KR101713304B1 - 프로폴리스, 마카, 당귀 추출 혼합물의 발효물을 제조하는 방법 및 그 조성물 - Google Patents

프로폴리스, 마카, 당귀 추출 혼합물의 발효물을 제조하는 방법 및 그 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 프로폴리스, 마카, 참당귀를 액체 이산화탄소를 용매로 하여 초임계 추출한 추출물과 그 추출물박에 에탄올을 가하여 냉각 침지시킨 후 결정화된 당을 분리하여 건조한 분말과 에탄올 추출물을 여과한 후 농축하고 건조한 분말을 혼합한 후 발효공정을 통하여 제조하는 방법과 면역력 증진, 항산화 효과, 항염작용, 항균작용이 우수한 건강식품 및 화장품 조성물을 제공한다.

Description

프로폴리스, 마카, 당귀 추출 혼합물의 발효물을 제조하는 방법 및 그 조성물{Production method and its composition for fermentation of propolis, Lepidium melenii Walpers and Angelica gigas N.}
본 발명은 프로폴리스, 마카, 참당귀 조성물을 함유하는 면역력 증진, 항산화 효과, 항균작용, 항염작용이 우수한 건강식품, 의약품 및 화장품 소재의 제조방법 및 그 조성물에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 지질 성분을 함유하고 있는 프로폴리스원궤 분말과 마카젤라틴분말, 참당귀건조분말의 혼합물의 초임계 지질추출물과 추출물박을 친수성 용매인 에탄올을 이용하여 제조한 당결정물과 에탄올 추출하여 얻어진 추출물을 혼합한 후 발효공정을 통하여 제조하는 제조방법 및 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 사용되는 물질인 프로폴리스, 마카, 참당귀는 천연물 중에서도 매우 다양한 약리활성을 가지고 있어 식품을 비롯한 많은 분야에 이용되고 있는 원료로서 모두 많은 양의 지질물질을 함유하는 것을 특징으로 하고 있다. 지금까지는 이러한 지질성분 때문에 의약품, 건강식품 및 화장품 소재로서 활용이 제한적이었으며, 많은 생산공정에 따른 비용과 시간이 소요되고, 복잡한 제조과정으로 인하여 상당량의 유효성분이 소실되는 단점을 가지고 있다.
특히 유기용매를 이용한 추출법은 유효성분의 추출에는 매우 효과적이나 추출 시 추출용매의 사용량이 많고, 추출 후 용매를 제거하는 과정에서 지질성분의 점성 때문으로 인하여 분말화가 어려웠으며, 또한 어렵게 추출한 지질추출물을 혼합하기 위하여 각기 다른 공정을 사용해야 하는 번거로운 절차를 가지고 있다. 이를 해결하는 방법으로 많은 부형제 사용하여 왔으며, 이로 인한 유효성분 순도를 낮추는 결과를 야기하고 있다. 그리고 이를 수용성화 시킬 경우 수용성분이 지극히 적고, 물에 불용성인 레진성분들이 불용성 상태로 침출되기 때문에 발효를 진행시키는데 많은 문제점을 야기하며, 또한 발효의 2차 산물의 수득률이 현저히 저하되는 결과를 야기한다. 