KR101414722B1 - 신규한 데구엘린 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 HIF-1 활성을 저해하는 화합물 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 화합물은 비선택적인 세포 독성에 의해 항암 활성을 나타내는 것이 아니라, HIF-1α 단백질의 축적을 선택적으로 저해하고 신생 혈관 생성 인자(VEGF)의 활성을 효과적으로 저해하므로, 항암제, 당뇨병성 망막증 및 관절염 치료제의 유효성분으로 사용될 수 있다.

Description

신규한 데구엘린 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물{A novel Deguelin derivatives or its pharmaceutically acceptable salts and pharmaceutical composition containing the same as an active ingredient}

본 발명은 Hsp90을 저해하는 데구엘린 유도체 및 이를 유효성분으로 함유하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

열충격 단백질군(heat-shock protein families; HSPs)과 같은 분자샤페론은 ATP 의존적인 구조 변화를 통해 클라이언트 단백질의 접힘을 조절하여 초기 단백질 (nascent proteins)의 활성화, 손상된 단백질의 재접힘이나 분해를 도와주는 단백질이다. 또한, 클라이언트 단백질은 분자샤페론과의 결합을 통해 집합 현상(aggregation)을 회피하며 이들의 결합은 클라이언트 단백질의 막 이동(membrane translocation)을 통해 세포내 퇴적(intracellular deposition)을 도와준다.

열충격 단백질군의 하나인 Hsp90의 분자 샤페론 기능은 세포의 신호 전달 경로에 관계 있는 다양한 클라이언트 단백질의 안정성과 활성화에 필요하다고 알려져 있다. 외부의 자극을 받지 않는 정상 조건에서 Hsp90의 양은 세포내 단백질의 1~2%를 차지하지만, 외부의 자극을 받는 조건에서는 Hsp90의 양이 두 배 정도 증가한다. 클라이언트 단백질의 암유발 돌연변이는 더 높은 수준의 Hsp90 기능을 요구하고 Hsp90의 과발현으로 이어지며, 정상 조직에 비해 과발현된 Hsp90은 암세포의 공통된 특징이다[Bagatell, R.; Whitesell, L. Altered Hsp90 function in cancer: A unique therapeutic opportunity. Mol . Cancer Ther . 2004, 3, 1021-1030].

ErbB2, Src, Met 티로신 키나아제, MEK 1/2(mitogen-activated protein kinase kinase), Akt, Raf-1, 사이클린 의존성 키나아제(Cyclin-dependent serine kinases), 스테로이드 호르몬 수용체, 말단소체복원효소(telomerase), 금속단백질-2(MMP-2), HIF-1α(hypoxia-inducible factor-1α)를 포함하는 Hsp90 클라이언트 단백질은 세포의 생존, 증식, 침범, 전이, 신생혈관형성 등을 포함하는 다양한 신호 전달 경로 상에 존재하고 악성 표현형에 기여한다고 알려져 있다[Eustace, B. K.; Sakurai, T.; Stewart, J. K.; Yimlamai, D.; Unger, C.; Zehetmeier, C.; Lain, B.; Torella, C.; Henning, S. W.; Beste, G.; Scroggins, B. T.; Neckers, L.; Ilag, L. L.; Jay, D. G. Functional proteomic screens reveal an essential extracellular role for hsp90 alpha in cancer cell invasiveness. Nat . Cell Biol. 2004, 6, 507-514].

특히, HIF-1α는 HIF-1β와 함께 HIF(hypoxia-inducible factor)를 구성하는 아단위로서, 산소-불안정성 전사인자이며 신생혈관형성-조절 단백질의 하나인 VEGF(vascular endothelial growth factor)의 발현을 유도함으로써 혈관 파괴와 혈관기능이상의 측면에서 신생혈관형성을 관장한다. 신생혈관형성은 새로운 혈관을 만들어내는 과정이며, 혈관이나 대사적으로 활성화된 조직의 수선, 재생, 발달에 필요하다.

그렇지만, 병리학적인 신생혈관형성은 전이를 통한 암의 성장과 확장에 중요한 역할을 하는 것뿐만 아니라, 비정상적으로 빠른 속도의 신생혈관형성에 의한 출혈, 혈관 누출, 조직 파괴를 유도한다. 결과적으로 병리학적인 신생혈관형성은 암뿐만 아니라 당뇨병성 망막증과 노인성 황반변성을 포함하는 다양한 신생혈관형성 의존성 질병을 야기할 수 있고, 건선과 류마티스 관절염과 같은 만성 감염 질환에 관련이 있다고 알려져 있다.

따라서 Hsp90의 억제는 신생혈관형성 관련 질병의 새롭고 효과적인 치료법으로 고려될 수 있으며, Hsp90 억제제는 신생혈관형성 관련 질병의 잠재적 화학치료제이다[Eccles, S.; Massey, A.; Raynaud, F.; Sharp, S.; Box, G.; Valenti, M.; Patterson, L.; de Haven Brandon, A.; Gowan, S.; Boxall, F. NVP-AUY922: a novel heat shock protein 90 inhibitor active against xenograft tumor growth, angiogenesis, and metastasis. Cancer Res . 2008, 68, 2850].

Hsp90은 동질이량체로 대부분 존재하며, N-말단 영역, 중간 영역, C-말단 영역으로 구성된다. 특히, N-말단 영역은 아데닌 결합 포켓(adenine nucleotide-binding pocket)을 가지고 있는데, 이는 버거렛 폴드(Bergerat fold)라고도 알려진 특이한 구조적 모티프(structural motif)를 포함하여 Hsp90이 Hsp70이나 다른 키나아제와 차이나는 ATP-결합 영역을 갖게 한다. 이러한 구조적 특이성은 매우 선택적인 Hsp90 억제제의 개발 가능성을 제시하며, 하기에 나타낸 바와 같은 몇 가지 Hsp90 저해제들이 알려져 있다.

젤다나마이신(2)과 이보다 독성이 덜한 유도체인 17-AAG(17-아릴아미노-17-디메톡시 젤다나마이신), 라디시콜(3)과 보다 안정적인 옥심 유도체, 그리고 합성 유도체인 PU3(4) 등의 대부분의 Hsp90 억제제는 Hsp90의 N-말단 영역의 ATP-결합 포켓과 상호작용한다고 알려져 있는 반면, DNA 선회효소(DNA gyrase)의 억제제로 알려진 항생 천연물인 노보바이오신(5)은 Hsp90의 C-말단 영역의 ATP-결합 포켓과 상호작용하여 효과적인 Hsp90 억제 효과를 보여준다. 이러한 Hsp90 억제제들은 다양한 암 유발 Hsp90 클라이언트 단백질의 분해를 촉진함으로써 다양한 암세포주의 전임상 모델에서 현저한 화학예방 효과를 보였다. 또한 17-AAG를 포함한 일부 Hsp90 억제제는 임상 단계에 진입했다.

데구엘린(1)[Clark, E., A relation between rotenone, deguelin and tephrosin. 1931; Vol. 73, pp 17-18.]은 아프리카 기원 식물인 문드리 세리시아(mundulea sericea)로 부터 분리된 로테노이드 계열 화합물로서, Akt 활성화를 차단함으로써 담배의 발암물질로부터 유도된 폐 발암을 막는 것으로 알려져 있으며, 다양한 형질전환 세포주와 암세포주를 이용한 생체 외 실험에서 세포 사멸 효과와 신생혈관형성 억제 효과를 나타내었다[Lee, H. Molecular mechanisms of deguelin-induced apoptosis in transformed human bronchial epithelial cells. Biochem. Pharmacol . 2004, 68, 1119-1124].

비록 데구엘린의 항암제 또는 신생혈관생성 억제제로서의 가능성은 효능적인 측면에서 확인되었지만, 독성, 낮은 용해도 및 화학적 불안정성은 데구엘린의 약물로서의 한계를 보여주고 있다.

이에, 본 발명자들은 데구엘린의 3차원 입체구조를 기반으로 데구엘린의 활성을 유지하면서 낮은 독성 및 개선된 물리 화학적 성질이 확보된 유도체를 합성하고, 이 신규한 데구엘린 유도체들의 Hsp90 억제 효과를 확인하고, 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 Hsp90을 저해하는 신규 화합물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 신규 화합물을 유효성분으로 함유하는 암 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 신규 화합물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병성 망막증 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 신규 화합물을 유효성분으로 함유하는 류마티스성 관절염 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 하기 화학식 1로 표시되는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:

[화학식 1]

(상기 화학식 1에서, R¹ 내지 R⁵는 본 명세서에서 정의한 바와 같다).

또한, 본 발명은 하기 화학식 2로 표시되는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:

[화학식 2]

(상기 화학식 2에서, R^a 및 R^b는 본 명세서에서 정의한 바와 같다).

나아가, 본 발명은 상기 화학식 1 및 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1 및 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 당뇨병성 망막증 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

나아가, 본 발명은 상기 화학식 1 및 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 류마티스성 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 화학식 1 및 화학식 2의 화합물은 Hsp90 발현을 억제하여 Hsp90 클라이언트 단백질인 HIF-1α 단백질의 축적을 저해하고 신생 혈관 생성 인자(VEGF)의 활성을 효과적으로 저해하므로, 항암제, 당뇨병성 망망증 및 관절염 치료제의 유효성분으로 사용될 수 있다.

도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 화합물들이 HIF-1α 축적을 저해하는 정도를 나타내는 웨스턴 블롯 도면이다.
도 2는 본 발명의 일실시예에 따른 화합물 53이 신생혈관 생성에 미치는 영향을 나타낸 사진이다.
도 3은 본 발명의 일실시예에 따른 화합물 69가 신생혈관 생성에 미치는 영향을 나타낸 사진이다.
도 4는 본 발명의 일실시예에 따른 화합물 72가 신생혈관 생성에 미치는 영향을 나타낸 사진이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 하기 화학식 1로 표시되는 신규한 데구엘린 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

상기 화학식 1에서,

R¹ 및 R²는 서로 독립적으로 -H, -OH, C_{1 - 4}직쇄 또는 측쇄 알킬, 또는 C_{1 - 4}알콕시이고,

R³은 -H, -OH, =O, -OR⁶ 또는 =N-O-R⁷이고,

R⁴는 -H, -OH, C_{1 - 4}알콕시, 아세테이트 또는 페닐메톡시이고,

R⁵는 C_{1 - 6}직쇄 또는 측쇄의 알킬 또는 알케닐이고,

R⁶은 C_{1 - 6}직쇄 또는 측쇄의 알킬 또는 알케닐, C_{5 - 8}아릴알킬,

,

또는

이고, 및

*R⁷은 -H, C_{1 -4} 직쇄 또는 측쇄 알킬, 또는 C_{5 - 8}아릴알킬이다.

이때, R⁴와 R⁵는 서로 고리 내 O를 1 이상 함유하는 5-8각 헤테로고리를 이룰 수 있으며, 이 고리에는 -OH 또는 C_{1 - 2}알킬기가 1 이상 치환될 수 있다.

또한,

는 단일결합 또는 이중결합이다.

바람직하게는,

상기 R¹ 및 R²는 서로 독립적으로 -OH 또는 -OMe이고,

R³은 -H, -OH, =O, -OR⁶ 또는 =N-O-R⁷이고,

R⁴는 -OH, C_{1 - 3}알콕시, 아세테이트 또는 페닐메톡시이고,

R⁵는 C_{1 - 5}직쇄 또는 측쇄의 알킬 또는 알케닐이고,

R⁶은 C_{1 - 3}직쇄 또는 측쇄의 알킬 또는 알케닐, C_{5 - 6}아릴알킬,

,

또는

이고, 및

*R⁷은 -H, C_{1 -3} 직쇄 또는 측쇄 알킬, 또는 C_{5 - 6}아릴알킬이다.

이때, R⁴와 R⁵는 서로 고리 내 O를 1 이상 함유하는 5-6각 헤테로고리를 이룰 수 있으며, 이 고리에는 -OH 또는 C_{1 - 2}알킬기가 1 이상 치환될 수 있다.

더욱 바람직하게는,

R³은 -H, -OH, =O, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 프로페녹시, 벤질옥시,

,

,

, =N-OH, =N-OMe 또는 =N-OBn이고,

R⁴는 -OH, 메톡시, 프로페녹시, 벤질옥시, 에세테이트 또는 R⁵와 함께 서로 고리 내 O를 1개 함유하는 6각 헤테로고리를 형성하며, 이 고리에는 -OH 또는 C_{1 - 2}알킬기가 1 이상 치환될 수 있고,

R⁵는

또는 R⁴와 함께 서로 고리 내 O를 1개 함유하는 6각 헤테로고리를 형성하며, 이 고리에는 -OH 또는 C_{1 - 2}알킬기가 1 이상 치환될 수 있고,

상기 R⁴와 R⁵가 형성하는 고리는

,

또는

이다.

상기 화학식 1의 화합물의 구체적인 예는 아래와 같다.

(6aS,12aS)-9-히드록시-2,3-디메톡시-8-(3-메틸-2-부테닐)-6a,12a-디히드로크로메노[3,4-b]크로멘-12(6H)-온,

(7aS,13aS)-9-히드록시-13,13a-디히드로-10-메톡시-3,3-디메틸-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온,

(7aS,13aS)-10-히드록시-13,13a-디히드로-9-메톡시-3,3-디메틸-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온,

(7aS,13aS)-13,13a-디히드로-9,10-디히드록시-3,3-디메틸-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온,

9,10-디메톡시-3,3-디메틸-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7-(13H)-온,

(7S,7aR,13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7-올,

(7aS,13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘,

(7S,7aR,3aS)-7,9,10-트리메톡시-3,3-디메틸-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘,

(7S,7aR,3aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-7-에톡시-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘,

(7S,7aR,3aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-7-프로폭시-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘,

(7S,7aR,3aS)-7-벤질옥시-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘,

(7S,7aS,13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-7-(테트라히드로-2H-피란-2-일록시)-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘,

(7S,7aS,13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3,h]크로멘-7-일 아세테이트,

(7S,7aS,13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7-일 카바메이트,

(13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-13,13a-디히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘,

(7aR,13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-13,13a-디히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 옥심,

(7aR,13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-13,13a-디히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 O-메틸옥심,

(7aR,13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-13,13a-디히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 O-벤질옥심,

(7aS,13aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-2,3,13,13a-테트라히드로-1H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온,

(7aS,13aS)-1,2-디히드록시-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-2,3,13,13a-테트라히드로-1H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온,

2,3,9-트리메톡시-8-(3-메틸-부트-2-에닐)-6a,12a-디히드로-6H-크로메노[3,4-b]크로멘-12-온,

9-아릴옥시-2,3-디메톡시-8-(3-메틸-부트-2-에닐)-6a,12a-디히드로-6H-크로메노[3,4-b]크로멘-12-온,

9-벤질옥시-2,3-디메톡시-8-(3-메틸-부트-2-에닐)-6a,12a-디히드로-6H-크로메노[3,4-b]크로멘-12-온,

아세트산 2,3-디메톡시-8-(3-메틸-부트-2-에닐)-12-옥소-6,6a,12,12a-테트라히드로크로메노[3,4-b]크로멘-9-일 에스테르, 및

(7S,7aR,3aS)-9,10-디메톡시-3,3-디메틸-7-(프롭-2-엔-옥시)-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘.

또한, 본 발명은 하기 화학식 2로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.

상기 화학식 2에서,

R^a는

또는

이고,

R^b는 -H, -OH 또는 C_{1 - 3}알콕시이고,

R^c 및 R^d는 서로 독립적으로 -H, C_{1 - 3}직쇄 또는 측쇄 알킬이고,

R^e는 서로 독립적으로 -H 또는 C_{1 - 3}알콕시이고,

X는

, -NH- 또는 C_{1 - 3}알킬 또는 알케닐이고, 및

Y는 -H, C_{1 - 3}알킬 또는 알케닐,

,

,

,

,

,

, -NH-,

,

또는 -SO₂Ph이다.

*이때, R^a와 R^b는 서로 고리 내 O를 1 이상 함유하는 5-8각 헤테로고리를 이룰 수 있으며, 이 고리에는 옥소 또는 디메톡시페닐기가 1 이상 치환될 수 있다.

또한,

는 단일결합 또는 이중결합이다.

바람직하게는,

상기 R^a는

또는

이고,

R^b는 -H, -OH 또는 C_{1 - 2}알콕시이고,

R^c 및 R^d는 서로 독립적으로 -H, C_{1 - 2}직쇄 또는 측쇄 알킬이고,

R^e는 서로 독립적으로 -H 또는 C_{1 - 2}알콕시이고,

X는

, -NH- 또는 C_{1 - 2}알킬 또는 알케닐이고, 및

Y는 -H, C_{1 - 2}알킬 또는 알케닐,

,

,

,

,

,

, -NH-,

,

또는 -SO₂Ph이다.

*이때, R^a와 R^b는 서로 고리 내 O를 1 이상 함유하는 5-6각 헤테로고리를 이룰 수 있으며, 이 고리에는 옥소 또는 디메톡시페닐기가 1 이상 치환될 수 있다.

*더욱 바람직하게는,

상기 R^a는

,

,

,

,

,

,

,

,

또는 R^b와 서로 고리 내 O를 1개 함유하는 6각 헤테로고리를 형성하며, 이 고리에는 옥소 및 디메톡시페닐기가 각각 하나씩 치환될 수 있고,

R^b는 -H, -OH, 메톡시 또는 R^a와 서로 고리 내 O를 1개 함유하는 6각 헤테로고리를 형성하며, 이 고리에는 옥소 및 디메톡시페닐기가 각각 하나씩 치환될 수 있고,

상기 고리는

또는

이다.

상기 화학식 2의 화합물의 구체적인 예는 다음과 같다.

(3S)-3-(3,4-디메톡시페닐)-8,8-디메틸-2,3-디히드로-4H,8H-피라노[2,3-f]크로멘-4-온,

(6,7-디메톡시크로만-4-일)(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)메타논,

2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)에타논,

2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)에타논,

2-(3,4-디메톡시페닐-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온

2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-2-메틸프로판-1-온,

2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온,

1-(3,4-디메톡시페닐)시클로프로필)(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)메타논,

(S)-2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온,

(R)-2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온,

3-(3,4-디메톡시페닐)-8,8-디메틸-4H,8H-피라노[2,3-f]크로멘-4-온,

6,7-디메톡시-2H-크로멘-4-일(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)메타논,

6,7-디메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-4-일)(4-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)메타논,

6,7-디메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-4-일)(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)메타논,

6,7-디메톡시-2H-크로멘-4-일)(4-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)메타논,

2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-2-(페닐설포닐)에타논,

(3,4-디메톡시페닐)(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)메타논,

(E)-1-(3,4-디메톡시페닐)-3-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온,

(E)-3-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온,

(E)-3-(3,4-디메톡시페닐)-1-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온,

(E)-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-3-(2,4,5-트리메톡시페닐)프롭-2-엔-1-온,

(E)-3-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온,

(E)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-3-(2,4,5-트리메톡시페닐)프롭-2-엔-1-온,

2-(3,4-디메톡시페닐)-8,8-디메틸-4H,8H-피라노[2,3-f]크로멘-4-온,

2-(3,4-디메톡시페닐)-N-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)아세트-아미드,

N-(3,4-디메톡시벤질)-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-카복사미드,

N-(3,4-디메톡시페닐)-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-카복사미드,

N-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-3,4-디메톡시벤즈아미드,

(R)-2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온,

(S)-2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온.

본 발명에 따른 화학식 1 및 화학식 2의 신규한 데구엘린 유도체의 구체적인 예를 하기 표 1에 정리하였다.

화합물	구조
데구엘린 (Deguelin)
화합물 8
화합물 9
화합물 10
화합물 11
화합물 12
화합물 13
화합물 14
화합물 15
화합물 16
화합물 17
화합물 18
화합물 19
화합물 20
화합물 21
화합물 22
화합물 23
화합물 24
화합물 25
화합물 26
화합물 27
화합물 28
화합물 29
화합물 30
화합물 31
화합물 37
화합물 45
화합물 53
화합물 54
화합물 56
화합물 57
화합물 58
화합물 59
화합물 69
화합물 72
화합물 80
화합물 81
화합물 82
화합물 83
화합물 84
화합물 86
화합물 87
화합물 88
화합물 89
화합물 90
화합물 91
화합물 92
화합물 93
화합물 94
화합물 95
화합물 96
화합물 97
화합물 98
화합물 99
화합물 100
화합물 101

*본 발명은 상기 화학식 1 및 화학식 2로 표시되는 신규한 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 가능한 용매화물, 수화물 또는 프로드럭을 모두 포함한다.

본 발명의 화학식 1 및 화학식 2로 표시되는 신규한 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산 또는 아인산과 같은 무기산류와 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류와 같은 무독성 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트 또는 만델레이트를 포함한다.

본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면, 화학식 1 및 화학식 2로 표시되는 신규한 화합물을 과량의 산 수용액 중에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조할 수 있다. 동량의 화학식 1 및 화학식 2로 표시되는 신규한 화합물 및 물 중의 산 또는 알코올을 가열하고, 이어서 이 혼합물을 증발시켜서 건조시키거나 또는 석출된 염을 흡입 여과시켜 제조할 수도 있다.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 은염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.

본 발명에 따른 신규한 데구엘린 유도체는[(a) Caboni, P.; Sherer, T.; Zhang, N.; Taylor, G.; Na, H.; Greenamyre, J.; Casida, J. Rotenone, deguelin, their metabolites, and the rat model of Parkinson's disease. Chem . Res . Toxicol 2004, 17, 1540-1548; (b) Anzeveno, P. Rotenoid interconversion. Synthesis of deguelin from rotenone. J. Org . Chem . 1979, 44, 2578-2580]에 공지된 방법으로 제조될 수 있으나 이에 제한되지 않으며, 이외에 이미 공지된 방법뿐만 아니라 미공지된 방법이라도 상기 신규한 데구엘린 유도체를 합성할 수 있는 방법이라면 사용할 수 있다.

상기와 같이 본 발명에 따라 제조된 신규한 데구엘린 유도체는 제조 후, 고속 액체크로마토그래피로 분리 정제한 후 핵자기 공명에 의해 분자구조를 확인할 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 화학식 1 및 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 화학식 1 및 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염은 Hsp90 발현을 억제하여 Hsp90 클라이언트 단백질인 HIF-1α 단백질의 축적을 저해하고 신생 혈관 생성 인자(VEGF)의 활성을 효과적으로 저해한다. 상기 HIF-1α 활성 저해는 HIF-1α 단백질 축적 저해 또는 HIF-1α 표적 유전자 단백질의 발현을 저해하는 일련의 현상을 모두 포함한다.

