KR101686008B1 - Composition comprising extract of herbal mixture for preventing alopecia or hair growth effect - Google Patents

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Abstract

본 발명은 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 상기 조성물은 사람 모유두 세포의 성장, 분열 촉진 효과와 동물에 대한 양모 효과가 우수하여 탈모방지 또는 양모용 약학 조성물, 건강기능식품, 화장료로서 용이하게 사용가능하다. The present invention relates to a composition containing an extract of a herbal medicine mixture comprising a herbal composition, a lobule, a green leaf, a green tea, and a herbal composition, wherein the composition is excellent in growth and cleavage promotion effect of human dermal papilla cells, A pharmaceutical composition for wool, a health functional food, and a cosmetic composition.

Description

생약 혼합물의 추출물을 함유하는 탈모방지 또는 양모효능이 있는 조성물 {Composition comprising extract of herbal mixture for preventing alopecia or hair growth effect}[0001] The present invention relates to a hair-loss-preventing or wool-effective composition containing an extract of a herbal mixture,

본 발명은 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물을 함유하는 탈모방지 또는 양모용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for hair loss prevention or hair wool containing an extract of a herbal medicine mixture comprising a herbal composition, a lobule, a green tea and a herbal composition.

인체의 모발은 약 10만 내지 15만개 정도이며, 각각의 모발은 서로 다른 주기를 가지며 성장기(anagen), 퇴행기(catagen), 휴지기(telogen)를 거쳐 성장, 탈락하게 된다. 이러한 주기는 36년에 걸쳐 반복되는데 그 결과 일일 평균 50 내지 100개의 모발이 정상적으로 탈락하는 양상을 보인다.The human hair has about 100,000 to 150,000 hairs, and each hair has a different period and grows and falls through anagen, catagen, and telogen. This cycle repeats over 36 years and results in an average of 50 to 100 hairs per day dropping normally.

일반적으로 탈모증(alopecia 또는 hair loss)이라 함은 이러한 주기 중에서 성장기의 모발 비율이 짧아지고 퇴행기 또는 휴지기의 모발이 많아져 비정상적으로 모발이 탈락하는 숫자가 많아지는 것을 의미하는데, 특히, 탈모 환자의 대부분을 차지하고 있는 남성형 탈모의 경우에는 모발 밀도의 감소는 없지만 모발의 굵기가 극단적으로 감소한다는 사실이 밝혀지고 있다.In general, alopecia or hair loss means that the number of abnormal hair loss is increased due to the shortening of hair growth rate during the growing period and the increase of hair in the retrograde period or resting period among these cycles. Especially, In the case of male hair loss, there is no decrease in hair density, but it is revealed that hair thickness is extremely reduced.

이러한 탈모증의 치료나 예방에 있어서 현재까지 가장 널리 사용되는 제제는 미녹시딜(Minoxidil) 함유 제제로서, 현재까지 미국 FDA의 승인을 받은 두 가지 발모제 성분 중의 하나이다. 미녹시딜은 고혈압 치료제이었지만 사용상의 부작용으로 발모 현상이 나타나면서 현재에는 발모제로 더 유명한 약물이 되었다. 미녹시딜의 발모 작용기전에 대해서는 정확히 밝혀져 있지는 않지만, 혈관 확장 효과를 통한 혈류량 증가로 모근에 영양을 공급하여 모발 성장을 촉진하는 것으로 추측하고 있다. 이러한 혈류량 증가 모델은 미녹시딜이 모근을 구성하는 주요세포인 모유두(dermal papilla)에서 혈관 확장에 관련된 성장 인자인 혈관내피성장 인자(VEGF: vascular endothelial growth factor)의 발현을 증가시킨다는 최근의 보고에 의해서 간접적으로 증명되었다(Br. J. of Dermatol., 1998, 138, 407~411). 또한, 미녹시딜의 발모효과 기전에 있어 혈관 확장 효과 이외에도 체외 배양 중인 모근의 모유두 세포 활성화(Skin Pharmacol., 1996, 9, 3~8) 및 모낭 조직배양에서 모낭의 성장을 촉진한다는 연구 보고(J. Invest. Dermatol., 1989, 92, 315~320) 등은 미녹시딜이 모근에 직접적인 성장 인자로 작용함을 시사하고 있다.The most widely used formulation to treat or prevent alopecia is Minoxidil, one of the two FDA-approved hair growth agents. Minoxidil was a remedy for hypertension, but it became a more popular drug as a hair growth drug nowadays with hair growth due to side effects. Minoxidil's hair growth mechanism has not been clarified precisely, but it is supposed that nutrient supply to the hair follicle promotes hair growth by increasing blood flow through vasodilation effect. This model of blood flow increase has been shown indirectly by a recent report that minoxidil increases the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), a growth factor related to vasodilation in the dermal papilla, (Br. J. of Dermatol., 1998, 138, 407-411). In addition, in addition to the vasodilating effect of minoxidil, hair follicle cell activation (Skin Pharmacol., 1996, 9, 3-8) and hair follicle tissue culture promoted hair follicle growth in vivo. Invest. Dermatol., 1989, 92, 315-320) suggest that minoxidil acts as a direct growth factor in hair follicles.

이밖에 최근에 발매가 시작된 머크(Merck)사의 프로페시아(Propecia) 주성분인 피나스테라이드(finasteride)는 남성호르몬 테스토스테론(testosterone)이 더 강력한 형태의 남성호르몬인 디히드로테스토스테론(DHT: dihydrotestosterone)으로 전환되는 것을 억제한다고 알려져 있다. 1997년 12월 남성형 탈모증의 치료제로 1㎎ 타블렛이 FDA로부터 사용 승인을 받아 현재 시판 중으로, 임상결과 유의할 만한 효과를 나타내는 것으로 판명되었으나 일부 남성 기능 억제 부작용도 보고되고 있다(J. Am. Acad. Dermatol., 1998, 39, 578~589). 그러나 이 약물 또한 미녹시딜과 같이 임상효과가 그다지 탁월하지 못하고 부작용에 대한 우려 때문에 좀 더 우수한 발모제 탐색연구가 활발히 진행되고 있는 실정이다. Finasteride, a major component of Merck's recently launched propecia, has also been shown to inhibit the conversion of testosterone to the more potent male hormone dihydrotestosterone (DHT) . In December 1997, a 1 mg tablet was approved for use by the FDA for the treatment of male alopecia, which is currently on the market and has been shown to have significant effects on clinical outcome, but some male functional inhibitory side effects have also been reported (J. Am. Acad. Dermatol , 1998, 39, 578-589). However, the drug is not as excellent as minoxidil, and clinical research is actively pursued for better hair growth due to concerns about side effects.

이러한 각각의 효과에 편향적인 유효 성분들의 경우에는 동물 실험이나 제한적인 임상 실험에서 발모 증진에 효과가 있는 것으로 나타난다고 보고하고 있지만 복잡한 모발 성장 메커니즘을 충족시켜주지 못하고 사람 개개인의 고유한 탈모 특성 등이 고려되지 못하기 때문에 실제적으로 대다수의 사용자들이 눈에 띄는 효과를 보지 못하는 경우가 많은 실정이다. 따라서, 해외 경쟁제품과 효과 및 개념적으로 경쟁력을 보유한 발모 증진 신소개 개발 및 원천기술의 상용화가 필요하다.Although active ingredients that are biased toward each of these effects are reported to be effective in enhancing hair growth in animal experiments or limited clinical trials, they do not meet complex hair growth mechanisms, and the individual hair loss characteristics There are many cases in which the majority of users do not notice a noticeable effect because they are not considered. Therefore, it is necessary to develop new hair growth promoting products that have competitiveness with overseas competitiveness, conceptual competitiveness, and commercialization of original technology.

