KR101779085B1 - 무산상자속 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항알러지용 조성물 - Google Patents
무산상자속 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항알러지용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 명세서에는 무산상자속(Sphallerocarpus spp .) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항알러지용 조성물이 개시된다. 일 측면에서, 상기 무산상자속 식물은 무산상자(Sphalerocarpus gracilis)일 수 있으며, 본 명세서는 부작용이 없고 안정성이 높은 무산상자속 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항알러지용 약학 조성물, 화장료 조성물 및 식품 조성물을 제공하는 효과가 있다.
Description
본 명세서에는 무산상자속 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항알러지용 조성물이 개시된다.
현대사회는 점점 복잡해지고 산업과 문명의 발달로 인해 자연환경오염의 증가, 식생활의 변화, 스트레스의 가중 등으로 인해 알러지성 질환이 매년 증가하고 있다. 최근, 대한 소아알레르기 호흡기학회에서 '어린이 청소년 알레르기 질환 국제역학조사(ISAAC)' 설문지를 이용하여 조사한 바에 따르면, 아토피성 피부질환은 1995년에는 초등학생의 16.3%, 중학생의 7.3%로 나타난 반면, 2000년에는 각각 24.9%와 12.8%로 증가하였음을 알 수 있다.
비만세포 및 혈중 호염구는 여러 가지 알러지(allergy) 질환 즉, 아토피 피부염, 알러지 비염, 천식, 음식 알러지 및 아나필락틱 쇼크 등을 유발하는 주요한 체내 세포로 알려져 있다. 이들 세포는 세포 표면에 알러지를 유발하는 항체인 IgE에 대한 수용체(FcεRI)를 가지고 있고, 이러한 수용체는 알러지를 유발하는 물질(항원, allergen)에 의해 자극을 받아 자신이 가지고 있는 히스타민(histamine), 프로스타글란딘(prostaglandin), 루코트리엔(Leukotriene) 등 다양한 알러지를 유발, 심화시키는 물질들을 세포 바깥으로 분비한다(Kim K. et al., Eur. J. Pharmacol., 581:191-203, 2008).
알러지성 질환으로 잘 알려진 아토피 피부염에 대한 연구들에서, 케모카인(chemokine)들에 의한 아토피 피부염의 발생이 또한 보고되었다. 이들 케모카인은 싸이토카인(cytokine)과 마찬가지로 세포에서 발현되는 단백질이나, 그 작용은 약간 다른 것으로 알려져 있다. 즉, 상기 케모카인들은 주로 특정 부위로 특정한 세포들을 불러 모으는 역할을 한다. 어떤 세포가 특정 케모카인을 발현하게 되면 그 케모카인에 반응하는 종류의 세포들이 상기 케모카인이 발현된 세포 쪽으로 이동하게 되어, 일종의 집합 신호 역할을 한다고 알려져 있다. 특히, 다양한 종류의 백혈구의 이동과 활성화를 조절하는 싸이토카인의 일종으로, 조직으로의 염증세포의 침윤을 조절한다. 구체적으로 알려진 케모카인들로서는 CCL22/MDC 및 CCL17/TARC(T-세포의 회복 및 촉발 ; 인터루킨 4, 인터루킨 5, 인터루킨 13 및 TNF-α의 T-세포 생성), TSLP(TARC 및 MDC의 증가된 생성의 결과를 가져오는 수지상 세포의 활성화), CCL27/CTACK(림프구의 회복 및 이동) 및 RANTES(호산구 및 T-세포 이동/활성화 ; 내피세포 표면에의 호산구 부착의 증가) 등이 있다.
현재 알러지를 치료하는 다양한 방법들이 존재하지만, 대부분 그 원인을 근본적으로 없애기보다는 증상을 완화시키는 것에 불과하다. 대표적으로 알러지의 치료를 위해서, 알러젠에 의해 비만세포 등에서 분비된 히스타민이나 류코트리엔 등의 수용체에 대한 길항체를 그 성분으로 하는 약들이 사용되고 있다. 그러나, 이러한 약물은 환자에게 투여하면, 단기간 내에 내성을 나타내기 때문에 일정기간 이상 또는 반복하여 투여시 환자의 증상을 최초 복용시처럼 호전시킬 수 없다는 문제점이 있다.
