KR101435870B1 - Makgeolli with improved preservation comprising Grapefruit seeds extract - Google Patents

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Abstract

본 발명은 자몽 종자 추출물을 포함하는 저장성이 향상된 막걸리에 관한 것이다. 본 발명에 따른 자몽 종자 추출물을 포함하는 막걸리는 발효제의 당화력과 효모의 생육에 영향을 미치지 않고, 저장 기간 동안의 알코올, pH, 초산 및 고형분 함량의 변화가 기존의 막걸리와 유사하면서도, 막걸리의 산패원인균에 대한 항균 활성을 가지고 있다. 이에 따라, 자몽 종자 추출물의 첨가에 의한 막걸리의 일반적 특성은 변화시키지 않으면서 산패원인균을 감소시켜 막걸리의 저장성을 향상시키는 효과를 나타낸다. The present invention relates to a rice wine having enhanced storage stability including a grapefruit seed extract. The makkolli containing the grapefruit seed extract according to the present invention does not affect the glycation ability of the fermentation agent and the growth of the yeast, and changes in the alcohol, pH, acetic acid and solids content during the storage period are similar to the conventional rice wine, It has antibacterial activity against causative bacteria. Therefore, the general characteristics of rice wine by adding the grapefruit seed extract are not changed, and the cause of rancidity is reduced to improve the storage stability of rice wine.

Description

자몽 종자 추출물을 포함하는 저장성이 향상된 막걸리 {Makgeolli with improved preservation comprising Grapefruit seeds extract}[0001] The present invention relates to a method for producing grapefruit seeds,

본 발명은 자몽 종자 추출물을 포함하는 저장성이 향상된 막걸리에 관한 것이다. The present invention relates to a rice wine having enhanced storage stability including a grapefruit seed extract.

일반적으로 막걸리는 찹쌀, 멥쌀, 보리, 밀가루 등을 쪄서 누룩과 물을 섞어 발효시킨 한국 고유의 술로서, 탁주, 농주, 제주, 회주라고도 한다. 이러한 막걸리는 순수한 미생물에 의해서 자연 발효시킨 자연식품으로서 술이면서도 건강식품으로, 각종 풍부한 영양분, 즉 인체 내의 신진대사에 관여하는 10여종 이상의 필수 아미노산, 특히 일반 곡류에는 적게 함유된 리신(lysine)이 많이 함유되어 있으며, 새큼한 맛을 내어 갈증을 멈추게 하는 성분인 유기산과 간 기능을 도와주는 아세틸콜린, 단백질, 그 밖에도 비타민 B와 이노시톨, 콜린 등 B 복합체가 모두 함유되어 있어 피부 미용에도 좋은 것으로 알려져 있다. In general, makgeolli is a unique drink made in Korea by fermenting glutinous rice, rice, barley, and flour mixed with leaven and water. It is also called takju, arabuju, jeju, and goju. This rice wine is a natural food fermented naturally by pure microorganisms. It is a healthy food, but it is a healthy food. There are more than 10 kinds of essential amino acids that are involved in metabolism in the human body, especially lysine It is also known to be good for skin cosmetics because it contains all the organic acids that stop the thirst, the acetylcholine, protein, vitamin B, inositol, choline and so on. .

최근 막걸리 소비가 급증하고, 특히 생 막걸리는 살균처리를 한 살균막걸리에 비해 효모와 유산균이 살아있어 웰빙 식품으로 소비자에게 인기가 많으나 살균막걸리에 비해 유통 기한은 7~10일 정도로 짧은 편이다. Recently, the consumption of rice wine has increased rapidly. Especially, raw rice wine has been popular as a well - being food for consumers because yeast and lactobacillus are alive compared to sterilized rice wine that has been sterilized. However, the shelf life is short as 7 to 10 days compared to sterilized rice wine.

이에 본 발명자들은 자몽 종자 추출물을 포함하는 막걸리를 제조하고, 상기 막걸리가 막걸리의 산패원인균인 락토바실러스(Lcatobacillus) 균주의 발생을 제거하는 항균 활성이 있어, 막걸리의 저장성을 향상시킬 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다. Accordingly, the inventors of the present invention have confirmed that the makgeolli containing the grapefruit seed extract is prepared and that the makgeolli has an antimicrobial activity for eliminating the occurrence of Lcatobacillus strain, which is a causative agent of makgeolli, and can improve the storage stability of the makgeolli Thereby completing the present invention.

본 발명의 목적은 자몽 종자 추출물을 포함하는 저장성이 향상된 막걸리를 제공하는 데 있다.It is an object of the present invention to provide a rice wine with enhanced storage stability including a grapefruit seed extract.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 일 구체예에서, 자몽 종자 추출물을 포함하는 저장성이 향상된 막걸리를 제공한다. In order to accomplish the above object, the present invention provides, in one embodiment, a macheled rice having improved storage stability including a grapefruit seed extract.

본 발명에 있어서, 상기 막걸리는 락토바실러스(Lactobacillus) 균주의 발생을 억제시키고, 이에 따라 항균 활성이 증가된 것을 특징으로 할 수 있다. In the present invention, the makgeolli may be characterized by inhibiting the production of Lactobacillus strain and thus increasing the antimicrobial activity.

본 발명에 있어서, 상기 자몽 종자 추출물은 쌀의 전체 중량부에 대하여 0.5 내지 1.5 중량부로 포함되는 것을 특징으로 할 수 있다. In the present invention, the grapefruit seed extract may be contained in an amount of 0.5 to 1.5 parts by weight based on the total weight of the rice.

본 발명에 있어서, 상기 막걸리는 10℃ 내지 25℃에서 저장 기간이 80일 내지 100일인 것을 특징으로 할 수 있다. In the present invention, the rice wine may be characterized by having a storage period of from 80 to 100 days at 10 to 25 ° C.

본 발명은 다른 구체예에서, 쌀 및 쌀의 전체 중량부 100에 대하여 자몽 종자 추출물 0.5 내지 1.5 중량부를 혼합한 후 발효시켜 저장성이 향상된 막걸리를 제조하는 방법을 제공한다. According to another embodiment of the present invention, there is provided a method for preparing a rice wine having improved storability by mixing 0.5-1.5 parts by weight of grapefruit seed extract with 100 parts by weight of rice and 100 parts by weight of rice.

본 발명에 있어서, 상기 자몽 종자 추출물은 제 2단 담금 시 추가하는 것을 특징으로 할 수 있다. In the present invention, the grapefruit seed extract may be added at the second stage of immersion.

본 발명에 있어서, 여주(Momordica charantia)는 박과에 속하는 식물로 인도 등 열대 아시아 지역에서 자생하며 실험에 사용된 부위는 전초였다. 감귤속인 자몽(grapefruit)은 신맛, 단맛 그리고 쓴맛이 풍부한 과일로 종자 추출물이 실험에 사용되었다. 진득찰(Siegesbeckia glabrescens .)은 국화과에 속하는 식물로 한방에서는 전초가 약으로 사용되는데 본 실험에서도 전초 추출물을 사용하였다. 여기서 전초란 잎, 줄기, 꽃, 뿌리 따위를 가진 옹근 풀포기를 말한다. In the present invention, Momordica charantia is a plant belonging to the genus Bacillus, which is native to tropical Asia such as India, and the site used for the experiment was the outpost. Grapefruit, a citrus fruit, is a fruit rich in acidity, sweetness and bitter taste. Siegesbeckia glabrescens . ) Is a plant belonging to the family Asteraceae, and the outpost is used as a herb in one herb. Here, the outpost is the abandonment of the endoprost with leaves, stems, flowers, roots.

