KR101682071B1 - 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 담쟁이넝쿨 열매 추출물의 제조방법 및 이를 주요 활성성분으로 함유하는 노화 방지 및, 피부 미백 기능을 갖는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 좀 더 구체적으로는 용매를 이용한 추출물의 제조, 농축 및 동결건조를 포함하는 담쟁이넝쿨 열매 추출물 제조방법 및 이를 통해 제조된 추출물 0.001 - 30.0중량%를 함유하며 노화방지 효과와 피부 미백 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 의하면 담쟁이넝쿨 열매 추출물은 라디칼 소거효과를 나타내었으며, 티로시나제 활성 저해 효과를 나타낼 뿐만 아니라 피부 잔주름 개선효과, 미백효과가 효과적인 미백 및 항노화 기능성 화장료를 제공할 수 있다.

Description

담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유하는 화장료 조성물 {A cosmetic composition containing extract of Parthenocissus tricuspidata (S. et Z.) PLANCH}

본 발명은 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 주요 활성성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 좀 더 구체적으로는 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 활성성분으로 0.001 ~ 1.0중량%로 함유하는 것을 특징으로 하는 항산화효과, 주름방지효과, 미백효과, 피부 자극완화 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.

사람의 피부는 나이를 먹으면서 피부 노화와 색소 침착에 의해 끊임없이 변한다. 이러한 피부색을 결정하는 인자에는 기본적으로 인종과 지역, 성별, 나이에 따른 차이를 배제하면 기미, 주근깨와 자외선 노출로 인한 태닝과 같은 부분, 또는 전체적인 색소침착, 그 외에 여드름 및 흉터, 각질의 분포 상태와 혈액 순환, 스트레스, 건강상태 등이 있다. 이상의 인자들 가운데에서도 가장 중요한 인자는 색소 침착이다.

피부색에 영향을 주는 색소로는 멜라닌, 카로틴, 헤모글로빈 등이 있는데 이중 가장 중요한 것은 멜라닌으로 생합성에 영향을 미치는 가장 큰 요인은 자외선과 체내 호르몬 분비 정도이다. 멜라닌의 생합성은 아미노산의 일종인 티로신이 멜라노사이트의 멜라노좀에서 티로시나제(tyrosinase)에 의해 산화되어 디하이드록시 페닐알라닌(dihydroxy phenylalanine)으로 전환되는 것을 시작으로 계속되는 일련의 산화과정을 거쳐 갈색(pheomelanin),흑색(eumelanin)의 중합체로 형성된다. 이러한 생합성 과정은 멜라노좀이라는 특수한 형태의 갈색 세포내 소기관에서 진행되며 멜라닌 과립을 포함한 멜라노좀은 핵 주변 부위에서 수지상 돌기 끝부분으로 이동, 케라티노사이트의 식세포작용에 의해 세포질 내로 이동하고 이들은 케라티노사이트의 핵 주변에 축적된다. 멜라닌의 합성과 멜라노좀의 수, 주위의 케라티노사이트로의 이동은 일차적으로는 유전적 영향을 크게 받으며 부분적으로는 호르몬과 자외선 등에 영향을 받는다. 그 밖에 티로시나제의 발현 및 멜라닌의 합성, 전송에 관여하는 세포내 조절인자인 싸이토카인(cytokine), 구리, 아연, 철 등의 금속 이온 및 인터페론, 프로스타글란딘, 히스타민 등이 관여하는 것으로 알려져 있다(박수남 : 대한화장품학회지, 25: 77-127, 1999). 그러나, 멜라닌이 과잉생산되면 기미, 주근깨 등을 형성하고 피부노화를 촉진하며 피부암 유발에 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 멜라닌 과잉생산을 예방하기 위한 연구개발이 활발히 진행되고 있다. 이미 아스코르빈산(일본특개평 4-9320), 하이드로퀴논(일본특개평 6-192062), 코직산(일본특개소 56-7710), 알부틴(일본특개평 4-93150)및 식물 추출물 등이 티로시나제 저해 활성을 나타내어 미백 화장료로 이용되고 있으나 화장품 제형 중에서의 안정성이 나빠 분해되어 착색되거나, 이취가 발생하거나, 생체 수준에서의 효능, 효과가 불분명하거나 또는 안전성이 문제가 되어 그 사용이 제한되고 있는 실정이다. 따라서 피부색을 결정짓는 멜라닌의 합성을 억제하고 이에 관여하는 효소인 티로시나제의 활성을 억제하여 피부의 미백효과를 기대할 수 있다.