일 측면에서, 본 명세서는 부작용이 없고 안정성이 높은 천연물 유래의 무산상자속 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항알러지용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물은 무산상자(Sphalerocarpus gracilis)일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물의 추출물은 무산상자속 식물의 뿌리 추출물일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물의 추출물은 물 및 탄소수 1 내지 6의 알코올로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 추출용매로 추출한 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물의 추출물은 에탄올 추출물일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물의 추출물은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 내지 80 중량%로 포함되는 것일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 알러지 질환은 부종(edema), 과민증(anaphylaxis), 알러지성 비염(allergic rhinitis), 알러지성 천식(allergic asthma), 고초열(hay fever), 퀸케부종(Quincke's edema), 알러지성 결막염(allergic conjunctivitis), 알러지성 각막염(allergic keratitis), 알러지성 피부염(allergic dermatitis), 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 접촉성 피부염(contact dermatitis), 두드러기(hives), 소양증(pruritus), 곤충 알러지, 식품 알러지 및 약품 알러지로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상 이상일 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 조성물은 a) 비만세포의 탈과립; b) 히스타민의 생성; c) 프로스타글란딘의 생성; d) TARC(Thymus and activation-regulated chemokine/CCL17)의 생성; 및 e) MDC(Macrophage-derived chemokine/CCL22)의 생성으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 억제하는 것일 수 있다.
일 측면에서, 본 명세서는 부작용이 없고 안정성이 높은 무산상자속 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 항알러지용 조성물을 제공하는 효과가 있다.
도 1은 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물이 비만세포의 과립 내 존재하는 알러지 유발물질의 분비를 억제함을 확인한 결과이다.
도 2는 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물이 비만세포에서 히스타민 생성을 억제함을 확인한 결과이다.
도 3은 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물이 비만세포에서 프로스타글란딘 생성을 억제함을 확인한 결과이다.
도 4는 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물이 인체 각질형성세포에서 TARC 생성을 억제함을 확인한 결과이다.
도 5는 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물이 인체 각질형성세포에서 MDC 생성을 억제함을 확인한 결과이다.
도 2는 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물이 비만세포에서 히스타민 생성을 억제함을 확인한 결과이다.
도 3은 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물이 비만세포에서 프로스타글란딘 생성을 억제함을 확인한 결과이다.
도 4는 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물이 인체 각질형성세포에서 TARC 생성을 억제함을 확인한 결과이다.
도 5는 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물이 인체 각질형성세포에서 MDC 생성을 억제함을 확인한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
일 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
다른 측면에서, 본 명세서에 개시된 기술은 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 명세서에서 "유효성분"은 단독으로 목적으로 하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체 등과 함께 목적으로 하는 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
본 명세서에서 "알러지 질환"은 생물체가 어떤 외래성 물질(allergen)과 접하게 되면 항원항체반응에 의해 보이게 되는 생체 내 반응 변화에 따라 나타나는 신체의 변화를 총칭하는 최광의의 개념이다. 본 명세서에서 상기 외래성 물질의 종류에는 제한이 없으며, 구체적으로 꽃가루, 약물, 식물성 섬유, 세균, 음식물, 염색약 또는 화학물질 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 명세서에서는 상기 외래성 물질로 인해 변화를 보이는 신체의 특정 부위는 제한하지 않는다. 또한, 본 명세서에서 "알러지 질환"은 내인성 요인, 예컨대 호르몬 변화, 스트레스, 정서장애, 피로, 수면부족 등으로 인한 생체 내 반응 변화에 따라 나타나는 신체의 변화도 포함하는 것을 의미한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 알러지 질환은 부종(edema), 과민증(anaphylaxis), 알러지성 비염(allergic rhinitis), 알러지성 천식(allergic asthma), 고초열(hay fever), 퀸케부종(Quincke's edema), 알러지성 결막염(allergic conjunctivitis), 알러지성 각막염(allergic keratitis), 알러지성 피부염(allergic dermatitis), 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 접촉성 피부염(contact dermatitis), 두드러기(hives), 소양증(pruritus), 곤충 알러지, 식품 알러지 및 약품 알러지로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며 외래성 요인 또는 내인성 요인에 의해 생체가 보이는 변화를 모두 포함한다.
