KR101410262B1

KR101410262B1 - 미백 화장료 조성물

Info

Publication number: KR101410262B1
Application number: KR1020130090738A
Authority: KR
Inventors: 김철훈; 김은미; 권두진; 김지선; 심재훈; 최경희; 이기범; 피경배
Original assignee: 주식회사 다쏘앤컴퍼니
Priority date: 2013-07-31
Filing date: 2013-07-31
Publication date: 2014-06-20

Abstract

본 발명의 헛개나무(Hovenia dulcis Thunb)로부터 유래된 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물에 관한 것이다.
나아가, 본 발명의 미백 화장료 조성물은 헛개나무 추출물 또는 상기 헛개나무 추출물에, 산수유 추출물 또는 석류 추출물에서 선택되는 1종 또는 2종의 추출물이 더 함유된 혼합추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 피부에서 타이로시나아제 활성 및 도파(DOPA)의 산화 활성을 저해함으로써, 색소침착의 원인인 멜라닌 생성을 억제하고 항산화 작용이 우수하여 피부 미백 효과가 탁월하여, 피부에 대한 부작용 및 독성 없이 안전하게 사용될 수 있으므로 색소침착의 예방 및 치료용으로 사용되기에 유용하다.

Description

미백 화장료 조성물{WHITENING COSMETIC COMPOSITION}

본 발명은 미백 화장료 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 헛개나무(Hovenia dulcis Thunb)로부터 유래된 추출물을 유효성분으로 함유하고, 또는 상기 헛개나무 추출물에, 산수유 추출물 또는 석류 추출물에서 선택되는 1종 또는 2종의 혼합형태가 더 함유된 혼합추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 피부자극 없이 피부미백, 피부 밝기, 피부 보습을 개선하는 미백 화장료 조성물에 관한 것이다.

삶의 질 향상에 따라 기본적인 삶에 대한 욕구 이외에 외적인 아름다운 피부를 위한 욕구가 증가하고 있다. 따라서, 자외선 노출에 따른 색소 침착, 피부 홍반, 주름 등 피부 미용에 대한 관심은 여성뿐 아니라 남성 소비자층으로까지 늘어나 피부미백 및 주름개선에 관련한 화장품 시장은 날로 확대될 전망이다.

대표적인 피부색소 원인으로 알려진 멜라닌 합성과정을 살펴보면, 자외선을 받은 케라티노사이트에서 멜라노사이트(melanocyte)로 신호가 전달되어 멜라노사이트 내의 멜라노좀(melanosome)이라는 소포체에서 먼저 티로시나제(Tyrosinase)라는 효소에 의해 티로신이 도파(DOPA)를 거쳐 도파퀴논(DOPAquinone)으로 전환되고, 도파퀴논으로부터 자동 산화반응과 효소 반응으로 도파크롬(DOPAchrome)을 거쳐 공중합체인 멜라닌이 생성된다. 따라서 일부 미백제품은 이러한 신호 전달을 제어함으로써 미백효과를 갖는 성분을 개발하기도 한다.

즉, 주로 자외선을 받아 멜라노사이트에 신호전달을 억제하는 단계에 사용되는 성분, 멜라닌 합성의 주효소인 티로시나아제(tyrosinase) 활성을 억제하는 성분이나 티로시나아제의 기질에 대한 길항물질(antagonist)을 개발함으로써, 피부에서의 색소침착을 방지하고, 또한 도파 환원물질을 개발하여 멜라닌 합성 경로의 중간 대사물질인 도파(DOPA)의 산화방지를 구현할 수 있다. 이에, 미백기능성 화장료를 개발하기 위해서는 항산화 및 미백효과가 우수한 천연 식물자원으로부터 생리활성성분 개발이 요구된다.

이러한 작용기전에 따라 종래의 미백제에는 자외선 흡수제나 산란제, 비타민 C, 코직산, 알부틴 등과 같은 티로시나아제 저해제 등을 함유한다. 그러나 상기 물질들은 불안정하고 피부 트러블을 유발하는 안전성문제로 인하여 사용이 금지되거나 극히 제한적인 함량으로 사용된다.

따라서, 종래 미백제가 가지고 있는 여러 단점을 극복하고자, 최근에는 피부에 안전한 천연 자원으로부터 유래된 미백성분 개발에 관심이 모아지고 있다.

