KR101584919B1

KR101584919B1 - 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물 및 이의 제조방법

Info

Publication number: KR101584919B1
Application number: KR1020140160802A
Authority: KR
Inventors: 오의철; 장동진; 배수경
Original assignee: 가톨릭대학교 산학협력단
Priority date: 2014-11-18
Filing date: 2014-11-18
Publication date: 2016-01-14

Abstract

본 발명은 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것으로, 상기 암로디핀 경구 붕해형 정제는 연속 공정을 통해 쉽게 제조할 있으며, 덱스트린 내에 암로디핀을 로딩한 마이크로캡슐 형태로서 암로디핀이 무정형 상태로 존재하여 암로디핀의 용해도가 크게 개선되며, 또한 상기 마이크로캡슐을 유드라짓으로 코팅함으로써 경구 붕해정 정제로 타정할 때 물리적 특정을 유지할 수 있기 때문에 암로디핀의 경구 흡수율을 향상시키면서 노인 환자들의 약물 순응도를 크게 개선시킨 장점이 있다.

Description

암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물 및 이의 제조방법{Composition for orally disintegrating tablets comprising amlodipine and manufacturing method thereof}

본 발명은 암로디핀의 경구 흡수율을 향상시키면서 노인 환자들의 약물 순응도를 개선시킨 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

암로디핀은 3-에틸-5-메틸-2-[2-아미노에톡시메틸]-4-[2-클로로페닐]-6-메틸-1,4-디하이드로피리딘-3,5-디카르복실레이트로서, 하이드로피리딘-디카르복실레이트 형태의 강력한 칼슘길항제(Calcium Channel Blocker)이며, 칼슘 이온이 심장 및 말초혈관 평활근의 세포막으로 유입되는 것을 차단하는 작용을 한다. 따라서 고혈압, 관상동맥의 고정폐쇄 또는 관상 혈관계의 혈관 경련과 혈관 수축에 의한 심근성 허혈증에 매우 유용한 치료제로서 장기간에 걸쳐 강력한 활성을 나타내므로, 성인의 경우 1일 1회 5mg을 경구로 투여하고 있으며, 암로디핀 함유 제제는 1일 최대 10mg까지 증량하여 투여할 수 있다.

암로디핀 경구 붕해형 정제(ODT)를 제조하기 위하여, 암로디핀 유리염에 비해 수용해도가 우수한 베실레이트 염 형태를 주로 사용하고 있다. 암모디핀 염 형태 대신 암로디핀 유리염을 활성성분으로 사용한 경우 낮은 용출속도와 위장관에서 투과성 문제가 있어 경구 흡수 및 생체이용율에 제한을 받으며, 암로디핀은 광 민감성 화합물로서, 빛에 의해 치료적으로 불활성인 유도체로 분해되며, 쓴맛을 나타낸다.

따라서, 암로디핀의 낮은 경구 흡수 및 생체이용율 문제를 해결할 수 있으면서도 노인과 같이 약을 삼킬 수 없는 환자들에게 적용할 수 있는 암로디핀 경구 붕해형 정제의 개발이 필요한 실정이다.

한국등록특허 제0586166호

본 발명의 목적은 암로디핀의 경구 흡수율을 향상시키면서 노인 환자들의 약물 순응도를 개선시킨 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 데 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 덱스트린 내에 암로디핀을 로딩한 마이크로캡슐; 및 상기 마이크로캡슐을 코팅한 유드라짓을 포함하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 덱스트린과 계면활성제를 증류수에 용해시키는 단계(제1단계); 암로디핀을 에탄올에 용해시키는 단계(제2단계); 상기 제1단계의 용액과 상기 제2단계의 용액을 혼합한 후, 1차 스프레이 건조하여 암로디핀 로딩된 덱스트린 마이크로캡슐을 제조하는 단계(제3단계); 및 유드라짓을 에탄올에 용해시켜 준비한 코팅 용액을 상기 마이크로캡슐에 첨가한 후, 2차 스프레이 건조하는 단계(제4단계)를 포함하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 제조방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물을 압출하여 얻어진 암로디핀 경구 붕해형 정제를 제공한다.

