KR101344826B1 - Cosmetic Composition for Anti-irritation of the Skin Comprising Phaseolus radiatus seed extracts by fermentation and enzyme treatment - Google Patents

Cosmetic Composition for Anti-irritation of the Skin Comprising Phaseolus radiatus seed extracts by fermentation and enzyme treatment Download PDF

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Abstract

본 발명은 녹두를 효모(Saccharomyces cerevisiae) 또는 유산균(Bifidobacterium)으로 배양하여 얻은 녹두 발효액을 다시 단백질 분해 효소를 처리하여 얻은 녹두 발효-효소 추출액을 유효성분으로 포함하는 피부 자극완화용 화장료 조성물 및 화장 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 녹두 발효-효소 추출액은 사이토카인인 IL-1α의 생합성을 억제해주고 피부 자극을 완화시켜주어 피부 트러블을 개선하고 피부를 진정 및 보호해주는 효능을 가지고 있다.The present invention relates to a cosmetic composition and cosmetic method for alleviating skin irritation, comprising a mung bean fermentation-enzyme extract obtained by treating a mung bean fermentation broth obtained by culturing mung bean with yeast ( Saccharomyces cerevisiae ) or lactic acid bacterium (Bifidobacterium) as an active ingredient. It is about. Mung bean fermentation-enzyme extract according to the present invention has the effect of inhibiting the biosynthesis of the cytokine IL-1α and relieving skin irritation to improve skin trouble and calm and protect skin.

녹두 발효, 효모, 유산균, 단백질 분해 효소, 피부 보호, 자극완화, IL-1α Mung bean fermentation, yeast, lactic acid bacteria, protease, skin protection, irritant, IL-1α

Description

녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 피부 진정 및 자극완화용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Anti-irritation of the Skin Comprising Phaseolus radiatus seed extracts by fermentation and enzyme treatment}Cosmetic composition for soothing and alleviating skin including mung bean fermentation-enzyme extract

본 발명은 녹두 발효-효소 추출액을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 녹두를 효모 또는 유산균으로 배양하여 얻은 발효 추출액을 단백질 분해효소를 이용하여 2차적으로 처리하여 얻은 발효-효소 추출액을 유효성분으로 하는 피부 진정 및 자극완화용 화장료 조성물에 관한 것이다.  The present invention relates to a cosmetic composition containing a mung bean fermentation-enzyme extract, and more particularly, a fermentation-enzyme extract obtained by secondarily treating a fermentation extract obtained by culturing mung bean with yeast or lactic acid bacteria using protease. It relates to a cosmetic composition for soothing and alleviating irritation as an active ingredient.

사람의 피부는 환경의 변화, 스트레스 등으로 인하여 다양한 피부 트러블들을 경험하게 된다. 유아기의 경우에는 아토피 피부염과 같은 피부 문제를 경험하며, 청소년기에는 피지 과잉 분비로 인한 아크네를 경험하며, 점차 노화가 진행되면서 피부가 건조해고, 탄력이 떨어지며, 주름 생성이 많아지며 피부도 칙칙해진다. 또한 외부의 약한 자극에도 쉽게 민감해지며 회복에도 오랜 시간이 걸린다. 특히 최근에는 다양한 화장품을 사용하게 되고 이에 따라 피부에 발생하는 트러블들도 매우 다양해지고 있어 이러한 피부 트러블을 해결하기 위한 많은 노력들을 수행하고 있으며 대표적인 방법으로 천연 식물성 성분을 활용하여 해결하는 것이며, 화 장품 업계에서는 이러한 방법을 많이 이용하고 있다. Human skin experiences various skin problems due to environmental changes and stress. In infancy, skin problems such as atopic dermatitis are experienced, and in adolescence, acne is caused by excessive secretion of sebum, and as aging progresses, the skin becomes dry, less elastic, more wrinkles are formed, and the skin becomes dull. It is also easily sensitive to external weak stimuli and takes a long time to recover. In particular, recently, various cosmetics have been used, and accordingly, troubles occurring on the skin have become very diverse. Therefore, many efforts have been made to solve such skin problems, and as a representative method, it is solved by using natural plant ingredients. The industry uses many of these methods.

최근에는 천연 식물 추출물을 사용하는 것 외에 천연물을 발효 시켜줌으로써 천연물의 기본적 특성과 함께 발효로 인해 생성되는 발효 산물을 이용한 소재 개발을 많이 시도하고 있다. Recently, in addition to the use of natural plant extracts by fermenting natural products, there are many attempts to develop materials using fermentation products generated by fermentation along with the basic characteristics of natural products.

청국장 및 낫도(natto)라는 대표적인 발효 식품에 이용되는 고초균에 의한 발효 산물을 이용하여 생산한 발효액을 이용하여 화장료 조성물을 제공하는 경우가 있다. 이러한 발효액은 미생물에 의해 자극성분들이 분해되거나 다른 물질로 전환됨으로써 피부 자극이 저하되는 장점들이 있으며, 미생물에 의한 발효 산물들이 또한 피부에 좋은 영향을 주는 것으로 알려져 있어서, 최근 화장료 조성물에 많이 이용되고 있다.In some cases, a cosmetic composition may be provided using a fermentation broth produced using a fermentation product of Bacillus subtilis used in representative fermented foods such as Cheonggukjang and natto. Such fermentation broth has the advantage of degrading the skin irritation by degrading the irritants by the microorganisms or converting to other substances, fermentation products by microorganisms are also known to have a good effect on the skin, has been widely used in cosmetic compositions in recent years .

이에, 본 발명자들은 여러 가지 원인으로 인해 발생하는 다양한 피부 현상을 해결하기 위하여 예의 노력한 결과, 녹두를 효모 또는 유산균 등을 이용하여 발효시킨 녹두 발효 추출액이 피부 자극 완화 효과가 우수하며, 특히, 녹두 발효 추출액을 단백질 분해효소로 2차 처리할 경우 피부에서 발생하는 자극문제를 보다 효과적으로 개선할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors have made efforts to solve various skin phenomena due to various causes, the mung bean fermentation extract fermented with mung beans using yeast or lactic acid bacteria, the skin irritation effect is excellent, in particular, mung bean fermentation The present invention was completed by confirming that the second extract was treated with proteolytic enzymes in a more effective way to improve the irritation problem occurring in the skin.

따라서 본 발명의 목적은 녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 피부 진정 및 자극완화용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.Accordingly, it is an object of the present invention to provide a cosmetic composition for soothing and alleviating skin, including mung bean fermentation-enzyme extract.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위에 의해 보다 명확하게 된다.Other objects and advantages of the present invention will become apparent from the following examples and claims.

상기와 같은 본 발명의 목적은 녹두 발효-효소 추출액을 유효성분으로 포함하는 피부 진정 및 자극 완화용 화장료 조성물에 의해 달성된다.The object of the present invention as described above is achieved by a cosmetic composition for calming and stimulating skin, comprising mung bean fermentation-enzyme extract as an active ingredient.

바람직하게는, 상기 녹두 발효-효소 추출액은 효모로서 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 이용하여 녹두를 배양하여 수득한 발효액을 단백질 분해 효소를 이용하여 효소 분해시켜 유효성분을 제조한 것이다.Preferably, the mung bean fermentation-enzyme extract is a fermentation broth obtained by culturing mung beans using Saccharomyces cerevisiae as yeast to prepare an active ingredient by enzymatic digestion using proteolytic enzymes. .

또한 바람직하게는, 상기 녹두 발효-효소 추출액은 유산균으로서 비피도박테리움(Bifidobacterium sp.)을 이용하여 녹두를 배양하여 수득한 발효액을 단백질 분해 효소를 이용하여 효소 분해시켜 유효성분을 제조한 것이다.Also preferably, the mung bean fermentation-enzyme extract is a lactic acid bacterium, and the fermentation broth obtained by culturing mung bean using Bifidobacterium sp.

또한, 바람직하게는, 상기 단백질 분해효소는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 아미노펩티다아제 및 디펩티다아제로 이루어지는 군중에서 선택되는 것이다.Also preferably, the protease is selected from the group consisting of pepsin, trypsin, carboxypeptidase, aminopeptidase and dipeptidase.

또한, 바람직하게는, 상기 녹두 발효-효소 추출액은 상기 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001-30.0%(w/w)로 함유되는 것이다.Also, preferably, the mung bean fermentation-enzyme extract is contained at 0.0001-30.0% (w / w) based on the total weight of the cosmetic composition.