이러한 제약을 회피하기 위하여 많은 연구자들이 수용성 분말의 개발을 시도하고 있으며, 현재까지 특이할 만한 결과는 보고되지 않고 있는 실정이다. 프로폴리스의 경우 일부에서 수용성화 시킨 프로폴리스 추출물을 제조한 결과를 보고하고 있으나, 제조에 있어 방사능을 조사하는 방법을 이용하는 경우가 있었으나 조사된 방사선으로 인하여 식품으로 이용이 불가능하며, 프로폴리스 원궤를 알콜 주정에 용해시켜 덱스트린이나 결정셀룰로오스를 혼합하여 분말화 하고, 당을 혼합하여 발효하는 방법이 제시되고 있으나 덱스트린의 경우 물에 대한 용해가 쉬워 부형제로서의 기능이 매우 떨어져 분말화된 형태의 성상을 얻기가 어려우며, 균을 접종하여 발효하기 위하여 물에 분산시킬 수가 없다. 이에 제시되는 부형제로는 MCC(Micro Crystalline Cellulose)라는 결정셀룰로오스를 사용하여 분말화 하는 방법이 소개되고 있으나, 이와 같은 부형제 사용으로 인하여 조성물의 유효성분을 심각하게 낮추는 결과를 야기하여, 효율적으로 식품, 의약품 및 화장품의 소재로 활용되지 못하는 천연물 소재의 단점을 더욱 부각시키는 결과를 초래하게 된다. 또한 프로폴리스의 1차 추출물을 냉각 분쇄한 후 발효공정을 통하여 수용성 프로폴리스로 제조하여 이용하는 방법도 제시되고 있다. 그러나 냉각하여 분쇄한 후 발효를 위하여 물에 분산할 경우 프로폴리스가 가지고 있는 60% 이상의 수지성분으로 인하여 쉽게 분산시키기 어렵고, 발효기 내부에 눌러 붙는 현상을 없앨 수 없으며, 수분과 접촉시에 응고되는 현상을 막을 수 없다. 또한 응고되어 떨어지거나 발효기 내부에 눌러 붙는 수지성분이 상당히 많으며, 이때 프로폴리스가 가지고 있는 플라보노이드 성분이 같이 소실되는 결과를 야기한다. 프로폴리스의 품질을 결정하는 기준은 플라보노이드 함량이며, 많은 양이 수지성분과 함께 분포하고 있어 이 부분에 대한 소실은 최종 제품의 품질저하와 직결되는 문제점을 가지고 있다.
또한 마카젤라틴분말의 경우 에탄올 농도 655%(v/v)의 발효주정을 가하여 추출하여 건조하고, 여기에 에탄올 농도 95%(v/v)의 발효주정을 가하고 수분흡수제를 가하여 에탄올 농도를 99%(v/v) 이상이 되게 한 후 정치하여 침전되는 불용성 물질을 제거하고 추출물을 얻는 방법이 제시되고 있으나 매우 번거로우며, 99%(v/v)이상의 고순도 에탄올을 사용하고 유지하여야 함으로 용이하지 않으며 생산단가가 매우 높다는 단점을 가지고 있다.
또한 참당귀건조분말의 경우 에탄올 농도 90%(v/v)의 발효주정과 가성소다(수산화나트륨)를 가하여 추출한 후 여액을 따라 내고, 다시 에탄올 농도 90%(v/v)이상의 발효주정을 가하여 추출 농축한 후 부형제를 사용하여 건조하는 방법 등이 제시되고 있으나 이 또한 90%(v/v)이상의 고순도 에탄올을 사용해야 하므로 용이하지 않으며 부형제의 사용으로 유효성분의 함량을 낮추는 결과를 야기하며, 생산단가가 매우 높다는 단점을 가지고 있다.