그의 일례로서, 대한민국특허 제654959호에는 산수유, 구기자, 복분자, 해송자, 진주가루 추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물이 티로시나제 활성을 억제하는 효과가 있고, 멜라닌 생성을 억제하는 효과가 있으며, 세포독성이 낮아 피부에 자극이 없어 안전하므로 피부 미백용 화장품에 유용하다고 보고하고 있다.

또한, 대한민국 공개특허 제2008-94455호에는 국화, 두충, 반하, 백급, 백렴, 백작약, 백출, 산수유, 상백피, 소회향 및 송이로 이루어지는 군으로부터 1 종 이상 선택되는 약재의 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 미백용 화장료 조성물이 공지되어 있으며, 대한민국특허 제898306호는 오미자, 구기자, 산수유, 상심자, 해송자, 복분자, 호두, 앵두로 구성된 복합 원료(Phyto White)로 구성하여 추출한 천연 분획물을 함유하는 미백 화장료 조성물을 개시하고 있다.

최근 대한민국 공개특허 제2012-131948호에는 피부 미백 활성을 갖는 비파잎(Eriobotrya japonica Lindl . Leaf) 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물으로, 화장료를 만들었을 때 우수한 멜라닌 생성 억제 등의 미백효과를 보고하고 있다.

한편, 헛개나무(Hovenia dulcis Thunb)는 갈매나무과의 낙엽교목으로서, 지구자나무라고도 칭하며, 한국(강원과 황해이남지역에 주로 분포), 일본, 중국 등에 분포되어 있다. 수피는 흑회색이며 작은 가지는 갈자색으로 피목(皮目)이 있다. 겨울눈은 2개의 눈비늘로 싸여 있으며, 털이 있다. 잎은 8∼15cm이며 어긋나고 넓은 난형 또는 타원형으로 3개의 굵은 잎맥이 발달하고 가장자리에 잔 톱니가 있다. 열매는 갈색이 돌고 지름 8 mm 정도이며 닭의 발톱 모양으로, 열매의 3실에 각각 1개씩의 종자가 들어 있다.

약학서 본초강목에는 헛개나무가 술을 썩히는 작용이 있다고 하며 생즙은 술독을 풀고 구역질을 멎게 한다고 기록되어 있으며, 맛이 달고 평온하며 독성이 없으며, 오장을 부드럽게 하고 윤활하게 하며 대변, 소변을 잘 보게 하며 가슴에 번열을 없애주고 갈증을 풀어주며 술독을 풀고, 구토증을 제거하며, 충독을 없애고 다섯 종류의 치질을 치유한다고 되어 있다.

현재까지 헛개나무 열매를 이용한 제품의 예로는 김치의 제조방법으로서, 대한민국 공개특허 제2002-79704호가 공개된 바 있으며, 대한민국 공개특허 제2002-35813호에는 헛개나무의 껍질과 잎, 매실과 오이의 열탕 추출액 및 설탕, 허브를 첨가하여 사탕이나 음료형태로 만든 건강식품이 개시되어 있다. 그 이외에도 대한민국특허 제543082호에는 헛개나무와 헛개나무 열매를 이용한 체중감량 및 콜레스테롤 감소용 식품 조성물을 보고하고 있다. 그러나, 아직까지 헛개나무를 미백화장료 조성물로서의 응용일례는 보고된 바 없다.

이에, 본 발명자들은 미백기능성 화장료에 적용 가능한 후보물질로서의 천연 식물군을 탐색한 결과, 전라도에 자생하는 식물원료 중에서 타이로시나아제 활성저해율 및 도파(DOPA) 산화활성 저해율 평가에서 우수하고 항산화 효과가 확인된 신규한 식물추출물을 발굴하고, 이를 유효성분으로 함유한 미백 화장료 조성물로 적용가능성을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 헛개나무로부터 유래된 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 헛개나무 추출물에, 산수유 추출물 또는 석류 추출물에서 선택되는 1종 또는 2종의 추출물이 더 함유된 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 헛개나무(Hovenia dulcis Thunb)로부터 유래된 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물을 제공한다.

상기의 추출물은 헛개나무 열매, 헛개나무 잎 또는 헛개나무 줄기 중에서 선택되는 단일성분 또는 그 혼합성분이 함유될 수 있으며, 80%에탄올 추출물 또는 열수추출물에서 피부 미백, 피부 밝기, 보습력 개선 효능이 유효하다.

