KR101254848B1 - 열 처리된 박테린, 및 상기 열 처리된 박테린으로부터 제조된 에멀젼 백신 - Google Patents
열 처리된 박테린, 및 상기 열 처리된 박테린으로부터 제조된 에멀젼 백신 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101254848B1 KR101254848B1 KR1020107013538A KR20107013538A KR101254848B1 KR 101254848 B1 KR101254848 B1 KR 101254848B1 KR 1020107013538 A KR1020107013538 A KR 1020107013538A KR 20107013538 A KR20107013538 A KR 20107013538A KR 101254848 B1 KR101254848 B1 KR 101254848B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- leptospira
- vaccine
- swine
- bacterin
- heat treated
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/0225—Spirochetes, e.g. Treponema, Leptospira, Borrelia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
- A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
Abstract
열 처리된 박테린, 열 처리된 박테린의 제조 방법, 및 상기 열 처리된 박테린으로부터 제조된 돼지 에멀젼 백신을 개시한다.
Description
본 발명은 일반적으로 백신 분야, 및 에멀젼 백신을 안정화시키는 방법에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 열 처리된 박테린, 열 처리된 박테린의 제조 방법, 및 상기 열 처리된 박테린으로부터 제조된 에멀젼 백신에 관한 것이다.
백신접종(vaccination)은 동물에서 감염성 질병을 제어하기 위하여 사용이 증가되고 있다. 백신에서는 종종 항원에 대한 체액성 및/또는 세포성 면역 반응을 증가시킬 수 있으므로 애주번트(adjuvant)가 사용된다. 백신은 종종 에멀젼으로서 제형화되는데, 그 이유는 에멀젼이 애주번트로서 작용할 수 있고, 항원을 주사 부위에 저장소(depot)로서 보유하는 특성을 갖기 때문이다. 에멀젼 백신에는 에멀젼화제(emulsifier)가 일반적으로 사용된다. 에멀젼화제를 사용하는 것 이외에, 에멀젼 백신의 안정성은 또한 기계적 수단에 의해 에멀젼의 액적 크기를 감소시키는 것을 통해 달성될 수 있다.
미국 특허 5,084,269는 레시틴을 광물유와 조합하여 함유하는 애주번트 제형에 관한 것이고, 이는 숙주 동물 내에서 자극이 더 작으면서도 증가된 전신 면역을 유도한다. 미국 특허 5,084,269에 따른 조성물은 상품명 AMPHIGEN(등록상표)(화이자, 인크.(Pfizer, Inc.)의 상표)로 상업적으로 이용가능하다.
일반적으로, 세균 항원은 가열될 때 불안정하고, 심지어 승온에 잠깐 동안 노출시킨 경우에도 항원의 활성을 감소시킬 수 있다. 예를 들어, 현재의 탄저병 백신은 37℃에서 48시간 내에 모든 생물학적 활성을 소실할 수 있다(문헌[S. Sing, N. Ahuja, V. Chauhan, E. Rajasekaran, W.S. Mohsin, R. Bhat, and R. Bhatnagar; Bioche. Biophys. Res. Commun. 2002 Sep. 6; 295(5):1058-62]).
본 발명은 열 처리된 박테린, 열 처리된 박테린의 제조 방법, 및 상기 열 처리된 박테린으로부터 제조된 돼지 에멀젼 백신에 관한 것이다. 상기 방법은 박테린을 약 35 내지 약 80℃의 온도로 가열하여 열 처리된 박테린을 형성하는 것을 포함한다.
정의
허용되는 항원 활성 - 용어 "허용되는 항원 활성"은 동종(homologous)의 살아있는 유기체를 사용한 명문화된(codified) 효력 시험을 통과함으로써 또는 시험접종된(challenged) 후 백신접종한 동물에서 보호 면역 반응을 유도하는 능력을 의미한다.
박테린 - 용어 "박테린"은 백신의 성분으로서 사용될 수 있는 사멸 세균의 현탁액을 의미한다.
에멀젼화제 - 용어 "에멀젼화제"는 에멀젼을 보다 안정하게 만들기 위해 사용되는 물질을 의미한다.
에멀젼 - 용어 "에멀젼"은 하나의 액체의 소액적(small droplet)이 다른 액체의 연속 상 내에 현탁되는 2개의 비혼화성 액체들의 조성물을 의미한다.
열 처리된 박테린 - 용어 "열 처리된 박테린"은 박테린을 의미하며, 이는 열 처리되고, 열 처리 전의 리파제 활성의 50% 이하의 리파제 활성을 갖고, 허용되는 항원 활성을 갖는다.
역(invert) 에멀젼 - 용어 "역 에멀젼"은 유중수형(water in oil) 에멀젼을 의미한다.
리파제 - 용어 "리파제"는 에멀젼 백신에서 에멀젼화제의 붕괴(breakdown)를 일으킬 수 있는 효소, 에스테라제, 리파제 및 포스포리파제를 의미한다.
정상(normal) 에멀젼 - 용어 "정상 에멀젼"은 수중유형(oil in water) 에멀젼을 의미한다.
수중유형 에멀젼 - 용어 "수중유형 에멀젼"은 오일의 소액적이 연속 수성상 내에 현탁되어 있는 에멀젼을 의미한다.
실온 - 용어 "실온"은 18 내지 25℃의 온도를 의미한다.
유중수형 에멀젼 - 용어 "유중수형 에멀젼"은 물 액적이 연속 오일상 내에 현탁되어 있는 에멀젼을 의미한다.