다음으로, 피부색과 함께의 노화의 특징을 나타내는 인자는 주름의 생성과 탄력의 저하이다. 피부노화는 내인성노화(intrinsic, chronological aging)와 광노화(phtoaging) 두 가지로 나눌 수 있다[Gilchrest BA: J. Am. Acad. Dermatol.,21, 610-613(1989)]. 내인성 노화는 연령이 증가함에 따라 생체의 생리적인 기능이 저하되어 자연적으로 유발되는 노화현상이다[Braverman IM 등: J. Invest. Dermatol., 78, 434-443(1982)]. 광노화는 피부가 광에 반복적으로 노출되어 피부의 외양 또는 기능이 변화되는 것을 의미한다[Ridder GM등: J. Am. Acad. Dermatol., 25, 751-760(1991)]. 또한, 피부노화는 자외선, 스트레스, 질병상태, 환경인자, 상처, 나이가 들어감에 따라 활성산소종이 활성화되어 야기될 수 있으며, 이런 상태가 심화될 경우 생체 내에 존재하는 항산화 방어망을 파괴하고, 세포 및 조직을 손상시켜 성인병 및 노화를 촉진하게 된다. 좀 더 구체적으로 말하자면, 피부의 주요 구성물질인 지질, 단백질, 다당류 및 핵산 등이 산화되어 피부세포 및 조직이 파괴되고, 결국 피부노화 현상이 생겨나는 것이다. 특히 단백질의 산화는 피부의 결합조직인 콜라겐, 히알루론산, 엘라스틴, 프로테오글라이칸, 피브로넥틴 등이 절단되어 심한 과다 염증반응과 피부의 탄력에 지장을 주게 되고 이것이 더 심해질 경우 DNA의 변이에 의해 돌연변이, 암의 유발, 면역기능 저하의 사태에 이르게 된다. 그러므로 신체의 대사 과정 중 발생하는 활성산소종이나 자외선 조사, 염증반응에 의해 매개되는 활성산소종을 소거하여 세포막을 보호하고, 또 이미 손상 받은 세포는 활발한 신진대사에 의해 재생화시켜서 세포를 증식시켜야 피부는 빠르게 회복되고 건강한 피부를 유지할 수 있다.

본 발명은 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 담쟁이넝쿨 열매 추출물의 화장료 원료로서의 효능을 확인하고, 우수한 티로시나제 억제효과로 인한 피부 미백 효과와 항산화 효과, 피부 주름의 개선효과가 우수한 화장료 조성물을 제공함을 목적으로 한다.

이에 본 발명자들은 오랜 연구 끝에 갈매나무목 포도과의 덩굴식물인 담쟁이넝쿨 열매 천연물을 선정하고 이로부터 추출물을 제조하여, 이 추출물에 대하여 티로시나제 활성 억제효과와 활성산소 소거효과, 피부주름의 개선효과를 실험한 결과 바람직한 결과를 얻고, 미백효과와 노화방지 화장료 조성물로서의 효능을 기대할 수 있다는 것을 발견하게 되었다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부자극이 없으면서도 멜라닌의 생성 및 이와 관련된 효소의 활성을 억제하여 우수한 피부 미백효과와 항산화 효과, 피부주름의 개선효과를 나타낸다.

본 발명의 조성물에 사용되는 원료인 담쟁이넝쿨 열매(Parthenocissus tricuspidata (S. et Z.) PLANCH)는 갈매나무목 포도과의 덩굴식물인 담쟁이의 열매로 돌담이나 바위 또는 나무줄기에 붙어서 자라는 식물이다. 열매는 둥근 장과로 백분으로 덮여 있으며 지름이 6~8mm로서 8~10월에 검게 익는다.

본 발명은 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유하는 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명에서 "화장료"라 함은 피부에 적용하여 주름 개선, 미백, 여드름 예방 및 치료, 육모, 탈모 예방 또는 치료 등의 목적으로 사용되는 화장품, 기능성 화장품 및 의약품, 의약부외품을 포함하는 의미로 사용하였다.