어성초(Houttuynia cordata)는 약모밀이라고도 하며, 응달진 숲 속에서 자란다. 땅속줄기가 옆으로 길게 벋고 가늘며 흰색이다. 줄기는 곧게 서고 높이가 20~50cm이며, 몇 개의 세로줄이 있고, 냄새가 난다. 잎은 어긋나고 길이가 3~8cm이고 끝이 뾰족하며 가장자리가 밋밋하고 턱잎이 잎자루 밑 부분에 붙어 있다. 꽃은 5~6월에 피고 줄기 끝에서 나온 짧은 꽃줄기 끝에 수상꽃차례를 이루며 많은 수가 달린다. 총포는 4개로 갈라지고 꽃차례 밑에 십자 모양으로 달려 꽃잎처럼 보이며, 갈라진 조각은 길이 1.5~2cm의 타원 모양 또는 긴 타원 모양이며 흰색이다. 꽃차례의 길이는 1~3cm이고, 꽃은 꽃잎과 꽃받침이 없고 3개의 수술과 1개의 암술이 있으며, 암술대는 3개이고, 씨방은 상위(上位)이고 3실이다. 열매는 삭과이고, 종자는 연한 갈색이다. 꽃이 피기 전의 식물체를 이뇨제와 구충제로 사용하고, 잎을 짓찧어 종기와 독충에 물렸을 때 바른다. 민간에서는 부스럼, 화농, 치질에 사용하고, 한방에서는 식물체를 임질, 장염, 요로감염증, 폐렴, 기관지염, 고혈압, 방광염, 축농증, 치루, 탈홍, 악창, 염증완화 등에 사용한다. 잎이 메밀의 잎과 비슷하고 약용식물이므로 약모밀이라고 부른다. 한국(울릉도, 안면도, 거제도), 일본, 중국, 히말라야, 자바에 분포한다. 중국의 '본초강목', '영남 체역록'. '중국약식물도감' 등에 어성초가 해독작용이 있다고 기록되어 있다. 또한 피를 맑게 하고 피부를 개선시키는 효과나 재생효과가 뛰어나다고도 알려져 있다. Houttuynia cordata , also known as anemic medicine , grows in the shaded forests. The underground stalk is long, narrow, thin and white. The stem is straight and 20 ~ 50cm high, has several vertical lines, and smells. Leaves are alternate phyllotaxis, 3 ~ 8cm long, pointed end, plain edge, stipule attached to bottom of petiole. The flower blooms in May to June, and the end of the stem of the stem ends up with a number of spikes on the end of the stem. The involucre is divided into 4 pieces, and under the inflorescence, it looks like a petal with a cruciform shape. The divided pieces are elliptical or elliptical with a length of 1.5 ~ 2cm and white. The length of the inflorescence is 1 ~ 3cm, the flower has no petal and calyx, 3 stamens and 1 pistil, 3 styles, and ovary is upper (upper) and 3 rooms. The fruit is seed vessel, and the seed is light brown. Use the plants before the flowering as a diuretic and insect repellent, and apply the leaves when they are bitten by boils and insects. In the private sector, it is used for swelling, hemorrhoids and hemorrhoids. In one room, the plant is used for gonorrhea, enteritis, urinary tract infection, pneumonia, bronchitis, hypertension, cystitis, sinusitis, feces, exfoliation, malaria and inflammation. Leaves are similar to leaves of buckwheat and are called medicinal plants because they are medicinal plants. It is distributed in Korea (Ulleungdo, Anmyeon-do, Geoje Island), Japan, China, Himalaya and Java. China 's' Prince Gangmok', 'Yeongnam' It is recorded that there is a detoxification effect on the Chinese medicine plant inscription. It is also known that it cleanses blood and improves skin and regenerates.

자소엽은 차조기(Perilla frutescens var. acuta[=Perilla sikokiana])의 잎을 건조하여 사용하는 것으로 비타민 A, 비타민 C, 칼슘, 인, 철 등의 미네랄이 많이 포함되어 있으며, 해독, 심신안정, 발한, 해열, 이뇨, 건위, 거담 효과가 있다. 이 외에도 입맛을 돋우고 혈액순환을 좋게 하고 땀을 잘 나게 하며 염증, 기침 등의 억제 효과가 있다. 빈혈이 줄어들고 혈중 콜레스테롤의 저하 효과, 혈관 염증의 억제 효과, 심혈관 질환의 예방 효과 등이 있고 소화기의 기능을 좋게 하며, 두통이나 무좀에도 치료 효과가 있다고 알려져 있다. The leaves of Perilla frutescens var. Acuta [= Perilla sikokiana ] are dried and used. It contains many minerals such as vitamin A, vitamin C, calcium, phosphorus and iron. , Fever, diuretic, dryness, and dementia. In addition, it increases appetite, improves blood circulation, makes sweat better, and has an inhibitory effect such as inflammation and cough. Anemia is reduced, blood cholesterol lowering effect, vascular inflammation inhibition effect, cardiovascular disease prevention effect, etc., and digestive function is good, and headache and athlete's foot is also known to have a therapeutic effect.

녹차는 차나무(Camellia sinensis)의 잎을 이용하여 말린 것으로서, 차나무의 잎을 채취한 후 즉시 가열하여 산화효소를 파괴시켜 녹색을 그대로 유지하는 동시에, 수분을 증발시켜 잎을 흐늘흐늘하게 말기 좋은 상태로 말리는데, 예전에는 사람이 가마솥에서 직접 잎을 손으로 비벼 말렸다. 건조된 녹차 잎은 가열을 계속하여 대부분의 수분을 제거하여 어느 정도 바삭바삭하게 만들어 차의 음용 또는 한약재의 원료로서 사용한다. 녹차의 카테킨 성분은 위암, 간암, 유방암, 식도암 등의 다양한 암 발생을 억제하는 효과가 있다고 알려져 있다. 녹차에 포함된 다당체는 인슐린 합성을 촉진시켜 혈당의 상승을 억제한다. 또한 중금속 제거 효과나 혈중 콜레스테롤의 상승 억제, 비만 예방, 피부의 진정 작용 등이 있어 피부노화의 억제에 효과적임이 알려져 있다. Green tea is dried using the leaves of Camellia sinensis . It is heated immediately after collecting the leaves of the tea tree to destroy the oxidizing enzyme to keep the green as it is. At the same time, the water is evaporated and the leaves are faint Previously, a man rubbed leaves directly in a cauldron. Dried green tea leaves continue to be heated to remove most of the moisture to make them crispy to some extent and used as a raw material for tea or herbal medicine. The catechin component of green tea has been known to inhibit various cancers such as gastric cancer, liver cancer, breast cancer, and esophageal cancer. The polysaccharide contained in green tea promotes insulin synthesis and inhibits the rise of blood sugar. It is also known that it is effective in suppressing the aging of the skin due to the heavy metal removal effect, the increase of blood cholesterol, the prevention of obesity and the soothing action of the skin.

한련초(Eclipta prostrata)는 논둑이나 습지에서 자란다. 밑부분이 비스듬히 자라다가 곧게 서며 부드럽지만 전체에 센 털이 있어 거칠다. 높이 10∼60cm로 잎겨드랑이에서 가지가 갈라진다. 잎은 마주나고 길이 3∼10cm, 나비 5∼25mm의 바소꼴로서 양면에 굳센 털이 있으며 잔 톱니가 있다. 꽃은 8∼9월에 피고 가지 끝과 원줄기 끝에 두화(頭花)가 1개씩 달린다. 두화는 지름 1cm 정도이고 설상화는 흰색이다. 총포조각은 5∼6개이며 긴 타원형으로 녹색이고 끝이 둔하다. 열매는 수과로서 검은색으로 익는데 설상화의 것은 세모지만 관상화의 것은 네모이다. 풀 전체를 약재로 한다. 민간에서 지혈제로 사용하며, 특히 혈분 치료에 쓰고 있다. 아시아와 세계의 따뜻한 곳에 분포한다. 한련초는 남성의 정기를 보호하는 기능이 있어 조루나 발기부전 등의 남성질환 치료 효과가 있다고 알려져 있으며, 신장기능의 향상, 요통 억제, 여성의 자궁염, 생리불순, 냉증 등에도 효과가 있다. 또한 암세포의 성장을 억제하는 것으로도 알려져 있다. Eclipta prostrata grows in rice paddies and wetlands. The lower part grows diagonally and stays straight and smooth, but it has rough hair all over. It is 10 ~ 60cm in height and branches are split in the axilla. Leaves are opposite, 3 ~ 10cm in length, 5 ~ 25mm in width, with hard hairs on both sides and with serrate. Flowers bloom from August to September, and one head flower hangs at the end of the branch and at the end of the main stem. The hare is about 1cm in diameter and the lanceolate is white. It has 5 ~ 6 pieces, green with long oval shape and dull end. The fruit is achene, which grows in black color. The whole pool is made into a medicinal material. It is used as a hemostatic agent in the private sector, especially in the treatment of blood. It is distributed in a warm place in Asia and the world. Hansikcho has a function to protect men's period, and it is known that it has the effect of treating male diseases such as premature ejaculation and erectile dysfunction. It is also effective in improvement of kidney function, lower back pain, women's uterine bleeding, menstrual irregularity and poor circulation. It is also known to inhibit the growth of cancer cells.

한편, 본 발명자들은 탈모방지 또는 양모효과가 있는 생약 조성물에 관한 연구를 하던 중, 본 발명의 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물이 탈모 억제 효과 또는 양모(발모) 효과가 우수함을 확인함으로써, 본 발명을 완성할 수 있었다. On the other hand, the inventors of the present invention have found that when the herbal composition having anti-hair loss or wool effect is studied, the extract of the herbal medicine mixture containing the herbal composition, the lobule, the green tea, By confirming the superiority, the present invention can be completed.

