KR101349747B1 - 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물 - Google Patents
워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101349747B1 KR101349747B1 KR1020110085041A KR20110085041A KR101349747B1 KR 101349747 B1 KR101349747 B1 KR 101349747B1 KR 1020110085041 A KR1020110085041 A KR 1020110085041A KR 20110085041 A KR20110085041 A KR 20110085041A KR 101349747 B1 KR101349747 B1 KR 101349747B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- extract
- fraction
- asthma
- inflammatory diseases
- prevention
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 93
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 54
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 title claims abstract description 46
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 title claims abstract description 44
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 24
- 241000369233 Wercklea Species 0.000 title claims abstract description 11
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 16
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims abstract description 10
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims abstract description 10
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 56
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000012223 aqueous fraction Substances 0.000 claims description 12
- 239000002034 butanolic fraction Substances 0.000 claims description 12
- 239000002036 chloroform fraction Substances 0.000 claims description 12
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 12
- 239000002038 ethyl acetate fraction Substances 0.000 claims description 12
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 10
- 239000002044 hexane fraction Substances 0.000 claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 10
- 208000001640 Fibromyalgia Diseases 0.000 claims description 9
- 206010034464 Periarthritis Diseases 0.000 claims description 9
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 9
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 9
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 claims description 7
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 claims description 7
- 208000030090 Acute Disease Diseases 0.000 claims description 6
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 claims description 6
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 claims description 6
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 claims description 6
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 claims description 6
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 claims description 6
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 claims description 6
- 201000002481 Myositis Diseases 0.000 claims description 6
- 206010068319 Oropharyngeal pain Diseases 0.000 claims description 6
- 206010033078 Otitis media Diseases 0.000 claims description 6
- 201000007100 Pharyngitis Diseases 0.000 claims description 6
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 claims description 6
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 claims description 6
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000000491 Tendinopathy Diseases 0.000 claims description 6
- 206010043255 Tendonitis Diseases 0.000 claims description 6
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 6
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000037893 chronic inflammatory disorder Diseases 0.000 claims description 6
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 claims description 6
- 201000003146 cystitis Diseases 0.000 claims description 6
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000014617 hemorrhoid Diseases 0.000 claims description 6
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 claims description 6
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 claims description 6
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 6
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 6
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 claims description 6
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 6
- 201000001245 periodontitis Diseases 0.000 claims description 6
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 claims description 6
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 6
- 206010039083 rhinitis Diseases 0.000 claims description 6
- 201000004415 tendinitis Diseases 0.000 claims description 6
- 206010044008 tonsillitis Diseases 0.000 claims description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 3
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 claims 3
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 claims 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 34
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 28
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 18
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 17
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 abstract description 17
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 abstract description 17
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 abstract description 17
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 abstract description 17
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 abstract description 17
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 abstract description 13
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 abstract description 13
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 12
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 12
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 abstract description 10
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 abstract description 10
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 abstract description 9
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 abstract description 9
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 abstract description 9
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 abstract description 9
- 206010030124 Oedema peripheral Diseases 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 5
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 abstract description 5
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 abstract description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000026683 transduction Effects 0.000 abstract description 2
- 238000010361 transduction Methods 0.000 abstract description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 abstract 1
- 102100029438 Nitric oxide synthase, inducible Human genes 0.000 abstract 1
- 101710089543 Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 abstract 1
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 abstract 1
- 230000027405 negative regulation of phosphorylation Effects 0.000 abstract 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 80
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 80
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 77
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 56
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 53
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N nitrogen oxide Inorganic materials O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 41
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 20
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 18
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 102000011779 Nitric Oxide Synthase Type II Human genes 0.000 description 15
- 108010076864 Nitric Oxide Synthase Type II Proteins 0.000 description 15
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 15
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 15
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 14
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 14
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 12
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 11
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 9
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 9
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 8
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 8
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 8
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 8
- 230000036541 health Effects 0.000 description 8
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 7
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 7
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 7
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 7
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 7
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 7
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 7
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 7
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 7
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 6
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- -1 olive oil Chemical compound 0.000 description 5
- 102000034285 signal transducing proteins Human genes 0.000 description 5
- 108091006024 signal transducing proteins Proteins 0.000 description 5
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 4
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 4
- 238000013198 immunometric assay Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 4
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 4
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 4
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 4
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 4
- 101150071146 COX2 gene Proteins 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 3
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 3
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 3
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 3
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 3
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 3
- 229940119170 jojoba wax Drugs 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 3
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 3
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 229960004063 propylene glycol Drugs 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 3
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N squalane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 3
- 229940058015 1,3-butylene glycol Drugs 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100114534 Caenorhabditis elegans ctc-2 gene Proteins 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- FPVVYTCTZKCSOJ-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol distearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCCOC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC FPVVYTCTZKCSOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 2
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 108010055717 JNK Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 240000000982 Malva neglecta Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 102100037808 Mitogen-activated protein kinase 8 Human genes 0.000 description 2
- 101001076414 Mus musculus Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 101150000187 PTGS2 gene Proteins 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 235000004347 Perilla Nutrition 0.000 description 2
- 244000124853 Perilla frutescens Species 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 101150070524 Rel gene Proteins 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N allantoin Chemical compound NC(=O)NC1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BTBJBAZGXNKLQC-UHFFFAOYSA-N ammonium lauryl sulfate Chemical compound [NH4+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O BTBJBAZGXNKLQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940063953 ammonium lauryl sulfate Drugs 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000007215 black sesame Nutrition 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 2
- 235000021329 brown rice Nutrition 0.000 description 2
- 235000019437 butane-1,3-diol Nutrition 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 229940082500 cetostearyl alcohol Drugs 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- MRUAUOIMASANKQ-UHFFFAOYSA-N cocamidopropyl betaine Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CC([O-])=O MRUAUOIMASANKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940073507 cocamidopropyl betaine Drugs 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N d-alpha-Tocopheryl acetate Natural products CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229960001617 ethyl hydroxybenzoate Drugs 0.000 description 2
- 235000010228 ethyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 2
- 239000004403 ethyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 2
- NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N ethylparaben Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- FOYKKGHVWRFIBD-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol acetate Natural products CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1 FOYKKGHVWRFIBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 229940100608 glycol distearate Drugs 0.000 description 2
- 239000002035 hexane extract Substances 0.000 description 2
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000018711 interleukin-13 production Effects 0.000 description 2
- 230000017307 interleukin-4 production Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 2
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 2
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 2
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 2
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 2
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700021653 rel Genes Proteins 0.000 description 2
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N tetratriacontyl alcohol Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 235000015192 vegetable juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBOMLICNUCNMMY-KJFJCRTCSA-N 1-[(4s,5s)-4-azido-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1O[C@H](CO)[C@@H](N=[N+]=[N-])C1 HBOMLICNUCNMMY-KJFJCRTCSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSEMPUNMUMBGQG-UHFFFAOYSA-N 9-(2-anthracen-9-ylethynyl)anthracene Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3C(C#CC=3C4=CC=CC=C4C=C4C=CC=CC4=3)=C21 WSEMPUNMUMBGQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001382 Adrenal suppression Diseases 0.000 description 1
- POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N Allantoin Natural products NC(=O)N[C@@H]1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 1
- 241001107116 Castanospermum australe Species 0.000 description 1
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 241000206576 Chondrus Species 0.000 description 1
- 102100030556 Coagulation factor XII Human genes 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010080865 Factor XII Proteins 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 208000010412 Glaucoma Diseases 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000001284 I-kappa-B kinase Human genes 0.000 description 1
- 108060006678 I-kappa-B kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000002397 Kinins Human genes 0.000 description 1
- 108010093008 Kinins Proteins 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 241000218378 Magnolia Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 235000000060 Malva neglecta Nutrition 0.000 description 1
- 241000219071 Malvaceae Species 0.000 description 1
- 101001033286 Mus musculus Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 101000648740 Mus musculus Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 1
- 239000008803 NDC-052 Substances 0.000 description 1
- ODUCDPQEXGNKDN-UHFFFAOYSA-N Nitrogen oxide(NO) Natural products O=N ODUCDPQEXGNKDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007999 Nuclear Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010089610 Nuclear Proteins Proteins 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 208000008469 Peptic Ulcer Diseases 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940122907 Phosphatase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010034972 Photosensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 229920001030 Polyethylene Glycol 4000 Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 238000012356 Product development Methods 0.000 description 1
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 1
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 1
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010057190 Respiratory tract infections Diseases 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 241000906446 Theraps Species 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960000458 allantoin Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000001088 anti-asthma Effects 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000924 antiasthmatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 235000015197 apple juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 235000021279 black bean Nutrition 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000002021 butanolic extract Substances 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 235000012970 cakes Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000015190 carrot juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000008004 cell lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 239000012459 cleaning agent Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 235000014510 cooky Nutrition 0.000 description 1
- 235000012495 crackers Nutrition 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N diethyl pyrocarbonate Chemical compound CCOC(=O)OC(=O)OCC FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 239000004088 foaming agent Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019674 grape juice Nutrition 0.000 description 1
- 235000013882 gravy Nutrition 0.000 description 1
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 1
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000017306 interleukin-6 production Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 229940041476 lactose 100 mg Drugs 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010985 leather Substances 0.000 description 1
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002032 methanolic fraction Substances 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000004531 microgranule Substances 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 235000021096 natural sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 102000002574 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010068338 p38 Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- 108091005981 phosphorylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000005424 photoluminescence Methods 0.000 description 1
- 230000002165 photosensitisation Effects 0.000 description 1
- 230000036211 photosensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000017983 photosensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 231100000434 photosensitization Toxicity 0.000 description 1
- 239000003504 photosensitizing agent Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 235000013550 pizza Nutrition 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229940057838 polyethylene glycol 4000 Drugs 0.000 description 1
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 1
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229940113124 polysorbate 60 Drugs 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003352 sequestering agent Substances 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000008279 sol Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000015193 tomato juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000003860 topical agent Substances 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 239000002966 varnish Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 1
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/304—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having a modulation effect on allergy and risk of allergy
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/20—Natural extracts
- A23V2250/21—Plant extracts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Botany (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
본 발명은 워크리아 인시그니스(Wercklea insignis)의 추출물 및 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물 및 이의 분획물이 대식세포에서 인위적인 염증 유발에 의해 급격히 증가한 NO, PGE2 TNF-α의 생성억제, iNOS 및 COX-2 발현 억제, MAPK 단백질의 인산화 저해, NF-κB의 핵전이 억제, 사이토카인 IL-6와 IL-1beta의 양을 감소시킴으로써 염증을 억제하고, 카라기난 유도 마우스 모델에서 족부종 억제 효과를 나타내었고, 천식이나 알레르기에 증가되는 Th2 유형 사이토카인인 IL-4와 IL-13의 양을 현저하게 감소시키는 효과를 가짐으로써 워크리아 인시그니스 추출물 및 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증관련 질환, 알레르기 및 천식의 예방 및 치료를 위한 의약품, 건강식품용 조성물에 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 워크리아 인시그니스(Wercklea insignis) 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
일반적으로 염증 반응은 생체의 세포나 조직에 어떠한 기질적 변화를 가져오는 침습이 가해질 때 그 손상부위를 수복 재생하려고 하는 생체의 방어 반응과정이다. 따라서 이러한 일련의 반응에는 국소의 혈관, 체액의 각종 조직세포, 면역관여 세포 등이 포함된다고 한다. 최근 분자생물학의 발달과 더불어 염증성 질환이 사이토카인(cytokine)이라는 분자 수준에서의 이해가 시도되고 있으며, 이러한 질환에 영향을 주는 인자들도 하나씩 규명되고 있다.
