KR101081256B1 - 바이사이클릭 펩타이드 화합물의 제조 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 약리학적 활성을 지닌 화합물 제조용 중간체로서 유용한, 화학식 (I)의 고순도 바이사이클릭 펩타이드 화합물을 고수율로 제조하기 위한, 완전히 용액중에서 수행되는 신규 방법에 관한 것이다:
Figure 112005028845310-pct00050
바이사이클릭 펩타이드 화합물, 타키키닌 NK2 수용체, 길항제, 신경조절자

Description

바이사이클릭 펩타이드 화합물의 제조 방법{PROCESS FOR THE PREPARATION OF BICYCLIC PEPTIDE COMPOUNDS}
본 발명은 약리학적 활성 화합물의 제조에서, 및 특히 타키키닌 NK2 수용체의 길항제 활성을 보유하는, 후술되는 화학식 (I-A)의 바이사이클릭 글리코펩타이드의 제조에서 중간체로서 유용한, 후술되는 화학식 (I)의 바이사이클릭 펩타이드 화합물의 신규 제조 방법에 관한 것이다.
화학식 (I-A)의 화합물 및 특히, 화합물 [N-4-(2-아세틸아미노-2-데옥시-β-D-글루코피라노실)-L-아스파라기닐-L-α-아스파틸-L-트립토필-L-페닐알라닐-L-2,3-디아미노프로피오닐-L-루이실]-C-4,2-N-3,5-락탐-C-1,6-N-2,1-락탐("Nepadutant"라는 상품명으로 알려져 있는, R1 = R2 = R3 = H인, 후술되는 화학식 (I-A)의 화합물)은 타키키닌 NK2 수용체의 강력한 길항제 활성을 지닌 화합물이며, 이에 따라 타키키닌이 신경조절자로서 연루되는 질환의 치료 및 예방에 유용한, 질환 치료용 약학적 화합물의 제조에 사용될 수 있다.
이러한 화합물 및 이의 중간체 일부가 유럽 특허 No. 815 126 B1, 특히 실시예 4에 기재되어 있다. 이 문헌은 4 및 5쪽에서, 문헌에 이미 공지되어 있는 방법 으로서, 화학식 (I)의 화합물을 수득하기 위하여, 적절히 보호된 아미노산의 순차적인 커플링 및 이들의 후속적인 최종 고리화에 의한 선형 펩타이드의 액상 또는 고체상 합성 방법을 기술하고 있다.
이들 방법은 매우 일반적인 방식으로 설명되었지만, 좀더 자세한 내용은 실시예 1과 2에서 화합물의 제조 방법에 대해 제공되어 있다. 이들 실시예에서, 사용되고 있는 합성법은 선형 펩타이드가 수득될 때까지 Fmoc 아미노산을 고체상에서 커플링하고, 수지로부터 분리 후 고리화하고, HPLC로 정제하고 다시 고리화하는 것이다. 이러한 합성 경로 뒤에는, 아스파라긴의 적절히 보호된 측쇄로서, 글리코사이드 펜던트가 수지 상에서의 선형 펩타이드의 고체상 합성 단계에서 도입되고 있음에 주목하는 것이 중요하다.
발명의 요약
본 출원인은 놀랍게도 약리 활성을 지닌 화합물의 제조를 위한 중간체로서 유용한, 후술되는 화학식 (I)의 바이사이클릭 펩타이드 화합물의 제조를 위한 신규하고 더욱 효율적인 방법을 발견하였다. 이러한 신규 방법은 고체상에서보다는 완전히 용액 중에서 수행되며 고 순도 및 고 수율로 산물을 수득할 수 있게 한다.
따라서, 본 발명의 요지는 하기의 단계 1) 내지 7)을 포함하는, 화학식 (I)의 바이사이클릭 펩타이드 화합물(서열번호 1)의 제조 방법이다:
Figure 112005028845310-pct00001
1) 화학식 (II)의 선형 펜타펩타이드(서열번호 2)를 용매의 존재하에서 탈보호시켜 화학식 (III)의 화합물을 생성하는 단계;
Figure 112005028845310-pct00002
(상기식에서, A1 및 A2는 서로 상이한 두 질소 보호 그룹이고; R5 및 R6는 서로 상이하고, 벤질옥시 및 저급 알킬옥시 그룹(여기에서, 알킬 부위는 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함한다) 중에서 선택된다)
2) 단계 1)로부터의 화학식 (III)의 화합물을 용매와 적당한 커플링제의 존재하에 분자내 고리화하여 화학식 (IV)의 화합물(서열번호 3)을 생성하는 단계;
Figure 112005028845310-pct00003
(상기식에서, R5는 상기에서 정의한 바와 같다)
3) 단계 2)로부터의 화학식 (IV)의 화합물을 용매의 존재하에서 탈보호시켜 화학식 (V)의 화합물을 생성하는 단계;
Figure 112005028845310-pct00004
(상기식에서, R5는 상기에서 정의한 바와 같다)
4) 단계 3)로부터의 화학식 (V)의 화합물과 화학식 (VIa)의 보호된 아미노산을 용매의 존재하에서 커플링시켜 화학식 (VII)의 화합물(서열번호 4)을 생성하는 단계;
Figure 112005028845310-pct00005
(상기식에서, A3는 질소 보호 그룹이고; R7는 벤질옥시 및 저급 알킬옥시 그룹(여기에서, 알킬 부위는 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함한다) 중에서 선택되며; R8은 카복실 그룹에 대한 활성화 절차로부터 유도되는 잔기이다)
5) 단계 4)로부터의 화학식 (VII)의 화합물을 용매의 존재하에서 탈보호시켜 화학식 (VIII)의 화합물을 생성하는 단계;
Figure 112005028845310-pct00006
(상기식에서, R7은 상기에서 정의한 바와 같다)
6) 용매와 적당한 커플링제의 존재하에, 단계 5)로부터의 화학식 (VIII)의 화합물을 분자내 고리화하여 화학식 (IX)의 바이사이클릭 화합물을 생성하는 단계:
Figure 112005028845310-pct00007
(상기식에서, R7은 상기에서 정의한 바와 같다)
7) 단계 6)로부터의 화학식 (IX)의 바이사이클릭 화합물을 용매의 존재하에 탈보호시켜 화학식 (I)의 화합물을 수득하는 단계.
Figure 112005028845310-pct00008
(상기식에서, R7은 상기에서 정의한 바와 같다)
화학식 (III)의 화합물은 서열번호 2로 표시된다. 화학식 (I)의 화합물은 예를 들면, 타키키닌 NK2 수용체에 대한 강력한 길항제 활성을 보유하는, 후술되는 화학식 (I-A)의 바이사이클릭 글리코펩타이드 화합물의 제조에 사용될 수 있으며; 본 출원인은 신 제법을 발견하였으며, 이에 따라 글리코사이드 펜던트는 용액 중에서 수행되는 반응에 의해 화학식 (I)의 화합물 중으로 혼입되며, HPLC에 의한 최종 산물의 정제가 필요하지 않아, 이들 화합물의 대규모 생산이 현행 제조 방법들에 비해 확실히 더 저렴한 비용으로 성취될 수 있다.