한국등록특허 제1261321호 (진두발을 함유하는 샴푸조성물 및 그 제조방법, 2013.04.30. 등록)Korean Registered Patent No. 1261321 (Shampoo Composition Comprising Chenopoderm and Preparation Method Thereof, Registered on Mar. 30, 2013.) 한국등록특허 1322926호 (한련초 추출물, 이의 분획물, 터트티에닐 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 탈모방지 및 발모촉진용 조성물, 2013.10.22. 등록)Korean Registered Patent No. 1322926 (registered trademark of HanSunikcho Extract, its fractions, turtienyl derivatives or pharmaceutically acceptable salts thereof, composition for preventing hair loss and promoting hair growth, registered on October 22, 2013) 한국공개특허 2011-0112019호 (탈모 방지 및 발모 촉진용 모발 화장료 조성물 및 그 제조방법, 2011.10.12. 공개)Korea Patent Publication No. 2011-0112019 (hair cosmetic composition for hair loss prevention and promotion of hair growth and method for producing the same, 한국공개특허 2011-0104196호 (탈모 방지 또는 육모 촉진을 위한 조성물, 2011.09.22. 공개)Korea Patent Publication No. 2011-0104196 (composition for preventing hair loss or promoting hair growth, disclosed on September 22, 2011)

Lachgar, S. et al., Minoxidil upregulates the expression of vascular endothelial growth factor in human hair dermal papilla cells. Br. J. of Dermatol., 1998, 138, 407~411. Lachgar, S. et al., Minoxidil upregulates the expression of vascular endothelial growth factor in human hair dermal papilla cells. Br. J. of Dermatol., 1998, 138, 407-411. Kurata. S. et al., Effects of hypertrichotic agents on follicular and nonfollicular cells in vitro. Skin Pharmacol., 1996, 9, 3~8.Kurata. S. et al., Effects of hypertrichotic agents on follicular and nonfollicular cells in vitro. Skin Pharmacol., 1996, 9, 3-8. Buhl, A.E. et al., Minoxidil stimulates mouse vibrissae follicles in organ culture. J. Invest. Dermatol., 1989, 92, 315~320.Buhl, A.E. et al., Minoxidil stimulates mouse vibrissae follicles in organ culture. J. Invest. Dermatol., 1989, 92, 315-320. Kaufman K.D. et al., Finasteride in the treatment of men with androgenetic alopecia. Finasteride Male Pattern Hair Loss Study Group. J. Am. Acad. Dermatol., 1998, 39, 578~589.Kaufman K.D. et al., Finasteride in the treatment of men with androgenetic alopecia. Finasteride Male Pattern Hair Loss Study Group. J. Am. Acad. Dermatol., 1998,39, 578-589. E. Kaiser et al. Color test for detection of free terminal amino groups in the solid-phase synthesis of peptides., Anal. Biochem., 1970, 34(2), 595~598.E. Kaiser et al. Color test for detection of free terminal amino groups in the solid-phase synthesis of peptides., Anal. Biochem., 1970, 34 (2), 595-598.

본 발명의 목적은 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물을 함유하는 탈모방지 또는 양모용 조성물을 제공하는 데에 있다.It is an object of the present invention to provide a composition for hair loss prevention or hair wool containing an extract of a herbal medicine mixture comprising a herbal composition, a lobule, a green tea and a herbal medicine.

본 발명은 어성초 100 중량부, 자소엽 20~80 중량부, 녹차 20~80 중량부 및 한련초 100~300 중량부를 포함하는 생약 혼합물의 추출물을 함유하는 탈모방지 또는 양모용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for preventing hair loss or wool comprising an extract of a herbal medicine mixture comprising 100 parts by weight of herringbone, 20 to 80 parts by weight of a baby leaf, 20 to 80 parts by weight of green tea, and 100 to 300 parts by weight of a herbal medicine.

상기 생약 혼합물의 추출물은, 어성초 100 중량부, 자소엽 20~80 중량부, 녹차 20~80 중량부 및 한련초 100~300 중량부를 포함하는 생약 혼합물을, 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출하여 제조할 수 있다.The extract of the herbal medicine mixture is prepared by mixing the herbal medicine mixture comprising 100 parts by weight of herringbone, 20 to 80 parts by weight of hemp leaflets, 20 to 80 parts by weight of green tea, and 100 to 300 parts by weight of Hansen's syrup with water, C1 to C4 lower alcohol, Followed by extraction with a mixed solvent.

본 발명은 또한 상기 어성초 100 중량부, 자소엽 20~80 중량부, 녹차 20~80 중량부 및 한련초 100~300 중량부를 포함하는 생약 혼합물의 추출물을 함유하는 탈모방지 또는 양모용 건강기능식품을 제공한다.The present invention also provides a hair-dressing preventive or health food for the wool containing an extract of a herbal medicine mixture comprising 100 parts by weight of the herringbone, 20 to 80 parts by weight of a baby leaf, 20 to 80 parts by weight of green tea, and 100 to 300 parts by weight of do.

또 다른 양태에 있어서, 본 발명은 상기 어성초 100 중량부, 자소엽 20~80 중량부, 녹차 20~80 중량부 및 한련초 100~300 중량부를 포함하는 생약 혼합물의 추출물을 함유하는 탈모방지 또는 양모용 화장료 조성물을 제공한다. In still another embodiment, the present invention provides a hair loss preventing or wooly hair treatment composition containing an extract of a herbal medicine mixture comprising 100 parts by weight of herringbone, 20 to 80 parts by weight of a baby leaf, 20 to 80 parts by weight of green tea, and 100 to 300 parts by weight of Thereby providing a cosmetic composition.

또한 상기 화장료는 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말, 젤, 솔젤, 에멀젼, 오일, 왁스 및 에어졸로 이루어진 군에서 선택되는 모발용 화장료일 수 있다. The cosmetic composition may further comprise at least one member selected from the group consisting of hair tonic, hair cream, hair lotion, hair shampoo, hair rinse, hair conditioner, hair spray, hair aerosol, pomade, powder, gel, sol gel, emulsion, oil, wax, It may be cosmetics.

또한 본 발명의 생약 혼합물의 추출물은, Further, the extract of the crude drug mixture of the present invention,

(1공정) 어성초 100 중량부, 자소엽 20~80 중량부, 녹차 20~80 중량부 및 한련초 100~300 중량부를 혼합하여 생약 혼합물을 제조하는 단계; (Step 1): A method for preparing a herbal mixture, comprising mixing 100 parts by weight of an adult plant, 20 to 80 parts by weight of a baby leaf, 20 to 80 parts by weight of a green tea, and 100 to 300 parts by weight of a herbicide.

(2공정) 상기 1공정의 생약 혼합물에, 상기 생약 혼합물 전체 중량 1~10배의 추출용매를 혼합하여 70~100℃에서 0.5~10시간 동안 추출하는 단계; 및,(Step 2) Extraction of 1 to 10 times the total weight of the crude drug mixture with the herbal mixture in the above-mentioned one step, and extraction at 70 to 100 ° C for 0.5 to 10 hours; And

(3공정) 상기 2공정의 추출물의 건더기를 제거하고 여액을 수거하는 단계;를 통해 얻을 수 있다.(Step 3) The step of removing the extract of the extract of the above two steps and collecting the filtrate can be obtained.

상기 1공정의 생약 혼합물은 어성초 100 중량부 기준으로 자소엽 20~80, 녹차 20~80 및 한련초 100~300 중량부를 혼합한 것일 수 있다. The herbal mixture in the above step may be a mixture of 20 to 80% of green lobules, 20 to 80% of green tea, and 100 to 300%

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명에서 이용되는 생약 혼합물은 어성초 100 중량부 기준으로 자소엽 20~80, 녹차 20~80 및 한련초 100~300 중량부를 혼합한 것일 수 있으며, 상기 혼합범위를 벗어나서 추출한 생약 혼합물의 추출물은 탈모방지 또는 양모효과가 좋지 않다. The herbal medicine mixture used in the present invention may be a mixture of 20 to 80% of self-lobes, 20 to 80 of green tea, and 100 to 300 parts of 100 to 300 parts by weight of Hansikucho on the basis of 100 parts by weight of the perennial herb. The extract of the herbal medicine mixture, Or the wool effect is not good.