또한, 본 발명은 상기 헛개나무 추출물에, 산수유 추출물 또는 석류 추출물에서 선택되는 1종 또는 2종의 추출물이 더 함유된 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물을 제공한다.

이때, 상기에서 석류 추출물은 석류 열매, 석류과피 또는 그들간의 혼합형태인 추출물이다.

본 발명은 헛개나무로부터 유래된 80% 에탄올 추출물 및 열수추출물이 멜라닌 생성억제에 유효한 생리활성과 우수한 항산화 효과를 확인하고, 헛개나무로부터 유래된 추출물을 색소침착의 예방 및 치료용도의 미백 화장료 조성물로 적용한다.

나아가, 본 발명은 상기 헛개나무 추출물에 산수유 추출물 또는 석류 추출물에서 선택되는 1종 또는 2종이 더 함유된 혼합추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 피부자극 없이 피부미백, 피부 밝기, 피부 보습을 구현하는 미백 화장료 조성물을 제공할 수 있다. 이에, 본 발명의 미백 화장료 조성물은 종래 피부 트러블을 유발하는 미백제를 대체사용할 수 있다.

도 1은 본 발명의 혼합추출물을 함유한 크림상의 화장품을 8주간 사용한 후의 피부 멜라닌 함량변화 결과이고,
도 2는 본 발명의 혼합추출물을 함유한 크림상의 화장품을 8주간 사용한 후의 피부 밝기변화 결과이고,
도 3은 본 발명의 혼합추출물을 함유한 크림상의 화장품을 8주간 사용한 후의 피부 수분함유량변화 결과이다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명하고자 한다.

본 발명은 미백기능성 화장료에 적용 가능한 후보물질로서의 헛개나무 추출물, 석류 추출물 및 산수유 추출물에 대하여 멜라닌 생성 억제효과에 대한 유효성 평가에서, 타이로시나아제 활성저해율 및 도파(DOPA) 산화 활성저해율 결과에서 현저히 우수하고, 항산화 효과가 우수한 헛개나무 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 색소침착의 원인인 멜라닌 생성을 억제하고 피부 미백 효과를 달성할 수 있다.

본 발명에서 사용되는 헛개나무 추출물은 헛개나무 열매, 헛개나무 잎 또는 헛개나무 줄기로부터 추출될 수 있다. 다만, 본 발명의 실시예에서 상기 헛개나무 구성별 단일성분으로 이루어진 헛개나무 추출물에 대한 평가를 실시하였으나, 상기 얻어진 헛개나무 구성별 추출물간의 혼합형태로도 가능할 것이다.

이때, 본 발명의 헛개나무 추출물은 80%에탄올 추출물 또는 열수추출물이며, 더욱 바람직하게는 80%에탄올 추출물에서 우수한 성능을 확인할 수 있다.

본 발명의 실시예에 뒷받침되는 바와 같이, 헛개나무 추출물, 석류 추출물 및 산수유 추출물의 단일성분에 대한 물성결과, 우수한 타이로시나아제 활성저해율 및 도파(DOPA) 산화활성 저해율을 보임으로써, 색소침착의 원인인 멜라닌 생성을 억제하고, 항산화 작용이 우수하므로 피부 미백 효과를 기대할 수 있으며, 세포 독성이 없는 우수한 안정성을 확인할 수 있다.

나아가, 본 발명은 상기 헛개나무 추출물에, 산수유 추출물 또는 석류 추출물에서 선택되는 1종 또는 2종의 추출물이 더 함유된 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물을 제공한다.

상기 혼합추출물로 함유한 경우, 각 추출물이 구현하는 멜라닌 생성을 억제효과와 더불어 항산화 효과 등의 성능간의 시너지 효과를 구현하거나 단독 함유할 때보다 성능보완이 가능하다.

이때, 상기 산수유 추출물은 산수유 열매로부터 추출한 80%에탄올 추출물 또는 열수추출물을 사용할 수 있다.

또한, 상기 석류 추출물은 석류열매 또는 석류과피로부터 추출할 수 있으며, 상기 석류열매와 석류과피를 함께 혼합하여 추출한 추출물도 가능하다.