본 발명에 따른 화학식 1 및 화학식 2의 화합물의 HIF-1α의 축적 저해 실험 결과, 본 발명에 따른 화합물은, 저산소 조건에서 비교군인 튜블린(Tublin)의 생성에는 영향을 주지 않으면서 농도의존적으로 HIF-1α 축적을 저해하는 것으로 나타났다. 특히, 본 발명에 따른 실시예 6의 화합물 14는 종래의 물질인 데구엘린(Deguelin)보다 HIF-1α 축적 저해 IC₅₀ 값이 약 10배 이상 뛰어난 것으로 나타났다(표 2 및 도 1 참조).

또한, 본 발명에 따른 화학식 1 및 화학식 2의 화합물의 화합물은, HIF-1α의 표적 유전자들 중 암의 증식과 전이에 기여하는 것으로 알려져 있는, 암의 성장 및 암이 다른 조직으로 전이하는데 있어서 중요한 신생 혈관 생성 인자인 VEGF(Vascular endothelial growth factor A)의 발현을 농도 의존적으로 저해하는 것으로 나타났다(도 2 ~ 도 4 참조).

따라서, 본 발명의 화학식 1 및 화학식 2의 화합물은 Hsp90 발현을 억제하여 Hsp90 클라이언트 단백질인 HIF-1α 단백질의 축적을 저해하고 신생 혈관 생성 인자(VEGF)의 활성을 효과적으로 저해하므로, 대장암, 간암, 위암, 유방암, 결장암, 골암, 췌장암, 두부 또는 경부 암, 자궁암, 난소암, 직장암, 식도암, 소장암, 항문부근암, 결장암, 나팔관암종, 자궁내막암종, 자궁경부암종, 질암종, 음문암종, 호지킨병, 전립선암, 방광암, 신장암, 수뇨관암, 신장세포암종, 신장골반암종, 중추신경계 종양 등의 다양한 암 치료제로 사용될 수 있다.

나아가, 본 발명은 상기 화학식 1 및 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 함유하는 Hsp90 억제를 통하여 당뇨병성 망막증 또는 관절염에 치료 효과를 나타내는 약학적 조성물을 제공한다.

Hsp90은 혈관 신생작용의 활성화가 질환의 악화와 관련되는 질환의 치료제 개발에 표적으로 이용될 수 있다. 특히, 저산소 상태에서 활성화되는 Hsp90의 클라이언트 단백질인 HIF-1α에 의해 유발되는 VEGF와 같은 혈관 신생 인자들은 당뇨병성 망막증 또는 류마티스성 관절염의 진전과 관련되어 있다. 따라서, 질환 조직의 저산소 상태로부터 활성화되는 HIF-1α을 저해하는 화합물은 당뇨병성 망막증 또는 관절염의 치료제로 활용되는 것이다.

본 발명의 화학식 1 및 화학식 2의 화합물은 줄무늬물고기(Zebrafish) 배아의 혈관 생성을 억제하는 효과가 뛰어난 것으로 나타났다(도 2 ~ 도 4 참조).

따라서, 신생 혈관 생성 인자인 VEGF(Vascular endothelial growth factor A)의 발현을 선택적으로 저해할 수 있으므로, 저산소 상태에서 HIF-1α에 의한 VEGF의 발현이 증가되어 악화되는 당뇨병성 망막증 또는 관절염 치료제의 유효성분으로 사용될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 다양한 경구 또는 비경구투여 형태로 제형화할 수 있다. 경구투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경/연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제, 엘릭시르제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/ 또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/또는 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 정제는 또한 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제를 함유할 수 있다.

본 발명에 따른 화학식 1 및 화학식 2의 화합물을 유효성분으로 하는 약학 조성물은 비경구투여할 수 있으며, 비경구투여는 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사 또는 흉부내 주사를 주입하는 방법에 의한다. 이때, 비경구투여용 제형으로 제제화하기 위하여 상기 화학식 1 및 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 안정제 또는 완충제와 함께 물에 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알 단위 투여형으로 제조할 수 있다. 상기 조성물은 멸균되고/되거나 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제제화할 수 있다. 유효성분으로서 화학식 1 및 화학식 2의 화합물은 사람을 포함하는 포유동물에 대해서 하루 0.1 내지 500mg/kg(체중), 바람직하게는 0.5 내지 100mg/kg(체중)의 양으로 1일 1회 또는 분할하여 경구 또는 비경구 경로를 통해 투여할 수 있다.

본 발명의 조성물은 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 더욱 상세하게 설명한다. 단, 하기의 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 이에 한정되는 것은 아니다.

< 제조예 1> 메틸 2-(3,4- 디메톡시페닐 )아세테이트 ( Methyl 2-(3,4-dimethoxyphenyl)acetate) (32)의 제조

카복시산(1 당량)과 무수 DMF(촉매량)를 무수 CH₂Cl₂(0.1 M)에 용해시키고 0 ℃까지 냉각시킨 다음, 옥살산 (3 당량)을 한 방울씩 첨가하였다. 상온에서 30분간 교반 후, 무수 메탄올(50 당량)을 한 방울씩 가하고 10분 동안 교반하였다. 다음으로, 혼합물을 물로 처리하고, 수성층을 CH₂Cl₂로 추출하고 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여 화합물 32를 얻었다.

1H NMR (CDCl3, 300MHz) δ6.79 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.54 (s, 2H).

< 제조예 2> 메틸 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-3-(4- 메톡시벤질옥시 ) 프로파노에이트 (Methyl 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-3-(4-methoxybenzyloxy)propanoate) (33)의 제조

제조예 1에서 제조한 화합물 32(500 mg, 2.38 mmol) 와 파라포름알데히드(76 mg, 2.50 mmol)를 무수 DMSO(5.0 mL)에 용해시키고 소디움 메톡사이드(6.8 mg, 0.12 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 24시간 동안 상온에서 교반한 다음, 얼음물(10 mL)에 부어 교반시키면서 2N-염산 수용액으로 중화하고, 물에 붓고 EtOAc(×3)로 추출하였다. 유기층을 포화 소금물 수용액으로 1회 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 실리카 겔 용리 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:1)로 정제하여 알돌 생성물을 옅은 노란색 고체로 얻었다(수율 58%, 331mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300MHz) δ6.74 (m, 3H), 4.05 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.73 (m, 2H), 3.65 (s, 3H)

상기에서 얻은 알돌 생성물(36 mg, 0.15 mmol)이 들어있는 무수 CH₂Cl₂(1.0 mL) 용액에 p-메톡시벤질 2,2,2-트리클로로아세트아미데이트(84 mg, 0.30 mmol) 및 CSA의 촉매량을 상온에서 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 아르곤 분위기하에서 하루 밤 동안 교반하고 여과하고 남은 필터 케이크를 CH₂Cl₂로 세척하였다. 상기에서 여과된 액체는 포화 NaHCO₃ 용액 및 염수로 추출한 것이다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 제조예 2의 화합물 33을 흰색 고체로 얻었다(수율 100%, 54 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500MHz) δ7.19 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 6.84 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 6.78 (m, 3H), 4.46 (AB quartet, 2H, J = 33.4, 11.7 Hz), 3.98 (m, 1H), 3.83 (s, 6H), 3.80 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.67 (s, 3H)

< 제조예 3> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-3-(4- 메톡시벤질옥시 ) 프로파날 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-3-(4-methoxybenzyloxy)propanal) (34)의 제조

제조예 2에서 얻은 화합물 33(20 mg, 0.055 mmol)을 무수 THF(1.0 mL)에 용해시키고, 메탄올(0.06 mmol, 1.1 당량)로 처리한 다음 -78 ℃까지 냉각시키고 DIBAL-H(0.16 mL, 0.16 mmol)을 천천히 가하였다. 상기 반응 혼합물을 TLC로 모니터링하며, 반응이 완료될 때까지 -78 ℃에서 교반하였다. 로쉘(Rochelle) 수용액을 15분 동안 조심스럽게 첨가하고 두 층의 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 강하게 교반한 다음, 물에 부었다. 수성층을 EtOAc(×2)로 추출하고 유기층을 무수 NaSO₄로 추출하고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4에서 1:1)로 정제하여, 1차 알콜을 얻었다. (수율 88%, 16 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ 7.21 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 6.85 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 6.77 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.73 (m, 2H), 4.46 (s, 2H), 3.93 (m, 1H), 3.83 (s. 6H), 3.81 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.72 (m, 2H), 3.10 (quin, 1H, J = 6.5 Hz); HRMS (FAB) Calcd for C₁₉H₂₄O₅(M+H⁺):332.1624, Found: 332.1628.

상기에서 얻은 1차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(2.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 제조예 3의 화합물 34를 얻었다(수율 71%, 11 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300MHz)δ9.66 (d, 1H, J = 1.65 Hz), 7.14 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.78 (m, 3H), 6.66 (m. 2H), 4.40 (d, 2H, J = 3.5 Hz), 3.99 (dd, 1H, J = 6.9, 6.9 Hz), 3.80 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.70 (m, 2H).

< 제조예 4> ( S )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)-3-(4-메톡시벤질옥시)프로판-1-온 ((S)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)-3-(4-methoxybenzyl oxy)propan-1-one) (35)의 제조

아릴 브로마이드(1.5 당량)이 들어있는 무수 THF 용액에 n-BuLi(1.4 당량)을 -78 ℃에서 한 방울씩 첨가하고 -78 ℃에서 교반함으로써 아릴 음이온을 생성시켰다. -78 ℃에서 20분간 교반한 후에, 알데히드(1.0 당량)를 첨가하고 30분간 계속 교반하며 반응온도가 상온이 되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 수용액으로 처리하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 추출물을 염수로 세척하고 MgSO4로 건조시키고 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 2차 알콜을 얻었다(수율 72%, 34 mg).

HRMS (FAB) Calcd for C₃₁H₃₆O₇ (M+H⁺): 543.2359, Found: 543.2365.

상기에서 얻은 2차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 제조예 4의 화합물 35를 얻었다(수율 84%, 26 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.34 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 7.11 (d, 2H, J = 8.6 Hz), 6.73 (m, 5H), 6.50 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.45 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.57 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.83 (dd, 1H, J = 8.9, 5.1 Hz), 4.39 (q, 2H, J = 11.5 Hz), 4.12 (t, 1H, J = 9.1 Hz), 3.75 (s, 6H), 3.71 (s, 1H), 3.57 (dd, 1H, J = 9.1, 5.1 Hz), 3.52 (s, 3H), 1.34 (s, 6H); HRMS (FAB) Calcd for C₃₁H₃₄O₇(M+H⁺): 519.2383, Found: 519.2373.

< 제조예 5> ( S )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )-3-히드록시-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온 ((S)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-3-hydroxy-1-(5-hydroxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)propan-1-one) (36)의 제조

10 mL 둥근 바닥 플라스크에 제조예 4에서 얻은 화합물 35(23 mg, 0.044 mmol) 및 CH₂Cl₂(1.0 mL)을 넣고 가열 건조하였다. 상기 용액을 -78 ℃까지 냉각시키고, 보론 트리클로라이드(0.16 mL, 0.16 mmol, CH₂Cl₂ 중 1.0 M 용액)를 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 후에, 반응을 포화 NH₄Cl 수용액으로 식히고 CHㅁCl₂로 추출하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 제조예 5의 화합물 36을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 75%, 12 mg).

HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₄O₆ (M+H⁺): 384.1573, Found: 384.1570.

< 제조예 6> 메틸 2-(2- 브로모 -4,5- 디메톡시페닐 )아세테이트 ( methyl 2-(2-bromo-4,5-dimethoxyphenyl)acetate) (38)의 제조

N-브로모숙시니미드(449 mg, 2.50 mmol)를 -78 ℃의 제조예 1에서 얻은 화합물 32(500 mg, 2.38 mmol)이 들어있는 무수 THF(12.0 mL) 용액에 부었다. 상기 반응 혼합물을 -78 ℃에서 30분간 교반하고 반응온도가 상온이 되도록 하고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 제조예 6의 화합물 38을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 96%, 660 mg).

¹H NMR (CDCl₃,300MHz)δ6.96 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 3.79 (s, 6H), 3.62 (s, 2H).

< 제조예 7> 메틸 2-(2- 브로모 -4,5- 디메톡시페닐 ) 펜트 -4- 에노에이트 ( methyl 2-(2-bromo-4,5-dimethoxyphenyl)pent-4-enoate) (39)의 제조

제조예 6에서 얻은 화합물 38(150 mg, 0.52 mmol)을 -78 ℃에서 무수 THF(6.0 mL)에 용해시키고, LHMDS(0.63 mL, 0.93 mmol, THF 중 1.0 M 용액)를 한 방울씩 가하였다. 20분간 교반 후, 알릴 브로마이드(0.044 mL, 0.52 mmol)를 한 방울씩 가한 후, 1시간 동안 교반하고 -40 ℃로 가온하였다. 상기 혼합물을 포화 NH₄Cl 수용액(5.0 mL)으로 처리하고 물(5.0 mL)에 부었다. EtOAc(2×15 mL)로 수성층을 추출하고 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:8)로 정제하여, 제조예 7의 화합물 39를 얻었다. (수율 53%, 90 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300MHz)δ6.94 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 5.68 (m, 1H), 4.98 (m, 1H), 4.11 (dd, 1H, J = 8.2, 7.2 Hz), 3.78 (s, 6H), 3.61 (s, 3H), 2.69 (m, 1H), 2.42 (m, 1H).

< 제조예 8> 1-(1-( 벤질옥시 ) 펜트 -4-엔-2-일)-2- 브로모 -4,5- 디메톡시벤젠 (1-(1-(Benzyloxy)pent-4-en-2-yl)-2-bromo-4,5-dimethoxybenzene) (40)의 제조

제조예 7에서 얻은 화합물 39(84 mg, 0.25 mmol)를 무수 THF(2.0 mL)에 용해시키고, 0 ℃로 냉각시켰다. 리튬 알루미늄하이드라이드(10 mg, 0.25 mmol)를 가하고 상온에서 반응이 종료될 때까지 1시간 동안 교반한 후, 0 ℃까지 냉각시키고 30분 동안 NaHCO₃(포화 수용액)를 조심스럽게 가하였다. 두 상의 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 강하게 교반한 다음, 물에 부었다. 수성층을 EtOAc(×2)로 추출하고 유기층을 NaSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:6)로 정제하여, 일차 알콜을 얻었다(수율 88%).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500zMHz) δ 7.01 (s, 1H), 6.73 (s, 1H), 5.73 (m, 1H), 5.03 (d, 1H, J = 17.1 Hz), 4.97 (d, 1H, J = 10.1 Hz), 3.84 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.77 (d, 2H, J = 5.7 Hz), 3.41 (quin, 1H, J = 7.1 Hz), 2.50 (quin, 1H, J = 7.1 Hz), 2.37 (quin, 1H, J = 7.1 Hz).

상기 일차 알콜(400 mg, 1.33 mmol)이 들어있는 무수 THF(7.0 mL) 용액에 0 ℃에서 소듐 하이드라이드(64 mg, 1.59 mmol, 미네랄 오일 중 60 %)를 첨가하고 상온에서 30분간 교반하였다. 테트라부틸 암모늄 브로마이드(23 mg, 0.066 mmol) 및 벤질 브로마이드(0.19 ml, 0.59 mmol)를 첨가하고 혼합물을 상온에서 하루 밤 동안 교반하였다. 혼합물을 포화 NH₄Cl(5.0 mL) 용액으로 처리하고, EtOAc(10 mL×2)로 추출하고, 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:8)로 정제하여, 제조예 8의 화합물 40을 무색 고체로 얻었다(수율 86%, 448 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.23 (m, 5H), 6.94 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 5.65 (m, 1H), 4.93 (m, 2H), 4.43 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.53 (m, 3H), 2.53 (m, 1H), 2.30 (m, 1H); HRMS (FAB) Calcd for C₂₀H₂₃BrO₃ (M+H⁺): 390.0831, Found: 390.0839.

< 제조예 9> 4-( 벤질옥시 )-3-(2- 브로모 -4,5- 디메톡시페닐 )부탄-1-올 (4-(Benzyloxy)-3-(2-bromo-4,5-dimethoxyphenyl)butan-1-ol) (41)의 제조

제조예 8에서 얻은 화합물 40(252 mg, 0.64 mmol)에 NMO(233 mg, 1.93 mmol)를 첨가하고 0 ℃에서 아세톤:물(4:1, 25 mL) 용액에 용해시켰다. 상기 혼합물에 OsO₄(0.32 mL, 0.032 mmol, 톨루엔 중 0.1 M 용액)를 첨가하고 상온에서 6시간 동안 교반한 다음, EtOAc(3×15 mL)로 추출하고, 소듐 설파이트 포화용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 용매를 제거하여 얻은 미정제 생성물을 아세톤:물(4:1, 25 mL) 용액에 용해시키고, 상온에서 교반한 다음, NaIO₄(413 mg, 1.93 mmol)를 천천히 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 30분간 교반하고 EtOAc(3×15 mL)로 추출하고, 티오황산나트륨 포화용액으로 세척하고, 감압하에 용매를 제거하여, 미정제 알데히드를 얻었다. 상기 미정제 알데히드를 별도의 정제 과정없이 다음 단계에 사용하였다.

상기에서 얻은 미정제 알데히드(0.64 mmol)가 들어있는 메탄올(6.0 mL)에 -100 ℃에서 소듐 보로하이드라이드(49 mg, 1.29 mmol)를 첨가하고 1시간 동안 온도를 유지시켰다. 혼합물을 NH₄Cl 포화 수용액으로 식히고, EtOAc로 추출하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:1)로 정제하여, 제조예 9의 화합물 41을 무색 고체로 얻었다(수율 73%, 184 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.23 (m, 5H), 6.94 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.54 (m, 4H), 2.01 (m, 2H), 1.81 (m, 1H); HRMS (FAB) Calcd for C₁₉H₂₃BrO₄ (M+H⁺): 394.0780, Found: 394.0774.

< 제조예 10> 4-( 벤질옥시메틸 )-6,7- 디메톡시크로만 (4-( Benzyloxymethyl )-6,7-dimethoxychroman) (42)의 제조

제조예 9에서 얻은 화합물 41(379 mg, 0.96 mmol) 및 소듐 t-부톡시드(124 mg, 1.25 mmol)를 아르곤 분위기하에서 Pd₂(dba)₃(13 mg, 0.0143 mmol) 및 2-(디-t-부틸포스피노)비페닐(7.0 mg, 0.024 mmol)을 함유하는 톨루엔(10 mL)이 들어있는 열 건조한 2목 둥근 바닥 플라스크에 가하였다. 상기 반응을 50~55 ℃로 하루 밤 동안 가열하고 상온으로 냉각시키고, EtOAc(10 mL)로 희석시키고, 셀라이트로 여과하고, 감압하에 용매를 제거하여 얻은 진노랑색의 미정제 생성물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:6)로 정제하여, 제조예 10의 화합물 42을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 75%, 226 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.24 (m, 5H), 6.61 (s, 1H), 6.30 (s, 1H), 4.48 (q, 2H, J = 11.9 Hz), 4.03 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.54 (m, 4H), 2.39 (m, 1H), 1.95 (m, 2H); HRMS (FAB) Calcd for C₁₉H₂₂O₄ (M+H⁺): 314.1518, Found: 314.1518.

< 제조예 11> 6,7- 디메톡시크로만 -4- 카발데히드 (6,7- Dimethoxychroman -4-carbaldehyde (43)의 제조

제조예 10에서 얻은 화합물 42(191 mg, 0.61 mmol) 및 20% Pd(OH)₂/C(38 mg)이 들어있는 메탄올(5 mL) 혼합물을 상온의 수소 분위기하에서 5시간 동안 교반하였다. 상기 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 메탄올(10 mL)로 세척하고, 감압하에 메탄올을 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:1)로 정제하여, 일차 알콜을 얻었다(수율 100%, 158 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ6.61 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 4.08 (m, 2H), 3.78 (m, 2H), 3.74 (s, 6H), 2.85 (m, 1H), 1.98 (m, 2H); LRMS (FAB) m/z 225 (M+H⁺).

상기에서 얻은 일차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 제조예 11의 화합물 43을 얻었다(수율 60%, 15 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ9.67 (d, 1H, J = 1.8 Hz), 6.58 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 4.13 (m, 3H), 3.81 (s, 6H), 2.32 (m, 1H), 2.06 (m, 1H).

< 제조예 12> (6,7- 디메톡시크로만 -4-일)(2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)메탄올 ((6,7-Dimethoxychroman-4-yl)(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)methanol (44)의 제조

6-브로모-2,2-디메틸-2H-크로멘(1.5 당량)이 들어있는 무수 THF 용액에 n-BuLi(1.4 당량)을 -78 ℃에서 한 방울씩 첨가하고 -78 ℃에서 교반함으로써 아릴 음이온을 생성시켰다. -78 ℃에서 20분간 교반한 후에, 제조예 11에서 얻은 화합물 43(1.0 당량)을 첨가하고 30분간 계속 교반하며 반응온도가 상온이 되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 수용액으로 처리하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 추출물을 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조시키고 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 제조예 12의 화합물 44를 얻었다(수율 75%, 18 mg).

*HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₆O₅ (M+H⁺): 382.1780, Found: 382.1793.

< 제조예 13> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )아세트알데히드 (2-(3,4- Dimethoxyphenyl ) acetaldehyde) (52)의 제조

메틸 3',4'-디메톡시페닐 아세테이트(1.94 g, 9.24 mmol)가 들어있는 무수 디에틸 에테르 용액을 교반하며 DIBAL-H(11.1 mL, THF 중 1 M 용액)를 -78 ℃를 유지하며 한 방울씩 첨가하고 같은 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 로쉘(Rochelle) 수용액을 15분간 조심스럽게 첨가하고 두 상의 혼합물을 0 ℃에서 1시간 동안 강하게 교반한 다음, 물에 부었다. 수성층을 EtOAc(×2)로 추출하고, 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 제조예 13의 화합물 52를 얻었다(수율 68%, 1.13 g).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ9.66 (t, 1H, J = 2.5 Hz), 6.80 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 6.68 (m, 1H), 6.64 (d, 1H, J = 1.8 Hz), 3.81 (s. 6H), 3.56 (d, 1H, J = 2.5 Hz).

< 제조예 14> 2-(3,4- 디메톡시페닐 ) 프로파날 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)propanal) (55)의 제조

메틸 3',4'-디메톡시페닐 아세테이트(4.76 g, 22.63 mmol)가 들어있는 무수 THF(5 mL) 용액에 -78 ℃의 아르곤 분위기하에서 LDA(18.1 mL, 36.21 mmol, THF 중 2 M 용액)를 한 방울씩 첨가하고 같은 온도에서 상기 혼합물을 30분간 교반하였다. 다음으로, 메틸 아이오다이드(2.82 mL, 45.26 mmol)를 첨가하고 혼합물을 1시간 교반하였다. 상기 반응 혼합물에 2N-HCl 수용액을 첨가하여 산성화하고 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 제조예 14의 화합물 55를 무색 오일로 얻었다(수율 79%, 4.01 g).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ6.80 (m, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.64 (q, 1H, J=7.1 Hz), 3.63 (s, 3H), 1.46 (d, 1H, J = 7.1 Hz); ¹³C NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ175.7, 148.9, 148.1, 133.0, 119.5, 111.2, 110.6, 55.8, 51.9, 44.9, 18.6.

