KR101362951B1 - 기미 형성 예지방법 및 기미 형성 예지용 진단 키트 - Google Patents
기미 형성 예지방법 및 기미 형성 예지용 진단 키트 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 기미 형성 예지방법 및 기미 형성 예지용 진단 키트에 관한 것으로서, 구체적으로는 기미 조직과 정상피부 조직 간에 다르게 발현되는 유전자들의 발현량을 확인하여 피부의 기미 형성 가능성을 진단하기 위하여, 상기 유전자 서열의 폴리뉴클레오티드와 혼성화하는 프로브로서 하나 이상의 폴리뉴클레오티드 또는 그의 상보적 폴리뉴클레오티드; 상기 유전자 서열의 폴리뉴클레오티드의 프라이머 쌍; 또는 상기 유전자에 의하여 코딩되는 아미노산 서열을 가변영역으로 가지는 하나 이상의 모노클로날 항체를 포함하는 기미 형성 예지방법 및 진단 키트에 관한 것이다. 본 발명에 따르면 기미 병변 부위에서 특이적으로 고발현되는 23종의 유전자 및 5종의 저발현 유전자를 기미 마커 유전자로 하여 피부에서의 기미 형성 가능성을 민감하고 빠르게 진단할 수 있다.
기미, 키트, 고발현, 저발현
Description
도 1은 RT-PCR에 의한 기미환자의 정상 및 병변 부위에서의 H19, PCOLCE2, WIF1, SOAT1, PDZK1, THRSP, TMEM56 및 CYR61의 mRNA 발현량이 나타난 사진이다.
도 2는 Real time PCR에 의한 기미환자의 정상 및 병변 부위에서의 H19, IGFBP6 및 PDZK1 유전자의 발현량을 도시한 그래프이다.
본 발명은 기미 형성 예지방법 및 기미 형성 예지용 진단 키트에 관한 것으로서, 구체적으로는 기미 조직과 정상피부 조직 간에 다르게 발현되는 유전자들의 발현량을 확인하여 피부의 기미 형성 가능성을 진단하기 위하여, 상기 유전자 서열의 폴리뉴클레오티드와 혼성화하는 프로브로서 하나 이상의 폴리뉴클레오티드 또는 그의 상보적 폴리뉴클레오티드; 상기 유전자 서열의 폴리뉴클레오티드의 프라이머 쌍; 또는 상기 유전자에 의하여 코딩되는 아미노산 서열을 가변영역으로 가지는 하나 이상의 모노클로날 항체를 포함하는 기미 형성 예지방법 및 진단 키트에 관한 것이다.
신체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합체 형태를 갖는 페놀계 고분자 물질로서, 태양으로부터 조사되는 자외선에 의한 피부손상 저해에 중요한 역할을 담당한다. 멜라닌의 과잉 합성 및 축적은 피부에 기미, 주근깨 및 노인성 흑자(senile lentigo)등 심각한 미적(美的) 문제를 일으킬 뿐만 아니라, 피부노화를 촉진하며 피부암을 유발하기도 한다 (참고: Hearing V.J. et al., FASEB J., 5: 2902-2909, 1991).
기미는 주로 태양에 노출된 피부에 일어나는 과색소 침착 증상으로, 일반적으로는 좌우 대칭 형태로 나타나는 특징을 갖고, 햇볕을 비교적 덜 받는 눈두덩이나 턱밑 같은 곳에는 거의 생기지 않는다. 따라서 햇볕이 강한 여름에 한층 더 증세가 심해지는 반면 겨울에는 옅어진다. 성별이나 인종, 나이에 큰 영향을 받지는 않지만 주로 동양인이나 라틴계 여성에게서 많이 발견된다. 그 원인에 대해서는 아직도 불명확한 부분이 많지만 주로 태양광에의 노출, 임신에 의한 호르몬 변화, 영양 부족, 내분기계 질환 등으로 인해 유발된다고 알려져 있다.
한번 생긴 기미는 완전한 제거하기가 어렵기 때문에 예방이 중요한데 기미가 생기기 쉬운 피부를 미리 확인하여 집중적인 예방 처치를 할 수 있다면 기미 발생을 좀더 효율적으로 방지할 수 있을 것이다. 그러나 상기 기술한 바와 같이 아직 기미의 원인에 대해 명확하게 밝혀진 바가 없기 때문에, 미리 기미 형성을 예지하는 것은 어려운 실정이다.