상기 생약 혼합물의 추출물은 C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 물과의 혼합용매를 이용할 경우에는 상기 추출물을 감압농축하여 사용할 수 있다. 또한, 물을 이용하여 추출하였을 경우에는 건더기를 제거한 여액을 바로 이용할 수 있으며, 이를 감압농축한 농축액 형태로도 사용할 수 있다. 상기 C1 내지 C4의 저급 알코올은 에탄올, 메탄올, 프로판올, 이소프로판올 및 부탄올에서 1종 이상 선택될 수 있다.The extract of the crude drug mixture can be used by concentrating the extract at a reduced pressure when a C1 to C4 lower alcohol or a mixed solvent with water is used. In addition, in the case of extraction using water, the filtrate from which the mackerel has been removed can be used immediately, and it can also be used in the form of a concentrated liquid under reduced pressure. The C1 to C4 lower alcohols may be selected from one or more of ethanol, methanol, propanol, isopropanol and butanol.

또한 추출조건은 생약 혼합물에 상기 생약 혼합물 전체 중량 1~10배의 추출용매를 혼합하여 바람직하게는 50~130℃, 더 바람직하게는 70~100℃, 가장 바람직하게는 80~90℃에서 추출할 수 있다. 추출시간은 바람직하게는 0.1~10시간 동안, 더 바람직하게는 0.5~10시간 동안, 가장 바람직하게는 1~5시간 동안 추출할 수 있다. Further, the extraction conditions are such that the extraction solvent is mixed with the herbal mixture at a total weight of 1 to 10 times the weight of the herbal medicine mixture, preferably at 50 to 130 캜, more preferably at 70 to 100 캜, most preferably at 80 to 90 캜 . The extraction time can be preferably extracted for 0.1 to 10 hours, more preferably 0.5 to 10 hours, most preferably 1 to 5 hours.

상기 생약 혼합물의 추출물은 상법에 따라, 유기용매(알코올, 에테르, 아세톤 등)에 의한 추출, 헥산과 물의 분배, 칼럼크로마토그래피에 의한 방법 등, 식물체 성분의 분리 추출에 이용되는 공지의 방법을 단독 또는 적합하게 조합한 방법을 이용하여 분획 또는 정제하여 사용할 수 있다. The extract of the crude drug mixture may be isolated by known methods used for separation and extraction of plant components, such as extraction with an organic solvent (alcohol, ether, acetone, etc.), partition with hexane and water, Or may be fractionated or purified by a suitable combination method.

상기 크로마토그래피는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(silica gel column chromatography), 엘에이취-20 컬럼 크로마토그래피(LH-20 column chromatography), 이온교환수지 크로마토그래피(ion exchange resin chromatography), 중압 액체 크로마토그래피(medium pressure liquid chromatography), 박층 크로마토그래피(TLC; thin layer chromatography), 실리카겔 진공 액체 크로마토그래피(silica gel vacuum liquid chromatography) 및 고성능 액체 크로마토그래피(high performance liquid chromatography) 중에서 선택될 수 있다. The chromatography can be carried out using silica gel column chromatography, LH-20 column chromatography, ion exchange resin chromatography, medium pressure liquid chromatography chromatography, thin layer chromatography (TLC), silica gel vacuum liquid chromatography, and high performance liquid chromatography.

한편, 상기 녹차는 차로 마실 수 있는 가공된 녹차 잎을 사용할 수도 있으나, 생녹차잎을 채취하여 그늘에서 건조한 것을 바로 이용할 수도 있다. On the other hand, the green tea can be processed green tea leaves that can be drunk by tea, but it is also possible to use fresh green tea leaves in the shade.

본 발명의 바람직한 구현 예에 따르면, 본 발명의 조성물은 약학적 조성물 또는 화장료 조성물로 제공될 수 있다. According to a preferred embodiment of the present invention, the composition of the present invention may be provided as a pharmaceutical composition or a cosmetic composition.

본 발명의 약학적 조성물 또는 화장료 조성물의 적용 대상이 되는 모발로는, 두발(頭髮), 눈썹(眉毛, 미모), 속눈썹(睫毛, 첩모), 음모(陰毛), 겨드랑이털, 가슴털, 코털, 다리털 등의 각종 체모가 포함될 수 있다.Examples of the hair to which the pharmaceutical composition or cosmetic composition of the present invention is applied include head hair, eyebrows, eyelashes, pubic hair, underarm hair, chest hair, nose hair, Hair follicles and the like may be included.

본 발명의 약학적 조성물에 포함된 유효성분인 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물의 투여량(건조중량 기준)은 성인 기준으로 0.001~1000㎎/kg, 바람직하게는 0.1~1000㎎/kg, 보다 바람직하게는 1~500㎎/kg이며, 상기 투여량을 하루에 한번 또는 수회 나누어 투여할 수도 있다. 또한, 본 발명의 생약 혼합물의 추출물(건조중량 기준)은 상기 약학적 조성물 총중량에 대하여 바람직하게는 0.0001~50 중량%, 더 바람직하게는 0.001~40 중량%, 가장 바람직하게는 0.001~30 중량%가 함유될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.The dose (on a dry weight basis) of the extract of the herbal medicine mixture containing the active ingredients of the present invention as the active ingredients is from 0.001 to 1000 mg / kg, preferably from 0.1 to 1000 mg / kg, To 1000 mg / kg, more preferably 1 to 500 mg / kg, and the dose may be administered once a day or divided into several times. The extract (on a dry weight basis) of the crude drug mixture of the present invention is preferably 0.0001 to 50% by weight, more preferably 0.001 to 40% by weight, and most preferably 0.001 to 30% by weight based on the total weight of the pharmaceutical composition. But are not limited thereto.

본 발명의 조성물이 약학적 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다. 상기 약학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 정제수, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘, 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등과 같이 통상적으로 이용되는 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 바람직하게는 경구 투여 및 비경구 투여가 좋으며, 비경구 투여시 도포에 의한 국소 투여 방식으로 적용되는 것이 좋다. 또한, 상기 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. When the composition of the present invention is prepared from a pharmaceutical composition, the pharmaceutical composition of the present invention includes a pharmaceutically acceptable carrier. The pharmaceutically acceptable carriers are those conventionally used in the field of manufacture and include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, But are not limited to, polyvinylpyrrolidone, cellulose, purified water, syrup, methylcellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, mineral oil and the like. The pharmaceutical composition of the present invention may further include additives commonly used such as lubricants, wetting agents, sweetening agents, flavoring agents, emulsifying agents, suspending agents, preservatives and the like in addition to the above components. The pharmaceutical composition of the present invention is preferably oral or parenteral, and is preferably applied topically by parenteral administration. The pharmaceutical compositions may be formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral preparations, suppositories and sterilized injection solutions according to a conventional method have.

본 발명의 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다.The appropriate dosage of the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on such factors as formulation method, administration method, age, body weight, sex, pathological condition, food, administration time, route of administration, excretion rate, .

본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분인 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물 뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다. 또한, 본 발명의 조성물은 상술한 유효성분 이외에, 본 발명의 유효성분에 의한 탈모 방지 또는 양모 작용을 손상시키지 않는 한도에서 종래부터 사용되어 오던 양모제(발모제) 또는 탈모방지제를 함께 혼합하여 사용할 수 있다. 또한, 상기 담체로서, 정제수, 일가 알코올류(에탄올 또는 프로필 알코올), 다가알코올류(글리세롤, 1,3-부티렌글리콜 또는 프로필렌글리콜), 고급지방산류(팔미틸산 또는 리놀렌산), 유지류(소맥 배아유, 동백기름, 호호바유, 올리브유, 스쿠알렌, 해바라기유, 마카데미아땅콩유, 아보가드유, 또는 지방산 글리세라이드) 등을 사용할 수 있으나, 이에 한정되지는 않는다. 또한, 필요에 따라, 계면활성제, 보습제, 방부제, 산화방지제 등을 첨가할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention contains components commonly used in cosmetic compositions, as well as extracts of herbal preparations comprising the active ingredients of the herbicide, the lobule, the green tea and the medicinal herb, such as antioxidants, stabilizers, Vitamins, pigments and flavors, and carriers. Further, the composition of the present invention may be used in combination with a conventional hair-dressing agent (hair growth agent) or an anti-hair-resting agent which has been used so far as it does not impair the hair-loss prevention or wool-like action by the active ingredient of the present invention . As the carrier, there can be used water, purified water, monohydric alcohols (ethanol or propyl alcohol), polyhydric alcohols (glycerol, 1,3-butylene glycol or propylene glycol), higher fatty acids (palmitic acid or linolenic acid) But are not limited to, oil, camellia oil, jojoba oil, olive oil, squalane, sunflower oil, macadamia peanut oil, avocado oil, or fatty acid glyceride). If necessary, surfactants, moisturizers, preservatives, antioxidants and the like may be added.