< 제조예 15> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )프로판산 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)propanoic acid) (64)의 제조

*

화합물 63(400mg, 1.78 mmol)이 들어있는 THF/물(2/1, 9.0 mL) 용액에 히드록사이드 모노히드레이트(230 mg, 5.35 mmol)를 상온에서 첨가하고 5시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 EtOAc(×2)로 추출하고, 유기층을 2N-NaOH 수용액으로 염기화하였다. 수성층은 2N-HCl 수용액으로 산성화하고 EtOAc(×2)로 추출하고 유기층을 염수로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 생성물을 제조예 16 및 17에 사용하였다.

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ6.83 (m, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.66 (q, 1H, J=7.3 Hz), 1.48 (d, 3H, J=7.3 Hz).

< 제조예 16~17> ( S )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )- N -(( R )-2-히드록시-1- 페닐에틸 ) 프로판아미드 ((S)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-N-((R)-2-hydroxy-1-phenylethyl) propanamide) (65) 및

( R )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )- N -(( R )-2-히드록시-1- 페닐에틸 ) 프로판아미드 ((R)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-N-((R)-2-hydroxy-1-phenylethyl)propanamide) (66)의 제조

제조예 15에서 얻은 화합물 64(282 mg, 1.34 mmol)이 들어있는 CH₂Cl₂(10 mL) 용액에 N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카보디미드 히드로클로라이드(EDCI)(287 mg, 1.47 mmol), (R)-(-)-2-페닐글리시놀(207 mg, 1.47 mmol) 및 HOBt(230 mg, 1.47 mmol)를 첨가하였다. 마지막으로, (230 mg, 1.47 mmol). Finally, 디이소프로필에틸아민(0.26 mL, 1.47 mmol)을 0 ℃에서 한 방울씩 첨가하였다. 반응 혼합물을 상온에서 하루 밤 동안 교반하고, NH₄Cl 포화 수용액으로 반응을 종료시키고, CH₂Cl₂로 희석하였다. 유기층을 물로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc: CH₂Cl₂:n-헥산=3:2:1)로 정제하여, 제조예 16의 화합물 65(수율 42%, 187 mg) 및 제조예 17의 화합물 66(수율 42%, 186 mg)을 연노랑색 고체로 얻었다.

( S )- Diastereomer (65): ¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.26 (m, 3H), 7.03 (m, 2H), 6.81 (m, 2H), 6.73 (s, 1H), 6.05 (m, 1H), 5.02 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.80 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.58 (q, 1H, J = 7.1 Hz) 1.48 (d, 3H, J = 7.1 Hz);

( R )- Diastereomer (66): ¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.23 (m, 3H), 7.10 (m, 2H), 6.78 (m, 3H), 5.97 (m, 1H), 4.96 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.72 (d, 2H, J = 5.0 Hz), 3.50 (q, 1H, J = 7.1 Hz) 1.46 (d, 3H, J = 7.1 Hz).

< 제조예 18> ( S )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )프로판산 (( S )-2-(3,4-Dimethoxyphenyl) propanoic acid (67)의 제조

제조예 16에서 얻은 화합물 65(186 mg, 0.56 mmol)가 들어있는 1,4-디옥산(5.0 mL) 용액에 설폰산 수용액(5.0 mL, 물 중 4.0 M)을 0 ℃에서 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 2시간 동안 환류시키고, 상온으로 냉각하여 EtOAc로 희석시키고, 유기층을 물로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 화합물 67을 갈색 오일로 얻었다(수율 100%, 117 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ6.83 (m, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.67 (q, 1H, J = 7.1 Hz), 1.47 (d, 3H, J=7.1 Hz).

< 제조예 19> ( S )-2-(3,4- 디메톡시페닐 ) 프로파날 (( S )-2-(3,4-Dimethoxyphenyl) propanal (68)의 제조

제조예 17에서 얻은 화합물 67(115 mg, 0.55 mmol)이 들어있는 무수 디에틸 에테르(8.0 mL) 용액을 0 ℃로 냉각시키고, BH₃·SMe₂ 착물(1.5 mL, 3.00 mmol)을 한 방울씩 첨가하였다. 상기 용액을 0 ℃에서 1시간 교반한 다음, 상온에서 3시간 동안 더 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 물을 한 방울씩 가하여 반응을 종료시켰다. 수소 가스 기포가 더 이상 관찰되지 않을 때, 2N-NaOH 수용액을 한 방울씩 가하였다. 수성층을 에테르(×2)로 추출하고 에테르층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 1차 알콜을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 85%, 104 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ6.78 (m, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.66 (m, 2H), 2.88 (sex, 1H, J = 6.9 Hz), 1.24 (d, 3H, J = 6.9 Hz).

상기에서 얻은 1차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 제조예 19의 화합물 68을 얻었다(수율 81%, 21 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ9.63 (d, 1H, J = 1.5 Hz), 6.86 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.74 (dd, 1H, J = 8.2, 2.0 Hz), 6.66 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 3.86 (s, 6H), 3.55 (q, 1H, J = 7.1 Hz), 1.40 (d, 3H, J = 7.1 Hz).

< 제조예 20> ( R )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )프로판산 (( R )-2-(3,4-Dimethoxyphenyl) propanoic acid) (70)의 제조

제조예 17에서 얻은 화합물 66(217 mg, 0.66 mmol)이 들어있는 1,4-디옥산(5.6 mL) 용액에 설폰산 수용액(5.6 mL, 물 중 4.0 M)을 0 ℃에서 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 2시간 동안 환류시키고, 상온으로 냉각하여 EtOAc로 희석시키고, 유기층을 물로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 화합물 70을 갈색 오일로 얻었다(수율 100%, 138 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ6.83 (m, 3H), 3.86 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.67 (q, 1H, J = 7.1 Hz), 1.47 (d, 3H, J=7.1 Hz).

< 제조예 21> ( R )-2-(3,4- 디메톡시페닐 ) 프로파날 (( R )-2-(3,4-Dimethoxyphenyl) propanal (71)의 제조

제조예 20에서 얻은 화합물 70(115 mg, 0.55 mmol)이 들어있는 무수 디에틸 에테르(10 mL) 용액을 0 ℃로 냉각시키고, BH₃·SMe₂ 착물(1.8 mL, 3.61 mmol)을 한 방울씩 첨가하였다. 상기 용액을 0 ℃에서 1시간 교반한 다음, 상온에서 3시간 동안 더 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 물을 한 방울씩 가하여 반응을 종료시켰다. 수소 가스 기포가 더 이상 관찰되지 않을 때, 2N-NaOH 수용액을 한 방울씩 가하였다. 수성층을 에테르(×2)로 추출하고 에테르층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 1차 알콜을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 81%, 104 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ6.78 (m, 3H), 3.87 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.66 (m, 2H), 2.88 (sex, 1H, J = 6.9 Hz), 1.24 (d, 3H, J = 6.9 Hz).

상기에서 얻은 1차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 제조예 21의 화합물 71을 얻었다(수율 79%, 16 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ9.63 (d, 1H, J = 1.5 Hz), 6.86 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.74 (dd, 1H, J = 8.2, 2.0 Hz), 6.66 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 3.86 (s, 6H), 3.55 (q, 1H, J = 7.1 Hz), 1.40 (d, 3H, J = 7.1 Hz).

< 제조예 22> 4-니트로벤젠-1,3- 디올 (4- Nitrobenzene -1,3- diol ) (46)의 제조

클로로포름:아세트산(2:1 ,270 mL) 혼합용액에 리솔시놀(5.0g, 44.96 mmol)을 용해시키고 질산(3.6 mL)이 들어있는 아세트산(70 mL) 용액을 산온에서 천천히 첨가하고 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)로 반응종료시키고, CH₂Cl₂(100 mL×3)로 추출하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 여과하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4에서 EtOAc:n-헥산:CH₂Cl₂=1:4:2)로 정제하여, 화합물 46을 노랑색 고체로 얻었다(수율 52%, 3.6 g).

¹H NMR (CD₃OD, 300 MHz) δ7.99 (d, 1H, J = 9.1 Hz), 6.43 (m, 2H).

< 제조예 23> 5-(2- 메틸부트 -3-인-2- 일옥시 )-2-니트로페놀 (5-(2- Methylbut -3-yn-2-yloxy)-2-nitrophenol) (47)의 제조

2-메틸-3부틴-2-올((0.36 mL, 3.70 mmol)이 들어있는 아세토니트릴(18 mL) 용액에 DBU(0.63 mL, 4.19 mmol)를 0 ℃에서 첨가한 다음, 트리플루오로아세트 무수물(0.58 mL, 4.19 mmol)을 30분간 한 방울씩 첨가하여 얻은 노랑색 용액을 0 ℃에서 40분간 교반하였다. 다른 플라스크에, 제조예 22에서 얻은 화합물 46(500 mg, 3.22 mmol)이 들어있는 아세토니트릴(18 mL) 용액에 0 ℃에서 DBU(0.63 mL, 4.19 mmol)로 처리한 다음, CuC1₂(8.65 mg, 0.064 mmol)를 첨가하여 얻은 혼합물에 상기에서 제조한 노랑색 용액(2-메틸-3-부틴-2-일 트리플루오로아세테이트)을 0 ℃에서 40분 동안 한 방울씩 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 하루 밤 동안 교반하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 물에 부었다. 수성층을 에틸 아세테이트로 추출하고, 유기층을 1N-HCI, 1N-KOH 및 염수 순서로 연속적으로 세척하였다. 상기 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 화합물 47을 얻었다(수율 45%, 320 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.90 (d, 1H, J = 9.4 Hz), 6.70 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.38 (d, 1H, J = 9.4 Hz), 5.63 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 1.45 (s, 6H); HRMS (FAB) Calcd for C₁₁H₁₁NO₄ (M+H⁺): 206.1181, Found: 206.1186.

< 제조예 24> 2,2-디메틸-6-니트로-2 H - 크로멘 -5-올 (2,2- Dimethyl -6- nitro -2H-chromen-5-ol) (48)의 제조

O-알킬레이티드 페놀(310 mg, 1.40 mmol)이 들어있는 N,N-디에틸아닐린(28 mL) 용액을 TLC로 모니터링하며, 질소 분위기하에서 반응이 완료될 때까지 130 ℃까지 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 얼음물에 붓고 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 2N-HCl 수용액, 2N-소듐 히드록시드 수용액 및 물로 세척하고, MgSO₄로 건조하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:15)로 정제하여, 제조예 24의 화합물 48을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 91%, 281 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.90 (d, 1H, J = 9.4 Hz), 6.70 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.38 (d, 1H, J = 9.4 Hz), 5.63 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 1.45 (s, 6H); HRMS (FAB) Calcd for C₁₁H₁₁NO₄ (M+H⁺): 206.1181, Found: 206.1186.

< 제조예 25> 5- 메톡시 -2,2-디메틸-6-니트로-2 H - 크로멘 (5- Methoxy -2,2-dimethyl-6-nitro-2H-chromene) (49)의 제조

제조예 24에서 얻은 화합물 48(130 mg, 0.59 mmol), 탄산칼륨(244 mg, 1.76 mmol) 및 요오드메탄(0.11 mL, 1.76)이 들어있는 무수 아세톤(7.0 mL)을 55 ℃로 하루 밤 동안 가열하였다. 상기 혼합물을 농축하고, 물로 처리한 다음, EtOAc(×3)로 추출하였다. 상기 추출층을 물로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 화합물 49를 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.77 (d, 1H, J = 8.9 Hz), 6.59 (m, 2H), 5.72 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 3.89 (s, 3H), 1.44 (s, 6H); HRMS (FAB) Calcd for C₁₂H₁₃NO₄ (M+H⁺): 236.0923, Found: 236.0924.

< 제조예 26> 5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-아민 (5- Methoxy -2,2-dimethyl-2H-chromen-6-amine) (50)의 제조

제조예 25에서 얻은 화합물 49(136 mg, 0.663mmol) 및 틴(II) 클로라이드 디하이드레이트(740 mg, 3.21 mmol)가 들어있는 끓는 에탄올(2.0 mL)를 질소 분위기하에서 1시간 동안 교반하였다. 에탄올을 진공 증발로 제거하고 얻은 잔류물을 에틸 아세테이트(×3)로 추출하고, 유기층을 2N-NaOH 용액(10 mL)으로 처리한 다음, 물(2×10 mL)로 처리하였다. 유기층을 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:15)로 정제하여, 제조예 26의 화합물 50을 노랑색 고체로 얻었다(수율 79%, 100 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ6.54 (m, 2H), 6.43 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 5.63 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 3.78 (s, 3H), 3.46 (br, 2H), 1.37 (s, 6H); HRMS (FAB) Calcd for C₁₂H₁₅NO₂ (M+H⁺): 205.1103, Found: 205.1104.

< 제조예 27> 6- 브로모 -5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 (6- Bromo -5- methoxy -2,2-dimethyl-2H-chromene (51)

제조예 26에서 얻은 화합물 50(260 mg, 1.27 mmol)이 들어있는 물(5.0 mL)을 0 ℃로 냉각시킨 다음, HBr(1.6 mL, 물 중 48%)을 천천히 가하였다. 상기 반응 고체를 0 ℃에서 10분간 강하게 교반하였다. 아질산나트륨이 들어있는 물(1.0 mL) 용액에 NaNO₂ 및 HBr를 함유하는 슬러리를 천천히 첨가하며, 반응 혼합물의 온도가 5 ℃ 이하가 되도록 하였다. 구리(I)브롬(190 mg, 1.30 mmol)이 들어 있는 물(5.0 mL)를 분별깔때기에 넣고, 60 ℃로 가열한 다음, 상기 아닐린 용액을 한 방울씩 가하며, 60 ℃를 유지시켰다. 반응이 종료된 후, 상기 반응 혼합물을 상온으로 식히고, EtOAc(×2)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:12)로 정제하여, 제조예 27의 화합물 51을 연노랑색 오일로 얻었다(수율 90%, 365 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ7.16 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.52 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.42 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 5.59 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 3.74 (s, 3H), 1.35 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ153.3, 152.7, 132.1, 131.2, 116.9, 116.6, 113.9, 107.3, 76.1, 61.5, 30.9, 27.7.

< 제조예 28> 1,2- 디메톡시 -4-( 페닐설포닐메틸 )벤젠 (1,2- Dimethoxy -4-(phenylsulfonylmethyl)benzene) (105)의 제조

4-(브로모에틸)-1,2-디메톡시벤젠(100 mg, 0.43 mmol) 및 벤젠설폰산 소듐 염 디하이드레이트(87 mg, 0.52 mmol)를 무수 DMF(1.5 mL) 용액에 넣고, 상기 혼합물을 80 ℃에서 12시간 동안 교반하고, 상온으로 식혔다. 물과 EtOAc를 사용한 일반적인 합성과정 후에, 용매를 증발시키고 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산:CH₂Cl₂=1:1:1)로 정제하여, 제조예 28의 화합물 105를 무색 오일로 얻었다(수율 93%, 118 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.56 (m, 3H), 7.39 (m, 1H), 6.67 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.55(dd, 2H, J = 8.1, 2.0 Hz), 6.47(d, 1H, J = 2.0 Hz), 4.18(s, 2H), 3.79(s, 3H), 3.65(s, 3H).

< 제조예 29> 5-히드록시-2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6- 카바알데히드 (5- Hydroxy -2,2-dimethyl-2H-chromene-6-carbaldehyde) (110)의 제조

2,4-디히드록시알데히드(1 당량)가 들어있는 무수 아세톤(0.01 M) 용액에 3-메틸-부트-2-에날(2.0 당량)이 들어있는 피리딘(0.01 M) 용액을 120 ℃에서 5.5시간 동안 한 방울씩 가하고 18시간 더 가열하였다. 상온으로 식힌 후, 감압하에 회전 증발기로 용매를 제거하고 톨루엔과 함께 공비 증류로 피리딘을 제거하여 얻은 미정제 생성물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:8)로 정제하여, 화합물 119를 무색 고체로 얻었다(수율 32%, 1.12 g).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ11.61 (s, 1H), 9.62 (s, 1H), 7.25 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.39 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 5.58 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 1.42 (s, 6H).

< 제조예 30> 5-( 메톡시에톡시 )-2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6- 카바알데히드 (5-(Methoxymethoxy)-2,2-dimethyl-2H-chromene-6-carbaldehyde) (108)의 제조

제조예 29에서 얻은 화합물 110(200 mg, 0.98 mmol) 및 탄산칼륨(406 mg, 2.94 mmol)가 들어있는 아세톤(5 mL) 용액에 클로로메틸메틸 에테르(0.11 mL, 1.47 mmol)를 상온에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 3시간 동안 환류시킨 다음, 감압하에 농축하여 얻은 미정제 잔류물을 EtOAc로 추출하고 유기층을 염수로 세척하였다. 추출액을 무수 MgSO₄로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 미정제 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:10)로 정제하여, 제조예 30의 화합물 108을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 100%, 231 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ10.07(s, 1H), 7.59 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.61(d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.53(d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.63(d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.02(s, 2H), 3.52(s, 3H).

< 제조예 31> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)-2-(페닐설포닐)에타논 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)-2-(phenylsulfonyl)ethanone) (106)의 제조

제조예 28에서 얻은 화합물 105(119 mg, 0.407 mmol)가 들어있는 무수 THF(5.0 mL) 용액에 n-BuLi(0.26 mL, 0.444 mmol, 헥산 중 1.6 M)을 -78 ℃에서 첨가하고 같은 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물에 제조예 30의 화합물 108(121 mg, 0.448 mmol)이 들어있는 무수 THF(3.0 mL)를 -78 ℃에서 서서히 첨가하였다. 첨가 1시간 후, 상기 반응 혼합물에 물을 넣어 반응을 종료시키고 EtOAc(×3)로 추출하였다. 추출물을 염수로 세척하고 무수 MgSO₄로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 중간체 잔류물(2차 알콜)을 별도의 정제 과정 없이 다음 단계에 사용하였다.

상기에서 얻은 2차 알콜(183 mg, 0.339 mmol)이 들어있는 무수 CH₂Cl₂(5.0 mL) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(286 mg, 0.660 mmol)을 상온에서 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 탄산나트륨 포화 수용액:티오황산나트륨 포화 수용액(1:1, 4 mL)로 처리하고 30분 동안 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 물에 붓고 CH₂Cl₂(×3)로 추출하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 제조예 31의 화합물 106을 얻었다(수율 63%, 137 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.95 (dd, 1H, J = 20.0, 7.9 Hz), 7.58 (m, 3H), 7.34 (m, 3H), 6.81 (dd, 1H, J = 8.4, 2.2 Hz), 6.74 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 6.70 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.60 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 5.85 (s, 1H), 5.50(d, 1H, J = 10.0 Hz), 3.78 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.33(s, 3H).

< 제조예 32> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)에타논 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)ethanone) (107)의 제조

제조예 31에서 얻은 화합물 106(10 mg, 0.0202 mmol)이 들어있는 무수 THF(1.0 mL)에 SmI₂(0.81 mL, 0.081 mmol, 0.1M in THF)를 -20 ℃에서 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 -20 ℃에서 10분간 교반한 다음, 암모늄 클로라이드 포화 수용액(2.0 mL)로 반응을 종료시켰다. 상기 혼합물을 셀라이트 패드로 여과하고 EtOAc(4.0 mL×3)으로 추출하였다. 유기층을 20% 티오황산나트륨 포화 수용액으로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 제조예 32의 화합물 107을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 87%, 77 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ12.88 (s, 1H), 7.58 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.74 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.63 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.25 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 5.50 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.15 (s, 2H), 3.79 (s, 6H), 1.37 (s, 6H).

< 제조예 33> 1,2- 디메톡시 -4-( 프롭 -2- 이닐옥시 )벤젠 (1,2- Dimethoxy -4-(prop-2-ynyloxy)benzene) (115)의 제조

3,4-디메톡시페놀이 들어있는 DMF(0.2M)용액에 프로파질 브롬(225 mg, 1.51 mmol) 및 탄산칼륨(211 mg, 1.51 mmol)를 첨가하고 상온에서 12시간 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 암모늄 클로라이드 포화 수용액으로 반응을 종료시키고디에틸 에테르로 추출하였다. 유기층을 물(×2), 염수로 세척하고 무수 MgSO₄로 건조시킨 다음, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(n-헥산:CH₂Cl₂=1:1)로 정제하여, 제조예 33의 화합물 115를 연노랑색 오일로 얻었다(수율 100%, 241 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ6.79 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 6.60 (d, 1H, J = 2.7 Hz), 6.49 (dd, 1H, J = 8.8, 2.7 Hz), 4.65 (d, 2H, J = 2.4 Hz), 3.86(s, 3H), 3.84(s, 3H), 2.52 (t, 1H, J = 2.4 Hz).

< 제조예 34> 4-(3- 브로모프롭 -2- 이닐옥시 )-1,2- 디메톡시벤젠 (4-(3-Bromoprop-2-ynyloxy)-1,2-dimethoxybenzene) (116)의 제조

소듐 히드록시드 포화 수용액(0.5 mL, 5.0 M)에 차가운 브로민(1.12mmol, 0.03 mL)을 첨가한 다음, 제조예 33에서 얻은 화합물 115(108 mg, 0.56mmol)가 들어있는 디메톡시에탄(1.0 mL)을 첨가하였다. 다음으로, 플라스크를 질소 기체로 채우고 상온에서 강하게 5시간 동안 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 얼음물에 붓고 n-헥산(5.0 mL)로 추출하였다. 상기 추출물을 물로 세척하고 무수 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 제조예 34의 화합물 116을 연노랑색 오일로 얻었다(수율 86%, 130 mg).

*¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ6.79 (d, 1H, J = 8.6 Hz, 1H), 6.58 (d, 1H, J = 2.9 Hz), 6.47 (dd, 1H, J = 8.6, 2.9 Hz), 4.66 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.84(s, 3H).

< 제조예 35> 4- 브로모 -6,7- 디메톡시 -2 H - 크로멘 (4- Bromo -6,7- dimethoxy -2 H -chromene) (118)의 제조

제조예 34에서 얻은 화합물 116(130mg, 0.48 mmol)을 N,N-디에틸아닐린(7.0 mL)에 넣고 TLC로 모니터링하며, 반응이 완료될 때까지 질소 분위기하에서 210 ℃로 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 얼음물에 붓고 EtOAc(10 mL)로 추출하였다. 유기층을 2N-HCl 수용액, 2N-NaOH 수용액 및 물로 세척하고, 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:8)로 정제하여, 제조예 35의 화합물 118을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 77%, 100 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) : δ6.73 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 6.01 (t, 1H, J = 4.2 Hz), 4.72 (d, 2H, J = 4.2 Hz), 3.88 (s, 3H), 3.86 (s, 3H).