이에, 본 발명자들은 정상피부 부위와 비교하여 기미 병변부위에서 발현이 증가 혹은 감소하는 유전자를 찾아내고, 그 찾아낸 유전자들에 대하여 기미부위에서의 발현정도를 재확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은 기미조직에서 특이적으로 발현이 증가 혹은 감소되어있는 유전자들의 발현정도를 측정하여 피부의 기미 형성 가능성을 판단하기 위한 방법 및 키트를 제공하는 것이다. 또한 시험 화합물이 상기 유전자로부터 코딩된 단백질의 작용을 촉진 또는 억제하는지를 확인하여 기미 형성 억제제를 스크리닝하는 방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 F7(coagulation factor VII, serum prothrombin conversion accelerator), MGC34923(hypothetical protein MGC34923), FLJ21963(FLJ21963 protein), PRKAA1(protein kinase, AMP-activated, alpha 1 catalytic subunit), ELOVL5(ELOVL family member 5, elongation of long chain fatty acids), ACSM3(acyl-CoA synthetase medium-chain family member 3),DGAT2L3(diacylglycerol O-acyltransferase 2-like 3), GABRA4(gamma-aminobutyric acid A receptor, alpha 4), TMEM56 (transmembrane protein 56), SLCO4C1(solute carrier organic anion transporter family, member 4C1), THRSP(THYROID HORMONE-RESPONSIVE SPOT14), HAO2(hydroxyacid oxidase 2 ), IGJ(immunoglobulin J polypeptide), ACSBG1(acyl-CoA synthetase bubblegum family member 1), ACP6(acid phosphatase 6, lysophosphatidic), SOAT1(ACYL-CoA:CHOLESTEROL ACYLTRANSFERASE), ELOVL3(elongation of very long chain fatty acids), C6orf188(chromosome 6 open reading frame 188), HSD3B1(hydroxy-delta-5-steroid dehydrogenase, 3 beta- and steroid delta-isomerase 1), MLSTD1(male sterility domain containing 1), Cyr61(CYSTEINE-RICH PROTEIN 61),DKFZP586H2123 (regeneration associated muscle protease) 및 PDZK1(PDZ domain containing 1)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드 또는 그 단편으로서, 상기 단편은 10개 이상의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드, 또는 그의 상보적 폴리뉴클레오티드; 및 상기 폴리뉴클레오티드를 표면에 결합시킨 고상 지지체를 포함하며, 상기 폴리뉴클레오티드에 혼성화된 전사체의 양이 정상치보다 많으면 기미 형성이 쉬운 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트를 제공한다.
또한, PCOLCE2, GFPT2(glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2), CCL21(chemokine C-C motif ligand 21), WIF1(WNT inhibitory factor 1) 및 H19로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 폴리뉴클레오티드 또는 그 단편으로서, 상기 단편은 10개 이상의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드, 또는 그의 상보적 폴리뉴클레오티드; 및 상기 폴리뉴클레오티드를 표면에 결합시킨 고상 지지체를 포함하며, 상기 폴리뉴클레오티드에 혼성화된 전사체의 양이 정상치보다 적으면 기미 형성이 쉬운 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트를 제공한다.
본 발명은 F7, MGC34923, FLJ21963, PRKAA1, ELOVL5, ACSM3, DGAT2L3, GABRA4, TMEM56, SLCO4C1, THRSP, HAO2, IGJ, ACSBG1, ACP6, SOAT1, ELOVL3, C6orf188, HSD3B1, MLSTD1, Cyr61, DKFZP586H2123 및 PDZK1으로 이루어진 군으로부터 선택된 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드; 및 상기 군으로부터 선택된 폴리뉴클레오티드에 상보적인 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드을 포함하며, 상기 폴리뉴클레오티드들을 프라이머로 하여 증폭된 DNA 양이 정상치보다 많으면 기미 형성이 쉬운 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트를 제공한다.
또한, 본 발명은 PCOLCE2, GFPT2, CCL21, WIF1 및 H19로 이루어진 군으로부터 선택된 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드; 및 상기 군으로부터 선택된 폴리뉴클레오티드에 상보적인 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드을 포함하며, 상기 폴리뉴클레오티드들을 프라이머로 하여 증폭된 DNA 양이 정상치보다 적으면 기미 형성이 쉬운 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트를 제공한다.
본 발명은 F7, MGC34923, FLJ21963, PRKAA1, ELOVL5, ACSM3, DGAT2L3, GABRA4, TMEM56, SLCO4C1, THRSP, HAO2, IGJ, ACSBG1, ACP6, SOAT1, ELOVL3, C6orf188, HSD3B1, MLSTD1, Cyr61, DKFZP586H2123 및 PDZK1으로 이루어진 군으로부터 선택된 유전자에 의하여 코딩되는 아미노산 서열을 가변영역으로 가지는 하나 이상의 모노클로날 항체를 포함하며, 상기 항체에 결합된 항원의 양이 정상치보다 많으면 기미 형성이 쉬운 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트를 제공한다.
또한, 본 발명은 PCOLCE2, GFPT2, CCL21, WIF1 및 H19로 이루어진 군으로부터 선택된 유전자에 의하여 코딩되는 아미노산 서열을 가변영역으로 가지는 하나 이상의 모노클로날 항체를 포함하며, 상기 항체에 결합된 항원의 양이 정상치보다 적으면 기미 형성이 쉬운 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트를 제공한다.
또한, 본 발명은 피부의 기미 형성을 예지하는 방법으로서, 표피 중의 F7, MGC34923, FLJ21963, PRKAA1, ELOVL5, ACSM3, DGAT2L3, GABRA4, TMEM56, SLCO4C1, THRSP, HAO2, IGJ, ACSBG1, ACP6, SOAT1, ELOVL3, C6orf188, HSD3B1, MLSTD1, Cyr61, DKFZP586H2123 및 PDZK1로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자의 발현량이 정상치보다 많으면 기미 형성이 쉬운 피부인 것으로 판단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지방법을 제공한다.