본 발명의 화장료 조성물에 사용될 수 있는 계면활성제로는, 음이온계 계면활성제로서, 알킬벤젠설폰산염, 폴리옥시알킬렌알킬황산 에스테르염, 알킬황산 에스테르염, 올레핀설폰산염, 알킬인산염, 폴리옥시알킬렌알킬에테르인산염, 디알킬설포석신산염, 지방산염 등을 들 수 있고, 비이온성 계면활성제로서, 폴리옥시에틸렌알킬에테르, 폴리옥시에틸렌지방산 에스테르, 다가 알콜지방산 부분 에스테르, 폴리옥시에틸렌 다가 알콜지방산 부분 에스테르, 폴리글리세린지방산 에스테르, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 유도체, 지방산디에탄올아미드 등을 들 수 있다. 또한, 양이온성 계면활성제로서는, 3급 지방족 아민염, 알킬트리메틸암모늄할라이드, 디알킬디메틸암모늄할라이드 등을 들 수 있고, 양쪽성 계면활성제로서는, 아미드베타인형, 이미다졸리늄베타인형, 설포베타인형 등을 들 수 있다. 상기 보습제로서는, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 소르비톨 등을 들 수 있다. 상기 방부제로서는, 벤조산, 데하이드로아세트산, 파라옥시벤조산에스테르(파라옥시벤조산메틸, 파라옥시벤조산부틸 등), 페녹시에탄올 등을 들 수 있다. 또한, 상기 산화방지제로서는, 아스코르브산, BHA 등을 들 수 있으며, 이외에도, 자외선 흡수제, 소염제 및 청량제 등을 첨가할 수 있다.Examples of the surfactant that can be used in the cosmetic composition of the present invention include anionic surfactants such as alkylbenzenesulfonates, polyoxyalkylene alkylsulfate ester salts, alkylsulfate ester salts, olefin sulfonates, alkyl phosphates, polyoxyalkylene Alkyl ether phosphates, dialkyl sulfosuccinates, fatty acid salts, and the like. Nonionic surfactants include polyoxyethylene alkyl ethers, polyoxyethylene fatty acid esters, polyhydric alcohol fatty acid partial esters, polyoxyethylene polyhydric alcohol fatty acid moieties Esters, polyglycerin fatty acid esters, polyoxyethylene hydrogenated castor oil derivatives, and fatty acid diethanolamides. Examples of the cationic surfactant include tertiary aliphatic amine salts, alkyltrimethylammonium halides and dialkyldimethylammonium halides. Examples of the amphoteric surfactants include amide betaine, imidazolinium betaine, sulfobetaine, And the like. Examples of the moisturizing agent include glycerin, propylene glycol, 1,3-butylene glycol, dipropylene glycol, and sorbitol. Examples of the preservative include benzoic acid, dehydroacetic acid, paraoxybenzoic acid esters (such as methyl parahydroxybenzoate, butyl parahydroxybenzoate), and phenoxyethanol. Examples of the antioxidant include ascorbic acid and BHA. In addition, an ultraviolet absorber, an anti-inflammatory agent, and a refreshing agent may be added.

본 발명의 화장료 조성물의 제형은 그 유효성분과 배합할 수 있는 임의의 제형으로서 탈모방지 또는 발모용 화장품의 형태로는 헤어토닉, 헤어크림, 헤어로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어컨디셔너, 헤어스프레이, 헤어에어졸, 포마드, 분말, 젤 등과 같이 용액, 솔젤, 에멀젼, 오일, 왁스, 에어졸 등 다양한 형태로 제조될 수 있으나 이들로 제한되는 것은 아니다.The formulations of the cosmetic composition of the present invention may be any formulations that can be combined with the active ingredients of the hair cosmetic composition. Examples of the hair cosmetic composition include hair tonic, hair cream, hair lotion, hair shampoo, hair conditioner, hair conditioner, Hair gels, emulsions, oils, waxes, aerosols, and the like, such as hair, hair, aerosols, pomades, powders and gels.

본 발명의 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물(건조물 기준)은 상기 화장료 조성물 총중량에 대하여 바람직하게는 0.0001~50 중량%, 더 바람직하게는 0.001~40 중량%, 가장 바람직하게는 0.001~30 중량%가 함유될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.The extract (on a dry matter basis) of the herbal medicine mixture comprising the herbal composition, the natural lobule, the green tea and the medicinal herb of the present invention is preferably 0.0001 to 50% by weight, more preferably 0.001 to 40% by weight, But it is not limited thereto.

본 발명의 화장료 조성물은 매일 사용할 수 있으며 또한 정해지지 않은 기간 동안에도 사용할 수 있다. 바람직하게는 사용자의 연령, 피부상태 또는 피부타입, 펩타이드의 농도에 따라 사용량, 사용횟수 및 기간을 조절할 수 있다. The cosmetic composition of the present invention can be used everyday or can be used for an unspecified period. Preferably, the amount of usage, the number of times of use, and the period of time can be adjusted according to the user's age, skin condition or skin type, and the concentration of the peptide.

본 발명은 또한 상기 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물을 함유하는 탈모방지 또는 양모용 건강기능식품을 제공한다. 상기 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성식품류 등이 있다. The present invention also provides a hair-loss-preventing or wool-health functional food containing an extract of a herbal medicine mixture comprising the above-mentioned herbal composition, female lobule, green tea, and hanuksikcho. The health functional food includes forms such as tablets, capsules, pills, and liquids. Examples of the foods to which the extract of the present invention can be added include various foods, beverages, gums, tea, Functional foods.

한편, 본 발명의 생약혼합물의 추출물이 함유된 탈모방지 또는 양모용 조성물, 약학조성물 또는 건강기능식품은 건조물 형태로 제조될 수도 있으며, 추출액으로 제조된 상태로 그대로 이용할 수 있다. 추출액 상태인 것을 바로 이용할 경우, 파우치 형태에 멸균 포장되어 복용하거나 탈모부위에 도포하기 용이한 형태로서 제공될 수도 있다.The composition for hair loss prevention or wool, the pharmaceutical composition or the health functional food containing the extract of the herbal medicine mixture of the present invention may be in the form of a dried product or may be used as it is in the form of an extract. If it is used directly in an extractive state, it may be provided as a form which is sterilized packaged in a pouch form and is easily taken or applied to a hair loss region.

본 발명은 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 상기 조성물은 사람 모유두 세포의 성장, 분열 촉진 효과와 동물에 대한 양모 효과가 우수하여 탈모방지 또는 양모용 약학 조성물, 건강기능식품, 화장료로서 용이하게 사용가능하다. The present invention relates to a composition containing an extract of a herbal medicine mixture comprising a herbal composition, a lobule, a green leaf, a green tea, and a herbal composition, wherein the composition is excellent in growth and cleavage promotion effect of human dermal papilla cells, A pharmaceutical composition for wool, a health functional food, and a cosmetic composition.

한편, 한국등록특허 제1261321호에는 녹차가 일부 구성성분으로 포함된 샴푸조성물이 개시되어 있고, 한국등록특허 1322926호에는 한련초 추출물의 탈모방지 및 발모촉진 효과가 개시되어 있으며, 한국공개특허 2011-0112019호에는 녹차, 어성초, 한련초가 포함된 발효물이 탈모 방지 및 발모 촉진용 모발 화장료에 포함될 수 있음이 나타나 있으며, 한국공개특허 2011-0104196호에는 한련초가 일부 구성성분으로 포함된 탈모 방지 또는 육모 촉진을 위한 조성물이 개시되어 있으나 본원발명과 같이 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초가 모두 포함된 생약 혼합물의 추출물이 탈모를 억제하고 양모 효과가 있음은 상기 선행문헌에는 개시되어 있지 않다.Korean Patent No. 1261321 discloses a shampoo composition in which green tea is included as a constituent component, Korean Patent No. 1322926 discloses the effect of preventing the hair loss and promoting the hair growth of the myrtle plant extract, and Korean Patent Publication No. 2011-0112019 It is indicated that the fermented product including green tea, hwaseongcho, and hanchikcho can be included in the hair cosmetic for preventing hair loss and promoting hair growth, and Korean Patent Publication No. 2011-0104196 discloses that the hanwoncho contains anti- However, it is not disclosed in the prior art that the extract of the herbal medicine mixture containing all of Hwasungsuja, Liliaceae, Green tea, and Hanshikwoo inhibits hair loss and has a wool effect as in the present invention.

도 1은 본 발명의 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물을 제조하는 공정을 나타내는 순서도이다. BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a flow chart showing a process for producing an extract of a herbal medicine mixture comprising a herbal composition, a lobule, a green tea, and a herb medicine.

이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지고, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다. Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail. However, the present invention is not limited to the embodiments described herein but may be embodied in other forms. Rather, the intention is to provide an exhaustive, complete, and complete disclosure of the principles of the invention to those skilled in the art.