도 1 내지 도 3은 본 발명의 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 크림성상의 시험제품에 대한 임상시험 결과를 도시한 것으로서, 사용 8주 후에 피부멜라닌 함량은 점점 감소하는 결과를 보이며[도 1], 사용 8주 후 피부 밝기가 점점 밝아지고[도 2], 피부수분 함유량은 사용 8주 후에 더욱 증가한 결과를 보인다[도 3].

이상의 결과로부터 본 발명의 헛개나무로부터 유래된 단일성분의 추출물 또는 상기 헛개나무 추출물에 산수유 추출물 또는 석류 추출물에서 선택되는 1종 또는 2종의 추출물이 더 함유된 혼합추출물을 함유함으로써, 피부자극 없이 피부미백, 피부 밝기, 피부 보습 개선효과를 보이는 미백용 화장료 조성물로서 유효하다.

또한, 본 발명의 헛개나무로부터 유래된 단일성분의 추출물 또는 상기에 산수유 추출물 및 석류 추출물의 혼합성분을 함유한 혼합추출물은 미백용 화장료 조성물에 0.0001 내지 10 중량%로 포함되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 0.0005 내지 10 중량%로 포함되는 것이다. 이때, 그 함량이 0.0001 중량% 미만이면, 기대하는 멜라닌 생성 억제 효과를 기대할 수 없고, 10 중량%를 초과하면, 함유량의 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증거가 나타나지 않는다.

이상의 미백용 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 제한되지 않고 목적하는 바에 따라 적절히 선택될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 미백용 화장료 조성물은 피부외용연고, 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 에멀젼, 오일젤 등의 제형으로 제조될 수 있다.

상기 제형에 함유된 유효성분이 추출물을 제외한 계면활성제, 항산화제, 오일성분, 보습제, 저급알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등의 성분은 통상 이 기술분야에서 적용되는 것으로부터 채택 사용할 수 있으며, 그 함량 역시 필요에 따라 적절히 배합하여 사용할 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다.

본 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

1. 식물추출물(단일 성분) 제조 및 물성평가

< 실시예 > 식물추출물의 제조

1. 80% 에탄올 추출물 제조

하기 표 1에서 제시된 식물원료는 전라도에서 재배하여 건조한 것을 구입하여 사용하였으며, 각 식물원료에 80% 에탄올을 첨가한 후, 실온에서 7일간 추출하여 자연 여과한 후, 다시 80% 에탄올을 첨가하여 동일한 과정을 반복하여 각 식물원료의 80% 에탄올 추출액을 얻었다. 이후 상기 추출액을 로터리 증발기를 이용하여 감압 농축하여 각 추출물의 고형분을 얻었다.

2. 열수 추출물의 제조

하기 표 1에서 제시된 식물원료가 자연 건조된 각 분말 50g에 증류수 0.5L를 첨가한 후 60℃에서 24 시간 추출하고 여과하여 열수 추출물을 얻었다.

< 실험예 1> 티로시나아제 활성 저해율 측정

타이로시나제는 인체 내의 멜라닌 생합성 경로에서 가장 중요한 초기 속도결정단계에 관여하는 효소로서, 대부분의 미백성분이 타이로시나제 효소를 억제하는 작용기전을 가지고 있다.

시험방법은 시험관 내에서 타이로시나제 효소의 활성을 저해하는 정도를 평가하는 방법이며, 시료를 에탄올에 1mg/ml로 녹여 시료액으로 준비하였다.

시험관에 0.1 M 인산염완충액(pH 6.5) 880 ㎕와 시료액 120 ㎕ 및 머쉬룸 타이로시나제(2000U/㎖)액 80 ㎕를 순서대로 넣고 37℃에서 6분 동안 반응시켰다. 상기 반응용액에 1.5 mM 타이로신 액 160 ㎕를 넣고 37℃에서 15분 동안 반응시킨 후, 자외선 분광기를 이용하여 490nm에서 흡광도를 측정하였다. 공시료액으로는 시료액 대신에, 0.1 M인산염완충액(pH 6.5)을 넣고, 양성대조군으로는 알부틴을 사용하였다.

이에, 티로시나아제 활성 저해율은 하기 수학식 1에 의해 산출되었다.