그리고, 피부의 기미 형성을 예지하는 방법으로서, 표피 중의 PCOLCE2, GFPT2, CCL21, WIF1 및 H19로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자의 발현량이 정상치보다 적으면 기미 형성이 쉬운 피부인 것으로 판단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지방법을 제공한다.
본 발명은 기미 형성 억제제를 스크리닝하는 방법으로서, F7, MGC34923, FLJ21963, PRKAA1, ELOVL5, ACSM3, DGAT2L3, GABRA4, TMEM56, SLCO4C1, THRSP, HAO2, IGJ, ACSBG1, ACP6, SOAT1, ELOVL3, C6orf188, HSD3B1, MLSTD1, Cyr61, DKFZP586H2123 및 PDZK1로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자에 의 하여 코딩되는 단백질, 또는 PCOLCE2, GFPT2, CCL21, WIF1 및 H19로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자에 의하여 코딩되는 단백질에 시험 화합물을 결합시키는 단계; 및 상기 시험 화합물이 상기 단백질의 작용을 촉진 또는 억제하는지를 확인하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 기미 형성 억제제의 스크리닝 방법을 제공한다.
이하 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다.
본 발명에서는 23종의 기미부위 고발현 유전자와 5종의 기미부위 저발현 유전자를 발굴하였으며, 이들이 기미와 관련이 있다는 사실은 아직까지 보고되지 않았다. 하기 표 1은 기미조직에서 특이적으로 고발현된 유전자, 표 2는 특이적으로 저발현된 유전자를 나열한 것이다. GB accession 은 genebank accession ID를 의미하고 Unigene 은 unigene DB의 ID를 의미하는 것으로서, 각 유전자의 서열을 개시한다.
| 유전자 기호 | GB_Accession | UniGene | 유전자 이름 |
| F7 | M13232 | Hs.36989 | coagulation factor VII (serum prothrombin conversion accelerator) |
| MGC34923 | BC027449 | Hs.61232 | hypothetical protein MGC34923 |
| FLJ21963 | BC009317 | Hs.13222 | FLJ21963 protein |
| PRKAA1 | BC037303 | Hs.43322 | protein kinase, AMP-activated, alpha 1 catalytic subunit |
| ELOVL5 | AF338241 | Hs.343667 | ELOVL family member 5, elongation of long chain fatty acids (FEN1/Elo2, SUR4/Elo3-like, yeast) |
| ACSM3 | AC004381 | Hs.512678 | acyl-CoA synthetase medium-chain family member 3 |
| DGAT2L3 | BC039181 | diacylglycerol O-acyltransferase 2-like 3 | |
| GABRA4 | BC035055 | Hs.248112 | gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 4 |
| TMEM56 | AK056404 | Hs.84522 | transmembrane protein 56 |
| SLCO4C1 | BX647880 | Hs.127648 | solute carrier organic anion transporter family, member 4C1 |
| THRSP | BC031989 | Hs.523924 | thyroid hormone responsive (SPOT14 homolog, rat) |
| HAO2 | BC020863 | Hs.236545 | hydroxyacid oxidase 2 (long chain) |
| IGJ | BC038982 | Hs.381568 | immunoglobulin J polypeptide, linker protein for immunoglobulin alpha and mu polypeptides |
| ACSBG1 | BC009289 | Hs.277543 | acyl-CoA synthetase bubblegum family member 1 |
| ACP6 | BC009965 | Hs.15871 | acid phosphatase 6, lysophosphatidic |
| SOAT1 | BC028940 | sterol O-acyltransferase (acyl-Coenzyme A: cholesterol acyltransferase) 1 | |
| ELOVL3 | BC034344 | Hs.302130 | elongation of very long chain fatty acids (FEN1/Elo2, SUR4/Elo3, yeast)-like 3 |
| C6orf188 | BC032556 | Hs.511968 | chromosome 6 open reading frame 188 |
| HSD3B1 | M35493 | Hs.364941 | hydroxy-delta-5-steroid dehydrogenase, 3 beta- and steroid delta-isomerase 1 |
| MLSTD1 | BC022267 | Hs.134497 | male sterility domain containing 1 |
| CYR61 | AL832891 | Hs.8867 | cysteine-rich, angiogenic inducer, 61 |
| DKFZP586H2123 | AF370388 | Hs.55044 | regeneration associated muscle protease |
| PDZK1 | BC006518 | Hs.15456 | PDZ domain containing 1 |
| 유전자 기호 | GB_Accession | UniGene | 유전자 이름 |
| PCOLCE2 | BC006265 | Hs.8944 | procollagen C-endopeptidase enhancer 2 |
| GFPT2 | BC000012 | Hs.30332 | glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2 |
| CCL21 | BC027918 | Hs.57907 | chemokine (C-C motif) ligand 21 |
| WIF1 | BC018037 | Hs.284122 | WNT inhibitory factor 1 |
| H19 | AK123560 | H19, imprinted maternally expressed untranslated mRNA |
현재 이들 유전자에 대해 알려진 내용은 다음과 같다.
