KR101206883B1 - 적정밀도 인식 억제 활성을 가지는 신규 스트렙토마이세스 속 균주 - Google Patents

적정밀도 인식 억제 활성을 가지는 신규 스트렙토마이세스 속 균주 Download PDF

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Abstract

본 발명은 세균 적정밀도 인식(Quorum sensing) 억제 활성을 가지는 신규한 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.) 균주에 관한 것으로, 구체적으로 세균 적정밀도 인식 억제 활성을 가지는 스트렙토마이세스 AN090072 및 스트렙토마이세스 AN090571 균주는 대장균(Escherichia Coli), 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) 및 살모넬라 티피마리움(Salmonella typhimurium)의 병원균에 대한 항균 활성을 나타내지 않으면서도 배추에서 어위니아 카로토보라(Erwinia carotovora)에 의한 무름병 발생을 억제하는 효과를 가지는 것을 확인하였으므로, 다양한 세균성 유기체에 의해 초래되는 감염성 식물병의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.

Description

적정밀도 인식 억제 활성을 가지는 신규 스트렙토마이세스 속 균주{Novel Streptomyces sp. with Quorum Sensing inhibition activity}
본 발명은 적정밀도 인식 억제 활성을 가지는 신규 미생물에 관한 것이다.
세포사이의 신호전달은 일반적으로 환경에 대처하기 위한 반응이며, 세균의 경우 독특한 방법을 취한다. 세균은 환경의 변화에 반응하여 "적정밀도 인식(Quorum Sensing)"이라는 독특한 신호 전달체계를 통해 개체를 유지해 나가는데, 한정된 공간에서 임계농도에 도달할 경우 자신들이 농도를 인지하여 더 이상의 증식을 막는 신호전달 방법으로 전달을 매개하는 물질을 오토인듀서(autoinducer)라하며 주로 아실 호모세린 락톤(acyl homoserine lactones, AHLs) 화합물이다. 아실 호모세린 락톤에는 옥소 헥사노일 호모세린 락톤(N-β-oxo-hexanoyl-L-homoserine lactone), 옥소 옥타노일 호모세린 락톤(N-β-oxo-octanoyl-Lhomoserine lactone), 옥소 데카노일 호모세린 락톤(N-β-oxo-decanoyl-L-homoserine lactone), 헥사노일 호모세린 락톤(N-hexanoyl-L-homoserine lactone), 부타노일 호모세린 락톤(N-butanoyl-homoserine lactone), 옥소 도데카노일 호모세린 락톤(N-β-oxo-dodecanoyl-L-homoserine lactone) 등이 있다.
적정밀도 인식이란 용어가 붙게 된 배경으로, '쿼럼(Quorum)'이란 '정족수'를 뜻하는 단어이다. 즉, 세균의 개체수가 얼마되지 않을 때는 이런 신호 전달이 일어나지 않으나, 개체수가 증가하여 AHLs의 농도가 일정수준 이상이 되면 자신들의 개체밀도를 감지하게 된다. '쿼럼(Quorum)'이란 단어가 쓰인 것은 이런 신호 전달이 개체수 감지를 위한 것이기 때문이다.
따라서 신호 전달 물질들이 일정 농도에 도달하면 조절단백질과 결합하여 특정 유전자의 발현을 촉진 혹은 억제하여 발병뿐 아니라 생체발광, 균막(biofilm)을 형성하여 항생제에 대한 내성을 가지게 되는 현상 등을 초래한다.
적정밀도 인식 전략으로 인해 다양한 발병요소 생산을 조절하여 병원성을 일으키는 대표적 예는 다음과 같다. 섬유성낭포증환자의 호흡기 감염에 대한 원인균인 슈도모나스 에어로지노사(Pseudomonas aeruginosa) 및 버크홀데리아 세파시아(Burkholderia cepacia)와 포유류에 대한 기회적 병원균인 세라티아 리퀴파시엔스(Serratia liquefacience), 어병균인 에어로모나스 히드로필라(Aeromonas hydrophila) 또는 비브리오 안귈라룸(Vibrio anguillarum), 식물병원균인 어위니아 카로토보라(Erwinia carotovora) 또는 아그로박테리움 투메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens) 등을 들 수 있다.