본 발명에 따른 자몽 종자 추출물을 포함하는 막걸리는 발효제의 당화력과 효모의 생육에 영향을 미치지 않고, 저장 기간 동안의 알코올, pH, 초산 및 고형분 함량의 변화가 기존의 막걸리와 유사하면서도, 막걸리의 산패원인균에 대한 항균 활성을 가지고 있다. 이에 따라, 자몽 종자 추출물의 첨가에 의한 막걸리의 일반적 특성은 변화시키지 않으면서 산패원인균을 감소시켜 막걸리의 저장성을 향상시키는 효과를 나타낸다. The makkolli containing the grapefruit seed extract according to the present invention does not affect the glycation ability of the fermentation agent and the growth of the yeast, and changes in the alcohol, pH, acetic acid and solids content during the storage period are similar to the conventional rice wine, It has antibacterial activity against causative bacteria. Therefore, the general characteristics of rice wine by adding the grapefruit seed extract are not changed, and the cause of rancidity is reduced to improve the storage stability of rice wine.

도 1은 막걸리에서 추출한 효모, 곰팡이 DNA의 PCR 증폭 결과를 나타낸 것이다(레인 1, 4℃, 3일째; 레인 2, 25℃, 3일째; 레인 3, 4℃, 6일째; 레인 4, 25℃, 6일째; 레인 5, 4℃, 9일째; 레인 6, 25℃, 9일째; 레인 7, 4℃, 12일째; 레인 8, 25℃, 12일째) .
도 2는 막걸리에서 추출한 세균 DNA의 PCR 증폭 결과를 나타낸 것이다(레인 1, 4℃, 3일째; 레인 2, 25℃, 3일째; 레인 3, 4℃, 6일째; 레인 4, 25℃, 6일째; 레인 5, 4℃, 9일째; 레인 6, 25℃, 9일째; 레인 7, 4℃, 12일째; 레인 8, 25℃, 12일째).
도 3은 자몽 종자, 진득찰, 여주 추출물의 항균 활성을 확인한 결과를 나타낸 것이다.
도 4는 자몽 종자, 진득찰, 여주 추출물의 첨가가 효모의 생육에 미치는 영향을 나타낸 것이다.
도 5는 자몽 종자, 진득찰, 여주 추출물이 첨가된 막걸리의 알코올 함량을 나타낸 것이다.
도 6은 자몽 종자 추출물이 첨가된 막걸리의 저장 기간에 따른 알코올 함량을 나타낸 것이다.
도 7은 자몽 종자 추출물이 첨가된 막걸리의 저장 기간에 따른 pH 변화를 나타낸 것이다.
도 8은 자몽 종자 추출물이 첨가된 막걸리의 저장 기간에 따른 총산의 변화를 나타낸 것이다.
도 9는 자몽 종자 추출물이 첨가된 막걸리의 저장 기간에 따른 고형분 함량을 나타낸 것이다.
도 10은 자몽 종자 추출물이 첨가된 막걸리의 DGGE 결과를 나타낸 것이다(발효제: 누룩, 레인1: 저장 0일째, 레인2: 10℃/10일째, 레인3: 10℃/40일째, 레인4: 10℃/70일째, 레인5: 10℃/100일째, 레인6: 25℃/10일째, 레인7: 25℃/40일째, 레인8: 25℃/70일째, 레인9: 25℃/100일째).
도 11은 자몽 종자 추출물이 첨가된 막걸리의 DGGE 결과를 나타낸 것이다(발효제: 입국, 레인1: 저장 0일째, 레인2: 10℃/10일째, 레인3: 10℃/40일째, 레인4: 10℃/70일째, 레인5: 10℃/100일째, 레인6: 25℃/10일째, 레인7: 25℃/40일째, 레인8: 25℃/70일째, 레인9: 25℃/100일째).
도 12는 자몽 종자, 진득찰, 여주 추출물이 첨가된 막걸리의 저장 온도와 기간에 따른 기호도 변화를 나타낸 것이다.
Figure 1 shows the results of PCR amplification of yeast and mold DNA extracted from rice wine (lane 1, 4 ° C, day 3; lane 2, 25 ° C, day 3; lane 3, 4 ° C, day 6; lane 4, 25 ° C , 6 days; lane 5, 4 ° C, day 9; lane 6, 25 ° C, day 9; lane 7, 4 ° C, day 12; lane 8, 25 ° C, day 12).
2 shows the result of PCR amplification of bacterial DNA extracted from rice wine (lane 1, 4 ° C, day 3; lane 2, 25 ° C, day 3; lane 3, 4 ° C, day 6; lane 4, Lane 5, 4 ° C, Day 9; Lane 6, 25 ° C, Day 9; Lane 7, 4 ° C, Day 12; Lane 8, 25 ° C, Day 12).
Fig. 3 shows the results of confirming the antimicrobial activity of grapefruit seeds, rosemary extract, and yuzu extract.
FIG. 4 shows the effect of addition of grapefruit seeds, rosemary extract and yeast extract on the growth of yeast.
Fig. 5 shows the alcohol content of rice wine with added grapefruit seeds, rosemary extract, and yuzu extract.
6 shows the alcohol content of the rice wine with grapefruit seed extract added according to the storage period.
FIG. 7 shows changes in pH of rice wine added with grapefruit seed extract according to storage period.
Fig. 8 shows changes in the total acid depending on the storage period of the rice wine added with the grapefruit seed extract.
Fig. 9 shows the solid content of rice wine with grapefruit seed extract added during storage period.
10 shows results of DGGE of rice wine added with grapefruit seed extract (fermenting agent: yeast, lane 1: storage 0 day, lane 2: 10 ° C / day 10, lane 3: 10 ° C./40 days, lane 4:10 25 ° C./100 day, lane 6: 25 ° C./day day, lane 7: 25 ° C./40 day, lane 8: 25 ° C./70 day, lane 9: 25 ° C./100 day) .
Fig. 11 shows DGGE results of rice wine added with grapefruit seed extract (fermenting agent: entry, lane 1: storage 0 day, lane 2: 10 ° C / day 10, lane 3: 25 ° C./100 day, lane 6: 25 ° C./day day, lane 7: 25 ° C./40 day, lane 8: 25 ° C./70 day, lane 9: 25 ° C./100 day) .
Fig. 12 shows changes in preference degree depending on the storage temperature and duration of rice wine added with grapefruit seeds, rosemary extract and yujoo extract.

이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to the following examples. However, the following examples are illustrative of the present invention, and the contents of the present invention are not limited by the following examples.

재료의 준비Preparation of materials

(1) 시판막걸리(1) Commercial rice wine

실험에 사용된 막걸리는 (주)서울장수의 생막걸리를 구입하여 사용하였다.
The makgeolli used in the experiment was purchased from Seoul Jinsu Co., Ltd.

(2) 입국의 제조(2) Manufacturing of entry

입국은 철원오대쌀과 곡물, 전통누룩 그리고 곡물누룩으로부터 분리한 곰팡이를 접종하여 제조하였으며 대조구에는 수원발효식품연구소에서 구입한 조제종국(白麴)을 접종하였다.Immigration was made by inoculating molds isolated from Cheolwon Ohwi rice, grain, traditional yeast, and grain leaven, and inoculated with the crude jongguk (白 麴) purchased from Suwon Fermented Food Research Institute.

입국을 제조하기 위하여, 쌀 3kg을 수세 후 2시간의 침지와 1시간의 탈기 과정을 거쳐 고온의 스팀기를 사용하여 20분간 증자한 후 품온이 30-32℃가량이 되도록 방랭하였다. 식은 고두밥에 종국을 첨가하여 파종한 후 광목천으로 보쌈하여 제국기에 넣어 배양하였다. 약 12시간 후 갈아쌓기 하여 품온을 약 28℃까지 낮추었으며 입상한 후 약 8시간 간격으로 갈아쌓기 하여 품온의 과열을 방지하였다. 이러한 갈아쌓기와 입상 과정을 2회 정도 반복 한 후 출국하였으며 4℃에 저장하여 사용하였다. 여기서 종국은 전체 쌀의 약 0.5% 되는 쌀에 포자수가 10g당 108정도 되도록 곰팡이를 접종 후 30℃에서 배양 한 것을 사용하였다.
3 kg of rice was washed with water for 2 hours and degassed for 1 hour and then steamed for 20 minutes using a high-temperature steamer and then cooled to 30-32 ° C. The seeds were added to the rice gruel and seeded in the gwangmok stream. After about 12 hours, the temperature was lowered to about 28 ° C. After the standing, the temperature was changed at intervals of about 8 hours to prevent overheating of the product temperature. This procedure was repeated twice and then left at 4 ℃. The rice seedlings were cultured at 30 ° C after inoculation of the fungus so that the rice yielded about 0.5% of the total rice was 10 8 per 10g of the spores.

