KR101652073B1 - 멀꿀 추출물을 함유하는 전립선 질환의 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 종래 치료제의 부작용이나 약물 내성을 유발하지 않고, 독성이 낮아 장기 투여가 가능하며 효능이 우수한 전립선 질환의 예방 및 치료/증상개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 멀꿀 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 전립선 질환의 예방 및 치료/증상개선용 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 종래 치료제의 부작용이나 약물 내성을 유발하지 않고, 독성이 낮아 장기 투여가 가능하며 전립선 질환의 예방 및 치료/증상개선에 효능이 우수한 조성물에 관한 것이다.
전립선은 샘조직과 섬유근조직으로 구성된 부속 생식샘으로 정액을 생성, 분비하는 역할을 한다. 전립선에서 만들어진 전립선액은 정소에서 만들어져서 이동해 온 정자에게 영양을 공급하며, 사정된 정액이 굳지 않도록 액체 상태를 유지시킴으로써 정자가 활발하게 운동할 수 있도록 돕는다. 대표적인 전립선 관련 질환으로는 전립선 비대증, 전립선 암 및 전립선염을 들 수 있다.
전립선 비대증(Benign prostatic hyperplasia, BPH)은 성인 남성에게 흔하게 나타나는 질병의 하나로 50세 이상의 남성의 50%, 80세 이상의 남성의 80% 이상이 이환되는 것으로 보고되고 있어 남성 요로 장애 중 가장 높은 빈도를 차지한다. 한국의 전립선 비대증 환자의 수는 2006년 45만9천명 정도에서 2011년 84만2천명으로 83.5%의 증가율을 나타내며 최근 그 발병이 급속히 증가하고 있다.
일반적으로 성인의 전립선의 크기는 20g 정도이나, 전립선이 비 정상적인 크기로 비대해져 40~400g의 크기로 커지게 되면, 가까이 있는 요로를 압박하여 하루 8회 이상 소변을 보는 빈뇨, 야간 빈뇨, 강하고 갑작스런 요의를 느끼면서 소변이 마려우면 참을 수 없는 절박뇨 등의 방광 저장 증상과 소변을 볼 때 뜸을 들여야 소변이 나오는 지연뇨나 소변의 흐름이 끊기는 단절뇨, 비뇨 시 힘을 주어야 하는 현상 등 방광의 배출 장애 증상이 나타나게 된다. 전립성 비대증을 가진 환자들은 요로폐색이나 기타 합병증이 없으면 외과적 치료를 할 필요는 없으나 80세까지 약 50% 정도는 치료가 필요한 실정이다. 또한 전립성 비대증의 환자 중 일부가 전립선 암과 관련되어 있으며, 그 자체가 치명적인 질환은 아니지만 삶의 질을 저하시킨다는 점에서 초고령화 사회로 진입하고 있는 현 사회의 중요한 의료문제로 대두되고 있다.
전립선 비대증의 치료방법은 초기에는 거의 수술을 수행하였으나, 80년대 후반부터는 약물 투여방법으로 급속도로 변화하고 있다. 그러나 종래 전립성 비대증의 치료에 사용되는 약물들은 많은 부작용을 나타내고 있고 그 효능에 한계가 있어, 부작용이나 약물 내성을 유발하지 않고, 치료효과가 우수한 새로운 치료제의 개발이 필요하다.
전립선암은 서양의 경우 남성암 중 가장 흔한 암으로 높은 발생 빈도를 보이며, 우리나라의 경우에도 그 빈도가 급격히 증가하고 있다. 전립선암의 치료는 병의 진행단계에 따라 차이가 있는데, 국소암의 경우 근본적인 치료를 목적으로 치료를 하지만 전이암의 경우에는 전신치료를 시행하게 된다. 국소성 전립선암의 치료를 위해서는 대기요법, 근치적 전립선 적출술, 방사선 요법을 환자의 연령, 건강상태, 성기능 상태, 종양의 병기와 분화도, 환자의 선호도 등을 고려하여 선택할 수 있다. 전이성 전립선암은 호르몬 치료나, 항암요법을 시행할 수 있다.
