KR101635373B1 - 공액 고분자 나노 입자 및 이의 제조 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 공액 고분자 나노 입자 및 이의 제조 방법에 관한 것으로서, 상기 공액 고분자 나노 입자는 공액 고분자, 지방산(fatty acid) 및 양친매성 고분자를 포함한다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 중성 환경에서도 도핑될 수 있어, 생체 내에서와 같은 중성 환경에서도 전기전도도가 높고, 근적외선 영역에서의 높은 흡광 특성을 가질 수 있다.

Description

공액 고분자 나노 입자 및 이의 제조 방법{CONJUGATED POLYMER NANOPARTICLE AND METHOD FOR PREPARING THE SAME}
본 발명은 공액 고분자 나노 입자 및 이의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 정밀한 국소 부위 약물 전달, 질병 진단, 질병 치료, 근적외선 영상화 및 광열 치료에 이용 가능한 공액 고분자 나노 입자 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.
폴리아세틸렌과 같은 공액 고분자에 기체 상태의 염소, 브롬, 요오드 등을 처리하면 전기가 통할 수 있다는 사실을 발견한 후에, 상기 공액 고분자는 전도성 고분자로서 많이 연구되었고, 실제로 상기 공액 고분자는 대전 방지, 전자파 차폐, 전극재료 등에 널리 이용되어 왔다. 현재는 폴리아세틸렌 이외에도 다양한 공액 고분자들이 개발되어 이용되고 있다.
상기 공액 고분자를 제조하는 방법은 잘 알려져 있다. 예를 들어, 대한미국 특허공개 제2012-0107686호에 따르면 화학적 산화 중합을 통해 공액 고분자를 제조할 수 있다.
상기 공액 고분자를 이용하여 센서, 바이오 프로브 등에 이용하기 위해서는 양친매성 화합물이 공액 고분자를 둘러싼 형태의 공액 고분자 나노 입자를 제조하는 것이 필요하다. 이러한 공액 고분자 나노 입자를 제조하는 방법에는 용매 증발법이 널리 사용되었다. 상기 용매 증발법은 클로로포름, 헥산 등의 유기 용매에 공액 고분자를 용해시키고 이를 유화한 후, 유기 용매를 증발시켜 제조하는 방법이다. 그러나, 상기 용매 증발법에 의하면 물에 잘 용해되지 않는 용매를 사용함으로써 생체 적합성에 문제가 있을 수 있으며, 유화시키기 위해서 추가적인 에너지가 필요하게 되고, 제조되는 나노 입자의 크기가 상대적으로 크며, 대량 생산이 어려운 문제점이 있다.
또한, 상기 방법에 의하여 제조된 공액 고분자는 강한 산성(pH 2 이하)에서만 도핑되어 전기적 특성 및 근적외선에서의 흡광 특성을 보임에 따라, 강산 환경이 아닌 생체 내에서와 같은 중성인 환경에서 이용 가능성이 떨어지는 문제가 있다.
대한미국 특허공개 제2012-0107686호(공개일: 2012년 10월 4일) 대한미국 특허공개 제2009-0113990호(공개일: 2009년 11월 3일)
이에, 본 발명의 목적은 중성 환경에서도 도핑될 수 있어, 생체 내에서와 같은 중성 환경에서도 전기 전도도가 높고, 근적외선 영역에서의 높은 흡광 특성을 가지는 공액 고분자 나노 입자를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 중성 환경에서도 도핑된 공액 고분자 나노 입자를 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 공액 고분자, 지방산(fatty acid) 및 양친매성 고분자를 포함한다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자 100 중량부에 대하여 상기 지방산을 1 내지 1000 중량부 및 상기 양친매성 고분자를 1 내지 1000 중량부로 포함할 수 있다.
상기 지방산은 올레산, 카프르산, 카프릴산, 팔미트산, 라우르산, 미리스트산, 아라키딕산, 베헨산, 리그노세르산, 세로틴산 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
상기 양친매성 고분자는 양이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 양쪽성 계면활성제, 비이온성 계면활성제 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하니일 수 있다.
상기 양친매성 고분자는 소듐 콜레이트 하이드레이트, n-옥틸글루코시드, 옥틸티오글루코시드, N-옥타노일-N-메틸글루카민, N-노나노일-N-메틸글루카민, 퀼라야 껍질(quillaja bark) 유래 사포닌, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트, 도데실 황산 나트륨, 테트라메틸암모늄 하이드록사이드 용액, 헥사데실트리메틸암모늄 브로마이드(CTAB), 디도데실디메틸암모늄 브로마이드(DMAB), N,N-비스(3-D-글루콘아미도프로필)데옥시콜아미드, N,N-비스(3-D-글루콘아미도프로필)콜아미드, 폴리비닐알코올, 폴리에틸렌 글리콜 도데실 에테르, 플루로닉 F-68, 트리톤 X-100, 트리톤 X-114, 트윈(Tween) 40, 트윈 80, 이게팔(Igepal) CA-630, 이게팔 CO-210, 이게팔 CO-520, 이게팔 CO-630, 이게팔 CO-720, 이게팔 CO-890, 이게팔 DM-970, 이게팔 CA-210, 이게팔 CA-520, 이게팔 CA-630, N-데카노일-N-메틸글루카민, 노닐페닐-폴리에틸렌 글리콜, 브리지 76(Brij 76), 브리지 58, 브리지 35P, 브리지 30, 폴리소르베이트 80, 사이클로헥실메틸-β-D-말토시드(Cymal-1), 2-사이클로헥실에틸-β-D-말토시드(Cymal-2), 5-사이클로헥실펜틸-β-D-말토시드(Cymal-5), 6-사이클로헥실헥실-β-D-말토시드(Cymal-6), 디기토닌, 데실-β-D-말토피라노시드, 라우릴-β-D-말토시드(DDM), n-헥사데실-β-D-말토시드, 운데실-β-D-말토시드, 데실-β-D-1-티오말코피라노시드, 데실-β-D-1-티오글루코피라노시드, 디메틸데실포스핀 옥사이드, 도데실디메틸포스핀 옥사이드 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
상기 공액 고분자는 폴리아세틸렌(polyacetylene), 폴리아닐린(polyaniline), 폴리피롤(polypyrrole), 폴리티오펜(polythiophene), 폴리(1,4-페닐렌비닐렌)(poly(1,4-phenylenevinylene)), 폴리(1,4-페닐렌설파이드)(poly(1,4-phenylenesulfide)), 폴리(플루오레닐렌에티닐렌)(poly(fluorenyleneethynylene)), 이들의 유도체 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자 및 상기 지방산을 포함하는 코어, 및 상기 코어를 둘러싸며, 상기 양친매성 고분자를 포함하는 쉘을 포함할 수 있다.
