KR101528193B1 - 락토바실러스 플란타룸 yml007로부터 분리된 항진균 활성을 갖는 펩타이드 - Google Patents
락토바실러스 플란타룸 yml007로부터 분리된 항진균 활성을 갖는 펩타이드 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 항진균 활성을 갖는 펩타이드에 관한 것으로서, 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 항진균 펩타이드를 제공한다. 또한 본 발명은 상기 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항진균용 조성물 또는 식품 보존용 조성물을 제공한다. 본 발명의 펩타이드는 넓은 범위의 항진균 활성을 가지므로, 이를 이용하여 항진균류와 관련된 미생물제제, 병원성 진균류 방제제, 사료를 포함한 식품 보존제 및 진균류와 관련된 향후 의약품 개발 등 다양한 분야에 활용가능할 것이다.
Description
본 발명은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 항진균 활성을 갖는 펩타이드에 관한 것이다.
농작물의 경작시 또는 운반이나 저장 중에 발생되는 식물성 병원균에 의한 경제적 손실은 약 5 내지 50%에 달하고 있으며, 이러한 손실 중 5 내지 10% 가량이 곰팡이에 의해 이루어지고 있으며, 개발도상국에서는 그 손실이 더욱 심각하다. 또한 곰팡이에 의한 피해는 단순 수확물의 감소뿐만 아니라 병원균이 생산하는 2차 대사산물이 사람과 동물에게 강한 독소로 작용하며, 인간과 가축에서 곰팡이 독소 중독증의 발생시킨다는 다수의 연구가 보고되어 있다.
고온다습한 우리나라의 여름철에는 사료중 곰팡이의 증식에 적합한 환경이 조성된다. 특히 여름 장마철에는 사료내 수분 함량이 16% 이상, 상대습도는 80 내지 85%까지 올라가므로 급격한 곰팡이의 번식이 있게 된다. 사료중에 곰팡이가 다량 증식할 경우 대사 산물로 여러 가지 마이코톡신이 생성되며, 이들의 종류 및 분비량은 곰팡이의 종류, 온도, 습도 및 사료의 수분 함량 등 여러 가지 요인들에 의해 변이를 갖게 된다. 그러나, 마이코톡신이 사료 중에 미량으로 존재하더라도 가축에게 주는 피해는 매우 크며 가축을 통해 인체로의 전이되는 등 많은 문제점을 내포하고 있다. 현재 400 이상의 마이코톡신 (mycotoxins)이 동정되었는데, 중요 마이코톡신 그룹은 인간 및 동물의 건강에 있어 주요 관심사가 되고 있으며, 음식 및 사료에서 빈번하게 발견되는 것으로는 아플라톡신 (aflatoxins), 오크라톡신 A (ochratoxin A), 트리코텐션즈 (trichothecenes: deoxynivalenol, nivalenol), 제랄레논 (zearalenone) 및 푸모니신 (fumonisins) 등이 있다.
현재, 곰팡이 성장 및 이의 마이코톡신 생성을 억제하기 위하여 식품이나 사료를 가열, 암모니아처리, 스크리닝 또는 방사선 처리하는 방법이 있으나, 이를 상업적으로 응용하기에는 너무 비싸거나 비실용적이고, 이에 의해 식품이나 사료의 영양소의 파괴를 야기할 수 있으며, 살균제와 같은 화학적 방제가 이루어지는 경우 이에 의한 부작용이 나타날 수 있다.
젖산균은 생-보존 미생물로서, 오랜 기간 식품산업에 있어 배양 스타터(starter)로서 사용되었고, 유기산, 지방산, 과산화수소 및 박테리오신과 같은 다양한 종류의 생리활성 분자들을 생산할 수 있다고 알려졌다. 현재 여러 항균 미생물이 발견되었으나, 넓은 범위에서 안정적인 항균 활성을 나타내지는 못하므로 다양한 부패균에 대항하는 항균 미생물을 찾으려는 시도가 계속되고 있다. 젖산균은 목초 사일리지(grass silage), 채소류, 사워도우(sourdough)와 같은 다양한 환경에서 분리되어 넓은 범위의 항균력을 가질 수 있다.