<실시예 1. 어성초, 자소엽, 녹차 및 한련초를 포함하는 생약 혼합물의 추출물의 제조><Example 1: Preparation of an extract of crude drug mixture containing Rhizobium, Rhizobia, Green tea,

하기 표 1의 생약 혼합물을 물 2kg과 혼합하여 90℃에서 4시간 동안 한약 추출기를 이용하여 추출하였고, 건더기를 제거하여 각각의 생약 혼합물의 추출물을 얻었다. 이 때 생약 혼합물의 총 중량은 400g으로 통일하였다. 상기 추출물 제조용 생약들은 건조된 것을 사용하였다. The crude drug mixture of Table 1 below was mixed with 2 kg of water and extracted with a herbal extractor at 90 ° C for 4 hours. The extract was obtained by removing the mackerel. At this time, the total weight of the crude drug mixture was unified to 400 g. The herbal medicine for the preparation of the extract was dried.

조건Condition 어성초(g)Goshencho (g) 자소엽(g)Lobulus (g) 녹차(g)Green tea (g) 한련초(g)Hansik Cho (g) 총계(g)Total (g) 실시예 1-1Example 1-1 100100 5050 5050 200200 400400 실시예 1-2Examples 1-2 130130 7070 7070 130130 400400 실시예 1-3Example 1-3 100100 2020 2020 260260 400400 실시예 1-4Examples 1-4 100100 8080 8080 140140 400400 실시예 1-5Examples 1-5 100100 2020 2020 260260 400400

<< 비교예Comparative Example 1. 비교대상 추출물의 제조> 1. Preparation of comparative extracts>

하기 표 2의 생약 혼합물을 물 2kg과 혼합하여 90℃에서 4시간 동안 한약 추출기를 이용하여 추출하였고, 건더기를 제거하여 각각의 생약 혼합물의 추출물을 얻었다. 이 때 생약 혼합물의 총 중량은 400g으로 통일하였다.The crude drug mixture shown in Table 2 below was mixed with 2 kg of water and extracted with a herbal extractor at 90 ° C for 4 hours. The extracts of each herbal mixture were obtained by removing the mackerel. At this time, the total weight of the crude drug mixture was unified to 400 g.

조건Condition 어성초(g)Goshencho (g) 자소엽(g)Lobulus (g) 녹차(g)Green tea (g) 한련초(g)Hansik Cho (g) 총계(g)Total (g) 비교예 1-1Comparative Example 1-1 400400 00 00 00 400400 비교예 1-2Comparative Example 1-2 00 400400 00 00 400400 비교예 1-3Comparative Example 1-3 00 00 400400 00 400400 비교예 1-4Comparative Example 1-4 00 00 00 400400 400400 비교예 1-5Comparative Example 1-5 200200 200200 00 00 400400 비교예 1-6Comparative Example 1-6 200200 00 200200 00 400400 비교예 1-7Comparative Example 1-7 200200 00 00 200200 400400 비교예 1-8Comparative Example 1-8 00 200200 200200 00 400400 비교예 1-9Comparative Example 1-9 130130 130130 140140 00 400400 비교예 1-10Comparative Example 1-10 130130 130130 00 140140 400400 비교예 1-11Comparative Example 1-11 130130 00 130130 140140 400400 비교예 1-12Comparative Example 1-12 100100 1010 1010 280280 400400 비교예 1-13Comparative Example 1-13 100100 170170 8080 5050 400400 비교예 1-14Comparative Example 1-14 1010 5050 200200 140140 400400

<실험예 1. 사람 모유두 세포의 성장 및 분열 촉진 효과>EXPERIMENTAL EXAMPLE 1 Growth and Cleavage Promoting Effect of Human Dermal Papilla Cells [

사람의 모유두 세포(Human Follicle dermal papilla cell:HFDPC)는 성형 수술의 부산물로 생긴 사람 두피로부터 분리 및 배양된 모유두 세포를 사용한다. 사람 모유두 세포는 10% FBS(Gibco BRL)가 포함된 DMEM(Cambrex)을 배지로 하여, 37℃, 5% CO2의 조건에서 인큐베이터에서 배양하였다.Human dermal papilla cells (HFDPC) use dermal papilla cells isolated and cultured from human scalp, which is a byproduct of plastic surgery. Human dermal papilla cells were incubated in DMEM (Cambrex) medium containing 10% FBS (Gibco BRL) at 37 ° C and 5% CO 2 in an incubator.

본 발명의 추출물들을 처리하기 위해, 사람 모유두 세포를 세포 배양용 96 웰 플레이트에 3,000개의 세포수로 일정하게 분주하여 0.1% FBS가 함유된 DMEM 배지에서 5시간 동안 37℃, 5% CO2 조건으로 인큐베이터에서 배양되었다. 실시예 1 및 비교예 1의 추출물을 동결건조한 후, 세포배양 배지에 최종 농도가 1㎍/㎖이 되도록 처리한 후 3~5일 동안 37℃, 5% CO2 조건으로 인큐베이터에서 배양하였다. 이 후 PBS 및 냉장보관된 5% TCA로 세포들을 세척한 후 0.1N NaOH, 1% SDS(sodium dodecyl sulfate) 용액으로 세포를 파쇄하고, liquid scintillation counter(Beckman)를 이용하여 세포 파쇄 용액에 포함된 방사능 활성을 측정하였으며, 상기 결과는 표 3에 나타내었다.To treat the extracts of the present invention, human dermal papilla cells were seeded at a constant density of 3,000 cells in a 96-well plate for cell culture and cultured in DMEM medium containing 0.1% FBS for 5 hours at 37 ° C under 5% CO 2 And incubated in an incubator. The extracts of Example 1 and Comparative Example 1 were lyophilized and then treated in a cell culture medium to a final concentration of 1 μg / ml and then incubated in an incubator at 37 ° C. and 5% CO 2 for 3 to 5 days. Cells were washed with PBS and chilled 5% TCA and then disrupted with 0.1 N NaOH and 1% SDS (sodium dodecyl sulfate) solution. Cells were disrupted using a liquid scintillation counter (Beckman) The radioactivity was measured and the results are shown in Table 3.

추출물 처리 조건Extract treatment conditions 대조군 대비 추출물 처리군의
사람모유두세포 증가율 (%)
In the control group,
Human dermal papilla cell growth rate (%)
실시예 1-1Example 1-1 190190 실시예 1-2Examples 1-2 185185 실시예 1-3Example 1-3 194194 실시예 1-4Examples 1-4 213213 실시예 1-5Examples 1-5 210210 비교예 1-1Comparative Example 1-1 121121 비교예 1-2Comparative Example 1-2 135135 비교예 1-3Comparative Example 1-3 129129 비교예 1-4Comparative Example 1-4 110110 비교예 1-5Comparative Example 1-5 121121 비교예 1-6Comparative Example 1-6 142142 비교예 1-7Comparative Example 1-7 135135 비교예 1-8Comparative Example 1-8 128128 비교예 1-9Comparative Example 1-9 119119 비교예 1-10Comparative Example 1-10 110110 비교예 1-11Comparative Example 1-11 125125 비교예 1-12Comparative Example 1-12 120120 비교예 1-13Comparative Example 1-13 138138 비교예 1-14Comparative Example 1-14 148148 대조군Control group 100100

상기 표 3을 참고하면, 본 발명의 추출물들이 대조군(무처리군)과 비교예 1보다 사람모유두 세포의 증식율이 뛰어난 것을 알 수 있어, 발모 또는 탈모방지 효과가 더 우수함을 확인할 수 있다.As shown in Table 3, it can be seen that the extracts of the present invention are superior to the control (untreated group) and the control group 1 in the proliferation rate of human dermal papilla cells, and thus the hair or hair loss prevention effect is more excellent.

<실험예 2. 발모효과 시험><Experimental Example 2> Hair growth test>

C57BL/6 쥐의 경우 모발의 성장기와 쇠퇴기가 생후 6-7주 후에 비교적 동일하게 발생되므로 발모 실험에 효과적인 모델이다. 이 동물모델에 실시예 1-1 및 1-2와 비교예 1-1, 비교예 1-5 및 비교예 1-9의 추출물을 선택적으로 처리하여 발모효과를 확인하였다. In C57BL / 6 mice, hair growth and decay are comparable after 6-7 weeks of age, which is an effective model for hair growth experiments. The extracts of Examples 1-1 and 1-2, Comparative Example 1-1, Comparative Example 1-5 and Comparative Example 1-9 were selectively treated with this animal model to confirm the hair growth effect.