본 발명의 담쟁이넝쿨 열매 추출물은 추출용매로서 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄 및 헥산 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하여 추출한 것을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 추출물이 상온에서 냉침, 가열 여과하여 얻어진 액상물, 추가로 용매를 감압농축 또는 동결건조하여 얻은 것임을 특징으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 담쟁이넝쿨 열매 추출물의 함량이 피부 외용제 조성물 전체에 대해서 건조 중량 기준 0.001~30.0중량%인 것을 특징으로 한다. 상기 추출물의 함량이 0.001중량% 미만인 경우에는 피부개선 효과가 거의 없으며, 30.0중량%을 초과하는 경우에는 함유량 증가에 대한 효과 증대 정도가 미미하여 경제적이지 못하다.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 좀더 구체적으로 설명한다. 단, 이들 실시예는 본 발명의 예시적인 기재일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되는 것은 아니다.

실시예 1: 담쟁이넝쿨 열매 추출물 제조

세절한 담쟁이넝쿨 열매를 70%(v/v) 에탄올 수용액으로 6시간 환류추출하고 냉침한 후, 와트만(Whatman) #5 여과지로 여과하였다. 여과된 추출물은 50℃ 이하에서 감압농축 및 동결건조하여 분말상의 추출물을 제조하였다.

실시예 2: 세포독성 평가

수득한 담쟁이넝쿨 열매추출물(실시예 1)의 피부세포에 대한 세포독성을 평가하였다.

96웰 시험 플레이트에 세포배양 배지(DMEM에10% FBS가 첨가된 것)에 희석된 섬유아세포(fibroblast)를 1x10⁵cells/㎖씩 넣고 24시간 동안 부착하였다. 각 웰에 실시예 1에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 적절한 농도로 희석하여 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. 24시간이 지나면 배지를 제거하고, 각 웰 당 MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide) 용액(2.5㎎/㎖)이 함유된 세포배양 배지 200㎕를 넣은 후 2시간 동안 37℃ CO₂ 배양기에서 배양하였다. 배지를 제거하고 DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 100㎕씩 넣어주었다. 5분간 진탕하여 세포를 용해시킨 후, 마이크로플레이트 판독기에서 565㎚ 흡광도를 측정하였다. 수학식 1에 의해 세포생존율(%)을 정하였으며, 세포의 생존에 영향을 미치지 않는 담쟁이넝쿨 열매 추출물의 농도를 결정하였다.

Bo : 세포배양배지만을 발색 반응한 웰의 565 ㎚ 흡광값

Bt : 시료를 처리하지 않고 발색 반응한 웰의 565 ㎚ 흡광값

St : 시료를 처리하고 발색 반응한 웰의 565 ㎚ 흡광값

표 1에서 확인할 수 있듯이 각 시료의 피부 섬유아세포의 100% 생존 처리농도는 실시예 1의 담쟁이넝쿨 열매 추출물이 2% 이하로, 세포 독성은 거의 없는것을 확인할 수 있었다. 이는 일반적으로 화장품에 사용되는 농도를 고려하였을 때 피부 자극 유발 가능성이 거의 없는 안전한 시료인 것을 말해준다.

시료명	100% 세포 생존 농도
실시예 1의 담쟁이넝쿨 열매 추출물	2%

실시예 3: NBT 법을 이용한 항산화 효과 측정 실험

실시예 1에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물의 항산화 효과를 확인하기 위해 실험실 조건에서 항산화제로 잘 알려진 녹차추출물을 비교샘플로 하고 NBT(Nitro Blue Tetrazolium)법을 이용하여 항산화 활성을 측정하였다.

항산화 효과를 측정하기 위해서 잔틴과 잔틴옥시다제에 의해 생성되는 활성산소를 NBT법에 의해 측정하고 피검물질이 활성산소를 제거하는 효과, 즉 활성산소 소거효과를 평가하였다. 잔틴과 잔틴옥시다제에 의해 활성산소를 생성하였다. 이 활성산소가 니트로블루테트라졸리움(Nitro Blue Tetrazolium;NBT)과 반응하여 이것에 의해 생성되는 청색을 파장 560nm에서 측정하는 것으로 활성산소 소거율을 측정하였다.