전립선염은 전립선에 염증이 생기는 질병으로, 성인 남성의 약 50%가 평생동안 한번은 증상을 경험한다고 할 정도로 흔한 질환이다. 요로계 감염 시 세균이 요도를 통해 직접 감염이 되는 경우가 가장 흔하며, 이 외에도 전립선액의 배설장애, 전립선 내로의 요 역류, 치질이나 대장염과 같은 염증의 전염 등으로도 야기될 수 있다.
상기 전립선암, 전립선 비대증, 전립선염과 같은 전립선 질환은 남성호르몬인 안드로겐과 연관이 있기 때문에 안드로겐 수용체의 발현을 억제하는 항안드로겐 약물에 의해 질환의 치료와 예방 효과 또는 증상의 완화 효과를 얻을 수 있다. 또는 전립선 특이항원의 발현을 억제하는 전립선 특이항원 억제제 역시 전립선 특이항원의 영향을 받는 상기 전립선 질환의 예방 및 치료/증상 개선에 효과가 있다.
한편, 멀꿀은 우리나라의 전남, 경남, 충남 등 남쪽지방의 계곡이나 숲 속에서 볼 수 있으며, 으름덩굴과의 상록 덩굴식물로 학명은 Stauntonia Hexaphylla이다. 줄기와, 잎, 뿌리는 약재로 사용하며, 항염증, 해열, 진통효과가 뛰어난 것으로 알려져 있다. 또한 심장이 약하거나 불완전할 때 기능을 정상으로 돌이키는 데 사용하는 강심제나, 체내의 불필요한 수분의 배출을 촉진하는 이뇨제로도 사용된다. 이외에도 피하지방 축적의 억제, 관절질환, 자궁근종이나 안면신경통 등에도 효과가 있다고 알려져 있으나 전립선 관련 질환에 대한 효과는 알려져 있지 않다.
본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제를 해결하기 위하여, 전립선 질환의 예방 및 치료/증상개선에 효과적인 새로운 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한 본 발명은 독성이 없고 인체에 대한 안정성이 확보되어 부작용이나 약물내성이 없이 안전하게 사용할 수 있는 전립선 질환의 예방 및 치료/증상개선용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
전술한 목적을 달성하기 위한 본 발명은 멀꿀 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 전립선 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
멀꿀 추출물은 전립선 질환의 실험모델로 통상적으로 사용되는 전립선암 세포주인 LNCap 세포를 사용한 안드로겐 수용체(AR) 및 전립선 특이항원(PSA)의 발현 측정에서, PSA와 AR의 발현을 효과적으로 억제하여 전립선 질환의 예방 및 치료에 효과가 있음을 나타내었다. 특히 상기 전립선 질환은 전립선암, 전립선 비대증 또는 전립선염일 수 있다.
상기 멀꿀 추출물은 멀꿀의 잎, 줄기, 수피 또는 열매를 생으로 또는 건조하여 C1~C4의 저급 알콜과 물 중 하나 또는 둘 이상의 혼합물을 사용하여 10~100℃에서 추출하여 제조할 수 있다. 추출 온도가 너무 낮으면 추출 효율이 저하되며, 추출과정의 온도가 너무 높은 경우 유효물질의 활성이 저하될 수 있으므로 온도는 30~80℃에서 추출하는 것이 더욱 바람직하였다. 추출은 단순히 용매에 침지하는 것에 의해 이루어질 수 있으나, 단시간 내에 추출 효율을 높일 수 있도록 하기 실시예와 같이 초음파를 사용하거나 가온, 교반하며 추출할 수도 있다. 또한 추출이 더욱 효율적일 수 있도록 멀꿀 시료는 작은 조각으로 분쇄 또는 마쇄하여 추출할 수도 있다. 상기 추출 시 용매의 양은 멀꿀 중량의 2~50배의 부피비로 사용할 수 있다. 용매의 사용량이 증가할수록 추출 효율이 증가하므로 50배보다 많은 용매를 사용한다고 해서 문제가 되는 것은 아니지만, 공정의 효율성이나 경제성을 고려한다면 용매의 양은 50배 이하인 것이 바람직하다. 또한 동일한 양의 용매를 사용하면서도 추출 효율을 증가시키기 위해서는 추출 회수를 증가시키는 것이 좋다.
