KR101533733B1 - 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품 조성물, 및 상기 조성물을 이용하여 암을 예방 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.

Description

오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 조성물{COMPOSITION FOR PREVENTING OR TREATING CANCER COMPRISING ALNUS JAPONICA, DESCURAINIA SOPHIA, AND PEUCEDANUM PRAERUPTORUM DUNN MIXED EXTRACTS OR FRACTION THEREOF}
본 발명은 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품 조성물, 및 상기 조성물을 이용하여 암을 예방 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.
암은 현재 전세계적으로 가장 많은 사망자를 내는 질병 중 하나로서, 암 발생 연령은 점차 낮아지고 있는 반면 평균 수명은 점차 연장되어가고 있어 암 발생률은 더욱 증가할 것으로 전망되고 있다. 국립 암센터 (National Cancer Center)에서 제공하는 2013년 통계 자료에 따르면 (비특허문헌 1), 2010년 암 등록 통계과에 등록된 우리 나라 암 발생 환자는 모두 202,053명이며, 2015년에는 약 27 만여 명에 달할 것으로 추정되고 있다.
종래 항암 치료에 사용되는 항암제로 백금을 함유하는 플라티늄 (platinum)계 항암제가 널리 사용되고 있다. 이러한 플라티늄계 항암제의 대표적인 제제로 시스플라틴 (Cisplatin), 카르보플라틴 (Carboplatin), 네다플라틴 (Nedaplatin) 등이 있다.
이러한 종래 항암제들은 화학적으로 합성된 항암제들로서, 이를 개체에 투여하는 경우 체내에 심각한 자극을 유발하여 개체의 체중을 감소시키고, 간독성 (hepatotoxicity), 신독성 (nephrotoxicity), 신경 독증 (neurotoxicity), 이독성 (ototoxicity)을 나타내는 등, 장기에 이상 소견을 보이는 것으로 나타났다. 이와 같은 종래의 항암제들이 유발하는 심각한 부작용에 관한 연구가 끊임없이 발표되고 있으며, 이에 항암 치료에 따른 부작용을 줄이려는 연구가 계속되고 있는 실정이다 (비특허문헌 2).
이러한 배경하에, 본 발명자들은 항암 효능이 우수하면서도 항암 치료 시 부작용을 유발하지 않는 물질을 발명하고자 연구를 수행하였으며, 이에 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물이 우수한 항암 효능을 나타내면서도 천연물 유래의 성분이어서 부작용을 유발하지 않는다는 것을 발견하고, 이를 활용한 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 완성하기에 이르렀다.
국립 암센터, 통계로 본 암 현황 (Cancer Facts & Figures 2013), p 18, 2013 Dong Wang 및 Stephen J. Lippard, Nature Reviews Drug Discovery, Vol. 4, 307-320 (April 2005)
본 발명은 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 이용하여 암을 예방, 개선 또는 치료하는 것을 목적으로 한다.
구체적으로, 본 발명의 하나의 목적은 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은 상기의 목적을 달성하기 위한 하나의 양태로서, 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 일 양태에 따르면, 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 오리나무 (Alnus japonica )는 유리목 (楡里木), 적양 (赤楊) 또는 다조 (茶條)라고도 불리는 낙엽큰키나무로서 자작나무과 (Betulaceae), 오리나무속 (Alnus)에 속하며, 국내에 자생하는 식물이다.
본 발명의 상기 재쑥 (Descurainia Sophia)은 정력자라고도 불리는 두해살이풀로서 십자화과 (Brassicaceae), 재쑥속 (Descurainia)에 속하며, 국내에 자생하는 식물이다.
본 발명의 상기 백화전호 (Peucedanum praeruptorum Dunn)는 산형과 (Umbelliferae)에 속하는 식물로서, 동명의 식물명을 갖는 전호 (Anthriscus sylvetris HOFFMANN)와는 생약, 한약재로서 특별히 상이하게 구분되는 식물이다.
본 발명에서 사용되는 용어, "추출물"은 천연물의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액이나 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다.
본 발명에서 상기 오리나무, 재쑥 또는 백화전호를 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있다.
본 발명에서 상기 오리나무, 재쑥 또는 백화전호를 추출하는 데에 사용되는 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있으며, 알코올을 용매로 사용하는 경우에는 보다 바람직하게는 C1 내지 C4의 알코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올)을 사용할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 에탄올을 사용할 수 있다.