세포막에서 핵까지 신호를 전달하는 경로는 MAPK(Mitogen-activated protein kinase) cascade를 따라 이루어지고, 현재까지 잘 알려진 MAPK으로는 Erk 외에 p38 MAPK와 JNK(jun N-terminal kinase) 등이 있으며, 이들의 표적유전자는 대부분 세포를 자라게 하는데 필요한 세포분열이나 성장을 촉진하는 호르몬을 만들고 염증 반응이나 apoptosis 등에 관여하게 된다(Vanden Berghe W et al ., J. Biol . Chem ., 273:3285-3290, 1998; Yang M et al ., Am . J. Physiol . Heart . Circ . Physiol . 294:H994-1001). 염증을 유도하는 사이토카인과 매개체들은 핵의 요소에 의해 조절된다. 그 예로 NF-κB(nuclear factor-kappa B)는 Rel 유전자계(Rel gene family)의 핵단백질로서 7가지가 있고, 세포질에서는 IκB(inhibitory kappa B)와 결합되어 불활성인 형태로 존재하나, 유해산소(reactive oxygen), TNF-α(tumor necrosis factor-alpha)과 같은 케모카인(chemokines) 및 LPS와 같은 다양한 자극에 의해 IκB 키나제가 활성화된 후 인산화 과정을 통해 IκB가 떨어져 나가게 된다. p50과 p65의 헤테로다이머(heterodimer)로 구성된 NF-κB는 활성화 된 후, 핵으로 이동하여 염증반응을 유도하는 유전자(종양괴사인자나 사이클로옥사이드 합성효소) 발현을 촉진시키는 것으로 알려져 있다(Oh GT et al ., Artherosclerosis, 159(1):17-26, 2001; Epstein FH et al ., The New England Journal of Medicine, 336(15):1066-1071, 1997; Zhang WJ et al ., FASEB J, 15(130):2423-2431, 2001; Denk A et al ., J. Biol . Chem ., 276(30):28451-28458, 2001; Sahnoun Z et al ., Phsiology, 53(4):315-339, 1998; Lindner V Pathobiology, 66(6):311-320, 1998; Landry DB et al., Am . J. Pathol., 151(4):1085-1095, 1997; ; Gerritsen ME et al., Am . J. Pathol.,147(2):p278-292, 1995).
질소산화물(NO)는 질소산화물 합성효소(NOS)에 의해 L-아르기닌(L-arginine)이 산화되어 생성되는데, 염증과정의 매개체로서 병원성 DNA를 손상시키는 방어작용을 함으로써 항상성을 유지하는 역할을 한다(Kou and Schroder, Annuals of Surgery 221, 220-235, 1995). NOS 중에서 유도성 나이트릭옥사이드 합성효소(iNOS; inducible nitric oxide synthase)는 세포 내에서 NO의 과생산에 아주 밀접한 관계가 있는 것으로 알려져 있다.
프로스타글란딘 E2(PGE2)과 류코트리엔 또한 아라키도닉산으로부터 생성되는 염증 매개체로서 특히, PGE2는 사이클로 옥사이드 합성효소(COX-2; cyclooxygenase-2 enzyme)에 의해 생성되며 주로 대식세포와 단핵구 세포에서 많이 생성되는데, 대식세포는 LPS와 같은 염증성 제제에 의해 빠르게 유도된다는 것이 밝혀졌다.
염증유발을 위해 동물모델에서 사용되는 물질들은 adjuvant, collagen II, carrageenan 등이 있는데, 해조류의 일종인 Chondrus cripus에서 추출한 carrageenan은 면역반응 억제 외에도 급성 염증 및 만성염증유발, DIC유발, 종양의 성장 촉진, Hageman factor와 kinin의 활성화, 보체의 불활성화 등 다양한 생물학적 작용이 있는 것으로 알려져 있다(Chan WY et al ., J. Pharmacol . Exptl . Therap ., 147: 48, 1965).
지금껏 일류가 개발한 약제 중 가장 강력한 항염작용을 지니고 있는 약제는 스테로이드 제제이다. 그러나 장기적으로 사용할 때 반드시 부작용을 수반하게 된다. 따라서 천식 치료에 있어 스테로이드제는 처음 사용할 때 놀라울 정도의 효과를 발휘하여 증상을 완전 소실시켜버리지만 이는 잠시일 뿐이고, 증상은 스테로이드 사용을 중지함과 함께 다시 나타나며 반복사용과 함께 증상은 더욱 심해져 간다. 스테로이드제는 둥근 다혈성의 얼굴, 체액의 저류, 부신억제, 감염에 대한 감수성의 증가와 기타 정신병, 백내장, 녹내장, 소화성 궤양, 창상 치유 지연, 초기 감염의 재활성화 등의 많은 부작용이 있다.
따라서, 천연식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 의약품이나, 별도의 정제 과정 없이 안전하게 섭취할 수 있으며 염증을 억제할 수 효과가 있고, 용이하게 식품에 이용할 수 있는 물질에 대한 연구가 필요한 실정이다. 최근 아시아 경제 2010년 6월 14일 기사자료에 의하면 “SK케미칼의 천연물 분야 신약개발로서, 위염, 치매에 이어 천식치료제가 현재 임상 2상 시험을 진행 중이며, 계획대로 진행된다면 2014년 천식치료제가 발매된다."라고 보고되었으며, 대덕넷 2010년 6월 17일 기사자료에 의하면 “한국생명공학연구원의 면역제어 연구실 이형규 박사팀이 신이(자목련의 꽃봉오리)에서 추출한 NDC-052를 천식치료제로 개발, 한국신약에 이전되어 ‘아스망’이라는 상품명으로 임상시험 3상 시험을 진행 중에 있고, 올 상반기 발매된다”는 보고와, 약사공론 2006년 1월 22일 기사자료에 의하면 “영남대 약대 장현욱 교수 연구팀이 삼백초와 가죽나무의 추출물이 천식과 알레르기 치료에 효과가 있고, 19일 한국파마에 기술 선급료 1억5000만원, 경상실시료 매출액의 4%로 기술이전 계약을 체결하였다“는 보고도 있었듯이 천연식물 추출물의 연구가 활발히 진행되고 있다.
워크리아 인시그니스(Wercklea insignis Pittier & Standl.)는 아욱목 아욱과에 속하는 식물로써, 코스타리카 인근에서 자생한다. 이 식물이 속하는 아욱목, 아욱과의 식물을 염증, 알러지 치료에 이용한다는 선행문헌은 있으나(KR 10-2007-0001359, KR 10-2008-0079489, US 2004/019429 A1, US 1989/0346104 A1, WO 03/033007 A1), 워크리아 인시그니스와 동속 및 동종에 대한 문헌은 아직 보고되지 않았다.
이에, 본 발명자들은 워크리아 인시그니스의 추출물 및 이의 분획물을 제조하고, 상기 추출물 및 이의 분획물이 염증에 의해 증가한 질소산화물의 생성 저해, iNOS 발현 억제, 프로스타글란딘 생성 억제, COX-2 발현 억제, MAPK 단백질의 인산화 저해, NF-κB의 핵으로 이동 저해, IL-6 및 IL-1beta 사이토카인의 생성 저해, TNF-α 생성 저해, 비장 세포에서 Th2 유형 사이토카인인 IL-4 및 IL-13 생성 저해 및 카라기난(carrageenan) 유도 마우스 모델에서 족부종 억제 등의 우수한 항염증, 항천식 효과를 가지며, 독성이 없는 안전한 물질로, 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료를 위한 조성물로 사용될 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 워크리아 인시그니스(Wercklea insignis) 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물, 건강식품용 조성물 및 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 워크리아 인시그니스(Wercklea insignis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 워크리아 인시그니스 추출물에 유기용매를 가하여 제조한 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 워크리아 인시그니스 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 개선용 건강식품용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 워크리아 인시그니스 추출물에 유기용매를 가하여 제조한 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 개선용 건강식품용 조성물을 제공한다.
