (g/병)	유효 경수	갓(mm)			대(mm)		개체중 (g/개)	갓색깔
균주 번호	초발이소요일수(일)	수확량 (유효) (g/병)	유효 경수	가로	세로	두께	굵기	길이	개체중 (g/개)	갓색깔
ASI 2618	13±0	62±9	1±0	63.0±4.2	74.0±1.4	11.0±1.4	56.5±2.1	64.0±2.8	61.0	회갈색
ASI 2778	10±4	138±30	2±1	54.4±13.1	43.5±12.4	11.3±3.0	23.5±6.3	104.4±30.4	69.0	황갈색
ASI 2798	14±1	63±12	1±0	78.5±2.1	64.5±6.4	11.5±0.7	31.5±2.1	66.0±1.4	63.0	황갈색
ASI 2800	14±1	55±10	1±0	76.3±14.6	66.0±1.0	12.7±1.2	29.7±3.8	57.3±2.5	55.0	황갈색
ASI 2803	13±0	174±26	3±1	57.0±16.2	53.5±18.1	14.8±3.2	20.0±5.0	84.3±21.4	58.0	회갈색
ASI 2850	10±4	91±66	2±1	45.3±13.5	35.3±7.2	10.3±2.9	19.8±5.3	101.2±18.4	45.5	황백색

(2) 교배 및 교잡주 선발

아위느타리버섯 균주 ASI 2803의 자실체에서 분리한 이핵균사와 아위느타리버섯 균주 ASI 2778의 아위느타리버섯 균주 자실체에서 분리한 일핵균사를 PDA 배지에서 7 일동안 배양하였고, 이를 PDA배지에 대치 접종하여 다이-모노(di-mono) 교배를 수행하였다. 이를 5일 동안 배양한 후 일핵균사쪽 균사를 떼어내어 클램프를 현미경으로 관찰하여 교배된 15개의 교잡주를 선발하였고, GW10-40 ~ 54으로 명명하였다.

(3) 우량 계통 선발

상기 교잡주 중에서 신품종 심사를 위한 작물별 특성조사요령[(느타리 버섯), http://www.seed.go.kr, 2006]을 기준으로 우량계통을 선발하였고, 그중 9종의 특성을 하기 표 4에 나타내었다.

계통명	전체 개체수(개)	유효경수(개)	수량 (g/병)	갓(mm)		대(mm)
계통명	전체 개체수(개)	유효경수(개)	수량 (g/병)	직경	길이	길이	굵기
GW10-41	2.0±1.4	1.0±0.0	78.8±1.8	37.5±3.5	26.0±5.7	72.5±3.5	36.0±5.7
GW10-44	4.5±2.1	2.0±1.4	105.0±1.4	37.5±3.5	22.5±2.9	80.0±8.2	27.3±3.4
GW10-45	4.0±0.0	1.0±0.0	79.5±9.2	47.5±3.5	28.5±4.9	75.0±7.1	37.5±7.8
GW10-47	3.0±1.5	1.4±0.5	76.3±18.2	37.8±7.3	27.9±5.8	65.7±9.0	30.9±6.2
GW10-48	3.2±1.9	1.8±0.8	82.8±11.4	41.8±9.9	26.7±2.6	59.7±10.4	29.7±8.8
GW10-50	1.0±0.0	1.0±0.0	70.5±17.7	43.5±2.1	30.5±7.8	83.0±11.3	36.5±2.1
GW10-66	3.5±2.1	1.8±1.0	86.5±21.2	46.4±8.9	38.1±7.5	62.0±10.3	31.3±5.4
GW10-67	3.5±2.1	1.5±0.7	79.0±21.2	39.7±1.5	24.0±3.6	64.0±3.6	31.7±3.6
GW10-95	1.5±0.7	1.5±0.7	90.5±20.5	50.3±4.2	28.7±2.9	61.0±6.0	41.7±1.8
ASI 2778	2.3±1.2	1.3±0.6	83.0±12.1	46.0±9.9	33.8±7.5	76.3±4.8	27.3±10.0
ASI 2803	2.5±0.7	2.5±0.7	90.0±14.1	40.8±6.6	22.0±2.7	65.8±13.7	27.2±1.8

(4) 생산력 검정

9종의 우량 계통에서 7 종의 발생개체를 선발하여 발생개체수, 수확량 및 크기를 조사하였고, 그 결과를 하기 표 5에 나타내었다.