< 제조예 36> 4- 브로모 -6,7- 디메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 (4- Bromo -6,7-dimethoxy-2,2-dimethyl-2H-chromene) (119)의 제조

무수 DMF(0.05 mL, 0.62 mmol) 및 포스포러스 옥시브로마이드(188mg, 0.62 mmol)가 들어있는 무수 트리클로로에틸렌(1.5 mL) 용액에 2,2-디메틸크로마논(100 mg, 0.41 mmol)이 들어있는 무수 트리클로로에틸렌(1.5 mL) 용액을 0 ℃에서 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 60 ℃로 가열하고 감압하에 농축하여 주황색 검을 얻었다. 상기 검을 CH₂Cl₂(×5)로 추출하고 추출물을 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 제조예 36의 화합물 119를 노랑색 고체로 얻었다(수율 91%, 9 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ6.95 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 5.82 (s, 1H), 3.85(s, 3H), 3.83(s, 3H), 1.41(s, 6H).

< 제조예 37> 2,2-디메틸-2H- 크로멘 -6- 카바알데히드 (2,2- dimethyl -2H-chromene-6-carbaldehyde) (120)의 제조

페놀(1 당량), 탄산칼륨(2 당량), 포타슘 요오드(1.7 당량) 및 구리(I)요오드(0.02 당량)이 들어있는 DMF(1.0 M) 현탁액을 상온에서 준비하였다. 상기 혼합물에 3-클로로-3-메틸-1-부틴(1.8 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 65 ℃로 2시간 동안 가열한 후, 상온으로 식혀 디에틸 에테르에 붓고, 10% 수산화나트륨(×3) 및 염수로 세척하였다. 추출물을 무수 MgSO₄로 건조시키고, 농축하여 얻은 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산)로 정제하여 o-알킬레이티드 페놀을 얻었다.

o-알킬레이티드 페놀(1 당량)이 들어있는 N,N-디에틸아닐린(0.05 M) 용액을 질소 분위기하에서 190 ℃로 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 가열하였다. 반응 혼합물을 얼음물에 붓고 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 2N-HCl 수용액, 2N-NaOH 수용액 및 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 미정제 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산)로 정제하여, 화합물 120을 얻었다(수율 46%, 326 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ 9.80 (s, 1H), 7.15 (dd, 1H, J = 8.2, 2.0 Hz), 7.49 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.84 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.35 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 5.67 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 1.45 (s, 6H); HRMS (FAB) Czalcd for C12H13rO2(M+H⁺): 189.0916, Found: 189.0916.

< 제조예 38> 5-( 메톡시 )-2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6- 카바알데히드 (5-(Methoxy)-2,2-dimethyl-2H-chromene-6-carbaldehyde) (121)의 제조

제조예 29에서 얻은 화합물 110(200 mg, 0.98 mmol) 및 탄산칼륨(406 mg, 2.94 mmol)이 들어있는 아세톤(5 mL) 용액에 요오드메탄(0.11 mL, 1.47 mmol)을 상온에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 3시간 동안 환류시킨 다음, 감압하에 농축하여 얻은 미정제 잔류물을 EtOAc로 추출하고, 유기층을 염수로 세척하였다. 추출물을 무수 MgSO₄로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:10)로 정제하여, 화합물 121을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 91%, 231 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ10.07(s, 1H), 7.59 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.61(d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.53(d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.63(d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.02(s, 2H), 3.52(s, 3H).

< 제조예 39> 6- 브로모 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 (6- Bromo -2,2- dimethyl -2 H -chromene) (131)의 제조

2-메틸-3-부틴-2-올(1.15 당량)이 들어있는 아세토니트릴(0.02 M) 용액에 0 ℃에서 DBU(1.3 당량)을 주사기를 통해 30분간 가하였다. 상기 결과물로 얻은 노랑색 용액을 0 ℃에서 40분간 교반하였다. 다른 플라스크에, 4-브로모페놀(1 당량)을 아세토니트릴(0.03 M)에 0 ℃에서 넣고 DBU(1.3 당량)으로 처리한 다음, CuC1₂·H₂0(0.02 당량)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 0 ℃에서, 상기에서 준비한 노랑색 용액(2-메틸-3-부틴-2-일 트리플루오로아세테이트)을 캐뉼라를 통해서 40분 동안 한 방울씩 가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 5시간 동안 교반하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 물에 부었다. 수성층을 헥산으로 추출하고; 유기층을 1N-HCI, 1N-KOH(×2), 염수 순으로 세척하였다. 유기층을 무수 MgSO₄로 건조시키고 감압하에 농축하여 o-알킬레이티드 페놀(1.0 당량)을 얻었다. 상기 생성물을 바로 다음 단계에 사용하였다.

상기 o-알킬레이티드 페놀(1.0 당량)이 들어있는 N,N-디에틸아닐린(0.05 M) 용액을 TLC로 모니터링하며, 반응이 완료될 때까지 질소 분위기하에서 190 ℃로 가열하였다. 상기 반응 혼합물을 얼음물에 붓고 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 2N-HCl 수용액, 2N-NaOH 수용액, 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 미정제 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:20)로 정제하여, 화합물 131을 연노랑색 오일로 얻었다(수율 68%, 464 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.15 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.06 (d, 1H, J = 2.3 Hz), 6.63 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.23 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.62 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 1.39 (s, 6H).

< 제조예 40> (3,4- 디메톡시페닐 )(2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)메탄올 ((3,4-Dimethoxyphenyl)(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)methanol) (132)의 제조

제조예 39에서 얻은 화합물 131(60 mg, 0.25 mmol)이 들어있는 무수 THF(3.0 mL) 용액에 n-BuLi(0.17 mL, 0.28 mmol, n-헥산 중 1.6 M 용액)을 -78 ℃에서 첨가한 다음, 30분간 교반하였다. 다음으로, 상기 혼합물에 3,4-디메톡시벤즈알데히드(83 mg, 0.50 mmol)가 들어있는 무수 THF(1.0 mL)을 한 방울씩 가하고 30분 동안 교반하며, -78 ℃를 유지시켰다. 상기 반응 혼합물에 암모늄 클로라이드 포화 수용액을 넣어 반응을 종료시키고, EtOAc(×2)로 추출하고, 염수로 세척하였다. 유기층을 무수 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 화합물 132를 흰색 고체로 얻었다(수율 66%, 108 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.06 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 7.85 (m, 4H), 6.71 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.26 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 5.70 (s, 1H), 5.58 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 3.84 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.09 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 1.39 (s, 6H).

< 제조예 41> 1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일) 에타논 (1-(5-hydroxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)ethanone) (112)의 제조

아릴 브로마이드(1.5 당량)이 들어있는 무수 THF 용액에 n-BuLi(1.4 당량)을 -78 ℃에서 한 방울씩 첨가하고 -78 ℃에서 교반함으로써 아릴 음이온을 생성시켰다. -78 ℃에서 20분간 교반한 후에, 2',4'-디히드록시아세토페논(1.0 당량)을 첨가하고 30분간 계속 교반하며 반응온도가 상온이 되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 수용액으로 처리하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 추출물을 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조시키고 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:15에서 1:10)로 정제하여, 화합물 112를 연노랑색 고체로 얻었다(수율 32%, 460 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ12.94 (s, 1H), 7.50 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.79 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.31 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 5.56 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 1.42 (s, 6H).

< 제조예 42> 1-(2,2-디메틸-2H- 크로멘 -6-일) 에타논 (1-(2,2- Dimethyl -2H-chromen-6-yl)ethanone) (134)의 제조

화합물 133(1 당량), 탄산칼륨(2 당량), 포타슘 요오드(1.7 당량) 및 구리(I)요오드(0.02 당량)이 들어있는 DMF(1.0 M) 현탁액을 상온에서 준비하였다. 상기 혼합물에 3-클로로-3-메틸-1-부틴(1.8 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 65 ℃로 2시간 동안 가열한 후, 상온으로 식혀 디에틸 에테르에 붓고, 10% 수산화나트륨(×3) 및 염수로 세척하였다. 추출물을 무수 MgSO₄로 건조시키고, 농축하여 얻은 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 o-알킬레이티드 페놀을 얻었다.

o-알킬레이티드 페놀(1 당량)이 들어있는 N,N-디에틸아닐린(0.05 M) 용액을 질소 분위기하에서 190 ℃로 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 가열하였다. 반응 혼합물을 얼음물에 붓고 EtOAc로 추출하였다. 유기층을 2N-HCl 수용액, 2N-NaOH 수용액 및 물로 세척하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 미정제 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:15)로 정제하여, 화합물 134를 무색 오일로 얻었다(수율 65%, 248 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.32 (dd, 1H, J = 8.4, 2.1 Hz), 6.60 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 6.77 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.34 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.65 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 2.51 (s, 3H), 1.43(s, 6H); LRMS (FAB) m/z 203 (M+H⁺).

< 실시예 1> (6 a S ,12 a S )-9-히드록시-2,3- 디메톡시 -8-(3- 메틸 -2- 부테닐 )-6a,12a-디히드로크로메노[3,4-b]크로멘-12(6H)-온 ((6aS,12aS)-9-Hydroxy-2,3-dimethoxy-8-(3-methyl-2-butenyl)-6a,12a-dihydrochromeno [3,4-b]chromen-12(6H)-one) (8)의 제조

로테논(Sigma-Aldrich, 200 mg, 0.50 mmol)이 용해되어 있는 무수 CH₂Cl₂(5.0 mL) 용액에 -10 ℃의 아르곤 분위기하에서 BBr₃(0.53 mL, 0.53 mmol, CH₂Cl₂ 중 1.0 M 용액)을 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 5분간 혼합하였다. 다음으로, 메탄올(1.0 mL)을 첨가하고 감압하여 용매를 제거하고, 여과하여 얻은 미정제 잔류물(화합물 7)을 별도의 정제 과정 없이 다음 단계에 사용하였다. 헥사메틸포스포아미드(HMPA) 용액에 상기 화합물 7 및 NaBH₃CN(69 mg, 1.1 mmol)을 넣고 70 ℃로 가열하여 3시간 동안 교반한 다음, 물에 부었다. 상기 혼합물의 추출물을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조한 다음 감압 농축하였다. 다음으로, 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 실시예 1의 화합물 8을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 50%, 55 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ7.68 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.76 (s, 1H), 6.50 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.41 (s, 1H), 5.19 (m, 1H), 4.87 (t, 1H, J = 2.97 Hz), 4.60 (dd, 1H, J = 11.9, 3.1 Hz), 4.14 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 3.80 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.70(s, 3H), 3.34 (m 2H), 1.74 (s, 3H), 1.65 (s, 3H); ¹³H-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ190.4, 162.1, 160.1, 149.3, 147.5, 143.6, 134.0, 126.9, 121.1, 114.8, 112.5, 110.7, 110.5, 108.5, 104.7, 100.8,72.0, 66.2, 56.2, 55.7, 44.1, 25.7, 22.0, 17.7; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₄O₆ (M+H⁺): 396.1573, Found:396.1575.

< 실시예 2~4> (7 a S ,13 a S )-9-히드록시-13,13a- 디히드로 -10- 메톡시 -3,3-디메틸-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 ((7aS,13aS)-9-Hydroxy-13,13a-dihydro-10-methoxy-3,3-dimethyl-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromen-7(7aH)-one) (9);

(7 a S ,13 a S )-10-히드록시-13,13a- 디히드로 -9- 메톡시 -3,3-디메틸-3 H -크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 ((7aS,13aS)-10-Hydroxy-13,13a-dihydro-9-methoxy-3,3-dimethyl-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3 -h]chromen-7(7aH)-one) (10); 및

(7 a S ,13 a S )-13,13a- 디히드로 -9,10-디히드록시-3,3-디메틸-3 H -크로메노[3,4- b]피라노[2,3-]크로멘-7(7aH)-온 ((7aS,13aS)-13,13a-Dihydro-9,10-dihydroxy-3,3-dimethyl-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromen-7(7aH)-one) (11)의 제조

비교예 1의 데구엘린(100 mg, 0.25 mmol)이 용해되어 있는 무수 CH₂Cl₂(7.0 mL) 용액에 -78 ℃의 아르곤 분위기하에서 BBr₃(0.25 mL, 0.25 mmol, CH₂Cl₂ 중 1.0 M 용액)을 첨가하고 1시간 교반한 다음, 0 ℃가 될 때까지 두었다. 추가로 30분간 교반한 다음, 반응 혼합물을 물로 식히고, CH₂Cl₂로 추출하고 염수로 세척하였다. 상기에서 얻은 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산:CH₂Cl₂=1:3:1에서 1:2:1)로 정제하여, 실시예 2의 화합물 9를 연노랑색 고체로 얻었다(수율 16%, 16 mg).

¹H-NMR (acetone-d₆, 400 MHz) δ7.64 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 7.60 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.59 (d, 1H, J = 10.1 Hz), 6.40 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.30 (s, 1H), 5.66 (d, 1H, J = 10.1 Hz), 5.06 (m, 1H), 4.57 (dd, 1H, J = 12.2, 2.9 Hz), 4.22 (d, 1H, J = 12.2 Hz), 3.85 (d, 1H, J = 4.0 Hz), 3.62 (s, 3H), 2.00 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.30 (s, 3H); ¹³C-NMR (acetone-d₆, 100 MHz) δ190.2, 160.8, 158.2, 149.6, 148.6, 143.7, 130.4, 129.4, 116.6, 114.3, 112.2, 112.1, 110.3, 105.8, 105.2, 78.8, 74.0, 67.3, 57.3, 45.4, 29.0, 28.6; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₁O₆ (M+H⁺): 381.1321, Found: 381.1327.

또한, 실시예 3의 화합물 10을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 14%, 14 mg).

¹H-NMR (acetone-d₆, 300 MHz) δ7.64 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 7.07 (s, 1H), 6.60 (s, 1H), 6.59 (d, 1H, J = 10.1 Hz), 6.39 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.38 (s, 1H), 5.67 (d, 1H, J = 10.1 Hz), 5.06 (m, 1H), 4.59 (dd, 1H, J = 12.2, 2.9 Hz), 4.23 (d, 1H, J = 12.2 Hz), 3.82 (d, 1H, J = 4.0 Hz), 3.71 (s, 3H), 2.00 (m, 1H), 1.39 (s, 3H), 1.30 (s, 3H); ¹³C-NMR (acetone-d₆, 75 MHz) δ190.0, 160.8, 158.2, 149.1, 148.2, 142.1, 130.4, 129.4, 116.6, 114.5, 114.3, 112.1, 110.3, 107.2, 102.1, 78.8, 73.9, 67.4, 56.6, 45.4, 29.0, 28.6; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₁O₆ (M+H⁺): 381.1338, Found: 381.1335.

나아가, 실시예 4의 화합물 11을 연노랑색 고체로 얻었다(33% 수율, 32 mg).

¹H-NMR (acetone-d₆, 400 MHz) δ7.75 (s, 1H), 7.63 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 7.38 (s, 1H), 6.59 (s, 1H), 6.58 (d, 1H, J = 10.1 Hz), 6.39 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.29 (s, 1H), 5.65 (d, 1H, J = 10.1 Hz), 5.03 (m, 1H), 4.55 (dd, 1H, J = 12.2, 2.9 Hz), 4.20 (d, 1H, J = 12.2 Hz), 3.79 (d, 1H, J = 4.0 Hz), 1.99 (m, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.30 (s, 3H); ¹³C-NMR (acetone-d₆, 100 MHz) δ190.1, 160.8, 158.2, 148.4, 146.9, 140.7, 160.8, 158.2, 148.4, 146.9, 140.7, 130.4, 129.3, 116.6, 114.9, 114.2, 112.1, 110.3, 106.2, 105.1, 78.8, 74.0, 67.2, 45.4, 29.0, 28.6; HRMS (FAB) Calcd for C₂₁H₁₉O₆ (M+H⁺): 367.1182, Found: 367.1179.

< 실시예 5> 9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-3 H - 크로메노[3,4- b ]피라노 [2,3- h ] 크로멘-7-(13H)-온 (9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromen-7-(13H)-one) (12)의 제조

비교예 1의 대굴린(50 mg, 0.13 mmol)이 용해되어 있는 에틸알콜(2.0 mL) 용액에 상온에서 소듐아세테이트(21 mg, 0.25 mmol) 및 I₂(290 mg, 1.14 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 12시간 동안 환류시킨 후, 상온까지 냉각시키고 EtOAc로 추출하였다. 추출액의 유기층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 EtOAc:n-헥산=1:1 용액으로부터 결정화하여, 실시예 5의 화합물 12를 연노랑색 고체로 얻었다(수율 35%, 17 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ8.42 (s, 1H), 8.01 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.84 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.73 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.52 (s, 1H), 5.70 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 4.99 (s, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 1.47 (s, 6H).; ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ174.2, 157.1, 156.1, 151.0, 148.9, 146.2, 144.0, 130.5, 126.4, 118.4, 115.3, 114.6, 111.7, 110.5, 109.9, 109.0, 100.3, 77.7, 64.8, 56.2, 55.8, 28.1; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₀O₆ (M+H⁺): 392.1260, Found: 392.1263.

< 실시예 6> (7 S ,7 a R ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-7,7a,13,13a- 테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7-올 ((7S,7aR,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromen-7-ol) (14)의 제조

데구엘린(300 mg, 0.76 mmol)이 용해되어 있는 메탄올(10.0 mL) 용액에 0 ℃에서 NaBH₄(43 mg, 1.13 mmol)를 첨가하고 30분간 교반한 다음 물로 식혔다. 상기 혼합물을 디에틸 에테르로 추출하고 유기층을 염수로 세척한 다음, MgSO₄로 건조시키고 농축시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:1)로 정제하여, 실시예 6의 화합물 14를 흰색 고체로 얻었다(수율 100%, 300 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ6.99 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.68 (s, 1H), 6.64 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.47 (s, 1H), 6.41 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.56 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.80 (m, 2H), 4.57 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.21 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 3.36 (t, 1H, J = 4.9 Hz), 1.41 (s, 3H), 1.39 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ154.3, 149.6, 149.4, 147.9, 143.8, 130.0, 129.1, 116.4, 113.6, 111.3, 109.8, 109.5, 108.7, 100.7, 76.0, 69.1, 66.3, 65.0, 56.5, 55.8, 37.9, 27.8, 27.7; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₄O₆ (M+H⁺): 396.1560, Found: 396.1562.

< 실시예 7> (7 a S ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-7,7a,13,13a- 테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘 ((7aS,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromene) (13)의 제조

실시예 6에서 제조한 화합물 14(40 mg, 0.10 mmol)가 용해되어 있는 무수 THF(2.0 mL) 용액에 0 ℃의 아르곤 분위기하에서 소듐하이드라이드(16 mg, 0.40 mmol)를 첨가하고 30분간 교반한 다음, 0 ℃에서 카본 디설파이드(0.063 mL, 1.00 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물에 0 ℃에서 아이오도메탄(0.064 mL, 1.00 mmol)을 첨가하고 반응온도가 상온이 되도록 하였다. TLC로 반응이 종료됨을 확인한 후, 상기 혼합물을 메탄올(1.0 mL)로 식히고 감압하에 용매를 제거하여 얻은 잔류물을 EtOAc로 추출하고 염수로 세척하였다. 상기 추출액의 유기층을 MgSO₄로 건조시키고 여과하고 농축시킨 미정제 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:6)로 정제하여, 원하는 중간체 화합물을 얻었다(수율 71%, 35 mg). 이 중간체 화합물(21 mg, 0.043 mmol)을 무수 톨루엔(1.0 mL)에 용해시키고 트리-n-부틸틴 하이드라이드(0.024 mL, 0.086 mmol) 및 AIBN(촉매량)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 환류시키고 감압하에 용매를 제거하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:6)로 정제하여, 실시예 7의 화합물 13을 연노랑색 오일로 얻었다(수율 69%, 11 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ6.75 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.63 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.62 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.31 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.52 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 5.53 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.67 (q, 1H, J = 4.7 Hz), 4.24 (d, 1H, J = 5.4 Hz), 3.79 (s, 6H), 3.26 (m, 1H), 2.99 (m, 2H), 1.38 (s, 3H), 1.37 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ152.2, 148.9, 148.7, 147.7, 143.5, 128.9, 128.5, 116.7, 113.0, 111.4, 111.2, 109.7, 108.8, 100.6, 75.6, 69.7, 65.6, 56.6, 55.8, 31.6, 29.6, 29.4, 27.8, 27.6; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₄O₅ (M+H⁺): 380.1624, Found: 380.1631.

< 실시예 8> (7 S ,7 a R ,3 a S )-7,9,10- 트리메톡시 -3,3-디메틸-7,7a,13,13a- 테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘 ((7S,7aR,3aS)-7,9,10-Trimethoxy-3,3-dimethyl-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromene) (15)의 제조

실시예 7에서 제조한 화합물 14(1 당량)가 용해되어 있는 무수 THF 용액에 0 ℃에서 아이오도메탄(1.5당량)를 첨가한 다음, 0 ℃에서 t-BuOK 용액(THF 중 1 M, 1 당량)을 한방울씩 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반한 다음, 포화 NH₄Cl 수용액으로 식히고 EtOAc로 추출하였다. 추출액 중 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 실시예 8의 화합물 15를 무색 고체로 얻었다(55 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ6.93 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.77 (s,1H), 6.64 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.42 (s, 1H), 6.37 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.31 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.55 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.78 (m, 1H), 4.51 (t, 1H, J = 10.0 Hz), 4.39 (d, 1H, J = 3.6 Hz), 4.22 (dd, 1H, J = 10.0, 3.9 Hz), 3.82 (s, 1H), 3.81 (s, 1H), 3.38 (m, 1H), 3.15 (s, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.39 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ154.2, 149.1, 149.0, 148.4, 143.5, 129.3, 129.0, 116.5, 113.6, 111.5, 110.3, 110.0, 108.4, 100.4, 76.7, 75.9, 70.0, 65.8, 57.0, 56.5, 55.7, 37.2, 27.9, 27.8; HRMS (FAB) Calcd for C₂₄H₂₄O₆ (M+H⁺): 410.1729, Found: 410.1713.