대한민국 특허 제 10-0748846호 프로폴리스 발효물의 제조방법. 대한민국 특허 제 10-0749233호 참당귀 추출물의 제조방법 및 그 조성물 대한민국 특허 제 10-0814133호 마카마이드 고함유 마카추출물 제조방법 대한민국 특허 제 10-1167009호 방사능 해독 소요시간의 단축이 가능한 식품 제조방법
해당사항 없음
본 발명은 다양한 기능성을 가지고 있는 천연물 소재 중에서 다량의 지질물질을 함유하고 있어 고도의 생산기술과 장비, 그리고 많은 비용과 시간이 소요되는 단점을 가지고 있는 프로폴리스, 마카, 참당귀를 매우 용이하게 추출, 분리, 혼합하여 발효가 용이한 프로폴리스, 마카, 참당귀 혼합추출물 분말을 제조하고, 이 혼합추출물 분말을 발효하는 제조방법을 제공하는 것과 면역력 증진, 항산화 효과, 항염작용, 항균작용이 우수한 건강식품, 의약품 및 화장품 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명은 프로폴리스 원궤(1차 추출 등의 가공을 하지 않은 상태의 원궤), 마카젤라틴분말, 참당귀건조분말을 각각 1~5 중량비로 혼합한 후 분쇄하고, 식품용 액체이산화탄소를 사용하여 초임계 추출하여 얻어진 수분함량 1~10%의 지질추출물을 얻고, 초임계 추출하고 남은 추출물박을 에탄올 농도 70~95%(v/v)의 발효주정으로 추출한 후 냉각하고, 정치시켜 당을 결정화 시킨 후 이를 에탄올 추출물과 분리하여 세척한 후 건조하여 분말을 얻고, 에탄올 추출물은 여과한 후 감압농축하고 건조하여 분말을 얻고, 지질추출물, 당결정분말, 에탄올추출분말을 혼합하여 물에 분산시킨 후 균을 접종하여 발효물 제조하는 제조방법과 이를 유효성분으로 하는 면역력 증진, 항산화 효과, 항염작용, 항균작용이 우수한 건강식품, 의약품 및 화장품 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명은 프로폴리스, 마카, 참당귀 추출물에 관한 것으로 본 발명의 방법을 이용하여 지질추출물 얻을 경우 각 원료의 지질성분 및 특성에 따라 각각의 다른 복잡한 공정으로 인한 비용, 시간, 그리고 많은 인력 투입을 개선할 수 있으며,
원료 각각을 분말화 하기 위한 부형제 사용으로 인하여 추출물의 유효성분비를 심각하게 낮추는 결과를 야기한다. 또한 본 발명에서는 동시에 추출물박을 사용하여 발효에 필요한 당을 분리함으로써 덱스트린 등 불필요한 발효매개물을 사용하지 않으며, 원료가 가지고 있는 지질성분이 제거된 초임계 추출물박에서 분리한 고유의 당성분을 이용함으로써 고기능성 발효대사산물을 얻을 수 있고, 식품으로 사용이 가능한 수용성 유기용매인 발효주정 추출물까지 얻을 수 있어 원재료가 가지고 있는 고기능성 유효성분을 모두 활용할 수 있는 장점을 가지게 되며, 식품, 의약품 또는 화장품으로서 대중의 건강증진에 기여하며, 제품화되어 기업의 이윤을 창출할 수 있다
도면 1. 본 발명의 제조공정도.
본 발명에 따른 생약조성물에 있어 프로폴리스의 주요성분은 플라보노이드로서, 채집하는 나무의 종류에 따라 노란색에서 연두색을 띄고 있으며, 계피산 및 쿠마르산을 함유하고 있어 독특한 향기가 나며, 50% 이상의 수지성분을 함유하고 있어 매우 점성질의 흡성성이 강한 특성을 가지고 있다. 프로폴리스에는 예로부터 뛰어난 기능성 성분이 함유되어 있는 것으로 알려져 있으며, 민간에서는 각종 질병의 치료에 이용되어 왔다. 프로폴리스는 벌이 벌집을 외부로부터 보호하기 위하여 벌집의 틈새 등을 막고 튼튼하게 하는데 사용되는 물질로 나무에서 수집한 수지와 밀랍 및 각종 효소를 함유한 벌의 타액 분비물로 강한 내병균성, 내바이러스성 및 내충성을 가지고 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명에 따른 생약조성물에 있어 마카는 십자화과(Brassicaceae)의 두해살이풀 또는 한해살이풀(Lepidium)로 배축을 뿌리채소로 먹는다. 크림색의 마카는 단맛이 있고 크기도 적당하여 페루에서 널리 재배되고 있으며, 볼리비아와 페루의 안데스가 원산지이다. 베타-시토스테롤, 사포닌, 스티그마스테롤, 타닌, 알카로이드, 베타-엑디손 등이 함유되어 있으며, 강력한 항산화 기능과 자양강장, 피로회복 등의 효능을 가지고 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명에 따른 생약조성물에 있어 참당귀(Angelica gigas N.)는 산형과의 두해살이풀 또는 세해살이풀로서, 높이는 1~2미터 자라고, 8~9월에 자줏빛 꽃이 복산형 화서로 피고 날개가 붙은 타원형의 열매가 열리는 것을 특징으로 한다. 뿌리에 휘발성 정유가 함유되어 있는데, 주성분은 부틸리덴 프탈라이드이며, 지방유, 비타민류 물질이 함유되어 있고, 유효물질로는 디컬신, 디커시놀이 있으며, 항암, 치매, 진통, 혈액순환, 항균, 혈소판응고방지 등 다양한 방면에 사용되고 있다.