김치는 잘 알려진 젖산 발효 식품으로, 여러 종류의 젖산균(lactic acid bacteria; LAB)이 포함되어 있다. 본 발명자들은 다양한 식품 부패균에 대항하는 강력하고 넓은 범위의 항진균 활성을 가진 김치 LAB인 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007를 분리하였고, 상기 균주로부터 넓은 범위의 및 항진균 활성을 가진 펩타이드를 분리하여 그 특성을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
한편, 일본공개특허 제1994-2714415호에서는 유산균 산생의 신규 항균 물질 및 그 배합물질에 관한 것으로서, 락토바실러스 헤르베티크스 K-4(Lactobacillus helveticusK-4, 미공연균기 12249 호)의 세균이 고분자물질을 생합성하는 항균 물질로 H-Arg-Pro-Lys-His-Pro-Ile-Lys-His-Gln-OH의 구조인 펩타이드에 대해 개시하고 있지만, 본 발명의 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 항진균 펩타이드에 대한 언급은 없다.
본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 항진균 펩타이드를 제공하고자 한다.
또한, 본 발명은 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항진균용 조성물 또는 식품 보존용 조성물을 제공한다.
본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 항진균 펩타이드를 제공한다. 상기 서열번호 1은 "IIVVGGIYRER"이다.
상세하게는, 상기 펩타이드는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007(KCTC 12032BP) 유래인 것을 특징으로 한다.
또한, 상기 진균은 특별히 한정된 것은 아니며, 효모, 사상균, 곰팡이, 녹병균, 및 버섯으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상일 수 있으며, 바람직하게는 아스퍼질러스 (Aspergillus), 푸사리엄 (Fusarium), 페니실리엄 (Penicillium), 칸디다 (Candida) 및 사카로미세스 (Saccharomyces)로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 미생물일 수 있다. 더욱 바람직하게는 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 또는 아스퍼질러스 플라버스(Aspergillus flavus)일 수 있다.
본 발명은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드 외에도 상기 서열들의 변이체가 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 본다. 변이체는 염기서열 또는 아미노산 서열은 변화되지만, 서열번호 1의 아미노산 서열과 유사한 기능적 특성을 갖는 염기서열로 이루어진 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드이다. 구체적으로, 본 발명에 따른 펩타이드는 서열번호 1의 아미노산 서열과 70% 이상, 더욱 바람직하게는 80% 이상, 더 더욱 바람직하게는 90% 이상, 가장 바람직하게는 95% 이상의 서열 상동성을 가지는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항진균용 조성물을 제공한다.
상기 항진균용 조성물을 사용하는 일례로, 동물, 가축이 섭취하는 식물에 서식하는 진균의 독소생성을 저해하기 위하여 사용할 수 있으며, 식물의 파종, 재배, 수확, 저장, 가공 및 유통기간 중에 적용하여 진균의 독소생성을 저해시킬 수 있다.
본 발명의 항진균용 조성물은 당업계에 공지된 방식의 제제화 방식에 따라, 예컨대 상기 펩타이드를 포함하도록 분말, 펠렛 또는 과립, 마이크로캡슐 등으로 제형화하여 그대로 사용할 수 있다. 상기 항진균용 조성물은 계면활성제, 분산제, 표면 활성화제, 담체, 보존제, 습윤제, 공급 촉진제, 유인제, 캡슐화제, 결합제, 유화제, 염료, U.V. 보호제, 완충제 등 목적 병원균 및 작물, 곡류 등 살포 대상에 따라 적용하기 용이한 다른 성분을 부가함으로 수득할 수 있다. 또한, 부가적으로 포함되는 부형제는 상기 항진균용 조성물의 용도 및 적용방법에 따라 적절한 물질을 사용하는 것이 바람직하며, 식물 또는 동물에 해가 없는 모든 종류의 물질이 바람직할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 식품 보존용 조성물을 제공한다.