수학식 1

타이로시나제 활성 저해율(%)= 100 - [(b-b'/a-a') × 100]

a: 공시료액의 반응 후의 흡광도, b: 시료액의 반응 후의 흡광도

a', b' : 타이로시나제 효소대신 완충액으로 대체하여 측정한 흡광도

상기 표 2에서 확인되는 바와 같이, 대조군인 알부틴 대비, 산수유, 석류열매, 석류과피, 헛개나무 열매, 헛개나무 잎, 헛개나무 줄기의 80% 에탄올 추출물은 천연 미백 기능성 소재로 가능한 정도의 티로시나아제 활성 저해율을 확인하였다. 또한, 각 식물의 열수추출물도 알부틴 대비 50%정도의 티로시나아제 활성 저해율을 확인하였다.

< 실험예 2> DOPA 산화 활성저해율 측정

티로시나아제는 멜라닌 합성과정에 관여하는 촉매제로 멜라닌의 합성속도를 결정짓는 효소이다. 미백성분의 in vitro DOPA 산화 활성저해율 분석은 티로시나아제의 DOPA 산화반응에 대한 활성저해를 측정하여 미백성분의 효과를 평가하는 방법이다.

시료를 에탄올에 1mg/㎖로 녹여 시료액으로 준비하였다. 시험관에 0.1M 인산염완충액(pH 7.0) 850 ㎕와 시료액 25 ㎕ 및 머쉬룸 타이로시나제(2,000 U/㎖) 액 25 ㎕를 순서대로 넣고 37℃에서 6분 동안 반응시켰다. 상기 용액에 5mM L-DOPA(L-3,4-dihydroxyphenylalanine)액 50㎕를 넣은 다음 37℃에서 1 분 동안 반응 시킨 후, 자외선 분광기를 이용하여 475nm에서 흡광도를 측정하였다.

공시료액으로서 시료액 대신에 0.1M 인산염완충액(pH 7.0)을 넣고, 양성대조군으로는 알부틴을 사용하였다. 이에, DOPA 산화 활성저해율은 하기 수학식 2에 의해 산출되고 그 결과를 하기 표 3에 기재하였다.

수학식 2

DOPA산화 활성저해율(%)=100-[(각 시료액의 반응 흡광도/공시료액의 반응 흡광도) ×100]

상기 표 3의 결과로부터, 헛개나무 열매, 헛개나무 잎 및 헛개나무 줄기의 80%에탄올 추출물과 열수 추출물의 경우, 대조군인 알부틴과 비교하여 유사하거나 더 강한 DOPA산화 활성저해율을 확인하였다.

< 실험예 3> 전자공여능 ( DPPH 라디칼 소거율) 실험

식물추출물의 항산화 효과를 측정하기 위하여 DPPH 소거활성은 타가시라와 오하타케의 방법으로 측정하였다.

200 μM DPPH 에탄올용액 2㎖에, 에탄올에 10 mg/㎖의 농도로 용해시킨 시료 200 ㎕를 넣고 5초간 볼텍스 교반기로 혼합하여, 30℃에서 30분 동안 반응시킨 후, 자외선 분광기 (Opizen POP)를 이용하여 517nm에서 흡광도를 측정하였다.

또한 양성 대조군으로서 BHT, 토코페릴 아세테이트, 아스코르빈산을 사용하였다. 이에, DPPH 라디칼 소거율을 하기 수학식 3에 의해 산출되었다.

수학식 3

DPPH 라디칼 소거율(%) =

상기 표 4의 결과로부터, 항산화 작용은 활성 산소에 전자를 공여하여 지방질 산화를 억제시켜, 인체 내에서 활성산소에 의한 노화를 억제시킬 수 있다.

그 결과, 대조군인 아스코르빈산 대비, 산수유 열매, 석류열매, 석류과피, 헛개나무 줄기 등의 80% 에탄올 추출물과 산수유열매, 석류열매 열수추출물은 대조군과 거의 유사한 항산화 활성을 보였다. 특히, 석류열매의 경우 다양한 추출물에서 강한 항산화 활성을 보여, 피부노화 예방이나 미백제로 유용함을 확인하였다.