본 발명의 조성물을 예방 및 치료용 약제로 이용하기 위해서는 약제학적 분야에서 공지의 방법에 의하여 그 자체 또는 약학적으로 허용되는 담체(carrier), 부형제(forming agent), 희석제 등과 혼합하여 정제, 캅셀제, 트로키제, 액제, 현탁제 등의 경구투여용 제제 또는 주사용 제제나 비말제 등의 비경구투여용 제제로 제형화하여 전립선 질환의 치료 및 예방제로 사용할 수 있다. 본 발명에 따른 유효성분의 투여량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 제제의 형태, 투여경로, 치료받을 대상의 연령, 체중, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태의 종류 및 질환 또는 병리상태의 심각도 등에 따라 처방자의 판단에 따라 적절히 선택될 수 있으며, 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 일반적인 투여량은 0.001mg/kg·일~10g/kg·일이다. 본 발명의 조성물은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 예방 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 멀꿀 추출물을 유효성분으로 포함하는 전립선 질환의 예방 및 증상개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다. 상기 멀꿀 추출물은 본 발명의 건강기능식품에 바람직하게는 0.01~100 중량%로 하여 첨가될 수 있다. 본 발명의 건강기능식품은 정제, 캡슐제, 환제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능성식품류 등이 있다.
이상과 같이 본 발명의 조성물에 의하면 안드로겐 수용체 및 전립선 특이항원의 발현 저해 효과가 우수하여 전립선 질환의 예방 및 치료/증상개선에 효과적으로 이용될 수 있다.
또한 본 발명의 조성물은 오랜기간 전립선 질환 이외의 질병의 치료를 위한 대체요법에 이용되어온 소재를 이용한 조성물로서, 인체에 대한 안정성이 확보되어 있어 독성이나 부작용에 대한 우려없이 안전하게 사용할 수 있으며, 약물 내성을 유발하지 않아 전립선 질환의 치료에 더욱 효과적이다.
도 1은 멀꿀 추출물이 LNCap 세포에서 PSA와 AR 발현 억제효과를 나타냄을 보여주는 웨스턴 블랏 결과 이미지.
도 2는 멀꿀 추출물이 LNCap 세포에서 PSA 발현 억제효과를 나타냄을 보여주는 그래프.
도 3은 멀꿀 추출물이 LNCap 세포에서 AR 발현 억제효과를 나타냄을 보여주는 그래프.
도 2는 멀꿀 추출물이 LNCap 세포에서 PSA 발현 억제효과를 나타냄을 보여주는 그래프.
도 3은 멀꿀 추출물이 LNCap 세포에서 AR 발현 억제효과를 나타냄을 보여주는 그래프.
이하 첨부된 실시예를 들어 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 이러한 실시예는 본 발명의 기술적 사상의 내용과 범위를 쉽게 설명하기 위한 예시일 뿐, 이에 의해 본 발명의 기술적 범위가 한정되거나 변경되는 것은 아니다. 또한 이러한 예시에 기초하여 본 발명의 기술적 사상의 범위 안에서 다양한 변형과 변경이 가능함은 당업자에게는 당연할 것이다.
실시예
실시예 1 : 멀꿀 추출물의 제조
멀꿀 추출물은 한국식물추출물은행에서 분양받아 사용하였다. 구체적인 추출방법은 다음과 같다. 건조된 멀꿀 잎 20g에 메탄올 300ml를 넣고 소니케이션(sonication)에 의해 3시간 동안 저온추출하였다. 이후 얻어진 추출물을 여과지로 여과하였으며, 여과 잔사를 메탄올 300ml로 3시간 동안 저온추출하고 여과하는 과정을 추가로 2회 반복하였다. 추출이 완료되면 여액을 합하여 감압농축하여 1.88g의 추출물을 얻었다.