(3) 막걸리 제조(3) Manufacture of makgeolli

막걸리 제조에 사용된 전분질 원료는 철원오대쌀이며 입국(koji)은 (주)서울장수에서 구입한 것과 직접 제조한 것을 사용하였다. 누룩은 진주곡자(sp300)에서 구입하여 사용하였으며 효모는 시판효모(La Parisienne, Saccharomyces cerevisiae, DB ingredients, UK) 및 본원에서 누룩으로부터 분리하여 보존하고 있는 균주를 사용하였다.
The source of starch used in the makgeolli was cheolwon pragee, and the koji was purchased directly from Seoul Jusu Co., Ltd. and used directly. Yeast was purchased from pearl crab (sp300) and yeast was purchased from commercial yeast (La Parisienne, Saccharomyces S. cerevisiae , DB ingredients, UK) and strains retained separately from koji were used here.

(4) 식물약재의 준비 및 선별(4) Preparation and selection of plant medicinal materials

식물약재는 한국식물추출물은행(http://extract.pdrc.re.kr/extract/f.htm)과 해외생물소재허브센터(http://www.ibmrc.re.kr)에서 분양받은 것을 사용하였다. 식물약재의 원산지는 국산이었으며 99.9%의 methanol에 추출한 것이었다. 자몽종자 추출물(DF-100, Food additive bank, Korea)은 미국FDA 식품첨가물 고시집에 등재되어 있는 것을 사용하였다. 식물약재의 원물은 약초시장에서 건조된 것을 구입하였다.The plant medicinal materials used are the Korean plant extract bank (http://extract.pdrc.re.kr/extract/f.htm) and the overseas biomaterial hub center (http://www.ibmrc.re.kr) Respectively. The origin of the plant medicinal material was domestic and it was extracted with 99.9% methanol. The grapefruit seed extract (DF-100, Food additive bank, Korea) was used in the US FDA Food Additives Notification. The raw materials of the plant medicines were purchased from the herb market.

항균활성 능력이 있는 식물약재를 선별하기 위하여, 식품의약품안정청 식품원재료 데이터 베이스에 등재된 원재료는 12,487개로 중 식용가능 한 식품원재료가 1,570개를 확인하고, 이 가운데 식품공전상 식품에 사용이 가능하다고 명시된 584개, 그 중 식물은 469개를 선별하였다. 469개 중 가장 많은 수를 차지하는 잎의 경우 수용성 엽록소가 술에 용출되어 기호도를 감소시키고 지방질을 갖은 종자를 그대로 사용할 경우 지방에 의한 산패를 초래하며 열매의 경우 열매의 당 성분이 대부분 당 소스로 사용된다. 이러한 이유로 각 부위를 제외한 후 78종의 줄기와 52종의 뿌리를 대상으로 술의 첨가에 적합한 원료 73종을 선발하였다. 이와 함께 항균활성이 우수하다고 알려졌으나 술에 적용한 사례가 없는 자몽 종자 추출물을 구입하였다. In order to select antimicrobial active phytopharmaceuticals, 12,487 raw materials listed in the food raw material database of the Food and Drug Administration have identified 1,570 food raw materials that can be edible, Specified 584, among which 469 plants were selected. Among the 469 leaves, the water soluble chlorophyll dissolves in the wine and reduces the preference. When the seed with the fat is used as it is, it causes rancidity due to the fat. In the case of the fruit, the sugar content of the fruit is mostly used as the source do. For this reason, 73 kinds of raw materials were selected for 78 kinds of stem and 52 kinds of root after excluding each part. In addition, it was known that the antimicrobial activity was excellent, but the grapefruit seed extract without the application was purchased.

자몽 종자 추출물을 사용한 막걸리의 제조Manufacture of makgeolli using grapefruit seed extract

자몽 종자 추출물을 사용한 막걸리의 제조방법은 다음과 같다. 발효제로는 누룩과 입국을 사용하였으며 첨가비율은 30sp/g이었다. 급수량은 200%이고 효모는 쌀양의 0.5%를 첨가하였으며, 자몽 종자 추출물은 원물을 분쇄하여 전체 쌀양의 0.5, 1.0, 2.0%를 2단에 첨가하였다. 1단은 48시간, 2단은 72-96시간 동안 25℃에서 이루어졌다. 발효가 끝난 원주는 120mesh의 체를 사용하여 제성하였으며 이화학적 특성 분석은 알코올 함량을 6.0%로 조절한 후에 이루어졌다. 자몽 종자 추출물무첨가구를 대조구로 사용하였다. 이러한 방법으로 최종 100L 용량으로 막걸리를 제조하였다.
A method of producing makgeolli using grapefruit seed extract is as follows. Yeast and entry were used as the fermenting agent, and the addition rate was 30 sp / g. Feeding rate was 200%, yeast was added 0.5% of rice, and grapefruit seed extract was pulverized and 0.5, 1.0 and 2.0% of total rice was added to second stage. The first stage was 48 hours and the second stage was performed at 25 ° C for 72-96 hours. The fermented beverage was sieved using a 120 mesh sieve, and its physicochemical properties were determined after adjusting the alcohol content to 6.0%. The control group was fed with no grapefruit seed extract. In this way, makgeolli was prepared with the final 100L capacity.

막걸리의 산패원인균의 동정 및 자몽 종자 추출물의 항균 활성 확인Identification of causal bacteria of rice wine and identification of antimicrobial activity of grapefruit seed extract

(1) 막걸리의 산패원인균 동정(1) Identification of causative bacteria of rice wine

생막걸리를 4℃와 25℃에 약 12일간 저장하면서 저장기간에 따른 효모수, 세균수 그리고 젖산균의 수를 측정하였다. 효모는 저장기간 동안 초기보다 감소하였으며 세균의 수는 저장온도 4, 25℃에서 모두 105CFU/mL의 수준을 나타내었다. 젖산균은 저장 기간이 경과할수록 저장 초기에 비하여 증가하는 것을 알 수 있었는데 4, 25℃에서 저장한 막걸리는 저장 초기 3.8 × 105CFU/mL이었던 것이 저장 12일에는 각각 6.8 × 107, 3.9 × 107CFU/mL을 나타내었다. The raw rice wine was stored at 4 ℃ and 25 ℃ for about 12 days, and the number of yeast, bacterial and lactic acid bacteria were measured during storage. The number of bacteria was decreased to 10 5 CFU / mL at 4, 25 ℃ storage temperature. It was found that lactic acid bacteria increased as storage time elapsed compared with that at the beginning of storage. The storage of makkolli at 4 and 25 ℃ was 3.8 × 10 5 CFU / mL at the beginning of storage and 6.8 × 10 7 and 3.9 × 10 7 CFU / mL.

이러한 결과를 바탕으로 저장 온도와 기간별로 회수한 막걸리에서 추출한 DNA를 주형으로 하여 곰팡이와 효모의 경우 ITS1F 와 ITS4R universal primer를 이용하여 1차 PCR(polymer chain reaction) 한 후 GC clamp가 붙어있는 ITS1F-GC 와 ITS2R을 이용하여 2차 PCR한 후 전기영동하고, 세균의 경우 GC clamp가 붙어있는 B357F-GC와 U519R을 이용하여 PCR 한 후 전기영동 하였다. 그 결과, 세균과 효모(곰팡이 포함)가 각각 200bp, 500bp 의 크기로 증폭되었음을 알 수 있었다.Based on these results, ITS1F and ITS4R universal primers were used as primers for DNA extracted from makkolli, which was recovered by storage temperature and period, and ITS1F and ITS4R universal primers were used for polymer chain reaction. PCR was performed using GC and ITS2R, followed by electrophoresis. Bacteria were subjected to PCR using B357F-GC and U519R with GC clamp and electrophoresed. As a result, bacteria and yeast (including fungi) were amplified to 200 bp and 500 bp, respectively.

