KR101697236B1 - 상지의 분배추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 상지의 분배추출물(Ramulus mori)을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 구체적으로는 MMP-1 생성 억제 효과, 콜라겐 합성 증진 효과, 피부주름 개선효과, 피부탄력 개선효과, 피부노화 방지효과가 있는 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

상지의 분배추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물{COSMETIC COMPOSITION CONTAINING PARTITION EXTRACT OF RAMULUS MORI}

본 발명은 상지의 분배추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다. 구체적으로는 피부 주름개선 효과, 피부 탄력 개선 효과 및 피부 항노화 효과가 있는 화장료 조성물에 관한 것이다.

사람의 피부는 노화 과정에서 다양한 물리·화학적인 변화가 일어난다. 그 원인으로는 크게 내적인 노화(intrinsic aging)와 광노화(photo-aging)로 구분되며 이에 관한 연구가 활발히 이루어지고 있다. 자외선, 스트레스, 질병 상태, 환경 인자, 상처에 의하여, 또는 나이가 들어감에 따라 자유라디칼이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다.

좀 더 구체적으로 말하자면, 피부의 주요 구성 물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부 세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부 노화 현상이 생겨나는 것이다.

특히, 단백질의 산화는 피부의 결합 조직인 콜라겐 (collagen), 히아루론산 (hyaluronic acid), 엘라스틴(elastin), 프로테오글리칸(proteoglycan), 피브로넥틴(fibronectin) 등이 절단되어 심한 과다 염증 반응과 피부의 탄력에 지장을 주고 이것이 더 심해질 경우 DNA의 변이에 의해 돌연변이, 암의 유발, 면역 기능 저하의 사태에 이르게 된다.

그러므로 신체의 대사 과정 중 발생하는 자유라디칼이나 자외선 조사, 염증 반응에 의해 매개되어 발생하는 자유라디칼을 소거하여 세포막을 보호하고, 또 이미 손상 받은 세포는 활발한 신진 대사에 의해 재생시켜서 세포를 증식시켜야 빠르게 회복되고 건강한 피부를 유지할 수 있다.

노화에는 이러한 자유라디칼 뿐만 아니라 콜라겐 분해효소인 기질 금속 단백질 분해 효소 (Matrix Metalloproteinase; MMP)라는 효소도 관여한다. 즉, 생체 내에서 콜라겐과 같은 세포외기질의 합성과 분해는 적절하게 조절되나, 노화가 진행되면서 콜라겐 합성이 감소하고, 콜라겐을 분해하는 효소인 기질 금속 단백질 분해 효소(MMP)의 발현이 촉진되어 피부의 탄력이 저하되고 주름이 형성된다. 또한, 자외선 조사에 의해 이러한 분해 효소가 활성화되기도 한다.

이제까지 화장품의 소재로서 사용된 원료들은 단순히 효소 활성만을 억제하는 것이 대부분이었으나, 최근 세포 내에서 활성화가 유도되는 MMP 발현을 조절하거나 그 활성을 억제할 수 있는 물질의 개발이 요구되고 있다.

합성물질은 피부자극을 야기하거나 제형의 안정성에 영향을 미치는 문제점이 있어 최근 여러 화학 물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 화장품이 많이 개발되고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐만 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발 가치가 한층 늘어나고 있다.

이에, 본 발명자들은 이제까지 알려지지 않은 여러 천연물들에 있어서 화장품으로의 응용 가능성을 연구한 결과, 상지를 선정하고 분배추출물을 제조하여 MMP-1 생성억제효과, 콜라겐 생합성효과, 피부 주름개선 효과, 피부 탄력 개선 효과를 측정한 결과, 그 효능이 매우 우수하므로 화장품으로서의 효능을 기대할 수 있다는 것을 발견하게 되었다.

또한, 본 발명의 목적은 상지의 분배추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 상지(Ramulus mori)의 분배추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 피부주름 개선용인 것을 특징으로 한다.

또한, 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 피부 탄력 개선용인 것을 특징으로 한다.

또한, 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 피부 노화 방지용인 것을 특징으로 한다.