아울러, 본 발명은 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물은 독성이 없는 안전한 물질로, 염증에 의해 증가한 질소산화물의 생성 저해, iNOS 발현 억제, 프로스타글란딘 생성 억제, COX-2 발현 억제, MAPK 단백질의 인산화 저해, NF-κB의 핵으로 이동 저해, IL-6 및 IL-1beta 사이토카인의 생성 저해, TNF-α 생성 저해, 비장 세포에서 IL-4 및 IL-13 생성 저해 및 카라기난 유도 마우스 모델에서 족부종을 억제함으로써 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물, 건강식품용 조성물 또는 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 워크리아 인시그니스(Wercklea insignis) 추출물 또는 이의 분획물을 제조하는 방법을 나타낸 그래프이다.
도 2는 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드(LPS, lipopolysaccharides)로 유도된 iNOS의 발현에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 억제 효과를 나타낸 그래프이다:
음성대조군: 0.2% DMSO만 투여한 군;
LPS: 1㎍/㎖의 LPS를 처리하여 염증이 유도된 양성대조; 및
LPS+WI추출물: 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 40㎍/㎖ 처리한 후 LPS로 유도한 군.
도 2a : 핵산증폭분석;
도 2b : 웨스턴 블랏팅; 및
도 2c : 면역형광분석
도 3은 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드(LPS)로 유도된 COX-2의 발현에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 억제 효과를 나타낸 그래프이다:
도 3a : 핵산증폭분석;
도 3b : 웨스턴 블랏팅; 및
도 3c : 면역형광분석.
도 4는 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드로 유도된 신호전달 단백질의 인산화에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그림이다.
도 5는 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드로 유도된 NF-kB의 단백질의 핵으로의 이동에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드로 유도된 사이토카인의 생성에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다:
# : 음성대조군에 대한 P값이 0.005 이하;
* : 양성대조군에 대한 P값이 0.05 이하; 및
** : 양성대조군에 대한 P값이 0.005 이하.
도 7은 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드로 유도된 TNF-alpha의 생성에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다.
도 8은 카라기난(carrageenan)으로 유도된 마우스 족부종에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다:
* : 음성대조군에 대한 P값이 0.15 이하; 및
** : 음성대조군에 대한 P값이 0.05 이하.
도 9는 비장 세포에서 ConA로 유도된 사이토카인의 생성에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다:
# : 음성대조군에 대한 P값이 0.005 이하;
* : 양성대조군에 대한 P값이 0.05 이하; 및
** : 양성대조군에 대한 P값이 0.005 이하.
도 2는 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드(LPS, lipopolysaccharides)로 유도된 iNOS의 발현에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 억제 효과를 나타낸 그래프이다:
음성대조군: 0.2% DMSO만 투여한 군;
LPS: 1㎍/㎖의 LPS를 처리하여 염증이 유도된 양성대조; 및
LPS+WI추출물: 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 40㎍/㎖ 처리한 후 LPS로 유도한 군.
도 2a : 핵산증폭분석;
도 2b : 웨스턴 블랏팅; 및
도 2c : 면역형광분석
도 3은 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드(LPS)로 유도된 COX-2의 발현에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 억제 효과를 나타낸 그래프이다:
도 3a : 핵산증폭분석;
도 3b : 웨스턴 블랏팅; 및
도 3c : 면역형광분석.
도 4는 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드로 유도된 신호전달 단백질의 인산화에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그림이다.
도 5는 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드로 유도된 NF-kB의 단백질의 핵으로의 이동에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다.
도 6은 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드로 유도된 사이토카인의 생성에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다:
# : 음성대조군에 대한 P값이 0.005 이하;
* : 양성대조군에 대한 P값이 0.05 이하; 및
** : 양성대조군에 대한 P값이 0.005 이하.
도 7은 RAW264.7 세포에서 리포폴리사카라이드로 유도된 TNF-alpha의 생성에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다.
도 8은 카라기난(carrageenan)으로 유도된 마우스 족부종에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다:
* : 음성대조군에 대한 P값이 0.15 이하; 및
** : 음성대조군에 대한 P값이 0.05 이하.
도 9는 비장 세포에서 ConA로 유도된 사이토카인의 생성에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 저해 효과를 나타낸 그래프이다:
# : 음성대조군에 대한 P값이 0.005 이하;
* : 양성대조군에 대한 P값이 0.05 이하; 및
** : 양성대조군에 대한 P값이 0.005 이하.
이하, 본 발명 상세히 설명한다.
본 발명은 워크리아 인시그니스(Wercklea insignis) 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물은
1) 워크리아 인시그니스를 물, 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출하는 단계; 및
2) 단계 1)의 추출물을 감압농축 및 건조시켜 건조분말을 수득하는 단계를 포함하는 제조 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 상기 방법에 한정되지 않는다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 1)에서는 워크리아 인시그니스는 재배한 것 또는 시판되는 것을 제한 없이 사용될 수 있다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 1)의 알코올은 C1 내지 C2 저급 알코올을 이용하는 것을 특징으로 하며, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하나, 메탄올을 이용하여 추출하는 것이 바람직하다. 추가적으로 유기물질은 100% 알코올에서 용출이 더 잘 되고 배당체는 알코올 수용액에서 용출이 더 잘 되므로 필요에 따라 알코올 또는 알코올 수용액으로 선택하여 사용할 수 있다. 상온에서 추출하는 것이 바람직하나 이에 한정하는 것은 아니다. 아울러 추출 회수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 2)의 감압농축 및 건조과정은 당 업계에서 사용되는 통상의 방법에 의해 수행될 수 있다.
본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물의 유기용매 분획물은
1) 워크리아 인시그니스 추출물의 물 현탁액을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올로 분획하는 단계 및
2) 단계 1)의 분획물을 감압농축 및 건조시켜 건조분말을 수득하는 단계를 포함하는 제조 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 상기 방법에 한정되지 않는다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 1)의 워크리아 인시그니스 추출물은 상기 기재된 추출물 제조 방법에 따라 제조가 가능하나 이에 한정되지 않는다.
상기 염증성 질환은 피부염, 알레르기, 아토피, 천식, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루푸스, 섬유근통 (fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 건주위염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome), 다발성 경화증, 및 급성 및 만성 염증 질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명은 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 개선용 건강식품용 조성물을 제공한다.
본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물은
1) 워크리아 인시그니스를 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하는 단계; 및
2) 단계 1)의 추출물을 감압농축 및 건조시켜 건조분말을 수득하는 단계를 포함하는 제조 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 상기 방법에 한정되지 않는다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 1)에서는 워크리아 인시그니스는 재배한 것 또는 시판되는 것을 제한 없이 사용될 수 있다.
유기물질은 100% 알코올에서 용출이 더 잘 되고 배당체는 알코올 수용액에서 용출이 더 잘 되므로 필요에 따라 에탄올 또는 에탄올 수용액으로 선택하여 사용할 수 있다. 상온에서 추출하는 것이 바람직하나 이에 한정하는 것은 아니다. 아울러 추출 회수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 2)의 감압농축 및 건조과정은 당 업계에서 사용되는 통상의 방법에 의해 수행될 수 있다.
본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물의 유기용매 분획물은
1) 워크리아 인시그니스 추출물의 물 현탁액을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올로 분획하는 단계 및
2) 1)의 분획물을 감압농축 및 건조시켜 건조분말을 수득하는 단계를 포함하는 제조 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 상기 방법에 한정되지 않는다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 1)의 워크리아 인시그니스 추출물은 상기 기재된 추출물 제조 방법에 따라 제조가 가능하나 이에 한정되지 않는다.
상기 염증성 질환은 피부염, 알레르기, 아토피, 천식, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루푸스, 섬유근통 (fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 건주위염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome), 다발성 경화증, 및 급성 및 만성 염증 질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명자들은 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물이 세포독성이 있는지 알아보기 위해, 대식세포에 대조군(DMSO), 본 발명의 추출물들을 처리한 후 배양한 다음 세포의 생존율을 측정하였다. 그 결과, 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물과 부탄올 분획물은 40 ㎍/㎖ 농도까지 독성이 거의 없음을 확인하였다. 그러나, 클로로포름과 에틸아세테이트 분획물은 40 ㎍/㎖의 농도에서 급격히 세포독성이 증가하는 것을 확인하였다. 따라서, 본 발명의 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물 또는 이의 분획물은 세포독성에 안전한 물질임을 알 수 있다(표 1 참조).
본 발명자들은 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물의 염증성 질환 또는 천식에 대한 억제 효과를 알아보기 위하여 유도성 질소산화물(NO) 생성량, iNOS 발현량 변화 및 IL-6 저해 효과를 측정하였다. 그 결과, LPS에 의해 유발된 염증에 대하여 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물이 농도의존적으로 질소산화물과 IL-6의 생산량을 감소시키고, 물 분획물을 제외하고는 모든 분획물에서 저해효과를 나타내었다(표 2 참조). 또한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 처리한 군에서 처리농도에 따라 iNOS의 핵산 발현량(도 2a 참조) 및 단백질 발현량(도 2b 및 도 2c 참조)이 현저히 감소하였다.
본 발명자들은 워크리아 인시그니스 추출물이 염증성 질환 또는 천식에 대한 억제 효과를 알아보기 위하여 프로스타글란딘 E2 생성량, COX-2 발현량 변화를 측정하였다. 그 결과, LPS에 의해 유발된 염증에 대하여 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물이 농도의존적으로 프로스타글란딘 E2 생산량을 감소시키고, 특히 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물 40 ㎍/㎖을 처리한 군에서는 85.63 ± 0.69 %의 저해 효과를 나타내었다(표 3 참조). 또한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 처리한 군에서 처리농도에 따라 COX-2의 핵산 발현량(도 3a 참조) 및 단백질 발현량(도 3b 및 도 3c 참조)이 현저히 감소하였다.