본 발명은 고체 상태의 프로폴리스 원궤(1차 추출 등의 가공을 하지 않은 상태의 원궤), 마카젤라틴분말, 참당귀건조분말을 각각 1~5 중량비로 혼합한 후 이를 식품용 액체이산화탄소를 사용하여 압력 100~500bar, 온도 30~60℃, 1~5시간 초임계 추출하여 얻어진 수분함량 1~10%의 지질추출물("추출물 A"라고 함)을 얻는다. 더욱 바람직하게는 300bar 초임계 추출압력에서 지질추출물의 수율이 가장 높았으며, 이는 추출 압력의 증가에 따른 조지방 함량이 감소되는 것은 지질성분이 아닌 다른 성분에 대한 용해도가 증가되면서 지질성분의 용해도에 대한 상대적 농도가 감소되기 때문이다. 또한 40℃의 낮은 온도에서 조지방의 함량이 가장 높게 나타났는데 초임계 이산화탄소를 이용한 추출공정에서 온도의 증가는 밀도의 감소를 가져와 용해도의 감소를 유발하기 때문이다.
초임계 추출하고 남은 추출물박을 에탄올 농도 70~95%(v/v)의 발효주정으로 50~75℃에서 1~5시간 추출한 후 상온에서 서서히 식힌 후 10~30℃에서 10~24시간 정치시킨 후 결정화 된 당성분과 추출액을 분리한 후 결정화된 당을 물로 세척한 다음 50~80℃에서 감압 건조한 후 분쇄하여 분말(추출물 B라고 함)을 얻는다. 더욱 바람직하게는 추출물박을 에탄올 농도 90%(w/v)의 발효주정으로 70℃에서 5시간 추출하는데 추출물이 함유하고 있는 당성분을 분리하기 위해서는 에탄올추출공정 직후 15~20℃의 상온에서 서서히 냉각시켜 줌으로서 당결정 작용에 도움을 줄 수 있으며, 에탄올 농도 95% 이상의 고순도 발효주정을 사용할 경우에 비하여 에탄올 농도 90%의 발효주정을 사용할 경우 결정 속도가 크게 다르지 않으며, 에탄올 농도 95%를 유지하기 위해서는 많은 양의 고순도 발효주정이 필요하여 경제성을 확보하기가 어렵다. 또한 에탄올 농도 70%(w/v)이하의 저농도 발효주정의 경우 수분함량으로 인하여 다량의 당성분이 다른 불순물과 함께 에탄올 용액으로 용출되기 때문에 바람직하지 않다.
추출물박에서 분리된 에탄올 추출액을 40~70℃에서 감압 농축한 후 건조하여 분쇄한 후 분말(추출물 C라고 함)을 얻는다.
추출물 A, 추출물 B, 추출물 C를 1:0.5~0.7:0.1~0.3의 중량비로 혼합하여 추출물혼합분말(이하 "HMP-3"라고 함)을 얻는다.