한편 식품, 특히 냉장이나 냉동 중 식품에 존재하는 미생물이 평소엔 병원성을 일으키지 않다가 어떠한 환경변화에 의해 신호 물질을 생성하여 병원성을 일으킬 수 있다. 한편 이러한 시료 중의 신호물질을 조사함으로써 시료 중에 존재하는 세균을 검출하고, 세균의 양을 정량할 수 있는 가능성도 보고되었다. 이러한 식품뿐만 아니라 농작물 및 어류 등을 포함한 다양한 동식물과 인간을 숙주로 하여 병원성을 일으키는 데에도 적정밀도 인식이 관여하는 것으로 알려지고 있다.
이에, 본 발명자들은 2800여 주의 균주 중 적정밀도 인식 억제 활성이 있는 140 균주를 확보한 후, GSS 배지에서 성장이 가능하고 항균활성이 뛰어난 2종의 신규 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.) 균주를 선별하였고, 상기 2종의 스트렙토마이세스 속 균주로부터 배추 무름병에 대한 방제효과를 확인하여 식물병 방제제로서 유용하게 사용할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 적정밀도 인식 억제 활성 및 항균활성을 가지는 신규 균주, 이를 이용한 식물병 방제제 및 이를 이용한 방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 수탁번호 KCTC11637BP 또는 KCTC11638BP로 기탁된 적정밀도 인식 억제 활성을 갖는 신규 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.) 균주를 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 식물병 방제제를 제공한다.
아울러, 본 발명은 상기 균주, 이의 배양액 또는 상기 식물병 방제제를 토양, 식물 또는 식물 종자에 처리하는 단계를 포함하는 식물병 방제 방법을 제공한다.
본 발명의 세균 적정밀도 인식 억제 활성을 가지는 신규 스트렙토마이세스 AN090072 및 스트렙토마이세스 AN090571 균주는 대장균(Escherichia Coli), 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) 및 살모넬라 티피마리움(Salmonella typhimurium)의 병원균에 대한 항균 활성을 나타내지 않으면서도 배추에서 어위니아 카로토보라(Erwinia carotovora)에 의한 무름병 발생을 억제하는 효과를 가지므로, 세균 적정밀도 인식 억제 활성에 의해 다양한 세균성 유기체에 의해 초래되는 감염성 식물병의 치료 또는 예방에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 AN090072 및 AN090571 배양액의 상등액으로 웰-확산 분석(Well-diffusion assay)하였을 때의 보라색 색소(violacein)생산을 저해하는 저지환을 생성한 평판의 사진이다.
도 2는 베넷(Bennett) 배지 상의 AN090072 및 AN090571 사진을 나타낸 도이다.
도 3은 AN090072 및 AN090571를 SEM 현미경으로 관찰한 결과를 나타낸 도이다.
도 4은 AN090072 및 AN090571의 스트렙토마이스 속(Streptomyces sp. ) 서열 유사성 분석을 수행한 결과를 필로제네틱 트리(Phylogenetic tree)로 나타낸 것이다.
도 5는 AN090072 및 AN090571의 배양액을 어위니아 카로토보라의 배양액에 첨가한 후 배추 표면에 주입하고서 무름병 억제여부를 확인한 사진이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 적정밀도 인식 억제 활성을 가지고 수탁번호 KCTC11637BP 또는 KCTC11638BP로 기탁된 신규 스트렙토마이세스 속 균주를 제공한다.
본 발명의 구체적 실시예에서, 전남 보성 차밭 토양에서 채취한 토양에서 적정밀도 인식 억제 효과를 가지는 2800 여주의 균주를 선별한 후, 이 중 GSS 배지에서 성장하는 32 종의 균주 중 세균 적정밀도 인식 억제 활성만을 가진 균주를 선발하기 위해 대장균(Escherichia Coli), 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) 및 살모넬라 티피머리움(Salmonella typhimurium)에 대한 항균활성이 없는 균주 5종을 선별하였고 최종적으로 AN090072 및 AN090571 균주를 선별한 후, 형태학적, 생리학적, 생화학적 특성 및 16S rRNA 염기서열을 분석하여 동정을 실시한 결과, 신규한 스트렙토마이세스 속 균주임을 알 수 있었고, 각각 스트렙토마이세스 AN090072(Streptomyces sp. AN090072) 및 스트렙토마이세스 AN090571(Streptomyces sp. AN090571)로 명명하였다. 또한, 이 균주를 2010년 2월 8일에 한국생명공학연구원 유전자은행에 기탁하였으며, 수탁번호는 각각 KCTC11637BP 및 KCTC11638BP로 부여받았다.