상기 코어는 약제학적 활성 성분을 더 포함할 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자 100 중량부에 대하여 약제학적 활성 성분을 0.1 내지 100 중량부로 더 포함할 수 있다.
상기 약제학적 활성 성분은 항암제, 항생제, 호르몬, 호르몬 길항제, 인터루킨, 인터페론, 성장 인자, 종양 괴사 인자, 엔도톡신, 림포톡시, 유로키나제, 스트렙토키나제, 조직 플라스미노겐 활성제, 프로테아제 저해제, 알킬포스포콜린, 방사선 동위원소로 표지된 성분, 심혈관계 약물, 위장관계 약물 및 신경계 약물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자의 상기 공액 고분자는 pH 1 내지 8에서 도펀트에 의하여 도핑될 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 직경이 1 내지 500nm일 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 공액 고분자 및 지방산을 용매에 용해시켜 제1 혼합 용액을 제조하는 단계, 상기 혼합 용액을 양친매성 고분자를 포함하는 용액과 혼합하여 제2 혼합 용액을 제조하는 단계, 그리고 상기 제2 혼합 용액을 반응시키는 단계를 포함한다.
상기 제1 혼합 용액을 제조하는 단계에서 약제학적 활성 성분을 더 첨가할 수 있다.
상기 용매는 N-메틸-2-피롤리돈, 아세톤, 아세토니트릴, 사염화탄소, 클로로포름, 사이클로헥산, 1,2-디클로로에탄, 디클로로메탄, 디에틸에테르, 디메틸 포름아마이드, 디메틸 설폭사이드, 1,4-디옥산, 에탄올, 에틸 아세테이트, 헵탄, 헥산, 메탄올, 메틸 3급 부틸 에테르(methyl-tert-buryl ether), 펜탄, 1-프로판올, 2-프로판올, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 2,2,4-트리메틸펜탄, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
상기 제2 혼합 용액을 반응시키는 단계는 상기 지방산의 녹는점 이하의 온도에서 상기 제2 혼합 용액을 교반시켜 이루어질 수 있다.
본 발명의 공액 고분자 나노 입자는 중성 환경에서도 도핑될 수 있어, 생체 내에서와 같은 중성 환경에서도 전기 전도도가 높고, 근적외선 영역에서의 높은 흡광 특성을 가질 수 있다. 이에 따라, 상기 공액 고분자 나노 입자에 약물을 담지시키면, 레이저를 통하여 국소적인 온도 변화를 유도하여 담지된 약물을 방출시킬 수 있어, 정밀한 국소 부위 약물 전달, 질병 진단, 질병 치료, 근적외선 영상화 및 광열 치료가 가능하다.
본 발명의 공액 고분자 나노 입자의 제조 방법을 이용하여 중성 환경에서도 도핑된 공액 고분자 나노 입자를 제조할 수 있다.
도 1은 실시예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자의 투과 전자 현미경(TEM; JEM-1011 JEOL, 일본) 사진이다.
도 2a 및 도 2b는 실시예 1 내지 3에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자의 흡광 특성 및 광열 특성을 나타내는 그래프이다.
도 3은 실시예 1 내지 3에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자(100%, 500%, 1000%) 및 독소루비신(DOX)의 형광 특성을 나타내는 그래프이다.
도 4a는 실시예 4 및 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자를 세포와 48 시간 동안 배양시킨 뒤, 세포 내로의 유입(uptake) 여부를 암시야(dark field) 영상을 통해 확인한 결과이고, 도 4b는 세포 내로 유입된 폴리아닐린 나노 입자에 레이저 조시한 후 광열 치료 효과를 확인한 결과이다.
도 5은 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 MDA-MB-231 유방암 세포주를 마우스 모델에 주입(injection)한 후, 레이저를 조사한 결과에 대한 사진이다.
도 6은 다양한 농도의 HCl에 따른 실시예 1 및 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자의 색 변화 효과를 실험한 결과이다.
이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.
본 발명의 일 실시예에 따른 공액 고분자 나노 입자는 공액 고분자, 지방산(fatty acid) 및 양친매성 고분자를 포함한다.