< 실시예 9> (7 S ,7 a R ,3 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-7- 에톡시 -7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘 ((7S,7aR,3aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-7-ethoxy-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b] pyrano[2,3-h]chromene) (16)의 제조

실시예 7에서 제조한 화합물 14(1 당량)가 용해되어 있는 무수 THF 용액에 0 ℃에서 아이오도에탄(1.5당량)를 첨가한 다음, 0 ℃에서 t-BuOK 용액(THF 중 1 M, 1 당량)을 한방울씩 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반한 다음, 포화 NH₄Cl 수용액으로 식히고 EtOAc로 추출하였다. 추출액 중 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 실시예 9의 화합물 16을 무색 고체로 얻었다(수율 71%, 23 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ6.94 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 6.77 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 6.38 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 5.57 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.81 (m, 1H), 4.55 (dd, 1H, J = 10.1, 9.9 Hz), 4.39 (d, 1H, J = 4.1 Hz), 4.24 (dd, 1H, J = 10.1, 3.8 Hz), 3.82 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.39 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 1.41 (s, 3H), 1.39 (s, 3H). ¹³C-NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ153.9, 149.1, 148.9, 148.4, 143.3, 128.9, 128.6, 116.6, 114.4, 111.7, 110.1, 109.8, 108.5, 100.3, 75.8, 75.0, 70.1, 66.0, 64.9, 56.5, 55.7, 36.8, 29.6, 27.8, 27.8; HRMS (FAB) Calcd for C₂₅H₂₈O₆ (M+H⁺): 424.1886, Found: 424.1894.

< 실시예 10> (7 S ,7 a R ,3 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-7- 프로폭시 -7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘 ((7S,7aR,3aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-7-propoxy-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromene) (17)의 제조

실시예 7에서 제조한 화합물 14(1 당량)가 용해되어 있는 무수 THF 용액에 0 ℃에서 아이오도프로판(1.5당량)을 첨가한 다음, 0 ℃에서 t-BuOK 용액(THF 중 1 M, 1 당량)을 한방울씩 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반한 다음, 포화 NH₄Cl 수용액으로 식히고 EtOAc로 추출하였다. 추출액 중 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 실시예 10의 화합물 17을 무색 고체로 얻었다(수율 68%, 15 mg).

*¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ6.94 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.83 (s,1H), 6.39 (s, 1H), 6.34 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.53 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.77 (m, 1H), 4.57 (t, 1H, J = 9.9 Hz), 4.50 (d, 1H, J = 3.7 Hz), 4.21 (dd, 1H, J = 9.9, 4.2 Hz), 3.80 (s, 6H), 3.39 (m, 1H), 3.10 (m, 1H), 1.39 (s, 8H), 0.69 (t, 3H, J = 7.3 Hz); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ153.9, 149.1, 148.9, 148.3, 143.3, 128.9, 128.7, 116.6, 114.3, 111.7, 110.2, 109.8, 108.4, 100.3, 75.8, 75.3, 71.3, 70.1, 65.9, 56.5, 55.8, 36.8, 29.6, 27.9, 27.8, 22.9; HRMS (FAB) Calcd for C₂₆H₃₁O₆ (M+H⁺): 439.2121, Found: 439.2120.

< 실시예 11> (7 S ,7 a R ,3 a S )-7- 벤질옥시 -9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘 ((7S,7aR,3aS)-7-Benzyloxy-9,10-dimethoxy-3,3-dimethyl-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromene) (18)의 제조

실시예 7에서 제조한 화합물 14(1 당량)가 용해되어 있는 무수 THF 용액에 0 ℃에서 벤질브로마이드(1.5당량)를 첨가한 다음, 0 ℃에서 t-BuOK 용액(THF 중 1 M, 1 당량)을 한방울씩 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반한 다음, 포화 NH₄Cl 수용액으로 식히고 EtOAc로 추출하였다. 추출액 중 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:6)로 정제하여, 실시예 11의 화합물 18을 무색 고체로 얻었다(수율 88%, 22 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ7.22 (m, 2H), 7.00 (d, 1H, J = 6.2 Hz), 6.87 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.66 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 6.62 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 6.37 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.56 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.81 (m, 1H), 4.62 (t, 1H, J = 9.9 Hz), 4.54 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 4.48 (AB quartet, 1H, J = 85.0, 12.5 Hz), 4.25 (dd, 1H, J = 14.2, 4.6 Hz), 3.84(s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.36 (m, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.40 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ154.2, 149.1, 148.9, 148.7, 143.4, 137.9, 129.2, 129.0, 128.1, 127.6, 127.4, 127.2, 116.5, 113.8, 111.3, 110.1, 110.0, 108.4, 100.4, 75.9, 72.8, 69.9, 69.8, 65.8, 64.9, 56.2, 55.8, 37.3, 27.9, 27.8; HRMS (FAB) Calcd for C₃₀H₃₀O₆ (M+H⁺): 486.2042, Found: 486.2050.

< 실시예 12> (7 S ,7 a S ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-7-( 테트라히드로 -2 H -피란-2-일록시)-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘 ((7S,7aS,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-7-(tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromene) (19)의 제조

실시예 7에서 제조한 화합물 14(30 mg, 0.076 mmol) 및 DHP(13 mg, 0.15 mmol)가 용해되어 있는 CH₂Cl₂(1.0 mL)에 p-톨루엔설포네이트(5.8 mg, 0.023 mmol)를 첨가하고 상온에서 1시간 교반하였다. 다음으로, 물(0.5 mL)로 반응을 식히고 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 추출액의 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 12의 화합물 19를 무색 오일로 얻었다(수율 50%, 부분입체 이성질체 혼합물, 18 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ7.06 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.91 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.84 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.63 (t, 1H, J = 9.9 Hz), 6.42 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.37 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.33 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.54 (t, 1H, J = 9.3 Hz), 4.85 (m, 4H), 4.75 (m, 1H), 4.63 (t, 1H, J = 10.0 Hz), 4.55 (t, 1H, J = 10.0 Hz), 4.33 (m, 1H), 4.21 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 3.70 (m, 1H), 3.40 (m, 3H), 3.29 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 1.71-1.19 (m, 12H), 1.40 (s, 12H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ154.2, 153.7, 149.2, 149.1, 149.0, 148.9, 148.7, 148.7, 148.2, 148.2, 143.3, 143.2, 116.5, 116.4, 113.4, 113.1, 111.8, 111.7, 110.2, 110.0, 109.6, 109.6, 109.3, 109.3, 109.1, 108.2, 100.3, 100.2, 99.1, 93.2, 75.9, 75.8, 72.4, 69.8, 69.4, 69.1, 65.8, 65.2, 61.6, 60.4, 56.5, 56.5, 55.8, 55.8, 37.2, 36.8, 30.3, 30.2, 28.0, 27.9, 27.8, 27.7, 25.4, 25.3, 18.7, 18.1; HRMS (FAB) Calcd for C₂₈H₃₂O₇ (M+H⁺): 480.2148, Found: 480.2155.

< 실시예 13> (7 S ,7 a S ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-7,7a,13,13a- 테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3,h]크로멘-7-일 아세테이트 ((7S,7aS,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3,h]chromen-7-yl acetate) (20)의 제조

실시예 7에서 제조한 화합물 14(30 mg, 0.076 mmol) 및 DMAP(촉매량)가 용해되어 있는 CH₂Cl₂(1.0 mL) 용액에 Et₃N(0.012 mL, 0.086 mmol) 및 아세틱 무수물(0.06 mL, 0.64 mmol)을 0 ℃의 아르곤 분위기하에서 첨가하였다. 다음으로, 반응 혼합물을 상온에서 10분간 교반하고, 포화 NH₄Cl 수용액으로 식혔다. 상기 혼합물을 CH₂Cl₂로 추출하고, 유기층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 실시예 13의 화합물 20을 흰색 고체로 얻었다(수율 82%, 27 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ7.01 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 6.63 (s, 1H), 6.63 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 6.38 (s, 1H), 6.38 (d, 1H, J = 7.5 Hz), 6.24 (d, 1H, J = 4.4 Hz), 5.56 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.86 (m, 1H), 4.43 (t, 1H, J = 10.2 Hz), 4.24 (m, , 1H), 3.81 (s, 6H), 3.49 (m, 1H), 1.71 (s, 3H), 1.4 (s, 6H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ170.0, 154.6, 149.3, 148.6, 148.5, 143.4, 130.5, 129.1, 116.2, 111.7, 110.9, 109.7, 109.6, 108.6, 100.1, 76.1, 69.0, 66.7, 64.5, 56.4, 55.8, 36.4, 27.9, 27.8, 20.8; HRMS (FAB) Calcd for C₂₅H₂₆O₇ (M+H⁺): 438.1679, Found: 438.1681.

< 실시예 14> (7 S ,7 a S ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-7,7a,13,13a- 테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7-일 카바메이트 ((7S,7aS,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromen-7-yl carbamate) (21)의 제조

실시예 7에서 제조한 화합물 14(30 mg, 0.076 mmol)이 용해되어 있는 무수 CH₂Cl₂(0.5 mL) 용액에 트리클로로아세틸 이소시아네이트(0.014 mL, 0.11 mmol)를 0 ℃의 아르곤 분위기하에서 첨가하고 0 ℃에서 30분간 교반하였다. 감압하에 용매를 제거하고 남은 잔류물을 메틸알콜(1.0 mL) 및 물(0.2 mL)에 용해시켰다. 상기 혼합물을 0 ℃로 냉각시킨 다음, 탄산칼륨(313 mg, 2.26 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 30분간 교반한 후 상온이 되도록 두고, 추가로 1시간 더 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 염수로 식히고 EtOAc로 추출하였다. 추출액의 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 실시예 14의 화합물 21을 흰색 고체로 얻었다(수율 67%, 21 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ6.87 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.62 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.53 (s, 1H), 6.33 (s, 1H), 6.27 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.46 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.74 (m, 1H), 4.56 (dd, 1H, J = 11.7, 2.7 Hz), 4.49 (d, 1H, J = 2.7 Hz), 4.18 (d, 1H, J = 11.7 Hz), 3.73 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.14 (s, 6H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ154.2, 149.6, 148.9, 148.3, 143.3, 130.6, 128.4, 116.6, 110.2, 110.1, 109.6, 108.6, 108.2, 100.9, 75.9, 75.1, 67.5, 65.9, 56.7, 55.8, 55.6, 35.5, 28.1, 27.6.

< 실시예 15> (13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-13,13a- 디히드로 -3 H -크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘 ((13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-13,13a-dihydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromene) (22)의 제조

실시예 7에서 제조한 화합물 14(3 mg, 7.6 μmol)이 용해되어 있는 아세트산(1.0 mL) 용액을 100 ℃에서 2시간 교반하고 물(2.0 mL)로 처리하였다. 혼합물을 디에틸 에테르로 추출하고 수성층을 다시 디에틸 에테르로 추출하였다. 유기층은 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:7)로 정제하여, 실시예 15의 화합물 22를 무색 오일로 얻었다(수율 70%, 2 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ6.98 (s, 1H), 6.81 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.60 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.55 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 6.36 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.59 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 5.27 (m, 2H), 4.57 (dd, 1H, J = 10.0, 5.4 Hz), 4.13 (t, 1H, J = 10.0 Hz), 3.88 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 1.42 (s, 3H), 1.38 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ153.3, 150.3, 149.2, 148.2, 144.7, 129.7, 126.4, 123.7, 116.6, 116.2, 111.8, 110.6, 109.8, 109.6, 105.2, 100.9, 76.1, 71.1, 67.9, 56.3, 55.9, 28.0, 27.6; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₂O₅ (M+H⁺): 378.1467, Found: 378.1474.

< 실시예 16> (7 a R ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-13,13a- 디히드로 -3 H -크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 옥심 ((7aR,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-13,13a-dihydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromen-7(7aH)-one oxime) (23)의 제조

비교예 1에서 제조한 데구엘린(25 mg, 0.063 mmol)이 용해되어 있는 무수 피리딘(1.0 mL)에 히드록실아민 히드로클로라이드(14 mg, 0.19 mmol)를 첨가하고 반응 온도를 70 ℃까지 올리고 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 상기 혼합물을 물(0.5 mL)로 식히고 CH₂Cl₂로 추출하여 얻은 추출액의 유기층을 2N-HCl 수용액, 물, 염수로 세척하였다. 감압하에 용매를 제거하고 남은 잔류물을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 실시예 16의 화합물 23을 흰색 고체로 얻었다(26 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ8.26 (br, 1H), 7.59 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.62 (m, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.37 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 5.49 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.84 (d, 1H, J = 3.2 Hz), 4.61 (dd, 1H, J = 12.0, 2.4 Hz), 4.48 (m, 1H), 4.24 (d, 1H, J = 12.0 Hz), 3.79 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.34 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ155.7, 151.6, 151.3, 149.3, 147.7, 143.6, 128.6, 124.5, 116.2, 112.2, 110.7, 109.8, 108.2, 106.2, 100.6, 76.5, 69.6, 66.8, 60.4, 56.4, 55.8, 31.6, 28.1, 27.8; HRMS (FAB) Calcd for C₂₄H₂₅N₅O₇ (M+H⁺): 409.1525, Found: 409.1513.

< 실시예 17> (7 a R ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-13,13a- 디히드로 -3 H -크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 O-메틸옥심 ((7aR,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-13,13a-dihydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chro men-7(7aH)-one O-methyloxime) (24)의 제조

실시예 16에서 제조한 화합물 23(1 당량)이 용해되어 있는 무수 THF 용액에 0 ℃에서 아이오도메탄(1.5당량)을 첨가한 다음, 0 ℃에서 t-BuOK 용액(THF 중 1 M, 1 당량)을 한방울씩 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반한 다음, 포화 NH₄Cl 수용액으로 식히고 EtOAc로 추출하였다. 추출액 중 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 17의 화합물 24를 흰색 고체로 얻었다(수율 57%, 12 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ7.68 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.61 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.51 (s, 1H), 6.38 (m, 2H), 5.48 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.71 (d, 1H, J = 3.3 Hz), 4.59 (dd, 1H, J = 12.0, 2.4 Hz), 4.45 (m, 1H), 4.21 (d, 1H, J = 12.0 Hz), 4.03 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 1.39 (s, 3H), 1.33 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ155.6, 151.2, 150.0, 149.2, 147.6, 143.5, 128.5, 124.7, 116.3, 111.9, 110.6, 109.7, 108.4, 106.3, 100.5, 76.5, 69.6, 66.9, 61.9, 56.3, 55.8, 32.3, 28.1, 27.8; HRMS (FAB) Calcd for C₂₄H₂₅NO₆ (M+H⁺): 423.1682, Found: 423.1677.

< 실시예 18> (7 a R ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-13,13a- 디히드로 -3 H -크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 O-벤질옥심 ((7aR,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-13,13a-dihydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chro men-7(7aH)-one O-benzyloxime) (25)의 제조

실시예 16에서 제조한 화합물 23(1 당량)이 용해되어 있는 무수 THF 용액에 0 ℃에서 벤질브로마이드(1.5당량)을 첨가한 다음, 0 ℃에서 t-BuOK 용액(THF 중 1 M, 1 당량)을 한방울씩 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반한 다음, 포화 NH₄Cl 수용액으로 식히고 EtOAc로 추출하였다. 추출액 중 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 실시예 17의 화합물 24를 흰색 고체로 얻었다(수율 33%, 11 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ7.71 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 7.46 (d, 2H, J = 7.1 Hz), 7.31 (m, 3H), 7.24 (s, 1H), 6.62 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.46 (s, 1H), 6.37 (m, 2H), 5.48 (d, 1H, J = 10. Hz), 5.27 (AB quartet, 2H, J = 50.7, 12.0 Hz), 4.76 (d, 1H, J = 3.0 Hz), 4.58 (dd, 1H, J = 12.0, 2.2 Hz), 4.44 (m, 1H), 4.20 (d, 1H, J = 12.0 Hz), 3.78 (s, 3H), 3.48(s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.33 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ155.6, 151.2, 150.1, 149.1, 147.5, 143.5, 137.5, 128.7, 128.5, 128.4, 128.1, 124.6, 116.3, 111.7, 110.6, 109.7, 108.5, 106.4, 100.5, 76.5, 69.6, 66.8, 56.0, 55.7, 32.3, 29.6, 28.1, 27.8; HRMS (FAB) Calcd for C₃₀H₂₉NO₆ (M+H⁺): 499.1995, Found: 499.1999.

< 실시예 19> (7 a S ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-2,3,13,13a- 테트라히드로-1H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 ((7aS,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-2,3,13,13a-tetrahydro-1H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h] chromen-7(7aH)-one) (26)의 제조

실시예 1에서 제조한 화합물 8(4 mg, 10 μmol) 및 p-톨루엔설폰산(0.5 mg, 2.5 μmol)이 들어있는 벤젠(1.0 mL) 용액을 80 ℃에서 1시간 교반하고 포화 NaHCO₃ 수용액(1.0 mL)으로 식히고 디에틸 에테르로 추출하여 얻은 추출액에서 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산:CH₂Cl₂=1:3:1에서 1:2:1)로 정제하여, 실시예 19의 화합물 26을 흰색 고체로 얻었다(수율 99%, 3.5 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.61 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.79 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 6.43 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 4.90 (m, 1H), 4.62 (dd, 1H, J = 12.0, 3.0 Hz), 4.17 (d, 1H, J = 12.0 Hz), 3.81 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 2.65 (m, 2H), 1.74 (t, 2H, J = 6.6 Hz), 1.33 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ189.4, 161.0, 159.9, 149.2, 147.3, 143.7, 126.3, 112.2, 111.6, 110.2, 108.8, 104.9, 100.7, 75.5, 72.2, 66.3, 56.2, 55.7, 44.1, 31.5, 26.9, 26.3, 16.5; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₅O₆ (M+H⁺): 397.1651, Found: 397.1642.

< 실시예 20> (7 a S ,13 a S )-1,2-디히드록시-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-2,3,13,13a-테트라히드로-1H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 ((7aS,13aS)-1,2-Dihydroxy-9,10-dimethoxy-3,3-dimethyl-2,3,13,13a-tetrahydro-1H-chromeno[3,4-b] pyrano[2,3-h]chromen-7(7aH)-one) (27)의 제조

비교예 1에서 제조한 데구엘린(20 mg, 0.051 mmol)이 들어있는 아세톤:물(4.0 mL, 4:1) 용액에 N-메틸모폴린 N-옥사이드(NMO, 18 mg, 0.15 mmol) 및 OsO₄(0.1 M in toluene, 0.020 mL, 0.002 mmol)를 첨가하고, 0 ℃에서 10분간 교반하였다. 혼합물을 상온까지 데피고 3일간 더 교반하였다. 포화 소듐 설파이트 수용액으로 0 ℃가 되도록 식힌 후에, 반응 혼합물을 셀라이트 패드로 여과하고 EtOAc로 세척하였다. EtOAc로 유기층을 추출하고 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=2:1에서 EtOAc 100%)로 정제하여, 실시예 20의 화합물 27을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 47%, 부분입체 이성질체 혼합물, 10 mg).

(1) isomer A: ¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ7.76 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 6.48 (m, 3H), 4.98 (d, 1H, J = 4.7 Hz), 4.46 (m, 3H), 4.42 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.76 (t, 1H, J = 4.7 Hz), 3.71 (s, 3H), 3.45 (br, 1H), 3.34 (d, 1H, J = 4.5 Hz), 1.40 (s, 3H), 1.31 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ190.7, 160.6, 160.4, 151.2, 148.2, 144.3, 128.7, 113.0, 110.5, 110.0, 109.1, 108.6, 101.1, 79.1, 76.3, 70.4, 67.3, 63.7, 61.9, 56.3, 55.9, 24.3, 22.5;

(2) isomer B: ¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ7.77 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 6.47 (m, 3H), 4.97 (d, 1H, J = 4.7 Hz), 4.59 (m, 3H), 4.43 (s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.73 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.53 (br, 1H), 3.30 (d, 1H, J = 4.5 Hz), 1.43 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ190.8, 160.8, 160.6, 151.2, 148.2, 144.1, 128.8, 113.2, 110.8, 109.7, 109.2, 108.4, 101.0, 79.0, 76.7, 70.3, 67.2, 63.8, 62.0, 56.3, 55.8, 24.5, 22.5.

< 실시예 21> 2,3,9- 트리메톡시 -8-(3- 메틸 - 부트 -2- 에닐 )-6a,12a- 디히드로 -6 H -크로메노[3,4-b]크로멘-12-온 (2,3,9-Trimethoxy-8-(3-methyl-but-2-enyl)-6a,12a-dihydro-6H-chromeno[3,4-b]chromen-12-one) (28)의 제조

실시예 1에서 제조한 화합물 8(1 당량) 및 아이오도메탄(2 당량)이 들어있는 무수 아세토니트릴 용액에 세슘 카보네이트(1.5 당량)을 첨가하고, 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 상기 혼합물을 물로 식힌 다음, EtOAc로 추출하여 얻은 유기층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 21의 화합물 28을 흰색 고체로 얻었다(수율 41%, 16 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 500 MHz) δ7.80 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 6.74 (s, 1H), 6.56 (d, 1H, J = 8.9 Hz), 6.41 (s, 1H), 5.11 (m, 1H), 4.87 (m, 1H), 4.58 (dd, 1H, J = 11.9, 3.3 Hz), 4.15 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 3.83 (s, 3H), 3.81 (d, 1H, J = 4.1 Hz ), 3.77 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.28 (m, 2H), 1.74 (s, 3H), 1.61 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ190.0, 163.6, 159.2, 149.3, 147.4, 143.6, 131.8, 126.9, 121.6, 117.4, 113.1, 110.3, 105.1, 104.6, 100.7, 71.8, 66.2, 56.2, 55.8, 55.8, 44.3, 25.7, 21.9, 17.6; HRMS (FAB) Calcd for C₂₄H₂₆O₆ (M+H⁺): 410.1732, Found: 410.1735.

< 실시예 22> 9- 아릴옥시 -2,3- 디메톡시 -8-(3- 메틸 - 부트 -2- 에닐 )-6a,12a- 디히드로-6H-크로메노[3,4-b]크로멘-12-온 (9-Allyloxy-2,3-dimethoxy-8-(3-methyl-but-2-enyl)-6a,12a-dihydro-6H-chromeno[3,4-b]chromen-12-one) (29)의 제조

실시예 1에서 제조한 화합물 8(1 당량) 및 아릴아이오다이드(2 당량)가 들어있는 무수 아세토니트릴 용액에 세슘 카보네이트(1.5 당량)을 첨가하고, 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 상기 혼합물을 물로 식힌 다음, EtOAc로 추출하여 얻은 유기층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:6)로 정제하여, 실시예 22의 화합물 29를 연노랑색 고체로 얻었다(수율 39%, 12 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ7.78 (d, 1H, J = 8.9 Hz), 6.75 (s, 1H), 6.53 (d, 1H, J = 8.9 Hz), 6.42 (s, 1H), 5.98 (m, 1H), 5.30 (m, 2H), 5.15 (m, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.58 (m, 2H), 4.16 (d, 1H, J = 11.8 Hz), 3.81 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 3.78 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.33 (m, 2H), 1.74 (s, 3H), 1.62 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ190.0, 162.6, 159.4, 149.4, 147.5, 143.7, 132.5, 131.7, 126.8, 121.6, 117.8, 117.6, 113.2, 110.5, 106.2, 104.7, 100.8, 72.0, 69.0, 66.3, 56.3, 55.8, 44.4, 25.7, 22.1, 17.8; HRMS (FAB) Calcd for C₂₆H₂₈O₆ (M+H⁺): 436.1886, Found: 436.1883.