본 발명의 상기 오리나무, 재쑥 또는 백화전호의 추출물은, 상기 오리나무, 재쑥 또는 백화전호의 천연, 잡종, 변종 식물의 다양한 기관으로부터 추출될 수 있고, 예를 들어 뿌리, 지상부, 줄기, 잎, 꽃, 열매의 몸통, 열매의 껍질뿐만 아니라 식물 조직 배양물로부터도 추출이 가능하다.
본 발명에서 사용되는 용어, "분획물"은 여러 다양한 구성 성분들을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 성분 그룹을 분리하기 위하여 분획을 수행하여 얻어진 결과물을 의미한다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 오리나무, 재쑥 또는 백화전호 추출하여 얻은 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 사용하였다.
본 발명에서 상기 분획물을 얻는 데에 사용되는 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 등의 극성 용매; 헥산 (Hexane), 에틸 아세테이트 (Ethyl acetate), 클로로포름 (Chloroform), 디클로로메탄 (Dichloromethane) 등의 비극성 용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 분획 용매 중 알코올을 사용하는 경우에는 바람직하게는 C1 내지 C4의 알코올을 사용할 수 있다.
본 발명의 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물은, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호를 각각 추출한 후, 각 추출물을 혼합하여 제조하거나, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호를 함께 추출하는 방식으로 제조할 수 있다.
이와 같은 본 발명의 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물은, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 각각의 추출물을 단독으로 사용하는 경우보다 항암 효능에 있어 월등한 시너지 효과를 나타낸다. 특히 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물은 종양의 성장을 억제하고, 암 세포의 전이를 억제하며, 신생 혈관 형성을 억제하는 데에 탁월한 시너지 효과를 나타내어, 이들을 각각 단독으로 사용하는 경우에 비해 상당한 정도로 우수한 암의 예방, 개선 또는 치료 효과를 나타낸다.
본 발명의 상기 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 함유된 상기 오리나무의 추출물 또는 이의 분획물, 재쑥의 추출물 또는 이의 분획물, 및 백화전호의 추출물 또는 이의 분획물의 중량비는 특별히 제한되지 아니하나, 바람직하게는 약 1:1:1의 중량비로 함유될 수 있다. 상기 범위로 함유되는 경우, 암 세포의 성장 및 암 세포의 전이를 효과적으로 억제할 수 있으며, 신생 혈관 형성 작용 또한 효과적으로 억제할 수 있는 이점이 있다.
본 발명의 상기 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있으며, 상기 담체와 함께 제제화되어 식품, 의약품, 사료 첨가제 및 음용수 첨가제 등으로 제공될 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용 가능한 담체"란 생물체를 자극하지 않으면서, 투여되는 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체 또는 희석제를 의미한다.
본 발명에 사용 가능한 상기 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되고 약학적으로 허용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
또한, 필요한 경우 항산화제, 완충액 및/또는 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가하여 사용할 수 있으며, 희석제, 분산제, 계면 활성제, 결합제 및/또는 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제 등으로 제제화하여 사용할 수 있다.
본 발명의 상기 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물의 투여 방식은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방식에 따를 수 있다. 상기 투여 방식의 비제한적인 예로, 조성물을 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있다.
본 발명의 상기 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물은 목적하는 투여 방식에 따라 다양한 제형으로 제작될 수 있다. 경구 투여용 제형의 비제한적인 예로는, 트로키제 (troches), 로젠지 (lozenge), 정제, 수용성 현탁액, 유성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등을 들 수 있다.
본 발명의 상기 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 정제 또는 캡슐 등과 같은 경구 투여용 제형으로 제제화하기 위하여, 락토오스, 사카로오스 (Saccharose), 솔비톨 (Sorbitol), 만니톨 (Mannitol), 전분, 아밀로펙틴 (Amylopectin), 셀룰로오스 (Cellulose) 또는 젤라틴 (Gelatin) 등과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트 (dicalcium phosphate) 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕괴제; 스테아르산 마그네슘 (magnesium stearate), 스테아르산 칼슘 (calcium stearate), 스테아릴 푸마르산 나트륨 (sodium stearyl fumarate) 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스 (polyethylene glycol wax) 등과 같은 윤활유 등을 포함할 수 있다. 나아가 캡슐 제형의 경우 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등을 추가로 함유할 수 있다.
본 발명의 상기 조성물을 비경구 투여하는 방법으로는, 예를 들어 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여 또는 국부 투여 등을 이용할 수 있으며, 상기 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무하는 방법 또한 이용할 수 있으나 이들에 제한되지 아니한다.