본 발명에 따른 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물은 연속 공정을 통해 쉽게 제조할 있으며, 덱스트린 내에 암로디핀을 로딩한 마이크로캡슐 형태로서 암로디핀이 무정형 상태로 존재하여 암로디핀의 용해도가 크게 개선되며, 또한 상기 마이크로캡슐을 유드라짓으로 코팅함으로써 경구 붕해정 정제로 타정할 때 물리적 특정을 유지할 수 있기 때문에 암로디핀의 경구 흡수율을 향상시키면서 노인 환자들의 약물 순응도를 크게 개선시킨 장점이 있다.

도 1은 본 발명에 따른 암로디핀-로딩 덱스트린 마이크로캡슐(ADM), 상기 마이크로 캡슐을 유드라짓으로 코팅한 ADM(CADM) 및 암로디핀 경구 붕해형 정제(ODT)의 모식도를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 SEM 이미지를 나타낸 것이다((a: ADM, b: CADM, c: ODT-ADM 단면도, d: ODT-CADM 단면도).
도 3은 ADM(a) 및 CADM(b)의 입자 분포를 나타낸 것이다.
도 4는 암로디핀 유리염, 덱스트린, 유드라짓^® EPO, 덱스트린 및 유드라짓^® EPO를 갖는 암로디핀의 물리적 혼합물, ADM 및 CADM의 DSC 온도기록도를 나타낸 것이다.
도 5는 암로디핀 유리염, 덱스트린, 유드라짓^® EPO, 덱스트린 및 유드라짓^® EPO를 갖는 암로디핀의 물리적 혼합물, ADM 및 CADM의 분말 X-선 회절패턴을 나타낸 것이다.
도 6은 암로디핀 유리염, ADM, CADM 및 ODTs-CADM의 용출 프로파일(a: pH 1.2 HCl, b: pH 6.8 PBS)을 나타낸 것이다.
도 7은 암로디핀 유리염, ADM 및 CADM을 랫트에서 암로디핀 2.5 mg/kg의 용량으로 경구투여한 후 암로디핀의 혈장 농도 프로파일을 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

본 발명은 덱스트린 내에 암로디핀을 로딩한 마이크로캡슐; 및 상기 마이크로캡슐을 코팅한 유드라짓을 포함하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물을 제공한다.

본 발명은 덱스트린과 계면활성제를 증류수에 용해시키는 단계(제1단계); 암로디핀을 에탄올에 용해시키는 단계(제2단계); 상기 제1단계의 용액과 상기 제2단계의 용액을 혼합한 후, 1차 스프레이 건조하여 암로디핀 로딩된 덱스트린 마이크로캡슐을 제조하는 단계(제3단계); 및 유드라짓을 에탄올에 용해시켜 준비한 코팅 용액을 상기 마이크로캡슐에 첨가한 후, 2차 스프레이 건조하는 단계(제4단계)를 포함하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 제조방법을 제공한다.

상기 제1단계는 증류수 100 중량부에 대하여 덱스트린 60 내지 100 중량부와 계면활성제 0.5 내지 1.5 중량부를 용해시킬 수 있다. 상기 덱스트린은 수용해성 마이크로캡슐 형성 역할을 수행하며 상기 함량 범위를 벗어나면 불완전한 마이크로캡슐 형성의 문제가 야기될 수 있다. 그리고, 계면활성제는 소듐 로릴 설페이트, 암모늄 로릴 설페이트, 소듐 도데실 설페이트, 및 소듐 도데실벤젠설포네이트로 이루어진 군에서 선택될 수 있으며, 흡수촉진 및 분무건조물의 균일한 혼합 역할을 수행하며 상기 함량 범위를 벗어나면 분무공정의 수율 저하 및 분무건조물의 불균일성의 문제가 야기될 수 있다.

상기 제2단계는 에탄올 100 중량부에 대하여 암로디핀 유리염 5 내지 10 중량부를 용해시킬 수 있으며, 상기 함량 범위를 벗어나면 암로디핀 유리염 의 비균일성 분산의 문제가 야기될 수 있다.

상기 제3단계는 제1단계의 용액 70 내지 80 중량% 및 제2단계의 용액 20 내지 30 중량%을 혼합할 수 있으며, 상기 함량 범위를 벗어나면 암로디핀 유리염 의 비균일성 분산의 문제가 야기될 수 있다.

상기 제3단계는 140 내지 170℃에서 1차 스프레이 건조할 수 있으며, 상기 온도 범위를 벗어나면 분무건조 수율의 저하 및 건조분말의 흐름성의 문제가 야기될 수 있다.