또한, 바람직하게는, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것이다.Also preferably, the cosmetic composition consists of a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray Have a formulation selected from the group.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 화장료 조성물을 이용하여 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장 방법에 의해 달성된다.Another object of the present invention is achieved by a cosmetic method characterized in that it is applied to the skin using the cosmetic composition.

본 발명은 녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 피부 진정 및 자극완화용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물에 포함된 유효성분인 녹두 발효-효소 추출액은 녹두를 효모 또는 유산균으로 배양하여 수득한 발효액을 다시 단백질 분해 효소를 이용하여 2차 처리해 줌으로써 획득될 수 있으며, 이 추출액은 염증 사이토카인인 IL-1α의 생합성을 억제해주며, 세포 자극 완화 효과가 우수하며, 이를 함유하는 화장료의 경우, 피부 자극을 완화해주는 효과가 탁월하여 피부 자극완화 및 진정 효과를 기대할 수 있다. 피부에 자극이 발생하기 위해서는 외부 자극을 매개하는 다양한 사이토카인이 생성하게 되는데 그 대표적인 성분은 IL-1α 이다. 이러한 성분들의 생성을 조절해줌으로써 피부 자극을 완화해줄 수 있다. 피부에 자극이 발생하기 위해서는 외부 자극을 매개하는 다양한 사이토카인이 생성하게 되는데 그 대표적인 성분은 IL-1α이다. 이러한 성분들의 생성을 조절해줌으로써 피부 자극을 완화해줄 수 있다. The present invention relates to a skin composition for soothing and alleviating irritation comprising mung bean fermentation-enzyme extract. Mung bean fermentation-enzyme extract, which is an active ingredient included in the cosmetic composition of the present invention, may be obtained by subjecting the fermentation broth obtained by culturing mung beans with yeast or lactic acid bacteria to secondary treatment using proteolytic enzymes. It inhibits the biosynthesis of the Cain IL-1α, and is excellent in mitigating cell stimulation, and in the case of cosmetics containing it, the effect of mitigating skin irritation is excellent, so that skin irritation and calming effect can be expected. In order to cause skin irritation, various cytokines that mediate external stimuli are produced, a representative component of which is IL-1α. By controlling the production of these ingredients, you can relieve skin irritation. In order to cause skin irritation, various cytokines that mediate external stimuli are produced, a representative component of which is IL-1α. By controlling the production of these ingredients, you can relieve skin irritation.

상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 피부 진정 및 자극완화용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a cosmetic composition for soothing and alleviating skin, including mung bean fermentation-enzyme extract.

본 발명의 조성물에서 유효성분으로 이용되는 녹두(Phaseolus radiatus, Mung bean)는 안두 또는 길두라고도 하며, 콩과의 한해살이풀 녹두의 종자로서, 따뜻한 기후의 양토(壤土:모래와 점토가 알맞게 섞인 검은빛의 흙)에서 잘 자라며, 높이는 30∼80cm이다. 줄기는 가늘고 세로로 난 맥이 있고 10여 개의 마디가 있으며 가지를 친다. 잎은 1쌍의 떡잎과 갓 생겨난 잎이 나온 뒤, 3개의 작은 잎으로 된 겹잎이 나온다. Mung bean ( Phaseolus radiatus, Mung bean) used as an active ingredient in the composition of the present invention, also known as andu or gildu, is a seed of perennial green mung beans, which is a warm mixture of loam (모: sand and clay of warm climate). It grows well in the soil, and its height is 30 ~ 80cm. The stem has a thin, vertical vein, about 10 nodes, and branches. The leaves come out with a pair of cotyledons and freshly formed leaves, followed by three small leaves of double leaves.

이러한 녹두는 콩과의 다른 콩류와는 달리, 한방에서 피부병 치료, 해열 및 해독제로 쓰여 왔을 뿐만 아니라, 동의보감에서는 녹두분으로 만들어 얼굴에 발랐을 때 미용효과를 얻을 수 있다고 알려져 왔다. 최근까지도 녹두는 건조 분말의 형태로 또는 이를 물이나 꿀에 개어 얼굴 마사지에 사용되거나, 또는 녹두가루를 물에 섞어 만드는 녹두전과 녹두로부터 전분을 뽑아 만드는 청포묵, 빈대떡, 녹두죽, 숙주나물 등의 식품으로서 예부터 사용되어 왔을 뿐이다.Unlike other legumes such as legumes, such green beans have been used as a treatment for skin diseases, antipyretic and antidote in oriental medicine, and in synonymous gagam, it has been known that beauty effects can be obtained when it is made with green beans. Until recently, mung bean is used as a dry powder or as a food for facial massage by dipping it in water or honey, or as a food such as green bean paste, mung bean cake, mung bean porridge, mung bean sprouts, mung bean sprouts made by mixing mung bean powder with water. It has only been used since ancient times.

본 명세서에서 용어“녹두”는, 녹두의 다양한 기관(예: 씨앗(열매)잎, 꽃, 줄기 및 뿌리 등)을 의미하며, 바람직하게는 녹두의 씨앗(열매)을 의미한다.As used herein, the term “mung beans” refers to various organs of mung beans (eg, seeds (berry) leaves, flowers, stems, roots, etc.), and preferably refers to seeds (fruit) of mung beans.

본 발명에서 용어 “녹두 발효-효소 추출액”은 녹두를 효모균(Sacharomyces sp) 또는 유산균(Bifidobacterium sp)을 이용하여 배양하여 수득한 녹두 발효액을 다시 단백질 분해 효소로 처리하여 얻은 추출액을 의미하는 것으로, 발효 시 사용하는 발효균의 종류에 따라 “녹두 효모 발효- 효소 추출액” 또는 “녹두 유산균 발효- 효소 추출액”으로 나뉜다.As used herein, the term “mung bean fermentation-enzyme extract” refers to an extract obtained by treating mung bean fermentation broth obtained by culturing mung bean using yeast (Sacharomyces sp) or lactic acid bacterium (Bifidobacterium sp) again with a proteolytic enzyme, and fermentation. Depending on the type of fermentation bacteria used in the study, it is divided into “Mung bean yeast fermentation-enzyme extract” or “Mung bean lactic acid bacteria fermentation-enzyme extract”.

본 발명에서 녹두를 발효시키는데 사용되는 효모균은, 진핵미생물(핵과 세포질이 핵막에 의하여 나누어져 있는 생물)에 속하며, 세포벽, 세포막, 핵, 사립체, 과립 등 세포 소기관을 갖추고 있다. 성의 구별이 없는 이들은 주로 budding(출아법)으로 번식하는데, 분리된 많은 효모들 중에는 발효능이 없는 것, budding 대신 fission(분열) 혹은 bud-fission 방법으로 증식하는 것, 자낭포자(ascospore)가 아닌 사출포자(ballistospore)를 형성하거나 포자(spore)형성이 관찰되지 않는 것 등 다양한 그룹의 효모도 존재한다. 크기는 보통 5× 5-12 ~10× 5-12㎛로 세균의 5-10배 크기이며, 적정 pH는 4.5-5.5이나 1-10에서도 생존한다. pH 1에서 12시간 생존하는 효모는 박테리아보다 산에 강하므로 배지의 pH를 3.5~3.8 정도로 맞추면 박테리아의 오염을 어느 정도 억제할 수 있다.Yeasts used to ferment mung beans in the present invention belong to eukaryotic microorganisms (organisms in which the nucleus and cytoplasm are divided by the nuclear membrane), and have cell organelles such as cell walls, cell membranes, nuclei, particulates, and granules. Those without sex distinction breed mainly by budding, among which many of the isolated yeasts have no fermentation capacity, multiply by fission or bud-fission instead of budding, and not ascospore. There are also various groups of yeasts, such as forming spores or not forming spores. The size is usually 5 × 5 -12 ~ 10 × 5 -12 ㎛, 5-10 times the size of bacteria, and the optimal pH survives at 4.5-5.5 but 1-10. Yeasts that survive 12 hours at pH 1 are more acid resistant than bacteria, so adjusting the pH of the medium to about 3.5 to 3.8 can reduce bacterial contamination.