상기 비경구 투여를 위한 제형으로는, 예를 들어 피하 주사, 정맥 주사 또는 근육 내 주사 등의 주사용 형태; 좌제 주입 방식; 또는 호흡기를 통하여 흡입이 가능하도록 하는 에어로졸제 등 스프레이용으로 제제화할 수 있으나 이에 제한되지 아니한다. 상기 주사용 제형으로 제제화하기 위해서는 본 발명의 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플 (ampoule) 또는 바이알 (vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다. 상기 에어로졸제 등의 스프레이용으로 제형화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합될 수 있다.
본 발명의 상기 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물의 적합한 도포, 분무 또는 투여량은, 상기 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로는 물론, 투여 대상이 되는 동물의 나이, 체중, 성별, 질병 증상의 정도, 섭취하는 음식, 배설 속도 등과 같은 요인들에 의해 다양해 질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어, "암"은 세포의 사멸 조절과 관련된 질병으로서, 정상적인 세포 자살 (apoptosis)의 균형이 깨지는 경우 세포가 과다 증식하게 됨으로써 생기는 질병을 의미한다. 이러한 비정상적 과다 증식 세포들은 경우에 따라 주위 조직 및 장기에 침입하여 종괴 (腫塊)를 형성할 수 있으며 체내의 정상적인 구조의 파괴나 변형을 유발할 수 있는데, 이러한 상태를 통칭하여 암이라고 한다.
일반적으로 종양 (tumor)이라 하면 신체 조직의 자율적인 과잉 성장에 의해 비정상적으로 자란 덩어리를 의미하며, 종양은 양성 종양 (benign tumor)과 악성 종양 (malignant tumor)으로 구분할 수 있다. 악성 종양은 양성 종양에 비해 성장 속도가 매우 빠르며 주변 조직에 침윤하면서 전이 (metastasis)가 일어나 생명을 위협하게 된다. 이러한 악성 종양을 통상적으로 '암 (cancer)'이라 한다.
본 발명에서 상기 암의 종류는 특별히 제한되지 아니한다. 상기 암의 비제한적인 예로 뇌척수종양, 두경부암, 폐암, 유방암, 흉선종, 중프종, 식도암, 취암, 대장암, 간암, 위암, 췌장암, 담도암, 신장암, 방광암, 전립선암, 고환암, 생식 세포종, 난소암, 자궁 경부암, 자궁 내막암, 대장암, 림프종, 급성 백혈병, 만성 백혈병, 다발성 골수종, 육종, 악성 흑색종 등을 들 수 있다.
본 발명의 조성물은 상술한 종류의 암 이외의 암에 있어서도 효과적인 항암 효능을 나타내나, 특히 폐암, 대장암, 위암, 혈액암 및 림프종의 예방, 개선 또는 치료에 보다 효과적이다.
본 발명에서 사용되는 용어, "예방"이란, 본 발명의 상기 암의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 개체에 투여하여 암의 발병을 억제시키거나 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "치료"란, 본 발명의 상기 조성물을 암 발병 의심 개체에 투여하여 암의 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개선"은 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 상기 건강 기능 식품 조성물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 비제한적인 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등을 들 수 있다.
본 발명의 상기 건강 기능 식품 조성물이 음료 조성물인 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비제한적인 예로 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 수크로오스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 들 수 있다. 상기 첨가되는 추가 성분의 비율은 당업자의 선택에 의해 적절하게 결정될 수 있다.
상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품 조성물은 천연 과일 주스, 과일 음료 또는 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 사용되거나 2 이상을 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가물의 비율 또한 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 양태에 따르면, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 암의 예방 또는 개선용 사료 첨가제 또는 음용수 첨가제를 제공한다.
본 발명의 상기 사료 첨가제 또는 음용수 첨가제는 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물을 사료 첨가제 또는 음용수 첨가제 형태로 따로 제조하여 사료 또는 음용수에 혼합시키는 방식으로 사용하거나, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물을 사료 또는 음용수 제조시 직접 첨가하는 방식으로 사용할 수 있다.
본 발명의 상기 사료 첨가제 또는 음용수 첨가제는 액상 또는 건조 상태일 수 있으며, 바람직하게는 건조된 분말 형태일 수 있다. 본 발명의 상기 사료 첨가제 또는 음용수 첨가제를 건조된 분말 형태로 제조하기 위한 건조 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법을 사용할 수 있다. 상기 건조 방법의 비제한적인 예로는, 통풍 건조, 자연 건조, 분무 건조, 동결 건조 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 가지 이상의 방법을 함께 이용하는 방식으로 수행될 수 있다.