상세한 설명
본 발명은 감소된 리파제 활성을 갖는 박테린, 상기 박테린으로부터 제조된 돼지 에멀젼 백신, 및 박테린의 리파제 활성을 감소시키는 방법에 관한 것이다. 일부 박테린은 항원성 성분 외에 리파제 활성을 갖는다. 리파제 활성을 갖는 박테린을 에멀젼 내로 포함시키면, 리파제는 에멀젼 생성에 사용된 에멀젼화제를 붕괴시킬 수 있다. 높은 리파제 활성을 갖는 박테린을 함유하는 에멀젼 백신은 불안정한 에멀젼이 되는 경향이 있고, 낮은 수준의 리파제를 갖는 박테린을 함유하는 에멀젼이 안정한 경향이 있다. 사멸될 때 리파제 활성을 갖는 박테린을 생산할 수 있는 세균의 예는 에리시펠로트릭스 루시오파티에애(Erysipelothrix rhusiopathieae), 리스테리아 모노시토게네스(Listeria monocytogenes), 에셔리키아 콜라이(Escherichia coli), 미코플라스마 히오뉴모니애(Mycoplasma hyopneumoniae), 및 렙토스피라(Leptospira) 종, 예를 들어 공지의 병원체 렙토스피라 카니콜라(Leptospira canicola), 렙토스피라 그립포티포사(Leptospira grippotyposa), 렙토스피라 하르드조(Leptospira hardjo), 렙토스피라 익테로해모라기애(Leptospira icterohaemorrhagiae), 렙토스피라 브라티스라바(Leptospira bratislava) 및 렙토스피라 포모나(Leptospira pomona)를 포함한다. 이들 세균은 돼지에서 질병을 일으킬 수 있어서, 이들 질병에 대해 백신접종을 하는 것이 바람직하다. 렙토스피라 박테린은 높은 리파제 활성을 가지기 쉬운 반면, 에리시펠로트릭스 루시오파티에애 박테린은 더 낮으며 더 용이하게 조절될 수 있는 리파제 활성을 가질 수 있다.
에멀젼 생성에 사용된 에멀젼화제를 붕괴시키고 따라서 에멀젼을 불안정하게 하고 붕괴시키는 리파제는 하나 이상의 에멀젼 파괴 효소, 예를 들어 에스테라제, 리파제 및 포스포리파제를 포함할 수 있다. 이들 효소, 에스테라제, 리파제 및 포스포리파제를 리파제로서 총칭한다. 박테린의 리파제 활성은 O-피발로일옥시메틸 움벨리페론(C-POM)으로 불리는 합성 기질을 사용하여 측정할 수 있다. 리파제에 의해 유발된 가수분해 속도는 리파제 활성의 측정치이다. 상기 반응에서 리파제에 의해 유발된 가수분해의 반응 속도는 리파제 활성의 산물의 형광 강도의 증가에 의해 모니터링된다. 반응 속도는 선택된 정확한 가수분해 시험 조건에 좌우되기 때문에, 가수분해 속도에 의해 측정되는 리파제 활성 수준의 비교는 동일한 시험 조건에 의해 생성된 데이타를 사용하여 이루어져야 한다. 방법은 문헌([Kurioka S., and Matsuda M. (1976) Ana. Biochem. 75: 281-289], [De Silva NS, and Quinn PA. (1987) J. Clin. Microbiol. 25: 729-731] 및 [Grau, A., and Ortiz, A. (1998) Chem. Phys. of Lipids. 91: 109-118])을 포함한 몇몇 문헌에 개시되어 있다.
에멀젼 백신에서, 에멀젼의 붕괴는 성분의 상 분리를 일으킨다. 상 분리가 있을 때 용기로부터 제거된 개별 투여량이 동일한 수준의 백신 성분을 함유하지 않을 수 있기 때문에 이는 바람직하지 않다. 또한, 에멀젼의 손실은 에멀젼화제의 애주번트 활성을 손실시키고, 백신의 항원 효과를 감소시킬 수 있다.
약화(attenuated) 생(live) 바이러스가 종종 박테린과 함께 백신 내에 포함된다. 그러한 백신은, 단일 백신을 사용하여 상이한 질병들에 대한 면역을 생성시킬 수 있기 때문에 유용하다. 박테린에 리파제 활성이 존재하면, 에멀젼으로부터 에멀젼화제를 방출시킬 것이다. 상기 유리 에멀젼화제는 생 백신 바이러스를 파괴하고 불활성화시켜, 바이러스 감염성을 손실시킬 수 있다.
백신에 유용한 박테린은, 관심있는 세균을 배양한 후 세균을 사멸시켜 세포벽 성분을 포함한 다양한 세균 성분을 함유하는 박테린을 생산함으로써 형성할 수 있다. 세균은, 이들을 메르티올레이트, 포르말린, 포름알데히드, 디에틸아민, 2원(binary) 에틸렌아민(BEI), 베타 프로피오락톤(BPL) 및 글루타르알데히드와 같은 화합물에 노출시키는 것을 포함한 다양한 방법에 의해 사멸될 수 있다. 이들 화합물의 조합물을 사용할 수도 있다. 또한, 멸균 방사선을 사용하여 세균을 사멸시키는 것이 가능하다.
본 발명에 이르러, 상기 리파제 활성을 갖는 박테린의 리파제 활성은 열 처리에 의해 감소될 수 있는 것으로 밝혀졌다. 구체적으로, 박테린의 리파제 활성은 박테린을 약 35 내지 약 80℃의 온도로 가열하여 열 처리된 박테린을 형성함으로써 감소될 수 있고, 이는 허용되는 항원 활성을 갖는다. 열 처리는 열 처리된 박테린의 리파제 활성이 열 처리 전의 박테린에서 발견된 것보다 50% 이하가 되도록 충분한 시간 동안 수행된다. 우수한 에멀젼 백신 안정성을 위해, 리파제 활성이 0으로 감소될 필요는 없다. 본 발명자들은, 저장 수명이 우수한 백신은 리파제 활성 수준이 열 처리 전의 리파제 활성 수준의 50% 이하인 열 처리된 박테린으로부터 제조될 수 있다는 것을 발견하였다.
시험 기질의 가수분해 속도가 박테린의 리파제 활성의 척도로서 사용되는 경우, 열 처리 전의 시험 기질의 가수분해 속도를 열 처리 후의 가수분해 속도와 비교한다. 열 처리는 가수분해 속도를 신선한(fresh) 박테린에서 관찰되는 가수분해 속도보다 50% 이하로 감소시키도록 수행된다.