무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물은 쌍떡잎식물 산형화목 미나리과에 속하는 식물로서, 예시적인 일 구현예에서, 본 명세서에 따른 무산상자속 식물은 무산상자(Sphalerocarpus gracilis)일 수 있다.
무산상자(Sphalerocarpus gracilis, 무산사상자, 복물생치라고도 불리움)는 한국, 아무르, 만주, 중국, 동몽골 및 동부 시베리아 등지에 분포하는 두해살이풀로서, 예전부터 줄기, 잎 등을 생으로 먹거나 달여서 먹었을 만큼 생물체에 무해하다. 잎은 어긋나고 3회 깃꼴로 잘게 갈라진다. 갈래 조각은 선형이고 가장자리가 밋밋하며 털이 없다. 잎자루는 밋밋하고 밑부분이 잎집으로 되어 있다. 꽃은 8월에 피고 백색이며 총포(總苞)는 없고 소총포는 5개이다. 소산경(小揀梗)은 5∼10개이며 작은 꽃가지와 더불어 길이가 일정하지 않다. 열매는 분과(分果)이며 좌우로 편평하고 8개의 능선이 있으며 능선 사이에 지선(脂腺)이 3개씩 있다.
상기 무산상자속 식물은 추출물의 생성을 위해 그의 지상부 또는 지하부의 일부 또는 전부를 포함하는 식물의 전 범위에 걸쳐 제한이 없이 사용 가능하며, 무산상자속 식물의 뿌리를 사용할 경우 효과가 우수하다. 아울러, 상기 무산상자속 식물은 재배한 것 또는 시판되는 것 등의 제한이 없이 사용 가능하다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물의 추출물은 조추출물뿐만 아니라 추출물의 가공물, 예를 들어 건조, 농축, 분획, 발효 등 추가적인 가공에 의한 모든 형태를 포함하는 것을 의미한다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물의 추출물은 무산상자속 식물 그 자체 또는 이를 분말화하거나 추출공정을 통해 수득한 추출물일 수 있다. 상기 추출공정은 당해 기술분야에서 이용되는 통상의 방법에 따라 실시될 수 있다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물의 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 무수 또는 함수 알코올(예컨대, 메탄올, 에탄올, 프로판올 또는 부탄올), 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 글리세린, 아세톤, 에틸아세테이트, 클로로포름, 메틸렌클로라이드, 부틸아세테이트, 디에틸에테르, 디클로로메탄, 헥산 및 이들의 혼합물을 포함하는 군에서 선택되는 추출용매, 구체적으로 물, 메탄올 및 에탄올을 포함하는 군에서 선택되는 추출용매로 추출한 추출물일 수 있다. 추출용매의 경우 상기 나열된 추출용매에 한정하는 것은 아니며, 추출용매의 구체적인 사용량은 추출될 각 시료의 5 내지 100 중량배이다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물의 추출물은 초임계 추출, 아임계 추출, 고온 추출, 고압 추출, 초음파 추출, 미생물을 이용한 발효나 자연발효대사 또는 XAD 및 HP-20을 포함하는 흡착 수지를 이용한 방법 등 당업계의 통상적인 추출방법에 따라 제조될 수 있다. 구체적으로, 가온하며 환류 추출 또는 상온에서 추출할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 아울러, 추출횟수는 1 내지 5회일 수 있으나, 구체적으로 3회 반복하여 추출할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다. 추출시간은 2 내지 24시간일 수 있고, 구체적으로 2 내지 12시간, 또는 3 내지 10시간, 또는 3 내지 5시간일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
예시적인 일 구현예에서, 상기 무산상자속 식물의 추출물은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 내지 80 중량%로 포함되는 것일 수 있다. 무산상자속 식물의 추출물이 조성물 내 상기 범위로 포함됨으로써, 다른 함유 물질들과의 적절한 조성비를 갖고 우수한 항알러지 효과를 나타내며, 경제성 및 효율성 면에서도 바람직할 수 있다. 구체적으로 상기 무산상자속 식물의 추출물은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.005 내지 78 중량%, 또는 0.01 내지 76 중량%, 또는 0.05 내지 74 중량%, 또는 0.1 내지 72 중량%, 또는 0.5 내지 70 중량%, 또는 1.0 내지 68 중량%, 또는 1.0 내지 66 중량%, 또는 1.0 내지 64 중량%, 또는 1.0 내지 62 중량%, 또는 1.0 내지 60 중량%, 또는 1.0 내지 50 중량%, 또는 1.0 내지 40 중량%, 또는 1.0 내지 30 중량%, 또는 1.0 내지 20 중량%, 또는 1.0 내지 10 중량%로 포함되는 것일 수 있다.