THRSP(THYROID HORMONE-RESPONSIVE SPOT14)는 지질합성(lipogenesis)에 관련된 기능을 보일 것이라 추측하고 있지만, 정확한 기능은 알려져 있지 않으며, 기미와의 관련성 또한 알려진 바가 없다.
WIP1(WILDTYPE p53-INDUCED PHOSPHATASE 1)은 p53 의존적인 세포 주기(cell cycle)에서 CHEK1 단백질을 비활성화 시켜 세포 주기를 어레스트(arrest)시키는 단백질로, 기미관련 보고는 전혀 없다.
SOAT1(ACYL-CoA:CHOLESTEROL ACYLTRANSFERASE)은 아실코에이(acyl CoA)와 콜레스테롤의 결합 관련 기능을 가지는 것으로 알려져 있다.
Cyr61(CYSTEINE-RICH PROTEIN 61) 은 세포 증식(cell proliferation), 케모택시스(chemotaxis), 혈관신생(angiogenesis), 및 세포 부착(cell adhesion)을 증진시키는 것으로 알려져 있으며, 피부조직에서는 섬유아세포(fibroblast)에서 발현되며, 혈관신생 관련 유전자들의 발현을 증가시키는 것으로 알려져 있다.
F7(coagulation factor VII, serum prothrombin conversion accelerator)은 혈액응고(blood coagulation)에 관여하는 보조인자이다.
PRKAA1(protein kinase, AMP-activated, alpha 1 catalytic subunit)은 phospholyation을 통해 콜레스테롤 합성과 지방산 합성을 조절하는 인자로, 세포 내 ATP의 레벨을 인지하는데 관련된 것으로 알려져 있으며, 기미나 색소형성에 관해서는 보고된 바가 전혀 없다.
DGAT2L3(diacylglycerol O-acyltransferase 2-like 3)는 피부조직에서 지질 대사에서 중요한 역할을 할 것이라고 예상이 되는 다이아실글리세롤 아실트랜스퍼라아제 패밀리(diacylglycerol acyltransferase family)의 일종으로 기미와의 관련 보고는 아직까지 없다.
GABRA4(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 4)는 신경계의 대표적인 억제 신경전달물질인 GABA 에 대한 수용체로 기미와의 관련 보고는 없다.
HAO2(hydroxyacid oxidase 2 )는 현재까지는 간과 신장에서 퍼옥시좀(peroxisome) 내에서 히드록시산(hydroxy acid)의 산화과정을 담당하는 효소로 알려져 있다.
IGJ(immunoglobulin J polypeptide)는 면역글로불린 알파와 뮤(mu)를 연결시키는 링커 단백질이다.
ACP6(acid phosphatase 6, lysophosphatidic)는 미오블라스트(myoblast)가 미오튜브(myotube)로 분화될 때 발현되는 단백질로, 기미와의 관련 보고는 전혀 없다.
PDZK1(PDZ domain containing 1)은 세포막에 존재하는 수용체와 같은 막단백질들과 그 조절 단백질간의 결합에 관여하는 것으로 알려져 있으나, 현재까지 기미와의 연관성은 보고된 바가 없다
그 외, ACSBG1(acyl-CoA synthetase bubblegum family member 1), ELOVL3(elongation of very long chain fatty acids), ELOVL5(ELOVL family member 5, elongation of long chain fatty acids), C6orf188(chromosome 6 open reading frame 188), HSD3B1(hydroxy-delta-5-steroid dehydrogenase, 3 beta- and steroid delta-isomerase 1), MLSTD1(male sterility domain containing 1), DKFZP586H2123 (regeneration associated muscle protease), TMEM56 (transmembrane protein 56), ACSM3(acyl-CoA synthetase medium-chain family member 3), SLCO4C1(solute carrier organic anion transporter family, member 4C1)은 정확한 기능이 알려져 있지않으며, 기미와의 관련성 또한 전혀 보고되어 있지 않다. FLJ21963는 유전자서열만 알려져 있으며, 그 외 관련 정보는 전혀 보고된 바가 없다.
저발현 유전자로서, PCOLCE2 (PROCOLLAGEN C-ENDOPEPTIDASE ENHANCER 2)는 프로콜라겐 1,2 의 프로펩티드(propeptide)의 절단에 관련된 단백질이다.
H19는 모계 각인(maternal imprinting)되는 비번역 mRNA로 정확한 기능은 알려져 있지 않으며, 기미와의 관련성도 보고된 바 없다.
GFPT2(glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2)는 헥소아민 (hexoamine) 경로(pathway)에 글루코오스를 uptake 시키는 단백질로, 기미와의 관련 보고는 전혀 없다.
CCL21(chemokine (C-C motif) ligand 21)는 조혈(hemopoiesis) 저해에 관련된 싸이토카인이다.
WIF1(WNT inhibitory factor 1) 은 배발생단계에서 세포-세포 상호작용에 중요한 역할을 하는 신호전달 단백질인 WNT에 결합하여 그 활성을 저해하는 단백질이며, 기미와 관련된 보고는 현재까지는 전혀 없다.