또한, 본 발명은 상기 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 식물병 방제제를 제공한다.
상기 식물병 방제제는 농학적 허용 담체를 추가적으로 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 스트렙토마이세스 AN090072 또는 스트렙토마이세스 AN090571 균주는 배추에서 어위니아 카로토보라(Erwinia carotovora)에 의한 무름병 발생을 억제하는 효과를 가지는 것을 확인하였으므로, 다양한 세균성 유기체에 의해 초래되는 감염성 식물병의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다.
본 발명의 신규 스트렙토마이세스 속 균주 및 이의 배양상등액은 세포 적정밀도 인식 저해제로서 작용하고, 식품 및 농작물, 어류 등을 포함한 다양한 동식물과 인간 포함한 숙주로부터 세균과 같은 미생물의 감염에 의해 초래되는 감염성 질병의 항감염제 또는 식물병 방제제로 사용될 수 있다.
본 발명의 신규 스트렙토마이세스 속 균주 및 이의 배양상등액은 단독으로 증류수에 용해시켜 사용하거나, 다른 부형제와 함께 제제화하여 식물병 방제제로 사용할 수 있다. 예를 들면, 상기 유효성분과 함께 통상의 보조제, 즉 벤토나이트(bentonite), 퍼라이트(perlite), 제올라이트(zeolite), 활석(talc)등과 함께 입제로 또는 소듐 도데실 설페이트(SDS; sodium dodecyl sulfate), 소듐 리그닌 설포네이트(SLS; sodium lignin sulfonate) 및 카올린(kaolin) 등과 함께 수화제로 제제화 될 수 있다
또한, 본 발명의 식물병 방제제는 추가로 통상의 다른 합성농약 또는 생물농약과 혼합하거나, 비료에 혼합하여 사용할 수도 있다.
본 발명에 따른 식물병 방제제의 처리량은 기존의 농약 처리량을 크게 벗어나지 않는 범위로서, 예를 들어, 억제제 액이 식물체 표면에 골고루 젖어 흘러내릴 때까지 살포한다. 또한, 식물의 종자로부터 성숙기에 이르기까지 어느 생장단계에 처리하여도 효과적이며, 어느 처리시기에서도 100 mM 이하의 농도에서는 식물의 발아나 생장에 영향을 주지 않고, 처리 10일 후까지 육안으로 보이는 약해도 없는 것으로 확인되었다. 본 발명의 식물병 방제제는 분무, 관주 또는 침지 등의 통상의 약제처리방법에 의해 처리될 수 있다.
본 발명에서 식물병 방제제의 사용량은 처리되는 식물의 종류, 식물병의 종류 및 상태, 처리시기 및 방법 등에 따라 적절히 조정될 수 있으나, 통상 바람직하게는 아실 호모세린 락톤(acyl homoserine lactone)의 경쟁적 저해 활성을 가지는 유효 성분의 함량 기준으로 2～100 mM의 농도범위 내이다.
본 발명의 식물병 방제제는 다양한 세균성 유기체에 의해 초래되는 감염성 식물병의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다. 채소류 무름병의 어위니아 카로토보라(Erwinia carotovora), 인삼 근부병의 어위니아 아라리아보라(Erwinia araliavora) 참깨 잘록병의 슈도모나스 세파시아(Pseudomonas cepacia), 고추와 토마토 풋마름병의 랄스토니아 솔라나세아룸(Ralstonia solanacearum), 감귤나무 궤양병의 크산토모나스 시트리(Xanthomonas citri),벼 흰빛잎마름병의 크산토모나스 오리제(Xanthomonas oryzae), 채소류 검은빛썩음병의 크산토모나스 캄페스트리스(Xanthomonas campestris) 또는 과수 근두암 종병의 아그로박테리움 투메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens) 감염 등을 비롯한 그람 음성 세균에 의한 감염을 들 수 있다.