Denaturing Gradient Gel Electrophoresis(DGGE)를 통한 분석 결과 세균의 경우 18개, 효모(곰팡이 포함)의 경우 11개의 위치가 다른 밴드를 분리하였다. 저장 온도 및 기간에 따른 막걸리의 DGGE 분석을 통한 결과는 도 1 및 도 2에 나타내었다. 효모와 곰팡이는 4℃와 25℃저장 막걸리 모두에서 Saccharomyces cerevisiae Aspergillus tubingensis , Candida glaebosa , Aspergillus niger 등 이 동정되었으며, DGGE 밴드 패턴의 변화도 적었다. 세균의 경우 4℃와 25℃ 저장 중 미생물의 변화가 다른 것으로 나타났다. 4℃ 저장 막걸리의 경우 Lactobacillus crustorum , Lactobacillus brevis, Microlaena stipoides 균이, 25℃ 저장 막걸리의 경우 Lactobacillus crustorum , Lactobacillus sp . Lactobacillus plantarum , Lactobacillus brevis, Lactobacillus rhamnosus , Lactobacillus similis 균이 동정 되었다. 특히, 25℃ 저장 중 12일째 Lactobacillus crustorum Lactobacillus plantarum균의 밴드가 진해짐을 알 수 있었다. 이상의 결과를 통해 막걸리의 저장 시 발생하는 산패에는 락토바실러스 균주(Lactobacillus sp .)가 관여하는 것으로 판단된다.
Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE) analysis showed that 18 strains of bacteria and 11 strains of yeast (including fungi) were isolated. The results of the DGGE analysis of the rice wine according to the storage temperature and period are shown in FIG. 1 and FIG. 2. Yeast and mold are stored at 4 ℃ and 25 ℃Saccharomyces cerevisiae Wow Aspergillus tubingensis , Candida glaebosa , Aspergillus niger And the variation of DGGE band pattern was also small. Bacteria showed different microbial changes during storage at 4 ℃ and 25 ℃. 4 ℃ storage case for rice wineLactobacillus crustorum , Lactobacillus brevis, Microlaena stipoides In case of bacteria, stored at 25 ℃Lactobacillus crustorum , Lactobacillus sp . Lactobacillus plantarum , Lactobacillus brevis, Lactobacillus rhamnosus , Lactobacillus similis The bacteria were identified. Particularly, during storage at 25 ° C on day 12Lactobacillus crustorumWowLactobacillus plantarumIt was found that the band of the microorganism was enlarged. These results suggest that lactic acid bacteria (Lactobacillus sp.Lactobacillus sp .)Is considered to be involved.

(2) 자몽 종자 추출물의 항균 활성 확인(2) Confirmation of antimicrobial activity of grapefruit seed extract

막걸리의 산패를 유발하는 젖산균을 대상으로 항균활성 여부를 관찰하였다. 73개의 식물약재와 자몽종자추출물을 대상으로 페이퍼 디스크를 사용하여 클리어 존(clear zone)을 확인한 결과 진득찰과 여주 그리고 자몽에서 항균활성이 확인되었으며 도 3에 나타내었다. Antimicrobial activity of lactic acid bacteria causing rancidity of makgeolli was observed. The clear zone of the 73 plant medicines and grapefruit seed extracts was confirmed by using a paper disk, and the antimicrobial activity was confirmed in the ginseng powder, Yeoju and grapefruit, and is shown in Fig.

락토바실러스 균주가 도말되어 있던 플레이트는 식물약재의 항균활성에 의하여 균이 있는 부위가 맑아지면서 클리어 존이 생성되는데 각 식물약재별로 크기를 측정하였다. 자몽의 경우 0.5-1.7cm, 진득찰은 0.7-1.7cm 그리고 여주는 0.8-1.7cm의 클리어 존을 생성하였다.
The plate on which the Lactobacillus strain was streaked was cleared of the bacterium due to the antimicrobial activity of the plant medicinal material, and a clear zone was formed, and the size of each plant medicament was measured. 0.5-1.7cm for grapefruit, 0.7-1.7cm for confectionery, and 0.8-1.7cm for Yeoju.

자몽 종자 추출물의 첨가에 따른 막걸리의 이화학적 특성 분석Analysis of physicochemical characteristics of rice wine with addition of grapefruit seed extract

(1) 누룩의 (1) of yeast 당화력에On the sugar strength 미치는 영향 Impact

선발된 식물약재가 알코올 발효 시 첨가하는 발효제의 당화력에 미치는 영향을 조사하였다(표 1). 식물약재를 첨가하여 당화력을 측정한 결과 누룩 자체의 당화력은 277SP였으며 이는 자몽 종자 추출물을 0.5% 첨가한 경우와 같았다. 첨가량이 증가함에 따라 당화력도 증가하여 1.0%일 때 284SP, 2.0%일 때 293SP를 나타내었다. 진득찰과 여주의 경우 자몽과 같은 경향을 보였으나 당화력의 증가 폭은 더 큰 것으로 나타났다. 진득찰의 함량이 0.5%에서 1.0%, 2.0%로 증가함에 따라 당화력은 278, 287 그리고 323P를 나타내었으며, 여주를 0.5%와 1.0%를 첨가한 경우 당화력은 288-289SP이었으나 2.0%를 첨가한 누룩 당화액에서는 355SP로 높은 값을 보였다. 입국과 식물약재를 혼합하여 당화력을 측정한 결과 입국 자체의 당화력은 88SP이었으며 식물약재를 첨가한 경우에는 이보다 높은 값을 나타내었으나 누룩의 경우와는 다른 양상을 보였다. 자몽, 진득찰 그리고 여주 모두 첨가량이 증가함에 따라 당화력은 감소하는 경향을 보였는데 각각의 식물약재를 0.5% 첨가한 경우 당화력은 97-99SP의 수준을 나타내었다. 하지만 첨가량이 1.0%, 2.0%로 증가함에 따라 당화력은 각각 92-95SP, 91-94SP의 값을 보였다.The effects of selected plant medicines on the glycation capacity of fermentation agents added during alcohol fermentation were investigated (Table 1). The glycation power of koji was 277SP, which was the same as that of 0.5% added grapefruit seed extract. As the addition amount increased, the saccharifying power increased to 284SP at 1.0% and 293SP at 2.0%. In the case of confectionery and yaju, grapefruit showed the same tendency but the growth rate of glycocity was larger. The saccharification powers were 278, 287 and 323P, respectively. The saccharification power was 288-289SP when 0.5% and 1.0% of yeast were added, but the saccharification power was increased to 2.0% And 355SP in glycated solution. The glycosylation power of the plant was found to be higher than that of the yeast except for the addition of botanical medicines. Glycyrrhiza, Glycyrrhizae, and L. gonorrhoe were decreased with increasing addition. The addition of 0.5% of each phytopathogenic agent showed the glycogen level of 97-99SP. However, as the addition amount increased to 1.0% and 2.0%, the saccharifying power values were 92-95SP and 91-94SP, respectively.

이상의 결과 누룩과 입국에 식물약재를 첨가하여 당화력을 측정한 결과, 발효제 단독인 경우보다 증가하여 나타나 식물약재의 첨가가 당화에 도움이 되는 것을 알 수 있었다.   As a result, the glycation activity was increased by adding the plant medicines to the yeast and the entry, and it was found that the addition of the botanical medicines was effective for glycation.