본 발명의 진단 키트에서 프로브로 사용되는 폴리뉴클레오티드는 기미 조직에서 고발현되거나 저발현되는 기미 마커 유전자의 전장(full length) 또는 그의 단편을 포함한다. 단편의 길이는 10개 이상의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 것이 바람직한데, 이는 프로브의 길이가 10bps이하이면 비특이적으로 결합되기 때문이다.
본 발명의 진단 키트에서 프라이머로 사용되는 폴리뉴클레오티드는 그 길이가 18-22개인 것이 바람직하다. 이는 프라이머의 길이가 18bps미만이면 비특이적으로 결합되고, 22bps를 초과하면 프라이머끼리 자체 결합하여 효율성이 떨어지며, 제작시에도 비용과 기술적인 면에서 비생산적이기 때문이다.
본 발명의 진단 키트에서 기미 마커 유전자에 의하여 코딩되는 아미노산 서열을 가변영역으로 가지는 모노클로날 항체는 일반적인 모노클로날 항체 제조방법으로 제조된다.
이하, 구체예를 들어 본 발명을 더욱 구체적으로 설명한다. 하기 구체예는 본 발명을 설명하기 위한 것이고 한정하기 위한 것은 아니다.
<실시예 1: 기미 마커 유전자 확인>
1.조직 샘플의 획득과 제작
환자의 조직 샘플은 기미증상을 보이는 여성 환자 8명으로부터 회수하였다. 동일 환자의 병변부와 정상부 조직을 각각 생검하여 세트로 조직을 회수하였다.
2.조직으로부터 RNA 채취
각 사람에서 각각 과색소침착 부위와 정상 부위의 피부조직을 3mm 정도 채취하여 RNA를 정제하기 위해 트리졸(trizol)에 넣고 잘게 쪼갠 후 클로로포름을 넣어 상층액의 RNA를 분리하였다. 얻어진 상층액의 RNA를 농축하기 위해 동량의 이소프로파놀을 넣고 원심분리하여 침전된 RNA를 얻고, 염기 제거를 위해 70% 에탄올로 침전된 RNA를 세척하였다. 그 후 얻어진 RNA를 정제된 물에 녹인 후 순도 및 양을 측정하기 위해 전기 영동을 실시해서 28S, 18S rRNA의 밴드가 명확하게 구분되는지를 확인하여 순도를 측정하고, 밴드의 진하기로 양을 측정하였다.
3.마이크로어레이용 샘플의 제작
각각의 시료에서 얻은 mRNA의 발현 양상을 비교하기 위해 마이크로어레이(microarray)를 수행하였으며 cRNA를 합성하기 위해 Biosystems Chemiluminescent RT-IVT Labeling Kit (ABI) 를 사용하였다. 그 방법은 다음과 같다. 각 시료에서 얻은 동일량의 RNA를 넣고 역전사 효소를 이용하여 cDNA를 합성한 후 합성된 cDNA로부터 cRNA를 합성한다(in vitro transcription). 이 때 DIG이 라벨된 UTP를 넣어줌으로써 합성된 cRNA를 라벨링하게 된다. 이렇게 라벨링된 cRNA의 순도 및 양을 측정한 후, 전체 1700개 유전자가 스폿팅되어 있는 Applied Biosystems 1700 human chip (ABI) 과 결합시켰다. 결합된 cRNA를 확인하기 위해 DIG과 특이적으로 결합하는 항체를 넣고 반응시켰다. 이 때 항체에는 화학발광효소(peroxidase)가 결합되어 있으므로 화학발광 기질을 넣고 반응시켜 감광된 이미지를 얻는다. 얻어진 이미지의 진하기를 분석하고 통계 처리하여 기미부위에서 특이적으로 고발현 및 저발현된 유전자를 확인하였다. 전체 1700개 유전자 중에서 고발현된 유전자는 23종이었고(표 1), 저발현된 유전자는 5종이었다(표 2).
4.RT-PCR
기미환자의 정상 및 병변부위의 표피로부터 채취한 RNA 각 1 ㎍을 올리고-dT프라이머(24 mer) 100 pmol (Bioneer)과 함께 70℃에서 10분(총용량 20 ㎕) 반응시켰다. 그 후, 5x제1쇄 반응 버퍼 4 ㎕, 0.1M DTT 2 ㎕, 2.5 mMdNTP 믹스 4 ㎕, SuperscriptII 1 ㎕(전부 invitrogen)를 첨가하여 42℃에서 1시간 반응시키고, 마지막으로 70℃에서 10분 반응시켜 신장시킴으로써 cDNA 템플릿을 조제하였다. rTaq용 10x버퍼 5 ㎕, 25 mM MgCl2 3 ㎕, 2.0 mM dNTP 믹스 5㎕, rTaq 0.5 ㎕(전부 Bioneer사), ddH2 0 33.5 ㎕, cDNA 템플릿 각 1 ㎕, 프라이머 센스 및 안티센스(하기 표 3 참조) 각 20 mM 1 ㎕(총용량 50 ㎕)를 전부 첨가하여 PCR 반응[94℃ 2분, (94℃ 30초, 55℃ 30초, 72℃ 1분)을 30사이클, 72℃ 10분]을 행하였다.