아울러, 본 발명은 상기 균주, 이의 배양액 또는 상기 식물병 방제제를 토양, 식물 또는 식물 종자에 처리하는 단계를 포함하는 식물병 방제 방법을 제공한다.
상기 균주, 이의 배양액 또는 상기 식물병 방제제는 액체 상태로 식물에 관주, 작물의 종자에 침지 또는 분무하거나 종자에 코팅하여 이용하는 것이 바람직하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
활성 균주의 선별
전남 보성 차밭 토양에서 채취한 토양을 1.5% LB 아가 플레이트에 도말하였다. 도말한 플레이트를 28℃에서 48시간 동안 배양한 후, 적정밀도 인식(Quorum Sensing) 억제 활성이 있는 2800 여 주를 선별하였다.
상기에서 선별된 균주들을 각각 10 ㎖ 1.5% G.S.S. 배지[D-glucose 20g, Soluble starch 10g, Soybean meal 25g, Beef extract 1g, Yeast extract 4g, Sodium chloride 2g, Calcium carbonate 2g, Potassium phosphate 0.025g, D.W. 1L (pH 7.2) 포함]에 접종하여 28℃에서 7일 동안 140 rpm으로 교반하면서 배양한 후, 각 배양액에서 공지의 방법인 웰 확산 분석(well diffusion assay)을 수행하여 32개 균주를 선별하여 표 1에 나타내었다(대한민국 등록특허 제 10-0724770호).
균주번호 균주 성장 여부
E. coli B. subtilis S. typhimurium
AN0900072 x x x
AN0900126 o o o
AN0900155 o o o
AN0900240 o o o
AN0900314 o o o
AN0900372 o x o
AN0900445 o o o
AN0900522 o o o
AN0900531 o o o
AN0900538 x x x
AN0900571 x x x
AN0900633 o o x
AN0900642 o o x
AN0900807 o o o
AN0900813 o o x
AN0900898 x x x
AN0900939 o o o
AN0800149 x x x
AN0800422 o x x
AN0800425 o x x
AN0800481 o x o
AN0800638 o o x
AN0800828 o o x
AN0801160 o o x
AN0801183 o o x
AN0801628 x o o
AN0801646 x o o
AN0801731 o o x
AN0801760 o o x
AN0801777 o o x
AN0801781 o o x
항균활성 측정
상기 실시예 1에서 선별된 32종의 균주 중에서 세균 적정밀도 인식 억제 활성만을 가진 균주를 선발하기 위해 대장균(Escherichia Coli) KCTC 1924, 바실러스 섭틸리스(Bacillus subtilis) KCTC 1021 및 살모넬라 티피머리움(Salmonella typhimurium) KCTC 1926에 대한 항균활성이 없는 균주를 공지의 방법을 이용하여 선별하였다(대한민국 등록특허 제 10-0724770호).
그 결과, AN090072, AN090538, AN090571, AN090898 및 AN080149가 대장균, 바실러스 섭틸리스 및 살모넬라 티피머리움에 대한 항균 활성이 없는 세균 적정밀도 인식 억제 활성을 가진 균주임을 확인하였다.
상기에서 선별한 5종의 균주에서 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 웰 확산 분석을 수행하여 보라색 색소(violacein) 생산 저해 활성을 확인하여 도 1에 나타내었다. 이때, 키타사토스포라 속 AR030054(Kitasatospora sp. AR030054; AR54)를 양성 대조군으로, 물을 음성 대조군으로 사용하였다.
항균활성 균주의 동정
<3-1> 형태학적, 생리학적 및 생화학적 동정
상기 실시예 2에서 선별된 5 종의 균주 중 AN090072 및 AN090571 균주를 최종 선별하여 버어지스 매뉴얼(Bergy's Manual of Determinative Bacteriology)과 의약 박테리아의 동정 매뉴얼(Manual for the Identification of Medical Bacteria)을 참고하여 균주의 형태학적, 생리학적 및 생화학적 특성을 조사한 후 균주 동정을 실시하였다. 베넷(Bennett) 배지 상에서 회색을 나타내고 있는 AN090072 및 AN090571 사진(도 2) 및 SEM(scanning electron microscope; 주사전자 현미경)으로 확인한 사진(도 3)을 나타내었다.