열 처리 전의 활성과 열 처리 후의 활성을 측정하는데 동일 방법이 사용되기만 한다면 리파제 활성 수준을 측정하는 방법 자체는 중요하지 않다. 예를 들어, 시험 기질의 가수분해 속도가 하나의 기질을 사용하여 측정되는 경우, 상이한 기질은 상이한 속도를 생성시킬 것이다. 그러나, 초기 활성 결정 및 처리 후의 활성 결정을 위해 동일한 기질이 사용된다면, 상대적인 속도는 여전히 열 처리의 효과를 보여줄 것이다.
렙토스피라 포모나 박테린(9CFR §113.101), 렙토스피라 익테로해모라기애 박테린(9CFR §113.102), 렙토스피라 카니콜라 박테린(9CFR §113.103), 렙토스피라 그립포티포사 박테린(9CFR §113.104), 및 렙토스피라 하르드조 박테린(9CFR §113.105)에 대한 항원 활성에 대한 명문화된 시험이 존재한다(9CFR §113.101, §113.102, §113.103, §113.104 및 §113.105). 이들 종에 대해, 허용되는 항원 활성은 햄스터를 동종의 생 세균으로 시험접종할 때 백신접종하지 않은 햄스터의 적어도 80%가 생존하지 않는 모델에서 백신접종한 햄스터의 적어도 75%가 생존하도록, 백신접종한 햄스터에서 보호 면역 반응을 유도하는 능력으로서 규정된다. 항원 렙토스피라 하르드조의 경우에, 허용되는 항원 활성은, 세균 항원 렙토스피라 하르드조를 포함하는 백신을 접종한 송아지에서 40 이상의 렙토스피라 하르드조에 대한 혈청 응집 기하 평균 역가를 유도하는 백신의 능력으로서 규정된다. 다른 박테린의 경우, 허용되는 항원 활성은, 동종의 살아있는 유기체를 사용하는 명문화된 효력 시험을 통과함으로써 또는 시험접종된 후 백신접종한 동물에서 보호 면역 반응을 유도하는 능력으로서 정의된다.
열 처리는 일정 범위의 온도에 걸쳐 다양한 시간 동안 수행할 수 있다. 일반적으로, 가열은 약 35 내지 약 80℃의 온도에서 약 20분 내지 약 24시간 동안 이루어질 수 있다. 박테린이 보다 고온, 예를 들어 약 75 내지 약 80℃로 가열되면, 가열 시간은 상기 시간 범위 중 짧은 범위이다. 가열이 보다 저온에서 이루어지면, 가열은 보다 긴 시간 동안 이루어진다. 온도 및 시간의 다른 조합은 약 60 내지 약 70℃의 온도에서 약 9 내지 약 10시간 동안 가열하는 것이다. 온도 및 시간의 다른 조합은 약 65 내지 약 70℃의 온도에서 약 5 내지 약 8시간 동안 가열하는 것이다. 온도 및 시간의 다른 조합은 약 65 내지 약 70℃의 온도에서 약 1시간 동안 가열하는 것이다. 온도 및 시간의 다른 조합은 약 55 내지 약 65℃의 온도에서 약 5 내지 약 8시간 동안 가열하는 것이다.
박테린은 열 처리 후에 새로 제조된 박테린보다 더 낮은 리파제 활성을 갖지만, 새로 제조된 박테린과 동일한 방식으로 제형화될 수 있다. 따라서, 열 처리된 박테린은 백신을 생산하는 통상적인 방식에 의해 백신 내로 포함될 수 있다. 상기 방법은 당업계에 잘 공지되어 있다.
에멀젼 백신은 목적하는 박테린을 오일상 및 에멀젼화제(들)과 조합함으로써 형성할 수 있다. 이어서, 조합물을 강하게 교반하여 에멀젼을 형성한다. 적합한 교반 방법은 균질화(homogenization) 및 후속적인 미세유체화(microfluidization)를 포함한다. 방부제 및 부형제를 또한 에멀젼화 전에 조합물에 포함시킬 수 있다.
백신은 박테린 및 바이러스 항원을 모두 포함할 수 있다. 박테린 및 바이러스 항원을 포함하는 백신 제조 시, 포함시킬 박테린, 임의의 바이러스 항원, 에멀젼화제(들) 및 선택적으로 방부제 및 부형제를 오일상과 조합하고 에멀젼화시킨다. 에멀젼 형성 후, NaOH 또는 HCl의 용액을 사용하여 제형의 pH를 적절한 pH로 조정할 수 있다. 백신 용도를 위해, 주사 부위에서 자극을 피하도록 pH는 중성에 가까운 것이 일반적으로 바람직하다. pH 약 7.0 내지 약 7.3이 일반적이다.
에멀젼 백신 형성을 위한 적합한 오일상은 대사불가능(non-metabolizable) 오일 및 대사가능 오일을 포함한다. 대사불가능 오일은 광물유, 예를 들어 백색(white) 광물유와 경질(light) 광물유를 포함한다. 대사가능 오일은 식물유, 어유 및 합성 지방산 글리세리드를 포함한다.