| 유전자 기호 | 프라이머 종류 | 프라이머 서열 |
| H19 |
센스(서열번호1) | aaa gac acc atc gga aca gc |
| 안티센스(서열번호2) | aga gtc gtg gag gct ttg aa | |
| PCOLCE2 |
센스(서열번호3) | gag gca aaa tca tgc caa ac |
| 안티센스(서열번호4) | gag gcc tca tac ctc cat ca | |
| WIF1 |
센스(서열번호5) | att ggg caa aaa tgc gta ag |
| 안티센스(서열번호6) | ttg ttt aaa tgc cac tac cac a | |
| SOAT1 |
센스(서열번호7) | cga ata tgc ctt ggc tgt tt |
| 안티센스(서열번호8) | gac tcc att gcc caa gaa aa | |
| PDZK1 |
센스(서열번호9) | gag gct cca gct cct act cc |
| 안티센스(서열번호10) | cgc cct tct gta cct ctt tg | |
| THRSP |
센스(서열번호11) | aga gaa tgg aac cgc aga ga |
| 안티센스(서열번호12) | act tgt ccc gtc att tcc tg | |
| TMEM56 |
센스(서열번호13) | agc aaa agt ttc ccc agg tt |
| 안티센스(서열번호14) | cac gtt tgc aag tga tgg ac | |
| CYR61 |
센스(서열번호15) | cag ctg acc agg act gtg aa |
| 안티센스(서열번호16) | gtc tag gtg tgc cct gga aa |
마지막으로 1.5% SYBR GREEN 함유 아가로스겔로 전기영동하여 약 100 bp의 밴드를 얻어 그 결과를 도 1에 나타내었다. GAPDH는 대조군으로서 나타내었다. 도 1로부터 밝혀진 바와 같이, H19, PCOLCE2, WIF1, SOAT1 유전자는 표피의 기미 부위에 있어서 정상 부위 대비 현저히 발현이 저하되어 있고, PDZK1, THRSP, TMEM56, CYR61은 기미부위에서 발현이 상대적으로 증가해있는 것을 알 수 있으며, 이는 상기 마이크로 어레이 결과와 일치한다.
5.Real Time PCR
상기 결과를 재확인하기 위하여, 12명의 기미환자의 정상 및 병변부위의 표피로부터 채취한 RNA 각 2 ㎍을 올리고-dT프라이머 100 pmol (applied biosystems)과 함께 70℃에서 5분간(총용량 5 ㎕) 반응시켰다. 그 후, 5x제1쇄 반응 버퍼 4 ㎕, MgCl2 2.4㎕, 2.5 mM dNTP 믹스 1 ㎕, Rtase 1㎕를 첨가하여 42℃에서 1시간 반응시키고, 마지막으로 70℃에서 15분 반응시켜 신장시킴으로써 cDNA 템플릿을 조제하였다. AmpliTaq Gold® DNA 폴리머라아제가 포함된 TaqMan Universal PCR Master 2x버퍼 25 ㎕, cDNA 템플릿 각 22.5 ㎕, 프라이머센스 및 안티센스(하기 표 4 참조) 믹스 20 mM 2.5 ㎕(총용량 50 ㎕)를 전부 첨가하여 PCR 반응[95℃ 10분, (95℃ 15초, 60℃ 1분)을 40사이클, 72℃ 10분]을 행하였다.
| 유전자 기호 | 프라이머종류 | 프라이머 서열 |
| H19 |
센스(서열번호17) | atg aca tgg tcc ggt gtg a |
| 안티센스(서열번호18) | aga aac aga ccc gct tct tg | |
| PDZK1 |
센스(서열번호19) | ggc agg ctc aga aca gaa ag |
| 안티센스(서열번호20) | cta cca gat cat tgt tct tca |
그 결과는 도 2에 나타내었다. 도 2에 따르면 기미환자의 기미부위에서의 각 mRNA 발현량은 정상부위 대비 H19는 감소, PDZK1은 증가함으로써, 마이크로 어레이 결과와 일치함을 알 수 있다.
이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명에 따르면 기미 병변 부위에서 특이적으로 고발현되는 23종의 유전자 및 5종의 저발현 유전자를 기미 마커 유전자로 하여 피부에서의 기미 형성 가능성을 민감하고 빠르게 예측할 수 있다.
<110> Amorepacific corporation
<120> Method and kit for prediction of chloasma
<160> 20
<170> KopatentIn 1.71
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<211> 20
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<223> primer
<400> 20
ctaccagatc attgttcttc a 21
Claims (14)
- 폴리뉴클레오티드 또는 그 단편으로서 상기 폴리뉴클레오티드는 H19를 코딩하는 폴리뉴클레오티드이고, 상기 단편은 10개 이상의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드,또는 그의 상보적 폴리뉴클레오티드; 및상기 폴리뉴클레오티드를 표면에 결합시킨 고상 지지체를 포함하며,상기 폴리뉴클레오티드에 혼성화된 전사체의 양이 정상치보다 적으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트.
