KR100884681B1 - 미감수를 발효시킨 유산균용액의 제조 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 미감수(쌀뜨물)를 정치 침전하여 상등액은 버리고 농축액만 취하여 미감수 농축액을 얻은 다음, 이를 고온고압으로 멸균하고, 김치로부터 분리한 유산균을 접종하여 유산균이 1.0 × 107cfu/㎖ ∼ 9.0 × 108cfu/㎖ 정도가 되도록 증식시켜 유산균 배양액을 얻은 후, 유산균의 배양액을 미감수 농축액에 대하여 1 ∼ 10중량% 접종하고 확대 배양하여 유산균 혈청을 제조하고, 유산균 혈청을 10 ∼ 1,000배의 미감수에 접종하여 2 ∼ 4일 발효시켜 미감수를 발효시킨 유산균 용액을 얻어 인체에 안전하면서 상시 음용할 수 있으며, 알코올탈수소효소의 활성 증가에 영향을 미치므로 숙취 해소에 응용 가능할 뿐만 아니라 알코올 분해에 관련이 있는 산업적 용도로 사용이 가능하도록 하는 효과를 얻을 수 있는 미감수를 발효시킨 유산균 용액의 제조 방법에 관한 것이다.
미감수, 유산균, 유산균 용액, 숙취 해소

Description

미감수를 발효시킨 유산균용액의 제조 방법{The preparation method of lactic acid fermentation broths using rice washouts}
본 발명은 미감수를 발효시킨 유산균 용액의 제조 방법에 관한 것으로, 미감수(쌀뜨물)를 정치 침전하여 상등액은 버리고 농축액만 취하여 미감수 농축액을 얻은 다음, 이를 고온고압으로 멸균하고, 김치로부터 분리한 유산균을 접종하여 유산균이 1.0 × 107cfu/㎖ ∼ 9.0 × 108cfu/㎖ 정도가 되도록 증식시켜 유산균 배양액을 얻은 후, 유산균의 배양액을 미감수 농축액에 대하여 1 ∼ 10중량% 접종하고 확대 배양하여 유산균 혈청을 제조하고, 유산균 혈청을 10 ∼ 1,000배의 미감수에 접종하여 2 ∼ 4일 발효시켜 미감수를 발효시킨 유산균 용액을 얻어 인체에 안전하면서 상시 음용할 수 있으며, 알코올탈수소효소의 활성 증가에 영향을 미치므로 숙취 해소에 응용 가능할 뿐만 아니라 알코올 분해에 관련이 있는 산업적 용도로 사용이 가능하도록 하는 효과를 얻을 수 있는 미감수를 발효시킨 유산균 용액의 제조 방법에 관한 것이다.
음용한 알코올은 위에 들어가서 음식물과 혼합되고, 여기에서 약 20% 정도는 위점막이 알코올을 흡수하고, 일부는 점막세포가 있는 알코올탈수소효소로 분해된다. 나머지 약 80%는 장관에서 흡수되고 혈중(문맥)에 들어간 알코올은 간에 도달하여 대부분은 간에서 대사되어 아세트알데히드로되고 곧 초산으로 되며, 최종적으로 이산화탄소와 물로 되며, 남은 일부는 호흡으로 또는 오줌으로 배설된다. 간에는 알코올탈수소효소가 다량 있어서 일반인에게는 알코올의 약 80%를 대사시키며, 나머지 20%는 마이크로솜 에탄올산화계(MEOS)라 불리는 경로에 의하여 처리된다. 술을 마시고 다음날 아침 알코올이 남지 않게 마시려면 8시간 정도로 처리 가능한 량, 즉 소주잔으로 2 ∼ 3잔을 넘지 않아야 된다. 