바람직하게는, 상기 상지의 분배추출물은 상기 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.0001 ~ 30.0 중량% 함유될 수 있다.

또한, 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 MMP-1 생성억제효과, 콜라겐 생합성 효과를 나타내는 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

바람직하게는, 상기 상지의 분배추출물은 상지를 추출용매로 추출한 추출물을 노르말 헥산(N-hexane), 염화메틸렌(methylene chloride), 에틸아세테이트(ethyl acetate) 및 물로 순차적으로 분획하는 단계로 얻어질 수 있다.

또한 바람직하게는, 상기 상지의 분배추출물은 상지를 추출용매로 추출한 추출물을 노르말 헥산, 염화메틸렌 및 에틸아세테이트로 순차적으로 분획하는 단계로 얻어질 수 있다.

본 발명에 따른 상지(Ramulus mori)의 분배추출물은 MMP-1 생성 억제 효과(실험예 1), 콜라겐 합성 증진 효과(실험예 2), 주름개선 효과(실험예 3), 피부 탄력 개선 효과(실험예 4)를 갖는다.

본 발명의 화장료 조성물 중 유효 성분으로 사용되는 상지(Ramulus Mori)는 뽕나무속 식물의 여린 가지를 말린 것으로 뽕나무속에는 뽕나무(Morus alba, Linne), 처진 뽕나무(Morus alba for. Peldulls DIPPEL), 산뽕나무(Morus bombycis, Koidzumi), 꼬리 뽕나무(Morus bombycis var. Caudatifolia), 섬 뽕나무(Morus bombycis var. maritima KOIDZ), 가새 뽕나무(Morus bombycis for. Kase VYKEI), 몽고 뽕나무, 왕 뽕나무, 돌 뽕나무(Morus tiliaefolia, Makino)가 있으며, 이들은 낙엽활엽성의 교목으로 한국의 대부분 지역에 걸쳐 표고 500~1,400 m에 수평적으로 분포하며, 산골 마을 부근이나 산기슭에 자생한다. 상지의 모양은 긴 원주형으로 드물게 분지가 있고, 크기가 일정하지 않으며, 직경은 0.5-1.5 cm 이다. 표면은 회황색 혹은 황갈색으로 다수의 황갈색 점상 피공과 미세한 종문이 있으며, 회백색을 띤 반원형 잎 흔적과 황갈색의 액아가 있다. 절편의 두께는 0.2-0.5 cm 로 외피 부위는 비교적 얇고, 목질 부위는 황백색이며, 사선은 방사상이고, 수부는 백색 또는 황백색이다. 상지의 채취 시기는 늦은 봄과 초여름 사이이며, 잎을 제거한 후, 신선할 때 30∼60cm 크기로 잘라 햇볕에 말린다. 상지는 약간 쓴 맛이 나며, 소염, 이뇨, 강장, 발한 및 풍을 제거하는 등의 효능을 가지고 있어, 오래 전부터 한약재로 쓰이고 있다.

본 발명은 상지의 분배 추출물을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 바람직한 실시 형태에 따르면, 상지의 분배 추출물은 상지를 추출용매로 추출하여 상지 추출물을 얻는 단계(제1 단계) 및 상기 상지 추출물을 분획하여 분배추출물을 얻는 단계(제2 단계)로 얻어진다.

상기 상지 추출물을 얻는 단계(제1 단계)에서, 상지 추출물은 추출용매로 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 추출될 수 있다. 상기 유기용매는 C1 내지 C4의 알코올, 초산에틸, 염화메틸렌 및 클로로포름으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나 또는 이들의 혼합용매이고, 바람직하게는 물 및 C1 내지 C4의 알코올의 혼합 용매로 추출하며, 보다 바람직하게는 60 내지 100%의 에탄올로 추출한다. 추출시 온도는 30℃ 내지 150℃이며, 바람직하게는 50℃ 내지 100℃이다. 추출시 시간은 30분 내지 48시간이며, 바람직하게는 1시간 내지 12시간이다. 추출방법은 초음파 추출법, 초임계 추출, 아임계 추출, 열수추출법, 상온 추출법 또는 환류추출법을 수행한다. 바람직하게는 상온 추출 또는 환류 추출법을 수행하고, 보다 바람직하게는 환류 추출법을 1 내지 20회, 바람직하게는 2 내지 10회 반복 수행한다. 본 발명의 상지 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.