상기 공액 고분자는 도펀트에 의해 도핑됨으로써 전기 전도성을 가지는 가질 수 있는 전도성 고분자이면 제한 없이 사용 가능하다. 이러한 특성을 가지는 공액 고분자의 종류는 잘 알려져 있으며, 예를 들어 폴리아세틸렌(polyacetylene), 폴리아닐린(polyaniline), 폴리피롤(polypyrrole), 폴리티오펜(polythiophene), 폴리(1,4-페닐렌비닐렌)(poly(1,4-phenylenevinylene)), 폴리(1,4-페닐렌 설파이드)(poly(1,4-phenylene sulfide)), 폴리(플루오레닐렌에티닐렌)(poly(fluorenyleneethynylene)), 이들의 유도체 및 이들의 혼합물로 이루어지는 군에서 선택되는 어느 하나 일 수 있으나, 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 한 구체예에서, 상기 공액 고분자는 폴리아닐린일 수 있다. 상기 폴리아닐린은 생체 적합성이 우수하고, 세포 증식을 연구하기 위한 전기 활성 소재로도 사용 가능하다. 또한, 상기 폴리아닐린의 경우 전자 이동을 유도하고, 여기-에너지 수준을 감소시키는 원자가 밴드 및 전도성 밴드 간의 밴드 간 갭 상태를 발생하는 양자화를 위한 도펀트(예를 들어, 강산, 루이스산, 전이금속, 알칼리 이온)라는 것이다. 따라서, 폴리아닐린의 광학-흡광 피크는 도핑 과정 동안 에머랄딘 염기(emeralidine base, EB)가 에머랄딘 염(emeralidine salt, ES)으로 전이되면서 근적외선 영역으로 적색 이동한다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자와 함께 지방산을 포함함에 따라 중성 환경에서도 도펀트에 의하여 도핑될 수 있다. 따라서, 상기 공액 고분자 나노 입자는 생체 내에서와 같은 중성 환경에서도 전기전도도가 높고, 근적외선 영역에서의 높은 흡광 특성을 가질 수 있다. 이에 따라, 상기 공액 고분자 나노 입자에 약물을 담지시키면, 레이저를 통하여 국소적인 온도 변화를 유도하여 담지된 약물을 방출시킬 수 있어, 정밀한 국소 부위 약물 전달, 질병 진단, 질병 치료, 근적외선 영상화 및 광열 치료가 가능하다.
상기 지방산은 포화 지방산 또는 불포화 지방산일 수 있으며, 상기 지방산으로는 탄소수 8 내지 30의 지방산을 바람직하게 사용할 수 있고, 예를 들면 올레산, 카프르산, 카프릴산, 팔미트산, 라우르산, 미리스트산, 아라키딕산, 베헨산, 리그노세르산, 세로틴산 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나를 사용할 수 있다.
또한, 상기 지방산은 상 변화 물질로서 상기 공액 고분자 나노 입자 제조시에는 고체 상태로 존재하고, 생체 내에서 레이저가 조사되면 상기 공액 고분자가 흡광하여 방출하는 열에 의하여 녹을 수 있는 물질이다.
즉, 상 변화 물질 중에서도 상기와 같은 지방산을 사용하면 상기 공액 고분자를 별도의 도핑 과정 없이도 도핑시킬 수 있으며, 중성 환경뿐만 아니라, pH 8 이하, 바람직하게 pH 1 내지 8의 알칼리성 환경에서도 상기 공액 고분자를 도핑시킬 수 있다.
상기 공액 고분자를 도핑시킬 수 있는 도펀트로는 활성산소종, 활성질소종, 과산화 수소, 생체 이온 및 프리 라디칼로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 산화물질, 또는 산화환원력을 갖는 생체 분자일 수 있으나, 상기 공액 고분자의 적외선 흡광 성능 및 전기 전도성을 더욱 향상시킬 수 있다는 측면에서 상기 도펀트는 수소 이온일 수 있다.
상기 양친매성 고분자는 상기 공액 고분자와 상기 지방산의 혼합물을 포함하는 입자를 둘러쌈으로써 상기 공액 고분자 나노 입자가 수용성을 띄도록 한다. 이에 따라, 상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자 및 상기 지방산을 포함하는 코어와 상기 코어를 상기 양친매성 고분자가 둘러싸서 형성되는 쉘을 포함하는 코어-쉘(core-shell) 구조를 가질 수 있다. 한편, 상기 코어는 상기 공액 고분자와 상기 지방산의 혼합물 형태일 수 있으나, 상기 공액 고분자를 상기 지방산이 둘러싸고 있는 층상 형태일 수도 있다.
상기 양친매성 고분자는 친수성기와 소수성기를 가지는 물질이면 제한 없이 사용될 수 있으며, 화학 합성에 의한 물질일 수도 있고 천연에 존재하는 물질일 수도 있다. 또한, 상기 양친매성 고분자는 양이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 양쪽성 계면활성제, 비이온성 계면활성제 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
구체적으로, 상기 양친매성 고분자는 소듐 콜레이트 하이드레이트, n-옥틸글루코시드, 옥틸티오글루코시드, N-옥타노일-N-메틸글루카민, N-노나노일-N-메틸글루카민, 퀼라야 껍질(quillaja bark) 유래 사포닌, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트, 도데실 황산 나트륨, 테트라메틸암모늄 하이드록사이드 용액, 헥사데실트리메틸암모늄 브로마이드(CTAB), 디도데실디메틸암모늄 브로마이드(DMAB), N,N-비스(3-D-글루콘아미도프로필)데옥시콜아미드(deoxy-BIGCHAP), N,N-비스(3-D-글루콘아미도프로필)콜아미드(BIGCHAP), 폴리비닐알코올, 폴리에틸렌 글리콜 도데실 에테르, 플루로닉 F-68, 트리톤 X-100, 트리톤 X-114, 트윈 40, 트윈 80, 이게팔(Igepal) CA-630, 이게팔 CO-210, 이게팔 CO-520, 이게팔 CO-630, 이게팔 CO-720, 이게팔 CO-890, 이게팔 DM-970, 이게팔 CA-210, 이게팔 CA-520, 이게팔 CA-630, N-데카노일-N-메틸글루카민, 노닐페닐-폴리에틸렌 글리콜, 브리지 76(Brij 76), 브리지 58, 브리지 35P, 브리지 30, 폴리소르베이트 80, 사이클로헥실메틸-β-D-말토시드 (Cymal-1), 2-사이클로헥실에틸-β-D-말토시드 (Cymal-2), 5-사이클로헥실펜틸-β-D-말토시드(Cymal-5), 6-사이클로헥실헥실-β-D-말토시드(Cymal-6), 디기토닌, 데실-β-D-말토피라노시드, 라우릴-β-D-말토시드(DDM), n-헥사데실-β-D-말토시드, 운데실-β-D-말토시드, 데실-β-D-1-티오말코피라노시드, 데실-β-D-1-티오글루코피라노시드, 디메틸데실포스핀 옥사이드, 도데실디메틸포스핀 옥사이드 또는 이들의 혼합물일 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 중성 환경에서도 도핑되어 적외선 흡광 특성을 가지므로 광열 치료 물질로 이용이 가능하며, 상기 공액 고분자 나노 입자가 조영제 물질을 포함하는 경우 근적외선 영상화를 통한 질병의 진단이 가능하다.