< 실험예 4> 세포 독성 평가

두 개의 24-웰 플레이트에 웰당 1×10⁵cell/500㎕ 세포와 배지 500㎕ 분주하고, 약 6∼12시간 동안 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 배양하였다. 12시간 후 세포가 배양되어 있는 24-웰 플레이트를 가져와 배지를 교체해주고 10mg/㎖로 녹인 추출물을 두 개의 24-웰 플레이트에 농도별 분주해 준 후 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 48시간 동안 배양하였다.

48시간 후 셀 카운팅 키트-8(Cell counting kit-8)을 배지 양의 1/10만큼 처리한 후 1시간 동안 배양시켰다. 배양 후, 리더기(ELISA READER)를 이용하여 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 이하, 세포 독성은 하기 수학식 4에 의해 산출되었다.

수학식 4

생존율 (%) = (소재 OD값-블랭크 OD값)/(음성대조군 OD값- 블랭크 OD값)×100

상기 표 5의 결과로부터, 산수유 열매 80% 에탄올 추출물과 산수유 열매 열수추출물은 0.1mg/㎖의 농도에서 80%의 생존률을 보였다. 특히, 헛개나무 열매. 잎 및 줄기의 80% 에탄올 추출물과 열수추출물 모두의 경우, 0.1mg/㎖의 농도에서 80%의 생존률을 확인하였다.

또한, 표 6의 결과로부터, 석류 과피 또는 열매 또는 그 혼합형태의 80% 에탄올 추출물은 0.1mg/㎖의 농도보다 현저히 낮은 농도에서 대등한 생존률을 보였다.

< 실험예 5> 멜라닌 생성 억제능 평가

6-웰 플레이트에 각 웰당 3×10⁵ cell/2㎖씩 세포를 분주하였다. 12 시간 경과후 세포가 배양되어 있는 6-웰 플레이트를 가져와 배지를 교체해주고 10mg/㎖로 녹인 추출물을 각각의 농도별로 처리하였다. 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 48시간 배양하고, 48시간 후 세포를 모두 수거해 상층액만 분리 후 80℃ 전기 오븐에 넣고 1∼2시간 동안 건조시켰다. 건조 후 1N NaOH를 200㎕ 넣고 잘 섞어준 후 80℃ 전기 오븐에서 1시간 동안 건조시켰다. 건조가 종료되면 96웰에 100㎕씩 분주한 후 리더기(ELISA READER)를 이용하여 405nm에서 흡광도를 측정하였다. 하기 수학식 5에 의해 멜라닌생성 억제능을 산출되었다.

수학식 5

멜라닌생성 억제능(%) = 100―[(소재의 OD값 × 100)/음성대조군의 OD값]

이상의 결과로부터, 식물추출물, 특히 헛개나무의 열매, 잎 및 줄기로부터 얻은 80% 에탄올 추출물과 열수추출물은 우수한 타이로시나아제 활성저해율 및 도파(DOPA) 산화활성 저해율, 멜라닌 생성 억제능, 항산화 작용 및 세포 독성결과 안전성이 확인됨으로써, 미백 기능성 화장품 소재로서의 가능성을 확인하였다.

2. 혼합추출물(혼합 성분) 제조 및 물성평가

< 실시예 15> 혼합추출물의 제조

상기 실시예1 에서 제조된 산수유 열매 함유 80% 에탄올 추출물(49.57중량%), 상기 실시예3에서 제조된 석류 열매+과피 함유 80% 에탄올 추출물(50.32중량%) 및 상기 실시예 9에서 제조된 헛개나무 열매 함유 80% 에탄올 추출물(60.76중량%)을 각 고형분 비율 1: 1: 1로 혼합하여 혼합추출물을 제조하였다. 이때, 혼합추출물 원액 1g 당 고형분 함량 0.494g(고형분 함량비 49.4%)이며, 이 안에서 80% 에탄올 추출물 3종의 비율이 각각 0.148g이 함유되었다.

< 실험예 5> 혼합추출물의 티로시나아제 활성 저해율 측정

상기 실시예 15에서 제조된 혼합추출물을 시료액으로 사용하고, 대조군인 알부틴의 함량을 1 mg/㎖ 및 0.33 mg/㎖별로 측정하되, 상기 실험예 1에서 수행한 동일한 측정방법으로 수행하여 그 결과를 표 9에 기재하였다.