Saccharogenic power(SP)Saccharogenic power (SP) 누룩(277)Yeast (277) 입국(88)Entry (88) 자몽

grapefruit

0.5%0.5% 277277 9898
1.0%1.0% 284284 9393 2.0%2.0% 293293 9191 진득찰

Intonation

0.5%0.5% 278278 9797
1.0%1.0% 287287 9292 2.0%2.0% 323323 9292 여주

Yeoju

0.5%0.5% 288288 9999
1.0%1.0% 289289 9595 2.0%2.0% 355355 9494

(2) 효모의 생육에 미치는 영향 (2) Influence on growth of yeast

식물약재의 첨가가 효모의 생육에 미치는 영향을 관찰하여 도 4에 나타내었다. 자몽 종자 추출물을 첨가한 경우 대조구에 비하여 낮은 흡광도를 나타내었다. 초기의 흡광도에서 큰 변화 없이 24시간까지 유지되는 것으로 나타났는데 이는 자몽 종자 추출물의 첨가로 인하여 효모의 증식이 억제되었음을 의미한다. 그러나 흡광도가 일정한 값으로 유지되는 것으로 보아 알코올 발효에는 영향을 미치지 않는 것을 알 수 있었다. 진득찰과 여주를 0.5-2.0%로 첨가한 효모의 생육곡선은 식물약재를 첨가하지 않은 대조구와 같은 양상을 나타내었다. 초반 3시간 동안 흡광도는 급격히 증가하였고 그 후 완만한 증가를 보였으며 24시간까지 효모의 생육은 그대로 유지되는 것으로 나타났다. 오히려 대조구가 9시간까지 완만하게 증가한 것에 비하여 식물약재를 첨가한 효모의 증식 속도가 더 빠른 것으로 나타나 초반 3시간이 지난 후의 흡광도는 대조구가 9시간이 지난 후에 나타낸 흡광도와 같았으며 그 후에 더 증가하는 경향까지 보였다.The effect of the addition of plant medicines on the growth of yeast was observed and is shown in Fig. Addition of grapefruit seed extract showed lower absorbance than control. The initial absorbance was maintained for 24 hours without significant change, which means that yeast growth was inhibited by the addition of grapefruit seed extract. However, the absorbance was maintained at a constant value, indicating that alcohol fermentation was not affected. Growth curves of yeast supplemented with 0.5-2.0% yeast extract and yeast were similar to those of the control without addition of phytochemicals. During the first three hours, the absorbance increased rapidly, then gradually increased, and the yeast growth remained unchanged until 24 hours. Rather, the growth rate of the yeast with the phytopathogenic agent was faster than that of the control until 9 hours, and the absorbance after the first 3 hours was equal to the absorbance of the control after 9 hours, Tended to be.

이상의 결과는 식물약재의 첨가는 경우에 따라 효모의 생육을 억제하나 알코올 발효에 영향을 미치지 않는 것으로 나타났으며 이러한 결과로 미루어 식물약재는 효모가 활발하게 증식 한 후, 즉 주모의 발효가 끝난 후에 첨가하는 것이 바람직한 것으로 나타났다.
The results showed that the addition of plant medicines inhibited the growth of yeast but did not affect alcohol fermentation. As a result, the plant medicines were found to actively grow after yeast fermentation It was found to be preferable.

(3) 알코올 함량에 미치는 영향(3) Effect on alcohol content

식물약재가 첨가된 막걸리의 알코올 함량은 도 5에 나타내었다. 누룩을 발효제로 사용하여 막걸리를 제조한 결과 알코올 함량은 13.6%로 나타났다. 자몽 종자 추출물, 진득찰 그리고 여주의 첨가량이 0.5%, 1.0% 그리고2.0%로 증가 할수록 알코올 함량은 낮아졌으며 각 식물약재별로 2.0%를 첨가한 경우에는 대조구보다 낮은 알코올 함량을 보였다. 식물약재 중 진득찰을 0.5% 첨가한 막걸리의 알코올 함량이 15.2%로 가장 높았으며 자몽 종자 추출물과 여주를 0.5% 첨가한 막걸리는 각각 14.8%와 15.0%를 나타내었다.The alcohol content of rice wine added with plant herb is shown in FIG. The content of alcohol was 13.6% as a result of making makgeolli using yeast as an fermentation agent. Alcohol content was decreased with 0.5, 1.0 and 2.0% addition of grapefruit seed extract, confectionery and sweet potato, and lower alcohol content was observed at 2.0% addition of each plant medicinal material. The alcohol content of makkolli added 0.5% of the phytopathogenic herbs was the highest at 15.2% and the makkolli with 0.5% of grapefruit seed extract and mallow juice showed 14.8% and 15.0%, respectively.

입국을 사용한 경우 대조구의 알코올 함량은 13.0%로 나타났으며 식물약재 첨가량에 따른 알코올 함량은 누룩을 사용한 막걸리와 같은 것으로 나타났다. 자몽 종자 추출물을 첨가한 경우 첨가량이 0.5%에서 2.0%로 증가할수록 알코올 함량은 14.2%, 13.6% 그리고 11.6%를 보였으며 진득찰과 여주를 첨가한 막걸리는 16.8%에서 13.9%, 16.6%에서 13.6%의 함량을 나타내었다.
The alcohol content of the control group was 13.0% and the alcohol content of the control group was the same as the rice wine using the yeast. The alcohol content of 14.5%, 13.6% and 11.6% in the addition of grapefruit seed extract increased from 0.5% to 2.0%, while that of makkolli added 16.8% to 13.9% and 16.6% to 13.6% Respectively.

자몽 종자 추출물이 첨가된 막걸리의 저장기간에 따른 특성 분석Characterization of makkolli with Grapefruit Seed Extract by Storage Period

자몽 종자 추출물, 진득찰 그리고 여주를 0.5, 1.0, 2.0% 첨가하고 발효제로 입국 또는 누룩을 사용하여 제조한 막걸리의 10℃와 25℃에서 100일간 저장 한 저장기간별 알코올 함량, pH 변화, 총산 및 당도를 확인한 결과, 식물약재를 첨가하지 않은 막걸리와 비교하여 정상적인 범위 내에서 변화하는 것을 확인하였다(도 6 내지 도 9).The alcohol content, pH change, total acidity and sugar content of rice wine, which were prepared by adding 0.5, 1.0 and 2.0% of grapefruit seed extract, confectionery and yeast were added at 10 ℃ and 25 ℃ for 100 days. As a result, it was confirmed that it changed within a normal range as compared with the rice wine without added plant medicine (Figs. 6 to 9).

또한, 자몽 종자 추출물, 진득찰 그리고 여주를 첨가한 막걸리의 저장기간에 따른 유기산, 유기당 및 향기성분을 분석한 결과, 유기산 중 옥살산, 말산, 젖산, 아세트산, 시트르산 및 숙신산을 함유하고, 유리당은 과당, 포도당, 맥아당, 자당을 함유하는 것을 확인하였다. 향기성분은 검출된 약 15개의 에스터 중 파인애플향의 카푸릴산 에틸과 사과, 포도향의 에틸 카프레이트 및 부드러운 향의 에틸 팔미테이트가 주를 이루었으며, 아미노산류의 발효에 의해 생성되는 퓨젤유 중 발효취와 톡 쏘는 향을 특징으로 갖는 이소아밀 알코올의 함량은 식물약재의 첨가에 의하여 감소하는 경향을 보였다(표 2 내지 표 4). As a result of analysis of organic acids, organic sugars and aroma components of the rice wine containing the grapefruit seed extracts, confectionaries and sweet potatoes, the content of oxalic acid, malic acid, lactic acid, acetic acid, citric acid and succinic acid in organic acids was analyzed. , Glucose, maltose and sucrose. Among the fifteen esters detected, the fragrance component was mainly composed of pineapple-ethyl ethyl caprate and apple, grape flavor ethyl caprate and a soft fragrance of ethyl palmitate. Of the fusogenic oil produced by the fermentation of amino acids, The content of isoamyl alcohol, which is characterized by a spicy flavor, tended to decrease with the addition of plant medicaments (Tables 2 to 4).

본 발명에서 사용되는 발효제로는 막걸리의 제조에 통상 사용되는 입국 또는 누룩이 사용될 수 있으며, 본 발명의 실시예에서는 발효제로 입국을 사용한 막걸리의 경우에 대해서만 하기 표에 나타내었고, 발효제로 누룩을 사용한 경우 비슷한 양상을 나타내어 이에 대해서는 생략하였다.As the fermentation agent to be used in the present invention, entrapment or yeast commonly used in the production of makgeolli may be used. In the examples of the present invention, only the case of makkolgye which has been used as the fermentation agent is shown in the following table. The results are similar, and are omitted.