본 발명의 식품은 곤충을 포함한 동물이 섭취할 수 있는 모든 것을 의미하며, 상기 식품에는 사료를 포함할 수 있다.
상기 식품 보존용 조성물이 적용될 수 있는 구체적인 예로는, 곡류가공품, 야채, 과일, 야채의 건조제품이나 절단제품, 과일쥬스, 야채쥬스, 야채와 과일의 혼합쥬스, 칩류, 면류, 축산가공식품, 수산가공식품, 유가공식품, 발효유식품, 미생물발효식품, 제과제빵, 양념류, 육가공류, 산성음료수, 감초류, 허브류, 곤충 사료류, 가축 사료류, 애완동물 사료류 등이 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 식품 보존용 조성물은 유해 병원성 미생물의 생육억제 및 사멸효과가 있고 식품을 무처리군에 비해 오래 유지하거나 보존하는 활성을 갖게 할 수 있다.
상기 식품 보존용 조성물은 식품 보존 필요성에 맞게 편리하고 적합한 방법으로 액상, 고상, 파우더 형태 등으로 다양하게 제제화될 수 있다. 상기 식품 보존용 조성물은 식품 제조 공정시 원료와 함께 배합할 수 있으며, 본 발명의 일례로, 상기 식품 보존용 조성물에 식품을 담그거나, 담근 후 휘젓거나, 식품 보존용 조성물을 뿌리거나, 직접 혼합함으로써 이를 식품에 고르게 적용될 수 있도록 할 수 있다.
본 발명은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 항진균 활성을 갖는 펩타이드에 관한 것으로서, 상기 펩타이드는 11개의 아미노산으로 이루어져 있고, 1256.617Da의 분자량을 갖는데, 넓은 범위의 항진균 활성을 가지므로, 이를 이용하여 항진균류와 관련된 미생물제제, 병원성 진균류 방제제, 사료를 포함한 식품 보존제 및 진균류와 관련된 향후 의약품 개발 등 다양한 분야에 활용가능할 것이다.
도 1은 A. niger 및 A . flavus에 대한 분리된 분획의 항진균 활성을 나타낸다. 포자 형성 후에 강력히 억제되는 것을 확인하였다.
도 2는 항진균 활성을 보이는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007 세포 프리 상등액으로부터 정제된 활성 분획의 MALDI-TOF 스펙트럼을 나타낸다.
도 3은 항진균 화합물의 아미노산 서열 및 이의 관측 및 계산된 질량을 나타낸다.
도 4는 Multiple Sequence Comparison by Log-Expectation (MUSCLE)을 이용한 다중 서열 비교 결과이다.
도 5는 백분율을 이용한 평균 거리 계통수이다. 계통수는 서로 다른 미생물 유래 12개의 단백질 서열을 기초로 하여 나타냈다.
도 6은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 항진균 펩타이드의 카툰 2차 구조(a), 와이어 프레임 2차 구조(b) 및 도트 표면 2차 구조(c)를 나타낸다.
도 7은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 항균 펩타이드와 다른 균주로부터 분리된 다른 항균물질과의 서열 비교를 백분율로 나타냈다.
도 2는 항진균 활성을 보이는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007 세포 프리 상등액으로부터 정제된 활성 분획의 MALDI-TOF 스펙트럼을 나타낸다.
도 3은 항진균 화합물의 아미노산 서열 및 이의 관측 및 계산된 질량을 나타낸다.
도 4는 Multiple Sequence Comparison by Log-Expectation (MUSCLE)을 이용한 다중 서열 비교 결과이다.
도 5는 백분율을 이용한 평균 거리 계통수이다. 계통수는 서로 다른 미생물 유래 12개의 단백질 서열을 기초로 하여 나타냈다.
도 6은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 항진균 펩타이드의 카툰 2차 구조(a), 와이어 프레임 2차 구조(b) 및 도트 표면 2차 구조(c)를 나타낸다.