AN090072 및 AN090571 균주의 표현형 파악을 위해 ISP(International Streptomyces Project) 배지 2 내지 5를 이용하여 배양한 결과를 표 2 및 표 3에 각각 나타내었다.
AN090072
배지 기균사 기질균사 성장율 수용성 색소
ISP2 gray gray abundant none
ISP3 khaki khaki abundant brown
ISP4 gray redish brown abundant yellow
ISP5 brownish white brownish white abundant none
ISP6 yellow yellow moderate yellow
ISP7 white brown abundant redish brown
ISP2: Yeast extract-malt extract agar
ISP3: Otmeal agar
ISP4: Inorganic salt-starch agar
ISP5: Glycerol-asparagine agar
ISP6: Peptone yeast extract agar
ISP7: Tyrosine agar
AN090571
배지 기균사 기질균사 성장율 수용성 색소
ISP2 gray gray abundant none
ISP3 gray gray moderate none
ISP4 poor poor poor none
ISP5 poor poor poor none
ISP6 white yellow abundant none
ISP7 poor poor poor none
ISP2: Yeast extract-malt extract agar
ISP3: Otmeal agar
ISP4: Inorganic salt-starch agar
ISP5: Glycerol-asparagine agar
ISP6: Peptone yeast extract agar
ISP7: Tyrosine agar
또한, AN090072 균주는 글루코오스, 아라비노스, 수크로오스, 자일로오스, 인노시톨, 만니톨, 프룩토오스, 람노오스, 라피노오스 및 셀룰로오스 모두에 대하여 자화성(資化性)을 가졌고, AN090571 균주는 글루코오스 및 람노오스에 대해서는 자화성이 뛰어났으나, 아라비노스, 수크로오스, 자일로오스, 인노시톨, 만니톨, 프룩토오스, 라피노오스 및 셀룰로오스에 대해서는 다소 낮은 자화성을 가지고 있었다(표 4).
탄소원 AN090072 AN090571
Glucose + +
Arabinose + ±
Sucrose + ±
Xylose + ±
Inositol + ±
Mannitol + ±
Fructose + ±
Rhamnose + +
Raffinose + ±
Cellulose + ±
<3-2> 분자유전학적 동정
AN090072 및 AN090571 균주의 16S rRNA 서열 분석은 통상의 방법으로 실시하였다. 프라이머는 바이오니아(Bioneer)사의 27F와 1492R 프라이머를 10 pmol 농도로 사용하였고, 변성 94 ℃, 1 분, 어닐링 54 ℃, 45 분, 신장 72 ℃, 3 분 조건으로 30 사이클로 PCR을 실시한 후 서열분석기(Applied Biosystems model 310 automatic DNA sequencer)로 서열을 분석하였다.
AN090072 균주는 서열목록 1의 16S rRNA 서열을 갖는 것으로 NCBI(National Center for Biotechnology Information) 블라스트한 결과 Streptomyces aureofaciens NBRC 12843T 표준균주와 99.50%의 시퀀스 유사도를 나타내었다. 또한, AN090571 균주는 서열목록 2의 16S rRNA 서열을 갖는 것으로 NCBI 블라스트한 결과 Streptomyces misionensis NBRC 13063T 표준균주와 99.01%의 시퀀스 유사도를 나타내었다.
또한, 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.) 서열 유사성 분석을 수행한 결과를 도 4에 필로제네틱 트리(Phylogenetic tree)상에 나타내었다.
상기 실시예 3-1 및 실시예 3-2의 결과를 통해 AN090072 및 AN090571 균주를 신규한 스트렙토마이세스 속 균주임을 알 수 있었고, 각각 스트렙토마이세스 AN090072(Streptomyces sp. AN090072) 및 스트렙토마이세스 AN090571(Streptomyces sp. AN090571)로 명명하였다. 또한, 이 균주를 2010년 2월 8일에 한국생명공학연구원 유전자은행에 기탁하였으며, 수탁번호는 각각 KCTC11637BP 및 KCTC11638BP로 부여받았다.