자몽 종자 추출물을 첨가한 막걸리의 저장 기간에 따른 유기산 함량 변화(발효제:입국) Changes of Organic Acid Content of Makgeolli Added Grapefruit Seed Extract with Storage Period (Fermenting Agent: Entry) 저장온도
(℃)
Storage temperature
(° C)
저장기간
(일)
storage duration
(Work)
옥살산Oxalic acid 말산Malian 젖산Lactic acid 아세트산Acetic acid 시트르산Citric acid 숙신산Suche mountain
대조구







Control







-- 00 0.200.20 0.610.61 6.416.41 2.812.81 0.310.31 0.380.38
10


10


1010 0.210.21 0.620.62 6.386.38 3.013.01 0.110.11 0.100.10
4040 0.190.19 0.310.31 6.156.15 3.173.17 0.130.13 -- 7070 0.220.22 0.380.38 7.797.79 2.602.60 0.150.15 -- 100100 0.160.16 0.300.30 5.375.37 2.372.37 0.110.11 -- 25


25


1010 0.180.18 0.300.30 5.705.70 2.322.32 0.050.05 0.160.16
4040 0.080.08 0.290.29 5.835.83 2.552.55 0.040.04 0.030.03 7070 0.100.10 0.320.32 0.180.18 1.701.70 0.010.01 -- 100100 0.110.11 0.330.33 0.230.23 1.661.66 0.010.01 -- 자몽 0.5%






Grapefruit 0.5%






-- 00 0.160.16 0.720.72 3.463.46 4.914.91 0.220.22 --
10


10


1010 0.150.15 1.201.20 3.293.29 4.934.93 0.240.24 --
4040 0.210.21 0.710.71 3.773.77 4.214.21 0.290.29 -- 7070 0.190.19 0.630.63 3.413.41 4.444.44 0.260.26 -- 100100 0.210.21 0.660.66 3.233.23 3.703.70 0.240.24 -- 25


25


1010 0.180.18 0.640.64 2.862.86 4.604.60 0.190.19 --
4040 0.230.23 0.830.83 6.096.09 2.332.33 0.240.24 -- 7070 0.170.17 0.660.66 2.392.39 4.074.07 0.200.20 -- 100100 0.220.22 0.860.86 5.115.11 2.212.21 0.250.25 -- 자몽 1.0%






Grapefruit 1.0%






-- 00 0.240.24 0.890.89 10.4510.45 2.992.99 0.290.29 --
10


10


1010 0.230.23 0.860.86 9.329.32 2.962.96 0.260.26 --
4040 0.270.27 0.880.88 12.3612.36 3.053.05 0.210.21 -- 7070 0.260.26 0.820.82 12.5512.55 3.703.70 0.320.32 -- 100100 0.260.26 0.790.79 12.2512.25 3.843.84 0.390.39 -- 25


25


1010 0.290.29 1.041.04 13.8413.84 4.134.13 0.350.35 --
4040 0.290.29 1.171.17 15.1415.14 3.483.48 0.280.28 -- 7070 0.290.29 1.201.20 14.7114.71 3.633.63 0.340.34 -- 100100 0.260.26 1.221.22 12.9412.94 2.842.84 0.170.17 -- 자몽 2.0%






Grapefruit 2.0%






-- 00 0.280.28 1.041.04 16.9416.94 4.874.87 0.540.54 0.410.41
10


10


1010 0.290.29 0.160.16 17.1817.18 5.565.56 0.560.56 0.440.44
4040 0.310.31 0.140.14 18.0118.01 5.415.41 -- 0.460.46 7070 0.310.31 0.140.14 17.8517.85 5.385.38 -- 0.450.45 100100 0.310.31 0.120.12 18.2518.25 5.205.20 -- 0.360.36 25


25


1010 0.320.32 0.150.15 18.2218.22 5.435.43 0.560.56 0.510.51
4040 0.300.30 0.060.06 18.6218.62 4.944.94 -- 0.320.32 7070 0.290.29 0.040.04 18.5418.54 4.714.71 -- 0.240.24 100100 0.280.28 1.411.41 18.4818.48 3.313.31 -- --

자몽 종자 추출물을 첨가한 막걸리의 저장 기간에 따른 유리당 함량 변화(발효제:입국) Changes in free sugar content of rice wine with grapefruit seed extract added during storage (fermentation: entry) 식물
약재
plant
Medicinal
저장온도
(℃)
Storage temperature
(° C)
저장기간
(일)
storage duration
(Work)
포도당glucose 자당saccharose 맥아당Maltose
대조구







Control







-- 00 2.442.44 0.260.26 0.620.62
10


10


1010 2.392.39 0.150.15 0.870.87
4040 1.451.45 0.130.13 0.340.34 7070 1.061.06 0.270.27 0.380.38 100100 0.980.98 0.060.06 0.230.23 25


25


1010 1.161.16 0.050.05 0.380.38
4040 1.141.14 0.070.07 0.160.16 7070 1.001.00 0.070.07 0.240.24 100100 0.900.90 0.070.07 0.200.20 자몽 0.5%







Grapefruit 0.5%







-- 00 9.169.16 0.350.35 0.410.41
10


10


1010 2.672.67 0.720.72 0.210.21
4040 2.602.60 0.690.69 0.200.20 7070 1.911.91 0.550.55 0.250.25 100100 1.801.80 0.430.43 0.300.30 25


25


1010 2.142.14 0.310.31 0.290.29
4040 2.122.12 0.310.31 0.280.28 7070 1.701.70 0.290.29 0.260.26 100100 1.211.21 0.280.28 0.310.31 자몽 1.0







Grapefruit 1.0







-- 00 15.7215.72 1.111.11 0.480.48
10


10


1010 2.492.49 1.111.11 0.540.54
4040 2.832.83 1.091.09 0.520.52 7070 8.878.87 0.940.94 0.430.43 100100 9.219.21 0.690.69 0.410.41 25


25


1010 6.296.29 1.411.41 0.570.57
4040 6.266.26 1.801.80 0.860.86 7070 6.376.37 1.571.57 0.460.46 100100 8.458.45 1.501.50 0.510.51 자몽 2.0%







Grapefruit 2.0%







-- 00 49.8849.88 1.311.31 4.114.11
10


10


1010 44.1144.11 1.521.52 3.743.74
4040 48.6448.64 1.471.47 3.673.67 7070 49.3549.35 1.431.43 4.954.95 100100 51.3251.32 1.301.30 5.305.30 25


25


1010 45.8645.86 2.112.11 3.213.21
4040 47.2147.21 2.192.19 3.803.80 7070 48.0348.03 2.182.18 3.333.33 100100 48.2248.22 2.172.17 3.123.12