또한, 본 발명의 상지 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 및 발효 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 이산화탄소에 의한 감압, 고온에 의한 초임계추출법에 의한 추출, 초음파를 이용한 추출법에 의한 추출, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리하거나 자연 상태나 각종 미생물을 이용한 발효산물에 의한 추출물 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 및 추출방법을 통해 얻어진 활성 분획도 본 발명의 추출물에 포함된다.

상기 상지의 분배추출물을 얻는 단계(제2 단계)는 상기 제1 단계에서 얻은 상지 추출물을 노르말 헥산(N-hexane), 염화메틸렌(methylene chloride) 및 에틸아세테이트(ethyl acetate)로 순차적으로 분획하는 단계, 또는, 노르말 헥산, 염화메틸렌, 에틸아세테이트 및 물로 순차적으로 분획하는 단계를 포함한다.

구체적으로는, 상기 상지 추출물을 물에 재용해시킨 뒤, 물과 동량의 노르말 헥산을 첨가하여 2~5회 분획하고 노르말 헥산층을 분리한 뒤 감압 농축하여 노르말 헥산 분획물을 제조한다. 다음으로 노르말 헥산을 제거한 후 남은 물층에 동량의 염화 메틸렌을 첨가하여 2~5회 분획하고 염화메틸렌을 분리한 뒤 감압 농축하여 염화메틸렌 분획물을 제조한다. 그 다음으로 염화메틸렌을 제거한 후 남은 물층에 동량의 에틸아세테이트를 첨가하여 2~5회 분획하고 에틸아세테이틀 제거한 뒤 감압 농축하여 에틸아세테이트 분획물을 제조한다. 남은 물층은 동결건조하여 물 분획물을 제조한다.

본 발명에 따르면, 상기 상지의 분배추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.0001 ~ 30.0 중량%함유되며, 더욱 바람직하게는, 상기 상지의 분배추출물은 화장료 조성물의 전체 중량에 대해서 0.01 ~ 10 중량% 함유되는 것을 특징으로 한다. 상기 분배추출물의 함량이 0.0001 중량% 미만인 경우에는 피부개선 효과가 나타나지 않으며, 30.0 중량%를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 피부 개선 효과 증대 정도가 미미하며, 제형상의 안전 및 안정성에 문제가 있으며 경제적이지도 못하다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서 상기 유효 성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다. 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 팩, 마사지크림 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연등이 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다. 본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. 본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 제형 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

한편, 본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 이용하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 이용하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다. 본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다.

또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다. 본 발명의 상지 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 이용하는 화장방법을 수행하면, 피부 주름 개선 효과, 피부 탄력 개선 효과 및 피부 노화 방지 효과를 얻을 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다.

이와 같은 방법으로 얻어진 상지의 분배추출물은, 피부 주름 개선 효과, 피부 탄력 개선 효과, 및 피부 노화 방지 효과가 있다.

제조예 1 내지 4 : 상지의 분배추출물의 제조

세절하여 음건한 상지의 전초 200g을 70%(V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하여 추출물을 얻었다. 여과하여 걸러진 여액을 감압 농축 및 동결 건조하여 38.2 g의 에탄올 추출물을 수득하였다. 상기 에탄올 추출물을 극성에 따라 분획하기 위해 유기용매를 이용한 계통적 분획을 실시하였다. 구체적으로는 상기 에탄올 추출물 20g을 물 200 mL에 다시 녹인 뒤 동량의 노르말 헥산(n-hexane)을 첨가하고 헥산층을 분리하여 헥산 분획물을 수득하였다(제조예 1). 상기 헥산 분획물을 제거한 물층에 염화메틸렌(methylene chloride)를 동량 첨가하고 염화메틸렌 층을 분리하여 염화메틸렌 분획물을 수득하였다(제조예 2). 상기 염화메틸렌 분획물을 제거한 물층에 에틸아세테이트(ethyl acetate)를 동량 첨가하고 에틸아세테이트 층을 분리하여 에틸아세테이트 분획물을 수득하였다(제조예 3). 상기 에틸 아세테이트 분획물을 제거하고 남은 물층을 동결건조하여 물 분획물을 수득하였다(제조예 4). 상기 분획과정은 상온에서 수행하였으며 각 분획을 3시간 이상 정치하였다. 각 분획물을 얻는 과정은 2회 반복 수행하였으며 물층을 제외한 분획물은 여과 후 감압농축하고 건조시켰다.