도 7은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 항균 펩타이드와 다른 균주로부터 분리된 다른 항균물질과의 서열 비교를 백분율로 나타냈다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<
실시예
1>
락토바실러스
플란타룸
(
Lactobacillus
plantarum
)
YML007
로부터 항진균
펩타이드의
분리
1. 항진균 활성 분석
페이퍼 디스크 분석을 이용하여 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007에 대한 2차 스크리닝을 진행하였다. MRS 배지에서 30℃, 24시간 동안 배양한 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007을 10,000g, 10분 동안 원심분리하였고, 세포 프리 상등액을 0.45μm pore-size filter (Sartorius Stedim Biotech, Germany)에 여과한 후 사용하였다. 상등액은 1M NaOH로 pH 6으로 조절하였고, 추후 실험에 사용되었다. 상기 상등액 100 ㎕을 8mm 지름의 페이퍼 디스크(Advantec Roshi Kaisha, Ltd, Tokyo, Japan)에 로딩하였다. 플레이트는 30℃에 배양하였고, 24시간 및 48시간 후에 억제 부분을 측정하였다. 억제 부분의 지름을 측정하였고, 8mm 페이퍼 디스크의 지름은 전체 억제 부분 지름으로부터 뺐다. 페이퍼 디스크 방법을 이용하여 중요 부패균인 Fusarium oxysporum KCTC6434, A. flavus KCTC16682 및 A. oryzea KCCM 11371에 대한 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007의 넓은 항진균 활성을 분석하였다.
2. 항진균 화합물의 특성 분석
락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007의 배양 여과물에 프로테이나아제 K(proteinase K; Sigma), 트립신(trypsin; Sigma), 리파제(lipase; Sigma), 알파 아밀라아제(alpha amylase; Sigma) 및 카탈라아제(catalase; Sigma)를 각각 최종 농도 1mg/mL로 처리하고 37℃에서 3시간 동안 반응시킴으로써, 항진균 화합물의 기초 특성을 확인하였다. 상기 혼합물은 효소 활성을 불활성화시키기 위해 식힌 후, 페이퍼 디스크 방법에 의해 A. niger KCTC16683에 대한 항진균 활성을 분석하였다. 항진균 화합물의 특성을 더 조사하기 위해서, 1L의 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007 세포 프리 상등액을 암모니움 설페이트 침전(85% w/v) 시킨 후 투석하였다. 투석된 샘플은 Sephadex G-25 column (35x 2cm)을 이용한 젤 여과 크로마토그래피에 의해 1000-5000 kDa 범위의 분획을 정제하였다(Sigma Aldrich, USA). 20 mM 포스페이트 완충액(pH 7)을 40㎕ min-1 유량에서 용출 완충액으로 사용하였다. 전체 28개의 분획을 수집하였고, 항진균 활성을 확인하였다. 대부분의 활성 분획을 α-시아노-4-하이드록시-시나믹산(α-cyano-4-hydroxy-cinnamic acid; HCCA)을 매트릭스로 사용하여 MALDI-TOF (Ultra flex III, Bruker Daltonics, Germany)로 분석하였다. VSL-337 ND S-nitrogen laser (337 nm) 모델이 사용되었다. 이온 가속 전압(ion acceleration voltage) 및 레이저 세기는 각각 20 kV 및 35%였다. 정제된 샘플 부유물 5㎕을 동량의 HCCA와 함께 조심스럽게 혼합하였다. 5㎕의 상기 용액을 MALDI 플레이트에 올려놓고, 분석 전에 상온에서 15분 동안 건조시켰다.