0.05M Na₂CO₃(2.4㎖), 3mM 잔틴 용액(0.1㎖), 3mM EDTA 용액(0.1㎖), BSA 용액(0.1㎖), 0.72mM NBT 용액(0.1㎖)를 가하고 여기에 시료용액 0.1㎖을 첨가하고 25℃에서 10분간 방치하였다. 잔틴 옥시다제 용액(0.1㎖)을 가하여 빨리 교반하고 25℃에서 20분간의 배양을 개시하였다. 그 후 6mM CuCl₂ 용액(0.1㎖)을 가하여 반응을 정지시키고 560nm에서의 흡광도 St를 측정하였다. 공시험은 시료용액 대신에 증류수를 사용한 것을 상기와 똑같이 조작해 흡광도 Bt를 측정하였다. 역시, 시료용액의 블랭크(Blank)는 효소 대신에 증류수를 사용해 똑같이 조작하여 흡광도 Bo를 측정하였다.

억제율은 수학식 2에 의하여 산출하였으며, 그 결과는 표 2에 나타내었다.

St : 시료용액의 효소 반응 후 560nm 흡광도

Bt : 공시험용액의 효소 반응 후 560nm 흡광도

So : 시료용액의 효소 무첨가시 반응전 560nm 흡광도

Bo : 공시험용액의 효소 무첨가시 반응전 560nm 흡광도

표 2와 같이, 담쟁이넝쿨 열매 추출물은 우수한 항산화 활성을 나타내었으며, 항산화 활성이 우수한 녹차추출물과 유사하게 우수한 항산화 효과를 나타냄을 알 수 있었다.

시료명	함량	항산화효과 (%)
실시예 1의 추출물	0.2중량%	92.35
실시예 1의 추출물	0.1중량%	89.74
실시예 1의 추출물	0.05중량%	88.21
실시예 1의 추출물	0.005중량%	38.97
녹차 추출물	0.2중량%	95.41

실시예 4: 자유라디칼 소거활성 측정 실험

실시예 1에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물의 자유라디칼 소거활성을 측정하기 위해 실험실 조건에서 녹차추출물 같은 우수한 항산화활성을 갖는 추출물을 비교샘플로 하고 DPPH법을 이용하여 자유라디칼 소거활성을 측정하였다.

DPPH(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl free radical)라는 유리기를 사용하여 환원력에 의한 자유라디칼 소거활성을 측정하였다. 피검물질에 의해 DPPH가 환원되어 흡광도가 감소하는 정도를 공시험액의 흡광도와 비교하여 파장 560nm에서 자유라디칼 소거율을 측정하였다.

DPPH 자유라디칼 소거활성 측정을 위하여 0.2%, 0.1%, 0.05%, 0.005% 농도의 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 준비하였다. 상기 농도의 추출물을 96웰 플레이트에 각각 넣고, 여기에 100uM 메탄올용액으로 제조된 DPPH를 첨가하여 용액의 총 부피가 200㎕가 되도록 하였다. 이것을 37℃에서 30분간 방치한 후 560nm에서 흡광도를 측정하였다. 자유라디칼 소거활성(%)은 다음의 수학식 3으로 산출하였다.

A: 본 발명의 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 처리하지 않은 대조군 웰의 흡광도

B: 본 발명의 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 처리한 실험군 웰의 흡광도

표 3에서 확인할 수 있듯이 실시예 1의 담쟁이넝쿨 열매 추출물은 우수한 자유라디칼 소거활성을 나타내며, 항산화활성이 우수한 녹차추출물과 보다 우수한 항산화 효과를 나타냄을 알 수 있었다.

시료명	함량	항산화효과 (%)
실시예 1의 추출물	0.2중량%	83.865
실시예 1의 추출물	0.1중량%	90.071
실시예 1의 추출물	0.05중량%	88.475
실시예 1의 추출물	0.005중량%	88.652
녹차 추출물	0.2중량%	89.894

실시예 5: 티로시나제 억제효과 측정 실험

본 실시예는 실시예 1에서 수득한 시료의 미백효과를 확인하기 위해 티로시나제(tyrosinase)라는 효소의 기능이 억제되는 정도를 보고 미백효과를 평가한 것이다.