효모는 균종에 따라서 조금씩 차이가 있으나, 대부분 20~25℃에서 잘 자란다. 보통은 50℃이상에서는 사멸한다고 하지만 그 온도 이상에서 합성이 되지 않는 성장요소를 배지에 직접 첨가해 줌으로써 어느 정도는 극복이 가능하다. 사카로마 이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)의 경우 40℃이상에서 사멸하지만 배지에 올레산(oleic acid)와 에르고스테롤(ergosterol)을 첨가해 줌으로써 이를 방지할 수 있다. 효모 균체 자체는 단세포 식물로서 단백질과 미량광물질을 다량 함유하고 있다. 본 발명의 녹두를 발효시키는데 사용하기에 바람직한 효모는 사카로마이세스 세레비시애이다.Yeast is slightly different depending on the species, but most grow well at 20 ~ 25 ℃. Usually, it is killed above 50 ℃, but it can be overcome to some extent by adding the growth factor which is not synthesized above the temperature directly to the medium. Saccharomyces cerevisiae dies above 40 ° C, but this can be prevented by adding oleic acid and ergosterol to the medium. Yeast cells themselves are single-celled plants that contain large amounts of protein and trace minerals. A preferred yeast for use in fermenting the green beans of the present invention is Saccharomyces cerevisiae.

본 발명에서 녹두를 발효시키는데 사용된 발효균으로 유산균은, 포도당 또는 유당과 같은 탄수화물을 분해하여 유산(젖산)이나 초산과 같은 유기산을 생성하는 인체에 매우 유익한 미생물의 일종이다. 일반적으로, 유산균이 당으로부터 유산을 만드는 것을 발효라 하며, 이러한 발효과정을 거쳐서 발효식품이 만들어 진다. 본 발명에서 사용될 수 있는 유산균은 예컨대, 비피도 박테리움, 락토 바실러스, 스트렙토 코커스, 류코노스톡, 페디오 코커스, 락토 코커스를 포함하며, 바람직하게는 비피도 박테리움(Bifidobacterium sp)이다. As the fermentation bacteria used to ferment mung beans in the present invention, lactic acid bacteria are a kind of microorganisms that are very beneficial to the human body to break down carbohydrates such as glucose or lactose to produce organic acids such as lactic acid (lactic acid) or acetic acid. Generally, lactic acid bacteria make lactic acid from sugar is called fermentation, and fermented food is made through this fermentation process. Lactic acid bacteria that can be used in the present invention include, for example, Bifido bacterium, Lactobacillus, Streptococcus, Leukonostock, Pediococcus, Lactococcus, preferably Bifidobacterium sp.

본 발명에서 녹두 발효액을 처리하는데 사용되는 단백질 분해 효소는 상기한 효모 또는 유산균에 의한 발효로도 분해 또는 전환되지 않은 성분들을 2차적으로 분해 또는 전환시키기 위하여 사용되는 것으로서, 이의 구체적인 예로는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 아미노펩티타아제, 디펩티다아제 등이 있으며, 바람직하게는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 가장 바람직하게는 펩신이 사용될 수 있다.In the present invention, the proteolytic enzyme used to process the mung bean fermentation broth is used to secondaryly decompose or convert components that are not degraded or converted by fermentation by the yeast or lactic acid bacteria described above, and specific examples thereof include pepsin and trypsin. , Carboxypeptidase, aminopeptidase, dipeptidase and the like, preferably pepsin, trypsin, carboxypeptidase, most preferably pepsin can be used.

본 발명의 녹두 발효-효소 추출액은 다음의 단계로 제조될 수 있다:Mung bean fermentation-enzyme extract of the present invention can be prepared by the following steps:

a) 녹두를 분말로 만드는 단계;a) powdering green beans;

b) 상기 단계 a)에서 제조된 녹두 분말을 정제수에 희석한 후 효모 또는 유산균을 이용하여 발효시키는 단계;b) diluting the mung bean powder prepared in step a) in purified water and then fermenting using yeast or lactic acid bacteria;

c) 상기 단계 b)의 발효에 의해 얻은 발효액을 여과하여 단백질 분해효소로 분해하는 단계; 및c) filtering the fermentation broth obtained by the fermentation of step b) into a protease; And

d) 상기 단계 c)의 효소 분해액을 저온 숙성 및 여과하여 녹두 발효-효소 추출액을 제조하는 단계.d) low-temperature aging and filtration of the enzyme digestion solution of step c) to prepare a mung bean fermentation-enzyme extract.

상기 녹두 발효-효소 추출액의 제조 단계에서, 상기 단계 a)의 녹두의 분말화는 100 내지 500 메쉬 크기 이하로 제조될 수 있으며, 이에 한정될 필요는 없다. In the preparation step of the mung bean fermentation-enzyme extract, the powdered mung bean of step a) may be prepared in a size of 100 to 500 mesh or less, but is not limited thereto.

또한 상기 단계 b)의 발효는 녹두 분말과 정제수를 1:10으로 혼합한 후 121℃에서 멸균시킨 후 유산균(Bifidobacterium sp) 또는 효모균(Sacharomyces sp)을 접종하여 배양함으로써 달성된다. 발효 단계에서 사용된 녹두 분말은 총 배양액 1L를 기준으로, 1 내지 50g의 양으로 사용하는 것이 바람직하다.In addition, the fermentation of step b) is achieved by mixing the mung bean powder and purified water at 1:10 and sterilizing at 121 ° C., followed by inoculation with Bifidobacterium sp or Yeast (Sacharomyces sp). The mung bean powder used in the fermentation step is preferably used in an amount of 1 to 50 g based on 1 L of the total culture solution.

또한, 발효단계에 사용된 효모 또는 유산균은 총 배양액 1L 기준으로, 1 × 104 내지 1 × 105 세포수의 양으로 접종되는 것이 바람직하며, 각 균주의 성상에 따라 통상적인 조건 및 호기적 또는 통상 혐기(anaerobic)적인 조건에서 배양될 수 있다. 또한, 발효균의 배양을 더욱 활성화시키기 위하여 추가적인 탄소원 및/또는 pH 조절제가 첨가될 수도 있다. 이때 적합한 배양조건은 30 - 37℃, pH 5-7의 호기 또는 통상혐기적인 조건에서 약 1 내지 15일간 배양되며, 바람직하게는 1 내지 7일 이며, 더욱 바람직하게는 1 내지 5일이며, 가장 바람직하게는 2 내지 4일간 배양된다. In addition, the yeast or lactic acid bacteria used in the fermentation step is preferably inoculated in the amount of 1 × 10 4 to 1 × 10 5 cells on the basis of 1L of the total culture solution, depending on the characteristics of each strain and aerobic or It can usually be cultured in anaerobic conditions. In addition, additional carbon sources and / or pH adjusters may be added to further activate the culture of the fermentor. At this time, suitable culture conditions are incubated for about 1 to 15 days in an aerobic or normal anaerobic condition of 30-37 ℃, pH 5-7, preferably 1 to 7 days, more preferably 1 to 5 days, most Preferably it is incubated for 2 to 4 days.

상기 단계 c)는 단계 b)에서 얻은 발효액을 1차 여과한 후 그 여과액을 단백질 분해효소로 분해하는 단계로서, 이때 여과는 0.25 내지 0.45μm 크기의 여과막으로 여과하여, 여분의 녹두분말알갱이 및 발효균을 제거할 수 있다. 1차 여과막으로 분리된 여과액은 단백질 분해효소로 분해하여 효모 또는 유산균에 의한 발효로도 분해 또는 전환되지 않은 성분들을 2차적으로 분해 또는 전환시키기 위해 실시된다. 이때, 사용되는 단백질 분해효소로는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 아미노펩티다아제, 디펩티다아제 등이 있으며, 바람직하게는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제이며, 가장 바람직하게는 펩신이다. 단백질 분해 효소의 사용량은 제조사의 사용 지침서에 따라 정하며, 당업자의 수준에서 적절히 변경 가능하며 가장 적절하게는 발효액의 총 중량에 대하여 1-5%이다. 상기에서 단계 d)는 단백질 분해효소에 의한 생물전환 방법에 의해 얻어진 추출액을 저온 숙성하여 안정화 시킬 수 있으며, 1차 여과막에 비해 더 세밀한 여과막으로 2차 여과한 후 농축하여 보관할 수 있으며, 이 농축물을 적절히 희석하여 사용한다. 이때 상기 분해-여과-농축의 과정은 보다 유효한 효과가 있는 녹두 발효-효소 추출액을 얻기 위한 공정단계로서, 저온 숙성과정은 5 내지 10일 동안 이루어지는 것이 바람직하며, 여과막의 크기는 0.25μm 이하인 것이 바람직하다.The step c) is a step of firstly filtering the fermentation broth obtained in step b) and then decomposing the filtrate with proteolytic enzymes, wherein the filtration is filtered through a 0.25 to 0.45 μm filtration membrane, and the excess mung bean powder and Fermentation bacteria can be removed. The filtrate separated by the primary filtration membrane is subjected to secondary decomposition or conversion of components that are not degraded or converted even by fermentation by yeast or lactic acid bacteria by proteolytic enzymes. At this time, proteases used are pepsin, trypsin, carboxypeptidase, aminopeptidase, dipeptidase, and the like, preferably pepsin, trypsin, carboxypeptidase, and most preferably pepsin. The amount of proteolytic enzyme used is determined according to the manufacturer's instructions, and can be appropriately changed at the level of those skilled in the art and most suitably 1-5% based on the total weight of the fermentation broth. In step d), the extract obtained by the bioconversion method by proteolytic enzymes can be stabilized by aging at low temperature, and can be stored after the second filtration with a finer filtration membrane than the primary filtration membrane. Properly dilute and use. At this time, the decomposition-filtration-concentration process is a process step for obtaining a more effective mung bean fermentation-enzyme extract, it is preferable that the low temperature ripening process is performed for 5 to 10 days, the size of the filtration membrane is 0.25μm or less. Do.