"HMP-3"을 물에 5~50%(w/v)의 비로 분산시킨 다음 70℃에서 3시간 동안 방치하여 살균한 후 여기에 발효를 위한 균으로 식품용으로 가능한 효모, 박테리아, 곰팡이 등을 적당량 첨가하고, 온도와 습도를 유지하면서 배양물에 분산균을 접종하여 발효물 제조하고 이를 40~80℃에서 감압농축하여 건조하고, 분쇄한 후 100mesh로 선별하는 제조방법에 의하여 본 발명의 조성물을 얻게 된다. 더욱 상세하게는 "HMP-3" 100g을 500ml의 물에 첨가하고, 1단계 발효를 위해 Saccharomyces속에 포함된 효모를 이용하여 36℃에서 3시간 교반 후 5시간 무교반 상태로 반복하여 2일간 발효공정을 진행한 후 2단계 1차로 제조된 효모발효 배양물에 Bacillus속 균주를 접종시킨 후 36℃에서 3시간 교반 후 5시간 무교반 상태로 반복하여 2일간 배양한 후 동결건조하여 92g의 "HMP-3" 발효분말을 얻었다.
상기의 추출물 A와 추출물 B, 추출물 C를 각각 1:0.5~0.7:0.1~0.3의 중량비로 혼합하여 발효함으로서 본 발명의 면역력 증진, 항산화 효과, 항염작용, 항균작용이 우수한 건강식품 및 화장품 조성물을 제공하게 된다.
"추출물 A"의 제조
프로폴리스 원궤 100g, 마카젤라틴분말 100g, 참당귀건조분말 200g을 식품용 액체 이산화탄소를 이용하여 추출압력 300bar, 추출온도 40℃에서 3시간 초임계추출하여 수분함량 3%(w/w)의 지질성분을 추출하여 150g의 지질추출물을 얻었다. 이것이 "추출물 A"가 된다.
"추출물 B"의 제조
초임계 추출하고 남은 추출물박 240g을 에탄올 농도 90%(v/v)의 발효주정 1,200ml로 5시간 추출한 후 상온에서 서서히 식힌 후 20℃에서 24시간 정치시킨 후 결정화된 당성분과 추출액을 분리한 후 결정화된 당을 물로 세척한 다음 80℃에서 감압 건조한 후 분쇄하여 100g의 분말을 얻는다. 이것이 "추출물 B"가 된다.
"추출물 C"의 제조
상기 실시예 2의 추출물박에서 추출한 에탄올 추출액 1,100ml를 55℃에서 감압 농축한 후 건조하고 분쇄하여 50g의 분말을 얻는다. 이것이 "추출물 C"가 된다.
추출물 혼합분말 "HMP-3"의 제조
추출물 A, 추출물 B, 추출물 C를 1:0.5~0.7:0.1~0.3의 중량비로 혼합하여 분말을 얻는다. 이것이 추출물혼합분말(이하 "HMP-3"라고 함)가 된다.
추출물 A, B, C의 중량비로 혼합한 조성표
시료명 "가" "나" "다" "라" "마" "바" "사"
추출물A 1 1 1 1 1 1 0
추출물B 0 0.5 0.7 0.5 0.7 0.7 0.7
추출물C 0.3 0.1 0.1 0.3 0.3 0 0.3
항산화 효과의 비교 1
잔틴옥시다아제에 의하여 생성된 라디칼의 소거활성을 NBT(Nitro-Blue Tetrazolium) 환원법으로 측정하였다.
0.4mM Xanthine과 0.2mM NBT 함유 0.1M potassium phosphate buffer(pH 7.5) 1ml과 0.1M potassium phosphate buffer(pH 7.5) 0.6ml에 시료 0.1ml을 혼합한 후 xanthine oxidase(0.07U/ml) 1ml을 가하여 섭씨 3도에서 20분간 반응시켰다. 1M HC1 1ml을 첨가하고 반응을 완료한 다음 520nm에서 흡광도를 측정하는 방법으로 항산화 효과를 계산하였다.
항산화 효과(%) = ((Control - Sample) / (Control - Blank)) * 100
Control : 시료대신 0.24mM NBT를 첨가한 경우의 흡광도
Sample : 시료를 첨가한 경우의 흡광도
Blank : 물을 첨가한 경우의 흡광도
상기의 식에서 Sample의 흡광도가 낮을 수록 항산화 효과는 크게 나타남을 알 수 있다.
