KR101083358B1 - 당뇨 예방 및 개선용 조성물, 요구르트 및 두부 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 당뇨 예방 및 개선용 조성물, 요구르트 및 두부에 관한 것으로, 구체적으로는 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 해송이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물, 상기 조성물을 유효성분으로 포함하는 요구르트 및 두부에 관한 것이다.
상기 조성물, 요구르트 및 두부는 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 활성을 억제하여 급격한 혈당 상승을 막아 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있으며, 천연 유래 물질을 포함하므로 장기간 사용하여도 부작용이 없으며 건강기능식품으로 제조가능하므로 일상 생활에서 간편하게 섭취할 수 있다.
해송이버섯, 당뇨, 요구르트, 두부
Description
본 발명은 당뇨 예방 및 개선용 조성물, 요구르트 및 두부에 관한 것으로, 구체적으로는 알파-아밀라제(α-amylase)와 글루코시다제(glucosidase)의 활성을 저해하는 해송이버섯 추출물을 포함하여 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있고, 천연 식물에서 유래되어 장기간 섭취하여도 부작용이 적으며, 건강기능식품등으로 제조하여 일상 생활에서 간편하게 섭취가 가능한 암 예방 또는 개선용 조성물, 요구르트 및 두부에 관한 것이다.
당뇨병은 다양한 원인에 의하여 인슐린이 정상적으로 작동되지 않아, 혈중의 포도당 농도가 비정상적으로 상승되고 이로써 여러가지 합병증을 일으키게 되는 만성 대사 질병이다. 그 유발 인자로는 바이러스 감염, 비만, 운동부족, 스트레스, 식사 및 약물등이 알려져 있다. 당뇨병은 탄수화물 대사의 조절을 포함한 여러 가지 세포내외의 환경에서 대사성 이상을 초래하고, 이들 이상은 시각계, 신경계, 비 뇨계, 맥관계등과 같은 여러 장기에서 병변을 일으킨다. 당뇨병은 주로 2가지 형태로 구분할 수 있는데 인슐린 의존형(제1형) 당뇨병은 환경적 요인으로 유전적 소인이 활성화되어 인슐린을 생산하는 베타세포에 자기면역반응을 일으켜 유발된다고 알려져 있다. 인슐린 비의존형 당뇨병(제2형)은 그 병인이 명확하지는 않으나 인슐린 저항성의 증가가 중요한 원인으로 알려져 있다.
당뇨병 치료제로는 인슐린이 가장 이상적이고 효능적이나 그 지속시간이 짧고 경구적으로는 작용을 나타내지 못하므로 주사제로 사용하여야 하는 단점이 있다. 현재 사용되고 있는 경구용 혈당 강하제로는 설폰요산계 및 비구아니드계 약물이 있다. 설폰요산계 약물은 췌장의 베타세포에서 만들어진 인슐린의 분비를 촉진시켜 혈당 강하 작용을 나타내나, 간독성 및 저혈당을 야기한다. 또한, 비구아니드계 약물은 오심, 식욕부진, 설사등의 부작용을 나타낸다.
당뇨병은 치료하기 어려운 질병으로 약물치료와 함께 식이요법이 절대적으로 필요하다. 또한, 기존의 인슐린이나 경구 혈당 강하제의 투여로는 근원적 치료에 한계가 있고 경제적 부담과 더불어 부작용의 위험도 수반하고 있어 근래에와서는 천연식물의 혈당 강화 효과에 대한 관심이 증대되고 이 분야에 대한 많은 연구가 수행되고 있다. 이 등(Lee M. Y. 등(1988), J. Korean Soc. Food Nutr. 17, 57-61)의 실험에서도 두릅나무 추출물이 혈당 강하 효과를 보였으며, 오미자의 에테르-메탄올 추출물이 알록산(alloxan)으로 당뇨병이 유발된 토끼에서 강력한 혈당 강하 작용을 나타낸다는 것이 확인되었다(Sheo H. J. 등(1987), J. Korean Soc. Food Nutr. 16, 262-267). 또한, 닭의 장풀(Commelina communis L.)과 참마( Dioscorea japonica Thunb)가 스트렙토조토신(streptozotocin, STZ) 유발 당뇨 흰쥐에서 혈당 강하 효과가 있음이 보고된 바 있다(Lim S. J. 및 Kim M. W.(1992), Korean J. Nutr. 25, 511-517).
본 발명의 목적은 알파-아밀라제(α-amylase)와 글루코시다제(glucosidase)의 활성을 저해하는 해송이버섯 추출물을 포함하여 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있고, 천연 식물에서 유래되어 장기간 섭취하여도 부작용이 적으며, 건강기능식품등으로 제조하여 일상 생활에서 간편하게 섭취가 가능한 암 예방 또는 개선용 조성물, 요구르트 및 두부를 제공하는 것이다.
상기의 목적을 달성하고자 본 발명은,
물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 해송이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물을 제공한다.
상기 해송이버섯 추출물은 50 내지 100℃ 에서 5 내지 20 시간동안 해송이버섯에 대하여 1:30 내지 1:60 의 추출용매비(w/v)로 추출하여 얻은 것일 수 있다.
상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 저분자 물질을 제거한 분획물일 수 있다.
상기 저분자 물질의 분자량은 20 kDa 미만일 수 있다.
상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 저분자 물질을 제거하고 중성다당체를 분리한 분획물일 수 있다.
상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 저분자 물질을 제거하고 산성다당체를 분리한 분획물일 수 있다.
상기 해송이버섯 추출물은 총 조성물에 대하여 1 내지 30 중량부로 포함될 수 있다.
본 발명의 다른 목적을 달성하고자 본 발명은,
상기 본 발명의 해송이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물을 포함하는 당뇨 예방 및 개선용 요구르트를 제공한다.
상기 조성물은 요구르트에 대하여 0.1 내지 5 중량부로 포함될 수 있다.
본 발명의 또 다른 목적을 달성하고자 본 발명은,
상기 본 발명의 해송이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물 또는 해송이버섯을 포함하는 당뇨 예방 및 개선용 두부를 제공한다.
상기 조성물 또는 해송이버섯은 두부에 대하여 1 내지 10 중량부로 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물은 베타-글루칸, 폴리페놀등의 함량이 높아 알파-아밀라제와 글루코시다제의 활성을 저해하여 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있다. 또한, 천연 식물에서 유래되어 장기간 섭취하여도 부작용이 적다.