< 실시예 23> 9- 벤질옥시 -2,3- 디메톡시 -8-(3- 메틸 - 부트 -2- 에닐 )-6a,12a- 디히드로-6H-크로메노[3,4-b]크로멘-12-온 (9-Benzyloxy-2,3-dimethoxy-8-(3-methyl-but-2-enyl)-6a,12a-dihydro-6H-chromeno[3,4-b]chromen-12-one) (30)의 제조

실시예 1에서 제조한 화합물 8(1 당량) 및 벤질브로마이드(2 당량)이 들어있는 무수 아세토니트릴 용액에 세슘 카보네이트(1.5 당량)을 첨가하고, 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 상기 혼합물을 물로 식힌 다음, EtOAc로 추출하여 얻은 유기층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:6)로 정제하여, 실시예 23의 화합물 30을 흰색 고체로 얻었다(수율 25%, 12 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ7.78 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.31 (m, 5H), 6.74 (s, 1H), 6.60 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 6.41 (s, 1H), 5.15 (m, 3H), 4.48 (m, 1H), 4.61 (dd, 1H, J = 11.9, 3.0 Hz), 4.16 (d, 1H, J = 11.9 Hz), 3.81 (d, 1H, J = 4.1 Hz), 3.78 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.35 (m, 2H), 1.66 (s, 3H), 1.61 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ190.0, 162.7, 159.3, 149.4, 147.5, 143.6, 136.3, 131.8, 129.7, 128.6, 128.0, 127.1, 126.9, 122.8, 121.7, 117.9, 113.4, 110.5, 106.3, 104.7, 100.8, 72.0, 70.3, 66.3, 56.3, 55.8, 44.4, 25.7, 22.2, 17.7; HRMS (FAB) Calcd for C₃₀H₃₀O₆ (M+H⁺): 487.2121, Found: 487.2113.

< 실시예 24> 아세트산 2,3- 디메톡시 -8-(3- 메틸 - 부트 -2- 에닐 )-12-옥소-6,6a,12,12a-테트라히드로크로메노[3,4-b]크로멘-9-일 에스테르 (Acetic acid 2,3-dimethoxy-8-(3-methyl-but-2-enyl)-12-oxo-6,6a,12,12a-tetrahydrochromeno [3,4-b]chromen-9-yl ester) (31)의 제조

실시예 1에서 제조한 화합물 8(25 mg, 0.063 mmol) 및 DMAP(촉매량)이 들어있는 CH₂Cl₂(1.0 mL) 용액에 트리에틸아민(0.01 mL, 0.07 mmol) 및 아세틱 무수물(0.05 mL, 0.53 mmol)을 0 ℃의 아르곤 분위기하에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 10분간 교반하고 포화 NH₄Cl 수용액으로 식히고, CH₂Cl₂로 추출하여 얻은 유기층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 24의 화합물 31을 연노랑색 오일로 얻었다(수율 44%, 14 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ7.80 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.70 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.68 (s, 1H), 6.42 (s, 1H), 5.02 (m, 1H), 4.93 (m, 1H), 4.60 (dd, 1H, J = 12.0, 3.2 Hz), 4.17 (d, 1H, J = 12.0 Hz), 3.87 (d, 1H, J = 4.0 Hz), 3.78 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.24 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 1.72 (s, 3H), 1.62 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ190.1, 168.6, 159.8, 154.9, 149.7, 147.6, 143.9, 132.5, 125.9, 123.0, 120.7, 116.4, 110.5, 104.0, 100.9, 72.3, 66.1, 56.3, 55.8, 44.4, 29.6, 25.6, 23.0, 20.8, 17.7; HRMS (FAB) Calcd for C₂₅H₂₆O₇ (M+H⁺): 438.1679, Found: 438.1681.

< 실시예 25> (3 S )-3-(3,4- 디메톡시페닐 )-8,8-디메틸-2,3- 디히드로 -4 H ,8 H - 피라노[2,3-f]크로멘-4-온 ((3S)-3-(3,4-Dimethoxyphenyl)-8,8-dimethyl-2,3-dihydro-4H,8H-pyrano[2,3-f]chromen-4-one) (37)의 제조

제조예 5에서 얻은 화합물 36(10 mg, 0.026 mmol)이 들어있는 무수 THF(1.0 mL) 용액에 질소 분위기하에서 트리페닐포스핀(65 mg, 0.25 mmol) 및 디이소프로필아조디카복실레이트(0.024 mL, 0.12 mmol)가 들어있는 무수 THF(0.5 mL) 용액을 첨가하고, TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 감압하에 반응 혼합물을 농축한 후, 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 25의 화합물 37을 흰색 고체로 얻었다(수율 58%, 5.5 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ7.74 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.82 (s, 2H), 6.77 (s, 1H), 6.61 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.47 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 5.58 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.63 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 1.44 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ190.9, 159.5, 157.6, 149.1, 148.5, 128.9, 128.6, 127.8, 120.6, 115.6, 114.7, 111.8, 111.4, 111.2, 109.1, 77.5, 55.8, 51.3, 29.6, 28.2, 28.2, 21.7; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₂NO₅ (M+H⁺): 367.1545, Found: 367.1552.

< 실시예 26> (6,7- 디메톡시크로만 -4-일)(2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일) 메타논 ((6,7-Dimethoxychroman-4-yl)(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)methanone) (45)의 제조

제조예 12에서 얻은 화합물 44(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:6)로 정제하여, 실시예 26의 화합물 45를 얻었다(수율 55%, 9.9 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ7.79 (dd, 1H, J = 8.5, 2.1 Hz), 7.66 (d, 1H, J = 1.9 Hz), 6.81 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.42 (s, 1H), 6.34 (m, 2H), 5.66 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.61 (t, 1H, J = 5.8 Hz), 4.17 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 2.21 (m, 2H), 1.45 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ199.6, 157.7, 149.4, 149.2, 143.3, 131.3, 130.5, 129.0, 127.4, 121.5, 120.9, 116.3, 112.4, 110.6, 101.1, 77.7, 63.4, 56.4, 55.8, 41.6, 28.4, 28.4, 26.57; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₄NO₅ (M+H⁺): 380.1624, Found: 380.1621.

< 실시예 27> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일) 에타논 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)ethanone) (53)의 제조

아릴 브로마이드 6-브로모-2,2-디메틸-2H-크로멘(1.5 당량)이 들어있는 무수 THF 용액에 n-BuLi(1.4 당량)을 -78 ℃에서 한 방울씩 첨가하고 -78 ℃에서 교반함으로써 아릴 음이온을 생성시켰다. -78 ℃에서 20분간 교반한 후에, 제조예 13에서 얻은 화합물 52(1.0 당량)를 첨가하고 30분간 계속 교반하며 반응온도가 상온이 되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 수용액으로 처리하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 추출물을 염수로 세척하고 MgSO4로 건조시키고 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 2차 알콜을 얻었다.

상기에서 얻은 2차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 실시예 27의 화합물 53을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 46%, 37 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ7.76 (dd, 1H, J = 8.4, 2.2 Hz), 7.62 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 6.76 (m, 4H), 6.29 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 5.61 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 4.10 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 1.40 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ196.3, 157.3, 148.8, 147.7, 131.0, 130.4, 129.4, 127.3, 127.1, 121.5, 121.4, 120.6, 116.0, 112.3, 111.2, 77.4, 55.7, 55.7, 44.5, 28.2 28.2; HRMS (FAB) Calcd for C₂₁H₂₃O₄ (M+H⁺): 339.1596, Found: 339.1595.

< 실시예 28> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)에타논 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)ethanone) (54)의 제조

제조예 27에서 얻은 화합물 51(1.5 당량)이 들어있는 무수 THF 용액에 n-BuLi(1.4 당량)을 -78 ℃에서 한 방울씩 첨가하고 -78 ℃에서 교반함으로써 아릴 음이온을 생성시켰다. -78 ℃에서 20분간 교반한 후에, 제조예 13에서 얻은 화합물 52(1.0 당량)를 첨가하고 30분간 계속 교반하며 반응온도가 상온이 되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 수용액으로 처리하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 추출물을 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조시키고 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 2차 알콜을 얻었다.

상기에서 얻은 2차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 28의 화합물 54를 연노랑색 고체로 얻었다(수율 48%, 80 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.43 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.72 (s, 3H), 6.54 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 6.52 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 5.62 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.12 (s, 2H), 3.77(s, 6H), 3.69(s, 3H), 1.37(s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ198.7, 157.7, 156.3, 148.8, 147.8, 131.1, 130.5, 127.6, 124.8, 121.7, 116.5, 114.8, 112.8, 112.6, 111.2, 63.2, 55.8, 55.8, 50.3, 50.2, 28.1, 28.0; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₅O₅ (M+H⁺): 369.1702, Found: 369.1705.

< 실시예 29> 2-(3,4- 디메톡시페닐 -1-(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)프로판-1-온 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)propan-1-one (56)의 제조

제조예 27에서 얻은 화합물 51(1.5 당량)이 들어있는 무수 THF 용액에 n-BuLi(1.4 당량)을 -78 ℃에서 한 방울씩 첨가하고 -78 ℃에서 교반함으로써 아릴 음이온을 생성시켰다. -78 ℃에서 20분간 교반한 후에, 제조예 14에서 얻은 화합물 55(1.0 당량)를 첨가하고 30분간 계속 교반하며 반응온도가 상온이 되도록 하였다. 상기 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 수용액으로 처리하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 추출물을 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조시키고 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 2차 알콜을 얻었다.

상기에서 얻은 2차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 29의 화합물 56을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 64%, 11 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ7.27 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 6.76 (m, 3H), 6.55 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.48 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 5.62 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.60 (q, 1H, J = 6.9 Hz), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 1.48 (d, 3H, J = 6.9 Hz), 1.39 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ202.5, 157.1, 155.7, 149.0, 147.9, 133.8, 130.7, 130.5, 125.5, 120.2, 116.5, 112.3, 111.2, 77.2, 76.7, 63.3, 55.8, 55.7, 50.0, 43.1, 28.0, 28.0, 19.0; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₇O₅ (M+H⁺): 383.1858, Found: 383.1853.

< 실시예 30> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)-2-메틸프로판-1-온 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)-2-methylpropan-1-one) (57)의 제조

실시예 28의 화합물 54(15 mg, 0.041 mmol)가 들어있는 무수 THF(1.0 mL) 용액을 교반하며, 소듐 하이드라이드(5.0 mg, 0.12 mmol, 미네랄 오일 중 60%) 및 요오드메탄(0.02 mL, 0.16 mmol)을 상온의 아르곤 분위기하에서 첨가하였다. 반응이 끝난 후, 혼합물을 EtOAc(2.0 mL×3)로 추출하여 얻은 추출액의 유기층을 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 30의 화합물 57을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 88%, 14 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 400 MHz) δ6.87 (m, 3H), 6.52 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 6.21 (q, 1H, J = 5.4 Hz), 5.61 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 3.88 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 1.50(s, 3H), 1.37(s, 3H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ206.6, 155.1, 154.1, 148.9, 147.9, 136.2, 130.5, 127.8, 126.7, 118.2, 116.6, 115.0, 111.1, 111.0, 109.8, 77.2, 76.2, 63.6, 55.8, 55.8, 51.6, 27.9, 27.8, 26.3; HRMS (FAB) Calcd for C₂₄H₂₉O₅ (M+H⁺): 397.2015, Found: 397.2015.

< 실시예 31> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)프롭-2-엔-1-온 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)prop-2-en-1-one (58)의 제조

실시예 28의 화합물 54(20 mg, 0.054 mmol)가 들어있는 무수 DMF(1 mL) 용액에 탄산칼륨(15 mg, 0.11 mmol)를 상온의 질소 분위기하에서 첨가하고 상온에서 40분간 교반하며 파라포름알데히드(3 mg, 0.082 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 4시간 동안 교반한 다음, EtOAc(2.0 mL×2)로 추출하였다. 유기 추출물을 NH₄Cl 포화 수용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 31의 화합물 58을 무색 오일로 얻었다(수율 87%, 18 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.30 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.95 (m, 2H), 6.78 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 6.51 (m, 2H), 5.90 (s, 1H), 5.60 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 5.55 (s, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 1.38 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ196.5, 157.3, 156.2, 149.4, 149.1, 148.6, 131.7, 130.4, 129.7, 125.0, 121.7, 120.2, 116.5, 114.8, 111.8, 110.9, 110.7, 77.2, 76.8, 63.1, 55.8, 28.0, 27.9; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₅O₅ (M+H⁺): 381.1702, Found: 381.1709.

< 실시예 32> 1-(3,4- 디메톡시페닐 ) 시클로프로필 )(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘-6-일)메타논 (1-(3,4-Dimethoxyphenyl)cyclopropyl)(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)methanone) (59)의 제조

무수 DMSO(0.5 mL)에 소듐 하이드라이드(1.2 mg, 0.029 mmol, 미네랄 오일 중 60%) 및 트리메틸설폭소늄 아이오다이드(6.5 mg, 0.029 mmol)를 상온의 질소 분위기하에서 첨가하였다. 상기 혼합물을 40분간 교반한 다음, 실시예 31의 화합물 58(10 mg, 0.026 mmol)이 들어있는 무수 DMSO(0.5 mL) 용액을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 1시간 교반하고, NH₄Cl 포화 수용액으로 식히고, EtOAc(×3)로 추출하였다. 유기층을 NH₄Cl 포화 수용액 및 염수로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 32의 화합물 59를 연노랑색 고체로 얻었다(수율 91%, 9 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ6.98 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.78 (m, 2H), 6.67 (d,1H, J = 8.4 Hz), 6.48 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.35 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 5.58 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 3.78 (s, 3H), 3.75(s, 3H), 3.73(s, 3H), 1.67 (q, 2H, J = 4.0 Hz), 1.35(s, 6H), 1.28 (q, 2H, J = 4.0 Hz); ¹³C NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ203.6, 155.4, 153.9, 148.4, 147.8, 133.0, 130.4, 128.7, 126.3, 121.4, 116.5, 114.7, 113.6, 111.4, 110.6, 76.2, 63.1, 55.7, 55.7, 37.1, 27.8, 17.7; HRMS (FAB) Calcd for C₂₄H₂₆O₅ (M+H⁺): 394.1780, Found: 394.1774.

< 실시예 33> ( S )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2H- 크로멘 -6-일)프로판-1-온 ((S)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)propan-1-one) (69)의 제조

CeCl₃·7H₂O(189 mg, 0.52 mmol)를 1-목 플라스크에 넣고 감압(0.1 Torr)하에 서서히 135-140 ℃까지 가열하며 2시간 동안 교반하였다. 플라스크가 뜨거울 때, 아르곤 가스를 주입하고 플라스크를 얼음 수조에 넣어 냉각시켰다. 상기 반응 혼합물을 강하게 교반하며 THF(1.0 mL)를 한번에 모두 첨가한 다음, 얼음 수조를 제거하고 현탁액을 상온의 아르곤 분위기하에서 하루 밤 동안 교반하였다. 다음으로, 플라스크를 다시 -78 ℃로 냉각하고, 제조예 27에서 얻은 화합물 51(61 mg, 0.23 mmol)이 들어있는 무수 THF(1.0 mL) 용액에 n-BuLi(0.13 mL, 0.13mmol)을 -78 ℃에서 첨가한 다음 20분간 교반하여 생성된 아릴 음이온을 첨가하였다. -78 ℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 제조예 19에서 얻은 화합물 68(20 mg, 0.10 mmol)을 첨가하고, 30분간 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 NH₄Cl 포화 수용액으로 처리하고, 생성물을 EtOAc로 추출하고, 염수, NaHCO₃, 염수로 세척하고, 무수 MgSO₄로 건조시켰다. 용매를 증발시키고 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 2차 알콜을 부분입체 이성질체 혼합물로 얻었다(수율 80%, 32 mg).

isomer A: ¹H-NMR (Acetone-d₆, 300 MHz) δ7.22 (d, 1H, J = 8.4 Hz ), 6.73 (m, 3H ), 6.50 (m, 2H), 5.69 (d, 1H, J = 9.9 Hz ), 4.95 (m, 1H), 3.70 (s, 6H), 3.61 (s, 3H), 3.07 (quin, 1H, J=6.8 Hz), 1,35 (s, 6H), 1.28 (d, 3H, J = 6.9 Hz);

isomer B: ¹H-NMR (Acetone-d₆, 500 MHz) δ7.02 (d, 1H, J = 8.4 Hz ), 6.75 (m, 3H ), 6.55 (d, 1H, J = 10.0 Hz ), 6.43 (d, 1H, J = 8.5 Hz ), 5.70 (d, 1H, J = 9.9 Hz ), 4.93 (dd, 1H, J = 7.5, 4.0 Hz), 3.72 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 2.95 (quin, 1H, J = 7.2 Hz), 1,34 (d, 6H, J = 11.8 Hz), 1.06 (d, 3H, J = 7.2 Hz).

상기에서 얻은 2차 알콜(32 mg, 0.083 mmol)을 CH₂C1₂(2.0 mL)에 용해시킨 다음, 분자체(41 mg) 및 N-메틸 모폴린-N-옥사이드(NMO, 15 mg, 0.13 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 10분 동안 교반한 후, 테트라프로필암모늄 페루테네이트(TPAP, 3 mg, 0.0083 mmol)를 첨가하고 반응이 완료되었을 때, 상기 혼합물을 CH₂C1₂로 희석하고, 10% 소듐 설파이트 수용액, 염수, 마지막으로 구리(II) 설페이트 포화 용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 33의 화합물 69를 얻었다(수율 84%, 27 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ7.27 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 6.76 (m, 3H), 6.55 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.48 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 5.62 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.60 (q, 1H, J = 6.9 Hz), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 1.48 (d, 3H, J = 6.9 Hz), 1.39 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ202.5, 157.1, 155.7, 149.0, 147.9, 133.8, 130.7, 130.5, 125.5, 120.2, 116.5, 112.3, 111.2, 77.2, 76.7, 63.3, 55.8, 55.7, 50.0, 43.1, 28.0, 28.0, 19.0; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₇O₅ (M+H⁺): 383.1858, Found: 383.1853.

< 실시예 34> ( R )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2H- 크로멘 -6-일)프로판-1-온 ((R)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)propan-1-one) (72)의 제조

CeCl₃·7H₂O(125 mg, 0.34 mmol)를 1-목 플라스크에 넣고 감압(0.1 Torr)하에 서서히 135-140 ℃까지 가열하며 2시간 동안 교반하였다. 플라스크가 뜨거울 때, 아르곤 가스를 주입하고 플라스크를 얼음 수조에 넣어 냉각시켰다. 상기 반응 혼합물을 강하게 교반하며 THF(1.0 mL)를 한번에 모두 첨가한 다음, 얼음 수조를 제거하고 현탁액을 상온의 아르곤 분위기하에서 하루 밤 동안 교반하였다. 다음으로, 플라스크를 다시 -78 ℃로 냉각하고, 제조예 27에서 얻은 화합물 51(36 mg, 0.14 mmol)이 들어있는 무수 THF(1.0 mL) 용액에 n-BuLi(0.084 mL, 0.13mmol)을 -78 ℃에서 첨가한 다음 20분간 교반하여 생성된 아릴 음이온을 첨가하였다. -78 ℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 제조예 21에서 얻은 화합물 71(13 mg, 0.067 mmol)을 첨가하고, 30분간 교반하였다. 상기 반응 혼합물을 NH₄Cl 포화 수용액으로 처리하고, 생성물을 EtOAc로 추출하고, 염수, NaHCO₃, 염수로 세척하고, 무수 MgSO₄로 건조시켰다. 용매를 증발시키고 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 2차 알콜을 부분입체 이성질체 혼합물로 얻었다(수율 48%, 12 mg).

isomer A: ¹H-NMR (Acetone-d₆, 300 MHz) δ7.22 (d, 1H, J = 8.4 Hz ), 6.73 (m, 3H ), 6.50 (m, 2H), 5.69 (d, 1H, J = 9.9 Hz ), 4.95 (m, 1H), 3.70 (s, 6H), 3.61 (s, 3H), 3.07 (quin, 1H, J=6.8 Hz), 1,35 (s, 6H), 1.28 (d, 3H, J = 6.9 Hz);

isomer B: ¹H-NMR (Acetone-d₆, 500 MHz) δ7.02 (d, 1H, J = 8.4 Hz ), 6.75 (m, 3H ), 6.55 (d, 1H, J = 10.0 Hz ), 6.43 (d, 1H, J = 8.5 Hz ), 5.70 (d, 1H, J = 9.9 Hz ), 4.93 (dd, 1H, J = 7.5, 4.0 Hz), 3.72 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 2.95 (quin, 1H, J = 7.2 Hz), 1,34 (d, 6H, J = 11.8 Hz), 1.06 (d, 3H, J = 7.2 Hz).

상기에서 얻은 2차 알콜(14 mg, 0.036 mmol)을 CH₂C1₂(1.0 mL)에 용해시킨 다음, 분자체(18 mg) 및 N-메틸 모폴린-N-옥사이드(NMO, 7.0 mg, 0.055 mmol)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 10분 동안 교반한 후, 테트라프로필암모늄 페루테네이트(TPAP, 1.3 mg, 0.0036 mmol)를 첨가하고 반응이 완료되었을 때, 상기 혼합물을 CH₂C1₂로 희석하고, 10% 소듐 설파이트 수용액, 염수, 마지막으로 구리(II) 설페이트 포화 용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 실시예 34의 화합물 72를 얻었다(수율 71%, 10 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ7.27 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 6.76 (m, 3H), 6.55 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.48 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 5.62 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.60 (q, 1H, J = 6.9 Hz), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.65 (s, 3H), 1.48 (d, 3H, J = 6.9 Hz), 1.39 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ202.5, 157.1, 155.7, 149.0, 147.9, 133.8, 130.7, 130.5, 125.5, 120.2, 116.5, 112.3, 111.2, 77.2, 76.7, 63.3, 55.8, 55.7, 50.0, 43.1, 28.0, 28.0, 19.0; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₇O₅ (M+H⁺): 383.1858, Found: 383.1849.

< 실시예 35> 3-(3,4- 디메톡시페닐 )-8,8-디메틸-4 H ,8 H - 피라노[2,3- f ]크로멘 -4-온 (3-(3,4-Dimethoxyphenyl)-8,8-dimethyl-4H,8H-pyrano[2,3-f]chromen-4-one) (80)의 제조

제조예 32의 화합물 107(15 mg, 0.042 mmol)이 들어있는 무수 톨루엔(1.0 mL) 용액에 디메틸아미노디메톡시메탄(6.7 ㎕, 0.051 mmol)을 상온에서 첨가하고 2시간 환류시킨 다음, 감압하에 용매를 제거하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제하여, 실시예 35의 화합물 80을 얻었다(수율 100%, 20 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ8.00(d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.90 (s, 1H), 7.14 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.98 (dd, 1H, J = 8.3, 2.0 Hz), 6.86 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 6.80 (d, 1H, J = 9.0 Hz), 6.75 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 5.66 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 3.86 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 1.43 (s, 6H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ175.8, 157.2, 152.2, 151.8, 149.0, 148.7, 130.8, 126.6, 124.6, 124.6, 120.9, 118.2, 115.2, 114.8, 112.5, 111.1, 109.1, 77.6, 55.9, 55.8, 28.0, 28.0; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₁O₅ (M+H⁺): 365.1389, Found: 365.1394.