본 발명의 상기 사료 첨가제 또는 음용수 첨가제는 필요에 따라 기타 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 상기 사용 가능한 첨가제의 비제한적인 예로는, 사료 또는 음용수의 품질 저하를 방지하기 위하여 첨가하는 결착제, 유화제, 보존제 등; 사료 또는 음용수의 효용 증대를 위하여 첨가하는 아미노산제, 비타민제, 효소제, 생균제, 향미제, 비단백질태질소화합물 (非蛋白質態窒素化合物), 규산염제, 완충제, 착색제, 추출제 또는 올리고당 등이 있으며, 그 외에 사료 혼합제 등을 추가로 포함할 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상이 함께 첨가될 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 양태에 따르면, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 암의 예방 또는 개선용 사료 또는 음용수를 제공한다.
상기 사료 또는 음용수는, 사료 또는 음용수에 본 발명의 상기 사료 첨가제 또는 음용수 첨가제를 첨가하여 제조하거나, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물을 직접 첨가하여 제조할 수 있다.
본 발명에서 상기 사료의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 사료를 사용할 수 있다. 상기 사료의 비제한적인 예로는, 곡물류, 근과류, 식품 가공 부산물류, 조류, 섬유질류, 제약 부산물류, 유지류, 전분류, 박류 또는 곡물 부산물류 등과 같은 식물성 사료; 단백질류, 무기물류, 유지류, 광물성류, 유지류, 단세포 단백질류, 동물성 플랑크톤류 또는 음식물 등과 같은 동물성 사료를 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
본 발명에서 상기 음용수의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 음용수를 사용할 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 양태에 따르면, 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 포함하는 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
본 발명에서 사용되는 용어, "개체"란, 암이 발병되었거나 발병할 가능성이 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미한다.
본 발명의 상기 예방 또는 치료 방법은 구체적으로, 암이 발병하였거나 발병할 위험이 있는 개체에 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물을 약학적으로 유효한 양으로 투여하는 단계를 포함한다. 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물의 적합 한 1 일 총 사용량은 올바른 의학적 판단 범위 내에서 당업자에 의해 적절하게 결정될 수 있다.
특정 동물에 대한 상기 조성물의 구체적인 약학적 유효량은, 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 해당 개체의 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 성별 또는 식이는 물론, 상기 조성물의 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료 기간 등을 고려하여 결정될 수 있으며, 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 잘 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있다.
본 발명의 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물의 바람직한 1 일 총 사용량은 약 500 mg/kg/일 내외일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 대수증식기의 A549사람 폐암 세포주를 경피 주사로 주입한 마우스에 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물을 투여하여 종양의 크기 및 중량을 측정한 결과, 종래의 화학적 합성 항암제, 예를 들어 시스플라틴 (Cisplatin)과 같은 백금 함유 플라티늄계 항암제를 사용하는 경우보다 월등한 항암 효능을 나타내는 것이어서 상당히 의미있는 결과에 해당한다. 이러한 결과는 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 포함하는 조성물을 항암 치료에 사용하는 경우, 상기 세 가지 물질의 우수한 시너지 효과에 의해 도출되는 것으로 판단된다.
상기 결과는, 본 발명의 상기 조성물 및 시스플라틴 각각의 항암 치료에 따른 부작용 발생 여부를 관찰한 실시예의 결과에 비추어 상당히 의미있는 결과에 해당한다. 구체적으로 본 발명의 일 실시예에 따르면, 대수증식기의 A549사람 폐암 세포주를 경피 주사로 주입한 마우스에 본 발명의 상기 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물, 및 시스플라틴을 각각 투여하여 마우스의 체중 및 장기 (간 및 신장)의 무게를 측정한 결과, 시스플라틴을 투여한 마우스의 경우 체중 및 장기 무게 모두 상당히 감소된 반면, 본 발명의 상기 오리나무 및 재쑥의 혼합 추출물을 투여한 마우스의 경우, 체중 및 장기 무게의 감소가 관찰되지 않았다.
종래 화학적 합성 항암제의 경우, 항암 치료에 따른 체중 감소 및 간, 신장, 비장 등의 장기에 이상 소견을 보이는 등 부작용이 심각한 것과 비교할 때, 본 발명은 천연물 유래의 조성물로서, 항암 효능 이외에 체내에 심각한 자극을 가한다거나 유해한 작용을 유발함이 없이 안전하게 사용할 수 있으며, 따라서 본 발명의 조성물을 이용하여 항암 치료를 수행하는 경우, 치료 대상이 되는 개체에 부작용을 유발하지 않는 이점이 있다.