티로시나제는 생체내에서 티로신(tyrosine)이라는 물질의 산화과정을 촉진하여 멜라닌이 생성되게 도와주는 효소이다. 본 실시예에서는 이 효소의 기능을 억제하여 티로신이 산화되어 멜라닌이라는 흑색의 고분자를 형성하는 것을 억제하는 정도를 측정하는 방법(Pomerantz S. H.: J. Biochem., 24: 161 - 168, 1996)을 응용하여 미백효과를 평가하였다.

각 시료들의 티로시나제에 대한 저해활성은 시료 15㎕를 96 웰 플레이트에 넣고, 50mM 인산 완충액(pH 6.5) 150㎕, 1.5mM L-티로신 용액 25㎕를 넣은 후, 머쉬룸 티로시나제(1,500units/㎖, Sigma사) 10㎕를 첨가하여 37℃에서 20분간 반응 시킨 후, 마이크로플레이트 판독기(microplate reader, ELx800, 미국)를 사용하여 490nm에서 흡광도를 측정하여 티로시나제에 대한 저해율을 측정하였다. 티로시나제에 대한 저해율(%)은 수학식 4에 따라 계산하였으며, IC₅₀값은 티로시나제 효소 활성을 50% 저해하는 물질의 농도이다.

A : 시료를 넣은 웰의 반응 전 흡광도

B : 시료를 넣은 웰의 반응 후 흡광도

C : 시료를 넣지 않은 웰의 반응 전 흡광도

D : 시료를 넣지 않은 웰의 반응 후 흡광도

티로시나제 활성 억제효과를 시험한 결과, 표 4에서 확인할 수 있듯이 실시예 1 담쟁이넝쿨 열매 추출물의 IC₅₀값은 0.89%로 나타나 기존에 알려진 미백제인 알부틴과 유사한 티로시나제 활성 억제 효과를 나타내었다.(표 4)

시료명	티로시나제 저해 효과 (IC50)
실시예 1의 추출물	0.89%
알부틴	0.51%

실시예 6: B16F1 멜라노싸이트를 이용한 멜라닌 합성억제 실험

본 실시예는 실시예 1에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물의 미백효과를 확인하기 위해 B16F1 멜라노싸이트에 대한 멜라닌 생성 억제 정도를 보고 미백 효과를 판단한 것이다. 본 실시예에 사용된 B16F1 멜라노싸이트는 마우스에서 유래한 세포균주이며, 멜라닌이라는 흑색색소를 분비하는 세포이다. 이 세포의 인공배양 중에 시료를 처리하여 멜라닌색소가 감소하는 정도를 비교 평가하였다. 본 실시예에 사용된 B16F1 멜라노싸이트는 ATCC(American Type Culture Collection, 기탁번호: 6323)로부터 분양받아 사용하였다. B16F1 멜라노싸이트의 멜라닌 생합성 억제효과 측정은 다음과 같이 행하였다. B16F1 멜라노싸이트를 6 웰 플레이트에 각 웰당 2x10⁶ cells/㎖ 농도로 분주하고 세포를 부착시킨 후 독성을 유발하지 않는 농도로 시료를 처리하여 72시간 동안 배양하였다. 72시간 배양 후 세포를 트립신(trypsin)-EDTA로 떼어낸 후 세포수를 측정한 다음 원심분리하여 세포를 회수하였다. 세포 내 멜라닌의 정량은 로탄[Lotan : Cancer Res., 40, 3345-3350(1980)]의 방법을 약간 변형하여 실시하였다. 셀 펠릿을 PBS(phosphate buffered saline)로 1회 세척한 후 균질화 완충액(50mM 소듐 포스페이트, pH 6.8, 1% Triton X-100, 2mM PMSF(phenylmethanesulphonylfluoride)) 1㎖를 첨가하여 5분간 와류하여 세포를 파쇄하였다. 원심분리(3,000rpm, 10분)하여 얻은 세포여액에 1N NaOH{10% DMSO(Dimethyl sulfoxide) 포함}를 첨가하여 추출된 멜라닌을 용해한 후 마이크로 플레이트 판독기로 405㎚에서 멜라닌의 흡광도를 측정한 다음 멜라닌을 정량하여 시료의 멜라닌 생성 저해율(%)을 측정하였다. B16F1 멜라노싸이트의 멜라닌 생성 저해율(%)은 수학식 5에 의하여 계산하였으며, IC50값은 멜라닌 생성을 50% 저해하는 물질의 농도이다.