상기 제4단계는 에탄올 100 중량부에 대하여 유드라짓 2 내지 10 중량부를 용해시킬 수 있으며, 상기 함량 범위를 벗어나면 비균질한 코팅 문제가 야기될 수 있다.

상기 제4단계는 90 내지 100℃에서 2차 스프레이 건조할 수 있으며, 상기 온도 범위를 벗어나면 과도한 에탄올 함유 또는 불완전한 코딩 문제가 야기될 수 있다.

본 발명에서는 덱스트린 내에 암로디핀을 로딩한 마이크로캡슐; 및 상기 마이크로캡슐을 코팅한 유드라짓을 포함하는 조성물을 압출법으로 타정하여 암로디핀 경구 붕해형 정제를 제조할 수 있다.

보다 상세하게는 암로디핀 경구 붕해형 정제를 제조하기 위하여, 덱스트린 내에 암로디핀을 로딩한 마이크로캡슐; 및 상기 마이크로캡슐을 코팅한 유드라짓을 포함하는 조성물에 부형제 및 붕해제를 첨가하여 혼합할 수 있다. 상기 부형제로는 만니톨, 에리스리톨, 자일리톨, 솔비톨, 말티톨 등의 당알콜류를 사용할 수 있으며, 상기 붕해제로는 정제의 제조에 일반적으로 사용되는 붕해제에서 1 또는 2종 이상 선택될 수 있으며, 미세결정 셀룰로오스, 크로스포비돈, 전분 등을 사용할 수 있지만, 이에 한정되는 것은 아니며 경구 붕해형 정제 제조를 위한 어떠한 부형제 및 붕해제를 사용하여도 무방하다.

더불어, 암로디핀 경구 붕해형 정제 시에 통상적인 정제 제조에 사용되는 공붕해제, 활택제, 감미제, 착향제 등을 추가로 첨가할 수 있다.

이하, 하기 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 다만, 이러한 실시예에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.

이하, 모든 실험은 암로디핀의 광분해를 최소화하기 위하여 제한된 명조건(30W 빨간 램프, 약 1.5 m 거리 유지) 하에서 수행하였다.

<실시예 1> 암로디핀-로딩 덱스트린 마이크로캡슐(ADM) 및 코팅된 ADM(CADM) 준비

ADM은 스프레이-건조 방법으로 제조하였다. 즉, 덱스트린(84g) 및 소듐 로릴 설페이트(1g)를 증류수(100 g)에 용해시키고, 암로디핀 유리염(5g)을 에탄올(80g)에 용해시켰다. 두가지 용액을 55-60℃에서 예비가열하고 혼합하였으며, 이렇게 얻어진 반응물은 0.7 mm 직경 노즐을 구비한 Bㆌchi B-290 미니 스프레이 건조기(Flawil, Switzerland)를 이용하여 스프레이 건조하였다. 이때, 스프레이 건조는 주입구 공기 온도 150-155℃, 배출구 공기 온도 100-110℃, 스프레이 유속 800 Nl/h, 피드 스프레이율 5 ml/min, 진공 100%의 조건에서 수행하였다. 이렇게 스프레이 건조된 분말 ADM을 모아 4℃에서 잘 밀봉된 용기에 담아 보관하였다.

에탄올(600g)에 유드라짓^® EPO(17.5g)을 용해시켜 준비한 코팅 용액을 ADM(82.5g)에 첨가하여 연속적으로 교반하였다. 이렇게 얻어진 ADM-현탁 코팅 용액을 스프레이 건조하여 CADM을 얻었다. 이때, 스프레이 건조는 주입구 공기 온도 90-100℃, 피드 스프레이율 7 ml/min, 진공 100%의 조건에서 수행하였다.

< 실시예 2> ADM 및 CADM 의 물성 분석

실시예 1에서 제조한 ADM 및 CADM의 모양과 표면을 백금으로 스퍼터링한 후 3.0 kV의 가속전압에서 Hitachi S-4800 주사전자현미경(SEM, Tokyo, Japan)을 이용하여 관찰하였다. 그 결과, ADM 및 CADM의 SEM 이미지는 도 2a 및 도 2b와 같이 매끄러운 표면을 갖는 구형이고 큰 입자들에 부착된 몇 개의 작은 입자들이 관찰되었다.