상기의 결과에 비추어, 본 발명의 조성물은 종래 부작용을 유발하는 항암제를 사용하기 곤란한 건강 상태를 갖는 개체, 저연령 또는 고연령의 개체 및 체내외에 가해지는 자극에 민감한 체질을 갖는 개체 등에서 보다 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 상기 예방 또는 치료 방법에서 상기 조성물을 투여하는 투여 경로 및 투여 방식은 특별히 제한되지 아니하며 목적하는 해당 부위에 상기 조성물을 포함하는 조성물이 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다. 구체적으로, 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 그 투여 경로의 비제한적인 예로는, 구강, 직장, 국소, 정맥내, 복강내, 근육내, 동맥내, 경피, 비측내 또는 흡입 등을 통하여 투여되는 것을 들 수 있다.
본 발명의 상기 조성물은 보다 바람직하게는 구강 투여할 수 있다.
본 발명의 조성물은 암 세포의 성장 및/또는 증식을 억제하는 작용, 암 세포의 전이를 억제하는 작용, 및 신생 혈관 형성을 억제하는 작용을 하여, 암을 효과적으로 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
특히, 본 발명의 조성물은 오리나무의 추출물 또는 이의 분획물과 재쑥의 추출물 또는 이의 분획물, 백화전호의 추출물 또는 이의 분획물을 함께 사용함으로써, 이들 각각의 추출물 또는 분획물을 단독으로 사용하는 경우에 비하여 우수한 시너지 효과를 나타내어 효과적으로 암을 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 천연물로부터 유래된 것이어서 항암 효능 이외에 체내에 심각한 자극을 가한다거나 유해한 작용을 유발함이 없이 안전하게 사용할 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물을 이용하여 항암 치료를 수행하는 경우, 치료 대상이 되는 개체에 부작용을 유발하지 않는다.
도 1a는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물, 및 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 종양 부피 증가 억제 효과를 나타낸 것이다. 도면에서 AJ는 오리나무, DS는 재쑥, PP는 백화전호의 추출물을 나타내며, 각 추출물의 혼합 추출물은 "＋" 기호로 나타내었다. 이하 동일하다.
도 1b는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물, 및 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 투여에 따른 종양의 부피 변화를 측정한 데이터를 오리나무 단독추출물, 재쑥 단독추출물, 백화전호 단독추출물 및 시스플라틴 투여군과 비교하여 나타낸 것이다.
도 1c는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 종양 무게 증가 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 투여에 따른 마우스의 체중 변화를 측정한 것이다.
도 3a는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 투여에 따른 간 무게 변화를 측정한 것이다.
도 3b는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 투여에 따른 신장 무게 변화를 측정한 것이다.
도 4a는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 처리에 따른 혈관내피세포에서의 세포 이동 억제 효과를 현미경으로 관찰한 것이다.
도 4b는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 처리에 따른 혈관내피세포에서의 세포 이동 억제 효과를 측정한 데이터이다.
도 5a는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 처리에 따른 혈관내피세포에서의 튜브 형성 억제 효과를 현미경으로 관찰한 것이다.
도 5b는 본 발명의 일 양태인 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물의 처리에 따른 혈관내피세포에서의 튜브 형성 억제 효과를 측정한 데이터이다.
이하, 제조예 및 실시예들을 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 다만, 이들 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것에 불과하므로 본 발명의 범위가 이들 제조예 및 실시예에 의해 한정되는 것으로 해석되어서는 아니된다.
제조예 1: 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 추출물의 제조
(1) 오리나무 추출물의 제조
시중의 오리나무 가지 절편을 입수하여 건조하고 분쇄한 후, 70% 에탄올에 담가 초음파 추출 (sonication)를 수행하였다. 상기 초음파 추출은 매회 용매를 교환하여 수행하였으며, 1회에 60 분씩 총 2회 반복 수행하였다. 상기 초음파 추출 후, 이를 감압 농축하고 균질화 과정을 거쳐 오리나무의 추출물을 수득하였다. 상기 수득된 추출물을 125 mg/ml 내지 500 mg/ml의 농도로 2% 에탄올을 포함하는 0.5% 카르복시메틸 셀룰로오스 (Carboxymethyl cellulose; CMC) 수용액에 녹여 냉동 상태로 보관하였다.
