KR100844926B1 - 카스파제-3 저해제로서의 퀴놀린 유도체, 이의 제조방법 및이를 포함하는 약제학적 조성물 - Google Patents

카스파제-3 저해제로서의 퀴놀린 유도체, 이의 제조방법 및이를 포함하는 약제학적 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR100844926B1
KR100844926B1 KR1020070010137A KR20070010137A KR100844926B1 KR 100844926 B1 KR100844926 B1 KR 100844926B1 KR 1020070010137 A KR1020070010137 A KR 1020070010137A KR 20070010137 A KR20070010137 A KR 20070010137A KR 100844926 B1 KR100844926 B1 KR 100844926B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
formula
compound
amino
nitro
quinoline
Prior art date
Application number
KR1020070010137A
Other languages
English (en)
Inventor
한제욱
김성규
신민기
손상권
정윤성
하니나
김종환
Original Assignee
영진약품공업주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 영진약품공업주식회사 filed Critical 영진약품공업주식회사
Priority to KR1020070010137A priority Critical patent/KR100844926B1/ko
Priority to PCT/KR2008/000202 priority patent/WO2008093940A1/en
Application granted granted Critical
Publication of KR100844926B1 publication Critical patent/KR100844926B1/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/48—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C07D215/54—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen attached in position 3

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

카스파제-3의 활성을 저해하여 카스파제 관련 질환을 치료하기 위해 사용되는, 하기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 제공된다 :
[화학식 1]
Figure 112007009619646-pat00001
상기 화학식 1에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; R은
Figure 112007009619646-pat00002
,
Figure 112007009619646-pat00003
또는
Figure 112007009619646-pat00004
이고; R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)n- 이고; R4는 C, N, O 또는 S이고; R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니 트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고; A는 C, N, O 또는 S이고; Y는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이다.
또한, 상기 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물이 제공된다.
카스파제-3 저해제, 퀴놀린 유도체, 제조 방법, 약제학적 조성물