마이크로캡슐의 크기분포는 Mastersizer 2000 laser diffraction particle size analyzer (Malvern, Worcestershire, UK)를 이용하여 측정하였으며, 또한 입자크기는 SPAN에 의한 부피중량 평균 직경과 분포 너비로서 산출하였다. ADM의 평균입자경과 SPAN 값은 도 3과 같이 각각 13.3 ㎛ 및 2.4인 반면, CADM은 18.5 ㎛ 및 2.5로 나타났다. 더불어, CADM에서 크기분포의 변화없이 입자크기가 증가한 것은 ADM 상에 유드라짓^® EPO 코팅이 잘 형성됨을 입증하는 것이다.

암로디핀 유리염, 덱스트린, 유드라짓^® EPO, 덱스트린 및 유드라짓^® EPO를 갖는 암로디핀의 물리적 혼합물, ADM 및 CADM의 온도기록도는 Perkin Elmer 4000 differential scanning calorimeter (DSC, Norwalk, CT, USA)를 이용하여 분석하였다. 도 4와 같이, 암로디핀을 함유한 물리적 혼합물에서 관찰된 암로디핀의 144ㅀ에서의 흡열성(융해) 피크는 ADM 및 CADM에서 나타나지 않았다.

각 시료로부터 약 7mg을 알루미늄 팬에 놓고 15 ml/min의 질소 흐름 하 10℃/min의 가열속도, 25 내지 200℃에서 스캔하였다. 각 시료에 대한 X선 회절분석은 Rigaku D/MAX 2500 powder X선 회절분석기(Rigaku, Japan)를 이용하였으며, X선 패턴은 실온에서 10˚ 내지 70˚의 범위에서 2θ 스케일로 모았다. 도 5와 같이, 암로디핀의 어떠한 결정 피크도 ADM 또는 CADM에서 나타나지 않은 반면, 물리적 혼합물에서는 명확한 결정 피크가 나타났다. 이러한 결과로부터 ADM 및 CADM에서 암로디핀은 무정형 상태로 존재함을 알 수 있었다.

< 실시예 3> ADM 및 CADM 을 포함시킨 ODT 제조

직접 압출법에 의해 ADM을 함유한 ODT(ODTs-ADM)과 CADM을 함유한 ODT(ODTs-CADM)를 각각 제조하였다. 즉, ADM(118g) 또는 CADM(118g)에 40 메쉬 스크린에 통과시켜 준비한 미세결정 셀룰로오스(40g), 크로스포비돈(10g), 스프레이-건조된 만니톨(25g), 아스파탐(3g) 및 멘톨(2g)을 첨가하고 turbula 혼합기(Daemyoung DM-T2, Gwangmyeong, Korea)를 이용하여 60 rpm에서 5분 동안 혼합하였다. 이러한 혼합물에 소듐 스테아릴 푸마레이트(2g)을 윤활제로 첨가하고 5분 동안 균일하게 혼합하였다. Sejong GRC-7S rotary press (Sejong Pharmactech, Incheon, Korea)을 이용하여 최종 분말 혼합물을 200mg이 되도록 압축하였다. 9 mm 직경으로 세트된 round standard concave tooling을 이용하였으며, 압축력을 조정하여 3.0 kp의 정제 경도를 얻도록 하였다.

이렇게 얻어진 ADM 및 CADM을 포함시킨 ODT의 단면 SEM 이미지를 각각 도 2c 및 도 2d에 나타내었으며, 타정된 ADM에서는 파열 또는 의미있는 변형이 야기된 반면, CADM에서는 파열이나 의미있는 변형이 관찰되지 않고 원형이 유지되었다. 따라서, 유드라짓^® EPO로 코팅된 덱스트린 쉘이 타정 공정 시 야기되는 압축력에 의한 손상으로부터 ADM을 보호할 뿐 아니라, 암로디핀의 쓴맛을 차폐하는 데 효과적임을 알 수 있었다.

< 실시예 4> ODT 의 물리적 특성

무작위로 선택된 ODT의 무게, 두께 및 경도를 각각 측정하였다. 경도는 Erweka TBH 125 hardness tester (Heusenstamm, Germany)를 이용하여 측정하였다. ODT의 마손도 테스트는 Copley scientific FR 1000 friability tester (Nottingham, UK)를 이용하여 수행하였다. 30개의 먼지를 제거한 정제를 정확하게 칭량하였고, 테스터 드럼에 두었다. 25±1 rpm의 속도에서 100회의 회전 후, 정제를 다시 칭량하고 % 마손도를 USP 35 <1216> 정제 마손도 테스트법에 따라 산출하였다.