< 실시예 36> 6,7- 디메톡시 -2 H - 크로멘 -4- 일(2,2-디메틸-2 H -크로멘-6-일)메타논 (6,7-Dimethoxy-2H-chromen-4-yl(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)methanone) (81)의 제조

제조예 35에서 얻은 화합물 118(49 mg, 0.179 mmol)을 무수 THF(2.0 mL) 용액에 질소 분위기하에서 넣고 n-BuLi(0.12 mL, 0.20 mmol, 헥산 중 1.6 M)을 -78 ℃에서 한 방울씩 가하였다. 반응 혼합물을 -78 ℃에서 20분간 교반한 후, 제조예 37에서 얻은 화합물 120(78 mg, 0.357 mmol)이 들어있는 무수 THF(1.0 mL) 용액을 캐뉼라를 통해 한 방울씩 첨가하였다. 상기 과정을 통해 얻은 연노랑색 용액을 -78 ℃에서 20분간 교반한 다음, EtOAc(×2)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에 회전 증발기로 농축하여 얻은 미정제 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:10)로 정제하여, 연노랑색 고체의 중간체 2차 알콜을 얻었다(수율 61%, 45 mg).

¹H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ7.15 (dd, 1H, J = 8.3, 2.2 Hz), 7.03 (d, 1H, J = 2.2Hz), 6.75 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 6.62 (s, 1H), 6.41 (s, 1H), 6.26 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.83 (t, 1H, J = 4.1 Hz), 5.59 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.52 (br, 1H), 4.77 (m, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 1.39(s, 6H).

상기에서 얻은 2차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 티오황산나트륨(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 화합물 81을 얻었다(수율 87%, 39 mg).

¹H NMR (CDCl₃ , 300 MHz) δ7.70 (dd, 1H, J = 8.4, 2.2 Hz), 7.59 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 6.91 (s, 1H), 6.77 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.48 (s, 1H), 6.32 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.96 (t, 1H, J = 4.0 Hz), 5.65 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.77 (d, 2H, J = 4.0 Hz), 3.84 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 1.44 (s, 6H): ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ193.7, 157.8, 160.0, 148.4, 143.4, 134.7, 132.1, 131.2, 129.7, 128.5, 124.1, 121.4, 120,6, 116.1, 112.0, 108.3, 100.4, 77.7, 64.6, 56.1, 55.9, 28.3, 28.3; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₂O₅ (M+H⁺): 378.1467, Found: 378.1475.

< 실시예 37> 6,7- 디메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -4-일)(4- 메톡시 -2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)메타논 (6,7-Dimethoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-4-yl)(4-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)methanone) (82)의 제조

화합물 118 대신 화합물 119를 사용한 것, 화합물 120 대신 화합물 121을 사용한 것, 그리고 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)를 사용한 것을 제외하고는 실시예 36과 동일한 방법으로 수행하여 화합물 82를 무색 고체로 얻었다(수율 44%, 29 mg).

2차 알콜: ¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) : δ7.01 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.59 (s, 1H), 6.56 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.50 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.38 (s, 1H), 5.91 (br, 1H), 5.74 (s, 1H), 5.63 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 3.88 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.39 (s, 6H);

화합물 82: ¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.60 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 5.65 (d, J = 10 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.72 (s, 3H), 1.43 (s, 6H), 1.42 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ194.3, 157.4, 156.3, 150.1, 147.3, 143.1, 136.1, 133.2, 131.8, 130.4, 124.7, 116.5, 114.8, 111.8, 110.7, 108.8, 108.7, 101.1, 77.4, 76.8, 75.4, 63.1, 56.3, 56.8, 28.0, 26.6; HRMS (FAB) Calcd for C₂₆H₂₉O₆ (M+H⁺): 437.1964, Found: 437.1973.

< 실시예 38> 6,7- 디메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -4-일)(2,2-디메틸-2 H - 크로멘-6-일)메타논 (6,7-Dimethoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-4-yl)(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)methanone) (83)의 제조

화합물 118 대신 화합물 119를 사용한 것, 그리고 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)를 사용한 것을 제외하고는 실시예 36과 동일한 방법으로 수행하여 화합물 83을 무색 고체로 얻었다(수율 51%, 35 mg).

2차 알콜 : ¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.09 (dd, 1H, J = 8.3 Hz), 6.98 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.50 (s, 1H), 6.35 (s, 1H), 6.21 (d, 1H,0 J = 9.9 Hz), 5.65 (s, 1H), 5.54 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.46 (br, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 1.39 (s, 6H), 1.34 (s, 6H);

화합물 83: ¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.68 (dd, 1H, J = 8.4, 2.2 Hz), 7.57 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 6.86 (s, 1H), 6.76 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.46 (s, 1H), 6.32 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.74 (s, 1H), 5.65 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 3.84 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 1.47 (s, 6H), 1.44 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 75 MHz) δ194.0, 157.8, 150.4, 147.3, 143.2, 132.5, 132.3, 132.1, 131.2, 130.1, 128.5, 121.6, 120.7, 116.1, 108.7, 101.2, 77.7, 77.2, 75.5, 56.4, 55.9, 50.3, 50.3, 28.4, 27.0; HRMS (FAB) Calcd for C₂₅H₂₆O₅ (M+H⁺): 406.1780, Found: 406.1775.

< 실시예 39> 6,7- 디메톡시 -2 H - 크로멘 -4-일)(4- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)메타논 (6,7-Dimethoxy-2H-chromen-4-yl)(4-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)methanone) (84)의 제조

화합물 120 대신 화합물 121을 사용한 것, 그리고 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)를 사용한 것을 제외하고는 실시예 36과 동일한 방법으로 수행하여 화합물 84를 무색 고체로 얻었다(수율 41%, 22 mg).

2차 알콜: ¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.01 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 6.60 (s, 1H), 6.48 (s, 1H), 6.34 (s, 1H), 5.83 (m, 2H), 5.59 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.73 (d, 1H, J = 3.8 Hz), 3.81 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 1.34 (s, 6H);

화합물 84: ¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) : δ7.31(d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.27(s, 1H), 6.59(d, J = 10.1 Hz, 1H), 6.56(d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.47(s, 1H), 6.11 (t, J = 4.0 Hz, 1H), 5.65(d, J = 10 Hz, 1H), 4.78(d, J = 4.2 Hz, 2H), 3.84(s, 3H), 3.77(s, 3H), 3.72(s, 3H), 1.43(s, 6H): ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ193.3, 157.3, 156.1, 149.8, 148.6, 143.3, 135.4, 131.6, 130.5, 128.2, 124.3, 116.4, 114.8, 111.8, 111.7, 108.5, 100.3, 77.2, 64.7, 63.1, 56.1, 55.8, 27.9, 27.9; LRMS (FAB) m/z 409 (M+H⁺).

< 실시예 40> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)-2-(페닐설포닐)에타논 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)-2-(phenylsulfonyl)ethanone) (86)의 제조

제조예 28에서 얻은 화합물 105(0.407 mmol)이 들어있는 무수 THF(5.0 mL) 용액에 n-BuLi(0.26 mL, 0.444 mmol, 헥산 중 1.6 M)을 -78 ℃에서 한 방울씩 가하고 상기 혼합물을 같은 온도에서 1시간 교반하였다. 상기 반응 혼합물에 제조예 38에서 얻은 화합물 121(0.448 mmol)이 들어있는 무수 THF(3.0 mL)를 -78 ℃에서 천천히 가하였다. 첨가 1시간 후, 상기 반응 혼합물을 물로 반응을 종료시키고 EtOAc(×3)로 추출하였다. 추출물을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 감압하에 농축하여 얻은 미정제 잔류물(화합물 126)을 다음 단계에 별도의 정제 과정없이 사용하였다.

상기에서 얻은 화합물 126(183 mg, 0.339 mmol)이 들어있는 무수 CH₂Cl₂(5.0 mL) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(286 mg, 0.660 mmol)을 상온에서 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 탄산나트륨 포화 수용액:티오황산나트륨 포화 수용액(1:1, 4.0 mL)으로 처리하고 30분간 교반한 후, 상기 혼합물을 물에 붓고 CH₂Cl₂(×3)로 추출하고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 화합물 86을 얻었다(수율 63%, 137 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.53 (m, 3H), 7.35 (m, 3H), 6.80 (m, 2H), 6.68 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 6.35 (s, 1H), 5.61 (d, J = 10.1 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 1.38(s, 3H), 1.35(s, 3H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ206.6, 155.1, 154.1, 148.9, 147.9, 136.2, 130.5, 127.8, 126.7, 118.2, 116.6, 115.0, 111.1, 111.0, 109.8, 77.2, 76.2, 63.6, 55.8, 55.8, 51.6, 27.9, 27.8, 26.3; HRMS (FAB) Calcd for C₂₄H₂₉O₅ (M+H⁺): 397.2015, Found: 397.2015.

< 실시예 41> (3,4- 디메톡시페닐 )(2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일) 메타논 ((3,4-Dimethoxyphenyl)(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)methanone) (87)의 제조

제조예 40에서 얻은 화합물 132(1.0 당량)가 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 소듐 티오설페이트(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:8)로 정제하여, 화합물 87을 무색 고체로 얻었다(수율 81%, 86 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.56 (d, 1H, J = 8.4, 2.2 Hz), 7.47 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 7.41 (d, 1H, J = 1.8 Hz), 7.34 (d, 1H, J = 8.2, 2.0 Hz), 6.88 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.79 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.34 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.65 (d, 1H, J = 9.9 Hz),3.94 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 1.45 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ194.3, 156.7, 152.5, 148.8, 131.8, 131.1, 130.7, 130.7, 128.5, 124.7, 121.6, 120.5, 115.7, 112.1, 109.7, 77.4, 56.0, 28.3, 28.2.; LRMS (FAB) m/z 325 (M+H⁺).

< 실시예 42> ( E )-1-(3,4- 디메톡시페닐 )-3-(2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일) 프롭 -2-엔-1-온 ((E)-1-(3,4-Dimethoxyphenyl)-3-(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)prop-2-en-1-one) (88)의 제조

3',4'-디메톡시페닐아세토페논(1.0 당량) 및 제조예 37에서 얻은 화합물 120(2.0 당량)이 들어있는 순 에틸 알콜(0.1 M) 용액에 수산화칼륨 수용액(1.5 당량)을 상온에서 첨가한 다음, 5시간 동안 환류시켰다. 상온으로 식힌 후, 감압하에 회전증발기로 용매를 제거하고 얻은 미정제 잔류물을 EtOAc(×2)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 회전 증발기로 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 화합물 88을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 59%, 29 mg).

¹H NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.62 (m, 3H), 7.35 (m, 2H), 7.21 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.86 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.74 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.29 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.61 (d, 1H, J = 9.7 Hz), 3.90 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 1.39 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ188.6, 155.3, 153.0, 149.1, 143.9, 131.6, 131.3, 129.7, 127.7, 123.2, 121.6, 121.3, 119.1, 116.8, 116.0, 110.7, 109.9, 77.1, 56.1, 56.0, 28.2, 28.1.

< 실시예 43> ( E )-3-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2 H - 크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온 ((E)-3-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)prop-2-en-1-one) (89)의 제조

제조예 41에서 얻은 화합물 112(100 mg, 0.46 mmol) 및 3,4-디메톡시벤즈알데히드(154 mg, 0.92 mmol)가 들어있는 순 에틸 알콜(4.0 mL)에 수산화카륨 수용액(1.0 mL, 0.5 mM)을 상온에서 첨가하고 5시간 동안 환류시켰다. 상온으로 식힌 후, 가압하에 농축하여 얻은 미정제 잔류물을 EtOAc(10 mL) 및 물(5.0 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 MgSO₄로 건조시키고 감압하에 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 화합물 89를 흰색 고체로 얻었다(수율 57%, 95 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ13.77 (s, 1H), 7.78 (d, 1H, J = 15.3 Hz), 7.68 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.37 (d, 1H, J = 15.3 Hz), 7.18 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 7.10 (s, 1H), 6.84 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 6.71 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.33 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 5.54 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 3.90 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 1.42 (s, 6H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ191.7, 160.8, 159.5, 151.4, 149.1, 144.3, 130.4, 127.9, 127.6, 123.2, 117.8, 115.8, 113.9, 111.0, 110.2, 110.0, 109.3, 108.8, 108.0, 77.6, 55.8, 28.2.

< 실시예 44> ( E )-3-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일) 프롭 -2-엔-1-온 ((E)-3-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)prop-2-en-1-one) (90)의 제조

3,4-디메톡시벤즈알데히드(1.0 당량) 및 제조예 42에서 얻은 화합물 134(2.0 당량)가 들어있는 순 에틸 알콜(0.1 M) 용액에 수산화칼륨 수용액(1.5 당량)을 상온에서 첨가한 다음, 5시간 동안 환류시켰다. 상온으로 식힌 후, 감압하에 회전증발기로 용매를 제거하고 얻은 미정제 잔류물을 EtOAc(×2)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, 무수 MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 회전 증발기로 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 화합물 90을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 57%, 23 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.87 (dd, 1H, J = 8.4, 2.0 Hz), 7.77 (m, 2H), 7.41 (d, 1H, J = 15.5 Hz), 7.24 (m, 2H), 6.92 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.87 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.43 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.71 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 3.98 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 1.49 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ190.7, 188.5, 157.1, 151.1, 149.1, 143.9, 131.2, 131.0, 130.1, 127.9, 127.0, 122.8, 121.6, 120.7, 119.6, 116.0, 111.0, 110.0, 77.4, 55.8, 28.2, 28.1; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₃O₄ (M+H⁺): 351.1596, Found: 351.1590.

*< 실시예 45> (E)-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2H- 크로멘 -6-일)-3-(2,4,5- 트리메톡시페닐)프롭-2-엔-1-온 ((E)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)-3-(2,4,5-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) (91)의 제조

3,4-디메톡시벤즈알데히드 대신 2,4,5-트리메톡시벤즈알데히드를 사용한 것을 제외하고는 실시예 43과 동일한 방법으로 실시하여 화합물 91을 얻었다 (수율 61%, 29 mg).

¹HNMR(CDCl_{3 ,} 300MHz)δ7.87(dd,1H,J = 8.4, 2.0 Hz), 7.77 (m, 2H), 7.41 (d, 1H, J = 15.5 Hz), 7.24 (m, 2H), 6.92 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.87 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.43 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.71 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 3.98 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 1.49 (s, 6H); ¹³CNMR(CDCl₃,100MHz)δ190.7,188.5,157.1,151.1, 149.1, 143.9, 131.2, 131.0, 130.1, 127.9, 127.0, 122.8, 121.6, 120.7, 119.6, 116.0, 111.0, 110.0, 77.4, 55.8, 28.2, 28.1; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₃O₄(M+H⁺): 351.1596, Found: 351.1590.

< 실시예 46> ( E )-3-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)프롭-2-엔-1-온 ((E)-3-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)prop-2-en-1-one) (92)의 제조

페놀(1 당량), 탄산칼륨(3 당량) 및 요오드메탄(1.5 당량)이 들어있는 아세톤(0.25 M) 혼합물을 4시간 동안 환류시키고 상온에서 하루 밤 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 물로 처리하고, CH₂Cl₂(×3)로 추출하였다. 추출물을 물로 세척하고, 무수 MgSO₄로 건조시키고, 감압하에 용매를 제거하여 얻은 미정제 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 화합물 92를 연노랑색 고체로 얻었다(수율 81%, 18 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300 MHz) δ7.60 (d, 1H, J = 14.5 Hz), 7.46 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.30 (d, 1H, J = 14.5 Hz), 7.12 (m, 2H), 6.82 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.58 (m, 2H), 6.63 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 3.86 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 1.39 (s, 6H); HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₅O₅ (M+H⁺): 381.1702, Found: 381.1698.

< 실시예 47> (E)-1-(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2H- 크로멘 -6-일)-3-(2,4,5- 트리메톡시페닐)프롭-2-엔-1-온 ((E)-1-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)-3-(2,4,5-trimethoxyphenyl)prop-2-en-1-one) (93)의 제조

화합물 89 대신 화합물 91을 사용한 것을 제외하고는 실시예 46과 동일한 방법으로 실시하여 화합물 93을 얻었다(수율 75%, 20 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 300MHz)δ7.96(d,1H,J = 15.9 Hz), 7.44 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.32 (d, 1H, J = 15.9 Hz), 7.05 (s, 1H), 6.57 (m, 1H), 6.44 (s, 1H), 5.62 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 3.87 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 1.39 (s, 6H); ¹³CNMR(CDCl₃,100MHz)δ191.5, 156.9, 156.0, 154.4, 152.3, 143.2, 138.6, 131.1, 130.4, 126.0, 124.1, 116.6, 115.7, 114.7, 112.4, 110.9, 96.9, 76.7, 63.2, 56.5, 56.4, 56.3, 28.0, 28.0; HRMS(FAB) Calcd for C₂₄H₂₇O₆ (M+H⁺): 411.1808, Found:411.1813.

< 실시예 48> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )-8,8-디메틸-4 H ,8 H - 피라노[2,3- f ]크로멘 -4-온 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-8,8-dimethyl-4H,8H-pyrano[2,3-f]chromen-4-one) (94)의 제조

실시예 43에서 제조한 화합물 89(50 mg, 0.14 mmol)이 들어있는 무수 DMSO(5.0 mL) 용액에 요오드의 촉매량을 상온에서 첨가하고 TLC로 모니터링하며, 반응이 완료될 때까지 환류시켰다. 상온으로 식힌 후, 상기 혼합물을 20% 티오황산나트륨 수용액(10 mL)에 붓고, EtOAc(10 mL)로 추출하였다. 유기층을 물 및 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고 감압하에 회전증발기로 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(CH₂Cl₂:MeOH=1:10)로 정제하여, 화합물 94를 흰색 고체로 얻었다(수율 28%, 14 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 300 MHz) δ7.92 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 7.48 (dd, 1H, J = 8.4, 2.0 Hz), 7.29 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.93 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.81 (m, 2H), 6.66 (s, 1H), 5.70 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 3.91 (s, 3H), 3.90 (s, 3H), 1.45 (s, 6H); HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₁O₅ (M+H⁺): 365.1389, Found: 365.1387.

< 실시예 49> 2-(3,4- 디메톡시페닐 )- N -(5- 메톡시 -2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)아세트-아미드 (2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-N-(5-methoxy-2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)acet-amide) (95)의 제조

3',4'-디메톡시페닐아세트산(1.0 당량), PyBOP(1.0 당량) 및 제조예 26에서 얻은 화합물 50(1.2 당량)이 들어있는 무수 디클로로메탄(0.3 M) 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민(2.2 당량)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 분위기하에서 하루 밤 동안 교반하고, 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 EtOAc에 용해시켰다. 상기 용액을 5% 염산 수용액으로 추출하고, 염수로 세척하고, 탄산수소나트륨 포화 수용액으로 추출하고, 무수 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켜 얻은 갈색 오일 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 화합물 95를 노랑색 고체로 얻었다(수율 91%, 31 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 400 MHz) δ7.93 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.52 (br, 1H), 6.82 (m, 3H), 6.49 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 6.37 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.57 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 3.82 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.62 (s, 2H), 3.35 (s, 3H), 1.31 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ168.8, 149.5, 149.3, 148.3, 144.8, 131.2, 127.0, 124.2, 121.5, 120.3, 116.2, 114.1, 112.3, 112.0, 111.5, 75.4, 61.4, 55.7, 55.7, 44.3, 27.3, 27.2; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₅NO₅ (M+H⁺): 384.1811, Found: 384.1806.

< 실시예 50> N- (3,4- 디메톡시벤질 )-2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6- 카복사미드 ( N- (3,4-Dimethoxybenzyl)-2,2-dimethyl-2H-chromene-6-carboxamide) (96)의 제조

3,4-디메톡시벤질아민(1.0 당량), PyBOP(1.0 당량) 및 제조예 38에서 얻은 화합물 121(1.2 당량)이 들어있는 무수 디클로로메탄(0.3 M) 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민(2.2 당량)을 첨가한 것을 제외하고는 실시예 49의 방법과 동일하게 실시하여 화합물 96을 노랑색 고체로 얻었다(수율 79%, 41 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 400 MHz) δ7.51 (dd, 1H, J = 8.3, 2.0 Hz), 7.43 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 6.80 (m, 3H), 6.71 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 6.46 (m, 2H), 5.60 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 4.49 (d, 1H, J = 5.5 Hz), 3.81 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 1.39 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ166.7, 155.8, 149.0, 148.3, 131.2, 130.9, 127.8, 126.6, 125.5, 121.6, 120.8, 120.1, 116.0, 111.2, 111.1, 77.6, 55.8, 55.7, 43.8, 28.1, 28.1; HRMS (FAB) Calcd for C₂₁H₂₃NO₄ (M+H⁺): 354.1705, Found: 354.1703.

< 실시예 51> N- (3,4- 디메톡시페닐 )-2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6- 카복사미드 ( N- (3,4-Dimethoxyphenyl)-2,2-dimethyl-2H-chromene-6-carboxamide) (97)의 제조

3,4-디메톡시아닐린(1.0 당량), PyBOP(1.0 당량) 및 제조예 38에서 얻은 화합물 121(1.2 당량)이 들어있는 무수 디클로로메탄(0.3 M) 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민(2.2 당량)을 첨가한 것과 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:3)로 정제한 것을 제외하고는 실시예 49의 방법과 동일하게 실시하여 화합물 97을 노랑색 고체로 얻었다(수율 87%, 29 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 400 MHz) δ7.89 (s, 1H), 7.53 (dd, 1H, J = 8.8, 2.2 Hz), 7.50 (d, 1H, J = 2.3 Hz), 7.42 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 6.96 (dd, 1H, J = 8.6, 2.3 Hz), 6.76 (m, 2H), 6.28 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 5.63 (d, 1H, J = 9.8 Hz), 3.82 (s, 6H), 1.42 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ184.5, 165.2, 156.0, 148.9, 145.7, 131.7, 131.4, 127.9, 127.0, 125.6, 121.5, 121.0, 116.2, 112.1, 111.2, 105.9, 77.2, 56.0, 56.0, 55.7, 28.1, 28.1; HRMS (FAB) Calcd for C₂₀H₂₁NO₄ (M+H⁺): 340.1549, Found: 340.1542.