본 발명자들은 워크리아 인시그니스 추출물의 신호전달 단백질의 발현 억제효과를 확인한 결과, 대식세포에 LPS와 본 발명의 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 동시에 처리한 경우 전체형태의 신호전달 단백질들의 발현은 동일한 반면, 인산화 형태의 단백질들은 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 농도의존적으로 발현이 감소하는 것을 확인하였다(도 4 참조)
본 발명자들은 워크리아 인시그니스 추출물이 염증성 질환 또는 천식에 대한 억제 효과를 알아보기 위하여 NF-κB 단백질의 핵으로 이동하는지 여부를 측정하였다. 그 결과, LPS만 처리한 세포에 비해 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 함께 처리한 세포에서 p65가 핵 내에서 적게 관찰됨을 확인하였다(도 5 참조).
본 발명자들은 워크리아 인시그니스 추출물이 염증성 질환 또는 천식에 대한 억제 효과를 알아보기 위하여 사이토카인 IL-6와 IL-1beta의 생성량 변화를 측정하였다. 그 결과, LPS를 처리한 군에서 IL-6와 IL-1beta의 양이 증가하였고, LPS에 의해 증가된 사이토카인의 양이 처리된 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 농도에 따라 감소함을 확인하였다(도 6 참조).
본 발명자들은 워크리아 인시그니스 추출물이 염증성 질환 또는 천식에 대한 억제 효과를 알아보기 위하여 TNF-α의 생성량 변화를 측정하였다. 그 결과 LPS를 처리한 군에서 TNF-α의 양이 증가하였고, LPS에 의해 증가된 TNF-α의 양이 처리된 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 농도에 따라 감소함을 확인하였다(도 7 참조).
본 발명자들은 카라기난(carrageenan) 유도 마우스 족부종에 대한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 억제효과를 확인한 결과, 음성대조군은 카라기난에 의해 염증이 유도되어 발의 두께가 증가하였으나, 워크리아 인시그니스 추출물을 전처리한 군에서는 농도의존적으로 발의 두께가 감소함을 확인하였다(도 8 참조).
본 발명자들은 워크리아 인시그니스 추출물이 염증성 질환 또는 천식에 대한 억제 효과를 알아보기 위하여 비장세포에서 사이토카인 IL-4와 IL-13의 생성량 변화를 측정하였다. 그 결과, ConA에 의해 유도되는 사이토카인 IL-4와 IL-13의 양이 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 함께 처리한 군에서는 농도의존적으로 감소되었다(도 9 참조).
따라서, 본 발명의 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물 및 이의 분획물은 질소산화물의 생성 억제, 프로스타글란딘 생성 억제, MAPK 단백질의 인산화 저해, NF-κB의 핵으로의 이동 억제, 사이토카인 IL-6와 IL-1beta의 생성 억제, TNF-α의 생성 억제, 카라기난 유도 마우스 모델에서 족부종 억제 및 사이토카인 IL-4와 IL-13의 생성 억제 효과를 나타냄으로써 염증성 질환 또는 천식의 예방 또는 치료에 사용될 수 있음을 알 수 있다.
본 발명의 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물은 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유할 수 있으며, 상기 성분에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물은 임상 투여 시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 본 발명의 조성물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 본 발명의 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 비경구 투여시 피하주사, 정맥주사 또는 근육내 주사를 통할 수 있다.
투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다. 본 발명의 조성물의 유효용량은 0.0001 ~ 10 g/㎏이고, 바람직하기로는 0.0001 g ~ 5 g/kg이며, 하루 1 ~ 6회 투여될 수 있다.
본 발명의 조성물은 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
또한,본 발명은 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 예방 및 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물은
1) 워크리아 인시그니스를 물, 알코올 또는 이들의 혼합물로 추출하는 단계; 및
2) 단계 1)의 추출물을 감압농축 및 건조시켜 건조분말을 수득하는 단계를 포함하는 제조 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 상기 방법에 한정되지 않는다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 1)에서는 워크리아 인시그니스는 재배한 것 또는 시판되는 것을 제한 없이 사용될 수 있다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 1)의 알코올은 C1 내지 C2 저급 알코올을 이용하는 것을 특징으로 하며, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하나, 메탄올을 이용하여 추출하는 것이 바람직하다. 추가적으로 유기물질은 100% 알코올에서 용출이 더 잘 되고 배당체는 알코올 수용액에서 용출이 더 잘 되므로 필요에 따라 알코올 또는 알코올 수용액으로 선택하여 사용할 수 있다. 상온에서 추출하는 것이 바람직하나 이에 한정하는 것은 아니다. 아울러 추출 회수는 1 내지 5회인 것이 바람직하며, 3회 반복 추출하는 것이 더욱 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 2)의 감압농축 및 건조과정은 당 업계에서 사용되는 통상의 방법에 의해 수행될 수 있다.
본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물의 유기용매 분획물은
1) 워크리아 인시그니스 추출물의 물 현탁액을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올로 분획하는 단계 및
2) 단계 1)의 분획물을 감압농축 및 건조시켜 건조분말을 수득하는 단계를 포함하는 제조 방법에 의해 제조되는 것이 바람직하나 상기 방법에 한정되지 않는다.
상기 제조 방법에 있어서, 단계 1)의 워크리아 인시그니스 추출물은 상기 기재된 추출물 제조 방법에 따라 제조가 가능하나 이에 한정되지 않는다.
상기 염증성 질환은 피부염, 알레르기, 아토피, 천식, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루푸스, 섬유근통 (fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 건주위염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome), 다발성 경화증, 및 급성 및 만성 염증 질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물 및 이의 분획물은 질소산화물의 생성 억제, 프로스타글란딘 생성 억제, MAPK 단백질의 인산화 저해, NF-κB의 핵으로의 이동 억제, 사이토카인 IL-6와 IL-1beta의 생성 억제, TNF-α의 생성 억제, 카라기난 유도 마우스 모델에서 족부종 억제 및 사이토카인 IL-4와 IL-13의 생성 억제 효과를 나타냄으로써 염증성 질환 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있음을 알 수 있다.
상기 화장료 조성물은, 예를 들면 용액, 겔, 고체 또는 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀), 비이온형의 소낭 분산제의 형태, 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한, 포말(foam)의 형태 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 제조될 수 있다.
또한, 상기 화장료 조성물은 본 발명의 분획물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.
또한, 본 발명은 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 개선용 건강식품용 조성물을 제공한다.
본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 상기 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물은 열수 및 에탄올을 이용하여 추출하는 것이 바람직하다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.
상기 외에 본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 상기 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 염증성 질환 또는 천식에 걸린 개체에 투여하는 단계를 포함하는 염증성 질환 또는 천식 치료 방법을 제공한다.
아울러, 본 발명은 약학적으로 유효한 양의 상기 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 염증성 질환 또는 천식 예방 방법을 제공한다.
상기 개체는 인간을 포함한 모든 동물이 가능하다.
상기 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물은 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
상기 투여는 경구 투여, 또는 피하주사, 정맥주사 또는 근육내 주사를 통한 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다.
상기 투여 단위는, 개별 투여량의 1, 2, 3 또는 4배를 함유하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4배를 함유할 수 있다. 개별 투여량은 바람직하기로는 유효 약물이 1회에 투여되는 양을 함유하며, 이는 통상 1일 투여량의 전부, 1/2, 1/3 또는 1/4배에 해당한다. 유효용량은 0.0001 ~ 10 g/㎏이고, 바람직하기로는 0.0001 g ~ 5 g/kg이며, 하루 1 ~ 6회 투여될 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예, 실험예 및 제조예에 의하여 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예, 실험예 및 제조예는 본 발명을 구체적으로 예시하는 것이며, 본 발명의 내용이 실시예, 실험예 및 제조예에 의해 한정되는 것은 아니다.
<
실시예
1>
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물 또는 이의
분획물의
제조
<1-1>
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물의 제조
자연건조된 워크리아 인시그니스 잎 0.6 kg을 100% 메탄올로 실온에서 24시간 간격으로 3회 추출하여 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물(이하 "워크리아 인시그니스 추출물"이라고 명명함) 29.5 g을 얻었다.
<1-2>
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물의
분획물의
제조
상기 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 물 1 L로 현탁시키고, 동량의 100% 헥산을 가하여 진탕 방치하기를 3회 실시하여 물층을 제거한 후 헥산추출물 8.27g을 얻었다. 헥산 추출물을 제거하고 남은 물층에 클로로포름 동량을 가하여 진탕 방치하기를 3회 반복하여 클로로포름 추출물 4.28g을 얻었으며, 다시 남은 물층에 에틸아세테이트를 동량 가하여 같은 방법으로 에틸아세테이트 추출물 1.44g을 얻었으며, 또다시 남은 물층에 부탄올을 동량 가하여 같은 방법으로 부탄올 추출물 3.31g을 얻었으며, 남은 물층을 농축하여 물 추출물 4.68g을 얻었다(도 1).
<
실험예
1>
Raw264
.7 세포에서의
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물 및 이의
분획
물에 대한 세포독성실험
<1-1> 세포 배양
대식세포주 RAW264.7 세포(ATCC® No. TIB-71)는 10% FBS(fetal bovine serum), 2 mM L-글루타민(glutamine), 100 units/㎖ 페니실린(penicillin) 및 100 ㎍/㎖ 스트렙토마이신(streptomycin)이 함유된 DMEM 배지를 이용하여 37℃, 5% CO2 습윤 배양기에서 배양하였다.