본 발명의 추가의 요지는 하기의 단계 1A) 및 2A)를 포함하는, 화학식 (I-A)의 바이사이클릭 글리코펩타이드 화합물(서열번호 5)의 제조 방법이다:
Figure 112005028845310-pct00009
(상기식에서, R1, R2 및 R3는 동일하거나 상이하고, 수소 또는 산소 보호 그룹일 수 있다)
1A) 화학식 (I)의 바이사이클릭 펩타이드 화합물을 적절한 커플링제로 활성화시켜 화학식 (II-A)의 유도체를 수득하는 단계;
Figure 112005028845310-pct00010
(상기식에서, R은 가능하게는 할로겐으로 치환되는 벤조트리아졸, 아자벤조트리아졸 및 석시니미딜로 이루어진 그룹 중에서 선택된다); 및
2A) 단계 1A)로부터의 화학식 (II-A)의 화합물을 용매의 존재하에 화학식 (IIIA)의 글리코사이드 유도체와 반응시키는 단계:
Figure 112005028845310-pct00011
(상기식에서, R, R1, R2 및 R3는 상기에서 정의한 바와 같다)
본 발명의 또 다른 주제는 화학식 (II) 및 (III)의 화합물을 출발물질로 하여, 전술한 두 과정에서 기재된 바와 같이 화학식 (I)의 화합물 형성 과정을 거쳐 화학식 (1-A)의 화합물을 제조하는 방법이다.
고체상에서가 아니라 완전히 용액 중에서의 반응에 의해 수행된 본 발명의 방법은 예상치 못한 고 수율을 보여주며 HPLC 정제 과정의 사용을 요하지 않으며, 따라서, 생산비가 현저히 감소하고 대규모 제조가 가능해 진다.
발명의 상세한 설명
본 발명의 방법에 사용되는 질소 보호 그룹은 M. Bodansky, "Peptide Chemistry", Springer Verlag 1988 or in J. Jones, "The Chemical Synthesis of Peptides", Clarendon Press, Oxford 1994에 보고된 것들과 같은 펩타이드 합성에 사용될 수 있는 임의의 보호 그룹 중에서 선택될 수 있다.
본 발명에 따라, 질소 보호 그룹은 바람직하게는, 벤질옥시카보닐 및 알콕시 카보닐(여기에서, 알킬 부위는 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함한다)로 이루어진 그룹 중에서 선택되고; 더욱 바람직하게는, 질소 보호 그룹은 t-부톡시카보닐 (Boc) 및 벤질옥시카보닐(Z) 중에서 선택된다.
R8은 활성화 절차로부터 유도되는, 바람직하게는 벤질옥시카보닐, 알킬 부위에 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함하는 알콕시카보닐, 석시니미딜, 가능하게는 할로겐으로 치환되는 벤조트리아졸, 및 아자벤조트리아졸로 이루어진 그룹 중에서 선택된 잔기이다.
화학식 (II)의 선형 펩타이드는 하기 방법 중 하나에 의해 제조될 수 있다:
a) 단계적 방법: 이 방법에 의하면, 화학식 (II)의 펩타이드를 수득하는 데 필요한 아미노산을 질소 상에 보호되고 별도로 또는 동일 반응계에서(in situ) 생성된 화학식 (X)의 아미노산 Dpr의 유도체를 출발물질로 하여 순차적으로 커플링시키고; 전술한 화학식 (X)의 유도체를 용매의 존재하에 Leu 에스테르 (XI)와 반응시켜, 디펩타이드 A4-Dpr(A2)-Leu-R5를 수득한 다음, 이를 제거시킬 질소 상의 보호 그룹에 따라 및 유지될 보호 그룹과는 상용성인 적당한 방법에 의해 탈보호시킨다:
Figure 112005028845310-pct00012
Figure 112005028845310-pct00013
상기식에서,
A2 및 A4는 서로 상이하고, 상기 정의된 바와 같이, 질소 보호 그룹이고;
R5는 상기 정의한 바와 같으며;
R9는 활성화 절차로부터 유도되는, 바람직하게는 벤질옥시카보닐, 알킬 부위에 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함하는 알콕시카보닐, 및 석시니미딜로 이루어진 그룹 중에서 선택된 잔기이다.
이어서, 이와 같이 탈보호된 디펩타이드는 화학식 (II)의 화합물이 수득될 때까지, 아미노산 Phe의 활성화된 에스테르, 이어서 Trp 및 Asp와 순차적으로 커플링된다.
b) 2+2+1 방법 : 이 방법은 방법 a)에 따라 전술한 바와 같이 수득한 모노탈보호된 디펩타이드 H-Dpr(A2)-Leu-R5를, 별도로 제조되거나 동일 반응계에서 생성된 질소 상의 보호된 Trp의 활성화 에스테르를 Phe 에스테르와 커플링시킨 다음 에스테르 그룹을 가수분해함으로써 별도로 제조되거나 동일 반응계에서 생성된 하기 화학식 (XII)의 디펩타이드의 활성화 유도체와 커플링시키는 단계로 이루어진다.
A5-Trp-Phe-OH (XII)
상기식에서,
A2 및 A5는 서로 상이하고, 상기 정의한 바와 같이 질소 보호 그룹이다.
생성되는 테트라펩타이드 A5-Trp-Phe-Dpr(A2)-Leu-R5를 Trp의 질소에 부착된 그룹으로부터 적절히 탈보호시킨 다음 화학식 (VIb)의 화합물과 커플링시킨다.
Figure 112005028845310-pct00014
상기식에서, A1, R6 및 R8은 상기 정의한 바와 같다.
c) 3+2 방법: 이 방법에 따르면, 전술한 화학식 (XII)의 화합물로부터 질소 보호 그룹을 제거한 다음, 전술한 화학식 (VIb)의 화합물과 커플링시킴으로써 수득된 트리펩타이드 A1-Asp(R6)-Trp-Phe-OH를 a) 방법의 절차에 따라 기재된 바와 같이 제조된 모노 탈보호된 디펩타이드 H-Dpr-(A2)-Leu-R5와 커플링시킨다.
본 발명에서 사용되는 용어 "저급 알콕실 그룹"이란 알킬 부위가 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹, 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 이소프로필 및 t-부틸로 이루어진 그룹 중에서 선택된 그룹을 포함하는 알콕실 그룹을 말한다. 이는 본 발명의 알킬옥시카보닐 그룹에 대해서도 마찬가지이며, 여기에서 알킬 부분은 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹, 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 이소프로필 및 t-부틸로 이루어진 그룹 중에서 선택된 그룹을 포함한다.
커플링제는 예를 들어 M. Bodansky, "Peptide Chemistry", Springer Verlag 1988 or in J. Jones, "The Chemical Synthesis of Peptides", Clarendon Press, Oxford 1994에 보고된 것들과 같이 활성화된 아미노산 유도체를 생성하기 위하여, 펩타이드 합성에 더욱 통상적으로 사용되는 것들 중에서 선택될 수 있다.