이때, 알부틴의 1 mg/㎖ 및 0.33 mg/㎖ 농도대비, 혼합추출물 농도 1mg/㎖ 및 상기 혼합추출물 농도 1mg/㎖ 내에 함유된3종의 각 추출물(0.33mg)에 대하여 6회 반복 실시하여 평균값으로 하기 티로시나아제 활성 저해율을 측정하였다.

상기 표 9의 결과로부터, 실시예 15의 혼합추출물은 동일함량 조건의 알부틴 대비, 34%의 티로시나아제 활성 저해율을 보였다. 또한, 단일성분의 추출물 중에는 헛개나무 열매추출물이 우수한 티로시나아제 활성 저해율을 확인하였다.

< 실험예 6> 혼합추출물의 DOPA 산화 활성저해율 측정

상기 실시예 15에서 제조된 혼합추출물을 시료액으로 사용하고, 대조군인 알부틴의 함량을 1 mg/㎖ 및 0.33 mg/㎖별로 측정하되, 상기 실험예 2에서 수행한 동일한 방법으로 실시하여, 혼합추출물의 DOPA 산화 활성저해율을 측정하였다. 그 결과를 하기 표 10에 기재하였다.

이때, 알부틴의 1 mg/㎖ 및 0.33 mg/㎖ 농도대비, 혼합추출물 농도 1mg/㎖ 및 상기 혼합추출물 농도 1mg/㎖ 내에 함유된 3종의 각 추출물(0.33mg)에 대하여 6회 반복 실시하여 평균값으로 하기 DOPA 산화 활성저해율을 측정하였다.

상기 표 10의 결과에서 확인되는 바와 같이, 실시예 15의 혼합추출물은 동일함량의 알부틴과 대등한 DOPA 산화 활성저해율을 보였다.

또한, 혼합추출물 농도 1mg/㎖에 대한 DOPA 산화 활성저해율 향상은 각각의 단일성분의 추출물 중에서 헛개나무 열매 및 산수유 열매에 뒷받침됨을 확인하였다.

< 실험예 7> 혼합추출물의 전자공여능 ( DPPH 라디칼 소거율) 실험

상기 실시예 15에서 제조된 혼합추출물을 시료액으로 사용하고, 대조군으로서, 양성 대조군으로서 아스코르빈산을 사용하되, 상기 실험예 3에서 수행한 동일한 방법으로 실시하여, 혼합추출물의 DPPH 라디칼 소거율을 측정하였다. 그 결과를 하기 표 11에 기재하였다.

이때, 아스코르빈산의 1 mg/㎖ 및 0.33 mg/㎖ 농도대비, 혼합추출물 농도 1mg/㎖ 및 상기 혼합추출물 농도 1mg/㎖ 내에 함유된3종의 각 추출물(0.33mg)에 대하여 6회 반복 실시하여 평균값으로 하기 DPPH 라디칼 소거율을 측정하였다.

상기 표 11의 결과에서 확인되는 바와 같이, 실시예 15의 혼합추출물은 동일함량의 아스코르빈산과 비교하여 70% 수준의 항산화 활성을 보였다.

< 실험예 8> 임상시험 평가

상기 실시예 15에서 제조된 혼합추출물을 함유한 백색 크림상의 시험제품을 선정된 만 20∼60세의 여성 22명을 대상으로 사용 8주간 0, 4, 8주째의 기기적 측정, 전문가 육안평가 및 피험자의 주관적 설문평가, 피부 증상 여부에 대하여 평가하여 시험제품의 유효성을 확인하였다.

1. 피부 멜라닌 함량 측정

시험제품의 사용에 의한 피부 멜라닌함량의 변화를 확인하기 위하여 사용 전, 사용 4주 후, 사용 8주 후 피부 멜라닌함량을 측정하였다.

도 1은 이상의 피부 멜라닌 함량 측정결과로서, 시험제품의 피부 멜라닌함량 수치는 사용 전에 149.92±32.28, 사용 4주 후에 143.42±34.38, 사용 8주 후에 142.86±33.31으로 나타나 시험제품 사용 후 점점 감소하는 결과를 확인하였다.

2. 피부밝기 측정

시험제품 사용에 의한 피부 밝기의 변화를 확인하기 위하여 시험제품 사용 전, 사용 4주 후, 사용 8주 후 피부 밝기를 측정하였다.