실시예 4의 조성물에 대한 항산화 효과를 다음의 표에 보였다.
실시예 4의 조성물에 대한 항산화 효과
시료명 "가" "나" "다" "라" "마" "바" "사"
항산화도(%) 88.1 76.3 76.2 87.7 87.5 70.5 46
"HMP-3"의 발효물 제조
상기 실시예 4의 "HMP-3" 조성물 중 "가", "라", "마"를 각각 100g을 500ml의 물에 첨가하고, 1단계 발효를 위해 Saccharomyces속의 Caccharomyces cerevisiae를 이용하여 36℃에서 3시간 교반 후 5시간 무교반 상태로 반복하여 2일간 발효공정을 진행한 후 2단계 1차로 제조된 효모발효 배양물에 고초균인 Bacillus subtilis균주를 접종시킨 후 36℃에서 3시간 교반 후 5시간 무교반 상태로 반복하여 2일간 배양한 후 동결건조하여 아래 표 3과 같은 "HMP-3" 발효분말을 얻었다.
"HMP-3" 조성물 발효 후 수득량
"가" 발효물 "라" 발효물 "마" 발효물
수득량 79 93 99
항산화도 비교 2
실시예 6의 "가" 발효물, "라" 발효물, "마" 발효물에 대한 항산화 효과를 실시예 5의 잔틴옥시다아제에 의하여 생성된 라디칼의 소거활성을 NBT(Nitro-Blue Tetrazolium) 환원법으로 측정하였다.
"HMP-3" 조성물 발효 후 항산화도
"가" 발효물 "라" 발효물 "마" 발효물
항산화도(%) 85 92.1 98.9
발효 후 항산화도 상승하는 것을 확인할 수 있었다.
항균효과의 비교
상기 실시예 6의 "가" 발효물, "라" 발효물, "마" 발효물에 대한 항균력 시험을 실시하였다. 시험 균주로는 대장균(Esxherichia Coli ATCC 25922)과 황색포도상구균(Staphylococcus aureus ATCC 6538)을 사용하였으며, 36℃ 배양기에서 상기 균을 각각 16시간 배양하여 배양액을 준비하였다.
각 시험 균주 배양액을 20,000배 희석하여 1ml씩 각 원료에 적하한 후 25℃에서 24시간 보존 후 꺼낸다. 이를 멸균 처리된 한천배지에서 48시간 배양하고 습식 평판 배양법으로 조사하여 생균수를 측정하였다. 그리고 아래의 식에 따라 멸균율(%)을 계산하였으며, 그 결과는 [표 5]에 나타내었다.
멸균율(%) = [(희석액의 생균수 - 24시간 보존 후의 생균수)] × 100
"가" 발효물 "라" 발효물 "마" 발효물
대장균 91.8 98.1 99.9
포도상구균 87.7 96.3 99.9
상기의 표에 나타난 바와 같이 대장균 및 황색포도상구균에 대한 항균력은 본 발명의 조성물 중 "마" 발효물이 가장 우수하게 나타남을 확인할 수 있었다.
항염효과의 확인
항염효과는 아라키돈산(Arachidonic acid)을 이용한 평가법으로 확인하였다.(Ref. Agents and actions 1987 (20), 69-76).
마우스(hairless)의 양쪽 귀를 에탄올로 세척하고, 마우스의 귀 두께를 측정한 다음, 본 발명의 조성물, 아라키돈산 처리군(양성대조군)으로 하여 20ul씩 좌측귀는 시료만을 처리하고, 우측귀는 아라키돈산을 처리한 다음 도포 1시간 후 귀의 부종 정도를 측정하여 염증억제 지표로 사용하였다. 그 결과를 다음의 표 6에 나타내었다.
아라키돈산 "라" 발효물 "마" 발효물
염증억제율(%) 42,3 72.4 81.5
상기 표에 나타난 바와 같이 본 발명의 추출물 중 "마" 발효물에서 뛰어난 항염효과를 가짐을 알 수 있었다.