시판되고 있지 않을 경우, 활성화된 유도체는 아미노산 또는 펩타이드와 다수의 공지된 커플링제 중 하나 이상, 예를 들면 이소부틸 클로로포메이트(IBCF), 가능하게는 1-하이드록시벤조트리아졸(HOBt), 1-하이드록시-7-아자벤조트리아졸(HOAt), 6-클로로-1-하이드록시벤조트리아졸(Cl-HOBt) 및 하이드록시석시니미드(HOSu) 중에서 선택된 하이드록시 유도체와 병행하여 디사이클로헥실카보디이미드(DCC) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(DEAC·HCl) 중에서 선택된 카보디이미드; 포스포늄 염, N-옥사이드 구아니딘 염 또는 우로늄 염, 예를 들면 (벤조트리아졸-1-일옥시)트리(디메틸아미노)포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (BOP), (벤조트리아졸-1-일옥시)트리페롤리딘 포스포늄 헥사플루오로포스페이트 (PyBOP), 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-벤조트리아졸륨-3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트(HBTU), 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-5-클로로-1H-벤조트리아졸륨-3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트(HCTU), 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-벤조트리아졸륨-3-옥사이드 테트라플루오로보레이트(TBTU), 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸[4,5-b]피리디늄-3-옥사이드 헥사플루오로포스페이트(HATU), 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-5-클로로-1H-벤조트리아졸륨-3-옥사이드 테트라플루오로보레이트(TCTU), O-[(에톡시카보닐)시아노메틸렌아미노]-N,N,N′,N′-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TOTU), O-(바이사이클로[2.2.1]헵트-5-엔-2,3-디카복시미도)-N,N,N′,N′-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TNTU), 또는 O-(N-석시니미딜)-N,N,N′,N′-테트라메틸우로늄 테트라플루오로보레이트(TSTU)와의 반응에 의하여, 별도로 또는 동일 반응계에서 제조될 수 있다.
유도체가 동일 반응계에서 생성될 경우, 커플링 반응은 명백하게는, 분자내 고리화의 경우에, 분자 자체에 존재하는 유리 아민 말단에 상응하는 타 시약을 첨가함으로써 즉시 수행된다.
커플링 반응은 통상적으로, 펩타이드 합성에 일반적으로 사용되는 것들 중에서 선택된 유기 용매에서 N-메틸모폴린(NMM), 트리에틸아민(TEA) 또는 디이소프로필에틸아민(DIPEA)와 같은 3급 아민의 존재하에 수행된다. 커플링 반응을 위한 바람직한 용매는 에틸 아세테이트(AcOEt), 디메틸포름아미드(DMF) 및 N-메틸피롤리돈(NMP)이다.
커플링 반응은 분해를 유발하지 않거나 반응을 지나치게 느리게 하지 않는 온도에서 수행될 수 있으며, 온도는 바람직하게는 -20 내지 +50℃이다.
본 발명 방법에서의 탈보호는 보유시킬 그룹과는 상용성인, 제거할 그룹에 대한 적당한 방법에 의해 달성되며; 일반적으로, 본 발명의 탈보호 반응은 촉매 수소화에 의해 또는 산이나 염기 처리에 의해 수행된다.
수소화를 위해, 촉매는 이용 가능하고 본 목적에 적합한 다양한 촉매로부터 선택될 수 있으며; 5% 또는 10% 팔라듐이 바람직하다. 촉매 수소화에 의한 탈보호 반응용 용매는 아세톤과 같은 케톤, 촉매에 유독한 용매 및 반응 성분과 반응하는 것들을 제외하고는, 반응에서 화합물을 용해시키는 것들 중에서 선택될 수 있다. DMF, NMP, 유기산, 예를 들면, 아세트산 및 p-톨루엔 설폰산(PTSA), 및 알콜, 예를 들면, 메탄올, 에탄올, 및 이소프로판올 또는 이들의 혼합물이 바람직한 반응 용매이다. 수소화 반응 온도는 -20 내지 +50℃이다.
산 처리에 의한 탈보호를 위해, 염산같은 무기산, 또는 트리플루오로아세트 산 또는 포름산 같은 유기산이 바람직하게 사용되며, 이들은 단독으로 또는 타 용매와 혼합하여 사용될 수 있다. 온도는 -20 내지 +50℃이다.
염기 처리에 의한 탈보호의 경우, 알칼리 금속 및 알칼리 토금속의 하이드록사이드가 물, 디옥산, 아세토니트릴, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 또는 이들의 혼합물과 같은 용매의 존재하에 바람직하게 사용되며; 온도는 -20 내지 +50℃이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "산소 보호 그룹"이란 -OH 그룹의 보호를 위해 통용되고 있고 당업자에 익히 공지되어 있는 것들 중에서 선택된, 예를 들면, -COR4(여기에서, R4는 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 그룹이다), 가능하게는 할로겐 원자로 치환되는 페닐, 벤질 및 벤조일로 이루어진 그룹 중에서 선택된 보호 그룹을 말하며; 산소 보호 그룹은 바람직하게는 아세틸이다.
본 발명에 따르면, 화학식 (I-A)의 글리코펩타이드 화합물은 화학식 (III-A)의 글리코사이드 유도체를, 활성화 반응에 의해 수득되거나 화학식 (I)의 화합물에 의해 동일 반응계에서 생성된 화학식 (II-A)의 활성화된 펩타이드 유도체와 반응시켜 수득될 수 있다. 따라서, 화학식 (1-A)의 바이사이클릭 글리코펩타이드 화합물의 제조 방법에 있어서, 글리코사이드 그룹은 선형 펩타이드에가 아니라, 바이사이클릭 펩타이드 화합물에 도입된다.
R1, R2 및 R3가 수소가 아닌 화학식 (III-A)의 화합물을 반응시킬 경우, 수득되는 화학식 (1-A)의 화합물은 촉매적 수소화에 의해 또는 보호 그룹 R1, R2 및 R3의 종류에 따라 산 또는 염기 처리에 의해 R1, R2 및 R3가 수소인 상응하는 화합물 로 전환시킬 수 있다.
본 발명의 방법에 바람직하게 사용되는 화학식 (III-A)의 글리코사이드 화합물은 문헌에 공지되어 있고 예를 들면, I. Shin et al., Tetrahedron Letters, 42 (2001) 1325-1328 and D. Macmillan et al., Organic Letters, Vol. 4, N°9, 2002에 각각 기재된 바와 같이 제조될 수 있는, 2-아세트아미드-2-데옥시-β-D-글루코피라노실아민 및 2-아세트아미드-3,4,6-트리-O-아세틸-2-데옥시-β-D-글루코피라노실아민으로 이루어진 그룹 중에서 선택된다.
하기 실시예 및 합성 반응식은 본 발명의 비-제한적인 예시를 제공하기 위하여 제시된다.