본 발명의 에멀젼 백신을 제조하는데 사용할 수 있는 에멀젼화제의 예는 일반적인 백신 에멀젼화제인 인지질, 소르비탄 에스테르, 폴리에톡시화 소르비탄 에스테르, 및 만니톨 유도체이다. 인지질 에멀젼화제는 레시틴, 포스파티딜에탄올아민, 포스파티딜이니시톨, 포스파티딜세린 및 레시틴(예, AMPHIGEN(등록상표))을 포함한다. 소르비탄 에스테르 에멀젼화제는 소르비탄 모노라우레이트(예, Span(등록상표) 20 및 Arlacel(등록상표) 20), 소르비탄 모노올레에이트(예, Span(등록상표) 80 및 Arlacel(등록상표) 80), 소르비탄 모노팔미테이트(예, Span(등록상표) 40 및 Arlacel(등록상표) 40) 및 소르비탄 모노스테아레이트(예, Span(등록상표) 60 및 Arlacel(등록상표) 60)를 포함한다. 폴리에톡시화 소르비탄 에스테르는 폴리에톡시 소르비탄 모노라우레이트(예, Tween(등록상표) 20 및 Tween(등록상표) 21), 폴리에톡시 소르비탄 모노올레에이트(예, Tween(등록상표) 80), 폴리에톡시 소르비탄 모노팔미테이트(예, Tween(등록상표) 40) 및 폴리에톡시 소르비탄 모노스테아레이트(예, Tween(등록상표) 60)을 포함한다. 만니톨 유도체 에멀젼화제는 만니톨 옥타데카논 에테르를 포함한다. Span(등록상표), Arlacel(등록상표) 및 Tween(등록상표)은 아이씨아이 아메리카스(ICI Americas)의 상표이다. AMPHIGEN(등록상표)은 화이자, 인크.의 상표이다. 일반적으로, 백신은 정상 수중유형 에멀젼으로서 제형화되지만, 역 유중수형 에멀젼을 제조하는 것도 가능하다.
다양한 애주번트, 예를 들어 퀼(Quil) A, 콜레스테롤, 인산알루미늄 및 수산화알루미늄, 및 방부제, 예를 들어 메르티올레이트를 백신 내에 사용할 수 있다. 퀼 A는 남아메리카 나무 키라야 사포나리아 모리나(Quillaja Saponaria Molina)의 수피로부터 추출한 키라야(quillaja) 사포닌의 정제 혼합물이다. 퀼 A는 면역계에 직접 작용하여 전반적인 감수성 상태를 활성화시킨다. 이렇게 하여 체액 및 세포-매개 반응을 모두 유도한다. 친지성(lipophilic) 사슬은 내인성 경로에서 처리하기 위해 세포질 내로 전달되도록 항원 및 애주번트의 상호작용을 허용한다. 콜레스테롤은 적절한 비율로 첨가될 때 덜 바람직한 부작용을 제거하기 때문에, 퀼 A는 종종 콜레스테롤과 함께 사용된다. 콜레스테롤은 콜레스테롤이 퀼 A와 결합할 때 퀼 A와 함께 나선-유사 구조를 형성하는 불용성 복합체를 형성하여, 분자의 당 유닛을 노출시키고, 이는 면역 반응을 자극하는 것을 돕는다.
박테린을 함유하는 백신 내에 바이러스 항원을 첨가하는 것이 일반적이다. 상기 방법의 하나의 잇점은 동일한 결과를 달성하기 위해 몇몇 상이한 백신의 투여를 필요로 하는 대신에 몇몇 질병들에 대해 면역을 생성시키기 위해 하나의 백신을 사용할 수 있다는 점이다. 사(killed) 바이러스 및 약화 생 바이러스 모두가 백신에 사용될 수 있다. 사용할 수 있는 돼지 질병 유발 바이러스에는 돼지 아데노바이러스, 돼지 서코바이러스(Circovirus), 돼지 헤르페스 바이러스, 가성광견병(Pseudorabies) 바이러스, 전통적 돼지 콜레라(swine fever) 바이러스, 돼지 유행성 설사 바이러스, 돼지 적혈구응집 엔세팔로밀레티티스(hemaglutinating encephalomyletitis) 바이러스, 돼지 파르보바이러스, 돼지 호흡 코로나 바이러스, 돼지 생식 및 호흡 바이러스, 돼지 인플루엔자, 전달성 위창자염 바이러스 및 수포성 구내염 바이러스가 있다.
박테린에 리파제 활성이 존재하면, 에멀젼으로부터 에멀젼화제를 방출시킬 수 있다. 상기 유리 에멀젼화제는 생 바이러스 외피(envelope)를 파괴하고 생 백신 바이러스를 불활성화시켜, 바이러스 감염성을 손실시킬 수 있다. 따라서, 박테린을 열 처리하면 에멀젼을 안정화시키고, 그의 애주번트 효과를 보존하고, 바이러스의 바이러스 감염성을 보존하는 역할을 한다.
다음 실시예는 추가의 예시를 위해 제공되고, 청구된 발명의 범위를 제한하는 것으로 의도되지 않는다.
절차
절차 1. 탁도(
turbidity
)의 결정
탁도는 광 산란법에 의해 비탁적 단위(Nephelometric Units; NU)로 결정한다. 규정된 조건 하에 샘플에 의해 산란된 빛의 강도를 표준 참조 현탁액에 의해 산란된 빛의 강도와 비교한다. 산란광의 강도가 클수록 샘플의 탁도가 더 높다. 광원을 샘플 내로 비추고, 광 산란을 광원 방향에 대해 90°에서 측정한다. 기구는 포르마진 현탁액으로부터 광 산란을 측정함으로써 보정한다.
비탁계
(
Nephelometer
) 기구의 보정
증류수를 공극 크기 0.2 ㎛의 멤브레인 필터를 통해 여과하여 한외여과수를 제조한다. 부피 플라스크 내에서 1.00 g의 히드라진 설페이트(NH2) H2SO4를 한외여과수에 용해시키고 한외여과수로 100 ml로 희석시켜 제1 용액을 제조한다. 부피 플라스크 내에서 10.00 g의 헥사메틸렌테트라민을 한외여과수에 용해시키고 한외여과수로 100 ml로 희석시켜 제2 용액을 제조한다. 5.0 ml의 제1 용액을 5.0 ml의 제2 용액과 혼합하여 포르마진 현탁액을 제조한다. 혼합물을 24시간 동안 약 24℃에서 정치시킨다. 혼합물을 한외여과수로 100 ml로 희석하여, 탁도가 400 NU인 원액(stock) 탁도 현탁액을 형성한다. 10.00 ml의 원액 탁도 현탁액을 한외여과수로 100 ml로 희석하여 40 NU 포르마진 탁도 현탁액을 제조한다. 추가의 보정 용액은 원액을 희석하여 제조한다.