본 발명의 조성물은 음료등 건강기능식품으로 다양하게 제형화가 가능하며, 일상생활에서 손쉽게 섭취할 수 있다.
본 발명의 요구르트는 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있으며, 유산균이 풍부하고 기존의 요구르트와 대비하여 맛도 나빠지지 않아 용이하게 섭취가능하다.
본 발명의 두부는 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있으며, 일반적인 두부보다 기호도가 높아 맛이 좋으므로 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 좋은 식품을 일상 생활에서 용이하게 섭취할 수 있는 장점이 있다.
또한, 본 발명의 요구르트 또는 두부는 급격한 혈당 상승을 유발하지 않고 영양적으로도 균형을 이루어 당뇨환자가 지속적으로 섭취하기에도 적당하다.
이하, 당업자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 당뇨 예방 및 개선용 조성물은 해송이버섯 추출물을 유효성분으로 포함한다. 알파-아밀라제는 거대한 탄수화물을 더욱 작은 단위인 올리고당류 및 이당류로 분해하고, 글루코시다제는 이당류인 말토스 및 수크로스를 그의 각 단당류 단위로 분해하는 효소이다. 상기 해송이버섯 추출물은 알파-아밀라제 및 글리코시다제의 활성을 억제하여 혈당의 상승을 억제하여 당뇨의 예방 및 개선에 효과를 나타낸다. 또한, 상기 해송이버섯 추출물은 식물 추출물로 인체에 무해하며 장기간 사용하여도 부작용이 적다.
해송이버섯은 만가닥버섯(Lyophyllum ulmarium 또는 Hypsizygus ulmarium)의 일종으로 담자균류의 송이과의 느티나무버섯속에 속한다. 자실체는 기둥 모양을 하고 있으며, 완전히 퍼지지 않은 갓은 점 혹은 물결무늬를 띄고 갓의 색깔은 어두운 회색에서 회갈색으로 변하며 완전히 성숙하였을 때 연갈색을 나타낸다. 소나무에 붙어서 자라는 종으로 강원도 영동권에서만 재배되고 있다. 특히 송이, 느타리 및 표고버섯에 비해 칼슘, 칼륨, 마그네슘 그리고 인을 비롯한 무기질 성분이 풍부하고 단백질의 경우에도 1.5~2.5 배 이상 많이 함유하고 있다.
상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 분획물, 저분자 물질을 제거한 분획물, 중성다당체 분획물 또는 산성다당체 분획물일 수 있다. 상기 해송이버섯 추출물을 얻는 과정을 도 1 에 간략 하게 도시하였다.
상기 해송이버섯을 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 분획물에서, 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 이소프로판올과 같은 저급 알코올 또는 이들의 혼합물이 사용될 수 있으며, 인체에 섭취되므로 안전성을 위해 물 또는 에탄올로 추출하는 것이 가장 바람직하다.
상기 저분자 물질을 제거한 분획물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 저분자 물질을 제거한 분획물이다. 상기 저분자 물질은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하고 이를 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물에서 침전시킨 후 투석에 의해 제거될 수 있다. 보다 바람직하게는, 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출한 후 농축하여 얻은 농축액을 에탄올에 침전시킨 후 투석하여 얻을 수 있다.
상기 저분자 물질의 분자량은 20 kDa 미만일 수 있다. 따라서, 상기 저분자 물질을 제거한 분획물의 분자량이 20kDa 이상이 되어 고분자 다당체의 함량이 많아지고 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 활성을 억제하는 효과가 더 우수하다.
상기 중성다당체 분획물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 저분자 물질을 제거하고 중성다당체를 분리한 분획물이다. 상기 중성다당체 분획물은 암의 예방 및 개선에 우수한 효과를 나타낸다. 상기 중성다당체 분획물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 저분자 물질을 제거한 후, 이온교환 크로마토그래피에 의해 분리될 수 있다. 보다 구체적으로, 저분자 물질을 제거한 후, 이온교환 크로마토그래피를 행하고 증류수에 녹여 얻을 수 있다. 상기 중성다당체는 단백질과 결합되어진 단백다당체일 수 있다.
상기 산성다당체 분획물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 저분자 물질을 제거하고 산성다당체를 분리한 분획물일 수 있다. 일반적으로 산성다당체는 다당류에 갈락투론산(galacturonic acid), 글루쿠론산(glucuronic acid) 및 만뉴론산(mannuronic acid)이 결합된 다당체이다. 상기 산성다당체는 단백질과 결합되어진 단백다당체일 수 있다. 상기 산성다당체 분획물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 저분자 물질을 제거한 후 이온교환 크로마토그래피에 의해 분리될 수 있다. 보다 구체적으로, 저분자 물질 제거후 이온교환 크로마토그래피를 행하고, NaCl용액에 용해시켜 얻을 수 있다.
상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 50 내지 100℃ 에서 5 내지 20 시간동안 해송이버섯에 대하여 1:30 내지 1:60 의 추출용매비(w/v)로 추출하여 얻은 것일 수 있다. 바람직하게는 70 내지 80℃ 에서 8 내지 15 시간동안 해송이버섯에 대하여 1:50 내지 1:60 의 추출용매비로 추출하여 얻을 수 있다. 상기 온도, 시간 및 추출용매비 범위로 추출한 해송이버섯 추출물은 베타-글루칸의 함량, 총 폴리페놀 함량 및 추출 수율이 높을 뿐만 아니라, 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 활성을 억제하여 당뇨의 예방 및 개선에 우수한 효과를 나타낸다. 상기 추출용매는 당업계에 공지된 것이 제한없이 사용될 수 있으나, 인체에의 안전성을 고려하여 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물을 사용하는 것이 바람직하다. 상기 해송이버섯은 깨끗이 세 척하고 건조한 후 분쇄하여 분말형태인 것을 사용하거나, 깨끗이 세척한 해송이버섯 자체를 사용할 수 있다.
상기 해송이버섯 추출물은 총 조성물 100 중량부에 대하여 1 내지 30 중량부로 포함될 수 있다. 1 내지 30 중량부로 포함되는 경우 알파-아밀라제 및 글루코시다제 활성 억제 효과가 우수하며, 함량의 증가에 따라 당뇨 예방 및 개선 효과도 증가하는 경향을 나타내고, 장기간 섭취시에도 인체에 부작용이 나타나지 않는다.
상기 해송이버섯 추출물은 추출후 여과하여 통상적인 방법으로 동결건조하거나 분무건조하여 분말형태로 사용할 수 있다.