도 2는 이상의 피부 밝기 측정결과로서, 시험제품 사용 전에 62.42±2.59, 사용 4주 후에 63.01±2.56, 사용 8주 후에 63.64±2.76으로 나타나 시험제품 사용 후 점점 증가하는 결과를 확인하였다. 즉, 사용 4주 후의 피부밝기 변화율은 0.97%인 반면에, 사용 8주후의 피부 밝기 변화율은 1.97%이었다.

1. 피부 수분 함유량 측정

시험제품 사용에 의한 피부 수분함유량의 변화를 확인하기 위하여 시험제품 사용 전, 사용 4주 후, 사용 8주 후 피부 수분함유량을 측정하였다.

도 3은 이상의 피부 수분함유량 측정결과로서, 시험제품 사용 전에 62.40±12.37, 사용 4주 후에 67.63±10.06, 사용 8주 후에 68.76±7.64로 나타나 시험제품 사용 후 점점 증가하는 결과를 확인하였다. 즉, 사용 4주 후의 피부 수분함유량 변화율은 10.42%인 반면에, 사용 8주 후의 피부 수분함유량 변화율은 12.94%이었다.

이상의 결과로부터, 본 발명의 혼합추출물을 함유한 미백 화장료 조성물은 피부자극 없이 피부미백, 피부 밝기, 피부 보습 개선효과를 보였다.

< 실험예 9> 시험제품의 기호도 조사

상기 실시예 15에서 제조된 혼합추출물을 함유한 백색 크림상의 시험제품의 피부 촉촉함, 피부 매끄러움, 흡수성 정도, 발림성 정도, 제품의 향, 전반적 사용감에 대하여 피험자가 느끼는 기호도를 조사하였다.

조사결과는 평균과 표준편차로 표시하고, 각 항목별 답변의 설문 값과 답변에 대한 피험자 수의 백분율을 구하여 하기 표 12에 도시하였다.

시험제품의 기호도 평가 결과, 피험자의 70% 이상이 피부 촉촉함, 피부 매끄러움, 흡수성, 발림성, 향, 전반적 사용감 항목에 대하여 보통 이상으로 평가하였다. 특히 피험자의 90% 이상이 발림성, 전반적 사용감 항목에 대하여 보통 이상으로 평가하였고, 피험자 100% 전원이 촉촉함, 매끄러움에 대하여 보통 이상으로 평가하였다.

상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 헛개나무로부터 유래된 80% 에탄올 추출물 및 열수추출물이 피부에서 타이로시나아제 활성 및 도파(DOPA)의 산화 활성을 저해함으로써, 색소침착의 원인인 멜라닌 생성을 억제하고 항산화 작용이 우수하여 피부 미백 효과가 탁월하여, 피부에 대한 부작용 및 독성이 없고 안전하게 사용될 수 있으므로 색소침착의 예방 및 치료용으로 사용되기에 적합하다.

이에, 본 발명은 멜라닌 생성억제에 유효한 생리활성과 우수한 항산화 효과를 확인하고, 헛개나무로부터 유래된 추출물을 색소침착의 예방 및 치료용도의 미백 화장료 조성물로 적용한다.

나아가, 본 발명은 헛개나무 추출물의 단일성분을 함유하거나, 상기 헛개나무 추출물에 산수유 추출물 또는 석류 추출물에서 선택되는 1종 또는 2종이 더 함유된 혼합추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물을 제공함으로써, 피부자극 없이 피부미백, 피부 밝기, 피부 보습을 달성할 수 있다.

이에, 본 발명의 미백 화장료 조성물은 종래 피부 트러블을 유발하는 미백제 사용을 지양하거나 대체 사용할 수 있다.

이상에서 본 발명은 기재된 구체예에 대해서만 상세히 설명되었지만 본 발명의 기술사상 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속함은 당연한 것이다.

Claims

헛개나무(Hovenia dulcis Thunb) 줄기로부터 유래된 80%에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 피부자극 없이 피부에 안전한 미백 화장료 조성물.
삭제
삭제
제1항에 있어서, 상기 추출물에,
산수유 추출물; 또는
석류 열매 또는 석류열매 및 석류과피의 혼합추출물에서 선택되는 석류 추출물;에서 선택되는 1종 또는 2종의 추출물이 더 함유된 것을 특징으로 하는 피부자극 없이 피부에 안전한 미백 화장료 조성물.
삭제