탁도의 측정
탁도가 비탁계의 보정된 범위 내에 있도록, 측정할 샘플을 한외여과수로 희석한다. 탁도를 측정하고, 원래의 탁도를 다음 식을 사용하여 계산한다:
원래의 탁도(NU) = {M x(D + O)}/O
식에서, M은 희석된 샘플의 탁도(NU)이고,
D는 희석수의 부피(mL)이고,
O는 원래의 샘플 부피(mL)이다.
절차 2.
리파제
분석
리파제 활성은 형광 기질로서 O-피발록시메틸움벨리페론을 사용하여 결정하였다. 리파제는 상기 비-형광 기질의 가수분해를 촉매하여 수성 조건 하에 불안정한 히드록시메틸에테르를 생성시킨다. 불안정한 히드록시메틸에테르의 분해는 포름알데히드 및 형광 산물인 움벨리페론을 생성한다. 시간의 함수로서 생산된 움벨리페론의 형광 강도를 모니터링하면 리파제 효소 활성의 예민한 동적 측정을 제공한다.
O-피발록시메틸움벨리페론(몰레큘라 프로브스(Molecular Probes) 제품 번호 P35901) 용액을 순수 DMSO 내에 5 mM의 원액 농도로 제조하고; 미사용 용액을 -20℃에서 저장하고 차광하였다. 5 mM O-피발록시메틸움벨리페론 용액을 58 mM TRIS-HCl 버퍼(pH 8.0)를 사용하여 750 μM로 희석하고, 생성되는 용액을 37℃로 예온하였다. 렙토스피라 샘플 또는 대조군 버퍼/배지를 10분 동안 실온에서 6500 X 중력에서 원심분리하여 펠렛 및 상등액을 형성하였다. 반응은 저부피 96 웰 플레이트(Corning 3393, 흑색 폴리스티렌 비-결합 표면, 영역의 절반)의 분석 웰 내에서 15 ㎕의 100 mM TRIS-HCl 버퍼(pH 8.0)을 렙토스피라 샘플 또는 대조군 버퍼/배지로부터의 실온에서의 상등액 15 ㎕과 합하고; 10분 동안 37℃에서 예비-인큐베이팅한 후; 20 ㎕의 750 μM O-피발록시메틸움벨리페론 또는 대조군 버퍼/배지를 첨가하여 반응을 개시함으로써 수행하였다. 생성되는 반응 혼합물은 53 mM TRIS-HCl 버퍼(pH 8.0) 및 0 또는 300 μM O-피발록시메틸움벨리페론을 함유하였다. 형광 강도를 1-시간에 걸쳐 30-45초 간격으로 측정하였다(Spectramax Gemini XS, 37℃, λex= 360 nm, λem= 460 nm, PMT 감도 세팅 '중', 웰 당 6회 판독). 반응 속도는 생성되는 진행 곡선의 기울기로부터 결정하였다.
절차 3. 에리시펠로트릭스
루시오파티에애
제제의 탁도의 측정
에리시펠로트릭스 루시오파티에애 제제의 탁도를 분광광도법으로써 600 nm 파장에서 측정하였다. 결과는 광학 단위(optical unit, OU)로 기록된다.
[실시예]
실시예
1. 열 처리에 의한
리파제
활성의 감소
렙토스피라 카니콜라, 렙토스피라 익테로해모라기애, 렙토스피라 그립포티포사, 렙토스피라 하르드조 및 렙토스피라 포모나를 함유하는 메르티올레이트 사멸 렙토스피라의 풀(pool)을 개별 박테린으로부터 제조하였다. 6개의 박테린 샘플을 밤새(약 12시간) 4℃, 37℃, 45℃, 56℃, 65℃ 및 80℃에서 저장하였다. 4℃에서 저장한 샘플이 비-처리 대조군으로서 역할을 하였다. 12시간 동안 37℃, 45℃, 56℃, 65℃ 및 80℃에서 저장한 샘플이 열 처리된 샘플이었다. 저장 후, 시험 기질이 각각의 박테린의 존재 하에 가수분해되는 속도를 절차 2의 방법에 따라 측정하였다. (샘플에 대한 가수분해 속도) ÷ (4℃에서 저장된 샘플의 가수분해 속도) × 100이 저장 후에 남아 있는 각각의 박테린의 원래 리파제 활성의 백분율이다. 다음 표는 저장 온도 및 저장 후에 남아 있는 원래 리파제 활성의 백분율을 보여준다.
2개의 렙토스피라 브라티스라바 계대 배양물(serial)을 제조하였다. 상기 배양물을 메르티올레이트로 불활성화시킨 후, 65℃에서 8시간 동안 열 처리하였다. 샘플을 처리 전에 및 처리 중 2시간 마다 샘플을 채취하였다. 절차 2의 방법에 따라 각 시점에서 리파제 활성을 결정하였다. 샘플을 취했을 때에, 각 샘플의 존재 하에 시험 기질이 가수 분해되는 속도를 측정하였다. (샘플에 대한 가수분해 속도) ÷ (초기 가수분해 속도의 속도) × 100이 열 처리 후에 남아 있는 각각의 박테린의 원래 리파제 활성의 백분율이다. 다음 표는, 샘플 시간, 및 그 시점에 남아 있는 원래 리파제 활성의 평균 백분율을 보여준다.