반응식 1은 화학식 (II)의 화합물을 출발물질로 하여, 화학식 (I-A)의 화합물을 유도하는 합성 경로를 표시하고, 반면에 반응식 2 내지 4는 화학식 (II)의 화합물을 제조하기 위한 3가지 상이한 방법을 보여준다.
일례로서 나타낸 보호 그룹은 아미노 말단을 위한 t-부톡시카보닐 (BOC) 및 벤질옥시카보닐(Z)과, 카복실 말단을 위한 메틸에스테르 및 t-부틸에스테르이다.
하기 반응식에서 각 화합물 밑에 부여된 번호는 실시예에서 화합물에 할당된 번호에 해당한다.
제조된 화합물에 대한 순도의 확인과 평가는 원소 분석, HPLC, 1H-NMR, IR 및 질량 분석에 의해 설정되었다.
화학식 (I-A)의 화합물의 합성
Figure 112005028845310-pct00015
방법 a) (단계식 방법)에서와 같은 화학식 (II)의 화합물의 합성
Figure 112005028845310-pct00016
방법 b) (방법 2+2+1)에서와 같은 화학식 (II)의 화합물의 합성
Figure 112005028845310-pct00017
방법 c) (방법 3+2)에서와 같은 화학식 (II)의 화합물의 합성
Figure 112005028845310-pct00018
실시예 1
Z-Asp(OH)-Trp-Phe-Dpr(H)-Leu-OMe (서열번호 1)의 제조
95% 포름산 중의, 실시예 15에 기재된 방법으로 제조된 Z-Asp(OtBu)-Trp-Phe-Dpr(BOC)-Leu-OMe의 72 mmol/ℓ 용액을 진공하에 4시간 동안 40℃로 가열한다.
반응 혼합물을 감압하에 증발시키고 잔사를 8:2 CH3CN-H2O 혼합물로 재용해시킨다.
현탁액을 15 내지 20℃로 냉각하고 20% NMM 수용액을 첨가하여 pH를 6으로 보정한다.
감압하에 아세토니트릴을 증발시키고 생성되는 현탁액을 여과한다.
수득된 백색 고체를 H2O로 세척하고 진공하에 30 내지 40℃에서 건조시켜 96.4%에 해당하는 수율을 얻었다.
1H-NMR dimethylsulfoxide-d6 (DMSO-d6) δ:
0.86 (2d; 6H); 1.47-1.75 (m; 3H); 2.32-2.68 (m; 2H); 2.79-3.55 (m; 6H); 3.63 (s; 3H); 4.25-4.65 (m; 5H); 4.99 (AB-Syst.; 2H); 6.91-7.43 (m; 14H); 7.48-7.60 (2d; 2H); 7.82 (b; 2H); 8.03-8.43 (4d; 4H); 10.83 (s; 1H); 12.35 (b; 1H).
실시예 2
Figure 112005028845310-pct00019
(서열번호 2)의 제조
2.2 당량의 NMM을 DMF 중의 Z-Asp(OH)-Trp-Phe-Dpr(NH2)-Leu-Ome의 24 mmol/ℓ용액에 가하고 5 내지 10분 후, 1.2 당량의 PyBOP를 가한다.
실온에서 2 내지 3시간 교반한 후, 용액을 유체 잔사가 수득될 때까지 감압하에 증발시킨 다음 NaHCO3의 0.5M 수용액에 적가한다.
생성되는 현탁액을 여과하고 수득되는 고체를 중성 pH가 성취될 때까지 4:6 DMF-H2O 혼합물에 이어 H2O로 세척한 다음 진공하에 30 내지 50℃에서 건조시켜 84.2%에 해당하는 수율을 얻었다.
1H-NMR (DMSO d6) δ:
0.83 (2d; 6H); 1.34-1.69 (m; 3H); 2.31-2.92 (m; 4H); 3.03-3.91 (m; 4H); 3.61 (s; 3H); 4.17-4.63 (m; 5H); 5.01 (AB-Syst.; 2H); 6.84-7.48 (m; 16H); 7.60 (d; 1H); 7.87 (d; 2H); 8.01 (t; 1H); 8.27 (d; 1H); 10.81 (s; 1H).
실시예 3
Figure 112005028845310-pct00020
(서열번호 3)의 제조
8:2 디옥산-H2O 혼합물 중의
Figure 112005028845310-pct00021
77 mmol/ℓ를 함유하는 혼탁 용액을 35℃로 가열하고 1.5N NaOH를 서서히 지속적으로 첨가함으로써 pH 12.0 내지 12.5를 유지시킨다.
반응 말미에, 혼탁 용액을 6N HCl을 첨가하여 pH 9로 만들고, 코-애쥬반트 (co-adjuvant) 여과층 상에서 여과시켜 청징화한 다음 6N HCl을 다시 첨가하여 pH 3으로 산성화시킨다.
용액을 여과성 용액이 수득될 때까지 감압하에 농축시킨다.
백색 여과 고체를 1:1 디옥산-H2O 혼합물에 이어 H2O로 세척한 다음 진공하에 30 내지 40℃에서 건조시켜, 97.7%에 해당하는 수율을 얻었다.
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
0.84 (2d; 6H); 1.42-1.76 (m; 3H); 2.29-3.48 (m; 7H); 3.85 (m; 1H); 4.10-4.65 (m; 5H); 5.00 (AB-Syst.; 2H); 6.86-7.47 (m; 16H); 7.55-8.36 (4d+m; 5H); 10.80 (d; 1H); 12.65 (b; 1H).
실시예 4
Figure 112005028845310-pct00022
(서열번호 4)의 제조
DMF 중의
Figure 112005028845310-pct00023
의 66 mmol/ℓ 용액을 실온에서 1 당량의 NMM 및 촉매량의 10% Pd/C 존재하에, 50% 습도에서 수소화시킨다.
6시간 동안 반응시킨 후, 현탁액을 여과하여 촉매를 제거하고 여액을 DMF로 희석시켜
Figure 112005028845310-pct00024
의 53 mmol/ℓ용액을 수득하고, 여기에 4 당량의 NMM 및 1.05 당량의 Z-Asp(OtBu)Osu를 가한다.
실온에서 5시간 교반 후, 혼합물을 잔사가 수득될 때까지 감압하에 증발시킨 다음 0.05 N H2SO4에 적가한다. 생성되는 현탁액을 여과하고 수득된 고체를 1:1 DMF-H2O 혼합물에 이어 H2O로 세척한 다음 진공하에 30 내지 40℃에서 93.7%에 해당하는 수율을 얻었다.
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
0.84 (2d; 6H), 1.35 (s; 9H); 1.40-1.70 (m; 3H); 2.20-3.94 (m; 10H); 4.10-4.81 (m; 6H); 4.92-5.12 (AB-Syst.; 2H); 6.74-7.57 (m; 17H); 7.71-8.35 (4d+1t; 5H); 10.70 (s; 1H); 12.70 (b; 1H).