보다 바람직한 구현예에 따르면, 녹두 분말을 300 메쉬 크기 이하로 분말화한 뒤 배양액에 10 g/L 첨가하고, 효모 균주 또는 유산균 등을 50,000 cfu/L로 첨 가하여 각각 효모는 30℃, 유산균은 37℃에서, pH 5-7, 바람직하게는 약 pH 5.5로 호기적 또는 통성 혐기적인 조건으로 발효조에서 약 1일 내지 7일간 배양하여 발효시킨다. 배양 후 상기 발효액은 0.45μm의 여과막을 이용하여 1차 여과한 다음 이 여과액에 다시 단백질 분해효소를 처리한다. 이 처리액은 다시 10일간 저온 숙성 시킨 후 0.25μm 막으로 2차 여과하여 농축한 뒤 본 발명의 녹두 발효-효소 추출액을 제조한다. 사용하기 전에 최종 고형분의 농도를 10g/L가 되게 유지한다.According to a more preferred embodiment, the mung bean powder is powdered to 300 mesh or less and then added to the culture medium 10 g / L, yeast strain or lactic acid bacteria, etc. added at 50,000 cfu / L, respectively, yeast 30 ℃, lactic acid bacteria 37 Incubate at pH 5-7, preferably about pH 5.5, incubated in a fermenter for about 1 to 7 days under aerobic or anaerobic conditions. After incubation, the fermentation broth is first filtered using a 0.45 μm filtration membrane, and then the filtrate is subjected to protease again. The treated solution was further aged for 10 days at low temperature, concentrated by secondary filtration with a 0.25 μm membrane, and then prepared mung bean fermentation-enzyme extract of the present invention. The final solids concentration is kept to 10 g / L before use.

이렇게 제조된 본 발명의 녹두 발효-효소 추출액은 염증 사이토카인인 IL-1a의 생성을 억제해주며, 항알러지 효과가 있는 것으로 나타났다.Mung bean fermentation-enzyme extract of the present invention thus prepared inhibits the production of inflammatory cytokine IL-1a, and has been shown to have an anti-allergic effect.

본 발명에서 녹두 발효-효소 추출액은 상기한 바와 같이, 녹두 분말을 발효시키고, 그 발효액을 단백질 분해 효소로 처리하여 얻을 수 있지만, 이외에 녹두 분말대신 녹두 추출물을 사용하여 발효시켜 얻은 발효액을 단백질 분해 효소로 처리하여 얻을 수도 있다.Mung bean fermentation-enzyme extract in the present invention can be obtained by fermenting mung bean powder and treating the fermentation broth with proteolytic enzyme as described above, but in addition to the fermentation broth obtained by fermentation using mung bean extract instead of mung bean powder It can also be obtained by treatment.

한편, 본 발명에서, 녹두 발효-효소 추출액의 함량은 전체 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001 - 30.0 %(w/w)이고, 보다 바람직하게는 0.001-20%(w/w)이다. 이때, 녹두 발효-효소 추출액의 함량이 0.0001 %(w/w) 미만일 경우에는 뚜렷한 피부 자극 완화 효과를 기대할 수 없고, 녹두 발효-효소 추출액의 함량이 30.0%(w/w)를 초과하는 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과의 증가가 나타나지 않으며, 피부자극을 유발하거나 제형의 안정성에 있어서 문제가 생긴다. On the other hand, in the present invention, the content of mung bean fermentation-enzyme extract is 0.0001-30.0% (w / w), more preferably 0.001-20% (w / w) based on the total weight of the total cosmetic composition. In this case, when the content of mung bean fermentation-enzyme extract is less than 0.0001% (w / w), a clear skin irritation effect cannot be expected, and when the content of mung bean fermentation-enzyme extract exceeds 30.0% (w / w) There is no noticeable increase in effect with increasing content, causing skin irritation or problems in the stability of the formulation.

본 발명의 녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 화장료 조성물은 피부에 국소 적으로 바르거나 뿌리는 것에 의해 그 효과를 달성할 수 있다. 따라서 본 발명의 바람직한 일 양태에 따르면, 본 발명의 조성물은 크림, 로션 및 유연수 등의 화장료 조성물 또는 스프레이 및 연고 등의 약제학적 조성물 형태로 제조될 수 있다.The cosmetic composition comprising the mung bean fermentation-enzyme extract of the present invention can achieve the effect by applying or spraying locally on the skin. Therefore, according to a preferred aspect of the present invention, the composition of the present invention may be prepared in the form of cosmetic compositions such as creams, lotions and softening water or pharmaceutical compositions such as sprays and ointments.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 녹두 발효-효소 추출액 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The components included in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the mung bean fermentation-enzyme extract as an active ingredient, and are commonly used for example, such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavorings. Adjuvants, and carriers.

본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형 화 될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수(스킨), 영양 화장수(밀크로션), 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing , Oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations and sprays, etc. may be formulated, but is not limited thereto. More specifically, it may be prepared in the form of a flexible lotion (skin), nutrition lotion (milk lotion), nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder. .

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카 본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, and especially in the case of spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, Propellant such as propane / butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component is selected from aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives, or ethoxylated glycerol fatty acid esters.

또한, 본 발명은 녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 피부자극 완화용 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하여 피부 노화로 인해 손상된 다양한 피부 트러블을 개선하고, 피부를 진정해주는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.In addition, the present invention is applied to the skin irritation cosmetic composition containing mung bean fermentation-enzyme extract to the human skin to improve a variety of skin problems damaged by skin aging, provides a makeup method characterized in that to calm the skin do.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 이용하여 피부에 도포하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 이용하여 피부에 도포하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.The cosmetic method of the present invention refers to all cosmetic methods applied to the skin using the cosmetic composition of the present invention. That is, all the methods known in the art of applying to the skin using the cosmetic composition belong to the makeup method of the present invention.

본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 피부 보호 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be used alone or in combination, or may be used in combination with other cosmetic compositions other than the present invention. In addition, the cosmetic composition having excellent skin protection effect according to the present invention can be used according to a conventional method of use, and the number of times of use can be varied depending on the skin condition or taste of the user.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비 함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클렌징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비 함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.When the cosmetic composition of the present invention is a soap, a surfactant-containing cleansing or a surfactant-free cleansing formulation, it may be wiped off, peeled off or washed with water after application to the skin. The surfactant-containing cleansing formulation may be a cleansing foam, a cleansing water, a cleansing towel and a cleansing pack. The surfactant-free cleansing formulation may be a cleansing cream, , Cleansing lotion, cleansing water and cleansing gel, but is not limited thereto.

본 발명의 녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 화장료 조성물을 이용하는 화장방법을 수행하면 피부에서 발생할 수 있는 자극을 효과적으로 개선할 수 있다.Performing a cosmetic method using a cosmetic composition comprising the mung bean fermentation-enzyme extract of the present invention can effectively improve the irritation that may occur in the skin.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통 상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only for illustrating the present invention in more detail, it will be apparent to those skilled in the art that the scope of the present invention is not limited by these examples in accordance with the gist of the present invention. .

비교 제조예 1. 녹두 추출물 제조Comparative Preparation Example 1. Preparation of Mung Bean Extract

녹두를 정제수로 세척하고 건조시키고, 이를 미세하게 분말화 한 후 녹두 분말 100g을 70% 에탄올 용액 0.6L에 첨가하고, 냉각콘덴서가 장착된 환류 추출기에서 4시간 동안 가열 추출하였다. 그런 다음, 수득한 추출액을 300 메쉬 여과포로 여과하고, 와트만 5번 여과지로 여과한 후 감압농축기를 이용하여 용매를 제거하고 동결 건조하여 건조 중량 5.5g을 얻었다. 이렇게 얻은 추출물을 이하 ‘녹두 추출물’이라 통칭하며, 녹두 추출물은 최종 농도가 1g/100mL 되게 사용하였다. Mung beans were washed with purified water, dried, and finely powdered. Then, 100 g of mung bean powder was added to 0.6 L of 70% ethanol solution, and extracted by heating in a reflux extractor equipped with a cooling capacitor for 4 hours. Thereafter, the obtained extract was filtered through a 300 mesh filter cloth, filtered through Whatman No. 5 filter paper, and the solvent was removed using a vacuum condenser and freeze dried to obtain a dry weight of 5.5 g. The extract thus obtained is referred to as 'mung bean extract' below, and the mung bean extract was used to have a final concentration of 1g / 100mL.