3. 결과
효소 분석 결과, 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007의 항진균 활성은 카탈라아제(catalase)의 첨가에 영향을 받지 않았는데, 이는 관찰된 성장 억제가 과산화수소 생산물 때문은 아니라는 것을 의미한다. 하지만, 단백질 가수 분해 효소(프로테이나아제 K 및 트립신)의 처리는 세포-프리 상등액의 억제 활성을 없앴는데, 이는 화합물이 단백질적 특성을 나타낸다는 것을 의미한다. 샘플의 활성은 알파 아밀라아제(alpha amylase) 및 리파아제(lipase)에 영향을 받지 않았는데, 이는 활성 화합물이 지질 또는 탄수화물일 가능성을 배제하는 것이다. 항진균 화합물의 부분적 분리는 암모니움 설페이트(ammonium sulfate) 침전에 의해 수행되었고, 셀룰로오스 멤브레인(컷-오프 수치 3kDa)으로 투석하여 여과시 85%의 활성을 회복하였다. 상기 결과를 통하여, 상기 화합물의 분자량이 3kDa 미만일 것으로 추정하였다. 투석된 샘플의 28개 분획을 크로마토그래피 컬럼으로부터 수집하였다. 모든 분획은 농축 없이 항진균 활성을 확인하였다. 28개의 분획 중, 9개의 분획에서 상당한 억제 활성을 보였다. 최종 분리된 분획은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007이 생산하는 단백질성 화합물이라는 것을 확인하였고, 이는 시험 진균을 대상으로 활성을 나타냈다(도 1). MALDI-TOF 분석에서 1256.617 Da의 분자량을 가진 활성 화합물을 검출하였다(도 2).
<
실시예
2>
락토바실러스
플란타룸
(
Lactobacillus
plantarum
)
YML007
로부터 분리된 항진균
펩타이드의
특성 분석
1. 균주 및 성장 조건
락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007은 항진균 화합물의 생산을 위하여 최적화된 MRS 배지에서 배양하였다. 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 및 아스퍼질러스 플라버스(Aspergillus flavus)는 지표 균주로서 potato dextrose agar (PDA), 30℃에서 5-7일 동안 배양하여 사용되었다.
2. 항균 활성 분석
다양한 곰팡이균 및 식품 유래 병원균에 대항하는 것으로 선별된 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007의 항균 활성은 아가 확산 분석을 이용하여 수행하였다. MRS 배지에서 30℃, 24시간 동안 배양한 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007은 10,000g에서 10분 동안 원심분리하였고, 세포 상등액은 0.45-ml-pore-size 필터(Sartorius Stedim Biotech, Goettingen, Germany)를 통하여 여과한 후 사용하였다. 1 moll-1 NaOH를 이용하여 상등액의 pH를 6으로 조절하였고, F. oxysporum KCTC6434, A. flavus KCTC16682 및 A. oryzae KCCM 11371와, 식품 유래 병원성 균주 E. coli KCTC2441, E. coli o157: H7, E. coli KCTC1039, Staphylococcus aureus KCTC1621, Staphylococcus epidermidis KCTC1917, Bacillus subtilis KCTC1021, Enterobacter cloacae KCTC2361, Klebsiella pneumoniae KCTC2208, L. monocytogenes KCTC3569, Salm . choleraesuis ATCC10727, Salmonella enterica ATCC4931, Cronobacter muytjensii ATCC51329 및 Neisseria meningitides ATCC13098에 대항하여 100 ㎕를 각 웰(well)에 로딩하였다. 플레이트는 30℃에서 배양하였고, 24시간 및 48시간 후에 억제 부분을 확인하였다. 각 억제 부분의 지름을 측정하였고, 전체 억제 부분의 지름에서 웰(8 mm)의 지름을 뺐다.
3. 항균 화합물의 분리
분리는 다중-단계 프로토콜에 의해 수행되었다. 상등액은 암모늄 설페이트로 침전시킨 후, 셀룰로스 멤브레인을 통하여 3 kD 이하로 컷-오프(cut-off)하여 투석하였다. 그 후, Sephadex G-25 column (35 x 2 cm)을 이용하여 젤-여과 크로마토그래피를 통해 단편 범위 1000-5000 MW (Sigma Aldrich)로 활성 단편을 탈염하였다. 유량 40㎕ min-1에서 20 mM 포스페이트 완충액(pH 7)을 용출 완충액으로 사용하였다. 가장 활성화된 단편은 역상 HPLC로 초미세여과하였다.