그러나, 술을 많이 마시면 상황은 달라져서 알코올의 대사속도가 점점 적응하여 빨라지기 때문에 술에 잘 취하지 않게 되며, 이것은 알코올탈수소효소으 활성이 매우 촉진되어 있다는 것을 의미하고, 또 마이크로솜 에탄올산화계의 양이 한게를 넘는 것을 뜻한다. 마이크로솜 에탄올산화게는 알코올 이외의 약물의 대사에 작용하는 데, 술을 많이 마시면 마취약, 해열제, 진통제 등의 약효가 잘 나타나지 않는 원인이 된다. 또, 알코올과 약을 동시에 음용하면 약의 대사가 지연되고, 특히 수면제, 경구당뇨병약, 항응고약과 알코올을 병용하면 상기와 같은 약의 대사가 억제되기 때문에 생각지 않은 혼수, 저혈당, 출혈 등의 부작용이 출현하기 때문에 매우 위험하다. 알코올이 대사되면 아세트알데히드라 불리는 유독물질이 생기는 데, 이것이 숙취에 매우 나쁜 영향을 미치며, 안면 홍조, 두통 구토의 원인을 제공한다. 아세트알데히드를 대사시키는 아세트알데히드탈수소효소(ALDH)는 아세트알데히드가 고농도가 되지 않으면 작 동하지 않는 1형과 저농도에도 작동하는 2형이 있는 데, 동양인의 경우 약 50% 정도는 2형이 유전적으로 결손되어 있어서 동량의 알코올을 음용할 경우 2형 결손의 사람이 아세트알데히드 농도가 급상승하여 소량의 알코올을 먹어도 곧 얼굴이 붉어지고 심하면 구토까지 일어난다. 이와 같은 사람은 무리해서 마실 경우 최악의 경우 사망에 이를 수도 있다. 그러나, 소량의 음주는 이른바 관동맥경화를 지연시키고 심근경색을 예방할 수도 있으며, 알코올은 혈관을 확장하는 역할을 하기 때문에 협심증과 같이 혈관이 일시적으로 협착하는 경우에 소량의 알코올이 유효하다. 또한, 알코올은 뇌신경세포의 파괴를 촉진하는 데, 특히 세포막을 변성시켜 막에 존재하는 자극이나 정보의 수용체를 변화시키고, 뇌의 발육이 장해되어 지능력, 기억력, 계산력, 판단력 등을 저하시키는 원인이 되며, 장기간에는 치매, 보행장해까지 유발시킬 수 있고 특히 세포 분열이 많은 장기(정소, 난자)의 호르몬 합성을 저해하는 것이 알려져 있어서 발육이 왕성한 젊은이의 음주는 특히 주의해야 한다.
이러한 숙취를 해소하기 위하여 종래에는 드링크 형태의 제품이 개발되어 시판되고 있다. 예를 들어, 국내 특허 제1081168호에는 오리나무, 마가목, 여정실 및 갈근을 배합하여 제조한 천연 차가 기재되어 있으며, 국내공개특허 제2001-0019767호에는 갈화, 갈근, 감초, 백출, 진피, 택사, 구기자 및 생강을 위주로 하는 제품이 언급되어 있다. 이와 같이 서로 다른 여러 가지 종류의 약재를 배합하여 독특한 특성을 지닌 숙취 해소용 음료를 개발하였으나, 이들의 약재를 혼합할 경우 에스트로젠 유사 화합물의 혼입 가능성이 상존하는 만큼 매우 조심성 있는 접근이 필요하다.
상기와 같은 기존의 숙취해소를 위한 음료의 경우는 몇 가지의 약재를 사용한 상승효과로 혈중 알코올의 농도를 신속히 저하시키려는 것이었지만, 이것을 상시 음용할 경우에는 독성의 문제가 야기될 우려가 있기 때문에 단일물질로 분리된 소재를 발견하거나 독성의 문제가 야기되지 않는 천연물질이나 복합물의 개발이 요구되었다.