구체적인 예시로, 상기 공액 고분자 나노 입자를 이용하여 암세포를 판별할 수 있다. 대부분의 암 세포는 끊임없이 성장 및 증식하는 특성이 있고, 이러한 성장에 필요한 에너지를 해당 과정을 통해 얻게 된다. 따라서, 암 세포에서는 정상 세포에 비하여 해당 과정이 높게 일어나고, 피루베이트와 젖산과 같은 해당 과정 산물이 많이 생성된다. 즉, 암세포와 같이, 피루베이트 및 젖산이 존재하는 환경에 상기 공액 고분자 나노 입자가 존재하는 경우, 상기 피루베이트 및 젖산이 도펀트로 작용하여 공액 고분자가 도핑된다. 상기 공액 고분자의 도핑에 따라 공액 고분자의 흡광도가 변하게 되고, 색의 변화가 나타나게 된다. 따라서, 이러한 색의 변화를 이용하여, 상기 공액 고분자 나노 입자를 암세포를 감지하기 위한 센서, 키트로 사용할 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자를 이용하여 판별 가능한 암세포의 종류는 제한되지 않는다. 예를 들어, 암세포는 직장암, 담낭암, 난소암, 대장암, 임파종, 뇌암, 전립선암, 악성흑색종, 유방암, 위암, 폐암, 난소암, 간암, 기관지암, 비인두암, 후두암, 췌장암, 방광암, 결장암, 육종암 또는 자궁암 등일 수 있다.
한편, 상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자와 상기 지방산과 함께 약제학적 활성 성분을 더 포함할 수 있다. 상기 공액 고분자 나노 입자가 상기 약제학적 활성 성분을 포함함에 따라 상기 공액 고분자 나노 입자를 약물 전달 및 질병 치료 물질로 활용할 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자가 상기 코어-쉘 구조를 가지는 경우, 상기 약제학적 활성 성분은 상기 코어에 포함될 수 있으며, 이때 상기 약제학적 활성 성분과 상기 공액 고분자 및 상기 지방산은 혼합물 형태로 존재하거나, 상기 약제학적 활성 성분을 상기 공액 고분자와 상기 지방산의 혼합물이 둘러싸고 있는 층상 형태를 가질 수도 있다.
상기 약제학적 활성 성분은 항암제, 항생제, 호르몬, 호르몬 길항제, 인터루킨, 인터페론, 성장 인자, 종양 괴사 인자, 엔도톡신, 림포톡시, 유로키나제, 스트렙토키나제, 조직 플라스미노겐 활성제, 프로테아제 저해제, 알킬포스포콜린, 방사선 동위원소로 표지된 성분, 심혈관계 약물, 위장관계 약물 및 신경계 약물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나일 수 있다.
특히, 상기 항암제로는 에피루비신(Epirubicin), 도세탁셀(Docetaxel), 젬시타빈(Gemcitabine), 파클리탁셀(Paclitaxel), 시스플라틴(cisplatin), 카르보플라틴(carboplatin), 택솔(taxol), 프로카르바진(procarbazine), 시클로포스파미드(cyclophosphamide), 디악티노마이신(dactinomycin), 다우노루비신(daunorubicin), 에토포시드(etoposide), 탁목시펜(tamoxifen) 독소루비신(doxorubicin), 미토마이신(mitomycin), 블레오마이신(bleomycin), 플리코마이신(plicomycin), 트랜스플라티눔(transplatinum), 빈블라스틴(vinblastin) 또는 메토트렉세이트(methotrexate) 등을 예시할 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자 100 중량부에 대하여 상기 지방산을 1 내지 1000 중량부로 포함할 수 있다. 상기 지방산의 함량이 1 중량부 미만인 경우 상기 약제학적 성분의 담지에 있어 그 효율성이 낮아질 수 있고, 1000 중량부를 초과하는 경우 상기 공액 고분자 나노 입자의 크기가 너무 커지게 되어 상기 공액 고분자 나노 입자의 안정성이 떨어질 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자 100 중량부에 대하여 상기 양친매성 고분자를 1 내지 1000 중량부로 포함할 수 있다. 상기 양친매성 고분자의 함량이 1 중량부 미만인 경우 상기 공액 고분자 나노 입자를 둘러싸고 있는 상기 양친매성 고분자의 양이 너무 적어 수용상에서의 상기 공액 고분자 나노 입자의 안정성이 떨어질 수 있고, 1000 중량부를 초과하는 경우 세포 및 동물 등의 생체 내에 적용시 생체 적합성이 떨어질 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자가 상기 약제학적 활성 성분을 더 포함하는 경우, 상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자 100 중량부에 대하여 상기 약제학적 활성 성분을 0.1 내지 100 중량부로 포함할 수 있다. 상기 약제학적 활성 성분의 함량이 0.1 중량부 미만인 경우 상기 약제학적 성분의 함량이 극도로 적어짐에 따라 상기 약제학적 성분을 이용한 치료에 문제가 있을 수 있고, 100 중량부를 초과하는 경우 자기 소멸(self-quneching)과 같은 형광 특성 및 기타 광학적 특성이 오히려 떨어질 수 있다.