ODT의 in vitro 붕해시험은 Korean Pharmacopeia disintegration apparatus (Labfine, Seoul, Korea)을 이용하여 37±1℃의 증류수에서 수행하였다. 한 개의 정제를 2개의 바구니의 12개의 튜브 각각에 놓고 완전히 붕해되는 시간을 측정하였다.

다음 표 1에 따르면, 무게 변화 및 마손도는 컴페디얼 한계 이내로 나타났으며, 평균 타정 경도는 목표치와 유사하게 나타났으며, 평균 붕해 시간은 30초 미만으로 나타났다.

[표 2]

< 실시예 5> ADM , CADM 및 ODTs 에서의 에탄올 및 약물 함량 결정

ADM, CADM 및 ODTs에서의 에탄올 함량은 가스크로마토그래피를 이용하여 결정하였다. 아세토니트릴(0.2 ml)과 각 시료(0.5g)을 정제한 물에 용해시켜 50 ml로 조정하였다. 무수에탄올(2 ml)을 아세토니트릴(2 ml)에 첨가하고 물로 희석하여 50 ml의 내부표준용액을 준비하였다. 시료들은 불꽃이온화 검출기를 구비한 Agilent 7890 가스크로마토그래피 시스템(Palo Alto, CA, USA)을 이용하여 정량적으로 분석하였다. 이때, Agilent J&W DB 624 모세관 컬럼(Santa Clara, CA, USA)을 이용하며, 질소를 캐리어 가스로 이용하였다. 컬럼, 주입기 및 검출기는 각각 150, 170 및 170℃에서 유지시켰다.

정확하게 칭량한 ADM, CADM 및 ODT 시료를 각각 메탄올-물 공용매(50%, v/v)에 용해시키고 30분 동안 초음파처리 하여 모든 입자를 분쇄하였고, UV 검출기(Santa Clara, CA, USA)를 구비한 Agilent 1260 infinity 고성능액체크로마토그래피(HPLC) 시스템을 이용하여 235 nm에서 암로디핀 함량을 정량하였다. 정지상을 위해 30℃로 고정된 Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 컬럼(Santa Clara, CA, USA)을 이용하였고, 메탄올과 증류수(70:30, v/v)로 이루어진 이동상은 아세트산으로 pH 3.0으로 조정한 후 1.0 ml/min의 유속에서 이용하였다.

다음 표 2에 ADM, CADM, ODTs-ADM 및 ODTs-CADM의 에탄올 및 암로디핀 함량을 정리하였다. ADM의 평균 에탄올 함량은 2.37±0.17%(w/w)이며, 스프레이 코팅 전 첨가된 에탄올 양의 단지 5%만이 ADM 내에 들어있었다. ADM 내 암로디핀의 실제 양은 이론치 약물 함량의 98%인 5.43%로 나타났으며, 10개의 다른 위치에서 얻은 ADM 시료들에서 암로디핀 함량 변화가 적어 균일하게 분포하는 것으로 확인되었다. 그리고, CADM의 평균 에탄올 함량은 이론치 에탄올 함량의 약 72%인 1.95%로 감소하였으며, CADM 내의 암로디핀의 함량은 4.38±0.18%로 이론치인 4.41%와 거의 동일한 것으로 나타나 암로디핀의 소실이 거의 없이 균일하게 분포하는 것으로 확인되었다.

또한, ADM을 ODTs로 타정한 경우에는 ADM의 파열에 의해 남아있는 에탄올의 대부분(92%)이 제거된 반면, CADM에서는 남아있는 에탄올의 거의 대부분(99%)이 ODTs-ADM에서도 유지되는데, 타정 압축 공정 시 ADM 및 CADM에 포함되는 에탄올 함량의 명확한 변화됨을 알 수 있었다. 그리고, ODTs-CADM에서 측정된 암로디핀 함량은 이론치와 거의 동일한 2.58%로 나타났다.