상기 당뇨 예방 및 개선용 조성물은 각종 식품, 구체적으로는 건강기능식품으로 제조될 수 있다. 즉, 본 발명의 해송이버섯 추출물은 각종 음식, 음료, 곡류, 껌, 차, 비타민 복합제 및 엑기스 등과 같은 기호성 식품이나 건강 보조 식품류등에 첨가되어 통상적으로 알려진 방법에 따라 각종 식품을 제조할 수 있다. 또한, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸등의 형태로 제형화하여 사용할 수도 있다. 이외에도 일반적인 제형으로 제형화될 수 있으며, 식품에 사용되는 통상적인 첨가제등의 성분을 당업자가 적의하게 선택하여 배합할 수 있다.
본 발명은 상기 해송이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물을 포함하는 당뇨 예방 및 개선용 요구르트를 제공한다. 본 발명의 요구르트는 해송이버섯 추출물을 포함하여 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있으며, 쓴 맛이 있는 해송이버섯을 용이하고 간편하게 섭취할 수 있게 한다.
상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 분획물, 저분자 물질을 제거한 분획물, 중성다당체 분획물 또는 산성다당체 분획물일 수 있다. 이들의 제조 방법은 상기에서 기재한 바와 동일하므로 여기서는 설명을 생략한다. 상기 해송이버섯 추출물외에 해송이버섯을 세척하고 통상적인 방법으로 건조, 분쇄하여 분말화한 해송이버섯 분말을 사용할 수 있다.
상기 조성물은 요구르트에 대하여 0.1 내지 5 중량부로 포함될 수 있다. 상기 범위내에서 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 활성을 억제하는 효과가 우수하였으며, 버섯의 쓴 맛에도 불구하고 기호도가 좋아 용이하고 간편하게 섭취할 수 있다.
상기 요구르트에는 해송이버섯 추출물외에 요구르트에 통상적으로 사용되는 성분을 본 발명의 목적을 해치지 않는 범위내에서 당업자가 임의로 선택하여 첨가할 수 있다.
상기 요구르트는 당업계에 공지된 통상의 방법으로 제조될 수 있으며, 우유에 유산균 균주 또는 유산균 균주를 우유에 접종하여 제조한 스타터 배양액을 혼합하고 발효하여 제조할 수 있다. 상기 유산균 균주는 Lactobacillus bulgaricus, Streptococcus Thermophilus 또는 이들을 혼합한 것을 사용할 수 있다. 본 발명의 해송이버섯 추출물은 멸균한 우유에 상기 유산균 균주 또는 스타터 배양액을 첨가하는 단계에서 함께 첨가될 수 있으며, 액체 또는 분말형태로 첨가될 수 있다.
본 발명은 해송이버섯 또는 상기 해송이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물을 포함하는 당뇨 예방 및 개선용 두부를 제공한다. 본 발명의 두부는 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 활성을 억제하는 효과가 있어 당뇨의 예방 및 개선을 위한 건강기능식품으로 이용될 수 있고, 부작용이 없어 장기간 섭취가 가능하다. 또한, 해송이버섯이 첨가되었음에도 두부의 물성이 감소되지 않으며 기호도도 좋아 당뇨병의 예방에 효과가 있는 해송이버섯 또는 이의 추출물을 간편하고 용이하게 섭취할 수 있게 한다. 단백질등이 풍부하여 영양적으로도 균형을 이루므로 당뇨 환자가 장기간 섭취하기에 적합하다.
상기 해송이버섯은 분말형태로 첨가될 수 있다. 상기 해송이버섯 분말은 해송이버섯을 세척하고 손질한 후 열풍건조, 냉풍건조 또는 동결건조하여 얻은 것일 수 있다. 상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 분획물, 이에서 저분자 물질을 제거한 분획물, 중성다당체 분획물 또는 산성다당체 분획물일 수 있으며, 이들의 제조 방법은 상기에서 기재한 바와 같으므로 여기서는 설명을 생략한다. 상기 해송이버섯 추출물은 추출후 분무건조 또는 동결건조하여 분말형태로 제조한 것을 사용할 수 있다.
상기 해송이버섯 또는 상기 조성물은 두부에 대하여 1 내지 10 중량부로 포함될 수 있다. 상기 범위내에서 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 활성을 억제하여 당뇨의 예방 및 개선 효과가 우수하며, 두부의 경도, 부서짐성, 검성(gumminess)등이 두부의 물성을 저하시키기 않고, 기호도도 좋아 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있는 해송이버섯을 간편하고 용이하게 섭취할 수 있다.
상기 두부는 당업계에 공지된 통상의 방법으로 제조될 수 있다. 구체적으로는 원료인 콩을 불려 분쇄하는 단계; 여과 단계; 가열 단계; 및 응고 단계를 거쳐 제조할 수 있다. 상기 해송이버섯은 상기 여과 단계 후 가열 단계 전에 첨가될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 이는 본 발명의 설명을 위한 것일 뿐, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것은 아니다.
<실시예 1> 해송이버섯의 추출조건 최적화
1-1. 추출용매로 물을 사용하고, 온도, 시간을 달리하여 베타-글루칸의 함량이 높아 암의 예방 및 개선 효과가 우수한 해송이버섯 추출 조건을 규명하였다. 추출 조건의 설정은 중심합성계획법을 이용하였으며 추출 온도(X1), 추출 시간(X2), 추출 용매비(X3) 를 독립변수로(표 1), 추출 수율(Y1), 총 폴리페놀 함량(Y2), 베타-글루칸 함량(Y3)을 종속변수로 하였다.
해송이버섯을 깨끗이 세척하고 건조한 후 분쇄하여 분말화한다. 이렇게 제조된 해송이버섯 분말을 각각의 독립변수에 대하여 추출 용매로 물을 사용하여 추출하였고 이에 대한 종속변수의 값은 하기 표 2 에 나타내었다.
1-2. 실험적합도 측정
통계프로그램(Version 14, Minitab Inc., USA)을 이용하여 다음과 같은 이차방정식이 확립되었다.
Y 는 종속변수이며, α0i은 상수, α1i, α2i, α3i, α4i, 그리고 α5i 는 회기계수이며, Xj, Xjj 는 각각의 독립변수이다.
실험결과를 이용하여 통계프로그램인 Minitab으로 1차항과 2차항 그리고 교차항의 t-statistic 과 각각의 coefficients를 구하였다. 그 결과는 하기 표 3 에 나타내었다.