4. 젤 내 단백질 절단(In-gel protein digestion) 및 아미노산 서열 분석
관심 단백질 밴드를 잘라냈고, 서열 분석 등급의 변형 트립신(Promega, Madison, WI, USA)으로 젤 내 절단하였다. 젤로부터 표적 단백질 스팟(spot)을 잘라냈고, 폴리프로필렌 튜브(Eppendorf)에 넣고, 1:1 아세토니트릴(acetonitrile)/25 mM 암모늄 바이카보네이트(ammonium bicarbonate), pH 7.8 150㎕로 젤이 투명해질 때까지 4-5회 씻어냈다. 젤 단편은 Speedvac concentrator에서 건조시켰고, 그 후 20ng 트립신이 포함된 30㎕의 25 mM 암모늄 바이카보네이트(ammonium bicarbonate), pH 7.8로 재수화하였다. 37℃에서 20시간 동안 배양한 후, 액체 부분을 새로운 튜브로 옮겼다. 젤 매트릭스에 남은 트립신 처리된 펩타이드를 30℃에서 40분 동안 0.1% (v/v) 포름산(formic acid)이 포함된 20㎕의 50% (v/v) 수용성 아세토니트릴(acetonitrile)로 추출하였다. 상기 혼합 상등액을 Speedvac concentrator로 증발시켰고, 질량 분석을 위해 0.1% (v/v) 포름산(formic acid)이 포함된 8㎕의 5% (v/v) 수용성 아세토니트릴(acetonitrile) 용액에 녹였다.
5. 다중 서열 분석(Multiple Sequence Alignments)
항균 펩타이드의 아미노산 서열은 BLAST에 적용하였고, 유사성을 나타내는 연관 서열은 Multiple Sequence Comparison by Log-Expectation (MUSCLE)을 이용하여 비교하였다. 계통수(phylogenetic tree)는 다중 서열 비교 분석에 기초하여 수행하였다.
6. 2차 구조 예측
항균 펩타이드의 단백질 2차 구조 예측을 위해 GOR V 서버가 사용되었다. GOR V 서버는 Cuff 및 Barton 데이터베이스 상 513개의 연속적인 비중복 도메인을 기초로 하였는데, 이는 84107 잔기들을 포함하고 있다. 무작위 추출(randomization) 후에, 비교된 서열에 있어 Z score <5의 비교 서열만 서열 사이의 상동성을 방해하는 비유사한 서열로 판단하였다.
7. 결과
(1) 아미노산 서열분석
QSTAR XL (ESI-Q-TOF) 장착 nanoLC를 이용하여 LC-MS/MS에 의해 아미노산 서열을 분석한 결과, 1273.66 Da의 분자량을 가진 11개의 아미노산 펩타이드인 것으로 밝혀졌다. MALDI-TOF에 의해 결정된 분자량은 1256.617 Da이었는데, 그 차이는 17인 것으로 나타났다. 이는 펩타이드 IIVVGGIYRER(서열번호 1)이 분자량 1273.66 Da으로 계산되는데, 이전에 얻은 질량은 M-M (NH3) = M-17으로 계산하여 1256.617 Da이었던 것으로 보인다. 즉, MALD-TOF 분석 과정에서 M-17의 손실이 발생한 것으로 판단된다(도 3).
아미노산 서열은 단백질-단백질 상동성을 기초로 여러 데이터베이스에서 비교되었다. 비교 결과, 아미노산 서열 잔기는 알려진 펩타이드들과 30-40%의 상동성을 갖는 것으로 나타났다(표 1).
< 표 1 > 다른 항균 미생물과 YML007의 상동성
(2) 항균 펩타이드의 분류
상기 펩타이드의 소수성 특성 및 넓은 범위의 항균 활성에 기초하여, 본 발명자들은 상기 펩타이드가 클래스 II 박테리오신(Class II bacteriocins)과 관련된 것으로 예측하였다.