<1-2> 세포독성 측정
생쥐의 대식세포인 Raw264.7 세포를 소태아혈청(Fetal Bovine Serum) 5% 첨가한 DMEM(D㎕becco's Modified Eagle Medium, Gibco사) 배지에 1x105/㎖의 농도로 현탁하여 100 ㎕씩 96웰 플레이트(96 well plate)에 접종하여 부착하였다. 4시간 후에 추출물 및 이의 분획물을 농도별로 처리하였다. 24시간 동안 배양한 후, 5 ㎎/㎖의 MTT용액을 웰당 10 ㎕씩 첨가한 후 4시간 더 배양을 하고, 배양이 끝난 후, 상등액을 제거하고, DMSO를 100 ㎕씩 첨가한 후 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였으며, 세포생존률은 DMSO를 0.1% 처리한 음성대조군를 100%로 하여 하기 수학식에 따라 계산하였다.
워크리아 인시그니스 시료 (㎍/㎖) | 세포생존율 (%) |
음성대조군 | 100.00 ± 1.53 |
메탄올 추출물 5 | 101.81 ± 0.10 |
메탄올 추출물 10 | 95.59 ± 0.35 |
메탄올 추출물 20 | 94.77 ± 0.21 |
메탄올 추출물 40 | 92.25 ± 0.36 |
헥산 분획물 5 | 99.33 ± 0.83 |
헥산 분획물 10 | 86.26 ± 4.13 |
헥산 분획물 20 | 86.12 ± 4.74 |
헥산 분획물 40 | 78.89 ± 0.76 |
클로로포름 분획물 5 | 95.19 ± 1.85 |
클로로포름 분획물 10 | 87.70 ± 0.56 |
클로로포름 분획물 20 | 92.54 ± 1.45 |
클로로포름 분획물 40 | 59.93 ± 0.44 |
에틸아세테이트 분획물 5 | 90.37 ± 1.44 |
에틸아세테이트 분획물 10 | 93.13 ± 2.23 |
에틸아세테이트 분획물 20 | 98.96 ± 3.07 |
에틸아세테이트 분획물 40 | 55.81 ± 3.74 |
부탄올 분획물 5 | 94.11 ± 0.75 |
부탄올 분획물 10 | 97.09 ± 5.50 |
부탄올 분획물 20 | 91.03 ± 2.62 |
부탄올 분획물 40 | 84.14 ± 1.29 |
물 분획물 5 | 93.14 ± 1.07 |
물 분획물 10 | 94.27 ± 0.31 |
물 분획물 20 | 98.82 ± 5.81 |
물 분획물 40 | 94.06 ± 0.62 |
표 1은 워크리아 인시그니스 추출물 및 이의 분획물에 대한 독성실험결과이며, 상기와 같이 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물과 부탄올 분획물은 40 ㎍/㎖ 농도까지 독성이 거의 없음을 확인하였다. 그러나, 클로로포름과 에틸아세테이트 분획물은 40 ㎍/㎖의 농도에서 급격히 세포독성이 증가하는 것을 확인하였다.
<
실험예
2> 질소산화물(
NO
)과 사이토카인
IL
-6 생성에 관한
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물의 저해 효과
<2-1>
Raw264
.
7세포에서의
질소산화물(
NO
)과 사이토카인
IL
-6 생성 저해 실험
Raw264.7 세포에 LPS를 처리하여 인위적으로 유발시킨 염증에 대한 억제 효과를 알아보기 위하여 유도성 질소산화물의 생성량을 측정하였다.
구체적으로 페놀레드(phenol-Red)가 들어있지 않은 DMEM(D㎕becco's Modified Eagle Medium, Gibco사) 배지에 소태아혈청(Fetal Bovine Serum)을 5% 첨가하고, 세포를 1x105 세포를 현탁하여 96웰 플레이트(96 well plate)에 접종하였다. 4시간 동안 부착시킨 후, 시료를 0, 5, 10, 20 또는 40 ㎍/㎖의 농도로 처리하여 1시간 동안 배양한 후에 1㎍/㎖의 리포폴리사카라이드(LPS, lipopolysaccharide, Sigma사)를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 그 후, 상층액 100 μl를 회수하여 새로운 96웰 플레이트에 넣고, 그리스 시약(Griess reagent, Sigma사)을 동량 첨가하여 상온에서 10분간 반응시킨 후, 마이크로플레이트 측정기(microplate reader, Bio-Rad사)로 540 ㎚ 파장에서 흡광도를 측정하였다. 소디움 나이트라이트(sodium nitrite)를 이용하여 검량선을 작성하고, 이를 기준으로 배양액 내의 질소산화물 생성량을 구하였으며, 리포폴리사카라이드를 처리한 군의 질소산화물 생성량을 100%로 하여 각 시료의 저해율을 퍼센트로 나타내었다. 또한, 리포폴리사카라이드를 처리한 Raw264.7 세포에서의 워크리아 인시그니스 추출물 및 이의 분획물의 사이토카인 생성 저해 효과를 확인하기 위하여, 리포폴리사카라이드로 유도된 IL-6의 생성량을 효소면역학적 분석키트(mouse IL-6 Enzyme Immunometric Assay Kit, Assay designs, USA)를 이용하여 측정하였다.
워크리아 인시그니스 시료 (㎍/㎖) | NO 생성량 ( uM ) | IL -6 생성량 ( pg /㎖) | IL -6 Inhibition (%) |
음성대조군 | 0.29 ± 0.07 | -18.00 ± 1.57 | |
LPS | 21.55 ± 0.14 | 1341.63 ± 28.28 | |
LPS + 메탄올 추출물 5 | 19.84 ± 0.12 | 1206.82 ± 62.85 | 10.05 ± 4.68 |
LPS + 메탄올 추출물 10 | 19.09 ± 0.24 | 954.96 ± 104.76 | 28.82 ± 7.81 |
LPS + 메탄올 추출물 20 | 16.85 ± 0.08 | 790.15 ± 26.71 | 41.11 ± 1.99 |
LPS + 메탄올 추출물 40 | 11.61 ± 0.20 | 194.59 ± 47.14 | 85.50 ± 3.51 |
LPS + 헥산 분획물 5 | 21.00 ± 0.19 | 1225.89 ± 66.26 | 8.63 ± 4.94 |
LPS + 헥산 분획물 10 | 21.24 ± 0.19 | 1181.63 ± 42.43 | 11.93 ± 3.16 |
LPS + 헥산 분획물 20 | 17.91 ± 0.86 | 908.48 ± 86.69 | 32.29 ± 6.46 |
LPS + 헥산 분획물 40 | 13.21 ± 0.85 | 149.96 ± 80.40 | 88.82 ± 5.99 |
LPS + 클로로포름 분획물 5 | 20.44 ± 0.76 | 1158.67 ± 17.81 | 13.64 ± 1.33 |
LPS + 클로로포름 분획물 10 | 18.26 ± 0.23 | 1083.67 ± 28.02 | 19.23 ± 2.09 |
LPS + 클로로포름 분획물 20 | 14.58 ± 1.06 | 736.07 ± 80.14 | 45.14 ± 5.97 |
LPS + 클로로포름 분획물 40 | 1.32 ± 0.03 | 7.74 ± 2.36 | 99.42 ± 0.18 |
LPS + 에틸아세테이트 분획물 5 | 20.79 ± 0.34 | 1228.11 ± 11.26 | 8.46 ± 0.84 |
LPS + 에틸아세테이트 분획물 10 | 18.65 ± 0.15 | 1159.59 ± 3.40 | 13.57 ± 0.25 |
LPS + 에틸아세테이트 분획물 20 | 12.74 ± 1.72 | 684.78 ± 57.35 | 48.96 ± 4.27 |
LPS + 에틸아세테이트 분획물 40 | 1.36 ± 0.15 | -11.15 ± 2.36 | 100.83 ± 0.18 |
LPS + 부탄올 분획물 5 | 19.78 ± 1.09 | 1021.44 ± 23.83 | 23.87 ± 1.78 |
LPS + 부탄올 분획물 10 | 19.13 ± 0.44 | 910.52 ± 81.19 | 32.13 ± 6.05 |
LPS + 부탄올 분획물 20 | 14.77 ± 0.05 | 569.41 ± 74.90 | 57.56 ± 5.58 |
LPS + 부탄올 분획물 40 | 2.20 ± 0.02 | 67.93 ± 24.09 | 94.94 ± 1.80 |
LPS + 물 분획물 5 | 22.38 ± 0.23 | 1296.07 ± 33.52 | 3.40 ± 2.50 |
LPS + 물 분획물 10 | 21.83 ± 0.18 | 1276.63 ± 10.21 | 4.84 ± 0.76 |
LPS + 물 분획물 20 | 19.69 ± 1.42 | 1249.59 ± 97.69 | 6.86 ± 7.28 |
LPS + 물 분획물 40 | 21.80 ± 0.82 | 1312.19 ± 8.64 | 2.19 ± 0.64 |
표 2는 워크리아 인시그니스 추출물 및 이의 분획물의 질소산화물 생성 저해 효과와 사이토카인 생성 저해 효과를 나타내며, 상기와 같이 리포폴리사카이드를 처리한 군에 비해 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 처리한 군에서 농도의존적으로 질소산화물과 IL-6의 생산량이 감소하는 것을 확인하였고, 물 분획물을 제외하고는 모든 분획물에서 저해효과를 나타내었다(표 2). 따라서, 이후 실험은 시료를 획득하기 쉬운 메탄올 추출물로 실험을 실시하였다.