실시예 5
Figure 112005028845310-pct00025
(서열번호 5)의 제조
DMF 중의
Figure 112005028845310-pct00026
의 47 mmol/ℓ 용액을 실온에서 1 당량의 DIPEA 및 촉매량의 10% Pd/C의 존재하에 50% 습도에서 수소화시킨다.
약 2시간 동안 반응시킨 후, 현탁액을 여과하여 촉매를 제거하고
Figure 112005028845310-pct00027
Figure 112005028845310-pct00028
의 19 mmol/ℓ 용액이 수득될 때까지 DMF로 희석한 다음 여기에 1.4 당량의 DIPEA 및 1.2 당량의 HATU를 첨가한다.
실온에서 30 내지 60분간 교반한 후, 용액을 감압하에 잔사가 수득될 때까지 증발시킨 다음 NaHCO3의 0.5M 수용액에 적가한다.
생성되는 현탁액을 여과하고 수득된 고체를 pH가 중성이 될 때까지 풍부한 H2O로 세척하고, 진공하에 30 내지 50℃에서 건조시켜 94.1%에 해당하는 수율을 수득하였다.
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
0.88 (2d; 6H); 1.38 (s; 9H); 1.31-1.72 (m; 3H); 2.33-2.99 (m; 6H); 3.20-3.63 (m; 3H); 3.87-4.62 (m; 7H); 6.75-7.50 (m; 13H); 8.04 (b; 1H); 8.56 (d; 1H); 8.76 (d; 1H); 9.18 (b; 1H); 10.84 (s; 1H).
실시예 6
Figure 112005028845310-pct00029
(서열번호 6)의 제조
90% 포름산 중의
Figure 112005028845310-pct00030
의 83 mmol/ℓ 용액을 진공하에 40℃에서 2시간 동안 가열한다.
반응 혼합물을 농밀한 잔사가 수득될 때까지 감압하에 증발시킨 다음 H2O에 재용해시킨다.
생성되는 현탁액을 여과하고 수득된 고체를 H2O로 세척하고 진공하에 30 내지 40℃에서 건조시킨 다음 최종적으로는 메탄올을 용출제로 하여, SephadexR LH-20 칼럼으로 정제한다.
314 g의 백색 고체가 수득된다(역가 95.2%, 수율 82.0%).
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
0.88 (2d; 6H); 1.31-1.77 (m; 3H); 2.32-3.73 (m; 9H); 3.80-4.65 (m; 7H); 6.82-7.51 (m; 13H); 7.94-9.19 (2d; 2b; 4H); 10.85 (s; 1H); 12.20 (s; 1H).
실시예 7
Figure 112005028845310-pct00031
(서열번호 7)의 제조
3 당량의 NMM, 1.2 당량의 HATU 및 2-아세트아미드-3,4,6-트리-O-아세틸-2- 데옥시-β-D-글루코피라노실아민을 10분 간격으로 DMF 중의
Figure 112005028845310-pct00032
의 0.24 mol/ℓ용액에 가한다.
0 내지 4℃에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 유체 잔사가 수득될 때까지 감압하에 증발시킨 다음 NaHCO3의 1% 수용액에 적가한다.
생성되는 현탁액을 여과하고 수득된 고체를 H2O로 세척하여 진공하에 30 내지 40℃에서 건조시킨 다음 EtOH-H2O 혼합물로부터 재결정하여 정제한다.
117 g의 백색 고체가 수득된다 (역가 96.0%, 수율 87.0%).
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
10.80 (d;1H); 8.90 (b; 1H); 8.72 (d; 1H); 8.47 (d; 1H); 8.46 (d; 1H); 8.08 (b; 1H); 7.84 (d; 1H); 7.43 (dd; 1H); 7.33 (dd; 1H); 7.24 (b; 1H); 7.23 (m; 2H); 7.16 (m; 3H); 7.14 (d; 1H); 7.06 (dt; 1H); 7.00 (d; 1H); 6.98 (dt; 1H); 6.90 (t; 1H); 5.18 (dd; 1H); 5.12 (dd; 1H); 4.82 (dd; 1H), 4.18 (dd; 1H); 3.96 (dd; 1H); 3.85 (ddd; 1H); 3.80 (ddd; 1H); 4.53 (m, 1H); 4.47 (m; 1H); 4.43 (m; 1H); 4.39 (m; 1H); 4.16 (m; 1H); 4.08 (m; 1H), 3.58 (m; 1H); 3.30 (m; 1H); 2.98 (m; 1H); 2.88 (m; 1H); 2.86 (m; 1H); 2.70 (m; 1H); 2.65 (m; 1H); 2.60 (m; 1H); 2.19 (m; 1H); 2.00 (s, 3H); 1.96 (s; 3H); 1.90 (s; 3H), 1.73 (s; 3H); 1.65 (m; 1H); 1.52 (m; 1H); 1.37 (m; 1H); 0.92 (d; 3H); 0.85 (d; 3H).
실시예 8
Figure 112005028845310-pct00033
(서열번호 8)의 제조
방법 a)
2 당량의 NMM 및 1.3 당량의 TBTU와 2-아세트아미드-2-데옥시-β-D-글루코피라노실아민을 10분 간격으로 DMF 중의
Figure 112005028845310-pct00034
(실시예 6에 기재된 바와 같이 제조)의 83 mmol/ℓ용액에 가한다.
실온에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 농밀한 유성 잔사가 수득될 때까지 감압하에 증발시킨 다음 2:8 아세토니트릴 - t-부톡시메탄 (TBME) 혼합물로 재용해시킨다. 생성되는 현탁액을 30분간 실온에서 격렬하게 교반한 다음 여과한다.
수득된 고체를 TBME로 세척하고, 진공하에 25 내지 30℃에서 건조시킨 다음 최종적으로 아세토니트릴과 물로 이루어진 혼합물을 용출제로 사용하여 예비 HPLC로 정제한다.
151 g의 백색 고체가 수득된다(역가 93.0%, 수율 89.3%).
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
0.85 (d; 3H); 0.92 (d; 3H); 1.36 (m; 1H); 1.51 (m; 1H); 1.65 (m; 1H); 1.76 (s; 3H); 2.16 (dd; 1H); 2.57 (dd; 1H); 2.63 (dd; 1H); 2.67 (dd; 1H); 2.83 (dd; 1H); 2.88 (dd; 1H); 2.93 (m; 1H); 3.04-3.09 (m; 2H); 3.27-3.32 (m; 2H); 3.42 (m; 1H); 3.50 (ddd + b; 2H); 3.65 (dd; 1H); 3.96 (b; 1H); 4.09 (m; 1H); 4.12 (m; 1H); 4.35 (m; 1H); 4.43 (m; 1H); 4.50 (m; 1H); 4.53 (m + t; 2H); 4.81 (dd; 1H); 4.94 (d; 1H); 4.98 (d; 1H); 6.91 (b; 1H); 6.98 (t + b; 2H); 7.06 (t; 1H); 7.14-7.17 (m; 4H); 7.24 (t; 2H); 7.27 (b; 1H); 7.33 (d; 1H); 7.42 (d; 1H); 7.77 (d; 1H); 8.05 (b; 1H); 8.10 (d; 1H); 8.51 (d; 1H); 8.77 (d; 1H); 9.00 (b; 1H); 10.84 (d; 1H).