[표 2]

< 실시예 6> in vitro 용출시험

암로디핀 유리염, ADM, CADM 및 ODT-CADM에 대한 용출시험은 100 rpm 회전을 유지하면서 USP 35 <711> 용출시험 페달법을 이용하여 37±0.5℃에서 3회 수행하였다. 암로디핀 10.0 mg과 동일한 양을 포함한 각 시료를 용출용액인 pH 1.2의 염산 용액 또는 pH 6.8의 인산완충액(PBS) 900 ml에 넣고, 정해진 시간 간격(10, 20, 30, 60, 90 및 120분)에 각 용출용액 1 ml를 모으고, 0.45 ㎛ 멤브레인 필터를 이용하여 여과하였다. 용출된 암로디핀의 농도는 앞선 HPLC 방법을 이용하여 측정하였다.

도 6은 암로디핀 유리염, ADM, CADM 및 ODTs-CADM의 in vitro 용출시험 결과를 나타낸 것으로서, pH 1.2 염산 용액에서는 ADM, CADM 및 ODTs-CADM의 암로디핀 용출은 암로디핀 유리염보다 훨씬 신속하게 나타났다. 즉, 암로디핀 유리염은 10분만에 암로디핀 31% 용출된 반면, ADM과 CADM은 10분만에 암로디핀 각각 96.3% 및 83.1% 용출되었지만, CADM과 ODTs-CADM 간의 유의적인 용출 차이는 나타나지 않았다. 그리고, ADM, CADM 및 ODTs-CADM에서는 30분 후 거의 완전하게 암로디핀이 용출되었다. 이와 같이 ADM, CADM 및 ODTs-CADM에서의 향상된 암로디핀의 용출속도는 무정형 분산과 덱스트린 마이크로캡슐 내의 캠슐화에 의한 것으로 판단되었다.

pH 6.8 PBS 용액에서의 암로디핀 유리염, ADM, CADM 및 ODTs-CADM의 용출 결과는 pH 1.2 염산 용액와 유사하게 나타났으며, pH 6.8 용액에서 pH 1.2 용액에 비해 용출속도가 더 느린 것으로 나타났다.

< 실시예 7> In vitro 약동력학 분석

수컷 Sprague-Dawley 랫트(평균중량 285±15g, Samtako Bio Korea, Seoul, Korea)를 3개 실험군(n=5)으로 무작위로 나눈 후, 수술 전 물을 주지 않고 밤새 절식시켰다. 디에틸에테르로 마취시킨 후, 혈액 응고를 방지하기 위해 헤파린을 처리한 생리식염수로 씻어낸 23-게이즈 폴리에틸렌 튜브를 이용하여 대퇴정맥에 캐뉼러를 삽입시켰다. 암로디핀 유리염, ADM 및 CADM 분말을 0.5%(w/v) 카르복시메틸셀룰로오스 용액 1 ml에 균일하게 분산시킨 후, 마취에서 회복된 랫트에게 2.5 mg/kg의 용량으로 경구로 투여하였다. 혈액 시료(0.5 ml)는 정해진 시간 간격(0, 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12 및 24 시간)마다 뽑고 3,500 rpm에서 15분 동안 원심분리 시켰다. 이렇게 분리된 혈장 시료를 -70℃에서 저장하였고, 이후 실험에 사용하였다. 모든 동물 관리 및 절차는 동물윤리지침에 따라 수행하였으며, 동물연구 프로토콜은 가톨릭대학 실험동물 운영위원회의 승인을 받았다(Approval No. 2012-019).

혈장에서의 암로디핀 농도는 종전 알려진 방법을 약간 변형하여 LC-MS/MS 방법으로 측정하였다. electrospray ionization source를 구비한 Waters ZQ 2000 LC/MS system (New York, NY USA)를 이용하여 positive mode에서 수행하였다. 내부표준물질인 데시프라민(0.2 ㎍)을 혈장 시료(200 ㎕)에 첨가한 후 메틸터트부틸에테르(1 ml)를 혼합하여 단백질을 제거하였다. 원심분리하여 유기상을 모은 후, 증발시켜 건조 잔사를 얻고, 이를 200 ㎕의 이동상(아세토니트릴:물 = 60:40, 0.1 %(v/v) 포름산 첨가)에 재현탁시켰다. 각 혈장 추출액(40 ㎕)를 40℃의 온도에서 Waters Xterra MS C18 column (New York, NY, USA)에 적용하여 0.2 ml/min의 유속으로 이동상을 펌핑하여 용출하였다. 모세관 전압, 머문 시간 및 콘 전압을 각각 3.2 kV, 0.8초 및 30V로 하였다. Waters MassLynx software (New York, NY, USA)를 이용하여 데이터를 수집하고 분석하였다.