또한, 국내공개특허 제2001-0069936호에는 쌀뜨물과 콩가루를 1:1의 중량비로 혼합한 혼합액에 오가피, 당귀, 천궁, 진피, 감초를 담구어서 8일간 방치하여 제조한 숙취 해소용 건강식품을 기재하고 있으나 한약재가 지닌 고유의 냄새와 독성, 그리고 두통을 발생시킬 수 있는 성질 등을 억제시키기 위하여 홍삼, 구기자, 오미자, 동충하초, 영지, 꿀, 녹용, 갈근, 산수유, 인삼, 생강, 대추 등의 추가 약제를 일정 비율로 첨가하는 것이다.
한편, 쌀을 포함하는 대부분의 곡류는 최종 소비가 이루어지기 전에 미강 또는 유해 미생물의 제거 및 식미의 향상, 보존성 증대 등의 목적으로 세정을 하게 된다. 또한, 식품산업에서의 곡류의 2차 가공이나 대형 급식 시설에서 대량으로 발생되는 쌀뜨물은 폐수처리에 따른 막대한 비용을 발생시키기도 하며, 제대로 된 처리없이 방류시에는 하천과 소호에 부영양화를 야기하여 극심한 환경오염을 유발하고 있는 실정이지만 쌀뜨물을 포함한 곡류의 세정 부산물은 그 풍부한 영양적 특성 등으로 인하여 쉽게 부패균에 의해 변폐되어 효용성을 갖기 어려웠다.
그러나, 본 발명자 등의 선출원 특허 제2003-0054215호에는 안전성이 확보되어 상시 음용할 수 있으며, 환경오염을 유발하는 미감수를 이용하므로서 친환경적 이고, 알코올탈수소효소의 활성증가에 영향을 미치므로 숙취 해소에 응용 가능할 뿐만 아니라 알코올 분해에 관련이 있는 산업적 용도로 사용이 가능한 미감수를 발효시킨 유산균 용액이 기재되어 있다.
그러나, 상기의 특허에서는 미감수 농축액을 일부 통기성의 초벌토기에 10 ∼ 15㎝ 높이로 넣고 통기성이 있는 막으로 덮어 5 ∼ 6일 방치하여 대기중의 토착 호기성 유산균이 1.0 × 107cfu/㎖ ∼ 9.0 × 108cfu/㎖ 정도가 되도록 증식시켜 사용하고 있어, 기후의 변화, 온도의 변화, 지역적 특이성 등으로 인하여 토착 호기성 유산균의 종이 상이하여짐에 따라 균질한 제품을 얻기 어렵고, 미감수를 그대로 사용하기 때문에 유해 미생물의 잔존 가능성이 있을 뿐만 아니라 토착 호기성 유산균 외에 유해 미생물의 생육 가능성도 있어 안전성이 결여되는 등의 문제점이 있었다.
따라서, 본 발명의 목적은 안전성이 확보되어 상시 음용할 수 있으며, 환경오염을 유발하는 미감수를 이용하므로서 친환경적이고, 알코올탈수소효소의 활성증가에 영향을 미치므로 숙취 해소에 응용 가능할 뿐만 아니라 알코올 분해에 관련이 있는 산업적 용도로 사용이 가능한 미감수를 발효시킨 유산균 용액의 제조 방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 목적에 부합되도록 하는 미감수를 발효시킨 유산균 용액을 함유하는 조성물을 제공하는 데 있다.
상기 목적들 뿐만 아니라 용이하게 표출될 수 있는 또 다른 목적들을 달성하기 위하여 본 발명에서는 미감수(쌀뜨물)를 정치 침전하여 상등액은 버리고 농축액만 취하여 미감수 농축액을 얻은 다음, 이를 고온고압으로 멸균하고, 김치로부터 분리한 유산균을 접종하여 유산균이 1.0 × 107cfu/㎖ ∼ 9.0 × 108cfu/㎖ 정도가 되도록 증식시켜 유산균 배양액을 얻은 후, 유산균의 배양액을 미감수 농축액에 대하여 1 ∼ 10중량% 접종하고 확대 배양하여 유산균 혈청을 제조하고, 유산균 혈청을 10 ∼ 1,000배의 미감수에 접종하여 2 ∼ 4일 발효시켜 미감수를 발효시킨 유산균 용액을 얻었다.