상기 표 3 에 의하면, Y1 의 X2, X3 및 X2X2 의 p value 가 0.05 이하로 통계적으로 상관관계가 높은 것으로 나타났다. 그러나, Y2 의 모든 이차항은 p value가 0.05 이하로 높은 상관관계를 나타내었고, 모든 교차항은 통계적으로 상관관계가 없는 것으로 나타났다. Y3 는 X1X3 를 제외한 모든 교차항과의 상관관계가 높은 것으로 나타났으며, X2와 X3X3 를 제외한 1차항과 2차항의 모든 상관관계가 높은 것으로 나타났다.
실험설계의 적합도는 하기 표 4 에 나타내었다.
상기 표 4 에 의하면, 모든 종속변수에 대한 R2 값이 90% 이상이었고 p value 는 0.01 보다 낮아 선택되어진 독립변수가 실험에 적합한 설계였다고 할 수 있다.
1-3. 최적 추출 조건
추출 수율(Y1), 총 폴리페놀 함량(Y2) 및 베타-글루칸 함량(Y3) 에 대한 최적 추출 조건을 하기 표 5 에 나타내었다.
상기 표 5 에 의하면, 각각의 종속변수에 대한 최적 추출조건에서의 예상 값은 추출 수율 55.99%, 총 폴리페놀함량 1.81%, 베타-글루칸함량 22.00% 였다. 또한, 다중반응최적화에 의하여 각각의 독립변수는 X1=71.57℃, X2=11.31 hr 및 X3=51.58 로 산출되었다.
1-4. 각각의 독립변수간의 Response surface plots
하나의 독립변수를 최적값으로 고정시킨 후 두 독립변수간의 상관관계를 Maple 을 이용하여 3D surface plot 으로 나타내었다. 그 결과는 도 2a 내지 도 2c 에 나타내었다.
도 2a 는 종속변수인 추출 수율(Y1)에 대한 독립변수의 상관관계를 나타낸 그래프로 추출용매비가 code 값 -1.68 에 가까워질수록 추출수율은 낮아지며 code value 1.68 에 가까워질수록 추출수율의 값이 커지는 것으로 나타났다. 또한, 추출온도와 추출시간이 중심점에 가까워질수록 높은 추출수율값을 나타내었다.
도 2b 는 총 폴리페놀의 함량에 대한 각각의 두 독립변수의 상관관계를 나타낸 것으로 모든 독립변수가 중심점에 가까워질수록 높은 총 폴리페놀 함량을 나타내었다. 총 폴리페놀 함량에 대한 추출온도과 추출용매비의 상관관계에서 추출용매비가 중심점과 code value 1.68 의 사이에서 최대의 총 폴리페놀 함량값을 나타내었으나 code value 1.68 에 가까워졌을 경우 다시 감소하는 경향을 나타내었다. 추출온도의 경우 중심점과 code value -1.68 의 사이에서 최대의 페놀화합물 함량값을 나타내었으나 code value -1.68 에 가까워졌을 경우 다시 감소하는 경향을 나타내었다.
도 2c 는 베타-글루칸 함량에 대한 각각의 두 독립변수의 상관관계를 나타낸 것으로 추출용매비의 값이 code value 1.68 에 가까워질수록 높은 값을 나타내었으며, X2 및 X1 의 경우 중심점에 가까워질수록 높은 베타-글루칸 함량을 나타내었다.
1-5. 최적 추출 조건의 확인
다중반응최적화에 의해 얻어진 최적 추출 조건으로 해송이버섯을 추출하여 각각의 종속변수의 실제 실험값을 구하여 예상값과 비교하였다. 즉, 해송이버섯을 세척후 건조, 분쇄한 분말을 71.6℃ 에서 11.3 시간동안 해송이버섯 분말에 대하여 51.5 배의 물로 추출한 후, 추출 수율, 총 폴리페놀 함량 및 베타-글루칸 함량을 구하였다. 그 결과는 하기 표 6 에 나타내었다.
상기 표 6 에 의하면, 추출 수율 61.21%, 총 폴리페놀 함량 1.72%, 그리고 β-글루칸 함량 22.40%로 나타났으며 예상값과 실험값이 비슷한 값을 나타내어 적합한 실험설계였다고 할 수 있다. 추출 수율과 β-글루칸의 함량은 예상값보다 실험값이 더 높은 값을 나타내었으며 총 폴리페놀 함량은 실제값이 예상값보다 낮은 함량을 나타내었다.
<실시예 2> 해송이버섯 추출물 및 분획물의 분리
2-1. 해송이버섯 추출물의 제조(simple extract, SE)
해송이버섯을 세척하고 건조한 후 분쇄하여 분말화하였다. 상기 해송이버섯 분말을 71.6 ℃ 에서 11.3 시간동안 해송이버섯 분말의 중량에 대하여 51.5 배의 증류수를 가하여 추출하였다. 상기 추출물을 원심분리기(7000 rpm × 30 min)를 이용하여 원심분리한 뒤, 상층액을 여과지(Advantec 5C, Toyo, Tokyo, Japan)로 감압여과를 한 후 동결건조하여 분말화하였다.
2-2. 저분자 물질을 제거한 분획물(Cut off Extract, COE)
상기 2-1 의 추출물을 추출물의 약 4 배 부피비의 99% 에탄올에 4 ℃ 에서 24 시간동안 침전시킨 후, 투석막(MWCO 12000)을 이용하여 저분자 물질을 제거하였다.
2-3. 중성다당체 분획물(Neutral Polysaccharide, NP)
상기 2-2 에서 저분자 물질을 제거한 추출물을 DEAE-Sephacell 이 충진된 column (3×45 cm)에 주입하였다. 컬럼을 통과한 추출물을 증류수에 녹여 중성다당체 분획물을 얻었다.
2-4. 산성다당체 분획물(Acidic polysaccharide, AP)
상기 2-2 에서 저분자 물질을 제거한 추출물을 DEAE-Sephacell 이 충진된 column (3×45 cm)에 주입하였다. 컬럼을 통과한 추출물을 2M NaCl용액에 녹여 산성다당체 분획물을 얻었다.