본 명세서에 따른 조성물은 히스타민 생성을 억제할 수 있다. 상기 조성물은 히스타민 자체의 생성을 억제 또는 저해시킬 수 있거나 또는 본 명세서의 조성물에 의해 미미하게 생성된 히스타민의 활성을 억제 또는 저해시킬 수 있다. 다른 측면에서, 상기 조성물은 히스타민을 생성시키는 전단계(up-stream)의 효소 또는 단백질의 활성을 억제 또는 저해시킬 수 있다.
또한, 본 명세서에 따른 조성물은 프로스타글란딘의 생성을 억제할 수 있다. 상기 조성물은 프로스타글란딘 자체의 생성을 억제 또는 저해시킬 수 있거나 또는 본 명세서의 조성물에 의해 미미하게 생성된 프로스타글란딘의 활성을 억제 또는 저해시킬 수 있다. 다른 측면에서, 상기 조성물은 프로스타글란딘을 생성시키는 전단계(up-stream)의 효소 또는 단백질의 활성을 억제 또는 저해시킬 수 있다.
한편, TARC(Thymus and activation-regulated chemokine/CCL17)는 백혈구 유주(이동)에 관여하는 케모카인의 일종이다. MDC(Macrophage-derived chemokine/CCL22)는 대식세포 유주(이동)에 관여하는 케모카인의 일종이다. 아토피성 피부염은, TARC 및 MDC의 수용체 CCR4를 발현하는 Th2세포에 대해 유주(이동) 활성을 갖고 있는데, 피부의 표피각화세포에서 그리고 말초혈의 단핵구에서 TARC 및 MDC의 생성이 항진하고, 과잉으로 생성된 TARC 및 MDC가 CCR4를 발현하는 Th2세포를 피부로 이동시켜, 병태를 악화시킨다고 여겨지고 있다. 아토피성 피부염 환자의 혈청 내 TARC 및 MDC 수치는, 다른 피부질환 환자와 비교하여 유의하게 높은 값을 나타내고 아토피성 피부염의 중증도에 따라 증가한다. 따라서, TARC 및 MDC는 아토피성 피부염의 병태를 객관적으로 평가할 수 있는 주요 지표가 될 수 있다.
본 명세서에 따른 조성물은 TARC 및 MDC의 생성을 억제할 수 있다. 상기 조성물은 TARC 및 MDC 자체의 생성을 억제 또는 저해시킬 수 있거나 또는 본 명세서의 조성물에 의해 미미하게 생성된 TARC 및 MDC의 활성을 억제 또는 저해시킬 수 있다. 다른 측면에서, 상기 조성물은 TARC 및 MDC를 생성시키는 전단계(up-stream)의 효소 또는 단백질의 활성을 억제 또는 저해시킬 수 있다.
기존 알러지 질환의 개선, 완화 또는 치료를 위한 조성물은 이미 생성되어 분비된 알러지 유발 물질의 수용체에 대한 길항체를 그 성분으로 하여 알러지 원인을 근본적으로 해결할 수 없지만, 본 명세서에 따른 조성물은 알러지 원인이 되는 알러지 유발 물질의 생성 자체를 억제할 수 있어 알러지 질환의 예방 등을 위한 근본적인 해결책이 될 수 있다.