A : 시료를 첨가하지 않은 웰의 멜라닌 양

B : 시료를 첨가한 웰의 멜라닌 양

B16F1 멜라노사이트의 멜라닌 생성 억제효과를 시험한 결과 담쟁이넝툴 열매 추출물의 IC50값은 0.2%로 기존의 미백제인 알부틴, 유용성 감초 추출물, 상백피 추출물 등에 비해 유사하거나 우수한 효과를 나타내었다(표 5).

시료명	처리농도(%)	멜라닌 합성 저해효과(%)
실시예 1의 추출물	0.1	0.2%
알부틴	0.1	0.2%
상백피 추출물	0.1	5%
유용성 감초 추출물	0.1	0.03%

실시예 7: 피부 탄력 개선 및 주름 개선 효과 시험

본 실시예는 상기 실시예 1에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 화장료를 제조하여 사람을 대상으로 피부 탄력 개선 효과 및 주름 개선 효과를 비교예 1과 비교실험을 행하여 평가하였다.

비교실험에 사용된 화장료는 크림형태이고, 그 조성은 표 6에 나타낸 바와 같다. 우선 표 6에 기록되어 있는 나)상을 가열하여 70℃에 보존하였다. 이것에 가)상을 가하여 예비유화 후 호모믹서로 균일하게 유화하고 다음에 서서히 냉각하여 크림(실시예 7, 비교예 1)을 제조하였다. 실험자(20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 7에서 제조된 크림을, 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1에서 제조된 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. 실험 완료 후 피부 탄력 개선 효과는 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 피부탄력측정기(cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 측정하였다. 실험결과는 하기 표 7에 Cutometer SEM 575의 △R7값으로 기재하였는데 R7값은 피부의 점탄성(viscoelasticity) 성질을 나타낸다.

표 7과 같이, 실시예 1의 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 크림은 피부 탄력 개선효과가 우수함을 알 수 있다.

구 분		실시예 7	비교예 1
가	스테아릴 알콜	8	8
	스테아린산	2	2
	스테아린산 콜레스테롤	2	2
	스쿠알란	4	4
	2-옥틸도레실알콜	6	6
	폴리옥시에틸렌(25몰부가)알콜에스테르	3	3
	글리세릴모노스테아린산아스테르	2	2
나	담쟁이넝쿨 열매 추출물	0.2	-
	프로필렌글리콜	5	5
	정제수	잔량	잔량

주)단위 : 중량%

실험제품	피부탄력효과 (R7)
실시예 7	0.39
비교예1	0.17

n=20, p<0.05

실험자(20세~35세의 여성) 15명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 7에서 제조된 크림을 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1에서 제조된 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. 실험 완료 후 피부 주름 개선 효과는 제품 사용 전과 2개월간 사용 후에 피부의 주름개선효과를 알아보기 위하여 실리콘 재질의 모사판(replica)을 제작하여 지정 부위의 주름의 상태를 화상분석기인 비지오미터(visiometer: SV60, C+K Electronic Co., Germany)로 측정하였다. 그 결과는 표 8에 나타내었으며, 이 결과는 2개월 후의 각각의 파라미터 값에서 2개월 전 파라미터 값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다. 즉, 이 값이 음수로 나올수록 주름 개선효과가 높다는 것을 의미한다. 표 8과 같이, 실시예 1의 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 실시예 7의 크림은 피부 주름 개선 효과가 크게 증진되었음을 확인할 수 있었다.

실험제품	R1	R2	R3
실시예 7	-0.23	-0.19	-0.16
비교예 1	-0.11	-0.07	-0.09

R1: 주름 등고선의 최고치와 최저치의 차이값

R2: 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값들의 평균

R3: 5개씩 나눈 R1값 중 최고치

실시예8 : 미백효능 임상 평가

본 실시예는 실시예 7에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 크림 제형의 화장료를 사용하여 사람을 대상으로 피부 미백효과를 비교예 1과 비교실험을 행하여 평가하였다. 실험자 (20세~35세의 여성) 20명을 대상으로 얼굴 오른쪽 부위에는 실시예 7에서 제조된 크림을, 얼굴 왼쪽 부위에는 비교예 1에서 제조된 크림을 각각 1일 2회씩 연속 2개월간 도포하였다. 시험 완료 후 얼굴 좌우 양편의 도포 부위 피부를 화상분석기 및 피부색의 변화를 크로마메타(Minolta CR300)를 이용하여 색의 밝기변화(L)를 측정하고, 복수의 숙련자에 의한 객관적 육안 관찰과 피검자에 의한 주관적 육안관찰을 실시하여 하기 등급 분류에 따라 효과를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다. 이때 미백효능 정도를 다음의 7등급으로 분류하여 평가하였다.