비교제조예 1

세절하여 음건한 상지의 전초 200g을 70%(V/V) 에탄올 수용액으로 5시간씩 3회 환류 추출하고 냉침한 후 와트만(Whatman) #4 여과지로 여과하여 추출물을 얻었다. 여과하여 걸러진 여액을 감압 농축 및 동결 건조하여 38.2 g의 에탄올 추출물을 수득하였다.

실험예 1 : 상지의 분배추출물의 MMP-1 생성 억제 효과

본 실험예 1은 제조예 1 내지 4에서 수득한 상지의 분배추출물(분획물) 및 비교제조예 1에서 수득한 상지 추출물의 콜라겐 분해효소인 MMP-1 생성을 억제하는 효과를 측정하였다.

인간 정상 피부 세포인 섬유아세포 (한국 세포주 은행, 대한민국)를 48-웰 마이크로 플레이트(Nunc, 덴마크)에 각 웰당 1× 10⁶ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지(Sigma, 미합중국) 및 37℃의 조건에서 24시간 동안 배양한 후, 상기 제조예 1 내지 4의 상지의 분배추출물을 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 상지의 분배추출물이 포함되지 않은 무혈청 DMEM 배지에서 48시간 동안 추가로 배양하였다.　 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 MMP-1 분석 킷트(Amersham, 미합중국)를 이용하여 새로 합성된 MMP-1의 양(ng/㎖)을 측정하고, 하기 수학식 1에 따라 MMP-1 생성 억제율(%)을 계산하였으며, 그 결과를 표 1에 나타내었다.

시료명	처리 농도	MMP-1 생성 억제율(%)
		제조예 1	제조예 2	제조예 3	제조예 4	비교제조예 1
상지 분배추출물	50ppm	32.92	38.79	41.05	29.82	25.41
	100ppm	43.50	55.14	59.18	38.15	38.12
	500ppm	52.15	79.53	82.35	51.15	48.70
	1000ppm	69.20	84.21	91.38	67.90	61.55
TGF-β	200nM	76.80

상기 표 1의 결과에서 보는 바와 같이, 본 발명의 상지의 분배추출물은 농도 의존적으로 MMP-1의 생성을 억제(MMP-1 활성 억제)시키며 특히 제조예 2와 3에서 효과가 우수함을 확인할 수 있었다. MMP-1 생성 억제효과가 있는 것으로 알려진 물질인 TGF-β의 농도(200nM)와 본원발명의 상지 분획물의 농도(500ppm) 차이를 감안해도, 여러 종류의 물질이 혼합된 상태에서 상기와 같은 정도의 MMP-1 억제율을 나타낸 것은 본원발명의 상지의 분배추출물은 MMP-1 생성 억제 효과가 있다는 것을 보여준다.

실험예 2 : 상지의 분배추출물의 콜라겐 합성 증진 효과

인간 정상 상피 세포인 섬유아세포를 48-웰 마이크로 플레이트에 각 웰당 1 x 10⁶ 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 24시간 동안 배양하였다. 상기 제조예 1 내지 4에 의해 제조된 분배추출물 및 비교제조예 1에 의해 제조된 상지추출물을 첨가한 무혈청 DMEM 배지 및 대조군으로 상지 분배추출물이 포함되지 않은 무혈청 DMEM 배지에서 48시간 동안 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 콜라겐 키트(Takara, 일본)를 이용하여 프로콜라겐 (procollagen) 타입 I C-펩타이드 (PICP) 양을 측정하여 ng/㎖ 환산하였으며, 이에 의해 합성된 콜라겐 양을 측정하였다. 콜라겐 생합성 증가율(%)은 하기 수학식 2에 따라 계산하였으며, 그 결과를 표 2에 나타내었다.