계통	발생개체수 (개)	수확량 (g/병)	갓(mm)		대(mm)
계통	발생개체수 (개)	수확량 (g/병)	직경	두께	굵기	길이
GW10-41	9.3±2.7	128.4±20.7	40.7±6.9	29.5±7.2	35.2±5.4	85.6±11.1
GW10-45	7.7±1.6	144.6±19.0	36.6±6.2	31.6±5.4	35.2±3.9	85.4±10.3
GW10-50	15.4±5.5	91.4±30.8	29.2±31.4	22.9±4.2	28.3±3.8	78.3±8.8
GW10-68 (비산1호)	10.2±2.1	152.3±24.4	39.8±4.2	37.8±4.4	34.7±4.8	97.5±6.3
GW10-95 (비산2호)	15.4±5.9	195.9±16.4	55.1±10.6	43.0±5.7	41.2±7.1	85.9±5.7
2850	10.3±3.9	209.4±15.6	74.8±8.5	41.0±7.4	46.2±5.7	83.0±6.8
2798	19.5±4.7	48.2±19.4	58.3±20.6	22.9±8.3	26.3±3.4	62.9±7.5

실험예 1. 에르고치오네인(ergothioneine)의 분리

에르고치오네인 표준품(Sigma Co.) 및 건조된 아위느타리 버섯(GW10-41)을 이용하여 100 mg에 50% 에탄올 10 ml을 가해 상온에서 24 시간 동안 추출하였고, 이를 2000 rpm으로 10 분간 원심분리 후 상등액을 0.22 ㎛ 시린지 필터로 여과하여 액체크로마토그래피 (Acquity UPLC, liquid chromatography)를 수행하였다. 그 결과를 하기 도 1 에 나타내었다.

도 1에 따르면, 에르고치오네인 표준품과 GW10-41의 피크가 하나임을 알 수 있다.

실험예 2. Q- TOF 에 의한 에르고치오네인(ergothioneine)의 동정

에르고치오네인 표준품 및 아위느타리 버섯 GW10-41 등 9종의 시료를 Q-TOF 분석을 통해 에르고치오네인의 동정을 수행하였다. 구체적으로 에르고치오네인 표준품 및 아위느타리 버섯 GW10-41 등 9종의 시료를 각각 Q-TOF(Xeno G2-S)를 이용하여 분석을 수행하였고, 그 결과를 하기 도 2에 나타내었다. 이때, 도 3은 에르고치오네인의 Q-TOF 결과 그래프이고, 도 4는 아위느타리 버섯 GW10-41-1 시료의 Q-TOF 결과 그래프이다.

도 2에 따르면, 에르고치오네인 성분이 아위느타리 버섯 GW10-41 시료에서 피크를 형성하는 것을 확인할 수 있었다. 이를 통해, 아위느타리 버섯에 에르고치오네인 성분이 함유되어 있는 것을 알 수 있었다.

실험예 3. 아위느타리 육성계통에 대한 에르고치오네인(ergothioneine)의 분석

상기 실시예 1에서 선발된 9의 우량계통 아위느타리 버섯 중 4종의 시료를 건조한 후 100 g에 대하여 상기 실험예 1과 동일한 방법으로 추출하였고, 에르고치오네인의 함량을 측정하였다. 그 결과를 표 6 및 도 3에 나타내었다. 이때, 표 6 은 동일한 실험을 각각 3반복 3번 수행한 결과이다.

계통명	시료량 (mg)	희석배수	측정농도		농도범위 (mg/100g)
계통명	시료량 (mg)	희석배수	(ng/ml)	(mg/100g)	농도범위 (mg/100g)
GW10-41	100±0.4	5	4997±345.8	250±16.6	232 ~ 274
GW10-45	100±0.4	5	5127±341.6	255±17.7	233 ~ 278
GW10-50	100±0.1	5	4500±265.6	224±14.1	199 ~ 238
GW10-95 (비산 1호)	100±0.3	5	3367±223.9	167±11.6	141 ~ 176

상기 표 6 및 도 3에 따르면, 아위느티리 버섯의 에르고치오네인 함량이 약 141 ~ 278 mg/100g 인 것을 확인할 수 있고, 그중에서도 GW10-45의 시료가 각각 233 ~ 278 mg/100g으로 우수한 에르고치오네인 함량을 가지는 것을 확인할 수 있었다.

실험예 4. 아위느타리버섯 에르고치오네인 강화 교잡주 선발 및 유전적 검정

(1) 에르고치오네인 함량이 강화된 아위느타리 신품종 선발

상기 실시예 1에서 선발된 15종의 우량계통 아위느타리 버섯 중 9종의 시료에서 최우량 계통의 시료를 선발하기 위하여, 병 재배시 수량과 에르고치오네인 함량을 정리하여 표 7에 나타내었다.