식물병 억제능 측정
상기 실시예 3에서 최종선별된 AN090072 및 AN090571 균주의 식물병 억제능을 측정하기 위하여 하기 실험을 수행하였다. 식물 병원성 균주로는 오토인듀서(autoinducer)로 인해 병원성이 나타난다고 알려져 있는 어위니아 카로토보라(Erwinia carotovora)를 사용하였으며, 적용 대상 작물로는 배추를 이용하였다. 포트에서 재배한 배추[노랑만점, 신젠타종묘(주)]의 줄기에 상처를 내어 실온에서 방치한 후, 어위니아 카로토보라 배양액을 10배 희석한 현탁액 및 각 균주의 배양상등액의 원액 또는 10배 희석액, 어위니아 카로토보라 배양액을 100배 희석한 현탁액 및 각 균주의 배양상등액의 10배 희석액을 상처에 200 ㎕씩 접종한 후 2~3일 동안 변화를 관찰하였다. 이때, 양성 대조군으로 AR030054 균주를, 음성 대조군으로 각 균주의 배양 상등액 200 ㎕를 사용하였다. 병의 발생은 육안으로 관찰하였으며, 2일이 경과한 후에 문드러진 형태의 무름병 증세가 나타나고 짙은 갈색을 띠면 배추에 병이 발생한 것으로 판단하였다.
그 결과, 도 5에서 나타난 바와 같이 AN090072 및 AN090571 균주의 배양액 원액에 10배 희석된 병원균을 접종한 경우에서는 무름병 발생을 억제하였고, 각 균주의 배양액 10배 희석액에 병원균 10배 희석액을 접종한 경우에서는 배양액 원액을 처리한 것 보다 다소 감소된 무름병 억제능이 관찰되었으나, 병원균 100배 희석액을 처리한 경우에서는 증가된 무름병 억제능이 관찰되었다. AN090072 및 AN090571 균주는 양성 대조군으로 사용한 AR030054 균주보다 우수한 무름병 억제 효과를 가지는 것을 확인하였다.
한국생명공학연구원 KCTC11637BP 20100208 한국생명공학연구원 KCTC11638BP 20100208
서열목록 전자파일 첨부

Claims (10)

  1. 적정밀도 인식 억제 활성을 갖는 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.) ANO90072 균주 KCTC 11637BP 또는 ANO90571 균주 KCTC11638BP.
  2. 제 1항에 있어서, 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.) ANO90072 균주 KCTC 11637BP는 서열번호 1로 기재되는 16S rRNA 염기서열을 가지고, 스트렙토마이세스 속(Streptomyces sp.) ANO90571 균주 KCTC11638BP는 서열번호 2로 기재되는 16S rRNA 염기서열을 가지는 것을 특징으로 하는 균주.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 균주는 병원균에 대하여 적정밀도 인식 억제 활성에 의한 항균효과를 갖는 것을 특징으로 하는 균주.
  4. 제 3항에 있어서, 상기 균주는 적정밀도 인식 억제 활성에 의해 세균성 병원균에 대하여 항균활성을 가지는 것을 특징으로 하는 균주.
  5. 제 1항에 있어서, 상기 균주는 전염성 식물병에 대한 방제 효과를 가지는 것을 특징으로 하는 균주.
  6. 제 5항에 있어서, 상기 식물병은 무름병인 것을 특징으로 하는 균주.
  7. 제 1항의 균주 또는 이의 배양액을 유효성분으로 포함하는 어위니아 카로토보라(Erwinia cartovora)에 의한 무름병 치료제.
  8. 제 7항에 있어서, 농학적 허용 담체를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 어위니아 카로토보라(Erwinia cartovora)에 의한 무름병 치료제.
  9. 제 1항의 균주, 이의 배양액 또는 제 7항의 치료제를 토양, 식물 또는 식물 종자에 처리하는 단계를 포함하는 어위니아 카로토보라(Erwinia cartovora)에 의한 무름병 치료 방법.
  10. 제 9항에 있어서, 액체 상태로 식물에 관주, 작물의 종자에 침지 또는 분무하거나 종자에 코팅하여 이용하는 것을 특징으로 하는 어위니아 카로토보라(Erwinia cartovora)에 의한 무름병 치료 방법.
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