실시예
2. 실험적 백신 제형의 제조
렙토스피라 카니콜라, 렙토스피라 익테로해모라기애, 렙토스피라 그립포티포사, 렙토스피라 하르드조, 렙토스피라 포모나, 렙토스피라 브라티스라바, 에리시펠로트릭스 루시오파티에애, 및 돼지 파르보바이러스의 배양액(culture)을 성장시켰다. 각 렙토스피라 배양액의 탁도를 비탁적 단위(NU)로 측정하였다. 에리시펠로트릭스 루시오파티에애 배양액의 탁도를 광학 단위(OU)로 측정하였다. 세균을 메르티올레이트를 사용하여 사멸시켜 박테린을 형성하였다. 각각의 박테린을 65℃에서 8시간 동안 열 처리하여 리파제 활성을 감소시켰다. 에리시펠로트릭스 루시오파티에애 박테린은 열 처리하지 않았다. 렙토스피라 박테린을 사멸 돼지 파르보바이르서 및 사멸 에리시펠로트릭스 루시오파티에애와 합친 후, 각각의 2 ml 투여량의 백신이 하기 표에 기재된 성분을 함유하도록 AMPHIGEN(등록상표), 애주번트, 방부제 및 희석 버퍼와 혼합하였다.
항원의 농도
실시예
3. 햄스터 및
돼지에서
효력 시험
실시예 2의 백신을 표준 실험실 동물 모델을 이용하여 효력을 시험하기 위해 햄스터 및 래빗에 투여하였다. 이어서, 백신의 효력을 시험하기 위해 시험 햄스터에게 투여량의 렙토스피라 카니콜라, 렙토스피라 익테로해모라기애, 렙토스피라 그립포티포사, 렙토스피라 브라티스라바 또는 렙토스피라 포모나를 시험접종하였다. 효능의 증명으로서 생존 동물의 수를 측정하였다. 백신 분획의 효력을 입증하기 위해 래빗 현미경 응집 역가를 렙토스피라 하르드조에 대해 측정하였다. 하기 표는 열 처리된 렙토스피라 박테린으로부터 제조된 백신이 효능 기준을 통과하는 항원 반응을 생성시킬 수 있음을 보여준다.
백신 혈청학적 역가를 비교 기준 백신의 역가와 비교함에 의해 에리시펠로트릭스 루시오파티에애를 래빗에서 시험하였다. 그 백신은 3.0의 RP(효력 대비)를 가졌다. PPV를 적혈구 응집 분석으로 시험하였고, 1024 HA/0.05 ml의 HA 역가를 가졌다. 320 HA/0.05 ml의 HA 역가는 백신용으로 허용가능한 값이다.
실시예
4. 백신의 물리화학적 시험
백신을 실시예 2에 기재된 제형에 따라 열 처리된 렙토스피라 박테린 및 기타 성분들로써 제조하였다. 유사한 백신을 실시예 2의 방법에 따라 열 처리되지 않은 렙토스피라 박테린으로부터 제조하였다. 두 백신 제형을 4℃에서 0, 6, 12, 15 및 18 개월 수령(age) 동안 저장하였다. 각각의 백신에 대한 입자 크기 분석을 각 시점에서 레이저 회절계를 사용하여 수행하였다.
아래 나타낸 도표는 수 개월에 걸친 모니터링(0, 6, 12, 15 및 18 개월) 동안 각각의 백신에 대한 입자 크기 분포를 보여준다.
열 처리된 렙토스피라 박테린을 함유하는 새로 제조된 백신의 입자 크기 분석(0 일)
열 처리되지 않은 렙토스피라 박테린으로부터 제조된 백신(상부 그래프)은 에멀젼 붕괴를 나타내는 입도의 증가를 보여준다. 열 처리된 렙토스피라 박테린으로부터 제조된 백신(하부 그래프)은 18 개월의 수령 동안 에멀젼 안정성을 나타내는 입도 보유를 보여준다.
실시예
5.
PPV
적혈구응집 분석(
HA
)
열 처리하지 않은 렙토스피라 박테린 및 열 처리된 렙토스피라 박테린으로부터 제조된, 실시예 2에 기재된 백신 제형(실시예 2의 리스트에서의 백신은 열거된 모든 항원을 함유하였고, 모든 작업에서 동일 백신을 사용하였음)에 대해 초기에 HA 역가 및 용혈 역가를 시험하였다. 다양한 시점에서 HA 역가의 안정성을 측정하였다. 샘플을 pH 11-11.2로 조정하여 수산화 알루미늄 겔로부터 PPV(돼지 파르보바이러스) 바이러스를 추출함에 의해 HA 분석을 수행하였다. 그 후, 샘플을 원심분리시키고, 상등액을 분석을 위해 사용하기 위해 수집하였다. 기니아 피그 적혈구 세포를 96개 웰 플레이트에 첨가하여 응집 지시제로서 사용하였다. 샘플 상등액을 1:5의 희석률(dilution)로 출발하여 2열 건너 2배 희석하였다. 그 플레이트를 5 ± 3℃에서 16 내지 24시간 동안 배양하였다. 적혈구응집 정도는 각 웰에서 0 내지 4로 점수를 매겼다. 2 이상의 점수를 갖는 마지막 희석률로 역가를 기록한다. 열 처리되지 않은 백신의 시험 중에, 백신이 용혈을 일으킴이 관찰되었다. 용혈 역가는, 용혈이 관찰되었던 최고 희석률이었다. 열 처리된 백신은 용혈을 일으키지 않았다.
하기 표는 시간 경과에 따른 평균 HA 역가 및 용혈 역가를 보여준다. CTC는 열 처리된 렙토스피라 박테린을 갖는 백신이다. OPP는 열 처리된 렙토스피라 박테린을 갖지 않는 백신이다.