본 발명에 따른 미감수를 발효시킨 유산균 용액의 제조방법은 인체에 안전하면서 상시 음용할 수 있으며, 알코올탈수소효소의 활성 증가에 영향을 미치므로 숙취 해소에 응용 가능할 뿐만 아니라 알코올 분해에 관련이 있는 산업적 용도로 사용이 가능하도록 하는 효과가 있으며 균질하고 안전성이 있는 미감수를 발효시킨 유산균 용액을 용이하게 제조할 수 있다.
본 발명을 좀 더 구체적으로 설명하면 다음과 같다.
본 발명에 따른 미감수를 발효시킨 유산균 용액의 제조 방법은 미감수(쌀뜨물)를 정치 침전하여 상등액은 버리고 농축액만 취하여 미감수 농축액을 얻은 다음, 이를 고온고압으로 멸균하고, 김치로부터 분리한 유산균을 접종하여 유산균이 1.0 × 107cfu/㎖ ∼ 9.0 × 108cfu/㎖ 정도가 되도록 증식시켜 유산균 배양액을 얻은 후, 유산균의 배양액을 미감수 농축액에 대하여 1 ∼ 10중량% 접종하고 확대 배양하여 유산균 혈청을 제조하고, 유산균 혈청을 10 ∼ 1,000배의 미감수에 접종하여 2 ∼ 4일 발효시키는 것으로 특징지워진다.
먼저, 쌀을 씻어낸 쌀뜨물을 상온에서 약 2시간 이상 정치 침전하여 상등액은 버리고 농축액만을 취하여 미감수 농축액은 얻는다.
상기에서 얻은 미감수 농축액은 각종 미생물들이 그대로 혼합되어 있는 것이므로 추후에 유산균을 배양시 잡균에 의하여 오염될 가능성이 있으므로, 이를 고온 고압으로 멸균한다. 즉, 오토클레이브에 미감수 농축액을 넣은 다음, 1kg/㎠(약 121℃)의 압력으로 15 ∼ 20분간 가열하여 내열성 포자까지도 완전 멸균되어 무균 상태인 미감수 농축액을 얻고, 이를 무균 상태로 보관한다.
별도로 제조일로부터 3일이 경과한 3㎏ 용량의 종가집 포기 김치(대상 FNF(주) 제품)를 20℃에서 20시간 유지시킨 다음, 포장지를 개봉하고 여과지를 이용하여 김치 국물만을 분리한 후, 크실로오스(xylose) 2%, 효모 추출물(yeast extract) 1%, 펩톤(peptone) 1%, 탄산칼슘(CaCO3) 2%(탄산칼슘은 별도로 건열멸균하여 식균하기 전에 혼합한다) 및 한천 2%로 조제한 배지에 김치 국물을 일백금이 접종하여 30℃에서 약 24시간 동안 평판 배양한다. 배양이 완료된 후, 유기산을 만드는 균의 콜로니(colony) 주위는 탄산칼슘이 용해되어 용해환을 형성하므로 용해환이 형성된 콜로니로부터 균을 분리한다.
분리된 균을 크실로오스(xylose) 2%, 효모 추출물(yeast extract) 1%, 펩톤(peptone) 1% 및 한천 2%로 조제한 배지에 일백금이 접종하여 30℃에서 48시간 동안 평판 배양하는 방법으로 종배양하고, 종배양액을 크실로오스(xylose) 2%, 효모 추출물(yeast extract) 1% 및 펩톤(peptone) 1%로 조제한 배지에 0.1중량%의 비율로 접종하여 30℃에서 72시간 동안 진탕 배양하는 방법으로 본배양하여 유산균이 1.0 × 107cfu/㎖ ∼ 9.0 × 108cfu/㎖ 정도가 되도록 증식시켜 유산균 배양액을 얻는다.