(2) 재쑥 추출물의 제조
시중의 재쑥의 씨앗을 입수하여 건조하고 분쇄한 후, 재쑥 씨앗 9 kg 당 40L의 80% 에탄올을 사용하여 실온에서 추출하였다. 상기 추출은 매회 용매를 교환하여 수행하였으며, 1회에 24 시간씩 총 3회 반복 수행하였다. 상기 추출 후, 이를 감압 농축하여 상층부의 기름 성분을 제거한 후, 하층부의 추출물을 건조 및 균질화하여 재쑥의 추출물을 수득하였다. 상기 수득된 추출물을 125 mg/ml 내지 500 mg/ml의 농도로 2% 에탄올을 포함하는 0.5% 카르복시메틸 셀룰로오스 (Carboxymethyl cellulose; CMC) 수용액에 녹여 냉동 상태로 보관하였다.
(3) 백화전호 추출물의 제조
시중의 백화전호의 뿌리를 입수하여 상기 오리나무의 추출물 제조 방법과 동일한 방법으로 백화전호의 추출물을 제조하였다.
(4) 오리나무, 재쑥 및/또는 백화전호의 혼합 추출물의 제조
상기 제조한 각각의 오리나무, 재쑥 및/또는 백화전호의 추출물을 혼합하여 제조하거나, 오리나무, 재쑥 및/또는 백화전호를 원재료 상태에서 상술한 방법 중 한 가지 방법에 따라 함께 추출하여 제조할 수 있다.
본 실시예에서는 상기 제조한 각각의 오리나무, 재쑥 및/또는 백화전호의 추출물을 혼합하여 사용하였다.
제조예 2: 오리나무, 재쑥 및 백화전호 의 분획물의 제조
상기 제조예 1에서 얻어진 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 추출물 각각에 증류수를 가하여 현탁시켰다. 그 다음, 동량의 n-헥산 (n-Hexane)을 가하여 혼합한 후 n-헥산 가용성 분획부와 물 가용성 분획부를 분리하였고, 이를 3회 반복하여 실시한 다음, 이를 여과하고 감압 농축하여 헥산 분획물을 수득하였다. 그 다음, 상기 헥산 분획물을 제거하고 남은 물층에 에틸아세테이트를 동량 가하고 상기와 동일한 방법으로 에틸아세테이트 분획물을 수득하였다. 그 다음, 상기 에틸아세테이트 분획물을 제거하고 남은 물층에 부탄올을 동량 가하여 역시 상기와 동일한 방법으로 부탄올 분획물을 수득하였으며, 그 다음 상기 부탄올 분획물을 제거하고 남은 물층을 농축하여 물 분획물을 수득하였다.
상기 수득한 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 물 분획물을 각각 감압 건조하여 냉동 상태로 보관하였다.
실시예 1: 오리나무, 재쑥 및/또는 백화전호 의 혼합 추출물 투여에 의한 종양 성장 억제 효과 검증
상기 제조예 1에서 제조한 각각의 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물을 동물 실험군에 투여하여 이들 추출물의 종양 성장 억제 효과를 측정하였다.
구체적으로, 면역이 결핍된 6 주령의 Balb/cnu / nu 누드 마우스 (중앙 실험 동물사로부터 입수)를 1 주간 순화시킨 후, 대수증식기의 A549 사람 폐암 세포주를 혈청이 없는 RPMI 배지에 현탁하여 상기 마우스 1 마리당 5 × 106 세포를 피하 주사로 주입하였다.
상기 폐암 세포의 주입 1일 후, 상기 각 마우스에 상기 제조예 1에서 제조한 각 추출물과 각 추출물을 하기 표 1의 조성으로 혼합한 혼합 추출물을 각각 투여하였다.
실험군 투여량 조성비
비히클 (대조군) 0.5% CMC 수용액 250 ㎕ -
오리나무 추출물 250 mg/kg/일
(0.5% CMC 수용액 250 ㎕에 현탁)		 -
재쑥 추출물 250 mg/kg/일
(0.5% CMC 수용액 250 ㎕에 현탁)		 -
백화전호 추출물 250 mg/kg/일
(0.5% CMC 수용액 250 ㎕에 현탁)		 -
오리나무+재쑥+백화전호
혼합 추출물		 500 mg/kg/일
(0.5% CMC 수용액 250 ㎕에 현탁)		 오리나무:재쑥:백화전호=
1:1:1 혼합
(각 추출물은 500 mg당
166 mg씩 포함)
시스플라틴 5 mg/kg/주 -
상기 각 물질들의 투여에 있어서, 상기 추출물은 1일 1회 경구 투여하였으며, 상기 시스플라틴은 주 1회 복강 주사로 투여하였다. 상기 투여 후, 각 마우스들에게 물과 사료를 공급하여 생육하였고, 주 2회 각 마우스들의 종양의 크기 (부피) 및 무게를 측정하였다. 상기 종양의 부피는 캘리포를 이용하여 종양의 장축 및 단축 길이 (mm)를 측정한 후, 단축2 × 장축 × 0.52의 계산식으로 계산하여 측정하였다.