생후 6주령 된 암컷 C57BL/6 쥐를, 1주일간 사육 환경에 적응시킨 후(12시간 낮/12시간 밤, 온도 24 , 습도 40~50% , 먹이와 물은 자유 섭취), 7주령이 되었을 때 제모기를 이용하여 쥐 등 부위를 고르게 제모하였다. 실시예 1-1 및 1-2와 비교예 1-1, 비교예 1-5 및 비교예 1-9의 추출물을 동결건조한 후, 100㎍/㎖ 희석액으로 제조하여, 매일 2회 쥐 표피에 도포하였고, 양성대조군에는 1%(w/v) 미녹시딜 희석액, 음성대조군에는 물만 도포하였다. 이 후 30일간 관찰한 후 발모 양상의 변화를 확인하였으며, 상기 결과는 표 4에 나타내었다. Six-week old female C57BL / 6 rats were adapted to the breeding environment for one week (12 hours / 12 hours at night, 24 hours, 40-50% humidity, free access to food and water) The epidermis was evenly depilated using an epilator. The extracts of Examples 1-1 and 1-2 and Comparative Example 1-1, Comparative Example 1-5 and Comparative Example 1-9 were lyophilized, and then prepared as a 100 μg / ml dilution. The extracts were applied twice daily to the rat epidermis , 1% (w / v) minoxidil diluent in the positive control group, and water only in the negative control group. After 30 days of observation, changes in the hair growth pattern were observed. The results are shown in Table 4.

추출물 처리 조건Extract treatment conditions 미녹시딜 희석액 대비
추출물 처리군의 발모량 (%)
Preparation of Minoxidil Diluent
The amount of hair growth in the extract-treated group (%)
실시예 1-1Example 1-1 9595 실시예 1-2Examples 1-2 9393 비교예 1-1Comparative Example 1-1 3535 비교예 1-5Comparative Example 1-5 4141 비교예 1-9Comparative Example 1-9 4545 비교예 1-11Comparative Example 1-11 4242 양성대조군 : 1%(w/v 미녹시딜 희석액)Positive control: 1% (w / v minoxidil diluent) 100100 음성대조군Negative control group 2929

표 4를 참고하면, 본 발명의 생약 혼합물의 추출물 처리시, 모든 개체(n=5)에서 우수한 발모효과가 있음을 확인할 수 있다. Referring to Table 4, it can be seen that when the extract of the herbal medicine mixture of the present invention is treated, excellent hair growth effect is obtained in all individuals (n = 5).

<실험예 2. 생약혼합물의 추출물의 복용에 따른 탈모방지 및 양모효과 확인><Experimental Example 2: Prevention of hair loss and confirmation of wool effect by taking extract of crude drug mixture>

실시예 1 및 비교예 1의 각 추출물 별로 2013년 9월부터 피부과를 방문 중인 30~50대의 남성형 탈모가 진행되고 있는 환자들에게 각 그룹별로 5명씩 상기 추출물을 40일간, 매일 하루 3번 110㎖씩 식전 30분에 복용하게 하고 동일한 시간에 5~10㎖씩 탈모가 진행되는 부위에 도포하게 하였으며, 40일간의 복용 및 도포 후, 하기 표 5에 5점 타점법(5점 : 아주우수함, 4점 : 우수함, 3점 : 보통, 2점 : 나쁨, 1점 : 아주나쁨)으로 탈모방지 및 양모효과를 나타내게 하였다. For each of the extracts of Example 1 and Comparative Example 1, patients who were in the dermatology department in their 30s to 50s visiting dermatologists from Sep. 2013, the extracts were divided into 5 groups each for 40 days, 110ml three times daily (5 points: excellent, 4 points) in the following Table 5 after taking and applying for 40 days. The results are shown in Table 5 below. Point: excellent, 3 points: normal, 2 points: poor, 1 point: very poor) to prevent hair loss and wool effect.

조건Condition 탈모방지 및 양모효과Hair loss prevention and wool effect 실시예 1-1Example 1-1 3.93.9 실시예 1-2Examples 1-2 4.14.1 실시예 1-3Example 1-3 4.04.0 실시예 1-4Examples 1-4 4.24.2 실시예 1-5Examples 1-5 4.14.1 비교예 1-1Comparative Example 1-1 2.42.4 비교예 1-2Comparative Example 1-2 2.32.3 비교예 1-3Comparative Example 1-3 2.82.8 비교예 1-4Comparative Example 1-4 2.62.6 비교예 1-5Comparative Example 1-5 2.92.9 비교예 1-6Comparative Example 1-6 2.82.8 비교예 1-7Comparative Example 1-7 2.72.7 비교예 1-8Comparative Example 1-8 3.03.0 비교예 1-9Comparative Example 1-9 3.13.1 비교예 1-10Comparative Example 1-10 3.13.1 비교예 1-11Comparative Example 1-11 2.92.9 비교예 1-12Comparative Example 1-12 2.82.8 비교예 1-13Comparative Example 1-13 3.03.0 비교예 1-14Comparative Example 1-14 3.03.0 5점 : 아주우수함, 4점 : 우수함, 3점 : 보통, 2점 : 나쁨, 1점 : 아주나쁨 5 points: Excellent, 4 points: Excellent, 3 points: Normal, 2 points: Poor, 1 point: Very poor

표 5를 참고하면, 본 발명의 생약 혼합물의 추출물은 탈모방지 및 양모효과가 매우 우수한 것으로 나타난다. Referring to Table 5, the extract of the crude drug mixture of the present invention shows excellent hair loss prevention and wool effect.

<실험예 3. 독성실험> <Experimental Example 3> Toxicity test>

실험예 3-1. 급성독성Experimental Example 3-1. Acute toxicity

본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물)을 단기간에 과량을 섭취하였을 때 급성적(24시간 이내)으로 동물체내에 미치는 독성을 조사하고, 치사율을 결정하기 위하여 본 실험을 수행하였다. 일반적인 마우스인 ICR 마우스 계통 20마리를 대조군과 실험군에 각각 10마리씩 배정하였다. 대조군에는 PEG-400/tween-80/EtOH(8/1/1, v/v/v) 만을 투여하고, 실험군은 본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물을 상기 PEG-400/tween-80/EtOH(8/1/1, v/v/v)에 녹여 각각 경구투여하였다. 투여 24시간 후에 각각의 치사율을 조사한 결과, 대조군과 2g/㎏/day 농도의 본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물을 투여한 실험군에서 마우스가 모두 생존하는 것으로 확인되었다.To examine the toxicity of the herbal mixture (lyophilized product) obtained in Example 1-1 of the present invention to the animal body in an acute manner (within 24 hours) when an excessive amount of the herbal extract (lyophilisate) was consumed in a short period of time, Respectively. Twenty ICR mice were injected into each of the control and experimental groups. In the control group, only the PEG-400 / tween-80 / EtOH (8/1/1, v / v / v) -80 / EtOH (8/1/1, v / v / v) for oral administration. As a result, the mice were found to survive in the control group and in the experimental group to which the extract of the crude drug mixture of Example 1-1 of the present invention was administered at a concentration of 2 g / kg / day.

실험예 3-2. 실험군 및 대조군의 장기 및 조직 독성 실험Experimental Example 3-2. Organ organs toxicity test in experimental group and control group

장기 독성 실험은 본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물)을 각 농도로 8주 동안 C57BL/6J 마우스(각 군당 10마리)에 투여하여 실험하였다. 동물의 각 장기(조직)에 미치는 영향을 조사하기 위하여 본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물을 투여한 실험군과 PEG-400/tween-80/EtOH(8/1/1, v/v/v)만을 투여한 대조군의 동물들로부터 8주 후 혈액을 채취하여 GPT(glutamate-pyruvate transferase) 및 BUN(blood urea nitrogen)의 혈액 내 농도를 Select E(Vital Scientific NV, Netherland) 기기를 이용하여 측정하였다. 그 결과, 간독성과 관계있는 것으로 알려진 GPT와 신장독성과 관계있는 것으로 알려진 BUN의 경우, 대조군과 비교하여 실험군은 별다른 차이를 보이지 않았다. 또한, 각 동물로부터 간과 신장을 절취하여 통상적인 조직절편 제작과정을 거쳐 광학현미경으로 조직학적 관찰을 시행하였으며 모든 조직에서 특이한 이상이 관찰되지 않았다. In the long-term toxicity test, the extract (lyophilisate) of the crude drug mixture of Example 1-1 of the present invention was administered to C57BL / 6J mice (10 rats per group) for 8 weeks at each concentration. In order to investigate the effect on the organs (tissues) of the animals, the experimental group to which the extract of the crude drug mixture of Example 1-1 of the present invention was administered and the PEG-400 / tween-80 / EtOH (8/1/1, v / 8 weeks after the administration of v / v alone, the blood was collected and the concentration of glutamate-pyruvate transferase (GPT) and blood urea nitrogen (BUN) in the blood was measured using a Select E (Vital Scientific NV, Respectively. As a result, GPT, which is known to be related to hepatotoxicity, and BUN, which is known to be related to renal toxicity, showed no significant difference compared to the control group. In addition, liver and kidney were cut from each animal, followed by a general tissue section preparation, histological observation with an optical microscope, and no abnormalities were observed in all tissues.