<실시예 3> 해송이버섯 추출물을 포함한 요구르트의 제조
3-1. 스타터 균주(CHR. HANSEN's, danmark)로 Lactobacillus bulgaricus(Lb-12) 와 Streptococcus Thermophilus(TH-4)를 1:1로 혼합한 배양액을 2 회 계대배양 하여 우유 1ℓ에 분유 50 g 을 섞은 후 혼합 배양액을 0.1 % 첨가하여 발효시켜 스타터배양액을 제조하였다.
3-2. 원유에 분유 20 % 를 첨가하고 60 ℃ 에서 15분간 가열하여 분유를 녹인 후 90 ℃ 에서 30분간 멸균하였다. 멸균한 우유를 냉각후 스타터 배양액 10% 와 상기 실시예 2-1에서 제조한 동결건조하여 분말화한 해송이버섯 추출물을 요구르트에 대하여 1, 3, 5 중량부로 각각 첨가하고 38℃에서 150 rpm으로 교반하면서 18시간 동안 발효시켜 요구르트를 제조하였으며, 발효가 완료된 요구르트에 부재료를 첨가하고 혼합한 후 5 ℃ 에서 냉장 보관하였다.
<실시예 4> 해송이버섯 분말을 포함한 두부의 제조
4-1. 해송이버섯 분말의 제조
해송이버섯을 세척하고 30℃ 에서 48시간동안 냉풍건조하여 분말화하였고, 이를 핀밀을 사용하여 분쇄한 후 75mash 정도의 입도로 분쇄하여 해송이버섯 분말을 제조하였다.
4-2. 두부의 제조
콩 100 g 을 4 ℃ 에서 24 시간동안 물에 불리고 1000 ㎖ 의 물을 가하여 2분간 분쇄후 100 mash 의 천을 사용하여 압착 여과하였다. 여액에 상기 4-1 에서 제조한 해송이버섯 분말을 2.5, 5.0, 7.5, 10 중량부로 각각 첨가하고, 100 ℃ 에서 15 분간 가열 추출한 후 응고제를 첨가하여 30분간 응고시킨 후, 20g/㎠ 으로 30 분간 압착하여 두부를 제작하였다. 제조된 두부는 30 분간 맑은 물에 침지하여 잔여분의 응고제를 제거하였다.
<실험예 1> 해송이버섯 추출물의 성분 분석
상기 실시예 2 에서 얻어진 해송이버섯 분획물별 베타-글루칸, 총 폴리페놀, 당 및 단백질 함량을 분석하여 그 결과를 하기 표 7 에 나타내었다.
베타-글루칸의 함량은 Megazyme beta-glucan assay kit(Megazyme International Ireland Ltd., Ireland)를 사용하여 총 글루칸과 글루칸이외의 당함량을 구한 후, 알파-글루칸과 글루칸이외의 당함량 차이를 이용하여 구하였다. 상기 실시예 2 에서 얻은 각각의 시료(SE, COE, NP, AP)를 진한 염산을 첨가하여 100 ℃ 에서 2 시간동안 가수분해시킨 후 2N KOH 를 이용하여 pH 를 조정하였다. 가수분해액을 200 mM 의 sodium acetate buffer(pH 5.0)를 이용하여 희석한 후 원심분리하여 상층액 100 ㎕ 를 취하여 exo 1,3-β-glucanase 와 β-glucosidase 를 첨가한 후 glucose determination reagent(Megazyme International Ireland Ltd., Ireland)를 첨가하여 510 nm 에서 흡광도를 측정하여 총 글루칸과 글루칸이외의 당 함량을 얻었다. 알파-글루칸과 글리칸이외의 당함량은 시료에 2M KOH 를 넣고 20분간 얼음이 채워진 수욕에서 반응 후 1.2 M sodium acetate buffer(pH 3.8)를 첨가하고 amyloglucosidase 와 invertase를 넣고 40℃ 에서 20분간 반응하였다. 그 후 510 nm 에서 흡광도를 측정하여 값을 얻었다.
총당함량 분석은 phenol-sulfuric acid 법으로 실시하였다. 즉, 5% phenol(w/v) 0.2 ㎖ 와 sulfuric acid 1 ㎖ 를 시료 0.2 ㎖ 와 반응시킨 후, 글루코스를 표준당으로 하여 UV-Visible spectrophotometerspectrophotometer(UV-1601, shimadzu Co., Kyoto, Japan)로 490 nm 에서 흡광도를 측정하였다.
단백질 함량 분석은 시료 0.5 ㎎ 에 cupric sulfate 1g 과 sodium citrate 2g 을 증류수 200㎖ 에 녹인 시약과 sodium cabonate 20g 과 sodiu hydroxide 4g 을 1ℓ에 녹인 시약을 50:1 의 비율로 혼합한 시약 2.5㎖ 를 가한 후 10분 후 50% folin-ciocalteu phenil reagent 0.25㎖ 를 가하여 교반한 후 30분간 방치하고, bovine serum albumin 을 표준 단백질로 하여 spectrophotometer로 740 nm 에서 흡광도를 측정하였다.
총 폴리페놀의 함량은 분석법으로 널리 사용되고 있는 Folin-Denis 방법(1912)을 응용하여 측정하였다. 각각의 추출조건에 따라 제조된 추출물 0.1㎖ 에 2N-Foline reagent 0.5㎖, 증류수 8.4㎖ 를 가하고 3분간 정치한다음 1㎖ 의 20% Na2CO3 용액을 가하였다. 이 혼합액을 1시간 동안 정치한 후 spectrophotometer로 725nm 에서 흡광도를 측정하였고 (+)catechin을 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 총 폴리페놀 함량을 구하였다.
상기 표 7 에 의하면, 다른 분획에 비하여 COE의 베타-글루칸 함량이 22.20%로 가장 높은 것으로 나타났으며 NP의 베타-글루칸 함량이 가장 낮은 것으로 나타났다. 버섯에 들어있는 베타-글루칸은 생리기능성과 연관이 있다. SE의 총 폴리페놀함량은 1.94% 로 다른 분획에 비하여 가장 높은 함량을 나타내었고, 추출물의 분리가 일어날수록 총 폴리페놀 함량이 감소하는 것으로 나타났다. 이는 폴리페놀의 분자량이 12Da 보다 작아 투석단계에서 제거되었기 때문인 것으로 보인다. 총 폴리페놀 함량은 항산화 효과에 좋은 영향을 미치므로 SE는 다른 분획에 비하여 높은 항산화 효과를 나타낼 것으로 보인다. COE와 NP의 당 함량은 57.05% 와 57.49% 로 높게 나타났으며 COE의 단백질 함량은 26.92% 로 다른 분획에 비하여 가장 높게 나타났다. 일반적으로 단백질이 결합된 다당체가 더 효과적으로 생리적 활성을 나타내는 것으로 알려져 있어 COE가 다른 분획에 비하여 높은 생리적 특성을 나타낼 것으로 기대된다.