이에 따라, 본 명세서에 따른 항알러지용 조성물은 알러지 질환, 예컨대 천식, 아토피성 피부염, 비염 등의 예방, 개선 또는 치료에 우수한 효능을 갖는 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다. 또한, 알러지 질환에 화합물 성분의 약제를 사용하는 경우 내성이 쉽게 생기는 반면, 본 명세서에 따른 항알러지용 조성물은 천연물 유래의 추출물을 포함하여 장기간 복용시에도 내성이 없다.
본 명세서에서 약학 조성물은 피부 외용제 조성물을 포함하는 것일 수 있다. 약학 조성물의 제형은 용액제, 현탁제, 유액제, 겔제, 점적제, 좌제(坐劑), 크림제, 연고제, 패취제, 패드제 또는 분무제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 제형은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 용이하게 제조될 수 있으며, 부형제, 수화제, 유화 촉진제, 현탁제, 삼투압 조절을 위한 염 또는 완충제, 착색제, 향신료, 안정화제, 방부제, 보존제 또는 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.
또한, 약학 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여할 수 있으며, 약학 조성물의 유효성분은 투여받을 대상의 연령, 성별, 체중, 병리 상태 및 그 심각도, 투여 경로 또는 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 적용량 결정은 당업자의 수준 내에 있으며, 이의 1일 투여 용량은 예를 들어 0.1 mg/g/일 내지 100 mg/g/일, 보다 구체적으로는 5 mg/g/일 내지 50 mg/g/일이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 명세서에서 화장료 조성물은 제형이 특별히 한정되지 않으며, 목적하는 바에 따라 적절하게 선택할 수 있다. 예를 들어, 용액, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 유상에 수상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 고체, 겔, 분말, 페이스트, 포말(foam) 또는 에어로졸 조성물의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 화장료 조성물은 상기한 물질 이외에 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서, 바람직하게는 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분들을 더 포함할 수 있다. 또한 상기 화장료 조성물은 보습제, 에몰리언트제, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, pH 조정제, 유기 및 무기 안료, 향료, 냉감제 또는 제한제를 더 포함할 수 있다. 상기 성분의 배합량은 본 명세서의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 당업자가 용이하게 선정하여 사용할 수 있으며, 그 배합량은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.01 내지 5 중량%, 또는 0.01 내지 3 중량%일 수 있다.
본 명세서에서 식품 조성물은 다양한 형태의 식품 첨가제 또는 기능성 식품을 제공한다. 구체적으로, 상기 조성물을 포함하는 침출차, 액상차, 음료, 발효유, 치즈, 요구르트, 주스, 생균제제 또는 건강보조식품 등으로 가공될 수 있으며, 그 외 다양한 식품 첨가제의 형태로 사용될 수 있다.
또한, 식품 조성물은 유효성분이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화 방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제 및 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 그 외에도, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조성분을 더 포함할 수 있다. 상기 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 그 첨가량은 본 명세서의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 선택될 수 있다. 예를 들어, 상기 성분들의 첨가량은 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.01 내지 5 중량%, 또는 0.01 내지 3 중량% 범위일 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. 무산상자속 식물의 추출물 제조
본 실시예에서는 무산상자속 식물로 무산상자(Sphalerocarpus gracilis)를 2014년 몽골에서 재배한 것을 입수하여 사용하였으며, 이들을 세척하고 건조하여 사용하였다. 무산상자의 뿌리를 분쇄하여 추출용기에 넣고 적당량의 에탄올을 넣었다. 이들을 상온에서 3일 동안 방치한 후, 거름종이로 여과하여 무산상자속 식물의 추출물을 얻었다. 구체적으로, 무산상자 1 kg에 1 L 에탄올을 추가한 후 추출 및 농축하여 무산상자속 식물의 추출물 72 g을 얻었다. 이렇게 얻어진 무산상자속 식물의 추출물을 DMSO(Dimethyl sulfoxide)에 녹인 후, 하기 실험예에서 이용하였다.