<2-2>
iNOS
유전자의 발현 억제 실험 (
RT
-
PCR
)
실험예 <2-1>의 방법으로 100 mm 페트리디쉬에 1× 106 개의 세포를 분주하고, 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 농도별로 처리하고, LPS로 염증을 유도시켜 24시간 배양 후, 배지를 제거한 다음에 세포를 배양용기로부터 떼어내어 리보핵산 추출 용액(Invitrogen, CA, USA)을 사용하여 세포를 균질화하였다. 5분 후에 세포를 모아서 원심분리관에 옮기고, 200 ㎕의 클로로포름을 넣고 15초간 완전히 섞어주고, 3분간 방치한 후, 14000 rpm에서 15분간 원심분리하였다. 리보핵산을 포함하는 상등액을 새로운 관에 옮겨 담고 아이소프로필알코올 500 ㎕와 혼합하였다. 10분 후 다시 원심분리를 하여 상등액은 버리고, 침천물에 75% 에탄올 1 ㎖을 넣고 10000 rpm에서 5분간 원심분리한 후, 상등액은 버리고 침전된 리보핵산은 20분간 상온에서 건조시켰다. 건조된 리보핵산은 DEPC(Diethylpyrocarbonate, Sigma)가 처리된 증류수로 현탁하였다. 리보핵산은 정량 후, RT-PreMix (AccuPower RT PreMix, 바이오니아, 한국)를 이용하여 상보적 핵산(complementary DNA)를 합성하였다. 합성된 cDNA를 템플릿(template)로 하고, iNOS 프라이머(primer)를 혼합하고, PCR Premix (AccuPower PCR PreMix, 바이오니아, 한국)를 사용하여 리보핵산의 발현 정도를 확인하였다.
그 결과, 도 2a에서 보는 바와 같이 음성대조군에 비해 리포폴리사카라이드를 처리한 양성대조군의 iNOS 발현이 증가하는 것을 확인하였고, 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 처리한 군에서 처리농도에 따라 iNOS의 핵산 발현량이 현저히 줄어드는 것을 확인하였다(도 2a).
<2-3>
iNOS
단백질의 발현 억제 실험 (
Western
blotting
)
실험예 <2-1>의 방법으로 100 mm 페트리디쉬에 1× 106 개의 세포를 분주하고, 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 농도별로 처리하고, LPS로 염증을 유도시켜 24시간 배양 후, 배지를 제거한 다음에 세포를 배양용기로부터 떼어내어 단백질 분해효소 저해제(Protease inhibitor cocktail, Roche, USA)를 함유한 단백질 용출용액(CelLyticTM-MT Tissue Lysis Reagent, Sigma, USA)을 사용하여 균질화하였다. 추출액은 20분 동안 14000 rpm에서 원심분리한 뒤 상등액과 불용성 응집체를 분리하였다. 분리된 상등액의 단백질 농도는 바이오-라드 단백질 분석 키트(Bio-Rad protein assay kit, Bio-Rad, USA)를 이용하여 측정하였다. 또한, 상등액을 5× SDS(0.156M Tris-HCl, pH 6.8, 2.5% SDS, 37.5% 글리세롤, 37.5 mM DTT)와 1:4로 섞어 100℃에서 10분간 끓였다. 끓인 시료에서 40 ㎍ 단백질을 SDS 4-12% SDS-PAGE 겔에 로딩하고 125 V에서 2시간 동안 전기영동 하여 분자량에 따라 분리하였고, 상기 단백질을 겔 한 장당 50 mA의 조건으로 1시간 동안 전기영동 하여 PVDF 막으로 옮겼다. 단백질이 옮겨진 막에서 단백질이 없는 부분을 탈지 분유로 차단(blocking)시킨 다음, 1차 항체[항-iNOS 항체(1:1000, Santa Cruz Biotechnology, USA)] 및 2차 항체(항토끼-IgG-HRP; Amersham Biosciences, UK)를 순차적으로 결합시킨 후, ECL 검출 키트(Amersham Biosciences, UK)로 발광반응을 유발하였고 X-ray 필름에 노출시켜 감광하였다. 단백질 밴드의 상대적인 밀도는 이미지 분석시스템을 이용하여 감광의 정도를 검출하고, Tina 2.0 소프트웨어 (//linux.softpedia.com/get/System/Operating-Systems/Linux-Distributions/ TINA-KNOPPIX-Live-CD-5172.sht㎖)를 이용하여 정량하였다.
그 결과, 도 2b에서 나타내는 바와 같이 대식세포에 LPS와 본 발명의 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 동시에 처리한 경우 농도의존적으로 iNOS의 단백질 발현이 감소하였다(도 2b).
<2-4>
iNOS
단백질의
면역형광염색
실험 (
Immunofluoresence
)
약 2×105/㎖ 세포를 퍼머녹스 챔버 플라스틱 슬라이드(Permanox chambered plastic slides; Nunc, USA)에서 배양한 후 상등액을 제거하였다. 이후 4℃에서 30분간 에탄올로 고정하였고, 인산 완충액(PBS)으로 세척한 후, 3% 소 혈청 알부민(bovine serum albumin)으로 실온에서 30분간 차단하였다. 차단 후 1차 항체[항-iNOS 항체(1:100)]를 4℃에서 하루 동안 반응시켰다. 인산 완충액으로 3번 세척한 이후에 텍사스레드(Texas red; Santa Cruz Biotechnology, USA))가 연결된 2차 항체(Santa Cruz Biotechnology, USA)를 실온의 암조건에서 2시간 동안 반응하였다. 인산완충액으로 프로롱 골드 안티페드 용액(ProLong Gold Antifade reagent, Invitrogen, USA)으로 3번 마운팅한 후 공초점 현미경(LSM510m Carl Zeiss, Germany)으로 촬영하였다.
그 결과, 도 2c에서 보는 바와 같이 LPS만 처리한 세포에 비해 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 함께 처리한 세포에서 iNOS의 발현이 감소한 것을 확인하였다(도 2c).
<
실험예
3> 프로스타글란딘 생성에 관한
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물의 억제 효과
<3-1>
Raw264
.
7세포에서의
프로스타글란딘 생성 저해 실험
워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 프로스타글란딘 E2(Prostaglandin E2) 생성 저해 효과를 확인하기 위한 실험을 진행하였다. 실험예 <2-1>의 방법으로 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물과 리포폴리사카라이드를 처리한 Raw264.7 세포의 배양 상층액을 취하여 프로스타글란딘 측정 키트(PGE2 assay kit; R&D systems, Minneapolis, USA)를 사용하여 프로스타글란딘 E2(Prostaglandin E2)의 생성 저해 효과를 측정하였다.
워크리아 인시그니스 시료 (㎍/㎖) | PGE 2 생성량 ( pg /㎖) |
음성대조군 | 13.70 ± 0.26 |
LPS | 522.80 ± 25.24 |
LPS + 메탄올 추출물 5 | 405.15 ± 58.51 |
LPS + 메탄올 추출물 10 | 268.91 ± 38.83 |
LPS + 메탄올 추출물 20 | 145.69 ± 5.63 |
LPS + 메탄올 추출물 40 | 75.12 ± 3.63 |
표 3은 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 프로스타글란딘 E2 생성 저해 효과에 대한 것으로, 하기와 같이 처리한 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 농도의존적으로 프로스타글란딘 E2의 생성량이 감소하였고, 40 ㎍/㎖에서는 85.63 ± 0.69 % 의 프로스타글란딘 E2 생성 저해율을 나타내었다(표 3).
<3-2>
COX
-2 유전자의 발현 억제 실험 (
RT
-
PCR
)
워크리아 인시그니스 메탄올 추출물이 프로스타글란딘의 생성에 관여하는 사이크로옥시게네이즈(COX-2)의 발현에 미치는 영향을 확인하기 위하여 RT-PCR을 실시하였다. 실험예 <2-2>와 동일한 방법으로 얻은 cDNA를 템플릿(template)으로 하고, COX-2 프라이머(primer)를 혼합하고, PCR Premix를 사용하여 리보핵산의 발현정도를 확인하였다.
그 결과, 도 3a에서 보는 바와 같이, LPS 처리군에서는 COX-2의 발현이 증가하는 것을 확인하였고, 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 처리한 군에서 처리농도에 따라 COX-2의 핵산 발현이 억제되는 것을 확인하였다(도 3a).
<3-3>
COX
-2 단백질의 발현 억제 실험 (
Western
blotting
)
실험예 <2-3>과 동일한 방법으로 얻은 단백질을 부착시킨 PVDF 막에 1차 항체로 항-COX-2 항체(1:1000, Santa Cruz Biotechnology, USA)를 결합시킨후 실험예 <2-3>과 동일한 방법으로 감광하여 분석하였다.
그 결과, 도 3b에서 나타내는 바와 같이 대식세포에 LPS와 본 발병의 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 동시에 처리한 경우 농도의존적으로 COX-2의 단백질 발현이 감소하였다(도 3b).
<3-4>
COX
-2 단백질의
면역형광염색
(
Immunofluoresence
)
실험예 <2-4>와 같은 방법으로 세포를 고정하고, 차단한 후, 1차 항체[항-Cox-2 항체(1;100)]를 결합시키고, 동일한 방법으로 확인하였다.
그 결과, 도 3c에서 보는 바와 같이 LPS만 처리한 세포에 비해 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 함께 처리한 세포에서 COX-2의 발현이 감소한 것을 확인하였다(도 3c).
<실험예 4> Raw264.7 세포에서 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 신호전달 단백질의 인산화 억제 효과
실험예 <2-3>의 방법으로 세포를 분주하고, 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 농도별로 처리하고, LPS로 염증을 유도시켜 15분 혹은 30분간 배양 후, 배지를 제거한 다음에 세포를 배양용기로부터 떼어내어 단백질 분해효소 저해제 및 인산화분해저해효소(phosphatase inhibitor, Roche, 독일)를 함유한 단백질 용출용액을 사용하여 균질화하였다. 추출액은 20분 동안 14000 rpm에서 원심분리한 뒤 상등액과 불용성 응집체를 분리하였다. 분리된 상등액의 단백질을 정량하여 시료당 20 ㎍의 단백질을 SDS 10% SDS-PAGE 겔에 전기영동한 후, PVDF 막으로 옮겼다. 단백질이 옮겨진 막에서 단백질이 없는 부분을 탈지분유로 차단(blocking)시킨 다음, 1차 항체로 항-ERK, 항-p38 MAPK, 항-JNK, 항-IkBa(1:1000, Santa Cruz Biotechnology, USA)의 전체형태의 항체를 부착하거나, 항-p38 MAPK과 항-JNK(1:1000, Enzo, Rarmingdale, NY) 또는 항-ERK, 항-IkBa(1:1000, Cell Signaling Technology, 미국)의 인산화형태의 항체를 부착한 후, 2차 항체를 순차적으로 결합시켰다.