자몽 종자 추출물을 첨가한 막걸리의 저장 기간에 따른 향기성분 분석(저장온도 10℃, 발효제:입국)Analysis of Flavor Components by Storage Period of Makgeolli with Grapefruit Seed Extract (Storage Temperature 10 ℃, Fermenting Agent: Entry) Compound
Compound
0.5%0.5% 1.0%1.0% 2.0%2.0%
0일0 days 40일40 days 100일100 days 0일0 days 40일40 days 100일100 days 0일0 days 40일40 days 100일100 days Ethyl alcoholEthyl alcohol 15.2715.27 19.4719.47 20.6720.67 11.9811.98 18.6118.61 17.7617.76 10.1510.15 12.3912.39 13.6413.64 D-LimoneneD-Limonene 0.090.09 0.130.13 0.130.13 0.150.15 0.170.17 0.230.23 0.110.11 0.230.23 0.230.23 Isoamyl alcoholIsoamyl alcohol 1.901.90 2.292.29 2.632.63 1.131.13 2.142.14 2.292.29 1.491.49 1.521.52 1.951.95 Ethyl caprylateEthyl caprylate 2.522.52 3.193.19 2.132.13 1.971.97 3.553.55 2.782.78 0.210.21 2.082.08 1.511.51 Ethyl pelargonateEthyl pelargonate 0.390.39 0.450.45 0.290.29 0.220.22 0.390.39 0.410.41 0.030.03 0.200.20 0.180.18 Ethyl caprateEthyl caprate 12.8612.86 13.2813.28 13.6913.69 11.1111.11 12.4612.46 13.6113.61 8.258.25 8.418.41 10.1310.13 Dimethyl succinateDimethyl succinate 0.060.06 0.060.06 13.2813.28 0.060.06 0.100.10 0.090.09 0.090.09 0.060.06 0.070.07 Ethyl undecanoateEthyl undecanoate 0.080.08 0.100.10 0.090.09 0.070.07 0.070.07 0.070.07 -- 0.040.04 0.050.05 Ethyl laurateEthyl laurate 7.107.10 7.277.27 6.986.98 7.207.20 7.167.16 6.776.77 7.057.05 6.126.12 6.096.09 Phenylethyl alcoholPhenylethyl alcohol 5.025.02 5.595.59 5.075.07 4.334.33 4.244.24 4.114.11 2.952.95 2.942.94 2.972.97 Isobutyl laurateIsobutyl laurate 0.030.03 0.310.31 0.360.36 0.030.03 0.030.03 0.030.03 0.240.24 0.030.03 0.030.03 Ethyl myristateEthyl myristate 5.055.05 2.662.66 3.183.18 6.376.37 2.482.48 3.383.38 7.167.16 6.776.77 6.646.64 Isoamyl laurateIsoamyl laurate 0.140.14 0.110.11 0.130.13 0.200.20 0.110.11 0.150.15 0.000.00 0.200.20 0.200.20 Ethyl pentadecanoateEthyl pentadecanoate 0.140.14 0.110.11 0.110.11 0.200.20 0.110.11 0.130.13 0.180.18 0.220.22 0.210.21 Ethyl palmitateEthyl palmitate 24.6824.68 22.1922.19 20.1520.15 31.7531.75 26.5026.50 25.4425.44 28.9428.94 34.1434.14 34.2634.26 Ethyl heptadecanoateEthyl heptadecanoate 0.140.14 0.170.17 0.190.19 0.160.16 0.170.17 0.180.18 0.130.13 0.160.16 0.130.13 Ethyl stearateEthyl stearate 1.231.23 1.351.35 1.251.25 1.681.68 1.801.80 1.791.79 1.461.46 1.841.84 1.641.64 Ethyl oleateEthyl oleate 3.733.73 2.812.81 2.852.85 3.973.97 2.562.56 2.602.60 4.414.41 0.320.32 0.190.19 Ethyl linolateEthyl linolate 4.734.73 2.412.41 2.512.51 5.765.76 2.712.71 2.862.86 7.407.40 6.846.84 5.845.84 n-Palmitic acidn-Palmitic acid 2.982.98 4.044.04 1.891.89 1.861.86 3.973.97 5.695.69 1.531.53 4.204.20 4.264.26

자몽 종자 추출물이 첨가된 막걸리의 저장기간에 따른 항균 활성 확인Identification of antimicrobial activity of rice wine with grapefruit seed extract

자몽 종자 추출물을 농도별로 첨가하고 발효제를 달리 사용하여 제조한 막걸리의 온도별(10℃, 25℃) 저장 중 미생물의 변화를 Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE)를 이용하여 알아보았다. 발효제로 누룩을 사용한 막걸리의 DGGE 결과는 도 10에 나타내었다. 대조구(0%)의 경우 저장 기간에 따른 DGGE 밴드 패턴이 비슷한 반면, 자몽 종자 추출물을 0.5-2.0% 첨가하여 제조한 막걸리에서는 온도별, 저장기간별 밴드의 패턴이 변화됨을 알 수 있다. 0% 첨가막걸리는 락토바실러스 종으로 동정된 1, 2, 3, 6, 7, 12번 밴드가 저장기간 중 모든 온도에서 뚜렷하게 나타나고, 자몽 종자 추출물을 첨가하여 제조한 막걸리에서는 락토바실러스 종으로 동정된 밴드(0.5%첨가 4번 밴드, 1%첨가 2번 밴드, 2%첨가 2번 밴드)가 저장 기간이 지남에 따라 나타나지 않았다. 특히 자몽 종자 추출물을 0.5% 첨가한 막걸리의 경우 락토바실러스 종으로 동정된 12, 13 밴드는 25℃에서 저장한 시료에서는 거의 보이지 않았고, 자몽 종자 추출물을 1% 첨가한 막걸리의 경우 락토바실러스 종으로 동정된 4번 밴드가 25℃ 저장기간 중 나타났지만 10℃ 저장 중에는 나타나지 않았다. 자몽 종자 추출물을 2% 첨가한 막걸리는 0.5, 1.0% 첨가한 막걸리와 비교했을 때 10℃ 저장 중에는 특이한 변화가 나타나지 않지만 25℃ 저장 중에는 밴드의 패턴이 달라짐을 알 수 있다. 자몽 종자 추출물의 첨가 비율이 증가함에 따라락토바실러스 종 균주에 대한 항균활성이 높아지고 저장온도에 따라 항균활성도 달라짐을 알 수 있다. The changes of microorganisms during storage of rice wine (10 ℃, 25 ℃) were investigated by Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE). DGGE results of rice wine using yeast as an fermentation agent are shown in FIG. The DGGE band pattern of the control (0%) was similar to the DGGE band pattern during storage, but the pattern of temperature and storage period band was changed in the mangolli produced by adding 0.5-2.0% of grapefruit seed extract. 1, 2, 3, 6, 7, and 12 bands identified as Lactobacillus species at 0% added mugwheel were apparent at all temperatures during storage, and lactobacillus species were identified in Makgeolli prepared by adding grapefruit seed extract Band (band 4 with 0.5%, band 2 with 1%, band 2 with 2%) did not appear over the storage period. Especially, in case of rice wine with 0.5% of grapefruit seed extract, 12 and 13 bands identified as Lactobacillus species were hardly observed in samples stored at 25 ℃. In case of Makgeolli containing 1% grapefruit seed extract, it was identified as Lactobacillus species 4 band appeared during storage at 25 ℃ but not during storage at 10 ℃. Compared with the rice wine added with 0.5% and 1.0% of the rice wine added with 2% of grapefruit seed extract, no particular change was observed during storage at 10 ℃, but the band pattern was changed during storage at 25 ℃. The antimicrobial activity of Lactobacillus sp. Strain was increased with the addition of grapefruit seed extract.

자몽 종자 추출물을 농도별로 첨가하고 입국을 발효제로 사용하여 제조한 막걸리의 DGGE 결과는 도 11과 같다. 입국을 사용한 경우 대조구(0%)는 락도바실러스 종 균주로 동정된 밴드가 저장 기간 동안 점차 옅어지는 경우(1, 5번 밴드)가 있지만 대체로 뚜렷한 양상을 나타냈다. 자몽 종자 추출물을 첨가하여 제조한 막걸리에서는 대조구와 비교하여 전반적인 밴드 수가 감소하였고, 락토바실러스 종 균주로 동정된 밴드도 상당수 감소하였다. 자몽 종자 추출물을 0.5% 첨가한 막걸리는 10℃ 저장 기간 동안 락토바실러스 종 균주로 동정된 6번 밴드가 일정하게 보이는 반면 25℃ 저장 중에는 점점 옅어졌고, 자몽 종자 추출물을 1% 첨가한 막걸리는 10℃ 저장 기간 동안 락토바실러스 종 균주로 동정된 5번 밴드가 일정하게 보이는 반면 25℃에서 40일 저장 후에는 밴드가 없어졌다. 자몽 종자 추출물을 1% 첨가한 막걸리는 락토바실러스 종 균주로 동정된 5번 밴드가 10℃에서 70일 저장 이후부터 없어졌으며 25℃에서 저장했을 경우 10일 경과 후 보이지 않았다. The results of DGGE of makgeolli prepared by adding grapefruit seed extract to concentration and using as an fermentation agent are shown in Fig. In the control group (0%), the bands identified as Lactobacillus sp. Strains gradually diminished during the storage period (bands 1 and 5), but generally showed a clear pattern. In the case of makgeolli prepared by adding grapefruit seed extract, the overall number of bands decreased compared with the control, and Lactobacillus species The number of bands identified as strains was also decreased. Mackerel containing 0.5% of grapefruit seed extract was added to lactobacillus species While the 6th band identified as strain was constant, it became gradually thinner during storage at 25 ℃ and the 5th band identified as Lactobacillus strains during 10 ℃ storage period was constant in Makgeolli containing 1% grapefruit seed extract After 40 days of storage at 25 ° C the band disappeared. The 5th band identified as Lactobacillus sp. Strain was not removed after storage for 70 days at 10 ℃ and after 10 days for storage at 25 ℃.