<제형예 1: 피부외용 연고의 제조>&Lt; Formulation Example 1: Preparation of external ointment for skin &

하기 표 6과 같은 조성으로 피부외용 연고를 통상의 방법에 따라 조제하였다. Skin external ointment was prepared according to a conventional method with the composition shown in Table 6 below.

성분명Ingredients 첨가량 (중량%)Addition amount (% by weight) 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물)The extract (lyophilized product) of the crude drug mixture of Example 1-1 1.01.0 S-니트로소글루타치온S-nitrosoglutathione 0.040.04 히알루론산Hyaluronic acid 3.03.0 레시틴lecithin 3.03.0 디에틸세바케이트Diethyl sebacate 8.08.0 경납Nonsense 5.05.0 폴리옥시에틸렌올레일에테르 포스페이트Polyoxyethylene oleyl ether phosphate 6.06.0 파라옥시안식향산에스테르Paraoxybenzoic acid ester 적량Suitable amount 바셀린vaseline up to 100up to 100

<제형예 2. 샴푸의 제조>&Lt; Formulation Example 2: Preparation of shampoo &

하기 표 7과 같은 조성으로 샴푸를 통상의 방법에 따라 제조하였다. Shampoos were prepared according to the usual methods with the compositions shown in Table 7 below.

성분명Ingredients 첨가량 (중량%)Addition amount (% by weight) 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물)The extract (lyophilized product) of the crude drug mixture of Example 1-1 0.010.01 S-니트로소글루타치온S-nitrosoglutathione 0.040.04 히알루론산Hyaluronic acid 1.51.5 레시틴lecithin 3.03.0 30% 라우릴황산나트륨 30% sodium lauryl sulfate 20.020.0 30% 폴리옥시에틸렌라우릴황산나트륨 30% sodium polyoxyethylene lauryl sulfate 20.020.0 야자유지방산디에탄올아미드Coconut oil fatty acid diethanolamide 2.002.00 프로필렌글리콜Propylene glycol 2.002.00 코카미도프로필베타인Cocamidopropyl betaine 3.003.00 카르복시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.300.30 폴리쿼터늄-10Polyquaternium-10 0.500.50 파라옥시안식향산에스테르Paraoxybenzoic acid ester 0.200.20 구연산Citric acid 적량Suitable amount 향료Spices 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance

<< 제형예Formulation Example 3. 헤어토닉의 제조> 3. Manufacture of hair tonic>

하기 표 8과 같은 조성으로 헤어토닉을 통상의 방법으로 제조하였다.doing A hair tonic was prepared by the usual method with the composition shown in Table 8.

성분명Ingredients 첨가량 (중량%)Addition amount (% by weight) 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물)The extract (lyophilized product) of the crude drug mixture of Example 1-1 0.10.1 S-니트로소글루타치온S-nitrosoglutathione 0.040.04 히알루론산Hyaluronic acid 1.51.5 레시틴lecithin 3.03.0 에탄올ethanol 50.0050.00 L-멘톨L-menthol 0.100.10 D-판테놀D-Panthenol 0.200.20 글리세린glycerin 3.003.00 살리실산Salicylic acid 0.100.10 토포케릴 아세테이트Topoceryl acetate 0.100.10 폴리옥시에칠렌경화피마자유Polyoxyethylene hardened castor oil 0.500.50 향료Spices 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량Balance

<제제예 2 : 식품 제조>&Lt; Formulation Example 2: Food Preparation >

2-1. 조리용 양념의 제조2-1. Manufacture of cooking seasonings

본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물)을 조리용 양념에 1 중량%로 첨가하여 건강 증진용 조리용 양념을 제조하였다.The lyophilized mixture extract (lyophilized product) of Example 1-1 of the present invention was added to the cooking seasoning at 1 wt% to prepare a cooking sauce for health promotion.

2-2. 밀가루 식품의 제조2-2. Manufacture of flour food products

본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물)을 밀가루에 0.1 중량%로 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.(Lyophilized product) of the crude drug mixture of Example 1-1 of the present invention was added to flour at 0.1 wt%, and bread, cake, cookies, crackers and noodles were prepared using this mixture to prepare health promotion foods Respectively.

2-3. 스프 및 육즙(gravies)의 제조2-3. Manufacture of soups and gravies

본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물)을 스프 및 육즙에 0.1 중량%로 첨가하여 건강 증진용 수프 및 육즙을 제조하였다.The health enhancing soup and the juice were prepared by adding the extract (lyophilized product) of the crude drug mixture of Example 1-1 of the present invention to the soup and juice at 0.1 wt%.

2-4. 유제품(dairy products)의 제조2-4. Manufacture of dairy products

본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물)을 우유에 0.1 중량%로 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.The lyophilized mixture extract (lyophilized product) of Example 1-1 of the present invention was added to milk in an amount of 0.1% by weight, and various dairy products such as butter and ice cream were prepared using the milk.

2-5. 야채주스 제조2-5. Vegetable juice manufacturing

본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물) 0.5g을 토마토주스 또는 당근주스 1,000㎖에 가하여 건강 증진용 야채주스를 제조하였다.0.5 g of the herbal mixture extract (lyophilized product) of Example 1-1 of the present invention was added to 1,000 ml of tomato juice or carrot juice to prepare vegetable juice for health promotion.

2-6. 과일주스 제조2-6. Manufacture of fruit juice

본 발명의 실시예 1-1의 생약 혼합물의 추출물(동결건조물) 0.1g을 사과주스 또는 포도주스 1,000㎖에 가하여 건강 증진용 과일주스를 제조하였다.
0.1 g of the herbal mixture extract (lyophilized product) of Example 1-1 of the present invention was added to 1,000 ml of apple juice or grape juice to prepare fruit juice for health promotion.

Claims (4)

어성초 100 중량부, 자소엽 80 중량부, 녹차 80 중량부 및 한련초 140 중량부를 혼합하여 70~100℃에서 0.5~10시간 동안 추출한 생약 혼합물의 물 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 양모용 조성물.Characterized in that it contains a water extract of a herbal mixture which is obtained by mixing 100 parts by weight of herringbone, 80 parts by weight of green tea, 80 parts by weight of green tea and 140 parts by weight of herbal tea at 70 to 100 ° C for 0.5 to 10 hours Composition. 어성초 100 중량부, 자소엽 80 중량부, 녹차 80 중량부 및 한련초 140 중량부를 혼합하여 70~100℃에서 0.5~10시간 동안 추출한 생약 혼합물의 물 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 양모용 건강기능식품.Characterized in that it contains a water extract of a herbal mixture which is obtained by mixing 100 parts by weight of herringbone, 80 parts by weight of green tea, 80 parts by weight of green tea and 140 parts by weight of herbal tea at 70 to 100 ° C for 0.5 to 10 hours Health functional foods. 어성초 100 중량부, 자소엽 80 중량부, 녹차 80 중량부 및 한련초 140 중량부를 혼합하여 70~100℃에서 0.5~10시간 동안 추출한 생약 혼합물의 물 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 탈모방지 또는 양모용 화장료 조성물.Characterized in that it contains a water extract of a herbal mixture which is obtained by mixing 100 parts by weight of herringbone, 80 parts by weight of green tea, 80 parts by weight of green tea and 140 parts by weight of herbal tea at 70 to 100 ° C for 0.5 to 10 hours Cosmetic composition. (1공정) 어성초 100 중량부, 자소엽 80 중량부, 녹차 80 중량부 및 한련초 140 중량부를 혼합하여 생약 혼합물을 제조하는 단계;
(2공정) 상기 1공정의 생약 혼합물에, 상기 생약 혼합물 전체 중량 1~10배의 물을 혼합하여 70~100℃에서 0.5~10시간 동안 추출하는 단계; 및,
(3공정) 상기 2공정에서 추출한 생약 혼합물의 물 추출물의 건더기를 제거하고 여액을 수거하는 단계; 를 포함하는 생약 혼합물의 물 추출물 제조방법.
(Step 1): 100 parts by weight of Horseshoe cherry, 80 parts by weight of hemp leaf, 80 parts by weight of green tea, and 140 parts by weight of Hansikuchoshi, to prepare a herbal mixture;
(Step 2) Mixing the herbal medicine mixture of the above one step with water having a total weight of 1 to 10 times the total weight of the herbal medicine mixture and extracting the mixture at 70 to 100 ° C for 0.5 to 10 hours; And
(Step 3) removing the gut of the water extract of the crude drug mixture extracted in the above two steps and collecting the filtrate; &Lt; / RTI &gt;
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