상기 실험 결과, 종양의 부피에 있어서 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물을 투여한 경우에는 단독 추출물 투여의 경우는 물론, 시스플라틴 투여 경우보다 훨씬 월등한 종양 성장 억제 효과를 나타내었다 (도 1a 및 1b).
또한, 종양의 무게에 있어서, 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 모두, 시스플라스틴 투여군에 비하여 월등한 종양 무게 증가 억제 효과를 나타내는 것으로 확인되었다 (도 1c).
실시예 2: 오리나무, 재쑥 및/또는 백화전호 의 혼합 추출물 투여에 의한 체중 감소 여부 검증
상기 실시예 1에서 생육한 각 마우스의 체중 감소 여부를 측정하였다.
상기 실험 결과, 시스플라틴 투여군의 경우 약 6 주 이후 심각한 체중 감소를 나타내어 시스플라틴의 사용에 의해 부작용이 유발되는 것으로 확인된 반면, 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물을 투여한 경우, 비히클을 투여한 대조구와 같이 마우스의 체중 감소가 관찰되지 않았다 (도 2).
실시예 3: 오리나무, 재쑥 및/또는 백화전호 의 혼합 추출물 투여에 의한 장기의 이상 소견 여부 검증
상기 실시예 1에서 생육한 각 마우스의 간 및 신장의 무게 감소 여부 및 독성 지표 변화를 측정하였다.
상기 간 및 신장의 무게 감소 여부를 측정한 결과 (하기 표 2), 시스플라틴 투여군의 경우 간 및 신장의 무게가 상당한 정도로 감소되어 장기에 이상 소견을 보인 반면, 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물을 투여한 경우, 암 세포를 주입하지 않은 정상 마우스와 비교할 때 유의한 차이가 없었다 (도 3a 및 3b).
실험군 간 무게 (g) 신장 무게 (g)
비히클 (대조군) 1.325±0.07 0.50±0.03
오리나무+재쑥+백화전호
혼합 추출물		 1.230±0.04 0.51±0.03
시스플라틴 1.074±0.10 0.41±0.06
정상 마우스 1.200±0.05 0.47±0.03
또한, 간독성 및 신장 독성을 측정한 결과 (하기 표 3), 시스플라틴 투여군의 경우, 간독성 지표 및 신장 독성 지표가 상당히 증가하여 장기에 이상 소견을 보인 반면, 오리나무 및 재쑥의 혼합 추출물, 또는 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물을 투여한 경우 모두, 간독성 지표가 오히려 감소되거나 거의 증가하지 않는 것으로 확인되었다.
실험군 간독성 지표 (GOT) 신장독성 지표 (Creatinine)
비히클 63.43±10.85 0.14±0.05
오리나무+재쑥+백화전호
혼합 추출물		 59.38±8.9 0.16±0.07
시스플라틴 123.33±12.18 0.32±0.08
정상 마우스 67±9.9 0.15±0.06
실시예 4: 오리나무, 재쑥 및/또는 백화전호의 혼합 추출물 처리에 의한 혈관 신생 억제 효과 검증
상기 제조예 1에서 제조한 각각의 오리나무, 재쑥, 백화전호 추출물 및 이들의 혼합 추출물의 혈관 신생에 미치는 영향을 사람 유래 혈관내피세포를 이용하여 세포이동시험 (migration assay)과 튜브형성시험 (Tube formation assay)의 두 실험법을 통하여 측정하였다.
구체적으로, 세포이동시험의 경우 24 웰 플레이트에 웰당 100,000개씩의 사람 유래 혈관내피세포주 (HUVEC; Human umbilical vein endothelial cell)를 500 ml의 EGM-2 배지에 24시간 동안 배양한 후, 피펫을 이용하여 손상 (wound)을 생성하였다. 그 다음, 배지를 교체함과 동시에 각 추출물을 처리하고 20시간 후, 손상 치유 정도를 비히클 대비 %로 측정하였다.