실시예 2 : 멀꿀 추출물의 PSA와 AR 발현 억제 효과 평가
하기 실험에 의해 멀꿀 추출물이 전립선 특이항원과 안드로겐 수용체의 발현에 미치는 영향을 확인하였다.
남성 호르몬 의존성 사람 전립선 암 세포주인 LNCaP세포(ATCC, USA)를 6 웰 플레이트에 1X106 cells/well의 농도로 도말하여 15시간동안 37℃에서 배양하였다. 배양 세포에 Testosterone 1μM과 함께 멀꿀 추출물을 10, 100 또는 200㎍/㎖의 농도로 처리하고 72시간 추가로 배양한 후 수거하였다. 양성 대조군(BPH)으로는 멀꿀 추출물은 처리하지 않고 Testosterone 1μM만을 처리하였으며, 대조군(Fina)으로는 멀꿀 추출물 대신 전립선 비대증 치료제인 Finasteride 10μM을 Testosterone 1μM과 함께 처리하였다. 무처리군을 음성 대조군(Control)으로 하였다.
배양 후 수거한 세포에 RIPA buffer(50 mM Tris-HCl, pH 8.0, with 150 mM sodium chloride, 1% NP-40, 0.5% sodium deoxycholate, and 0.1% sodium dodecyl sulfate, with a protease inhibitor cocktail)를 처리하고 12,000rpm의 속도로 20분간 원심분리 하여 단백질을 분리 하였다. 분리된 단백질은 BCA(Bicinchoninic acid) 방법으로 정량하였다.
정량한 단백질 중 10㎍을 SDS-PEGE gel에 처리하여 전기영동을 실시한 후 PVDF 멤브레인에 단백질을 옮겨 놓았다. 그 후 PVDF 멤브레인을 5% skim milk에 1시간정도 반응시켜 표면의 비특이적 결합 단백질들을 제거 시키고 1차 항체인 AR과 PSA, 그리고 β-actin을 각각 1:2000, 1:1000, 1:5000으로 희석하여 4℃에서 하루동안 반응시켰다. 그 후 2차 항체(Anti-goat; 1: 5000, Santacruz, CA, USA , Anti-Rabbit, 1:5000, Abfrontier, Seoul, Korea)를 1시간동안 상온에서 처리하고 ECL kit(Amersham, UK)를 이용하여 AR과 PSA의 단백질 발현을 확인 하였다.
도 1은 PSA와 AR 단백질에 대한 웨스턴 블랏팅 결과를 보여주는 전기영동 사진이며, 도 2와 도 3은 각각 대조군 및 실험군에서의 PSA와 AR 단백질의 발현 정도를 그래프로 나타낸 것이다.
도 1 내지 도 3으로부터 멀꿀 추출물은 testosterone에 의한 PSA와 AR의 발현을 농도 의존적으로 억제함을 확인할 수 있었다. 멀꿀 추출물은 특히 AR 발현 억제효과가 더욱 현저하여 10㎍/㎖의 낮은 농도에서는 종래 전립선 질환 치료제로 알려진 Finasteride에 비해 우수한 효과를 나타내었으며, 200㎍/㎖의 처리 시에는 PSA의 발현에 대해서도 Finasteride에 비해 현저한 억제효과를 나타내었다.
Claims (4)
- 멀꿀 추출물을 유효성분으로 함유하는 전립선암, 전립선 비대증 또는 전립선염의 예방 및 치료용 약학 조성물.
- 삭제
- 제 1 항에 있어서,
상기 멀꿀 추출물은 잎, 줄기, 수피 또는 열매를 생으로 또는 건조하여 물과 C1~C4의 저급 알콜로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 또는 둘 이상의 혼합물을 용매로 사용하여 추출한 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
- 멀꿀 추출물을 유효성분으로 함유하는 전립선암, 전립선 비대증 또는 전립선염의 예방 및 증상 개선용 식품 조성물.
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