상기 공액 고분자 나노 입자는 직경이 1 내지 500nm일 수 있고, 바람직하게 5 내지 50nm일 수 있고, 더욱 바람직하게 10 내지 25nm일 수 있다. 상기 공액 고분자 나노 입자의 직경이 500nm를 초과하게 되는 경우 큰 입자 사이즈에 의해 용해도가 낮아지고 수용액 상에서 콜로이드 안정성이 떨어질 수 있다.
본 발명의 다른 일 실시예에 따른 상기 공액 고분자 나노 입자의 제조 방법은 공액 고분자 및 지방산을 용매에 용해시켜 제1 혼합 용액을 제조하는 단계, 상기 혼합 용액을 양친매성 고분자를 포함하는 용액과 혼합하여 제2 혼합 용액을 제조하는 단계, 그리고 상기 제2 혼합 용액을 반응시키는 단계를 포함한다. 상기 공액 고분자 나노 입자의 제조 방법에 따르면 중성 환경에서도 도핑된 공액 고분자 나노 입자를 제조할 수 있다.
구체적으로, 상기 공액 고분자와 상기 지방산을 수성 용매에 용해시키고, 상기 혼합물과 양친매성 고분자 수용액을 혼합한다. 상기 공액 고분자, 지방산 및 양친매성 고분자를 함유하는 혼합물을 교반 및 정제함으로써 공액 고분자 나노 입자를 제조할 수 있다. 상기 수성 용매는 자발적으로 물에 유화되기 때문에, 추가의 에너지 도입 없이도 상기 공액 고분자 나노 입자를 제조할 수 있다.
한편, 상기 공액 고분자 나노 입자가 약제학적 활성 성분을 더 포함하게 하기 위해서, 상기 공액 고분자와 상기 지방산을 상기 수성 용매에 용해시키는 단계에서 상기 약제학적 활성 성분을 더 첨가하여 상기 공액 고분자 및 상기 지방산과 함께 상기 수성 용매에 용해시킬 수 있다.
본 발명의 한 구체예에서, 상기 수성 용매에 상기 공액 고분자, 상기 지방산 및 상기 약제학적 활성 성분을 분산시키고, 상기 수성 용매에 분산되어 있는 공액 고분자, 상기 지방산 및 상기 약제학적 활성 성분을 양친매성 고분자가 분산된 수상에 주입한다. 주입 후 교반하면, 용매상은 수상에 드랍릿(droplet) 형태로 평형을 이루게 되고, 이때 양친매성 고분자는 계면의 드랍릿(deoplet)에 흡착하게 되어 공액 고분자 나노 입자를 얻을 수 있다.
이렇게 생성된 공액 고분자 나노 입자는 공액 고분자 코어와 친수성 쉘로 이루어진 구조를 가질 수 있다. 상기 양친매성 고분자의 친수성 기에 의해 상기 공액 고분자, 지방산 및 약제학적 활성 물질을 포함하는 공액 고분자 코어를 둘러싸는 친수성 쉘이 형성될 수 있다. 상기 친수성 쉘은 상기 공액 고분자 코어의 외부에 위치하여 높은 수용성을 나타내어 상기 공액 고분자 나노 입자의 분산성을 높일 수 있다.
상기 수성 용매는 물에 용해되는 용매이면 제한 없이 이용할 수 있다. 예를 들어, 수성 용매는 N-메틸-2-피롤리돈, 아세톤, 아세토니트릴, 사염화탄소, 클로로포름, 사이클로헥산, 1,2-디클로로에탄, 디클로로메탄, 디에틸에테르, 디메틸 포름아마이드, 디메틸설폭사이드, 1,4-디옥산, 에탄올, 에틸 아세테이트, 헵탄, 헥산, 메탄올, 메틸 3급부틸 에테르(methyl-tert-buryl ether), 펜탄, 1-프로판올, 2-프로판올, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 2,2,4-트리메틸펜탄, 물 또는 이들의 혼합물 일 수 있다.
상기 제2 혼합 용액을 반응시키는 단계는 상기 지방산의 녹는점 이하의 온도에서 상기 제2 혼합 용액을 교반시켜 이루어질 수 있다. 즉, 상기 제2 혼합 용액의 반응을 상기 지방산의 녹는점 이하의 온도에서 진행함으로써, 상기 지방산이 고상으로 존재하는 공액 고분자 나노 입자를 제조할 수 있다. 따라서, 상기 반응 온도는 상기 지방산의 녹는점 이하인 1 내지 99℃, 바람직하게 15 내지 50℃, 더욱 바람직하게 30 내지 40℃일 수 있다.
[ 제조예 : 폴리아닐린의 합성]
( 제조예 1)
폴리아닐린, 에머랄딘 염기(EB)는 과량의 HCl 하에서 화학적 산화 중합을 통해 합성하였다. 아닐린 단량체(0.2 mol)를 1M HCl 수용액(300 mL)에 첨가하였다. 계속해서, 산화제로 1M HCl 수용액(200 mL)에서 제조된 암모늄 퍼설페이트 용액(0.05 mol)을 방울씩 첨가하여 상온에서 6시간 동안 중합 과정을 수행하였다. 진녹색의 침전된 중합체 염(ES)은 여과하여 반응 용기로부터 얻고, 1M NaOH 용액(500mL)에 재분산시켰다. 그 후, 탈양자화된 EB를 여과하고, 아세톤(500 mL)에서 재분산시켰다. 마지막으로, 여과 및 진공 오븐에서 48시간 동안 건조 후 EB 미세 분말을 얻었다.
젤 투과 크로마토그래피(Acme 9200 GPC, Young Lin Instrument Co., Ltd.)를 이용하여 합성된 EB의 분자량을 측정한 결과, 5200 Da였다(분산도: 1.1).