실험예 1. 비만세포의 과립 내 존재하는 알러지 유발물질의 분비 억제
무산상자속 식물의 추출물이 비만세포의 과립 내 존재하는 알러지 유발물질의 분비를 억제하는지 여부를 아래와 같이 확인하였다(Jeong. H. J. et al., Cytokine, 18:252-9, 2002).
래트의 호염기성(Rat basophilic leukocyte, RBL-2H3, American Type Culture Collection, USA) 비만세포를 항생제와 10% 우혈청이 존재하는 최소배지에서 배양하였다. 배양 후 상기 세포를 트립신으로 수거한 후, 24-공 평판배양기(24-well microtiter plate)에 2×105 세포/공(well)이 되도록 넣고, 80% 자랄 때까지 배양하였다. 이렇게 배양한 세포를 PIPES 완충액(25 mM PIPES, pH 7.2, 159 mM NaCl, 5 mM KCl, 0.4 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 5.6 mM glucose, 및 0.1% BSA)으로 치환시킨 후, 상기 <실시예 1>에 의해 얻어진 무산상자속 식물의 추출물을 10, 20, 40 μg/ml 각각의 농도로 첨가하고 1시간 동안 배양시켰다. 1 시간 후, DNP-BSA를 최종농도 200 μg/ml로 첨가하고 30 분간 자극을 유도하였다. 알러지 유도물질의 분비 정도는 배지 중에 분비된 탈과립의 표식자인 베타 헥소스아미니데이즈(β-hexosaminidase)의 활성을 측정하여 결정하였으며, 베타 헥소스아미니데이즈(β-hexosaminidase)의 활성은 p-니트로페닐-아세틸-β-D-글루코사미나이드(p-nitrophenyl-acetyl-β-D-glucosaminide)로부터 유리된 p-니트로페닐(p-nitrophenol)의 양으로 결정하였다(Funaba M. et al., Cell Biol. Int., 27:879-85, 2003).
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 무산상자속 식물의 추출물은 비만세포 탈과립의 표식자인 베타 헥소스아미니데이즈(β-hexosaminidase)의 분비량을 억제하였으며, 이는 무산상자속 식물 추출물의 농도가 증가함에 따라 억제 효능 또한 증가하는 것으로 나타났다. 이에 따라, 무산상자속 식물의 추출물은 비만세포의 과립 내 존재하는 알러지 유발물질의 분비를 억제하는 효과가 우수함을 확인할 수 있었다.
실험예 2. 히스타민 생성 억제
무산상자속 식물의 추출물이 히스타민의 생성을 억제하는지 여부를 아래와 같이 확인하였다.
2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어 있는 24-공 평판배양기(24-well microtiter plate)에 RBL-2H3 비만세포를 2×105 세포/공(well)이 되도록 넣고, 80%로 자랄 때까지 배양시켰다. 그 후, 상기 <실시예 1>로부터 얻어진 무산상자속 식물의 추출물 10, 20, 40 μg/ml의 농도 각각을 무혈청 DMEM 배지에 첨가하고, 비만세포를 24시간 동안 배양시켰다. 비만세포에 DNP-BSA를 30 분간 처리한 다음 세포배양액을 채취하여 원심분리하고 상등액만 수확하였다. 상등액 중의 히스타민의 양은 EIA 키트(Bertin Pharma, France)를 이용하여 확인하였다.
그 결과, 도 2에 나타난 바와 같이, 무산상자속 식물의 추출물은 히스타민의 분비량을 억제하였으며, 우수한 히스타민 생성 억제 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
실험예 3. 프로스타글란딘 생성 억제
무산상자속 식물의 추출물이 프로스타글란딘의 생성을 억제하는지 여부를 아래와 같이 확인하였다.