방법 b)
MeOH 중의 0.04 당량의 0.1N NaOMe를 실시예 7에 기재된 바와 같이 제조된 MeOH 중의
Figure 112005028845310-pct00035
의 0.89 mol/ℓ 용액에 가한다.
실온에서 3시간 동안 교반한 후, pH를 6.5 내지 7로 보정하고 AmberlystR 15를 가한다. 수지를 제거한 뒤에, 용액을 잔사가 수득될 때까지 감압하에 농축시킨 다음 TBME로 희석한다.
생성되는 현탁액을 여과하고 수득된 백색 고체를 TBME로 세척하고 진공하에 35 내지 40℃에서 건조시켜 94.8%에 해당하는 수율을 얻었다.
실시예 9
Z-Dpr(BOC)-Leu-OMe의 제조
방법 a)
1.2 당량의 NMM을 DMF 중의 Z-Dpr(BOC)-OH의 0.66 mol/ℓ 용액에 가한다. 용액을 -25℃로 냉각하고 온도를 -20℃ 이하로 유지하면서 1 당량의 IBCF를 적가한다.
약 10분 후에, DMF 중의 1 당량의 H-Leu-OME HCl과 NMM을 함유하는 0.78 mol/ℓ 예비 냉각 용액을 적가한다. 이 때, 온도는 항상 -15℃ 이하를 유지한다.
1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 NaHCO3의 0.5M 수용액 중으로 적가한다.
생성되는 현탁액을 여과하고 수득된 고체를 pH가 중성이 될 때까지 H2O, 0.05M H2SO4 및 H2O로 순차적으로 세척하고 진공하에 30 내지 50℃에서 건조시켜 89.0%에 해당하는 수율을 얻었다.
융점 122-125℃; 1H-NMR (DMSO-d6)δ:
0.85 (2d; 6H); 1.37 (s; 9H); 1.40-1.71 (m; 3H); 3.01-3.36 (m; 2H); 3.61 (s; 3H); 4.06-4.37 (m; 2H); 5.03 (s; 2H); 7.35 (s; 5H); 6.66 (t; 1H); 7.20 (d; 1H); 8.29 (d; 1H).
방법 b)
1 당량의 DCC를 1 당량의 HOSu를 함유하는 DMF 중의 Z-Dpr(BOC)-OH의 0.35 mol/ℓ 용액에 가하고 0 내지 5℃로 냉각한다. 혼합물을 실온이 되게 한 다음 1시간 동안 교반한다. DCC를 여과 제거하고 투명한 여액에 1.2 당량의 H-Leu-Ome HCl과 2.6 당량의 NMM을 가한다. 실온에서 2 내지 3시간 동안 교반한 후, 혼합물을 0.5N NaHCO3로 희석한 다음 -5℃로 냉각시킨다.
생성되는 현탁액을 여과하고 수득된 고체를 0.5N NaHCO3, 2:1 H2O-DMF 혼합물 및 물로 순차적으로 세척한 다음, 진공하에 30 내지 40℃에서 건조시켜 93%에 해당하는 수율을 얻었다.
실시예 10
H-Dpr(BOC)-Leu-OMe의 제조
1 당량의 PTSA를 함유하는 MeOH 중의 Z-Dpr(BOC)-Leu-OMe의 0.14 mol/ℓ용액을 실온에서 촉매량의 10% Pd/C의 존재하에 50% 습도에서 수소화시킨다.
약 2시간 동안 반응시킨 후, 현탁액을 여과하여 촉매를 제거하고 여액을 DMF로 희석한다.
MeOH와 H2O를 감압하에 완전히 증발시키고 디펩타이드를 함유하는 잔류 DMF 용액을 후속 커플링을 위해 사용한다.
실시예 11
Z-Phe-Dpr(BOC)-Leu-OMe의 제조
Z-Phe-OH를 사용하여 실시예 9에 기재된 방법에 따라, 실시예 10으로부터의 디펩타이드 H-Dpr(BOC)-Leu-OMe로부터 화합물을 제조하였다.
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
0.86 (2d; 6H); 1.38 (s; 9H); 1.40-1.74 (m; 3H); 2.73-3.02 (m; 2H); 3.10-3.41 (m; 2H); 3.62 (s; 3H); 4.17-4.46 (m; 3H); 4.94 (AB-Syst.; 2H); 7.18-7.39 (m; 10H); 6.52 (t; 1H); 7.52 (d; 1H); 8.13 (d; 1H); 8.25 (d, 1H).
실시예 12
H-Phe-Dpr(BOC)-Leu-OMe의 제조
용매로서 DMF를 사용하여 실시예 10의 방법에 따라, 실시예 11로부터의 보호된 유도체로부터 화합물을 제조하였다.
실시예 13
Z-Trp-Phe-Dpr(BOC)-Leu-OMe(서열번호 9)의 제조
실시예 12의 트리펩타이드로부터 실시예 9의 방법 및 Z-Trp-OH를 사용하거나, 각각 실시예 17와 10에 기재된 바와 같이 수득한 두 디펩타이드 Z-Trp-Phe-OH와 H-Dpr(BOC)-Leu-OMe를 커플링함으로써 화합물을 제조하였다.
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
0.86 (2d; 6H); 1.37 (s; 9H); 1.40-1.76 (m; 3H); 2.73-3.41 (m; 6H); 3.62 (s; 3H), 4.16-4.67 (m; 4H); 4.93 (AB-Syst.; 2H); 6.89-7.65 (m; 16H); 6.55 (t; 1H); 8.07 (d; 1H); 8.11 (d; 1H); 8.29 (d; 1H);10.79 (s; 1H).
실시예 14
H-Trp-Phe-Dpr(BOC)-Leu-OMe(서열번호 10)의 제조
용매로서 NMP를 사용하여 실시예 10에 주어진 방법에 따라, 실시예 13의 보호된 유도체로부터 화합물을 수득하였다.
실시예 15
Z-Asp(OtBu)-Trp-Phe-Dpr(BOC)-Leu-OMe(서열번호 11)의 제조
방법 a)
1 용적의 CH3CN, 1.5 당량의 DIPEA 및 1.15 당량의 Z-Asp(OtBu)-OSu를 수소화 반응으로부터 유도된, NMP 중의 H-Trp-Phe-Dpr(BOC)-Leu-OMe의 0.16 mol/ℓ 용 액에 가한다. 실온에서 3 내지 4시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 5℃로 냉각하고 H2O로 희석한다. 생성되는 현탁액을 여과하고 수득되는 고체를 3:7 CH3CN-H2O 혼합물 및 H2O로 세척한 다음 진공하에 30 내지 50℃에서 건조시켜 90%에 해당하는 수율을 얻었다.