<실험예 2> 분획물의 분자량 측정
상기 실시예 2 에서 얻어진 중성다당체와 산성다당체의 분자량을 GPC 를 이용하여 구하였다. Sepharose CL-4B 가 충진되어진 column(3×10cm)에 분자량 12000, 150000, 670000 의 표준 dextran을 통과시켜 log MW에 대한 Kav 값을 이용하여 중성다당체와 산성다당체의 분자량을 계산하였다. 그 결과는 도 3 에 나타내었다.
도 3 에 의하면, 중성다당체의 분자량은 약 25 kDa, 산성다당체의 분자량은 약 21 kDa 인 것으로 나타났다. 해송이버섯의 저분자 물질은 상기 실시예 2-2 의 에탄올 침전과정에서 제거된 것으로 보인다. 따라서, 본 발명의 중성다당체와 산성다당체 모두 분자량이 20kDa 이상의 고분자 다당체인 것으로 나타났다.
<실험예 3> 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 활성 억제 효과
상기 실시예 2 에서 얻어진 해송이버섯 분획물의 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 활성 억제 효과를 평가하였다. 알파-글루코시다제 억제 활성(α-glucosidase inhibitory acitivity)은 Watanbe 등(1997)의 방법에 의해 측정하였다. 즉, 효소 알파-글루코시다제(0.7U)를 100mM phosphate buffer(pH7.0)에 녹여 사용하였고 기질은 5mM ρ-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside를 100mM phosphate buffer(pH7.0)에 녹여 사용하였다. 효소 용액 50㎕ 을 96well plate에 넣고 각각 다른 농도의 시료용액을 10㎕ 를 넣어 잘 교반한 후 micro plate reader로 405nm 에서 흡광도를 측정하였고 이를 zero time으로 하였다. 5분 방치 후 기질 용액 50㎕ 를 넣고 다시 5분 방치한 후 흡광도를 측정하였다.
알파-아밀라제 억제 활성 측정은 Sidney 등(1995)의 방법을 변형하여 측정하였다. 즉, 각각 다른 농도의 시료용액 1㎖ 를 시험관에 넣고 blank에는 0.02M phosphate buffer(pH6.9) 1㎖, 시료에는 1unit/㎖ 의 농도의 α-amylase를 1㎖ 넣고 교반 후 실온에서 5분간 방치하였다. 방치 후 기질 용액인 1% 전분 용액을 1㎖씩 넣어 교반하고 다시 실온에서 5분간 방치하였다. 방치 후 3,5-dinitrosalicylic acid(DNS)용액 3㎖ 를 넣고 알루미늄 호일로 덮고 끓는 물에 5분간 가열하였다. 가열 후 흐르는 물에 냉각하여 증류수 5㎖ 를 넣고 교반한 후 550nm 에서 측정하였다. 알파-아밀라제 억제 활성은 아래식을 이용하여 나타내었다.
A: 시료의 흡광도 값, B: 시료 blank의 흡광도 값
C: 전분 대조군 흡광도 값, D: 전분 대조군 blank 흡광도 값
그 결과는 도 4 및 도 5 에 나타내었다.
도 4 는 각 분획물의 농도에 따른 알파-아밀라제의 저해 활성을 측정한 것이다. 도 4 에 의하면, 30 mg/㎖ 의 농도에서 COE의 알파-아밀라제 저해 활성은 68.20% 로 다른 분획에 비하여 가장 높게 나타났으며, AP와 NP의 알파-아밀라제 저해활성의 경우 27.98 % 와 33.09 % 로 COE보다 낮은 활성을 나타내었다. SE 와 COE 의 경우 25 mg/㎖ 의 농도까지 완만한 증가를 보인 후 그 이상의 농도에서 급격하게 저해 활성이 증가되는 경향을 나타내었다.
도 5 는 각 분획물의 농도에 따른 알파-글루코시다제의 저해 활성을 측정한 결과이다. 도 5 에 의하면, 모든 분획물에서 농도가 증가할수록 저해 활성이 커지는 것으로 나타났다. COE 는 2.5 mg/㎖ 의 농도에서 알파-글루코시다제의 저해 활성이 76.13% 로 가장 높게 나타났으며 SE 와 COE 는 67.76% 와 76.12% 로 AP와 NP의 23.48% 와 30.33% 보다 높게 나타났다.
베타-글루칸의 함량과 폴리페놀 함량은 알파-아밀라제와 글루코시다제의 저해 활성에 영향을 미치는 것으로 보이며, 해송이버섯 추출물 중 저분자 물질을 제거한 분획물인 COE 는 베타-글루칸 및 총 폴리페놀의 함량이 높았으므로 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 저해 활성이 가장 크게 나타난 것으로 보인다.
<실험예 4> 혈당 강하 측정
해송이 추출물에 대한 혈당강하효과는 다음과 같이 실험하였다. 체중 약 270g 의 흰쥐를 대상으로 스트렙토조신을 주사하여 당뇨를 유발한 후 일반사료에 해송이 추출물의 농도를 다르게 첨가하여 8주간 식이한 4개 그룹을 대상으로 실시하였다. 그 결과는 하기 표 8 과 같다.
| 해송이버섯 추출물 (중량부) |
0 | 1 | 15 | 30 |
| 시작혈당 | 243±106.4 | 238±78.5 | 276±118.8 | 253±82.3 |
| 종료혈당 | 232±113.5 | 207±121.8 | 236±108.9 | 246±143.4 |
상기 표 8 에 의하면, 해송이버섯 추출물을 사료에 대하여 1 내지 30 중량부로 첨가한 경우 혈당 감소 효과가 나타났다.
<실험예 5> 요구르트의 성분 분석
상기 실시예 3 에서 제조한 요구르트의 성분을 분석하여 그 결과를 하기 표 9 에 나타내었다. AOAC(미국공인분석화학회)에 따라 수분은 상압가열건조법, 회분은 직접 회화법, 단백질은 마이크로 킬달법, 지방은 ethyl ether 를 용매로 하여 Soxhlet법으로 분석하였고, 탄수화물은 100-(수분+회분+지방+단백질 함량)으로 계산하였다. 하기 표 9 의 단위는 % 이다.