비교 제조예 2. 효모균을 이용한 녹두 효모 발효액 제조Comparative Preparation Example 2 Preparation of Mung Bean Yeast Fermentation Solution Using Yeast Bacteria

정제수로 세척하고 건조시킨 녹두를 미세하게 분말화하여 입자크기가 300메시가 되도록 하였다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 효모를 접종하였다. 이때 사용한 효모균은 사카로마이세스 세레비시애(Sacharomyces cerevisiae)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 30℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 1차 제거 한 후 0.25 μm 여과막을 이용하여 최종 여과하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 희석한 후 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 ‘녹두 효모 발효액’이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 효모 발효액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.Washed with purified water and dried mung bean finely powdered to a particle size of 300 mesh. Mung beans and purified water were mixed at 1:10 and sterilized at 121 ° C., and then inoculated with yeast. Saccharomyces cerevisiae was used as the yeast, and was added at 50,000 cfu / L per culture. Cultivation was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 30 ℃, pH 5.5. After cultivation, the culture solution was centrifuged to remove the culture cells first, and then filtered through a 0.25 μm filter membrane. The filtrate thus obtained was concentrated and diluted with a suitable solvent, and used in the present invention. The fermentation broth prepared in this way is hereinafter referred to as ' mung bean yeast fermentation broth '. Mung bean yeast fermentation broth used in the following experimental example was used to maintain a final concentration of 1g / 100mL.

비교 제조예 3. 락토바실러스(Lactobacillus sp)를 이용한 녹두 유산균 발효액 제조Comparative Preparation Example 3 Preparation of Mung Bean Lactic Acid Bacteria Fermentation Solution Using Lactobacillus sp

정제수로 세척하고 건조한 녹두를 미세하게 분말화하여 입자크기가 300메시가 되도록 하였다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 유산균을 접종하였다. 이때 사용한 유산균은 락토바실러스(Lactobacillus sp)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 37℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 1차 제거 한 후 0.25 μm 여과막을 이용하여 최종 여과하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 ‘녹두 락토바실러스 발효액 ’이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 락토바실러스 발효액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.Washed with purified water and finely powdered dried mung bean to have a particle size of 300 mesh. Mung beans and purified water were mixed at 1:10 and sterilized at 121 ° C., and then inoculated with lactic acid bacteria. The lactobacillus used was Lactobacillus sp, and was added at 50,000 cfu / L per culture. The culture was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 37 ℃, pH 5.5. After cultivation, the culture solution was centrifuged to remove the culture cells first, and then filtered through a 0.25 μm filter membrane. The solution obtained by concentrating the filtrate thus obtained was used in the present invention using a suitable solvent. The fermentation broth prepared in this way is referred to below as ' mung bean lactobacillus fermentation broth '. Mung bean Lactobacillus fermentation broth used in the following experimental example was used to maintain a final concentration of 1g / 100mL.

비교 제조예 4. 비피도 박테리움(Bifidobacterium sp)를 이용한 녹두 유산균 발효액 제조Comparative Preparation Example 4 Preparation of Mung Bean Lactic Acid Bacteria Fermentation Solution Using Bifidobacterium sp

정제수로 세척하고 건조한 녹두를 미세하게 분말화하여 입자크기가 300메시가 되도록 하였다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 유산균을 접종하였다. 이때 사용한 유산균은 비피도 박테리움(Bifidobacterium sp)을 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 37℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 1차 제거 한 후 0.25 μm 여과막을 이용하여 최종 여과하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 ‘녹두 비피도박테리움 발효액 ’이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 비피도박테리움 발효액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다. Washed with purified water and finely powdered dried mung bean to have a particle size of 300 mesh. Mung beans and purified water were mixed at 1:10 and sterilized at 121 ° C., and then inoculated with lactic acid bacteria. The lactic acid bacterium used was Bifidobacterium sp and was added at 50,000 cfu / L per culture. The culture was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 37 ℃, pH 5.5. After cultivation, the culture solution was centrifuged to remove the culture cells first, and then filtered through a 0.25 μm filter membrane. The solution obtained by concentrating the filtrate thus obtained was used in the present invention using a suitable solvent. The fermentation broth prepared in this way is hereinafter referred to as ' mungbean Bifidobacterium fermentation broth '. Mung bean Bifidobacterium fermentation broth used in the following experimental example was used while maintaining the final concentration to 1g / 100mL.

비교 제조예 5. 효소 처리 후 효모를 이용한 녹두 효소-효모 발효액 제조Comparative Preparation Example 5 Preparation of Mung Bean Enzyme-Yeast Fermentation Solution Using Yeast after Enzyme Treatment

정제수로 세척하고 건조시킨 녹두를 미세하게 분말화하여 입자크기가 300메시가 되도록 하였다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 단백질 분해 효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간동안 처리하였다. 처리 후 이 시료에 효모를 접종하였다. 이때 효모는 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 사용하였다(50,000 cfu/L로 첨가). 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 30℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였으며, 배양 후 배양액을 원심 분리 및 0.45μm의 여과막을 이용하여 1차 여과하였고, 배양균 및 찌꺼기를 제거 한 후, 0.25 μm 여과막을 이용하여 2차 여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 ‘녹두 효소-효모 발효액’이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 효소-효모 발효액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.Washed with purified water and dried mung bean finely powdered to a particle size of 300 mesh. Mung beans and purified water were mixed at 1:10 and sterilized at 121 ° C., and then treated with proteolytic enzymes (pepsin, sigma, and the United States) for 2 hours. Yeast was inoculated after treatment. The yeast was used Saccharomyces cerevisiae (added at 50,000 cfu / L). The culture was incubated at 5 ° C. fermenter for 3 days at 30 ° C. and pH 5.5. After cultivation, the culture solution was first filtered using centrifugation and 0.45 μm filtration membrane, and after removing the culture and debris, 0.25 Secondary filtration was performed using a μm filtration membrane. The solution obtained by concentrating the filtrate thus obtained was used in the present invention using a suitable solvent. The fermentation broth prepared in this way is hereinafter referred to as ' mung bean enzyme-yeast fermentation broth '. Mung bean enzyme-yeast fermentation broth used in the following experimental example was used to maintain a final concentration of 1g / 100mL.

비교 제조예 6. 효소 처리 후 락토바실러스(Lactobacillus) 속 균주를 이용한 녹두 효소-유산균 발효액 제조Comparative Preparation Example 6 Preparation of Mung Bean Enzyme-Lactic Acid Bacteria Fermentation Solution Using Lactobacillus Strain after Enzyme Treatment

정제수로 세척하고 건조한 녹두를 미세하게 분말화하여 입자크기가 300메시가 되도록 하였다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 단백질 분해 효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간동안 처리하였다. 이 시료에 유산균을 접종하여 발효시킨 후 녹두 발효액으로 사용한다. 이때 유산균은 락토바실러스를 사용하였다(50,000 cfu/L로 첨가). 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 37℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리 및 0.45μm의 여과막을 이용하여 1차 여과하였고, 배양균 및 찌꺼기를 제거 한 후, 0.25 μm 여과막을 이용하여 2차 여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 ‘녹두 효소-락토바실러스 발효액’이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 효소-락토바실러스 발효액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다. Washed with purified water and finely powdered dried mung bean to have a particle size of 300 mesh. Mung beans and purified water were mixed at 1:10 and sterilized at 121 ° C., and then treated with proteolytic enzymes (pepsin, sigma, and the United States) for 2 hours. This sample is inoculated with lactic acid bacteria and fermented before use as mung bean fermentation broth. At this time, Lactobacillus was used (added at 50,000 cfu / L). The culture was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 37 ℃, pH 5.5. After the culture, the culture solution was first filtered by centrifugation and 0.45 μm filtration membrane, and after removing the culture and debris, the second filtration was performed using a 0.25 μm filtration membrane. The solution obtained by concentrating the filtrate thus obtained was used in the present invention using a suitable solvent. The fermentation broth prepared in this way is hereinafter referred to as ' mung bean enzyme-Lactobacillus fermentation broth '. Mung bean enzyme-Lactobacillus fermentation broth used in the following experimental example was used to maintain a final concentration of 1g / 100mL.