방법 b)
1 당량의 DIPEA, 1.1 당량의 TBTU 및 5분 후에, 수소화 반응으로부터 유도된 DMF 중의 0.25 mol/ℓ H-Dpr(BOC)-Leu-OMe 용액 (실시예 10) 1 당량을 -5℃로 냉각한 DMF 중의 Z-Asp-(OtBu)-Trp-Phe-OH의 0.22 mol/ℓ용액에 온도를 -5℃ 이하로 유지하면서 가한다.
약 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 NaHCO3의 0.5M 수용액으로 희석한다.
생성되는 현탁액을 여과하고 수득된 고체를 H2O, H2O 중의 3:4 DMF-0.5M NaHCO3 혼합물 및 H2O로 세척한 다음 진공하에 30 내지 40℃에서 건조시켜 84.4%의 수율을 얻었다.
융점 215-218℃; 1H-NMR(DMSO-d6)δ:
0.86 (2d; 6H); 1.34 (s; 9H); 1.37 (s; 9H), 1.40-1.72 (m; 3H); 2.23-2.67 (m; 2H); 2.71-3.39 (m; 6H); 3.62 (s; 3H); 4.23-4.58 (m; 5H); 5.01 (AB-Syst., 2H); 6.89-7.58 (m; 16H); 6.50 (t; 1H); 7.87-8.29 (4d; 4H); 10.78 (s; 1H).
실시예 16
Z-Trp-Phe-OMe의 제조
실시에 9의 방법에 따라 두 아미노산 Z-Trp-OH와 H-Phe-OMe를 커플링시켜 화합물을 제조하였다.
1H-NMR (CDCl3) δ:
2.88-2.98 (m; 2H); 3.11 (dd; 1H); 3.32 (dd; 1H); 3.62 (s; 3H); 4.40-4.58 (m; 1H); 4.16-4.30 (m; 1H); 5.11 (s; 2H); 5.45 (d; 1H), 6.11 (d; 1H); 6.72-6.85 (m; 2H), 6.92-7.46 (m; 12H); 7.67 (d; 1H); 8.03 (s; 1H).
실시예 17
Z-Trp-Phe-OH의 제조
실시예 3에 기재된 방법에 따라, 실시예 16의 메틸에스테르로부터 화합물을 제조하였다.
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
2.70-3.15 (m; 4H); 4.20-4.36 (m; 1H); 4.38-4.55 (m; 1H); 4.92 (s; 2H); 6.85- 7.42 (m; 15H); 7.63 (d; 1H); 8.26 (d; 1H); 10.81 (s; 1H); 12.30 (b; 1H).
실시예 18
H-Trp-Phe-OH의 제조
용매로서 아세트산을 사용하여, 실시예 10의 방법에 따라, 실시예 17의 보호된 유도체로부터 화합물을 제조하였다.
실시예 19
Z-Asp(OtBu)-Trp-Phe-OH의 제조
실시예 18의 디펩타이드로부터 실시예 15의 방법(방법 a)에 따라 화합물을 제조하였다.
1H-NMR (DMSO-d6) δ:
1.35 (s; 3H); 2.21-2.67 (m; 2H); 2.71-3.18 (m; 4H); 4.22-4.58 (m; 3H); 5.00 (AB-Syst.; 2H); 6.87-7.43 (m; 14H); 7.55 (m; 2H); 7.94 (d; 1H); 8.17 (d; 1H); 10.80 (s; 1H); 12.25 (b; 1H).
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Claims (25)

  1. 하기의 단계 1) 내지 7)을 포함하는, 화학식 (I)의 바이사이클릭 펩타이드 화합물의 제조 방법:
    Figure 112011021555385-pct00036
    1) 화학식 (II)의 선형 펜타펩타이드를 용매의 존재하에서 탈보호시켜 화학식 (III)의 화합물을 생성하는 단계;
    Figure 112011021555385-pct00037
    (상기식에서, A1 및 A2는 서로 상이한 두 질소 보호 그룹이고; R5 및 R6는 서로 상이하고, 벤질옥시 및 저급 알킬옥시 그룹(여기에서, 알킬 부위는 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함한다) 중에서 선택된다)
    2) 단계 1)로부터의 화학식 (III)의 화합물을 용매와 커플링제의 존재하에 분자내 고리화하여 화학식 (IV)의 화합물을 생성하는 단계;
    Figure 112011021555385-pct00038
    (상기식에서, R5는 상기에서 정의한 바와 같다)
    3) 단계 2)로부터의 화학식 (IV)의 화합물을 용매의 존재하에 탈보호시켜 화학식 (V)의 화합물을 생성하는 단계;
    Figure 112011021555385-pct00039
    (상기식에서, R5는 상기에서 정의한 바와 같다)
    4) 단계 3)로부터의 화학식 (V)의 화합물과 화학식 (VIa)의 보호된 아미노산을 용매의 존재하에 커플링시켜 화학식 (VII)의 화합물을 생성하는 단계;
    Figure 112011021555385-pct00040
    (상기식에서, A3는 질소 보호 그룹이고; R7는 벤질옥시 및 저급 알킬옥시 그룹(여기에서, 알킬 부위는 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함한다) 중에서 선택되며; R8은 카복실 그룹에 대한 활성화 절차로부터 유도되는 잔기이다)
    5) 단계 4)로부터의 화학식 (VII)의 화합물을 용매의 존재하에 탈보호시켜 화학식 (VIII)의 화합물을 생성하는 단계;
    Figure 112011021555385-pct00041
    (상기식에서, R7은 상기에서 정의한 바와 같다)
    6) 용매와 커플링제의 존재하에서, 단계 5)로부터의 화학식 (VIII)의 화합물을 분자내 고리화하여 화학식 (IX)의 바이사이클릭 화합물을 생성하는 단계:
    Figure 112011021555385-pct00042
    (상기식에서, R7은 상기에서 정의한 바와 같다)
    7) 단계 6)로부터의 화학식 (IX)의 바이사이클릭 화합물을 용매의 존재하에서 탈보호시켜 화학식 (I)의 화합물을 수득하는 단계.
    Figure 112011021555385-pct00043
    (상기식에서, R7은 상기에서 정의한 바와 같다)
  2. 제 1 항에 있어서,
    - 화학식 (X)의 유도체를 용매의 존재하에 화학식 (XI)의 Leu 에스테르와 반응시켜, 디펩타이드 A4-Dpr(A2)-Leu-R5를 수득하는 단계;
    Figure 112011021555385-pct00044
    (상기식에서, R5는 제 1 항에서 정의한 바와 같다)
    - 디펩타이드 A4-Dpr(A2)-Leu-R5를 탈보호시켜 모노탈보호된 디펩타이드 H-Dpr(A2)-Leu-R5를 수득하는 단계;
    - 화학식 (II)의 화합물이 수득될 때까지, 모노탈보호된 디펩타이드 H-Dpr(A2)-Leu-R5를 후속 아미노산 Phe의 활성화된 에스테르, 연속하여 Trp 및 Asp와 커플링시키는 단계에 따라, 화학식 (II)의 선형 펩타이드가 질소 상에서 보호되고 별도로 또는 동일 반응계에서 생성된 화학식 (X)의 아미노산 Dpr의 유도체를 출발물질로 하여 아미노산의 순차적 커플링 방법에 의해 수득되는 방법.