상기 표 9 에 의하면, 해송이버섯 추출물을 첨가함에 따라 요구르트 성분에 큰 변화는 일어나지 않았다.
<실험예 6> 요구르트의 발효중 pH 및 적정산도의 변화
상기 실시예 3 에서 제조한 요구르트를 발효 시간에 따른 pH 및 적정산도를 구하여 그 결과를 도 6 및 도 7 에 나타내었다.
도 6 에 의하면, pH 가 발효 시작후 9 시간까지는 버섯 추출물 비첨가 요구르트는 6.29 에서 3.76 으로, 1 중량부에서는 6.3 에서 3.64 로 감소하였으며, 5 중량부 첨가군에서는 6.32 에서 3.83 으로 급격히 감소하는 경향을 나타내었다. 9시간 이후로는 서서히 감소하는 경향을 나타내었다. 요구르트의 발효과정중 초기 3시간 까지는 버섯 첨가량에 따른 pH 의 감소 차이가 적었으나, 3 시간이후 9 시간 까지는 버섯 추출물 첨가량이 증가할수록 pH 감소도 증가하였다. 9시간 이후에는 다시 첨가량에 따른 pH의 차이 폭이 적었다.
도 7 에 의하면, 요구르트의 적정산도가 발효가 진행되어 pH가 감소할수록 증가하는 경향을 나타내었으며, 초기의 적정산도 값은 모든 요구르트에서 유사한 값으로 시작되었으나, 버섯 추출물이 포함된 요구르트보다 해송이버섯 추출물을 첨가하지 않은 요구르트에서 적정산도 값이 약간 낮게 나타났다. 해송이 버섯 추출물이 첨가된 요구르트의 경우 해송이버섯 추출물의 첨가 농도에 따른 적정산도 값의 변화는 적게 나타났다. 이는 해송이버섯 추출물을 첨가한 요구르트의 발효과정 중 적정산도의 변화에 해송이버섯의 추출물이 미치는 영향이 적다고 할 수 있다.
<실험예 7> 요구르트의 유산균수의 측정
상기 실시예 3 에서 제조한 요구르트의 유산균수를 측정하여 그 결과를 도 6 에 나타내었다. 도 8 에 의하면, 요구르트의 발효중 유산균수의 변화는 발효시간이 증가함에 따라 발효 6 시간째 까지는 증가하는 경향을 보였으나 발효 9 시간 후에는 약간 감소하는 경향을 나타내었다. 발효 초기의 유산균은 107 범위였으나 발효 9 시간 이후로는 모든 요구르트에서 108 정도의 유산균수를 나타내었다. 요구르트의 유산균수는 발효시작 후 6 시간까지 증가량이 많았으며 6 시간이후는 서서히 증가하다 감소하는 경향을 나타내었다. 해송이버섯 추출물을 함유한 요구르트는 ㎖ 당 유산균수가 108 이상으로 식품공전상의 농후발효유의 유산균 기준을 넘는 값을 나타내었다.
<실험예 8> 요구르트의 관능평가
상기 실시예 3 에서 제조된 요구르트에 대하여 관능평가를 실시하였다. 관능평가요원 11명을 대상으로 요구르트의 맛과 향에 대한 기본지식과 훈련을 행하여 맛좋은 요구르트의 선별능력을 숙지시킨 후 해송이버섯 추출물의 첨가량에 따른 요구르트의 외관, 맛, 색깔, 향, 종합적 기호도를 5점(5=가장 좋다, 1=가장 나쁘다) 척도법을 사용하여 평가하였으며 평가결과에 대하여 Duncan's multiple range test를 수행하였고 통계분석은 SAS를 사용하여 분석하였다. 그 결과는 하기 표 10 에 나타내었다.
상기 표 10 에 의하면, 관능검사 결과 해송이버섯 추출물을 첨가 하지 않은 처리군에서 가장 좋은 점수를 얻었다. 해송이버섯 추출물을 첨가한 요구르트에서는 유의적으로 좋은 점수를 얻었고, 1 중량부로 첨가한 처리군에서 가장 좋은 점수를 얻었다. 해송이버섯 추출물을 첨가한 요구르트의 관능점수가 해송이버섯 추출물을 첨가한 것보다 낮게 나온 이유는 해송이버섯 추출물을 분말화한 고농도의 추출물을 첨가하여, 1 중량부만 첨가하여도 버섯의 향과 맛이 아주 강하게 나타나서 쓴맛이 나타났기 때문에 관능점수가 낮게 나온 것으로 사료된다. 그러나, 관능평가 결과 종합적 기호도는 나쁘지 않아 해송이버섯 추출물을 용이하고 간편하게 섭취할 수 있을 것으로 기대된다.
<실험예 9> 두부의 성분 분석
상기 실시예 4 에서 제조한 두부의 성분을 분석하여 그 결과를 하기 표 11 에 나타내었다. 두분의 성분 분석은 상기 실험예 4 의 요구르트의 성분 분석과 동일한 방법으로 수행하였다.
상기 표 11 에 의하면, 해송이버섯을 첨가함에 따라 성분에 큰 차이가 나타나지 않았다.
<실험예 10> 두부의 물성
상기 실시예 4 에서 제조한 두부의 경도, 부서짐성, 결합력, 탄성, 응집력 및 검성을 측정하여 그 결과를 하기 표 12 에 나타내었다.
두부의 물성은 시료를 일정크기로 균일하게 잘라 texture analyser (TA-XT2i, Stable Micro System Ltd, England)를 이용하여 TPA(texture profile analysis) mode에서 측정하였다. 두부의 측정조건은 20mm x 20mm x 20mm 크기로 잘라낸 후 10mm probe로 0.5 mm/sec t-speed, 1 mm/sec pre t-speed, 0.5 mm/sec post t-speed 그리고 30% strain의 조건에서 분석하였으며, 패티는 40mm x 40mm 크기로 잘라낸 후 30mm round probe로 0.5mm/sec t-speed, 1 mm/sec pre t-speed, 0.5mm/sec post t-speed에서 70% strain의 조건에서 분석하였다.