본 발명에서 사용될 수 있는 유산균은 류코노스톡(Leuconostoc)속 김치 유산균, 락토바실러스(Lactobacillus)속 김치 유산균, 웨이셀라(Weissella)속 김치 유산균 및 이들의 혼합 유산균에서 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하며, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 김치로부터 용이하게 분리할 수 있으며 공지 균주이므로 기탁은 행하지 않았다.
상기 류코노스톡속 김치 유산균은 류코노스톡 시트레움(Leuconostoc citreum), 류코노스톡 락티스(Leuconostoc lactis), 류코노스톡 메젠테로이드 서브 스피. 덱스트라니쿰(Leuconostoc mesenteroides subsp. dextranicum), 류코노스톡 메젠테로이드 서브스피. 메젠테로이드(Leuconostoc mesenteroides subsp. Mesenteroides), 류코노스톡 아르젠티눔(Leuconostoc argentinum), 류코노스톡 카르노숨((Leuconostoc carnosum), 류코노스톡 젤리둠(Leuconostoc gellidum), 류코노스톡 김치아이(Leuconostoc kimchii), 류코노스톡 인해(Leuconostoc inhae), 류코노스톡 가시코 미타툼((Leuconostoc gasicomitatum) 및 이들의 혼합 유산균으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하다.
상기 락토바실러스속 김치 유산균은 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 애시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 불가리커스(Lactobacillus bulgaricus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 김치아이(Lactobacillus kimchii), 락토바실러스 파라플란타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 쿠르바투스 서브시피. 쿠르바투스(Lactobacillus curvatus subsp. curvatus), 락토바실러스 사케이 서브시피. 사케이(Lactobacillus sakei sibsp. sakei) 및 이들의 혼합 유산균으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하다.
또한, 상기 웨이셀라속 김치 유산균은 웨이셀라 코레엔시스(Weissella koreensi), 웨이셀라 하니아이(Weissella hanii), 웨이셀라 김치아이(Weissella kimchii), 웨이셀라 솔리(Weissella soli), 웨이셀라 콘푸사(Weissella confusa) 및 이들의 혼합 유산균에서 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것이 바람직하다.
상기와 같이 분리 배양된 유산균의 활성도를 높이고 쌀뜨물의 발효력을 높이기 위하여 10배량의 미감수 농축액을 유산균 배양액에 첨가, 혼합하여 상온에서 확대배양하여 유산균 혈청을 제조하고, 유산균 혈청을 다시 10 ∼ 1,000배량의 농축된 미감수(고형분 함량 0.2 ∼ 2.0%, 생물학적산소요구량 15,000 ∼ 150,000ppm)에 접종하여 상온에서 2 ∼ 4일간 발효시켜 유산균 농도 1.0 × 108cfu/㎖ ∼ 9.9 × 1011cfu/㎖ 정도인 미감수를 발효시킨 유산균 용액을 얻는다.
상기와 같이 제조된 미감수를 발효시킨 유산균 용액에 대한 아이시알 마우스 수컷에서의 급성 및 아급성 독성실험을 수행하였다. 즉, 미감수를 발효시킨 유산균 용액을 최고 농도 30㎖/㎏/day의 용량으로 6마리씩 단회 경구투여하고, 14일 후에 사망율, 일반증상, 체중변화 및 부검 소견을 시험한 결과, 어떤 유해한 증상이나 변화도 관찰되지 않았으며, 28일간 연속 투여의 경우도 고농도 10㎖/㎏/day에서 어떤 독성도 관찰되지 않았기 때문에 안전한 물질로 판단되므로 숙취해소 등에 직접 응용 가능하며, 아무런 독성이 없기 때문에 상시 음용할 수 있다.