비교 제조예 7. 효소 처리 후 비피도박테리움 속(Bifidobacterium sp) 균주를 이용한 녹두 효소-유산균 발효액 제조Comparative Preparation Example 7 Preparation of Mung Bean Enzyme-Lactic Acid Bacteria Fermentation Solution Using Bifidobacterium sp Strain after Enzyme Treatment

정제수로 세척하고 건조한 녹두를 미세하게 분말화하여 입자크기가 300메시가 되도록 하였다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 단백질 분해 효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간동안 처리하였다. 이 시료에 유산 균을 접종하여 발효시킨 후 녹두 발효액으로 사용한다. 이때 유산균은 비피도박테리움 속(Bifidobacterium sp)를 사용하였다(50,000 cfu/L로 첨가). 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 37℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리 및 0.45μm의 여과막을 이용하여 1차 여과하였고, 배양균 및 찌꺼기를 제거 한 후, 0.25 μm 여과막을 이용하여 2차 여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액을 농축하여 얻은 액을 적정 용매를 이용하여 본 발명에 사용하였다. 이렇게 제조한 발효액을 이하 ‘녹두 효소-비피도박테리움 발효액’이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 효소-비피도박테리움 발효액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.Washed with purified water and finely powdered dried mung bean to have a particle size of 300 mesh. Mung beans and purified water were mixed at 1:10 and sterilized at 121 ° C., and then treated with proteolytic enzymes (pepsin, sigma, and the United States) for 2 hours. This sample is inoculated with lactic acid bacteria and fermented before use as a mung bean fermentation broth. At this time, lactic acid bacteria were used Bifidobacterium sp (added at 50,000 cfu / L). The culture was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 37 ℃, pH 5.5. After the culture, the culture solution was first filtered by centrifugation and 0.45 μm filtration membrane, and after removing the culture and debris, the second filtration was performed using a 0.25 μm filtration membrane. The solution obtained by concentrating the filtrate thus obtained was used in the present invention using a suitable solvent. The fermentation broth prepared in this way is hereinafter referred to as ' mung bean enzyme-Bifidobacterium fermentation broth '. Mung bean enzyme-Bifidobacterium fermentation broth used in the following experimental example was used while maintaining the final concentration to 1g / 100mL.

제조예 1. 녹두 효모 발효-효소 추출액의 제조Preparation Example 1 Preparation of Mung Bean Yeast Fermentation-Enzyme Extract

정제수로 세척하고 건조한 녹두를 미세하게 분말화하여 입자크기가 300메시가 되도록 하였다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 효모를 접종하였다. 이때, 효모는 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 30℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 제거 한 후 0.45μm 여과막을 이용하여 1차 여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액에 다시 단백질 분해효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간동안 처리한 후 이 액을 0.25μm 여과막을 이용하여 2차 여과하였다. 이 여과액을 다시 농축한 후 적정 용매를 이용하여 희석해서 사용하였다. 이렇게 제조한 발효-효소 추출액을 이하 ‘녹두 효모 발효-효소 추출액’이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 효모 발효-효소 추출액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.Washed with purified water and finely powdered dried mung bean to have a particle size of 300 mesh. Mung beans and purified water were mixed at 1:10 and sterilized at 121 ° C., and then inoculated with yeast. At this time, the yeast was used Saccharomyces cerevisiae (Saccharomyces cerevisiae), was added at 50,000 cfu / L per culture. Cultivation was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 30 ℃, pH 5.5. After incubation, the culture medium was centrifuged to remove the culture, and then filtered first using a 0.45μm filter membrane. The filtrate thus obtained was further treated with proteolytic enzymes (pepsin, sigma, and the United States) for 2 hours, and then the solution was filtered secondly using a 0.25 μm filtration membrane. The filtrate was concentrated again and diluted with a suitable solvent. The fermentation-enzyme extract thus prepared is hereinafter referred to as ' mung bean yeast fermentation-enzyme extract '. Mung bean yeast fermentation-enzyme extract used in the following experimental example was used to maintain a final concentration of 1g / 100mL.

제조예 2. 녹두 락토바실러스(Lactobacillus) 발효-효소 추출액의 제조Preparation Example 2 Preparation of Mung Bean Lactobacillus Fermentation-Enzyme Extract

정제수로 세척하고 건조시킨 녹두를 미세하게 분말화하여 입자크기가 300메시가 되도록 하였다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 유산균을 접종하였다. 이때, 유산균으로는 락토바실러스(Lacobacillus sp)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 37℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 제거 한 후 0.45μm 여과막을 이용하여 1차 여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액에 다시 단백질 분해효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간동안 처리한 후 이 액을 0.25μm 여과막을 이용하여 2차 여과하였다. 이 여과액을 다시 농축한 후 적정 용매를 이용하여 희석해서 사용하였다. 이렇게 제조한 발효-효소 추출액을 이하 ‘녹두 락토바실러스 발효-효소 추출액’이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 락토바실러스 발효-효소 추출액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다.Washed with purified water and dried mung bean finely powdered to a particle size of 300 mesh. Mung beans and purified water were mixed at 1:10 and sterilized at 121 ° C., and then inoculated with lactic acid bacteria. At this time, Lactobacillus (Lacobacillus sp) was used, and was added at 50,000 cfu / L per culture. The culture was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 37 ℃, pH 5.5. After incubation, the culture medium was centrifuged to remove the culture, and then filtered first using a 0.45μm filter membrane. The filtrate thus obtained was further treated with proteolytic enzymes (pepsin, sigma, and the United States) for 2 hours, and then the solution was filtered secondly using a 0.25 μm filtration membrane. The filtrate was concentrated again and diluted with a suitable solvent. The fermentation-enzyme extract thus prepared is hereinafter referred to as ' mung bean Lactobacillus fermentation-enzyme extract '. Mung bean Lactobacillus fermentation-enzyme extract used in the following experimental example was used to maintain the final concentration to 1g / 100mL.

제조예 3. 녹두 비피도박테리움(Bifidobacterium sp.) 발효-효소 추출액의 제조Preparation Example 3 Preparation of Mung Bean Bifidobacterium sp. Fermentation-Enzyme Extract

정제수로 세척하고 건조시킨 녹두를 미세하게 분말화하여 입자크기가 300메시가 되도록 하였다. 녹두와 정제수를 1:10으로 혼합하여 121℃에서 멸균시킨 후 유산균을 접종하였다. 이때, 유산균으로는 비피도박테리움(Bifidobacterium sp.)를 사용하였으며, 배양액 당 50,000 cfu/L로 첨가하였다. 배양은 5L 발효조를 이용하여 3일간, 37℃, pH 5.5로 유지하며 배양하였다. 배양 후 배양액을 원심 분리하여 배양균을 제거 한 후 0.45μm 여과막을 이용하여 1차 여과 하였다. 이렇게 얻은 여과액에 다시 단백질 분해효소(펩신, 시그마, 미합중국)를 2시간동안 처리한 후 이 액을 0.25μm 여과막을 이용하여 2차 여과하였다. 이 여과액을 다시 농축한 후 적정 용매를 이용하여 희석해서 사용하였다. 이렇게 제조한 발효-효소 추출액을 이하 ‘녹두 비피도박테리움 발효-효소 추출액’이라 통칭한다. 이하 실험예에 사용된 녹두 비피도박테리움 발효-효소 추출액은 최종농도가 1g/100mL가 되게 유지하여 사용하였다Washed with purified water and dried mung bean finely powdered to a particle size of 300 mesh. Mung beans and purified water were mixed at 1:10 and sterilized at 121 ° C., and then inoculated with lactic acid bacteria. At this time, Bifidobacterium sp. Was used as lactic acid bacteria, and was added at 50,000 cfu / L per culture. The culture was carried out using a 5L fermenter for 3 days, maintained at 37 ℃, pH 5.5. After incubation, the culture medium was centrifuged to remove the culture, and then filtered first using a 0.45μm filter membrane. The filtrate thus obtained was further treated with proteolytic enzymes (pepsin, sigma, and the United States) for 2 hours, and then the solution was filtered secondly using a 0.25 μm filtration membrane. The filtrate was concentrated again and diluted with a suitable solvent. The fermentation-enzyme extract thus prepared is hereinafter referred to as ' mungbean Bifidobacterium fermentation-enzyme extract '. Mung bean Bifidobacterium fermentation-enzyme extract used in the following experimental example was used while maintaining the final concentration to 1g / 100mL.