면역기능 증진 효과
상기 실시예 6의 "라" 발효물, "마" 발효물에 대한 면역기능 증진효과 시험을 실시하였다. 실험동물은 6주령의 25-30g의 수컷 ICR 마우스(대한바이오링크(주))로부터 공급받아 실험에 사용하였다. 사육실 및 실험실 환경 온도 23±2℃, 상대습도 55±10%, 조명주기 12시간, 조도 150-300 lux로 조절하였으며, 고형사료를 자유롭게 급여하면서 1주간의 적응사육을 실시한 후 마우스에 2.5% liquid thioglycllate medium을 2.5mL/mouse의 용량으로 복강내 주사하고 3일 후 세포를 얻어 이물질을 제거한 후 원심분리하여 세포 침전물에 1mL의 144mM NH4Cl 용액(17mM Tris buffer,pH 7.2)을 가하여 용혈시킨 후 적혈구를 제거한 후 일정량의 세포부유액과 동량의 trypan blue 용액을 혼합하여 96-well plate에 분주한 후 배양하여 본 발명의 추출물 "라" 발효물, "마" 발효물을 처리하였고, 비교를 위해 INF-γ(10ug/mL)을 처리하고, 72시간 동안 추가로 배양하였다.
본 발명의 추출물 "라" 발효물, "마" 발효물이 복강 대식세포를 활성화시켜 nitric oxide(NO) 분비를 촉진시켰는지를 검색하기 위하여 540nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다.
In vitro 상에서 마우스 복강 macrophage의 NO 생성에 미치는 영항
Treatment Dose(ug/mL) "라" 발효물 "마" 발효물
Medium - 10.03±1.64 10.11±2.12
IFN-γ 10 15.88±1.80 15.95±1.72
본발명 추출물 10 9.79±1.17 9.75±0.73
100 14.36±1.23 16.16±2.25
1,000 20.89±2.31 27.25±11.15
대조군으로 복강 대식세포를 RPMI 160 medium에서 배양했을 때의 NO 생성은 평균 10.03~10.11uM의 범위로 "라" 발효물, "마" 발효물 처리군에서 탁월한 상승효과를 나타냈으며, 이러한 결과에 따라 본 발명의 추출물 "라" 발효물, "마" 발효물은 농도 의존적으로 면역조절효과가 증가함을 확인하였다.
본 발명의 조성물은 면역력 증진, 항산화 효과를 가진 건강식품 및 의약품의 원료로서 사용이 가능하며, 본 발명의 조성물을 함유한 화장품도 매우 뛰어난 항균, 항염 작용을 가지고 있어 아토피 관련 질환의 개선 및 치료를 위한 고부가가치의 제품으로 개발될 수 있다.
해당사항 없음

Claims (5)

  1. ㄱ) 프로폴리스 원궤, 마카 젤라틴 분말 및 참당귀 건조분말을 혼합한 혼합물을 액체이산화탄소를 이용해 초임계 추출하여 지질추출물(추출물 A) 및 추출물박을 얻는 단계;
    ㄴ) 상기 ㄱ)에서 얻어진 추출물박에 에탄올을 가하여 추출한 후, 냉각 및 정치시켜 결정화된 당 성분과 에탄올추출액을 분리한 후, 상기 결정화된 당 성분을 건조 후 분쇄하여 당 결정 분말(추출물 B)을 얻는 단계;
    ㄷ) 상기 ㄴ)에서 얻어진 에탄올추출액을 농축 후, 건조하여 에탄올추출분말(추출물 C)을 얻는 단계;
    ㄹ) 상기 ㄱ), ㄴ) 및 ㄷ)에서 얻어진 추출물 A, 추출물 B 및 추출물 C를 혼합하여 추출물 혼합분말을 얻는 단계; 및
    ㅁ) 상기 ㄹ)에서 얻어진 추출물 혼합분말에 물을 가하고 미생물을 접종한 후 발효시켜 혼합 발효물을 얻는 단계;를 포함하는 것을 특징으로 하는 프로폴리스, 마카 및 참당귀 혼합 발효물의 제조방법.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 ㄹ) 단계에서,
    추출물 A, 추출물 B 및 추출물 C를 1 : 0.5~0.7 : 0.1~0.3의 중량비로 혼합하여 추출물 혼합분말을 얻는 것을 특징으로 하는 프로폴리스, 마카 및 참당귀 혼합 발효물의 제조방법.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 ㅁ)단계에서,
    상기 미생물은 식품용 효모, 박테리아 및 곰팡이균 중 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 프로폴리스, 마카 및 참당귀 혼합 발효물의 제조방법.