그 결과, 도 4에서 나타내는 바와 같이 대식세포에 LPS와 본 발명의 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 동시에 처리한 경우 전체형태의 신호전달 단백질들의 발현은 동일한 반면, 인산화 형태의 단백질들은 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 농도의존적으로 발현이 감소하는 것을 확인하였다(도 4).
<실험예 5> 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 NF -κB 단백질 이동 저해 효과
실험예 <2-4>와 같은 방법으로 세포를 고정하고, 차단한 후, 1차 항체[항-p65 항체(1;100)]를 결합시키고, 동일한 방법으로 확인하였다.
그 결과, 도 5에서 보는 바와 같이 LPS만 처리한 세포에 비해 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 함께 처리한 세포에서 p65가 핵 내에서 적게 관찰됨을 확인하였다(도 5).
<
실험예
6>
Raw264
.7 세포에서
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물의 사이토카인 생성 저해 효과
리포폴리사카라이드를 처리한 Raw264.7 세포에서의 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 사이토카인 생성 저해 효과를 확인하기 위하여, 리포폴리사카라이드로 유도된 IL-6와 IL-1beta의 생성량을 효소면역학적 분석키트(mouse IL-6 Enzyme Immunometric Assay Kit와 mouse IL-1beta Enzyme Immunometric Assay Kit; Assay designs, USA)를 이용하여 측정하였다. 실험예 <2-1>과 같은 방법으로 처리된 세포배양액을 50 ㎕를 회수하여 마우스 면역글로불린이 코팅된 96 웰플레이트에 분주하여 2시간 동안 교반하며 반응시켰다. 그런 다음, 세척용액으로 4회 세척하고, 제 1차 항체인 항-IL-6 혹은 항-IL-1beta 항체를 50 ㎕씩 분주한 후 2시간 반응시켰다. 반응 후에 세척을 하고 제 2차 항체를 분주하고 30분간 반응시켰다. 다시 세척한 후 기질을 넣어 30분간 반응시킨 다음, 발색 정도를 마이크로플레이트 측정기로 450 ㎚에서 측정하였다.
그 결과, 도 6에서 나타낸 바와 같이 LPS를 처리한 군에서 IL-6와 IL-1beta의 양이 증가하였고, LPS에 의해 증가된 사이토카인의 양이 처리된 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 농도에 따라 감소함을 확인하였다(도 6).
<
실험예
7>
Raw264
.7 세포에서
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물의
TNF
-α 생성 저해 효과
리포폴리사카라이드를 처리한 Raw264.7 세포에서의 워크리아 인시그니스 추출물의 염증 저해 효과를 확인하기 위하여, 리포폴리사카라이드로 유도된 종양괴사인자(tumor necrosis factor-α, TNF-α)의 생성량을 마우스 종양괴사인자를 효소면역학적 분석키트(mouse TNF-α Enzymen Immunometric Assay Kit; Assay designs, USA)를 이용하여 측정하였다. 실험예 <1-1>의 방법으로 Raw264.7세포를 배양한 후, 상층액 50 ㎕를 회수하여 마우스 면역글로불린이 코팅된 96 웰플레이트에 분주하여 2시간 동안 교반하며 반응시켰다. 그런 다음, 세척용액으로 4회 세척한 후, 제 1차 항체인 항-TNF-α 항체를 50 ㎕씩 분주한 후 2시간 반응시켰다. 반응 후에 세척을 하고 제 2차 항체를 분주하고 30분간 반응시켰다. 다시 세척한 후 기질을 넣어 30분간 반응시킨 다음, 발색 정도를 마이크로플레이트 측정기로 450 ㎚에서 측정하였다.
그 결과, 도 7에서 보는 바와 같이 LPS를 처리한 군에서 TNF-α의 양이 증가하였고, LPS에 의해 증가된 TNF-α의 양이 처리된 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물의 농도에 따라 감소함을 확인하였다(도 7).
<
실험예
8>
카라기난
(
carrageenan
) 유도 마우스
족부종에
대한
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물의 억제효과
워크리아 인시그니스 추출물이 동물세포에 대해 염증저해효과가 우수하였기에 동물실험을 통해 염증저해 효과를 확인하였다.
구체적으로, 무게가 20-25g인 BALB/c 암컷 마우스(코아텍, 대한민국)를 3-4마리씩 무작위적으로 선정하여 각 그룹으로 나누었다. 워크리아 추출물은 인산완충액(PBS)에 초음파로 녹여서 40 혹은 80mg/kg의 농도로 투여하였으며, 음성대조군으로는 PBS를 투여하였으며, 양성대조군으로는 인도메타신(Indomethacin, Sigma, USA)을 5 mg/kg의 농도로 투여하였다. 30분 후에, 염증을 유도하기 위하여 PBS에 녹인 카라기난(1% v/v) 용액을 마우스의 왼발에 25 ul씩 주사하였다. 발의 두께는 카라기난을 주사하기 전에 캘리퍼(Digital caliper, Niigata Seiki, 일본)로 측정하였으며, 카라기난 주사하고 2시간 후에 다시 측정하여 염증유도정도를 계산하였다.
그 결과 도 8에서 나타낸바와 같이 음성대조군은 카라기난에 의해 염증이 유도되어 발의 두께가 0.66±0.05mm까지 증가하였으나, 워크리아 인시그니스 추출물을 전처리한 군에서는 농도의존적으로(40mg/kg; 0.43 ± 0.04, 80mg/kg; 0.32±0.06) 발의 두께가 감소함을 확인하였다(도 8).
<
실험예
9> 비장 세포에서
워크리아
인시그니스
메탄올 추출물의 사이토카인 생성 저해효과
BALB/c 마우스(오리엔트, 대한민국)에서 비장을 무균적으로 떼어내어 10% 우태아혈청(FBS), 25mM HEPES, 2mM 글루타민(glutamine), 페니실린(100 U/㎖) 및 스트렙토마이신(100 ㎍㎍/㎖)을 포함하고 있는 RPMI 1640 배지(GibcoBRL, USA)에서 갈아서 단일세포현탁액(single cell suspension)으로 만들었다. 준비된 비장 세포 현탁액은 실온에서 1500 rpm으로 10분간 원심 분리한 뒤 상층액을 버리고 적혈구 분해용액(Red blood cell lysis buffer) 1 ㎖을 넣고 37℃ 에서 10분간 분해시켰다. 이 용액에 10 ㎖ PBS를 더하여 섞은 후, 실온에서 1500 rpm으로 5분간 원심 분리한 뒤 상층액을 버리는 과정을 2회 반복하였다. 마지막에 PBS 대신 10% 우태아혈청(GIBCO BRL, USA)을 첨가한 RPMI 1640 배지를 사용하여 부유시켰다. 세포수를 1 × 106 세포/㎖로 맞춘 후, 세포부유액 200 ㎕를 96웰 플레이트에 각각 분주하였고, 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 농도별 (0, 5, 10, 20, 40 ㎍/㎖)로 첨가한 후, 습윤배양기에서 5% CO2, 37℃ 조건으로 1시간 배양한 후, 세포에서 인터루킨-4(IL-4)와 인터루킨-13(IL-13)을 유도하기 위해 콘카나발린 A(Concanavalin A, Sigma, USA)를 1㎍/㎖농도로 첨가하였고, 습윤배양기에서 5% CO2, 37℃에서 3일간 배양하였다. 인터루킨-4와 13의 함량을 측정하기 위하여 각각의 사이토카인에 특정 반응하는 ELISA kit (R&D Systems, Minneapolis, USA)를 사용하였으며, 제조사의 방법에 따라 각 사이토카인의 함량을 측정하였다. 대조군은 Con A를 처리하지 않았다.
그 결과, 도 9에서 보는 바와 같이 ConA에 의해 유도되는 사이토카인 IL-4와 IL-13의 양이 워크리아 인시그니스 메탄올 추출물을 함께 처리한 군에서는 농도의존적으로 감소되었다(도 9).
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제조예를 예시한다.
<
제조예
1> : 약학적 제제의 제조
<1-1>
산제의
제조
본 발명의 워크리아 인시그니스(Wercklea insignis)의 메탄올 추출물 2 g
유당 1 g
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
<1-2> 정제의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 메탄올 추출물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
<1-3> 캡슐제의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 메탄올 추출물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유 당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
<1-4> 환의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 메탄올 추출물 1 g
유당 1.5 g
글리세린 1 g
자일리톨 0.5 g
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1환 당 4 g이 되도록 제조하였다.
<1-5> 과립의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 메탄올 추출물 150 ㎎
대두추출물 50 ㎎
포도당 200 ㎎
전분 600 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 30 % 에탄올 100 ㎎을 첨가하여 섭씨 60 ℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.
<
제제예
2> : 식품의 제조
<2-1> 밀가루 식품의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스(Wercklea insignis)의 열수 추출물을 0.5~5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하여 건강 증진용 식품을 제조하였다.
<2-2>
스프
및 육즙(
gravies
)의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물을 0.1~5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.
<2-3> 그라운드
비프(ground beef)의
제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물을 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.
<2-4> 유제품(
dairy
products
)의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물을 5~10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.
<2-5>
선식의
제조
현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.
본 발명의 워크리아 인시그니스의 물 추출물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.
상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 워크리아 인시그니스의 열수 추출물의 건조분말을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.
곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부),
종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부),
실시예 <1-2>의 추출물(3 중량부),
영지(0.5 중량부),
지황(0.5 중량부)
<
제제예
3> : 음료의 제조
<3-1>
건강음료의
제조
액상과당(0.5 %), 올리고당(2 %), 설탕(2 %), 식염(0.5 %), 물(75 %)과 같은 부재료와 본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물 5 g을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 건강음료를 제조하였다.
<3-2>
야채쥬스의
제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물 5 g을 토마토 또는 당근 쥬스 1,000 ㎖에 가하여 건강 증진용 야채쥬스를 제조하였다.
<3-3>
과일쥬스의
제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물 1 g을 사과 또는 포도 쥬스 1,000 ㎖ 에 가하여 건강 증진용 과일쥬스를 제조하였다.
<
제조예
4>
화장료
조성물의 제조
<4-1> 크림의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물 0.1 중량부
세토스테아릴알코올 2.8 중량부
밀난 2.6 중량부
스테아린산 1.4 중량부
친유형모노스테아린산글리세린 2 중량부
피이지-100 스테아레이트 1 중량부
세스퀴올레인산소르비탈 1.4 중량부
호호바오일 4 중량부
스쿠알란 3.8 중량부
폴리소르베이트 60 1.1 중량부
마카다이아오일 2 중량부
초산토코페롤 0.2 중량부
메칠폴리실록산 0.4 중량부
에칠파라벤 0.1 중량부
프로필파라벤 0.1 중량부
Euxyl K-400 0.1 중량부
1,3-부칠렌글리콜 7 중량부
메칠파라벤 0.05 중량부
글리세린 6 중량부
d-판데놀 0.2 중량부
트리에탄올아민 0.2 중량부
pt 41891 0.2 중량부
정제수 50.55 중량부
<4-2> 로션의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물 0.1 중량부
세토스테아릴알코올 1.6 중량부
스테아린산 1.4 중량부
친유형모노스테아린산글리세린 1.8 중량부
피이지-100 스테아레이트 2.6 중량부
세스퀴올레인산소르비탈 0.6 중량부
스쿠알렌 4.8 중량부
마카다이아오일 2 중량부
호호바오일 2 중량부
초산토코페롤 0.4 중량부
메칠폴리실록산 0.2 중량부
에칠파라벤 0.1 중량부
프로필파라벤 0.1 중량부
1,3-부칠렌글리콜 4 중량부
메칠파라벤 0.1 중량부
산탄검 0.1 중량부
글리세린 4 중량부
d-판데놀 0.15 중량부
알란토인 0.1 중량부
카르보내(2% aq. Sol) 4 중량부
트리에탄올아민 0.15 중량부
에탄올 3 중량부
pt 41891 0.1 중량부
정제수 51.7 중량부
<
제조예
5>
화장료
조성물 중 세정제의 제조
<5-1> 비누의 제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물 4.0 중량부
비누베이스 94.25 중량부
토코페롤 아세테이트 0.3 중량부
글리세린 0.2 중량부
PEG 4000(폴리에틸렌글리콜 4000) 0.8 중량부
호호바유 0.3 중량부
세탄올 0.15 중량부
상기 성분들을 혼합기에서 잘 혼합한 후 비누제조 기계에서 압출하고 일정한 크기로 절단 및 성형하여 비누 조성물을 제조하였다. 상기 비누 베이스는 당 업계에서 통상적으로 사용되고 있는 천연 유지인 팜유(palm oil)의 나트륨염이 사용될 수 있다.
<5-2>
바디
클렌저의
제조
본 발명의 워크리아 인시그니스의 열수 추출물 4.0 중량부
암모늄 라우릴 설페이트 42 중량부
코카미도프로필 베타인 12 중량부
글리콜 디스테어레이트 0.5 중량부
프로필렌 글리콜 1.0 중량부
색소 적당량
향료 적당량
구연산 적당량
드레인(50% 농축액) 1.0 중량부
정제수를 가하여 100 중량부로 한다.
암모늄 라우릴 설페이트, 코카미도프로필 베타인, 글리콜 디스테어레이트 및 프로필렌 글리콜를 70℃까지 가열하고 가열된 정제수를 넣어 유화시키면서 상기 나머지 성분들을 첨가하고 실온으로 냉각하여 바디 클렌저를 제조하였다.
Claims (12)
- 워크리아 인시그니스(Wercklea insignis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 추출물은 물, 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 2항에 있어서, 상기 알코올은 C1 내지 C2 저급 알코올인 것을 특징으로 하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 3항에 있어서, 상기 저급 알코올은 에탄올 또는 메탄올인 것을 특징으로 하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제 1항에 있어서, 상기 염증성 질환은 피부염, 알레르기, 아토피, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루푸스, 섬유근통 (fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 건주위염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome), 다발성 경화증, 및 급성 및 만성 염증 질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 워크리아 인시그니스 추출물을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올을 이용하여 순차적으로 계통분획하여 얻은, 헥산 분획물, 클로로포름 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물, 물 분획물 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 워크리아 인시그니스 추출물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 개선용 건강식품용 조성물.
- 제 7항에 있어서, 상기 추출물은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물을 용매로 하여 추출되는 것을 특징으로 하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 개선용 건강식품용 조성물.
- 제 7항에 있어서, 상기 염증성 질환은 피부염, 알레르기, 아토피, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루푸스, 섬유근통 (fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 건주위염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome), 다발성 경화증, 및 급성 및 만성 염증 질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 개선용 건강식품용 조성물.
- 워크리아 인시그니스 추출물을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올을 이용하여 순차적으로 계통분획하여 얻은, 헥산 분획물, 클로로포름 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물, 물 분획물 중 어느 하나 이상을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 개선용 건강식품용 조성물.
- 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 예방 및 개선용 화장료 조성물.
- 제 11항에 있어서, 상기 염증성 질환은 피부염, 알레르기, 아토피, 결막염, 치주염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위궤양, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 강직성 척추염, 류마티스 열, 루푸스, 섬유근통 (fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 건주위염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome), 다발성 경화증, 및 급성 및 만성 염증 질환으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 염증성 질환 예방 및 개선용 화장료 조성물.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/KR2011/006291 WO2012026771A2 (ko) | 2010-08-25 | 2011-08-25 | 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR20100082363 | 2010-08-25 | ||
KR1020100082363 | 2010-08-25 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20120019413A KR20120019413A (ko) | 2012-03-06 |
KR101349747B1 true KR101349747B1 (ko) | 2014-01-23 |
Family
ID=46128354
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020110085041A KR101349747B1 (ko) | 2010-08-25 | 2011-08-25 | 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (1) | KR101349747B1 (ko) |
-
2011
- 2011-08-25 KR KR1020110085041A patent/KR101349747B1/ko not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Acta Farm. Bonaerense. 25(2), pp.260-261(2006.) * |
African Journal of Biotechnology. 9(8), pp.1225-1229(2010.2.22.) * |
Journal of Ethnopharmacology. 72, pp.273-278(2000.) * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20120019413A (ko) | 2012-03-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US20100111927A1 (en) | Compositions Comprising Actinidia and Methods of Use Thereof | |
KR101618116B1 (ko) | 발효 우엉 추출물 또는 우엉으로부터 분리된 화합물을 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
KR20100080164A (ko) | (―)―압토시몬을 유효성분으로 포함하는 염증질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
KR20120118188A (ko) | 황기 추출물을 포함하는 피부 자극 또는 피부 염증 완화용 조성물 | |
KR101567573B1 (ko) | 발효 더덕 추출물 또는 더덕으로부터 분리된 화합물을 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
KR101487065B1 (ko) | 외톨개모자반 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 치료 또는 예방용 조성물 | |
KR101392333B1 (ko) | 로도덴드론 알붐 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환의 예방 및 치료를 위한 약학적 조성물 | |
KR101207239B1 (ko) | 천문동 추출물로부터 제조한 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환의 예방 및 치료용 조성물 | |
KR101851639B1 (ko) | 모과 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 항비만용 조성물 | |
KR101557934B1 (ko) | 발효 더덕 추출물 또는 더덕으로부터 분리된 화합물을 포함하는 비만 또는 비만 관련 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
KR20150115414A (ko) | 오미자 추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함하는 염증 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물 또는 상처치유용 약학적 조성물 | |
KR101349747B1 (ko) | 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물 | |
KR101167677B1 (ko) | 엘리오카퍼스 페티오라투스 추출물을 함유하는 염증성 질환 예방 및 치료용 조성물 | |
KR101077916B1 (ko) | 센티페드그라스 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
KR20200069616A (ko) | 올벚나무를 포함하는 항염증용 조성물 | |
KR20200089527A (ko) | 석창포 및 황칠 혼합 추출물을 포함하는 항염증용 조성물 | |
WO2012026771A2 (ko) | 워크리아 인시그니스 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 염증성 질환 또는 천식의 예방 및 치료용 조성물 | |
KR101333715B1 (ko) | 마스티시아 알보리아 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물 | |
KR101207214B1 (ko) | 해방풍 추출물로부터 제조한 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환의 예방 및 치료용 조성물 | |
KR101715996B1 (ko) | 톳 추출물의 디클로로메탄 또는 에틸 아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 활성 조성물 | |
KR101426873B1 (ko) | 알디시아 팅크토리아 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물 | |
KR101031889B1 (ko) | 주오닌비 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 염증성 질환의 예방 및 치료용 조성물 | |
KR101552816B1 (ko) | 여로 추출물을 함유하는 전립선 비대증 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR20140128123A (ko) | 담배풀 추출물을 유효성분으로 함유하는 아토피 및 염증성 질환 예방 및 치료용 약학적 조성물 | |
KR101091148B1 (ko) | 후라 크레피탄스 추출물을 함유하는 염증성 질환 예방 및 치료용 조성물 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant | ||
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20161228 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20171204 Year of fee payment: 5 |
|
LAPS | Lapse due to unpaid annual fee |