시료명	처리 농도	콜라겐 생합성 증가율(%)
		제조예 1	제조예 2	제조예 3	제조예 4	비교제조예 1
상지 분배추출물	5ppm	14.3	20.6	25.6	11.3	10.4
	10ppm	23.4	42.1	51.1	21.7	18.6
	25ppm	75.3	94.5	103.5	62.5	52.4
	50ppm	108.5	158.4	172.5	98.8	102.4
TGF-β	200nM	165.5

표 2에 따르면, 본 발명의 제조예 1 내지 4에 의해 제조된 상지의 분배추출물의 콜라겐 생합성율이 농도 의존적으로 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 특히 제조예 2와 3에 의해 제조된 상지의 분배추출물의 효과가 우수한 것을 확인하였다.

제형예 1 내지 4 :상지의 분배추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조

상지의 분배추출물을 포함하는 화장료는 제조예 1 내지 4의 상지의 분배추출물을 각각 포함하도록 제조하였으며, 효능의 비교를 위해 상지의 분배추출물 대신에 보습제로서 글리세린 및 1,3-부틸렌글리콜을 포함하는 화장료 조성물(비교제형예 1), 상지의 분배추출물 대신에 아데노신을 포함하는 화장료 조성물(비교제형예 2), 상지의 분배추출물이나 보습제를 모두 포함하지 않는 화장료 조성물(비교제형예 3), 상지의 분배추출물 대신 상지추출물을 포함하는 화장료 조성물(비교제형예 4)을 하기 표 3에 나타내었다.

구분	성분	제형예 1	제형예 2	제형예 3	제형예 4	비교 제형예 1	비교 제형예 2	비교 제형예 3	비교 제형예 4
A	제조예 1	2.0	-	-	-	-	-	-	-
	제조예 2	-	2.0	-	-	-	-	-	-
	제조예 3	-	-	2.0	-	-	-	-	-
	제조예 4	-	-	-	2.0	-	-	-	-
	비교제조예 1	-	-	-	-	-	-	-	2.0
	글리세린	-	-	-	-	5	-	-	-
	1,3-부틸렌글리콜	-	-	-	-	5	-	-	-
	아데노신	-	-	-	-	-	0.04	-	-
	EDTA-2Na	0.02	0.02	0.02	0.02	0.02	0.02	0.02	0.02
	정제수	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100	to 100
B	세토스테아릴알코올	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
	글리세릴스테아레이트	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5
	마이크로크리스탈린	0.7	0.7	0.7	0.7	0.7	0.7	0.7	0.7
	스쿠알란	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
	유동파라핀	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
	트리옥타노인	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
	폴리솔베이트	1.2	1.2	1.2	1.2	1.2	1.2	1.2	1.2
	솔비탄스테아레이트	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
	토코페릴아세테이트	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
	사이클로메치콘	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0	3.0
	BHT	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05
C	향,방부제	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량

실험예 3 : 상지의 분배추출물의 피부 주름 개선효과

본 발명의 상지의 분배추출물을 함유하는 화장료의 피부 주름 개선효과에 대한 임상실험을 실시하였다. 임상시험은 각 화장료의 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다.

즉, 임상실험은 상기 표 3의 제조예 1 내지 4의 상지의 분배추출물을 함유하고 있는 제형예 1 내지 4와 상지 분배추출물 대신에 보습제로서 글리세린 및 1,3-부틸렌글리콜을 포함하는 비교제형예 1의 화장료 조성물, 비교제조예 1을 함유하는 비교제형예 4를 사람을 대상으로 화장료의 사용으로 인한 피부 주름 개선효과를 확인 및 비교 평가하였다.