다음의 실시예는 본 발명을 좀 더 상세히 설명하는 것이지만, 본 발명의 범주를 한정하는 것은 아니다.
실시예 1
일반 가정에서 취반 전 발생하는 쌀뜨물(고형분 함량 0.03 ∼ 0.04%, 생물학적산소요구량 4,500ppm)을 4시간 정치 침전시켜 상등액은 버리고 농축액만 취하여 고형분 함량 1.5%, 생물학적산소요구량 약 105,000ppm인 미감수 농축액을 얻었다.
오토클레이브에 상기에서 얻은 미감수 농축액을 넣은 다음, 1kg/㎠(약 121℃)의 압력으로 20분간 가열하여 내열성 포자까지도 완전 멸균되어 무균 상태인 미감수 농축액을 얻고, 이를 무균 상태로 보관한다.
별도로 제조일로부터 3일이 경과한 3㎏ 용량의 종가집 포기 김치(대상 FNF(주) 제품)를 20℃에서 20시간 유지시킨 다음, 포장지를 개봉하고 여과지를 이용하여 김치 국물만을 분리한 후, 크실로오스(xylose) 2%, 효모 추출물(yeast extract) 1%, 펩톤(peptone) 1%, 탄산칼슘(CaCO3) 2%(탄산칼슘은 별도로 건열멸균하여 식균하기 전에 혼합한다) 및 한천 2%로 조제한 배지에 김치 국물을 일백금이 접종하여 30℃에서 약 24시간 동안 평판 배양한다. 배양이 완료된 후, 유기산을 만드는 균의 콜로니(colony) 주위는 탄산칼슘이 용해되어 용해환을 형성하므로 용해환이 형성된 콜로니로부터 균을 분리한다.
분리된 균을 크실로오스(xylose) 2%, 효모 추출물(yeast extract) 1%, 펩톤(peptone) 1% 및 한천 2%로 조제한 배지에 일백금이 접종하여 30℃에서 48시간 동안 평판 배양하는 방법으로 종배양하고, 종배양액을 크실로오스(xylose) 2%, 효모 추출물(yeast extract) 1% 및 펩톤(peptone) 1%로 조제한 배지에 0.1중량%의 비율로 접종하여 30℃에서 72시간 동안 진탕 배양하는 방법으로 본배양하여 유산균이 1.0 × 107cfu/㎖ ∼ 9.0 × 108cfu/㎖ 정도가 되도록 증식시켜 유산균 배양액을 얻는다.
상기와 같이 분리 배양된 유산균의 활성도를 높이고 쌀뜨물의 발효력을 높이기 위하여 10배량의 미감수 농축액을 유산균 배양액에 첨가, 혼합하여 상온에서 확대배양하여 유산균 혈청을 제조하고, 유산균 혈청을 다시 100배량의 농축된 미감수(고형분 함량 1.0%, 생물학적산소요구량 100,000ppm)에 접종하여 상온에서 3일간 발효시켜 유산균 농도 1.0 × 108cfu/㎖ ∼ 9.9 × 1011cfu/㎖ 정도인 미감수를 발효시킨 유산균 용액을 얻는다.
실시예 2 : 알코올의 분해를 촉진하는 미감수 발효 유산균 용액의 시험관내 활성 검증.