미백 효능 육안 평가 기준 :

-3: 매우 악화

-2: 악화

-1: 약간 악화

0: 변화 없음

1: 약간 개선

2: 개선

3: 매우 개선

표 9에서 나타낸 바와 같이 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 안면 피부에서 미백효과가 우수함을 알 수 있다.

	피부색의 밝기 변화(L)		숙련자의 객관적 평가		피검자의 주관적 평가
	실시예 7	비교예 1	실시예 7	비교예 1	실시예 7	비교예 1
평균값	6.21	3.25	2.5	1.5	2.6	1.7

이하에 그 외의 실시예를 나타내었다. 즉, 실시예 1에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 화장수, 유액 및 미용액을 실시예 9 내지 11에서 제조하였다. 이들 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 화장수, 유액 및 미용액은 활성산소 소거효과 뿐만 아니라 피부 잔주름 개선효과, 미백효과 등 피부 노화 방지 및 개선에 우수한 효과를 나타내었다.

실시예 9: 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 화장수 제조

95% 에탄올 8g에 폴리피로리돈 0.05g, 올레일알콜 0.1g, 폴리옥시에틸렌모노올레이트 0.2g, 향료 0.2g, 파라옥시안식향산메틸에스테르 0.1g, 소량의 산화방지제, 소량의 색소를 혼합용해 한다. 실시예 1에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물 10g, 글리세린 5g을 정제수 85.33g에 용해한 것에 상기 혼합액을 첨가한 후 교반하여 피부개선효과가 있는 화장수를 얻었다.

실시예 10: 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 유액 제조

세틸알콜 1.2g, 스쿠알란 10g, 바세린 2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.2g, 글리세린모노에스테아레이드 1g, 폴리옥시에틸렌(20몰 부가)모노올레이트 1g및 향료 0.1g을 70℃에서 가열혼합용해하고, 실시예 1에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물 0.5g, 디프로필렌글리콜 5g, 폴리에틸렌글리콜-1500 2g, 트리에탄올아민 0.2g, 정제수 76.2g을 75℃로 가열해서 용해시킨다. 양자를 혼합하여 유화시킨 후 냉각하여 수중유(O/W)형의 피부개선효과가 있는 유액을 얻었다.

실시예 11: 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 함유한 미용액 제조

95% 에틸알콜 5g에 폴리옥시에틸렌솔비탄모노올레이트 1.2g, 키툴로오즈 0.3g, 히아루론산나트륨 0.2g, 비타민 E-아세테이트 0.2g, 감초산 나트륨 0.2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.1g, 실시예 1에서 수득한 담쟁이넝쿨 열매 추출물 1g 및 적량의 색소를 혼합하여 피부개선효과가 있는 미용액을 얻었다.

Claims (9)

1. 담쟁이넝쿨 열매(Parthenocissus tricuspidata (S. et Z.) PLANCH) 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 효능을 갖는 화장료 조성물.
2. 청구항 1에 있어서,
   상기 화장료 조성물은 담쟁이넝쿨 열매 추출물을 조성물 전체에 대하여 0.001 ~ 30.0중량%로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
3. 청구항 1에 있어서,
   상기 담쟁이넝쿨 열매 추출물은 정제수, 메탄올, 에탄올, 글리세린, 에틸아세테이트, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 디클로로메탄 또는 헥산 중에서 선택된 1종 이상의 용매를 사용하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
4. 삭제
5. 청구항 1에 있어서,
   상기 화장료 조성물의 제형은 화장수, 젤, 수용성 리퀴드, 크림, 에센스, 수중유(O/W)형 또는 유중수(W/O)형의 제형의 화장료 조성물 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
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