[ 실시예 : 폴리아닐린 나노 입자의 제조]
( 실시예 1 내지 3: PAniLA )
제조예 1에서 제조한 폴리아닐린 5mg, 라우르산 각각 60mg(100%), 300mg(500%), 600mg(1000%) 및 독소루비신(doxorubicin) 1mg을 4mL의 N-메틸-2-피롤리돈에 용해시키고, 상기 혼합물(1)을 100mg의 트윈 80이 함유된 수용액 20mL에 가하였다. 상기 혼합물(2)을 실온에서 4시간 동안 교반하여 반응시킨 후, Mw 3000의 투석막을 이용하여 24 시간 동안 투석을 진행하였다. 투석이 끝난 상기 혼합물(3)을 3000rpm으로 60분 동안 세 차례 원심분리한 후, 인산 완충 용액(phosphate buffered saline, PBS) 5mL에 분산시켰다.
( 실시예 4: PAniLA )
제조예 1에서 제조한 폴리아닐린 5mg 및 라우르산 60mg을 4mL의 N-메틸-2-피롤리돈에 용해시키고, 상기 혼합물(1)을 100mg의 트윈 80이 함유된 수용액 20mL에 가하였다. 상기 혼합물(2)을 실온에서 4시간 동안 교반하여 반응시킨 후, Mw 3000의 투석막을 이용하여 24 시간 동안 투석을 진행하였다. 투석이 끝난 상기 혼합물(3)을 3000rpm으로 60분 동안 세 차례 원심분리한 후, 인산 완충 용액(phosphate buffered saline, PBS) 5mL에 분산시켰다.
( 실시예 5 내지 7: PAniLA )
상기 실시예 4에서 상기 라우르산 대신에 각각 올레산, 카프르산 및 카프릴산을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 4와 동일하게 실시하여 폴리아닐린 나노 입자를 제조하였다.
( 참고예 1: TPAni )
제조예 1에서 제조한 폴리아닐린 10mg을 각각 1.5㎖의 N-메틸-2-피롤리돈에 용해시키고, 상기 혼합물을 200mg의 트윈 80이 함유된 수용액 20㎖에 가하였다. 혼합물을 실온에서 24시간 동안 강하게 교반하였다. 그 후, 1500rpm으로 30분 동안 세 차례 원심분리하여 트윈 80이 코팅된 폴리아닐린 나노입자(TPAni)를 정제하고, 수상에서 분산시켜 두었다.
[ 실험예 1: 폴리아닐린 나노 입자의 특성 평가]
도 1은 실시예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자의 투과 전자 현미경(TEM; JEM-1011 JEOL, 일본) 사진이다. 상기 도 1을 참조하면, 상기 제조된 폴리아닐린 나노 입자는 폴리아닐린을 코어로 하여, 그 주변부를 라우르산이 둘러싸고 있는 모양의 입자인 것으로 추정된다.
또한, 상기 투과 전자 현미경 사진 상에서는 상기 폴리아닐린 나노 입자의 입경이 약 50 내지 60nm 정도인 것으로 확인되었다.
[ 실험예 2: 폴리아닐린 나노 입자의 흡광 특성 및 광열 특성 평가]
도 2a 및 도 2b는 실시예 1 내지 3에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자의 흡광 특성을 나타내는 그래프이다.
상기 도 2a를 참조하면, 실시예 1(라우르산의 함량: 100%), 실시예 2(라우르산의 함량: 500%) 및 실시예 3(라우르산의 함량: 1000%)의 흡광 특성을 관찰한 결과, 라우르산의 함량이 100%인 조건에서는 육안으로 보이는 사진(청록색) 및 흡광 스펙트럼(600nm 영역에서 peak이 발생)에서도 중성 상태에서는 도핑되지 않는 경향을 보였으나, 라우르산의 함량이 증가하면 중성 상태에서도 도핑되는 경향(용액 색상이 녹색, 흡광 peak이 900nm)을 확인하였다.
또한, 도 2b를 참조하면, 실시예 1 내지 3에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자는 흡광을 통하여 열이 발생하는 광열 효과가 발생하는 것을 확인하였으며, 특히 라우르산의 함량이 500% 조건(실시예 2: 300mg)에서 온도 상승률이 가장 높은 것을 확인하였다.
한편, 상기 실시예 4 내지 7에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자에 대해서도 상기 실시예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 유사한 정도의 흡광 특성 및 광열 특성을 얻을 수 있음을 확인하였다.
[ 실험예 3: 폴리아닐린 나노 입자의 형광 특성 평가]
도 3은 실시예 1 내지 3에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자(100%, 500%, 1000%) 및 독소루비신(DOX)의 형광 특성을 나타내는 그래프이다.
즉, 상기 도 3은 형광 특성을 가진 약제인 독소루비신(DOX) 만의 형광 및 상기 독소루비신을 포함하는 실시예 1 내지 3에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자의 형광 신호를 측정한 결과이다. 상기 도 3을 참조하면, 라우르산을 각각 100%(60mg), 500%(300mg), 1000%(600mg)로 증량하며, 폴리아닐린 나노 입자를 합성할 경우, 독소루비신의 형광 신호가 현저히 감소하는 것을 확인할 수 있다.
이는 폴리아닐린 나노 입자의 흡광 특성에 의한 것으로, 폴리아닐린 나노 입자가 600nm 근방에서 peak을 가지기 때문에 독소루비신의 형광 방출 신호를 전체적으로 흡수해버려 입자 합성 후의 형광 신호는 거의 측정되지 않았기 때문이다.
상기 결과를 통해, 상기 폴리아닐린 나노 입자 내에 독소루비신이 봉입된 것을 확인하였으며, 더욱이 상기 폴리아닐린 나노 입자 내부에 라우르산과 독소루비신 등 다중 물질을 담지할 수 있음을 확인하였다.
[ 실험예 4: 폴리아닐린 나노 입자의 광열 치료 효과 평가]
도 4a는 실시예 4 및 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자를 세포와 48 시간 동안 배양시킨 뒤, 세포 내로의 유입(uptake) 여부를 암시야(dark field) 영상을 통해 확인한 결과이고, 도 4b는 세포 내로 유입된 폴리아닐린 나노 입자에 레이저 조시한 후 광열 치료 효과를 확인한 결과이다.