- 제1항에 있어서,상기 키트는 F7[혈액응고인자 VII(coagulation factor VII)], MGC34923(가상 단백질 MGC34923), FLJ21963(FLJ21963 단백질), PRKAA1[단백질 키나아제 AMP-활성화 알파 1 촉매 서브유닛(protein kinase AMP-activated alpha 1 catalytic subunit)], ELOVL5(ELOVL 패밀리 멤버 5), ACSM3[아실코에이 합성효소 중쇄 패밀리 멤버 (acyl-CoA synthetase medium-chain family member 3)], DGAT2L3[다이아실글리세롤 O-아실트랜스퍼라아제 2-유사 3(diacylglycerol O-acyltransferase 2-like 3)], GABRA4[감마-아미노부티르산 A 수용체 알파 4(gamma-aminobutyric acid A receptor alpha 4)], TMEM56[막단백질 56(transmembrane protein 56)], SLCO4C1[용질 캐리어 유기 음이온 트랜스포터 패밀리 멤버 4C1(solute carrier organic anion transporter family member 4C1)], THRSP[갑상선 호르몬-반응 스폿14(THYROID HORMONE-RESPONSIVE SPOT14)], HAO2[히드록시산 옥시다아제 2(hydroxyacid oxidase 2)], IGJ[면역글로불린 J 폴리펩티드(immunoglobulin J polypeptide)], ACSBG1[아실코에이 합성효소 버블검 패밀리 멤버 1(acyl-CoA synthetase bubblegum family member 1)], ACP6[산 포스파타아제 6(acid phosphatase 6)], SOAT1[아실코에이:콜레스테롤 아실트랜스퍼라아제(acyl-CoA:cholesterol acyltransferase)], ELOVL3[초장쇄 지방산 신장단백질 패밀리 멤버 3(elongation of very long chain faatty acids)], C6orf188[염색체 6 오픈리딩프레임 188(chromosone 6 open reading frame 188)], HSD3B1[히드록시-델타-5-스테로이드 디하이드로게나아제 3 베타 및 스테로이드 델타-아이소머라아제 1(hydroxy-delta-5-steroid dehydrogenase 3 beta and steroid delta-isomerase 1)], MLSTD1[남성 불임 도메인 포함 1(male sterility domain containing 1)], Cyr61[시스테인-리치 단백질 61(CYSTEINE-RICH PROTEIN 61)], DKFZP586H2123[재생관련근육 프로테아제(regeneration associated muscle protease)], 및 PDZK1[PDZ 도메인 포함 1(PDZ domain containing 1)]로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 코딩하는 추가적인 폴리뉴클레오티드 또는 그 단편으로서, 상기 단편은 10개 이상의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드,또는 그의 상보적 폴리뉴클레오티드; 및상기 폴리뉴클레오티드를 표면에 결합시킨 고상 지지체를 더 포함하며,상기 추가적인 폴리뉴클레오티드에 혼성화된 전사체의 양이 정상치보다 많으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트.
- 제1항에 있어서,상기 키트는 PCOLCE2[프로콜라겐 C-엔도펩티다아제 인핸서 2(procollagen C-endopeptidase enhancer 2)], GFPT2[글루타민-프럭토오스-6-포스페이트 트랜스아미나아제 2(glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2)], CCL21[케모카인 C-C 모티프 리간드 21(chemokine C-C motif ligand 21)], 및 WIF1[WNT 억제 인자 1(WNT inhibitory factor 1)]로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상을 코딩하는 추가적인 폴리뉴클레오티드 또는 그 단편으로서, 상기 단편은 10개 이상의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드,또는 그의 상보적 폴리뉴클레오티드; 및상기 폴리뉴클레오티드를 표면에 결합시킨 고상 지지체를 더 포함하며,상기 추가적인 폴리뉴클레오티드에 혼성화된 전사체의 양이 정상치보다 적으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트.
- H19를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드; 및상기 폴리뉴클레오티드에 상보적인 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드을 포함하며,상기 폴리뉴클레오티드들을 프라이머로 하여 증폭된 DNA 양이 정상치보다 적으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트.
- 제4항에 있어서,상기 키트는 F7, MGC34923, FLJ21963, PRKAA1, ELOVL5, ACSM3, DGAT2L3, GABRA4, TMEM56, SLCO4C1, THRSP, HAO2, IGJ, ACSBG1, ACP6, SOAT1, ELOVL3, C6orf188, HSD3B1, MLSTD1, Cyr61, DKFZP586H2123, 및 PDZK1로 이루어진 군으로부터 선택된 것을 코딩하는 추가적인 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드; 및상기 군으로부터 선택된 폴리뉴클레오티드에 상보적인 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 더 포함하며,상기 추가적인 폴리뉴클레오티드들을 프라이머로 하여 증폭된 DNA 양이 정상치보다 많으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트.
- 제4항에 있어서,상기 키트는 PCOLCE2, GFPT2, CCL21, 및 WIF1로 이루어진 군으로부터 선택된 것을 코딩하는 추가적인 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드; 및상기 군으로부터 선택된 폴리뉴클레오티드에 상보적인 폴리뉴클레오티드의 단편으로서 18-22개의 연속 뉴클레오티드를 포함하는 하나 이상의 폴리뉴클레오티드를 더 포함하며,상기 추가적인 폴리뉴클레오티드들을 프라이머로 하여 증폭된 DNA 양이 정상치보다 적으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트.