  4. '프로폴리스 원궤', '마카 젤라틴 분말' 및 '참당귀 건조분말'을 혼합한 혼합물의 초임계 지질추출물(추출물 A), 상기 초임계 지질추출물 제조시 수득한 추출물박을 에탄올로 추출한 후 냉각 및 정치시켜 결정화된 당 성분과 에탄올추출액으로 분리하여 얻어진 당 결정분말(추출물 B) 및 에탄올추출분말(추출물 C)을 함유하는 것을 특징으로 하는 프로폴리스, 마카 및 참당귀 혼합분말.
  5. 제4항의 프로폴리스, 마카 및 참당귀 혼합분말에 물을 가하고 미생물을 접종한 후, 발효시켜 얻어진 프로폴리스, 마카 및 참당귀 혼합 발효물.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101836348B1 (ko) * 2017-04-18 2018-03-08 제이앤팜유한책임회사 카카오닙스의 추출물 제조방법 및 그 추출물을 함유하는 피부노화 억제용 화장료 조성물
KR20210091978A (ko) 2020-01-15 2021-07-23 서울프로폴리스 주식회사 원산지가 다른 수용성 프로폴리스 추출물을 혼합 사용한 피지분비 조절과 여드름 개선 조성물 및 그 제조방법

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102682737B1 (ko) * 2021-10-13 2024-07-12 서울프로폴리스 주식회사 원산지가 다른 프로폴리스를 혼합사용한 프로폴리스 초임계추출물과 초임계추출박을 활용한 주름개선 기능성화장품 조성물 및 이의 제조방법
KR102691535B1 (ko) * 2022-02-07 2024-08-05 (주) 수이케이 발효균을 이용한 참당귀 추출물 제조방법
CN114774198A (zh) * 2022-04-22 2022-07-22 珠海安生凤凰制药有限公司 一种基于co2超临界萃取法萃取当归提取物的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010527230A (ja) 2006-12-29 2010-08-12 ジェ パク，サン 発酵プロポリスの製造方法
KR101319990B1 (ko) 2013-07-01 2013-10-18 주식회사 더마랩 천문동 및 마카 복합발효추출물을 포함하는 피부 재생, 진정 및 자극완화용 화장료조성물

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100749233B1 (ko) 2006-03-13 2007-08-13 (주)에이지아이 참당귀 추출물의 제조방법 및 그 조성물
KR100814133B1 (ko) 2006-12-05 2008-03-18 주식회사 내추럴하우스 마카마이드 고 함유 마카 추출물 제조방법
KR101167009B1 (ko) 2011-09-19 2012-07-24 김진태 방사능 해독 소요시간의 단축이 가능한 식품 제조방법

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2010527230A (ja) 2006-12-29 2010-08-12 ジェ パク，サン 発酵プロポリスの製造方法
KR101319990B1 (ko) 2013-07-01 2013-10-18 주식회사 더마랩 천문동 및 마카 복합발효추출물을 포함하는 피부 재생, 진정 및 자극완화용 화장료조성물

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101836348B1 (ko) * 2017-04-18 2018-03-08 제이앤팜유한책임회사 카카오닙스의 추출물 제조방법 및 그 추출물을 함유하는 피부노화 억제용 화장료 조성물
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