Claims (6)
- 에멀젼, 사멸 세균의 현탁액을 포함하는 열 처리된 박테린, 및 돼지 아데노바이러스, 돼지 서코바이러스(Circovirus), 돼지 헤르페스 바이러스, 가성광견병(Pseudorabies) 바이러스, 전통적 돼지 콜레라(swine fever) 바이러스, 돼지 유행성 설사 바이러스, 돼지 적혈구 응집 엔세팔로밀레티티스(hemaglutinating encephalomyletitis) 바이러스, 돼지 파르보바이러스, 돼지 호흡 코로나 바이러스, 돼지 생식 및 호흡 바이러스, 돼지 인플루엔자, 전달성 위창자염 바이러스 및 수포성 구내염 바이러스로 이루어진 군 중에서 선택된 1 내지 13 종의 돼지 질병 유발 바이러스를 포함하는 백신으로서, 상기 사멸 세균이 렙토스피라 브라티스라바(Leptospira Bratislava) 종이고,
i) 상기 열 처리된 박테린이 허용되는 항원 활성을 가지며;
ii) 상기 열 처리된 박테린의 리파제 활성이 열 처리 전의 박테린의 리파제 활성의 50% 이하이고;
iii) 상기 에멀젼 백신이 열 처리되지 않은 박테린을 포함하는 에멀젼 백신에 비해 증가된 안정성을 갖는,
백신. - 제1항에 있어서,
레시틴 제제 및 백반계(alum based) 애주번트를 추가로 포함하는, 백신. - 제2항에 있어서,
오일 제제에 레시틴을 추가로 포함하는, 백신. - 제1항에 있어서,
사멸 세균의 현탁액을 포함하는 열 처리된 박테린을 추가로 포함하고, 이 때 사멸 세균이 렙토스피라 카니콜라(Leptospira canicola), 렙토스피라 익테로해모라기애(L. icterohaemorrhagiae), 렙토스피라 그립포티포사(L. grippotyphosa), 렙토스피라 하르드조(L. hardjo), 렙토스피라 포모나(L. pomona) 및 에리시펠로트릭스 루시오파티에애(Erysipelothrix rhusiopathieae)로 이루어지는 군 중에서 선택되는 1 내지 6 종의 세균인, 백신. - 제4항에 있어서,
레시틴 제제 및 백반계 애주번트를 추가로 포함하는, 백신. - 제5항에 있어서,
오일 제제에 레시틴을 추가로 포함하는, 백신.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US1571807P | 2007-12-21 | 2007-12-21 | |
US61/015,718 | 2007-12-21 | ||
PCT/IB2008/003369 WO2009090461A1 (en) | 2007-12-21 | 2008-12-04 | Heat treated bacterins, and emulsion vaccines prepared from such heat treated bacterins |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20100092022A KR20100092022A (ko) | 2010-08-19 |
KR101254848B1 true KR101254848B1 (ko) | 2013-04-15 |
Family
ID=40514058
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020107013538A KR101254848B1 (ko) | 2007-12-21 | 2008-12-04 | 열 처리된 박테린, 및 상기 열 처리된 박테린으로부터 제조된 에멀젼 백신 |
Country Status (21)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20090162397A1 (ko) |
EP (1) | EP2224951B1 (ko) |
JP (2) | JP5890096B2 (ko) |
KR (1) | KR101254848B1 (ko) |
CN (2) | CN106562927A (ko) |
AR (1) | AR070675A1 (ko) |
AU (1) | AU2008348022B2 (ko) |
BR (1) | BRPI0819938B1 (ko) |
CA (1) | CA2710186C (ko) |
CL (1) | CL2008003845A1 (ko) |
CO (1) | CO6290700A2 (ko) |
DK (1) | DK2224951T3 (ko) |
ES (1) | ES2763395T3 (ko) |
LT (1) | LT2224951T (ko) |
NZ (1) | NZ585877A (ko) |
PT (1) | PT2224951T (ko) |
RU (1) | RU2440137C1 (ko) |
TW (1) | TWI419702B (ko) |
UY (1) | UY31557A1 (ko) |
WO (1) | WO2009090461A1 (ko) |
ZA (1) | ZA201005178B (ko) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2224951B1 (en) * | 2007-12-21 | 2019-10-30 | Zoetis Services LLC | Heat treated bacterins, and emulsion vaccines prepared from such heat treated bacterins |
CA2883296A1 (en) * | 2012-08-30 | 2014-03-06 | Merial, Inc. | Hyperbaric device and methods for producing inactivated vaccines and for refolding/solubilizing recombinant proteins |
EP2983703A1 (en) | 2013-03-15 | 2016-02-17 | Zoetis Services LLC | Cross-protection of bovines against b. trehalosi infection by a multi-valent vaccine |
CN105879023B (zh) * | 2016-05-28 | 2020-11-27 | 青岛易邦生物工程有限公司 | 一种猪细小病毒和猪流行性腹泻二联灭活疫苗 |
CN106039304B (zh) * | 2016-05-28 | 2021-02-05 | 青岛易邦生物工程有限公司 | 一种猪细小病毒、猪流行性腹泻、大肠埃希氏菌三联疫苗 |
CN107496913A (zh) * | 2017-09-15 | 2017-12-22 | 天津瑞普生物技术股份有限公司 | 猪丹毒、猪细小病毒、猪流感病毒三联灭活疫苗制备方法 |
CN111658611B (zh) * | 2020-04-13 | 2021-06-01 | 四川大学 | 一种基于微乳的疫苗递送系统及其制备方法和应用 |
CN112941091A (zh) * | 2021-03-17 | 2021-06-11 | 吉林大学 | 一种猪血凝性脑脊髓炎dna疫苗及其制备方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5084269A (en) * | 1986-11-06 | 1992-01-28 | Kullenberg Fred W | Adjuvant for dose treatment with antigens |
US20040081666A1 (en) * | 2002-08-26 | 2004-04-29 | Dominowski Paul Joseph | Cattle reproductive disease vaccines |
Family Cites Families (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE3721169A1 (de) | 1986-06-30 | 1988-01-14 | Lion Corp | Orale zubereitung |
EP1181937A3 (en) * | 1994-08-09 | 2004-02-04 | Cytrx Corporation | Novel vaccine adjuvant and vaccine |
US6905712B2 (en) * | 1999-12-08 | 2005-06-14 | Statens Veterinarmedicinska Anstalt | Vaccine adjuvants comprising ginseng plant extract and added aluminum salt |
AU2002951692A0 (en) * | 2002-09-23 | 2002-10-17 | Vital Biotech (Hong Kong) Limited | Improvements in or relating to vaccines |
US20050089533A1 (en) * | 2003-01-29 | 2005-04-28 | Joseph Frantz | Canine vaccines against Bordetella bronchiseptica |
PT1613346E (pt) * | 2003-04-04 | 2013-01-29 | Pah Usa 15 Llc | Emulsões óleo-em-água microfluidificadas e composições de vacinas |