알코올 분해 시험의 원리는 알코올이 엔에이디의 존재하에 알코올탈수소효소에 의한 효소 반응에 의하여 아세트알데히드로 분해되며, 엔에이디는 산화되어 엔에이디에이치로 된다. 즉, 알코올탈수소효소는 알코올을 아세트알데히드로의 산화를 촉매하는데, 이때 340나노미터(nm)에서 흡광도의 증가는 샘플에서 알코올의 농도에 비례한다. 동물시험의 경우는 반드시 먼저 단백질을 제거하여야 한다. 1.8㎖ 트리클로로초산 용액(6.25%)을 원심관에 넣고 0.2㎖의 샘플을 첨가하고 혼합한 뒤, 실온에서 5분간 방치하고 2,000rpm에서 5분간 원심분리하여 상등액을 취한다. 이를 동물시험에서의 시험관내 활성 검증의 샘플로 사용하였다. 알코올 시험은 먼저 엔에이디(9.6 마이크로몰)와 알코올탈수소효소(이이스트 기원, 800 단위)가 들어 있는 바이알에 2.9㎖의 완충용액을 첨가하고 수회 흔든다. 블랭크는 0.1㎖의 증류수를 첨가하고 시험하고자 하는 바이알에는 0.1㎖의 단백질이 제거된 혈청으로부터의 상등액(동물시험의 경우)이나 시험하고자 하는 용액을 첨가하였다. 0.08% 알코올(0.1㎖)을 첨가하고 바이알의 두껑을 닫고 가볍게 흔들어 10분간 반응시켜서 340nm에서 10분 내에 측정을 종료하였다. 샘플에 특히 색깔이 있는 것은 블랭크를 나중에 빼 준 값으로 환산해야 됨을 유의해야 된다. 이상의 조건에서 기질과 효소 및 보조용액 중, 알코올을 넣지않거나 효소가 결여된 경우는 흡광도는 0.1부근의 값을 보인 반면 기질, 효소 및 기타 보조용액이 전부 함유된 경우의 흡광도는 1.33이었다. 비교를 위하여 ㄱ회사의 제품과 ㄴ회사의 제품 및 특허 출원 제2003-54215호의 실시예 1에서 얻은 유산균 용액을 샘플로 사용하여 흡광도를 비교한 결과, 각 각 1.62, 1.35 및 1.65이었다. 이에 비하여 상기 실시예 1에서 얻은 유산균 용액을 첨가한 경우는 흡광도가 1.68로 가장 높은 수치를 나타내어, 미감수 발효 유산균 용액 특히, 김치로부터 분리한 유산균을 이용한 미감수 발효 유산균 용액이 알코올탈수소효소의 활성 촉진에 효과가 있음을 확인하였다.
미감수 발효유산균 용액을 이용한 알코올탈수소효소의 활성 촉진 비교.
대조구 제품 ㄱ 제품 ㄴ 특허출원제2003-54215호의 실시예 1의 제품 실시예 1의 제품
1.33* 1.62 1.35 1.65 1.68
* 각각의 값은 6번의 동일한 시험 중 오차가 큰 2개를 제외한 4개의 평균값으로 나타내었음. 각 값은 신뢰도의 오차 범위 내에 있음. 이 시험은 3번 이상의 시험 중 전형적인 예를 나타냄.
실시예 3 : 알코올의 분해를 촉진하는 미감수 발효 유산균용액의 동물시험 활성 검증
실시예 1에서 얻은 미감수 발효 유산균용액이 알코올의 분해를 촉진하는지를 확인하기 위하여 동물시험에서의 활성을 검증하였다. 실험동물로는 에스디 랫트(수컷, 6주령, 각 체중 250g의 오차 5% 이내) 각각 3마리씩 사용하였으며, 먼저 50% 알코올을 각 마우스에 10미리리터/킬로그램씩 경구투여하고 1시간 뒤에 각 샘플을 10미리리터/킬로그램씩 경구투여 하였다. 2시간과 4시간 후에 각 실험동물의 경추를 탈골시켜 사망시키고 후대 정맥으로부터 혈액(1 ml)을 채취하여 제단백을 실시하고, 이를 혈청내의 알코올의 농도가 대조구 및 반응구에 비하여 어떠한지를 비교검토하였다. 실시예 2와 같은 방식으로 알코올탈수소효소의 활성을 측정한 결과, 미감수 발효 유산균용액을 투여한 군에서 반응구에 비하여 4시간 경과후의 알코올 측정에서 공히 40% 낮은 흡광도를 나타내었다. 이는 반응군에 비하여 미감수 발효 유산균용액을 투여한 군에서 상대적으로 알코올탈수소효소의 활성이 촉진되어 전체
적인 알코올의 농도가 낮아진 결과로 확인되었다. 제품 1과 제품 2를 투여한 군에서는 각각 13.4%와 22.% 정도 알코올이 감소된 것으로 보아 미감수 처리의 경우가 우수한 알코올 분해능이 있는 것으로 측정되었다.