< 실시예 52> N- (2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)-3,4- 디메톡시벤즈아미드 ( N- (2,2-Dimethyl-2H-chromen-6-yl)-3,4-dimethoxybenzamide) (98)의 제조

3,4-디메톡시벤조산(1.0 당량), PyBOP(1.0 당량) 및 제조예 26에서 얻은 화합물 50(1.2 당량)이 들어있는 무수 디클로로메탄(0.3 M) 혼합물에 N,N-디이소프로필에틸아민(2.2 당량)을 첨가하였다. 상기 혼합물을 질소 분위기하에서 하루 밤 동안 교반하고, 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 EtOAc에 용해시켰다. 상기 용액을 5% 염산 수용액으로 추출하고, 염수로 세척하고, 탄산수소나트륨 포화 수용액으로 추출하고, 무수 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 용매를 증발시켜 얻은 갈색 오일 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 화합물 98을 노랑색 고체로 얻었다(수율 60%, 17 mg).

*¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ8.16 (s, 1H), 8.08 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.49 (s, 1H), 7.36 (dd, 1H, J = 7.8. 1.8 Hz), 6.89 (d, 1H, J = 7.8 Hz), 6.61 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 6.53 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 6.57 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 3.93 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 3.78 (s, 1H), 1.40 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ164.7, 151.9, 149.8, 149.1, 145.4, 131.4, 127.7, 124.6, 121.2, 119.1, 116.5, 114.3, 112.4, 110.7, 110.3, 75.6, 62.0, 56.0, 27.5, 27.5; LRMS (FAB) m/z 370 (M+H⁺).

< 실시예 53> ( R )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)프로판-1-온 ((R)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)propan-1-one) (99)의 제조

아릴 브로마이드 화합물 131(1.5 당량)이 들어있는 무수 THF 용액에 n-BuLi(1.4 당량)을 -78 ℃에서 한 방울씩 첨가하고, -78 ℃에서 교반함으로써 아릴 음이온을 생성시켰다. -78 ℃에서 20분간 교반한 후에, 제조예 21에서 얻은 화합물 71(1.0 당량)을 첨가하고 30분간 계속 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 수용액으로 처리하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 추출물을 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조시키고 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 2차 알콜을 얻었다(수율 48%, 19 mg).

상기에서 얻은 2차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 소듐 티오설페이트(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 화합물 99를 얻었다(수율 85%, 16 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ7.73 (dd, 1H, J = 8.4, 1.7 Hz), 7.60 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 6.78 (m, 3H), 6.68 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 6.27 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.59 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.54 (q, 1H, J = 6.8 Hz), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 1.46 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 1.39 (s, 6H); ¹³C NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ198.9, 157.1, 149.2, 147.8, 134.3, 130.9, 130.5, 129.4, 127.3, 121.6, 120.5, 119.9, 115.9, 111.4, 110.5, 77.4, 55.8, 55.7, 46.8, 28.3, 28.3, 19.5; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₄O₄ (M+H⁺): 353.1753, Found: 353.1760.

< 실시예 54> ( S )-2-(3,4- 디메톡시페닐 )-1-(2,2-디메틸-2 H - 크로멘 -6-일)프로판-1-온 ((S)-2-(3,4-Dimethoxyphenyl)-1-(2,2-dimethyl-2H-chromen-6-yl)propan-1-one) (100)의 제조

아릴 브로마이드 화합물 131(1.5 당량)이 들어있는 무수 THF 용액에 n-BuLi(1.4 당량)을 -78 ℃에서 한 방울씩 첨가하고 -78 ℃에서 교반함으로써 아릴 음이온을 생성시켰다. -78 ℃에서 20분간 교반한 후에, 제조예 19에서 얻은 화합물 68(1.0 당량)을 첨가하고 30분간 계속 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 포화 NH₄Cl 수용액으로 처리하고 EtOAc로 추출하였다. 상기 추출물을 염수로 세척하고 MgSO₄로 건조시키고 용매를 증발시켜 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:4)로 정제하여, 2차 알콜을 얻었다(수율 59%, 13 mg).

상기에서 얻은 2차 알콜(1.0 당량)이 들어있는 CH₂Cl₂(0.03 M) 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 페리오디난(3.0 당량)을 첨가하고, 1시간 교반한 후, 상기 반응 혼합물을 CH₂Cl₂로 희석하고 소듐 티오설페이트(10%)를 첨가하였다. 상기 혼합물을 상온에서 두 층으로 분리되어 얻어질 때까지 10분 동안 교반하였다. 상기에서 얻은 유기층을 포화 NaHCO₃ 수용액으로 세척하고, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 화합물 100을 얻었다(수율 79%, 9.8 mg, 76% ee).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ7.74 (dd, 1H, J = 8.4, 1.7 Hz), 7.60 (d, 1H, J = 1.6 Hz), 6.78 (m, 3H), 6.68 (d, 1H, J = 8.5 Hz), 6.28 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.59 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.54 (q, 1H, J = 6.8 Hz), 3.82 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 1.46 (d, 3H, J = 6.8 Hz), 1.40 (s, 32H), 1.39 (s, H); ¹³C NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ198.9, 157.1, 149.2, 147.8, 134.3, 130.9, 130.5, 129.4, 127.4, 121.7, 120.5, 119.9, 116.0, 111.4, 110.5, 77.5, 55.8, 55.7, 46.8, 28.3, 28.3, 19.6; HRMS (FAB) Calcd for C₂₂H₂₄O₄ (M+H⁺): 353.1753, Found: 353.1759.

< 실시예 55> (7 S ,7 a R ,3 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-7-( 프롭 -2-엔- 옥시 )-7,7a,13,13a-테트라히드로-3H-크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘 ((7S,7aR,3aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-7-(prop-2-en-oxy)-7,7a,13,13a-tetrahydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromene) (17)의 제조

실시예 7에서 제조한 화합물 14(1 당량)가 용해되어 있는 무수 THF 용액에 0 ℃에서 3-아이오도프로펜(1.5당량)을 첨가한 다음, 0 ℃에서 t-BuOK 용액(THF 중 1 M, 1 당량)을 한방울씩 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 0 ℃에서 TLC로 모니터링하며 반응이 완료될 때까지 교반한 다음, 포화 NH₄Cl 수용액으로 식히고 EtOAc로 추출하였다. 추출액 중 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 여과하고 감압하에 농축하여 얻은 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:5)로 정제하여, 화합물 101을 무색 고체로 얻었다(수율 68%, 15 mg).

¹H NMR (CDCl_{3 ,} 500 MHz) δ7.93 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 6.79 (s, 1H), 6.64 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 6.41 (s, 1H), 6.36 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 5.66 (m, 1H), 5.54 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 5.56 (m, 2H), 4.78 (quin, 1H, J = 5.3Hz), 4.57 (m, 2H), 4.23 (dd, 1H, J = 9.4, 3.8 Hz) 3.90 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 1.39 (s, 3H); ¹³C NMR (CDCl₃, 125 MHz) δ154.1, 149.1, 149.0, 148.5, 143.4, 134.7, 129.0, 128.9, 116.5, 116.4, 113.9, 111.6, 109.9, 109.9, 108.5, 100.3, 75.9, 73.8, 70.0, 69.6, 65.8, 56.5, 55.7, 37.0, 27.9, 27.8.

< 비교예 1> (7 a S ,13 a S )-9,10- 디메톡시 -3,3-디메틸-13,13a- 디히드로 -3 H -크로메노[3,4-b]피라노[2,3-h]크로멘-7(7aH)-온 ((7aS,13aS)-9,10-Dimethoxy-3,3-dimethyl-13,13a-dihydro-3H-chromeno[3,4-b]pyrano[2,3-h]chromen-7(7aH)-one) (Deguelin)의 제조

실시예 1의 화합물 8(128 mg, 0.32 mmol)이 용해되어 있는 무수 CH₂Cl₂(4.0 mL) 용액에 -30 ℃의 아르곤 분위기하에서 페닐셀레닐 클로라이드(68 mg, 0.35 mmol)를 넣고, -30 ℃를 유지하며 10분간 교반한 다음 상온이 될 때까지 2시간 동안 교반하고 추가로 1시간 더 교반하였다. 다음으로, 상기 반응 혼합물을 감압하여 용매를 제거하고 얻은 잔류물을 THF(4.0 mL)에 용해시킨 다음, 0 ℃에서 과산화수소(물 중 30%, 0.06 mL)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 상온이 될 때까지 교반하며 TLC로 모니터링하고, EtOAc(8.0 mL) 및 물(4.0 mL)을 첨가하였다. 유기층을 분리하고 5% NaHCO₃ 수용액 및 염수로 세척한 다음, MgSO₄로 건조시키고, 여과하고, 농축하여 얻은 미정제 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(EtOAc:n-헥산=1:2)로 정제하여, 데구엘린(Deguelin)을 연노랑색 고체로 얻었다(수율 61%, 78 mg).

¹H-NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ7.72 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 6.77 (s, 1H), 6.62 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 6.43 (s, 1H), 6.43 (d, 1H, J = 8.7 Hz), 5.53 (d, 1H, J = 10.0 Hz), 4.89 (m, 1H), 4.17 (d, 1H, J = 12.0 Hz), 3.82 (d, 1H, J = 4.1 Hz), 3.78 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 1.43 (s, 3H), 1.36 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl₃, 100 MHz) δ189.2, 160.0, 156.9, 149.4, 147.4, 143.8, 128.6, 128.5, 115.7, 112.7, 111.4, 110.4, 109.1, 104.7, 100.9, 77.6, 72.4, 66.2, 56.3, 55.8, 44.3, 28.4, 28.1; HRMS (FAB) Calcd for C₂₃H₂₃O₆ (M+H⁺): 395.1495, Found: 395.1495.

< 실험예 1> 암세포 성장 억제 평가

본 발명에 따른 실시예의 화합물들이 암세포의 성장을 억제하는 정도를 알아보기 위하여 다음과 같이 실험을 수행하였다. 구체적으로, H1299 NSCLC(non-small cell lung cancer) 세포를 96-웰 플레이트에 5 x 10³ cells/well 농도로 분주하고 37 ^oC, 5% CO₂ 조건에서 24시간동안 배양한다. 각 실시예의 화합물을 DMSO에 용해(10 nM, 100 nM, 1 uM, 10 uM)시켜 각 웰에 처리하고, 48시간 후에 MTS 시약(3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-5-(3-카복시메톡시페닐)-2-(4-설포페닐)-2H-테트라졸리움)을 사용하여 세포 성장을 측정하였다. 동일한 실험을 3회 실시하여 각 분석 결과의 표준편차를 보정하였고, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

화합물	IC50(μM)
비교예 1 (Deguelin)	0.11
실시예 1 (화합물 8)	NA
실시예 2 (화합물 9)	9.8
실시예 3 (화합물 10)	0.87
실시예 4 (화합물 11)	0.97
실시예 5 (화합물 12)	10.1
실시예 7 (화합물 13)	4.2
실시예 6 (화합물 14)	0.01
실시예 8 (화합물 15)	4.1
실시예 9 (화합물 16)	9.8
실시예 10 (화합물 17)	10.5
실시예 11 (화합물 18)	NA
실시예 12 (화합물 19)	NA
실시예 13 (화합물 20)	0.68
실시예 14 (화합물 21)	0.11
실시예 15 (화합물 22)	NA
실시예 16 (화합물 23)	0.3
실시예 17 (화합물 24)	4.3
실시예 18 (화합물 25)	NA
실시예 19 (화합물 26)	0.14
실시예 20 (화합물 27)	NA
실시예 21 (화합물 28)	5.2
실시예 22 (화합물 29)	NA
실시예 23 (화합물 30)	NA
실시예 24 (화합물 31)	NA
실시예 25 (화합물 37)	4.5
실시예 26 (화합물 45)	3.8
실시예 27 (화합물 53)	1.0
실시예 28 (화합물(54)	0.14
실시예 29 (화합물 56)	0.73
실시예 30 (화합물 57)	3.2
실시예 32 (화합물 59)	102
실시예 33 (화합물 69)	0.49
실시예 34 (화합물 72)	1.3

표 2에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 신규한 데구엘린 유도체를 H1299 NSCLC 세포에 처리하였을 경우, 세포 성장 IC₅₀ 평균값이 약 3~5 μM로 나타났다. 특히, 실시예 6의 화합물 14는 IC₅₀ 값이 0.01 μM로 나타나 종래에 알려진 비교예 1의 데구엘린 보다 약 10배 이상의 암세포 성장 저해 효과가 나타난 것을 알 수 있다.

따라서, 본 발명에 따른 신규한 데구엘린 유도체는 암세포의 성장을 저해하는 효과가 우수하므로, 항암제 등으로 유용하게 사용될 수 있다.

< 실험예 2> HIF -1α 저해 활성 평가

상기 실험예 1을 통해 강한 세포 성장 저해도를 나타낸 데구엘린 유도체에 대하여 폐암 세포주인 H1299 NSCLC 세포에서 HIF-1α 축적(accumulation) 저해도를 측정하였다. 구체적으로는, 본 발명의 실시예에서 제조된 화합물들이 저산소(hypoxia) 조건에 의해 유도되는 HIF-1α 단백질의 생성을 농도의존적으로 저해하는 효과를 확인하기 위하여, 실시예에서 제조된 데구엘린 유도체들 및 비교예 1에서 제조된 데구엘린의 농도를 다르게 처리하였을 경우에 HIF-1α 단백질의 생성 정도를 웨스턴 블롯(Western blot) 분석법을 이용하여 비교하였다.

먼저, H1299 NSCLC(non-small cell lung cancer) 세포를 96-웰 플레이트에 5 x 10³ cells/well 농도로 분주한 후, 24시간 동안 배양한 다음, 저산소 조건(산소 1%, 질소 94%, 이산화탄소 5%)에서 12시간 동안 전처리하여 HIF-1α의 축적을 유도한 후, 화학식 1의 화합물을 DMSO 용매에 녹여 0~10 μM의 농도로 H1299 NSCLC 세포에 처리한 다음, 상기 저산소 조건에서 16시간 동안 배양한 다음 RIPA 완충용액을 이용하여 핵 추출물을 조제하였다. 이때, 저산소 조건에 따른 HIF-1 표적 유전자의 발현을 비교하기 위하여 산소 20%를 포함하는 대조군과 함께 실험을 수행하였다. 상기 핵 추출물 각 시료당 약 30 ㎍을 SDS PAGE(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)로 분리하고 폴리비닐리덴 플루오라이드 막(polyvinylidene fluoride membrane)에 옮긴 후 HIF-1α 항체(BD Pharmingen사) 및 HRP(horseradish peroxidase)로 표식된 2차 항체를 사용하여 HIF-1α 단백질의 양을 검출하였고, 내부 대조 유전자로 튜블린(Tubulin)을 사용하였다. 상기 측정 결과를 도 1에 나타내었다.

도 1은 본 발명의 일실시예에 따른 화합물들이 HIF-1α 축적을 저해하는 정도를 나타내는 웨스턴 블롯 도면이다.

도 1에 나타난 바와 같이, 본 발명의 일실시예에서 제조된 데구엘린 유도체들은 저산소 조건에서 튜블린(Tublin)의 생성에는 영향을 주지 않으면서 HIF-1α 단백질의 생성을 농도 의존적으로 저해하고 있음을 확인할 수 있다.

따라서, 본 발명에 따른 데구엘린 유도체들은 암을 악성화시키는 HIF-1α의 축적을 억제시키므로, 항암제의 유효성분으로 유용하게 사용될 수 있다.

< 실험예 3> 신생혈관 생성 억제 평가

본 발명에 따른 데구엘린 유도체들이 신생 혈관 생성 인자인 VEGF(Vascular endothelial growth factor A)를 억제하는 정도를 확인하기 위해서 형질전환 줄무늬물고기(zebrafish)를 사용하여 신생 혈관 생성을 알아보는 실험을 수행하였다.

구체적으로, 줄무늬물고기를 짝교배한 후 생성되는 줄무늬물고기 배아(Albino;Tg ( fli1 : EGFP ) ^{b4; y1} , Zebrafish International Resource Center, University of Oregon, Eugene)를 28.5 ℃의 양수(인공 해염을 0.2 g/L 농도로 녹인 증류수)에서 6시간 동안 배양하였다. 상기에서 배양한 줄무늬물고기 배아 10마리를 1군으로 하여 24-웰 플레이트에 500 ㎕의 양수와 함께 분양하고, 각 실시예의 데구엘린 유도체를 50 nM, 250 nM 및 1.25 μM 농도로 처리하였다. 실험이 진행되는 48시간에 양수(각 실시예의 데구엘린 유도체 포함)를 교체해 주었다. 배양후 72시간이 지난 후에, 라이카 DM5000B 형광현미경(Leica Microsystems, Wetzlar GmbH, Germany)을 사용하여 각 배아의 장하혈관망(subintestinal vessel plexus, SIV)에서 신생혈관형성을 측정, 촬영하였다.

도 2는 본 발명의 일실시예에 따른 화합물 53이 신생혈관 생성에 미치는 영향을 나타낸 사진이다.

도 3은 본 발명의 일실시예에 따른 화합물 69가 신생혈관 생성에 미치는 영향을 나타낸 사진이다.

도 4는 본 발명의 일실시예에 따른 화합물 72가 신생혈관 생성에 미치는 영향을 나타낸 사진이다.

도 2, 도 3 및 도 4에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 데구엘린 유도체를 처리하였을 경우에는 아무런 처리를 하지 않은 경우에 비하여 농도의존적으로 신생혈관 생성 수가 감소되었음을 확인하였다.

따라서, 본 발명에 따른 데구엘린 유도체는 신생 혈관 생성 억제 활성이 있으므로, 즉 신생 혈관 생성 인자인 VEGF의 활성을 저해하므로, 항암제의 유효성분으로 사용될 수 있다.

이하, 본 발명의 조성물을 이용한 제제예를 예시한다.

< 제제예 1> 산제의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 화합물 2 g

유당 1 g

상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

< 제제예 2> 정제의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 화합물 100 mg

옥수수 전분 100 mg

유당 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제 제조방법에 따라 타정하여 정제를 제조하였다.

< 제제예 3> 캡슐제의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 화합물 100 mg

옥수수전분 100 mg

유당 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

< 제제예 4> 주사액제의 제조

화학식 1 또는 화학식 2의 화합물 10 ㎍/㎖

묽은 염산 BP pH 3.5로 될 때까지

주사용 염화나트륨 BP 최대 1 ㎖

적당한 용적의 주사용 염화나트륨 BP 중에 본 발명에 따른 화학식 1 또는 화학식 2의 화합물을 용해시키고, 생성된 용액의 pH를 묽은 염산 BP를 사용하여 pH 3.5로 조절하고, 주사용 염화나트륨 BP를 사용하여 용적을 조절하고 충분히 혼합하였다. 용액을 투명 유리로 된 5 ㎖ 타입 I 앰플 중에 충전시키고, 유리를 용해시킴으로써 공기의 상부 격자하에 봉입시키고, 120 ℃에서 15 분 이상 오토클래이브시켜 살균하여 주사액제를 제조하였다.

Claims (13)

1. 하기 화학식 2로 표시되는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
   [화학식 2]
   

   

   
   (상기 화학식 2에서,
   R^a는

   

   이고,
   R^b는 -H, -OH 또는 C_1-3알콕시이고,
   R^e는 서로 독립적으로 -H 또는 C_1-3알콕시이고,
   X는

   

   , -NH- 또는 C_1-3알킬렌 또는 알케닐렌이고,
   Y는 단일결합, C_1-3알킬렌 또는 알케닐렌,

   

   ,

   

   ,

   

   ,

   

   ,

   

   , -NH-,

   

   또는

   

   이되,
   R^b가 -H, X가

   

   , Y가 단일결합일 경우 3개의 R^e 중 어느 하나가 C_1-3알콕시이거나 또는 3개의 R^e 모두가 C_1-3알콕시이고,
   R_- ^b가 -OH, X가

   

   , Y가 C₂ 알케닐렌일 경우 3개의 R^e 중 어느 하나가 C_1-3알콕시이거나 또는 3개의 R^e 모두가 C_1-3알콕시이고,
   R^b가 -H, X가

   

   , Y가

   

   일 경우 3개의 R^e 중 어느 하나가 C_1-3알콕시이거나 또는 3개의 R^e 모두가 C_1-3알콕시이고,
   R^b가 -H, X가

   

   , Y가 -NH-일 경우 3개의 R^e 중 어느 하나가 C_1-3알콕시이거나 또는 3개의 R^e 모두가 C_1-3알콕시이다).
   
2. 제1항에 있어서, R^a는

   

   이고,
   R^b는 -H, -OH 또는 C_1-2알콕시이고,
   R^e는 서로 독립적으로 -H 또는 C_1-2알콕시이고,
   X는

   

   , -NH- 또는 C_1-2알킬렌 또는 알케닐렌이고, 및
   Y는 단일결합, C_1-2알킬렌 또는 알케닐렌,

   

   ,

   

   ,

   

   ,

   

   ,

   

   , -NH-,

   

   또는

   

   인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
   
3. 제1항에 있어서, R^a는

   

   ,

   

   ,

   

   ,

   

   ,

   

   ,

   

   ,

   

   또는

   

   인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
   
4. 삭제
5. 삭제
6. 제1항에 있어서, 상기 화학식 2로 표시되는 화합물은
   2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)에타논,
   2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)에타논,
   2-(3,4-디메톡시페닐-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온
   2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-2-메틸프로판-1-온,
   2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온,
   (S)-2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온,
   (R)-2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온,
   2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-2-(페닐설포닐)에타논,
   (E)-1-(3,4-디메톡시페닐)-3-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온,
   (E)-3-(3,4-디메톡시페닐)-1-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온,
   (E)-1-(5-히드록시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-3-(2,4,5-트리메톡시페닐)프롭-2-엔-1-온,
   (E)-3-(3,4-디메톡시페닐)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프롭-2-엔-1-온,
   (E)-1-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-3-(2,4,5-트리메톡시페닐)프롭-2-엔-1-온,
   2-(3,4-디메톡시페닐)-N-(5-메톡시-2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)아세트-아미드,
   N-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)-3,4-디메톡시벤즈아미드,
   (R)-2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온, 및
   (S)-2-(3,4-디메톡시페닐)-1-(2,2-디메틸-2H-크로멘-6-일)프로판-1-온으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
   
7. 삭제
8. 삭제
9. 삭제
10. 제1항의 화합물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병성 망막증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
    
11. 제10항에 있어서, 상기 조성물은 HIF-1α의 축적 및 VEGF 단백질 발현을 저해하여 신생혈관의 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는 당뇨병성 망막증 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
    
12. 제1항의 화합물을 유효성분으로 함유하는 류마티스성 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
    
13. 제12항에 있어서, 상기 조성물은 HIF-1α의 축적 및 VEGF 단백질 발현을 저해하여 신생혈관의 생성을 억제하는 것을 특징으로 하는 류마티스성 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물.

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