상기 표 12 에 의하면, 해송이버섯 첨가 두부의 경도는 5.0 중량부에서 434.3으로 가장 높게 나타났으며, 10 중량부에서 270.8로 가장 낮게 나타났다. 해송이버섯의 첨가는 두부의 응고시 두부간의 결합력에 영향을 주는 경향이 있는 것으로 나타났다. 부서짐성은 해송이 버섯 5 중량부에서 8.98로 가장 부서짐성이 적은 것으로 나타났으며, 10 중량부에서 11.24로 가장 크게 나타났다. 탄성은 버섯 분말의 함량에 따라 0.928에서 0.955까지 나타났으며, 응집력은 해송이버섯을 첨가하지 않은 두부에서 0.7275로 가장 크게 나타났으며, 2.5 중량부에서 0.5588로 가장 적게 나타났다. 검성은 10 중량부에서 151.9로 가정 적었으며 5 중량부에서 274.1로 가장 높게 나타났다. 물성 측정 결과 5중량부로 해송이버섯이 첨가된 두부에서 물성값이 대체로 높게 나타났으며, 해송이버섯이 10중량부로 첨가된 두부에서 낮게 나타나는 경향이었으나 두부의 취급 및 섭취에는 전혀 문제가 되지 않는 수준이었다.
<실험예 11> 두부의 관능평가
상기 실시예 4 에서 제조한 두부에 대하여 관능평가요원 10명을 대상으로 두부의 맛과 향에 대한 기본지식과 훈련을 행하여 맛좋은 두부의 선별능력을 숙지시킨 후 해송이버섯의 첨가량에 따른 두부의 외관, 맛, 색깔, 향, 종합적 기호도를 5점(5=가장 좋다, 1=가장 나쁘다) 척도법을 사용하여 평가하였으며 평가결과에 대하여 Duncan's multiple range test를 수행하였고 통계분석은 SAS를 사용하여 분석하였다. 그 결과는 하기 표 13 과 같다.
상기 표 13 에 의하면, 색은 2.5 중량부 첨가 두부에서 4.37로 가장 높았으며 10 중량부에서 2.50으로 가장 낮은 점수를 얻었다. 두부의 색상은 백색에 가깔울수록 점수가 높았으며, 2.5 중량부에서는 버섯을 첨가한 기능때문에 색에 호감을 느낀 것으로 보인다. 물성은 해송이버섯을 첨가하지 않은 두부와 2.5 중량부로 첨가한 두부에서 4.13으로 가장 좋은 점수를 얻었으며, 10 중량부를 첨가한 두부에서 1.75 로 가장 낮은 점수를 나타내었다. 맛과 향은 2.5 중량부로 해송이버섯을 첨가한 군에서 가장 좋은 점수를 얻었으며, 10 중량부에서 가장 낮은 점수를 얻었다. 종합적 기호도에서는 해송이버섯울 2.5 중량부로 첨가한 두부가 가장 좋은 점수를 얻었다.
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 해송이버섯 추출물은 알파-아밀라제 및 글루코시다제의 활성을 저해하여 혈당의 상승을 억제하므로 당뇨의 예방 및 개선에 효과가 있다. 또한, 천연 유래의 물질로 인체에 안전하며 장기간 섭취하여도 부작용이 적고, 각종 건강식품으로 제조하여 일상 생활에서 용이하고 간편하게 섭취할 수 있다. 또한, 상기 해송이버섯 추출물을 포함하는 요구르트 또는 두부는 섭취시 급격한 혈당 상승이 없으며 영양적으로 균형을 이루어 당뇨 예방 및 개선용 식품으로 당뇨 환자가 섭취하기에 적합하다.
도 1 은 해송이버섯 분획물의 제조 단계를 나타낸 모식도이다.
도 2a 내지 도 2c 는 추출최적조건의 산출에서 종속변수 Y1(추출 수율), Y2(총 폴리페놀 함량) 및 Y3(베타-글루칸 함량)에 대한 각각의 두 독립변수간의 상관관계를 나타낸 3D surface plot 이다.
도 3 은 중성다당체와 산성다당체의 분자량 분포를 나타낸 것이다.
도 4 는 본 발명의 해송이버섯 분획물의 농도에 따른 알파-아밀라제 저해 활성을 나타낸 것이다.
도 5 는 본 발명의 해송이버섯 분획물의 농도에 따른 알파-글루코시다제의 저해 활성을 나타낸 것이다.
도 6 는 본 발명의 일 실시예에 따른 요구르트의 발효시간에 따른 pH 변화를 나타낸 것이다.
도 7 는 본 발명의 일 실시예에 따른 요구르트의 발효시간에 따른 적정 산도의 변화를 나타낸 것이다.
도 8 은 본 발명의 일 실시예에 따른 요구르트의 유산균의 수를 나타낸 것이다.
Claims (12)
- 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 해송이버섯 추출물을 유효성분으로 포함하고,상기 해송이버섯 추출물은 70 내지 80℃에서 8 내지 15 시간동안 해송이버섯에 대하여 1:50 내지 1:60의 추출용매비(w/v)로 추출하여 얻은 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 있어서,상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 분자량이 20 kDa 미만인 저분자 물질을 제거한 분획물인 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물.
- 삭제
- 제1항에 있어서,상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 분자량이 20 kDa 미만인 저분자 물질을 제거하고 중성다당체를 분리한 분획물인 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물.
- 제1항에 있어서,상기 해송이버섯 추출물은 해송이버섯을 물, 에탄올 또는 이들의 혼합물로 추출하여 얻은 추출액에서 분자량이 20 kDa 미만인 저분자 물질을 제거하고 산성다당체를 분리한 분획물인 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물.
- 제1항에 있어서,상기 해송이버섯 추출물은 총 조성물에 대하여 1 내지 30 중량부로 포함되는 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물.
- 제1항, 제4항 및 제6항 내지 제8항 중 어느 한 항의 조성물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 개선용 요구르트.
- 제9항에 있어서,상기 조성물은 요구르트에 대하여 0.1 내지 5 중량부로 포함되는 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 개선용 요구르트.
- 제1항, 제4항 및 제6항 내지 제8항 중 어느 한 항의 조성물 또는 해송이버섯을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 개선용 두부.
- 제11항에 있어서,상기 조성물 또는 해송이버섯은 두부에 대하여 1 내지 10 중량부로 포함되는 것을 특징으로 하는 당뇨 예방 및 개선용 두부.
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| US20070166320A1 (en) | 2004-08-13 | 2007-07-19 | Kazuo Yamazaki | Agent for preventing/ameliorating diabetes and functional food for preventing/ameliorating diabetes |
-
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| 논문1 : 한국식품영양과학회지 |
| 논문2 : 한국식품영양과학회지 |
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