(3) 다중 서열 분석(Multiple Sequence Alignments)
다중 서열 분석(Multiple Sequence Alignments; MSA)은 일반적으로 비슷한 크기를 가진 3개 또는 그 이상의 생물학적 서열(단백질 또는 핵산)을 비교한다. 비교된 상동성을 통해 서열 간의 진화적 연관성을 알아낼 수 있다. 쌍서열비교(Pairwise Sequence Alignment) 기술은 두 개의 생물학적 서열 간의 기능성 구조 및/또는 진화적 연관성을 나타낼 수 있는 유사 부위를 확인하기 위해 사용된다. 하지만, 50-300개의 아미노산을 가진 단백질에서 10-15개의 아미노산으로 이루어진 작은 펩타이드는 비교가 어렵다.
락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 11개의 아미노산을 가진 항균 펩타이드는 고분자량의 다른 단백질과는 상이한 상동성 패턴을 나타냈다. 작은 크기의 항균 펩타이드는 어떤 잔기가 활성 부위인지 예측하기가 어렵다. 5' 부위의 단백질 서열 잔기는 대부분 보존 잔기이므로, 항균 펩타이드의 서열이 다른 알려진 또는 알려지지 않은 단백질 서열과 비교하여 어떤 구조적 또는 기능적 관련이 있는지 결론내리는 것이 불가능했다. 도 4에 있어서, 진한 파란색은 보존 아미노산 잔기를 나타내고, 밝은 파란색은 덜 보존적인 아미노산 잔기를 나타내는 반면, 색이 없는 것은 비-보존 아미노산 잔기를 나타낸다(도 4). 여러 미생물로부터 분리된 다른 단백질의 아미노산 서열과의 상동성을 백분율로 나타낸 평균 거리 계통수는 도 5과 같다.
(4) 구조 예측
BLAST 및 MUSCLE을 이용하여 다중 서열 분석을 진행하였다. 다중 서열 분석은 2차 구조의 구별을 확실히 하기 위해서 GOR V에서 수행하였다. 구조 예측은 GOR V 2차 구조 예측 서버에서 진행되었다. 단백질의 2차 구조를 예측하기 위하여, GOR (Garnier-Osguthorpe-Robson) 방법은 정보 이론 및 베이지안(Bayesian) 통계가 모두 사용되었다(도 6).
GOR V prediction (http://gor.bb.iastate.edu/)
IIVVGGIYRER
CEEEEEEECCC
Sequence length: 11 amino acids
Column information:
1) Sequence index
2) Amino acid type
3) Helix probability
4) Sheet probability
5) Coil probability
6) GOR V prediction
1. I 0.067 0.178 0.755 C
2. I 0.070 0.595 0.336 E
3. V 0.075 0.802 0.123 E
4. V 0.112 0.744 0.144 E
5. G 0.112 0.505 0.382 E
6. G 0.142 0.462 0.396 E
7. I 0.195 0.520 0.286 E
8. Y 0.229 0.496 0.276 E
9. R 0.206 0.285 0.509 C
10. E 0.151 0.168 0.681 C
11. R 0.073 0.131 0.796 C
(5) 항균 펩타이드 데이터베이스에 기초한 다중 비교
항균 펩타이드 데이터베이스(antimicrobial peptide database; APD)는 광범위한 문헌 검색을 기초로 하고 있다. 이는 525개의 펩타이드에 대한 정보(498개의 항균, 115개의 항진균, 28개의 항바이러스 및 18개의 항암)를 포함한다. (http://aps.unmc.edu/AP/main.html)
락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007로부터 분리된 항균 펩타이드의 서열 비교는 다른 균주로부터 분리된 다른 항균물질과의 상동성을 백분율로 나타냈다(도 7).
(6) 항균 펩타이드의 특성 분석
서열: IIVVGGIYRER (서열번호 1)
I- I- V- V- G- G- I- Y- R- E- R- 소수성 잔기는 진하게 표시하였다.