실시예 4 : 미감수 발효 유산균용액에 의한 위 점막 보호효과
실시예 3과 같은 동물실험 중 후대 정맥으로부터 혈액(1㎖)을 채취하고 난 뒤의 위벽에 대한 혈흔 여부를 검토하였다. 대조군은 비교적 위벽에 혈흔을 발견할 수 없을 정도로 옅은 분홍색을 띈 반면, 알코올을 투여하고 아무런 약제를 처리하지 않은 음성 대조군은 출혈이 여러 곳에 관찰되었다. 제품 1과 제품 2의 경우는 2 ∼ 3 곳에 출혈이 관찰되었으나, 실시예 1에서 얻은 미감수발효 유산균용액 처리의 경우는 경미한 혈흔이 관찰되었다. 한편, 오메프라졸의 경우는 위궤양치료제로 사용되는 약제인데 이의 처리로서는 제품 1과 제품 2의 경우와 유사한 경향을 나타내었다. 이와 같은 실험의 결과로 보아 미감수 발효 유산균용액은 숙취해소의 효과와 더불어 위점막 보호효과를 겸비한 것으로 판단된다.

Claims (3)

  1. 미감수(쌀뜨물)를 정치 침전하여 상등액은 버리고 농축액만 취하여 미감수 농축액을 얻은 다음, 이를 고온고압으로 멸균하고, 별도로 김치 국물만을 분리한 후, 크실로오스 2%, 효모 추출물 1%, 펩톤 1%, 탄산칼슘 2% 및 한천 2%로 조제한 배지에 김치 국물을 일백금이 접종하여 30℃에서 24시간 동안 평판 배양한 후, 탄산칼슘이 용해되어 용해환이 형성된 콜로니로부터 균을 분리한 다음, 분리된 균을 크실로오스 2%, 효모 추출물 1%, 펩톤 1% 및 한천 2%로 조제한 배지에 일백금이 접종하여 30℃에서 48시간 동안 평판 배양하는 방법으로 종배양하고, 종배양액을 크실로오스 2%, 효모 추출물 1% 및 펩톤 1%로 조제한 배지에 0.1중량%의 비율로 접종하여 30℃에서 72시간 동안 진탕 배양하는 방법으로 본배양하여 유산균이 1.0 × 107cfu/㎖ ∼ 9.0 × 108cfu/㎖ 정도가 되도록 유산균 배양액을 얻은 후, 유산균의 배양액을 미감수 농축액에 대하여 1 ∼ 10중량% 접종하고 확대 배양하여 유산균 혈청을 제조하고, 유산균 혈청을 10 ∼ 1,000배의 미감수에 접종하여 2 ∼ 4일 발효시키는 것을 특징으로 하는 미감수를 발효시킨 유산균 용액의 제조 방법.
  2. 청구항 1에 있어서, 미감수를 발효시킨 유산균 용액은 알코올탈수소효소의 활성촉진용으로 사용됨을 특징으로 하는 미감수를 발효시킨 유산균 용액의 제조방법.
  3. 청구항 1에 있어서, 미감수를 발효시킨 유산균 용액은 숙취해소용으로 사용됨을 특징으로 하는 미감수를 발효시킨 유산균 용액의 제조 방법.
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