실험예 1 : HaCaT 케라티노사이트(keratinocyte)에서 IL-1α 분비 억제 효과 Experimental Example 1 Inhibitory Effect of IL-1α Secretion on HaCaT Keratinocyte

24 웰 플레이트에 HaCaT 케라티노사이트(German Cancer Research Institute, Germany)를 2× 105 cells/well의 밀도로 10% FBS가 첨가된 DMEM (Dulbeco's Modified Eagle's Medium, Gibco)으로 접종하여 가습화 된 37℃, 5% CO2 배양기에서 1일 배양하였다. 무혈청(Serum-free) DMEM으로 교환 후 비교제조예 1 내지 7과, 제조예 1, 2, 3의 시료를 모두 100ppm으로 처리하여 1일 배양하고 SDS (sodium dodecyl sulfate, Sigma)을 처리하여 4시간 더 배양하였다. 4시간 후 배양액 일부를 취해서 IL-1α 정량과 단백질 정량에 사용하였다. IL-1α 정량은 엔도젠사의 human IL-1α kit를 사용하여 kit의 IL-1α 정량법에 따라 수행하였으며, 시그마사의 BCA 방법으로 단백질을 정량하여 kit로 정량한 IL-1α를 단백질 양으로 보정하여 단위 단백질당 IL-1α 분비량을 측정하였다. 양성 대조군으로는 피부자극완화 물질로 기존에 사용되고 있던 Ketopropen을 사용하였으며 최종적인 IL-1α생성율(%)은 하기의 수학식 1에 의하여 구하였다. 37 ° C humidified by inoculating HaCaT keratinocytes (German Cancer Research Institute, Germany) with DMEM (Dulbeco's Modified Eagle's Medium, Gibco) with 10% FBS at a density of 2 × 10 5 cells / well , 1 day incubation in a 5% CO 2 incubator. After exchange with serum-free DMEM, the samples of Comparative Preparation Examples 1 to 7 and Preparation Examples 1, 2, and 3 were all treated at 100 ppm for 1 day of incubation and treated with SDS (sodium dodecyl sulfate, Sigma). Incubation was further time. After 4 hours, a portion of the culture was taken and used for IL-1α quantification and protein quantification. IL-1α quantification was performed according to the kit's IL-1α quantification method using Endogen's human IL-1α kit. The amount of IL-1α secretion per protein was measured. As a positive control, Ketopropen, which was previously used as a skin irritant, was used, and the final IL-1α production rate (%) was calculated by Equation 1 below.

Figure 112009004747904-pat00001
Figure 112009004747904-pat00001

IL-1α생성율 비교IL-1α production rate comparison 시 료sample IL-1α생성율(%)IL-1α production rate (%) 대조군Control group 32.41 ± 1.6732.41 ± 1.67 SDS만 처리SDS only 100.00 100.00 비교 제조예 1Comparative Production Example 1 90.93 ± 5.4090.93 ± 5.40 비교 제조예 2Comparative Production Example 2 91.50 ± 4.8091.50 ± 4.80 비교 제조예 3Comparative Production Example 3 88.22 ± 5.1088.22 ± 5.10 비교 제조예 4Comparative Production Example 4 86.32 ± 3.6086.32 ± 3.60 비교 제조예 5Comparative Preparation Example 5 87.46 ± 5.3087.46 ± 5.30 비교 제조예 6Comparative Preparation Example 6 87.33 ± 2.76 87.33 ± 2.76 비교 제조예 7Comparative Production Example 7 86.28 ± 2.8086.28 ± 2.80 제조예 1Production Example 1 83.33 ± 3.66 83.33 ± 3.66 제조예 2Production Example 2 81.46 ± 3.06 81.46 ± 3.06 제조예 3Production Example 3 79.22 ± 3.3079.22 ± 3.30 KetopropenKetopropen 63.15 ± 4.9663.15 + 4.96

상기 표 1의 결과에 따르면, 발효 후 효소 처리하여 얻은 본 발명의 제조예 1, 2 및 3의 시료에서, SDS 처리 후의 케라티노사이트에서의 IL-1α분비량이 타 시료들보다 상당량 감소하는 것을 알 수 있었다. 본 실험에서는 SDS처리를 통하여 피부에 발생할 수 있는 홍반을 일으킬 수 있는 IL-1α의 생합성을 본 것으로서 피부 세포에 SDS만 처리했을 때의 IL-1α의 양을 100으로 정하였을 때의 각 시료들의 IL-1α의 생성량을 구한 후 이것을 백분율화 한 것이다. 즉 이 결과를 통하여 발효후 효소 처리하여 얻은 시료에서의 IL-1α의 생성량을 줄여 줌으로써 피부에서 발생할 수 있는 홍반 등의 트러블을 완화시켜 주는 효과가 크다고 할 수 있다. 또한 발효시 사용한 유산균의 경우는 락토바실러스보다 비피도박테리움이 피부자극완화효과가 우수하였다. 추후 실험예 및 처방예에서는 유산균을 비피도박테리움으로 선택하여 실험하였다.According to the results of Table 1, in the samples of Preparation Examples 1, 2 and 3 of the present invention obtained by fermentation after fermentation, it was found that the amount of IL-1α secreted in keratinocytes after SDS treatment was significantly reduced compared to other samples. Could. In this experiment, the biosynthesis of IL-1α, which can cause erythema, which can occur on the skin through SDS treatment, was measured. When the amount of IL-1α was set to 100 when only SDS was treated on skin cells, IL of each sample was determined. After calculating the amount of -1α produced, we percentage it. In other words, by reducing the amount of IL-1α produced in the sample obtained by fermentation after fermentation, it can be said that the effect of relieving troubles such as erythema that may occur in the skin is great. In the case of lactic acid bacteria used during fermentation, Bifidobacterium had better skin irritation effect than Lactobacillus. In later experiments and prescription examples, lactic acid bacteria were selected as Bifidobacterium.

이하 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여 본 발명의 녹두 발효-효소 추출액을 포함하는 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나 본 발명의 조성물을 하기의 처방 예들로 한정하고자 하는 것은 아니다. 하기 처방 예에 사용한 녹두 발효-효소 추출액은 녹두 효모 발효-효소 추출액(제조예 1) 및 녹두 비피도박테리움 발효-효소 추출액(제조예 3) 중 어느 것을 사용하여도 무방하다.Hereinafter, based on the results of the above experimental example, to present a cosmetic composition comprising a mung bean fermentation-enzyme extract of the present invention. However, the composition of the present invention is not intended to be limited to the following formulation examples. The mung bean fermentation-enzyme extract used in the following prescription example may use either a mung bean yeast fermentation-enzyme extract (production example 1) and a mung bean Bifidobacterium fermentation-enzyme extract (production example 3).

처방예 1: 유연화장수Prescription 1: Softener

녹두 발효-효소 추출액을 함유한 화장료 중 유연화장수의 처방예는 다음과 같다.A prescription example of softening water in cosmetics containing mung bean fermentation-enzyme extract is as follows.

성 분ingredient 함량(%)content(%) 녹두 발효-효소 추출액Mung Bean Fermentation-Enzyme Extract 0.50.5 글리세린glycerin 5.05.0 1.3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 알란토인Allantoin 0.10.1 DL-판테놀DL-Panthenol 0.30.3 이.디.티.에이-2NALee D. TEE-2NA 0.020.02 벤조페논-9Benzophenone-9 0.040.04 소듐 히아루로네이트Sodium hyaruronate 5.05.0 니콜 HCO 60Nicole HCO 60 0.40.4 메틸 파라벤 Methyl paraben 0.20.2 향,incense, 0.010.01 증류수Distilled water 잔량Balance 합 계Sum 100100

처방예 2: 영양화장수Prescription Example 2: Nutritional Cosmetics

녹두 발효-효소 추출액을 함유한 화장료중 영양화장수의 처방예는 다음과 같다.A prescription example of nutrient cosmetics in cosmetics containing mung bean fermentation-enzyme extract is as follows.