혈장 농도 하 면적- 0 내지 24시간 곡선(AUC_0-24h)는 사다리꼴 공식-외삽법을 이용하여 산출하였다. 최대 혈장 농도(C_max), C_max에 도달하는 시간(T_max) 및 제거 반감기(T_1/2)는 non-compartmental analysis (WinNolinㄾ program, Cary, NC, USA)을 이용하여 실험치로부터 산출하였다. 0.05 미만의 p값은 unpaired Student's t-test (Jandel Scientific Sigmaplot, Corte Madera, CA, USA)를 이용하여 통계적으로 의미있음을 고려하였다.

도 7은 암로디핀 유리염, ADM 및 CADM 실험군의 혈장 농도-시간 프로파일에 관한 것으로서, ADM 실험군 및 CADM 실험군의 암로디핀 혈장 농도가 암로디핀 유리염 실험군에 비해 훨씬 높은 것으로 나타났다. 그리고, 다음 표 3과 같이 ADM 실험군의 AUC_0-24h 및 C_max 값은 암로디핀 유리염 실험군보다 각각 2.7 및 2.6배로 더 높았으며, CADM 실험군의 AUC_0-24h 및 C_max 값은 암로디핀 유리염 실험군보다 각각 2.7 및 2.5배로 더 높았다. 그리고, 암로디핀 유리염, ADM 및 CADM 실험군 간 T_max 및 T_1/2는 유의적인 차이가 없었다. 특히, 현재 시판되는 암로디핀 베실레이트를 함유한 정제(Norvasc^®)의 AUC₀ _-24h이 368.2±68.9 ngㅇh/ml, C_max이 38.8±9.8 ng/ml, T_max가 3.5±0.9 h, T₁ _/2가 7.9±0.5 h인 것으로 알려져 있는데(Drug Dev Ind Pharm 2013; 39: 1133-41), CADM의 AUC₀ _-24h 및 C_max 값이 시판 암로디핀 제품의 약 96% 및 90%이므로, CADM은 현재 판매되는 암로디핀 제품과 동등한 효과를 나타낼 수 있음을 확인하였다.

[표 3]

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.

Claims

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덱스트린과 계면활성제를 증류수에 용해시키는 단계(제1단계);
암로디핀을 에탄올에 용해시키는 단계(제2단계);
상기 제1단계의 용액과 상기 제2단계의 용액을 혼합한 후, 1차 스프레이 건조하여 암로디핀 로딩된 덱스트린 마이크로캡슐을 제조하는 단계(제3단계); 및
유드라짓^®을 에탄올에 용해시켜 준비한 코팅 용액을 상기 마이크로캡슐에 첨가한 후, 2차 스프레이 건조하는 단계(제4단계)
를 포함하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 제조방법.
청구항 2에 있어서, 상기 제1단계는 증류수 100 중량부에 대하여 덱스트린 60 내지 100 중량부과 계면활성제 0.5 내지 1.5 중량부를 용해시키는 것을 특징으로 하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 제조방법.
청구항 2에 있어서, 상기 제2단계는 에탄올 100 중량부에 대하여 암로디핀 유리염 5 내지 10 중량부를 용해시키는 것을 특징으로 하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 제조방법.
청구항 2에 있어서, 상기 제3단계는 제1단계의 용액 70 내지 80 중량% 및 제2단계의 용액 20 내지 30 중량%을 혼합하는 것을 특징으로 하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 제조방법.
청구항 2에 있어서, 상기 제3단계는 140 내지 170℃에서 1차 스프레이 건조하는 것을 특징으로 하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 제조방법.
청구항 2에 있어서, 상기 제4단계는 에탄올 100 중량부에 대하여 유드라짓^® 2 내지 10 중량부를 용해시키는 것을 특징으로 하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 제조방법.
청구항 2에 있어서, 상기 제4단계는 90 내지 100℃에서 2차 스프레이 건조하는 것을 특징으로 하는 암로디핀 경구 붕해형 정제용 조성물의 제조방법.
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