- H19 항원에 결합하는 모노클로날 항체를 포함하며,상기 항체에 결합된 항원의 양이 정상치보다 적으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트.
- 제7항에 있어서,상기 키트는 F7, MGC34923, FLJ21963, PRKAA1, ELOVL5, ACSM3, DGAT2L3, GABRA4, TMEM56, SLCO4C1, THRSP, HAO2, IGJ, ACSBG1, ACP6, SOAT1, ELOVL3, C6orf188, HSD3B1, MLSTD1, Cyr61, DKFZP586H2123, 및 PDZK1로 이루어진 군으로부터 선택된 항원에 결합하는 추가적인 모노클로날 항체를 포함하며,상기 추가적인 항체에 결합된 항원의 양이 정상치보다 많으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트.
- 제7항에 있어서,상기 키트는 PCOLCE2, GFPT2, CCL21, 및 WIF1로 이루어진 군으로부터 선택된 항원에 결합하는 추가적인 모노클로날 항체를 포함하며,상기 추가적인 항체에 결합된 항원의 양이 정상치보다 적으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 진단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지용 진단 키트.
- 피부의 기미 형성을 예지하는 방법으로서, 표피 중의 H19 유전자의 발현량이 정상치보다 적으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 판단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지방법.
- 제10항에 있어서,상기 방법은 표피 중의 F7, MGC34923, FLJ21963, PRKAA1, ELOVL5, ACSM3, DGAT2L3, GABRA4, TMEM56, SLCO4C1, THRSP, HAO2, IGJ, ACSBG1, ACP6, SOAT1, ELOVL3, C6orf188, HSD3B1, MLSTD1, Cyr61, DKFZP586H2123, 및 PDZK1로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 추가적인 유전자의 발현량을 측정하는 것을 더 포함하며,추가적인 유전자의 발현량이 정상치보다 많으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 판단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지방법.
- 제10항에 있어서,상기 방법은 표피 중의 PCOLCE2, GFPT2, CCL21, 및 WIF1로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 추가적인 유전자의 발현량을 측정하는 것을 더 포함하며,추가적인 유전자의 발현량이 정상치보다 적으면 기미 형성 가능성이 있는 피부인 것으로 판단하는 것을 특징으로 하는 피부의 기미 형성 예지방법.
- 기미 형성 억제제를 스크리닝하는 방법으로서,H19 유전자에 의하여 코딩되는 단백질에 시험 화합물을 결합시키는 단계; 및상기 시험 화합물이 상기 단백질의 작용을 촉진 또는 억제하는지를 확인하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 기미 형성 억제제의 스크리닝 방법.
- 제13항에 있어서,상기 방법은 F7, MGC34923, FLJ21963, PRKAA1, ELOVL5, ACSM3, DGAT2L3, GABRA4, TMEM56, SLCO4C1, THRSP, HAO2, IGJ, ACSBG1, ACP6, SOAT1, ELOVL3, C6orf188, HSD3B1, MLSTD1, Cyr61, DKFZP586H2123, 및 PDZK1로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자에 의하여 코딩되는 추가적인 단백질, 또는 PCOLCE2, GFPT2, CCL21, 및 WIF1로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 유전자에 의하여 코딩되는 추가적인 단백질에 시험 화합물을 결합시키는 단계; 및상기 시험 화합물이 상기 추가적인 단백질의 작용을 촉진 또는 억제하는지를 확인하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 기미 형성 억제제의 스크리닝 방법.
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|---|---|---|---|---|
| KR100964433B1 (ko) * | 2008-11-07 | 2010-06-16 | (주)아모레퍼시픽 | 피부 기능 향상 물질의 스크리닝 방법 |
| WO2011154639A2 (fr) * | 2010-06-11 | 2011-12-15 | Galderma Research & Development | Modulateurs de edn3 et/ou ednrb dans le traitement du melasma |
| WO2011154640A2 (fr) * | 2010-06-11 | 2011-12-15 | Galderma Research & Development | Modulateurs de trmp1, mmp2, mia ou ptgs1 dans le traitement du melasma |
| KR102083438B1 (ko) | 2011-11-04 | 2020-03-03 | (주)아모레퍼시픽 | 피부 장벽 기능 강화 물질 스크리닝 방법 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005106745A (ja) * | 2003-10-01 | 2005-04-21 | Shiseido Co Ltd | しみ部位亢進遺伝子群を指標とした皮膚しみ形成予知方法、皮膚しみ形成抑制剤のスクリーニング方法 |
-
2007
- 2007-04-26 KR KR1020070040859A patent/KR101362951B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005106745A (ja) * | 2003-10-01 | 2005-04-21 | Shiseido Co Ltd | しみ部位亢進遺伝子群を指標とした皮膚しみ形成予知方法、皮膚しみ形成抑制剤のスクリーニング方法 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106460059A (zh) * | 2014-06-03 | 2017-02-22 | 诺华股份有限公司 | 肺动脉高压生物标志物 |
| US12012636B2 (en) | 2014-06-03 | 2024-06-18 | Novartis Ag | Pulmonary hypertension biomarker |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20080096026A (ko) | 2008-10-30 |
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