2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어 있는 24-공 평판배양기(24-well microtiter plate)에 RBL-2H3 비만세포를 2×105 세포/공(well)이 되도록 넣고, 80% 자랄 때까지 배양시켰다. 그 후, 상기 <실시예 1>로부터 얻어진 무산상자속 식물의 추출물 10, 20, 40 μg/ml의 농도 각각을 무혈청 DMEM 배지에 첨가하고, 비만세포를 24시간 동안 배양시켰다. 비만세포에 DNP-BSA를 30 분간 처리한 다음 세포배양액을 채취하여 원심분리하고 상등액만 수확하였다. 상등액 중의 프로스타글란딘 PGE2의 양은 ELISA 키트(R&D Systems, MN, USA)를 이용하여 확인하였다.
그 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, 무산상자속 식물의 추출물은 프로스타글란딘의 분비량을 현저하게 억제하였으며, 우수한 프로스타글란딘 생성 억제 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
실험예 4. TARC 생성 억제
무산상자속 식물의 추출물이 TARC의 생성을 억제하는지 여부를 아래와 같이 확인하였다.
2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어 있는 24-공 평판배양기(24-well microtiter plate)에 HaCaT 인체 각질형성세포를 2×105 세포/공(well)이 되도록 넣고, 90% 자랄 때까지 배양시켰다. 그 후, 상기 <실시예 1>로부터 얻어진 무산상자속 식물의 추출물 5, 10, 20 μg/ml의 농도 각각을 TNF-α 및 IFN-γ 10 ng/ml와 함께 무혈청 DMEM 배지에 첨가하고, 인체 각질형성세포를 24시간 동안 배양시켰다. 24시간 경과 후, 세포배양액을 채취하여 원심분리하고 상등액만 수확하였다. 상등액 중의 TARC의 양은 ELISA 키트(abcam, UK)를 이용하여 확인하였다.
그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이, 무산상자속 식물의 추출물은 TARC의 생성을 억제하는 효과가 매우 우수함을 확인할 수 있었다.
실험예 5. MDC 생성 억제
무산상자속 식물의 추출물이 MDC의 생성을 억제하는지 여부를 아래와 같이 확인하였다.
2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어 있는 24-공 평판배양기(24-well microtiter plate)에 HaCaT 인체 각질형성세포를 2×105 세포/공(well)이 되도록 넣고, 90% 자랄 때까지 배양시켰다. 그 후, 상기 <실시예 1>로부터 얻어진 무산상자속 식물의 추출물 5, 10, 20 μg/ml의 농도 각각을 TNF-α 및 IFN-γ 10 ng/ml와 함께 무혈청 DMEM 배지에 첨가하고, 인체 각질형성세포를 24시간 동안 배양시켰다. 24시간 경과 후, 세포배양액을 채취하여 원심분리하고 상등액만 수확하였다. 상등액 중의 MDC의 양은 ELISA 키트(abcam, UK)를 이용하여 확인하였다.
그 결과, 도 4에 나타난 바와 같이, 무산상자속 식물의 추출물은 농도 의존적으로 MDC의 분비량을 억제하여으며, 우수한 MDC 생성 억제 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
본 발명의 일 측면에 따른 조성물의 제제예 및 제형예를 아래에서 설명하나, 다른 여러 가지 제제 및 제형으로도 응용 가능하며, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
[제제예 1] 연질캅셀제
무산상자 추출물 150 mg, 팜유 2 mg, 팜경화유 8 mg, 황납 4 mg 및 레시틴 6 mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 1 캡슐당 400 mg씩 충진하여 연질캅셀을 제조하였다.
[제제예 2] 정제
무산상자 추출물 150 mg, 포도당 100 mg, 홍삼추출물 50 mg, 전분 96 mg 및 마그네슘 스테아레이트 4 mg을 혼합하고 30% 에탄올을 40 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하고 타정기를 이용하여 정제로 타정하였다.
[제제예 3] 과립제
무산상자 추출물 150 mg, 포도당 100 mg, 홍삼추출물 50 mg 및 전분 600 mg을 혼합하고 30% 에탄올을 100 mg 첨가하여 과립을 형성한 후, 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 다음 포에 충진하였다. 내용물의 최종 중량은 1 g으로 하였다.