계통명	수량(g/병)	에르고치오네인(mg/100g)
GW10-41	128	232 ~ 274
GW10-45	145	233 ~ 278
GW10-50	91	199 ~ 238
GW10-95	196	141 ~ 176

상기 표 7에 따르면, GW10-45의 시료가 수량성 및 에르고치오네인 함량이 모두 우수한 것을 확인할 수 있어, GW10-45의 아위느타리 버섯이 최우량계통인 것을 알 수 있다. 따라서 하기 도 4와 같이 수량도 우수하면서 에르고치오네인이 강화된 아위느타리 신품종 GW10-45를 한국생명공학연구원 미생물자원센터에 기탁(기탁번호: KCTC12799BP) 하였다.

(2) 신규 교잡주 GW10-45 및 GW10-45 계통의 아위느타리버섯 균주의 유전적 검정

상기 실시예에서 얻어진 균주의 유전적 특성을 조사하기 위해 분자생물학적으로 동정하였다. 상세하게 기술하면 신균주 배양체로부터 MagExtractor Kit(Toyobo)를 사용하여 DNA를 추출하여 ITS 프라이머로 내부 전사부위를 증폭하여 정제한 후 ㈜마크로젠에 시퀀싱을 의뢰하여 염기서열을 표 8과 같이 결정하였다.

GW10-45의 염기서열

CGGAAGGATCATTAATGAATTCACTATGGAGTTGTTGCTGGCCTCTAGGGGCATGTGCACGCTTCACTAGTCTTTCAACCCACTTGTGAACTTTTGATAGATCTGTGAAGTCGTCTCTCAAGTCGTTAGACTTGGTTTGCTGGGATGTAAACGTCTCGGTGTGACTACGCAGTCTATTTACTTATAACACCCCAAATGTATGTCTACGAATGTCATTTAAAGGGCCTTGTGCCTATAAACCATAATACAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGCTCTCGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACCTTGCGCCCCTTGGTATTCCGAGGGGCATGCCTGTTTGAGTGTCATTAAATTCTCAAACTCACTCTGGTTTTTCCAATTGTGATGTTTGGATTGTTGGGGGCTGCTGGCCTTGACAGGTCGGCTCCTCTTAAATGCATTAGCAGGACTTCTCATTGCCTCTGCGCATGATGTGATAATTATCACTCATCAATAGCACGCATGAATAGAGTCTGGCTCTCTAACCGTCCGCAAGGACAATTTGACAATTTGACCTCAAATCAGGTAGGACTACCCGCTGAACTTAAGC

상기 표 8과 같이 염기서열이 결정된 유전자 부분을 NCBI BLAST 서치를 통해 염기서열의 유사성을 분석하였으며, ClustalW2를 이용하여 염기서열을 정리한 후 Primer3 프로그램을 활용하여 염기서열 유사성을 동정한 결과 도 5와 같이 느타리버섯속 아위느타리(Pleurotus eryngii var. ferulae) 버섯으로 동정되었다.

[수탁번호]

기탁기관명: 한국생명공학연구원 미생물자원센터

기탁번호: KCTC12799BP

기탁일자: 2015.04.24.

Claims

에르고치오네인이 강화된 기탁번호 KCTC12799BP의 아위느타리버섯 신균주.
제 1 항에 있어서,
상기 아위느타리버섯 신균주는 아위느타리버섯 균주 ASI 2803의 자실체에서 분리한 이핵균사;와
아위느타리버섯 균주 ASI 2778의 아위느타리버섯 균주 자실체에서 분리한 일핵균사;를 다이-모노(di-mono) 교배한 것을 특징으로 하는 아위느타리버섯 신균주.
제 1 항의 균주로부터 형성되고 에르고치오네인이 강화된 아위느타리버섯 자실체.
제 3 항에 있어서,
상기 자실체를 병 재배시 수확량이 140 g/병 이상인 것을 특징으로 하는 아위느타리버섯 자실체.
제 3 항에 있어서,
상기 자실체는 에르고치오네인(ergothioneine) 함량이 230 ~ 300 mg/100g 인 것을 특징으로 하는 아위느타리버섯 자실체.
제 3 항에 있어서,
상기 자실체의 갓은 큰느타리(새송이) 재배환경 조건에서 병 재배시 직경이 33 ~ 40 mm이고, 두께가 28 ~ 35 mm이며, 상기 자실체의 대는 굵기가 33 ~ 40 mm이고, 길이가 80 ~ 90 mm 인 것을 특징으로 하는 아위느타리버섯 자실체.
제 3 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항의 아위느타리버섯 자실체로부터 유래하는 것을 특징으로 하는 포자.
제 7 항의 포자간에 이루어지는 단포자 교배를 통해 얻어지는 것을 특징으로 하는 에르고치오네인이 강화된 아위느타리버섯 균주.
제 8 항의 균주로 형성되고 에르고치오네인이 강화된 아위느타리버섯 자실체.
제 9 항에 있어서,
상기 자실체는 에르고치오네인 함량이 230 ~ 300 mg/100g 인 것을 특징으로 하는 아위느타리버섯 자실체.