튜브형성시험의 경우, 50 ml의 growth-factor reduced matrigel을 함유한 96 웰 플레이트에 웰당 15,000개씩의 HUVEC 세포주를 분주한 후, 각 추출물을 처리하고 8시간 후 혈관 모양으로 형성되는 튜브의 길이를 측정하여 대조구와 비교하였다.
세포이동시험 및 튜브형성시험 결과, 재쑥, 오리나무, 전호 추출물 중, 오리나무 추출물이 세포의 이동과 튜브 형성을 일부 억제하여 혈관 신생 억제 효과가 있는 것으로 나타났으며, 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 처리의 경우, 오리나무 추출물 단독 처리군 보다 훨씬 월등한 혈관 신생 억제 효과를 보이는 것으로 확인되었다 (도 4a, 4b, 5a, 및 5b).
상기 실시예 1 내지 4의 결과를 종합할 때, 본 발명의 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물을 투여한 경우, 종래의 항암제인 시스플라틴을 투여한 경우보다 훨씬 월등한 정도의 종양 성장 억제 효과를 나타났으며, 혈관 신생 억제 효과 또한 우수하여, 효과적인 항암제로 이용될 수 있음을 뒷받침하였다.
더욱이, 시스플라틴을 투여한 경우에는 체중 및 장기의 심각한 무게 감소뿐만 아니라, 간독성 및 신장독성 지표의 상당한 증가가 관찰되어 심각한 부작용이 야기되는 반면, 본 발명의 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물을 투여한 경우, 체중 감소 및 장기 이상 소견이 관찰되지 않아 부작용이 발생하지 않는다는 점에서, 본 발명의 상기 추출물은 항암 효능이 우수하면서 부작용을 유발하지 않아 더욱 활용도가 높고 가치있는 항암제로 이용될 수 있음을 뒷받침하였다.
본 명세서는 본 발명의 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자이면 충분히 인식하고 유추할 수 있는 내용은 그 상세한 기재를 생략하였으며, 본 명세서에 기재된 구체적인 예시들 이외에 본 발명의 기술적 사상이나 필수적 구성을 변경하지 않는 범위내에서 보다 다양한 변형이 가능하다. 따라서 본 발명은 본 명세서에서 구체적으로 설명하고 예시한 것과 다른 방식으로 실시될 수 있으며, 이는 본 발명의 기술 분야에 통상의 지식을 가진 자이면 이해할 수 있는 사항이다.

Claims (10)

  1. 오리나무 (Alnus japonica), 재쑥 (Descurainia Sophia) 및 백화전호 (Peucedanum praeruptorum Dunn)의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 혼합 추출물은,
    오리나무를 추출한 오리나무 추출물, 재쑥을 추출한 재쑥 추출물 및 백화전호를 추출한 백화전호 추출물을 혼합하여 제조된 추출물; 또는
    오리나무, 재쑥 및 백화전호를 함께 추출하여 제조된 추출물인 것인 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 오리나무의 추출물 또는 이의 분획물, 재쑥의 추출물 또는 이의 분획물 및 백화전호의 추출물 또는 이의 분획물을 1:1:1의 중량비로 함유하는 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 추출물은 물 및 C1 내지 C4의 알코올로 이루어지는 군에서 선택되는 1 종 이상의 용매로 추출된 것인 조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 분획물은 물, 알코올, 클로로포름, 에틸 아세테이트 및 헥산으로 이루어지는 군에서 선택되는 1 종 이상의 용매로 분획된 것인 조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 종양의 성장을 억제하여 암을 예방 또는 치료하는 것인 조성물.
  7. 제1항에 있어서, 상기 조성물은 신생 혈관 형성을 억제하여 암을 예방 또는 치료하는 것인 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 암은 폐암, 대장암, 위암, 혈액암 및 림프종으로 이루어진 군에서 선택되는 1 종 이상의 암인 조성물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 하나의 항의 조성물을, 인간을 제외한 동물에 투여하는 것을 포함하는 암의 예방 또는 치료 방법.
  10. 오리나무 (Alnus japonica), 재쑥 (Descurainia Sophia) 및 백화전호 (Peucedanum praeruptorum Dunn)의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품 조성물.
KR1020130128792A 2013-10-28 2013-10-28 오리나무, 재쑥 및 백화전호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 조성물 KR101533733B1 (ko)

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