    Figure 112011021555385-pct00045
    상기식에서,
    A2 및 A4는 서로 상이하며, 질소 보호 그룹이고;
    R9는 활성화 절차로부터 유도되는 잔기, 벤질옥시카보닐, 알킬 부위에 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함하는 알콕시카보닐, 및 석시니미딜로 이루어진 그룹 중에서 선택된 잔기이다.
  3. 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 화학식 (II)의 선형 펩타이드가 하기 단계를 포함하는 합성 방법에 의해 수득되는 방법:
    - 제 2 항에서 기재된 바와 같이 수득한 모노탈보호된 디펩타이드 H-Dpr(A2)-Leu-R5를, 별도로 제조되거나 동일 반응계(in situ)에서 생성된 질소 상의 보호된 Trp의 활성화된 에스테르를 Phe 에스테르와 커플링시킨 다음 후속하여 에스테르 그룹을 가수분해함으로써 별도로 제조되거나 동일 반응계에서 생성된 화학식 (XII)의 디펩타이드의 활성화 유도체와 커플링시켜 테트라펩타이드 A5-Trp-Phe-Dpr(A2)-Leu-R5를 수득하는 단계;
    A5-Trp-Phe-OH (XII)
    (상기식에서, A2 및 A5는 서로 상이하며, 질소 보호 그룹이다)
    - 테트라펩타이드 A5-Trp-Phe-Dpr(A2)-Leu-R5를 Trp의 질소에 부착된 그룹으로부터 탈보호시키는 단계;
    - 탈보호된 테트라펩타이드를 화학식 (VIb)의 화합물과 커플링시키는 단계:
    Figure 112011021555385-pct00046
    (상기식에서, A1, R6 및 R8은 제 1 항에서 정의한 바와 같다).
  4. 제 1 항에 있어서, 화학식 (II)의 선형 펩타이드가 상기 화학식 (XII)의 화합물로부터 질소 보호 그룹을 제거한 다음, 상기 화학식 (VIb)의 화합물과 커플링시키고, 이어서 제 2 항에서 기재된 바와 같이 제조된 모노 탈보호된 디펩타이드 H-Dpr-(A2)-Leu-R5와 추가로 커플링시켜 수득된, 트리펩타이드 A1-Asp(R6)-Trp-Phe-OH를 커플링시키는 단계를 수반하는 3+2형 합성법에 의해 수득되는 방법.
  5. 제 1 항에 있어서, 질소 보호 그룹이 벤질옥시카보닐, 및 알킬 부위가 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함하는 알콕시카보닐로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 방법.
  6. 제 5 항에 있어서, 질소 보호 그룹이 t-부톡시카보닐 및 벤질옥시카보닐 중에서 선택되는 방법.
  7. 제 1 항에 있어서, R8 그룹은 벤질옥시카보닐, 알킬 부위에 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹을 포함하는 알킬옥시카보닐, 석시니미딜, 할로겐으로 치환되는 벤조트리아졸 및 아자벤조트리아졸로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 방법.
  8. 제 7 항에 있어서, 직쇄 또는 측쇄형 C1-C4 그룹이 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 이소프로필 및 t-부틸로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 방법.
  9. 하기의 단계 1A) 및 2A)를 포함하는, 화학식 (I-A)의 바이사이클릭 글리코펩타이드 화합물의 제조 방법:
    Figure 112011021555385-pct00047
    (상기식에서, R1, R2 및 R3는 서로 동일하거나 상이하고, 수소 또는 산소 보호 그룹일 수 있다)
    1A) 화학식 (I)의 바이사이클릭 펩타이드 화합물을 커플링제로 활성화시켜 화학식 (II-A)의 유도체를 수득하는 단계;
    Figure 112011021555385-pct00048
    (상기식에서, R은 할로겐으로 치환되는 벤조트리아졸, 아자벤조트리아졸 및 석시니미딜 중에서 선택된다); 및
    2A) 단계 1A)로부터 유도되는 화학식 (II-A)의 화합물을 용매의 존재하에 화학식 (III-A)의 글리코사이드 유도체와 반응시키는 단계:
    Figure 112011021555385-pct00049
    (상기식에서, R, R1, R2 및 R3는 상기에서 정의한 바와 같다)
  10. 제 9 항에 있어서, R1, R2 및 R3가 H가 아닌 화학식 (I-A)의 화합물을 용매의 존재하에 탈보호 반응에 의해 R1 = R2 = R3 = H인 화학식 (I-A)의 상응하는 화합물 로 전환시키는 방법.
  11. 제 9 항에 있어서, 산소 보호 그룹이 -COR4(여기에서, R4는 탄소수 1 내지 4의 직쇄 또는 측쇄 알킬 그룹이다), 할로겐 원자로 치환되는 페닐, 벤질 및 벤조일로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 방법.
  12. 제 11 항에 있어서, C1-C4 알킬 그룹이 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 이소프로필 및 t-부틸로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 방법.
  13. 제 12 항에 있어서, C1-C4 알킬 그룹이 메틸인 방법.
  14. 제 9 항에 있어서, 화학식 (III-A)의 글리코사이드 유도체가 2-아세트아미드-2-데옥시-β-D-글루코피라노실아민 및 2-아세트아미드-3,4,6-트리-O-아세틸-2-데옥시-β-D-글루코피라노실아민으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 방법.
  15. 제 9 항에 있어서, 화학식 (I)의 바이사이클릭 펩타이드 화합물이 제 1 항에서 기재한 바와 같이 제조되는 방법.
  16. 삭제
  17. 삭제
  18. 제 1 항 또는 제 9 항에 있어서, 커플링 반응이 3급 아민의 존재하에 유기 용매 중, -20 내지 +50℃의 온도에서 수행되는 방법.
  19. 제 18 항에 있어서, 3급 아민이 N-메틸모폴린, 트리에틸아민 및 디이소프로필에틸아민으로 이루어진 그룹 중에서 선택되고, 유기 용매는 에틸 아세테이트, 디메틸포름아미드 및 N-메틸피롤리돈으로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 방법.
  20. 삭제
  21. 삭제
  22. 제 1 항 또는 제 10 항에 있어서, 탈보호 반응은 -20 내지 +50℃의 온도에서, 순수한 산으로 또는 타 용매와 혼합된 산으로의 산 처리에 의해 수행되는 방법.
  23. 제 22 항에 있어서, 산은 염산, 트리플루오로아세트산 및 포름산 중에서 선택되는 방법.
  24. 제 1 항 또는 제 10 항에 있어서, 탈보호 반응은 -20 내지 +50℃의 온도에서, 용매의 존재하에 염기 화합물로의 처리에 의해 수행되는 방법.
  25. 제 24 항에 있어서, 염기 화합물은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속의 하이드록사이드 중에서 선택되고, 용매는 물, 디옥산, 아세토니트릴, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹 중에서 선택되는 방법.
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