친수성 아미노산 - I: 3, V: 2, L: 0, F: 0, C: 0, M: 0, A: 0, W: 0,
G 및 P의 갯수 - G: 2, P: 0,
음성 전하 아미노산 - E: 1, D: 0,
양성 전하 아미노산 - K: 0, R: 2, H: 0,
다른 아미노산 - T: 0, S: 0, Y: 1, Q: 0, N: 0
The Ile ratio = 27 %, The Val ratio = 18 %, The Leu ratio = 0 %,
The Phe ratio = 0 %, The Cys ratio = 0 %, The Met ratio = 0 %,
The Ala ratio = 0 %, The Trp ratio = 0 %, The Gly ratio = 18 %,
The Pro ratio = 0 %, The Thr ratio = 0 %, The Ser ratio = 0 %,
The Tyr ratio = 9 %, The Gln ratio = 0 %, The Asn ratio = 0 %,
The Glu ratio = 9 %, The Asp ratio = 0 %, The His ratio = 0 %,
The Lys ratio = 0 %, The Arg ratio = 18 %
APD에서 확인된 전체 소수성 비율 = 45 %
전체 네트 전하 = + 1
펩타이드의 Wimley-White 전체-잔기 소수성(i.e. 물에서 POPC 표면으로의 펩타이드 전체-잔기 유리 전이 에너지 합계) = 1.93 kcal/mol
입력 펩타이드의 분자량 = 1274.533
추정적으로 시스테인은 겹쳐 있고, 펩타이드의 분자흡광계수(molar extinction coefficient) = 1490
시스테인이 겹치지 않은 경우(예를 들면, 환원 HBD-1), 펩타이드의 분자흡광계수(molar extinction coefficient) = 1490[190]
단백질-결합 포텐셜(Boman index) : 1.09 kcal/mol
펩타이드의 분자식 : C58H99N17O15S0
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시예일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
<110> Industry-Academic Cooperation Foundation, Yeungnam University
<120> Peptide with antifungal activity purified from Lactobacillus
plantarum YML007
<130> ADP-2013-0376
<160> 1
<170> KopatentIn 2.0
<210> 1
<211> 11
<212> PRT
<213> Lactobacillus plantarum YML007
<400> 1
Ile Ile Val Val Gly Gly Ile Tyr Arg Glu Arg
1 5 10
Claims (6)
- 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 항진균 펩타이드.
- 제1항에 있어서, 상기 펩타이드는 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum) YML007(KCTC 12032BP) 유래인 것을 특징으로 하는 항진균 펩타이드.
- 제1항에 있어서, 상기 진균은 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 또는 아스퍼질러스 플라버스(Aspergillus flavus)인 것을 특징으로 하는 항진균 펩타이드.
- 제1항의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 항진균용 조성물.
- 제4항에 있어서, 상기 진균은 아스퍼질러스 나이거(Aspergillus niger) 또는 아스퍼질러스 플라버스(Aspergillus flavus)인 것을 특징으로 하는 항진균용 조성물.
- 제1항의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 식품 보존용 조성물.
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Families Citing this family (4)
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20130002870A (ko) * | 2011-06-29 | 2013-01-08 | 서울대학교산학협력단 | 시스-사이클로(ｌ-페닐알라닌-ｌ-프롤린)의 신규한 용도 |
| KR20130064528A (ko) * | 2011-12-08 | 2013-06-18 | 영남대학교 산학협력단 | 항진균 활성을 가진 락토바실러스 플란타룸 ｙｍｌ００７ 및 이의 용도 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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-
2013
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-
2014
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- 2014-04-29 WO PCT/KR2014/003799 patent/WO2015080355A1/ko active Application Filing
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20130002870A (ko) * | 2011-06-29 | 2013-01-08 | 서울대학교산학협력단 | 시스-사이클로(ｌ-페닐알라닌-ｌ-프롤린)의 신규한 용도 |
| KR20130064528A (ko) * | 2011-12-08 | 2013-06-18 | 영남대학교 산학협력단 | 항진균 활성을 가진 락토바실러스 플란타룸 ｙｍｌ００７ 및 이의 용도 |
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