상기 도 4a에서, MDA-MB-231 only는 유방암 세포주만을 배양한 경우이고, MDA-MB-231+TPAni는 상기 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 경우이고, MDA-MB-231+PAniLA는 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 경우이다.
상기 도 4a를 참조하면, MDA-MB-231 유방암 세포주 상에서 상기 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자(TPAni)에 비해 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자(PAniLA) 입자가 더 많이 유입된 것을 확인할 수 있다. 참고로, 흰색으로 반짝이는 부분이 PAniLA 입자를 나타낸다.
상기 도 4b에서는 폴리아닐린 나노 입자의 세포 내로의 유입을 확인한 후, 레이저 조사에 따른 광열 치료 효과를 확인하였다(초록색이 살아있는 세포를 의미함). 상기 도 4b에서 MDA-MB-231 only Laser O는 MDA-MB-231 세포에만 레이저를 조사한 경우이고, MDA-MB-231 with TPAni Laser O는 유방암 세포주와 상기 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 경우에 레이저를 조사한 경우이고, MDA-MB-231 with PAniLa Laser X는 유방암 세포주와 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 경우에 레이저를 조사하기 전의 암시야 영상이고, MDA-MB-231 with PAniLa Laser O는 유방암 세포주와 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 경우에 레이저를 조사한 후의 암시야 영상이다.
상기 도 4b를 참조하면, MDA-MB-231 세포에만 레이저를 조사했을 경우(MDA-MB-231 only Laser O), 세포에는 아무런 영향을 끼치지 않는 것을 확인하였다. 상기 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자를 유입시킨 후, 레이저를 조사했을 경우(MDA-MB-231 with TPAni Laser O), 세포가 약간의 손상을 입은 것을 확인하였다. 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자를 유입시킨 상태(MDA-MB-231 with PAniLa Laser X)에서는 세포가 거의 손상을 입지 않은 것으로 확인되어, 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자는 독성이 없다는 것을 확인하였다. 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자를 유입시킨 후, 레이저 조사 했을 경우(MDA-MB-231 with PAniLa Laser O), 살아있는 세포가 거의 없는 것을 확인하였다. 이는 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자가 레이저를 흡광한 후, 광열 효과에 의해 열을 발생시키고, 발생된 열에 의하여 세포가 죽었기 때문이다.
한편, 도 5는 상기 폴리아닐린 나노 입자의 광열 치료 효과를 측정하기 위하여 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 MDA-MB-231 유방암 세포주를 마우스 모델에 주입(injection)한 후, 레이저를 조사한 결과에 대한 사진이다.
상기 도 5에서 Injection O-Before는 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 MDA-MB-231 유방암 세포주를 마우스 모델에 주입(injection)하고, 레이저를 조사하기 전 사진이고, Injection O-After는 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 MDA-MB-231 유방암 세포주를 마우스 모델에 주입하고, 레이저를 조사한 후의 사진이고, Injection X-Before는 MDA-MB-231 유방암 세포주만을 마우스 모델에 주입하고, 레이저를 조사하기 전 사진이고, Injection X-After는 MDA-MB-231 유방암 세포주만을 마우스 모델에 주입하고, 레이저를 조사한 후의 사진이다.
상기 도 5를 참고하면, 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 함께 배양한 MDA-MB-231 유방암 세포주를 마우스 모델에 주입한 후, 레이저를 조사하면, 레이저 조사 부위가 까맣게 타 들어가는 것을 확인할 수 있으나, 상기 MDA-MB-231 유방암 세포주만을 마우스 모델에 주입하고, 레이저를 조사한 경우 이러한 현상이 발생하지 않는 것을 알 수 있다.
한편, 상기 실시예 5 내지 7에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자에 대해서도 상기 실시예 4에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 유사한 정도의 광열 치료 효과가 있음을 확인하였다.
[ 실험예 5: 폴리아닐린 나노 입자의 산화도에 따른 색 변화 효과]
상기 실시예 1 및 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자의 산화도에 따른 색 변화 효과를 알아보기 위하여, 상기 실시예 1 및 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자를 다양한 농도(10-1M 내지 10-10M)의 염화수소(HCl)로 도핑하였다. 그 후, 색의 변화를 육안으로 관찰하고, 흡광도를 흡광스펙트로미터(Mecasys UV-2120, 한국)로 분석하였고, 그 결과를 도 6에 나타내었다.
상기 도 6에 도시한 바와 같이, 상기 참고예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자(TPAni)의 경우 10-2M 초과의 높은 농도의 HCl에서는 에머랄딘 염(ES) 상태로 전이되어 녹색을 나타내었고, 10-3M 미만의 낮은 농도의 HCl에서는 에머랄딘 염기(EB) 상태로 전이되어 청색을 나타내었다. 반면, 상기 실시예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자(PAniLA)의 경우 10-2M 초과의 높은 농도의 HCl에서 뿐만 아니라, 10-8M의 낮은 농도의 HCl, 즉 중성 환경에서도 에머랄딘 염(ES) 상태로 전이되어 녹색을 나타내는 것을 알 수 있다.
한편, 상기 실시예 4 내지 7에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자에 대해서도 상기 실시예 1에서 제조된 폴리아닐린 나노 입자와 마찬가지로 10-2M 초과의 높은 농도의 HCl에서 뿐만 아니라, 10-8M의 낮은 농도의 HCl에서도 도핑이 이루어지는 것을 확인하였다.