US7691368B2 (en) * | 2005-04-15 | 2010-04-06 | Merial Limited | Vaccine formulations |
CN101312742B (zh) * | 2005-09-16 | 2012-07-25 | 梅瑞尔有限公司 | 用于冷冻干燥的疫苗的稳定剂 |
EP3320919B1 (en) * | 2005-12-29 | 2020-05-27 | Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. | Multivalent pcv2 immunogenic compositions and methods of producing such compositions |
WO2008032158A2 (en) * | 2006-09-11 | 2008-03-20 | Pfizer Products Inc. | Heat treated bacterins, and emulsion vaccines prepared from such heat treated bacterins |
AU2008219380B2 (en) * | 2007-02-27 | 2014-01-30 | Zoetis Services Llc | Immunogenic compositions and methods for treating and preventing animal infections |
EP2224951B1 (en) * | 2007-12-21 | 2019-10-30 | Zoetis Services LLC | Heat treated bacterins, and emulsion vaccines prepared from such heat treated bacterins |
-
2008
- 2008-12-04 EP EP08870798.9A patent/EP2224951B1/en active Active
- 2008-12-04 DK DK08870798.9T patent/DK2224951T3/da active
- 2008-12-04 RU RU2010125210/15A patent/RU2440137C1/ru active
- 2008-12-04 PT PT88707989T patent/PT2224951T/pt unknown
- 2008-12-04 KR KR1020107013538A patent/KR101254848B1/ko active IP Right Grant
- 2008-12-04 AU AU2008348022A patent/AU2008348022B2/en active Active
- 2008-12-04 ES ES08870798T patent/ES2763395T3/es active Active
- 2008-12-04 JP JP2010538934A patent/JP5890096B2/ja active Active
- 2008-12-04 LT LTEP08870798.9T patent/LT2224951T/lt unknown
- 2008-12-04 CN CN201610981429.2A patent/CN106562927A/zh active Pending
- 2008-12-04 WO PCT/IB2008/003369 patent/WO2009090461A1/en active Application Filing
- 2008-12-04 NZ NZ585877A patent/NZ585877A/en unknown
- 2008-12-04 BR BRPI0819938-8A patent/BRPI0819938B1/pt active IP Right Grant
- 2008-12-04 CN CN2008801217140A patent/CN101903041A/zh active Pending
- 2008-12-04 CA CA2710186A patent/CA2710186C/en active Active
- 2008-12-15 US US12/335,152 patent/US20090162397A1/en not_active Abandoned
- 2008-12-18 AR ARP080105537A patent/AR070675A1/es not_active Application Discontinuation
- 2008-12-19 UY UY31557A patent/UY31557A1/es not_active Application Discontinuation
- 2008-12-19 TW TW097149908A patent/TWI419702B/zh active
- 2008-12-19 CL CL2008003845A patent/CL2008003845A1/es unknown
-
2010
- 2010-05-07 US US12/775,749 patent/US9289482B2/en active Active
- 2010-06-21 CO CO10074461A patent/CO6290700A2/es not_active Application Discontinuation
- 2010-07-20 ZA ZA2010/05178A patent/ZA201005178B/en unknown
-
2014
- 2014-08-12 JP JP2014164086A patent/JP2014237698A/ja active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5084269A (en) * | 1986-11-06 | 1992-01-28 | Kullenberg Fred W | Adjuvant for dose treatment with antigens |
US20040081666A1 (en) * | 2002-08-26 | 2004-04-29 | Dominowski Paul Joseph | Cattle reproductive disease vaccines |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2710186C (en) | 2015-11-03 |
CN101903041A (zh) | 2010-12-01 |
AU2008348022A1 (en) | 2009-07-23 |
BRPI0819938B1 (pt) | 2019-02-26 |
JP2011507827A (ja) | 2011-03-10 |
AU2008348022B2 (en) | 2015-03-05 |
CL2008003845A1 (es) | 2010-09-24 |
ES2763395T3 (es) | 2020-05-28 |
US9289482B2 (en) | 2016-03-22 |
KR20100092022A (ko) | 2010-08-19 |
LT2224951T (lt) | 2020-01-10 |
JP5890096B2 (ja) | 2016-03-22 |
EP2224951A1 (en) | 2010-09-08 |
RU2440137C1 (ru) | 2012-01-20 |
DK2224951T3 (da) | 2020-01-06 |
BRPI0819938A2 (pt) | 2015-05-26 |
AR070675A1 (es) | 2010-04-28 |
WO2009090461A1 (en) | 2009-07-23 |
CO6290700A2 (es) | 2011-06-20 |
ZA201005178B (en) | 2011-03-30 |
EP2224951B1 (en) | 2019-10-30 |
TWI419702B (zh) | 2013-12-21 |
UY31557A1 (es) | 2009-08-03 |
NZ585877A (en) | 2012-06-29 |
PT2224951T (pt) | 2020-01-10 |
TW200940088A (en) | 2009-10-01 |
CA2710186A1 (en) | 2009-07-23 |
US20090162397A1 (en) | 2009-06-25 |
JP2014237698A (ja) | 2014-12-18 |
US20100285057A1 (en) | 2010-11-11 |
CN106562927A (zh) | 2017-04-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101254848B1 (ko) | 열 처리된 박테린, 및 상기 열 처리된 박테린으로부터 제조된 에멀젼 백신 | |
JP5643906B2 (ja) | 熱処理バクテリンおよびそのような熱処理バクテリンから調製された乳剤ワクチン |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A201 | Request for examination | ||
E902 | Notification of reason for refusal | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant | ||
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20160330 Year of fee payment: 4 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20180329 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20190327 Year of fee payment: 7 |