실험자(35세 - 50세의 여성) 160명의 여성을 대상으로 실험군을 각각 20명씩 상지의 분배추출물 대신에 보습제로서 글리세린 및 1,3-부틸렌글리콜을 포함하는 화장료 조성물(비교제형예 1) 처리군, 상지의 분배추출물을 아데노신 0.04%(v/v)로 대체한 크림(비교제형예 2) 처리군, 상지추출물을 함유한 크림(비교제형예 4), 상지의 분배추출물을 포함하는 제형예 1 내지 4의 실험군의 8 그룹으로 나누고, 얼굴 양쪽 면을 사용하여 8주 후의 주름 개선 효과를 육안 관찰 및 기기측정(cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)을 통하여 주름 개선 정도를 확인하였다. 이 평가를 토대한 주름 개선 효과 결과는 하기의 표 4에 나타내었다.

	주름 개선 효과			유효율(%)
	우수	약간	없음
제형예 1	10	2	8	60.0
제형예 2	11	5	4	80.0
제형예 3	16	2	2	90.0
제형예 4	6	7	7	65
비교제형예 1	3	3	14	30.0
비교제형예 2	15	3	2	90.0
비교제형예 4	10	4	6	70

상기 표 4의 결과에서도 알 수 있듯이, 본 발명의 상지의 분배추출물을 함유한 제형예 1 내지 4의 화장료 조성물은 주름개선 효과를 보였으며 특히 제형예 2와 3은 보습제를 함유하는 비교제형예 1에 비하여 약 3.0배 높은 주름개선 효과를 보여주었다.

또한, 상지의 분배추출물 대신 주름 개선 효과가 있는 것으로 알려진 아데노신을 함유하는 비교제형예 2의 화장료와 유사한 결과가 나타나, 상지의 분배추출물이 우수한 주름 개선 효과를 나타냄을 알 수 있었다.

실험예 4 : 피부 탄력 개선 효과 측정

본 실험예 4은 제조예 1 내지 4에서 수득한 상지의 분배추출물을 포함하는 제형예 및 비교제형예에 따른 화장료 조성물의 피부 탄력 개선 효과를 알아보기 위하여, 30~40대의 탄력이 감소한 여성 90명을 대상으로 측정하였다. 15명씩 6개 그룹으로 나눈 뒤, 1 그룹에는 제형예 1을, 2그룹에는 제형예 2를, 3그룹에는 제형예 3을, 4그룹에는 제형예 4를, 5그룹에는 비교제형예 3을, 그리고 6그룹에는 비교제형예 4를 안면에 매일 아침, 저녁으로 2회씩 12주간 도포하게 한 후, 12주 후 피부 탄력을 측정하였다. 얼굴 부위의 탄력을 cutometer SEM575(MPA 580, Courage+Khazaka GmbH, Germany)를 이용하여 측정하였으며, 피부 탄력을 나타내는 R2(biological elasticity)를 도포 전과 도포 후를 측정한 뒤 개선도(%)로 평가하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었으며, 결과는 각 군에 대한 개선도의 평균치이다.

실험제품	피부 탄력 개선도(%)
제형예1	15.7
제형예2	24.8
제형예3	25.4
제형예4	13.4
비교제형예3	4.7
비교제형예4	19.1

상기 표 5에 나타난 바와 같이, 상지의 분배추출물이 함유된 제형예 1 내지 4는 비교제형예 3에 비하여 피부 탄력이 매우 향상됨을 알 수 있었다.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims (7)

1. 상지(Ramulus mori)의 분배추출물을 유효성분으로 함유하고, 피부 주름 개선 또는 피부 탄력 개선 효과를 갖는 화장료 조성물로서,
   상기 상지의 분배추출물은 상지를 추출용매로 추출한 추출물을 노르말 헥산(N-hexane), 염화메틸렌(methylene chloride) 및 에틸아세테이트(ethyl acetate)로 순차적으로 분획하여 얻어진 에틸아세테이트 분획물인 것을 특징으로 하는, 화장료 조성물.
2. 제1항에 있어서,
   상기 상지의 분배추출물은 상기 화장료 조성물의 전체 중량에 대하여 0.0001 ~ 30.0 중량% 함유되는 화장료 조성물.
   
   
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