[제제예 4] 드링크제
무산상자 추출물 150 mg, 포도당 10 g, 홍삼추출물 50 mg, 구연산 2 g 및 정제수 187.8 g을 혼합하고 병에 충진하였다. 내용물의 최종 용량은 200 ml로 하였다.
[제제예 5] 건강 식품의 제조
무산상자 추출물 ................ 1000 ㎎
비타민 혼합물
비타민 A 아세테이트.............70 ㎍
비타민 E ..................... 1.0 ㎎
비타민 B1..................... 0.13 ㎎
비타민 B2 .................... 0.15 ㎎
비타민 B6...................... 0.5 ㎎
비타민 B12..................... 0.2 ㎍
비타민 C....................... 10 ㎎
비오틴......................... 10 ㎍
니코틴산아미드................. 1.7 ㎎
엽산............................ 50 ㎍
판토텐산 칼슘................... 0.5 ㎎
무기질 혼합물
황산제1철........................ 1.75 ㎎
산화아연......................... 0.82 ㎎
탄산마그네슘..................... 25.3 ㎎
제1인산칼륨...................... 15 ㎎
제2인산칼슘...................... 55 ㎎
구연산칼륨....................... 90 ㎎
탄산칼슘......................... 100 ㎎
염화마그네슘..................... 24.8 ㎎
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
[제제예 6] 건강 음료의 제조
무산상자 추출물............... 1000 ㎎
구연산...................... 1000 ㎎
올리고당...................... 100 g
매실농축액..................... 2 g
타우린......................... 1 g
정제수를 가하여 전체.......... 900 ㎖
통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 건강음료 조성물 제조에 사용할 수 있다.
상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비율을 임의로 변형 실시하여도 무방하다. 본 발명이 속한 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 내용을 바탕으로 본 발명의 범주 내에서 다양한 응용 및 변형을 행하는 것이 가능할 것이다.
[제형예 1] 유연화장수(스킨로션)
표 1.
[제형예 2] 유연화장수(밀크로션)
표 2.
[제형예 3] 영양크림
표 3.
[제형예 4] 마사지크림
표 4.
[제형예 5] 팩
표 5.
[제형예 6] 연고
표 6.
이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.
Claims (10)
- 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
- 무산상자속(Sphallerocarpus spp.) 식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
- 제 3항에 있어서,
상기 무산상자속 식물은 무산상자(Sphalerocarpus gracilis)인, 식품 조성물.
- 제 3항에 있어서,
상기 무산상자속 식물의 추출물은 무산상자속 식물의 뿌리 추출물인, 식품 조성물.
- 제 3항에 있어서,
상기 무산상자속 식물의 추출물은 물 및 탄소수 1 내지 6의 알코올로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 추출용매로 추출한 것인, 식품 조성물.
- 제 3항에 있어서,
상기 무산상자속 식물의 추출물은 에탄올 추출물인, 식품 조성물.
- 제 3항에 있어서,
상기 무산상자속 식물의 추출물은 조성물 전체 중량을 기준으로 0.001 내지 80 중량%로 포함되는, 식품 조성물.
- 제 3항에 있어서,
상기 알러지 질환은 부종(edema), 과민증(anaphylaxis), 알러지성 비염(allergic rhinitis), 알러지성 천식(allergic asthma), 고초열(hay fever), 퀸케부종(Quincke's edema), 알러지성 결막염(allergic conjunctivitis), 알러지성 각막염(allergic keratitis), 알러지성 피부염(allergic dermatitis), 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 접촉성 피부염(contact dermatitis), 두드러기(hives), 소양증(pruritus), 곤충 알러지, 식품 알러지 및 약품 알러지로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상 이상인, 식품 조성물.
- 제 3항에 있어서,
상기 조성물은 하기 a) 내지 e)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 억제하는, 식품 조성물.
a) 비만세포의 탈과립;
b) 히스타민의 생성;
c) 프로스타글란딘의 생성;
d) TARC(Thymus and activation-regulated chemokine/CCL17)의 생성; 및
e) MDC(Macrophage-derived chemokine/CCL22)의 생성.
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