Claims (16)

  1. 공액 고분자, 지방산(fatty acid) 및 양친매성 고분자를 포함하고,
    상기 공액 고분자 및 상기 지방산의 혼합물을 포함하는 코어, 및 상기 코어를 둘러싸며 상기 양친매성 고분자를 포함하는 쉘을 포함하고,
    상기 공액 고분자 100 중량부에 대하여 상기 지방산을 1 내지 1000 중량부 및 상기 양친매성 고분자를 1 내지 1000 중량부로 포함하며,
    상기 지방산은 올레산, 카프르산, 카프릴산, 팔미트산, 라우르산 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것인
    광열치료용 공액 고분자 나노 입자.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서,
    상기 양친매성 고분자는 양이온성 계면활성제, 음이온성 계면활성제, 양쪽성 계면활성제, 비이온성 계면활성제 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하니인 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 양친매성 고분자는 소듐 콜레이트 하이드레이트, n-옥틸글루코시드, 옥틸티오글루코시드, N-옥타노일-N-메틸글루카민, N-노나노일-N-메틸글루카민, 퀼라야 껍질(quillaja bark) 유래 사포닌, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트, 도데실 황산 나트륨, 테트라메틸암모늄 하이드록사이드 용액, 헥사데실트리메틸암모늄 브로마이드(CTAB), 디도데실디메틸암모늄 브로마이드(DMAB), N,N-비스(3-D-글루콘아미도프로필)데옥시콜아미드, N,N-비스(3-D-글루콘아미도프로필)콜아미드, 폴리비닐알코올, 폴리에틸렌 글리콜 도데실 에테르, 플루로닉 F-68, 트리톤 X-100, 트리톤 X-114, 트윈(Tween) 40, 트윈 80, 이게팔(Igepal) CA-630, 이게팔 CO-210, 이게팔 CO-520, 이게팔 CO-630, 이게팔 CO-720, 이게팔 CO-890, 이게팔 DM-970, 이게팔 CA-210, 이게팔 CA-520, 이게팔 CA-630, N-데카노일-N-메틸글루카민, 노닐페닐-폴리에틸렌 글리콜, 브리지 76(Brij 76), 브리지 58, 브리지 35P, 브리지 30, 폴리소르베이트 80, 사이클로헥실메틸-β-D-말토시드(Cymal-1), 2-사이클로헥실에틸-β-D-말토시드(Cymal-2), 5-사이클로헥실펜틸-β-D-말토시드(Cymal-5), 6-사이클로헥실헥실-β-D-말토시드(Cymal-6), 디기토닌, 데실-β-D-말토피라노시드, 라우릴-β-D-말토시드(DDM), n-헥사데실-β-D-말토시드, 운데실-β-D-말토시드, 데실-β-D-1-티오말코피라노시드, 데실-β-D-1-티오글루코피라노시드, 디메틸데실포스핀 옥사이드, 도데실디메틸포스핀 옥사이드 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 공액 고분자는 폴리아세틸렌(polyacetylene), 폴리아닐린(polyaniline), 폴리피롤(polypyrrole), 폴리티오펜(polythiophene), 폴리(1,4-페닐렌비닐렌)(poly(1,4-phenylenevinylene)), 폴리(1,4-페닐렌설파이드)(poly(1,4-phenylenesulfide)), 폴리(플루오레닐렌에티닐렌)(poly(fluorenyleneethynylene)), 이들의 유도체 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자.
  7. 삭제
  8. 제1항에 있어서,
    상기 코어는 약제학적 활성 성분을 더 포함하는 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자.
  9. 제1항에 있어서,
    상기 공액 고분자 나노 입자는 상기 공액 고분자 100 중량부에 대하여 약제학적 활성 성분을 0.1 내지 100 중량부로 더 포함하는 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자.
  10. 제8항 또는 제9항에 있어서,
    상기 약제학적 활성 성분은 항암제, 항생제, 호르몬, 호르몬 길항제, 인터루킨, 인터페론, 성장 인자, 종양 괴사 인자, 엔도톡신, 림포톡시, 유로키나제, 스트렙토키나제, 조직 플라스미노겐 활성제, 프로테아제 저해제, 알킬포스포콜린, 방사선 동위원소로 표지된 성분, 심혈관계 약물, 위장관계 약물 및 신경계 약물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자.
  11. 제1항에 있어서,
    상기 공액 고분자 나노 입자의 상기 공액 고분자는 pH 1 내지 8에서 도펀트에 의하여 도핑되는 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자.
  12. 제1항에 있어서,
    상기 공액 고분자 나노 입자는 직경이 1 내지 500nm인 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자.
  13. 공액 고분자 및 지방산을 용매에 용해시켜 제1 혼합 용액을 제조하는 단계,
    상기 혼합 용액을 양친매성 고분자를 포함하는 용액과 혼합하여 제2 혼합 용액을 제조하는 단계, 그리고
    상기 제2 혼합 용액을 반응시키는 단계를 포함하고,
    상기 제2 혼합 용액을 반응시키는 단계는 상기 지방산의 녹는점 이하의 온도에서 상기 제2 혼합 용액을 교반시켜 이루어지며,
    상기 지방산은 올레산, 카프르산, 카프릴산, 팔미트산, 라우르산 및 이들의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것인
    광열치료용 공액 고분자 나노 입자의 제조 방법.
  14. 제13항에 있어서,
    상기 제1 혼합 용액을 제조하는 단계에서 약제학적 활성 성분을 더 첨가하는 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자의 제조 방법.
  15. 제13항에 있어서,
    상기 용매는 N-메틸-2-피롤리돈, 아세톤, 아세토니트릴, 사염화탄소, 클로로포름, 사이클로헥산, 1,2-디클로로에탄, 디클로로메탄, 디에틸에테르, 디메틸 포름아마이드, 디메틸 설폭사이드, 1,4-디옥산, 에탄올, 에틸 아세테이트, 헵탄, 헥산, 메탄올, 메틸 3급 부틸 에테르(methyl-tert-buryl ether), 펜탄, 1-프로판올, 2-프로판올, 테트라하이드로퓨란, 톨루엔, 2,2,4-트리메틸펜탄, 물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것인 광열치료용 공액 고분자 나노 입자의 제조 방법.
  16. 삭제
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