이러한 결과로부터, 누룩을 발효제로 한 막걸리 중 자몽 종자 추출물을 첨가한 경우 10℃와 25℃에서 밴드의 수가 감소하거나 옅어짐을 알 수 있었는데 그러한 양상은 10℃보다 25℃에서 더 뚜렷하게 나타나 자몽 종자 추출물의 항균활성은 25℃에서 활발하게 일어났음을 알 수 있었다. 발효제로 입국을 사용한 경우 자몽 종자 추출물의 첨가는 발효제로 누룩을 사용한 경우와 마찬가지로 두 온도에서 모두 대조구에 비하여 락토바실러스 종 균주의 밴드 수가 감소하여 자몽 종자 추출물에 의한 항균활성이 있었음을 알 수 있었으며 이러한 현상은 10℃ 보다 25℃에서 더 활발하게 일어났다.
These results suggest that the addition of grapefruit seed extract to the rice wine with leaven as the fermentation agent decreased or decreased the number of bands at 10 ℃ and 25 ℃. The antimicrobial activity was found to be active at 25 ℃. The addition of grapefruit seed extract to the fermentation broth showed that the number of bacterium strains of Lactobacillus strain was decreased and the antimicrobial activity of grapefruit seed extract was increased at both temperatures as in the case of using yeast as the fermentation agent. The phenomenon occurred more actively at 25 ° C than at 10 ° C.

자몽 종자 추출물이 첨가된 막걸리의 저장 Storage of rice wine with grapefruit seed extract added 기간term 및 저장 온도에 따른 기호도 분석 And preference analysis according to storage temperature

자몽 종자, 진득찰, 여주 추출물을를 첨가하여 제조한 막걸리의 발효제 종류와 저장 온도에 따른 전체기호도의 변화는 도 12와 같다. The changes in overall preference according to the kinds of fermenting agent and storage temperature of the makgeolli prepared by adding grape seed,

발효제로 누룩을 사용한 경우 식물약재를 첨가하지 않은 막걸리(대조구)의 기호도는 10℃에 저장 시 40일까지 '보통'수준의 5점을 나타내었으며 그 후 70일에는 4점을 보였고 저장 100일에는 3점으로 '싫음'을 나타내었다. 자몽 종자 추출물을 첨가한 경우 저장 0일에 5점이었던 기호도는 첨가 함량에 관계없이 저장 기간이 경과 됨에 따라 증가하여 저장 70일에는 7점으로 '좋음'을 나타내었으며 저장 100일에 9점 척도 중 5-6점으로 '보통'수준의 기호도를 보였다. 진득찰의 경우 저장기간 동안의 기호도는 5점 이하로 낮은 편이었으며 여주를 첨가한 막걸리는 4-5점에서 시작한 기호도는 저장 10일까지는 변화가 없었으나 그 후 증가하여 저장 100일에는 6점을 나타내었다. 같은 시료를 25℃에 저장 한 경우 대조구는 10일 이후부터 낮아져 저장 100일에는 '싫음'이상을 의미하는 2점을 보였다. 자몽 종자 추출물과 여주를 첨가한 경우 기호도는 조금씩 증가하여 저장 40일에 높은 기호도를 보였으며 자몽 종자 추출물을 첨가한 막걸리는 그 후 감소하여 저장 100일에는 '보통'수준의 5-6점을 나타내었으며 여주를 첨가한 막걸리는 저장 70일 이후에 감소하여 저장 100일에는 자몽 종자 추출물을 첨가한 막걸리와 같은 양상을 보였다.When yeast was used as the fermenting agent, the preference of the rice wine without the phytopathogenic agent (control) showed 5 points of 'normal' level at 40 ℃ when stored at 10 ℃, and 4 points at 70 days after storage. Three points indicated 'dislike'. In the case of addition of grapefruit seed extract, the score of 5 points on the 0th day of storage increased as the storage period elapsed, regardless of the amount of addition, indicating that the score was 'good' on the 70th day of storage. 5-6 points, showing a 'normal' level of preference. The preference score during the storage period was as low as 5 points or less, while the preference score of the makgeolli added with Yeoju was not changed until 10th day of storage, but then increased to 6 points at 100th day of storage . When the same sample was stored at 25 ° C, the control was lowered from 10 days on, and showed 2 points indicating 'disliked' above 100 days of storage. In the case of adding grapefruit seed extract and mallow juice, the degree of preference increased slightly and the degree of preference was high at 40 days of storage. The makkolli added with grapefruit seed extract decreased thereafter and showed 5-6 points of 'normal' And the rice wine added with Yeoju decreased after 70 days of storage and showed the same pattern as rice wine with added grapefruit seed extract on the 100th day of storage.

발효제로 입국을 사용한 막걸리의 기호도는 저장 온도에 관계없이 저장 기간이 경과됨에 따라 감소하여 저장 100일에는 3점을 나타내었다. 자몽 종자 추출물을 첨가한 경우 10℃와 25℃에 저장 시 저장 0일에 5-6점을 나타내었던 기호도는 저장 40일 이후 증가하는 경향을 보였으며 저장 100일에는 각각 6-8점과 6-7점을 나타내었다. 여주를 첨가한 경우 25℃보다 10℃에서 저장 한 막걸리의 저장 100일 기호도는 조금 높았으며 10℃에서는 여주 첨가량이 1.0%>2.0%>0.5% 순이었으나 25℃에서는 1.0%>0.5%>2.0% 순으로 나타났다. 진득찰의 경우 저장 100일째 0.5%를 첨가한 막걸리의 기호도'보통'의 5점으로 대조구에 비하여 높게 나타났다. The degree of preference of rice wine used as an fermentation agent decreased with storage period regardless of storage temperature and showed 3 points at 100 days of storage. In the case of addition of grapefruit seed extract, the degree of preference, which showed 5-6 points on storage at 10 ℃ and 25 ℃, tended to increase after 40 days of storage, and 6-8 points and 6- 7 points. At 10 ℃, the sweetness of rice wine stored at 10 ℃ was higher than that of rice wine at 10 ℃. The addition of rice wine at 10 ℃ was 1.0%> 2.0%> 0.5%, but at 25 ℃ 1.0%> 0.5%> 2.0% Respectively. On the 100th day after storage, 0.5% of makkolli was preferred and the score of 'normal' was 5 points higher than that of the control.

이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다. While the present invention has been particularly shown and described with reference to specific embodiments thereof, those skilled in the art will appreciate that such specific embodiments are merely preferred embodiments and that the scope of the present invention is not limited thereby. something to do. It is therefore intended that the scope of the invention be defined by the claims appended hereto and their equivalents.

Claims (8)

삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 쌀 및 쌀 100 중량부에 대하여 자몽 종자 추출물 0.5 내지 1.5 중량부를 혼합한 후 발효시키는 단계를 포함하고, 상기 자몽 종자 추출물은 제 2단 담금 시 추가하는, 저장성이 향상된 막걸리를 제조하는 방법. And 0.5 to 1.5 parts by weight of grapefruit seed extract per 100 parts by weight of rice and rice, and then fermenting the grapefruit seed extract, wherein the grapefruit seed extract is added during the second stage of dipping. 삭제delete 제 6항에 있어서,
상기 막걸리는 10℃ 내지 25℃에서 저장 기간이 80일 내지 100일인 것을 특징으로 하는 저장성이 향상된 막걸리를 제조하는 방법.
The method according to claim 6,
Wherein the rice wine has a storage period of from 80 ° C to 100 days at 10 ° C to 25 ° C.
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