성분ingredient 함량(단위:중량%)Content (unit:% by weight) 녹두 발효-효소 추출액Mung Bean Fermentation-Enzyme Extract 2.02.0 글리세릴 스테아레이트SEGlyceryl stearate SE 1.51.5 스테아릴 알콜Stearyl alcohol 1.51.5 라놀린lanolin 1.51.5 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.31.3 솔비탄스테아레이트Sorbitan stearate 0.50.5 경화식물유Hardened vegetable oil 1.01.0 광물유Mineral oil 5.05.0 스쿠알란Squalane 3.03.0 트리옥타노인Trioctanoin 2.02.0 디메치콘Dimethicone 0.80.8 초산토코페롤Tocopherol Acetate 0.50.5 카르복시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.120.12 글리세린glycerin 5.05.0 1.3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 소듐히아루로네이트Sodium hyaluronate 5.05.0 트리 에탄올아민Triethanolamine 0.120.12 메틸파라벤Methyl paraben 0.20.2 incense 0.020.02 증류수Distilled water 잔량Balance 합계Sum 100100

처방예 3: 영양크림Formulation Example 3: Nutritional Cream

녹두 발효-효소 추출액을 함유한 화장료 중 영양크림의 처방예는 다음과 같다.A prescription example of nutrient cream in cosmetics containing mung bean fermentation-enzyme extract is as follows.

성 분ingredient 함량(단위:중량%)Content (unit:% by weight) 녹두 발효-효소 추출액Mung Bean Fermentation-Enzyme Extract 3.03.0 친유형 모노스테아린산글리세린Pro-type glycerin monostearate 2.02.0 AHAAHA 3.03.0 세테아릴알콜Cetearyl alcohol 2.22.2 스테아린산Stearic acid 1.51.5 밀납Wax 1.01.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 솔비탄스테아레이트Sorbitan stearate 0.60.6 경화식물유Hardened vegetable oil 1.01.0 스쿠알란Squalane 3.03.0 광물유Mineral oil 5.05.0 트리옥타노인Trioctanoin 5.05.0 디메치콘Dimethicone 1.01.0 소듐마그네슘실리케이트Sodium magnesium silicate 0.10.1 글리세린glycerin 5.05.0 베타인Betaine 3.03.0 트리에타올아민Triethanolamine 1.01.0 소듐히아루로네이트Sodium hyaluronate 4.04.0 메틸파라벤Methyl paraben 0.20.2 incense 0.050.05 증류수Distilled water 잔량Balance 합계Sum 100100

실험예 2: 녹두 발효-효소 추출액을 함유한 화장료의 자극완화 효과 평가Experimental Example 2: Evaluation of Stimulating Relaxation Effect of Cosmetics Containing Mung Bean Fermentation-Enzyme Extract

본 발명의 화장료의 자극완화 효과는 실제 사용 테스트를 통하여 평가하였다. 즉, 60명의 여성을 대상으로 얼굴 양쪽면을 사용하여 2주동안 사용하면서 피부에 나타나는 자극 여부를 평가하였다.The stimulating effect of the cosmetic of the present invention was evaluated through the actual use test. That is, 60 women were evaluated for irritation on the skin by using both sides of the face for 2 weeks.

처방예 3은 녹두 발효- 효소 추출액을 제조예 3의 녹두 비피도박테리움 발효-효소 추출액을 3%(w/w)로 함유하고 있는 영양 크림을 사용하였다. 비교 처방예1은 녹두 비피도박테리움 발효-효소 추출액을 비교 제조예 1의 녹두 추출물로 대체한 영양크림을 사용하였고, 비교 처방예 2는 비교 제조예 4의 녹두 비피도박테리움 발효액으로 대체한 영양 크림을 사용하였다. 대조예로는 처방예 3에서 녹두 비피도박테리움 발효-효소 추출액을 정제수로 대체한 영양 크림을 사용하였다. 처방예 3, 비교 처방예 1,2 및 대조예의 영양 크림은 녹두 발효-효소 추출액을 제외하고는, 상기 표 4의 처방예와 동일하게 하였다.Formulation Example 3 used a nutrient cream containing mung bean fermentation-enzyme extract as 3% (w / w) of mung bean Bifidobacterium fermentation-enzyme extract of Preparation Example 3. Comparative Formulation Example 1 used a nourishing cream in which mungbean Bifidobacterium fermentation-enzyme extract was replaced with mungbean extract of Comparative Preparation Example 1, and Comparative Formulation Example 2 was replaced with mungbean Bifidobacterium fermentation solution of Comparative Preparation Example 4. Nourishing cream was used. As a control example, the nutrition cream which replaced mung bean Bifidobacterium fermentation-enzyme extract with purified water in the prescription example 3 was used. The nutritional creams of Formulation Example 3, Comparative Formulation Examples 1, 2 and Control Example were the same as in Formulation Example 4 above, except for the mung bean fermentation-enzyme extract.

녹두 발효-효소 추출액을 함유한 영양크림의 자극 완화 효과Stimulatory Effects of Nutritious Cream Containing Mung Bean Fermentation-Enzyme Extract 화장품cosmetics 자극완화 효과Stimulating effect 유효율(%)Effective rate (%) 자극없음No irritation 약한자극감Weak irritation 강한자극감Strong stimulation 처방예 3의 크림Cream of Prescription Example 3 2828 22 00 93.393.3 비교 처방예 1의 크림Cream of Comparative Prescription Example 1 1818 88 44 60.060.0 비교 처방예 2의 크림Cream of Comparative Formulation Example 2 2020 66 44 60.060.0 대조예의 크림Control cream 1One 44 2525 3.33.3

상기 표 5의 실험 결과에 의하면, 녹두 비피도박테리움 발효-효소 추출액을 함유한 본 발명의 처방예 3의 영양 크림은 비교 제조예 1의 녹두추출물을 함유하는 비교 처방예 1, 비교 제조예 4의 녹두 비피도박테리움 발효액을 함유하는 비교 처방예 2 및 대조예에 비하여 아주 높은 자극완화 효과를 보여주었다.According to the experimental results of Table 5, the nutrition cream of Formulation Example 3 of the present invention containing mung bean Bifidobacterium fermentation-enzyme extract Comparative Formulation Example 1, Comparative Preparation Example 4 containing the mung bean extract of Comparative Preparation Example 1 Compared to Comparative Formulation Example 2 and Control Example containing Mungbean Bifidobacterium fermentation broth showed very high irritant effect.

이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.While the present invention has been particularly shown and described with reference to exemplary embodiments thereof, it is to be understood that the same is by way of illustration and example only and is not to be construed as limiting the scope of the present invention. Therefore, the substantial scope of the present invention will be defined by the appended claims and equivalents thereof.

Claims (6)

녹두 발효-효소 추출액을 유효성분으로 포함하는 피부 진정 및 자극 완화용 화장료 조성물.Cosmetic composition for calming and stimulating skin comprising mung bean fermentation-enzyme extract as an active ingredient. 제 1 항에 있어서, 상기 녹두 발효-효소 추출액은 효모로서 사카로마이세스 세레비시애(Saccharomyces cerevisiae)를 이용하여 녹두를 배양하여 수득한 발효액을 단백질 분해 효소를 이용하여 효소 분해시켜 유효성분을 제조한 것을 특징으로 하는 피부 진정 및 자극 완화용 화장료 조성물.The method of claim 1, wherein the mung bean fermentation-enzyme extract is a yeast fermentation broth obtained by culturing the mung bean using Saccharomyces cerevisiae (Saccharomyces cerevisiae) using a proteolytic enzyme to prepare an active ingredient Cosmetic composition for calming and irritating skin, characterized in that one. 제 1 항에 있어서, 상기 녹두 발효-효소 추출액은 유산균으로서 비피도박테리움(Bifidobacterium sp)을 이용하여 녹두를 배양하여 수득한 발효액을 단백질 분해 효소를 이용하여 효소 분해시켜 유효성분을 제조한 것을 특징으로 하는 피부 진정 및 자극 완화용 화장료 조성물.According to claim 1, wherein the mungbean fermentation-enzyme extract is a lactic acid bacteria as a lactic acid bacterium fermentation broth obtained by culturing mungbeans using Bifidobacterium sp (enzymatic digestion using a proteolytic enzyme to prepare an active ingredient) Cosmetic composition for calming and irritating skin. 제 2 항 또는 제 3 항에 있어서, 상기 단백질 분해효소는 펩신, 트립신, 카르복시펩티다아제, 아미노펩티다아제 및 디펩티다아제로 이루어지는 군중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 피부 진정 및 자극 완화용 화장료 조성물.According to claim 2 or 3, wherein the protease is selected from the group consisting of pepsin, trypsin, carboxypeptidase, aminopeptidase and dipeptidase cosmetic composition for skin sedation and irritation relief. 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 녹두 발효-효소 추출액 은 상기 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001-30.0%(w/w)로 함유되는 것을 특징으로 하는 피부 진정 및 자극 완화용 화장료 조성물.The soybean fermentation-enzyme extract of claim 1, wherein the mung bean fermentation-enzyme extract is contained in an amount of 0.0001-30.0% (w / w) based on the total weight of the cosmetic composition. Cosmetic composition for. 삭제delete
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