Description

카스파제-3 저해제로서의 퀴놀린 유도체, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물 {QUINOLINE DERIVATIVES AS CASPASE-3 INHIBITOR, PREPARATION PROCESS FOR THE SAME AND PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING THE SAME}
본 발명은 카스파제-3의 활성을 저해하는 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다.
포유동물에서 세포 수의 조절은 부분적으로는 세포의 증식과 사멸 사이의 균형에 의해 결정되는 것으로 알려져 있다. 괴사성 세포 사멸(necrotic cell death)으로 불리는 세포 사멸의 한 가지 형태는 통상적으로 외상 또는 세포성 상해로부터 생기는 세포 사멸에 대한 병리학적 형태로 특징지워진다. 이러한 세포 괴사는 염증을 유발하는 등 다른 조직에 해를 주게 된다.
이와 달리, 세포 사멸에 대한 다른 "병리학적" 형태는 질서있게 또는 조절되는 양식으로 진행된다. 이러한 질서있는 또는 조절되는 세포 사멸을 종종 "아폽토시스(apoptosis)"라 한다 (Barr, et al., Bio/Technology, 12:487-497, 1994; Steller, et al., 267:1445-1449, 1995). 아폽토시스는 프로그램화된 세포 사멸(programmed cell death)로 다른 조직에 손상을 주지 않고, 역할을 다한 세포나 수명이 다한 세포들을 제거할 수 있으므로, 손상되었거나 과도하게 자란 세포를 제거하여 생명체의 정상적인 발달과 항상성(homeostasis)을 유지시켜주는 생리적으로 필수적이고도 중요한 과정이다.
아폽토시스를 일으키는 원인으로는 여러 가지가 있지만, 그중 가장 중요한 역할을 하는 필수적인 단백질이 카스파제로서, 현재까지 14종이 밝혀져 있다. 이들은 시스테인 프로테아제로서 세포 내의 많은 중요 단백질들이 이들의 기질이 된다. 카스파제 부류에 의해 세포가 단편화된 후에 작은 입자 형태로 다른 세포들에 흡수되거나 대식구와 같은 세포에 의해서 염증 등의 현상 없이 제거되는 것이 바로 아폽토시스의 과정이다.
이러한 카스파제는 크게 두 가지, 개시자(initiator) 카스파제와 이펙터(effector) 카스파제로 나뉜다. 이중, 아폽토시스의 신호를 처음으로 받아서 그 신호를 이펙터 카스파제로 전달하는 역할을 주로 수행하는 것들을 개시자 카스파제라 하며, 카스파제-8,9 등을 대표적인 예로 들 수 있다. 또한, 아폽토시스의 과정을 직접 수행하여 여러 세포성 성분들을 잘라내는 역할을 하는 것들을 이펙터 카스파제라고 하며, 카스파제-3,6,7 등을 대표적인 예로 들 수 있다. 이중 가장 연구가 많이 진행된 카스파제가 바로 카스파제-3으로서, 이는 아폽토시스 시그날 변환 케스케이드의 최종 수용자로서의 역할을 수행한다. 많은 연구에서 카스파제-3의 발현 수준이나 활성을 저해함으로서 아폽토시스를 억제할 수 있는 것으로 밝혀져 있 다.
카스파제-3는 32kDa의 시스테인 프로테아제로서 포유 동물의 뇌에서 형태유전학적(morphogenetic) 세포 사멸 동안 중요한 역활을 하는 이펙터 카스파제이다. 이와 같은 카스파제가 관련된 아폽토시스 과정에 문제가 생겨서 야기되는 여러 가지 질병으로 대표적인 것이 암이다. 암은 아폽토시스가 일어나지 않아서 생기는 질병중 하나라고 할 수 있다. 이와는 반대로 계속적인 아폽토시스 과정의 진행에 의해 여러 가지 신경학적 장애(neurologic disorders)가 나타난다. 카스파제-3 매개 질환으로는 알쯔하이머병(Gervais F. G. et al., Cell, 97(3):395-406, 1999; Walter J. et al., Proc Natl Acad Sci U S A 96(4):1391-6, 1999; Barnes N. Y. et al., J Neurosci 18(15):5869-80, 1998; Kim T. W. et al., Science 277(5324):373-6, 1997), 헌팅턴병(Goldberg Y. P. et al., Nat Genet. 13(4):442-9, 1996; Wellington C. L. et al., J Biol Chem. 273(15):9158-67, 1998; Sanchez I. et al., Neuron. 22(3):623-33, 1999), 파킨슨씨병(Dodel R. C. et al., Mol Brain Res 64(1):141-8, 1999; Takai N. et al., J Neurosci Res 54(2):214-22, 1998), ALS(amyltrophic lateral sclerosis) (Pasinelli P. et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 95(26):15763-8, 1998), AIDS(Kruman I. I. et al., Exp Neurol. 154(2):276-88, 1998), 쇼크/국소빈혈(stroke/ischemia) (Hara H. et al., Proc Natl Acad Sci U S A. 94(5):2007-12, 1997; Namura S. et al., J Neurosci. 18(10):3659-68, 1998; Schulz J. B. et al., Ann Neurol. 45(4):421-9, 1999), 외상성 뇌 손상(traumatic brain injury) (Yakovlev A. G. et al., J Neurosci. 17(19):7415-24, 1997; Kermer P. et al., J Neurosci. 18(12):4656-62, 1998; Chaudhary P. et al, Mol Brain Res. 67(1):36-45, 1999), 척수 손상(spinal cord injury) (Crowe M. J. et al., Nat Med. 3(1):73-6, 1997; Shuman S. L. et al., J Neurosci Res. 50(5):798-808, 1997), 골관절염(osteoarthritis) 등을 대표적인 예로서 들 수 있다.
따라서, 이러한 카스파제-3를 저해하는 물질을 이용하여 상기의 알쯔하이머병, 헌팅턴병, 파킨슨씨병, ALS, AIDS, 쇼크/국소빈혈, 외상성 뇌 손상, 척수 손상, 골관절염 등의 카스파제 매개 질환의 효과적인 치료제를 개발하려는 노력이 계속적으로 이루어지고 있다.
현재까지, 이러한 카스파제-3의 활성을 저해하는 물질로서 아스파트산계 화합물, 펩타이드계 화합물, 감마케토산계 화합물 등이 보고되어 있다 (WO 93/05071, WO 96/03982, US Pat. No. 5,585,357, WO 00/32620, WO 00/55157, US Pat. No. 6,153,591)
그러나, 이들 화합물의 카스파제-3의 저해 활성은 충분치 않았으며, 이 때문에 보다 우수한 카스파제-3 저해 활성을 나타내는 물질의 개발이 계속적으로 요청되고 있다.
이에 본 발명은 우수한 카스파제-3 저해 활성을 나타내는 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공하기 위한 것이다.
본 발명의 다른 목적은, 상기 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법을 제공하는데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은, 상기 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 약제학적 조성물을 제공하는데 있다.
상기의 목적을 달성하기 위해, 본 발명은 카스파제-3의 활성을 저해하여 카스파제 관련 질환을 치료하기 위해 사용되는, 하기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다 :
[화학식 1]
Figure 112007009619646-pat00005
상기 화학식 1에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; R은
Figure 112007009619646-pat00006
,
Figure 112007009619646-pat00007
또는
Figure 112007009619646-pat00008
이고; R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)n- 이고; R4는 C, N, O 또는 S이고; R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고; A는 C, N, O 또는 S이고; Y는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이다.
상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고; R은
Figure 112007009619646-pat00009
,
Figure 112007009619646-pat00010
또는
Figure 112007009619646-pat00011
이고; R2는 N이고; R3는 -(CH2)2- 이고; R4는 C, N, O 또는 S이고; R5는 수소, C1-6 알킬 또는 C1-6 알콕시알킬이고; A는 N이고; Y는 수소임이 바람직하다.
또한, 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은, 5-플로로-3-[(7-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-7-트리플로 로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-8-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페리딘-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(8-플로로-4-피페리딘-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(4-모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-4-옥소-3-[(4-티오모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(8-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-({4-[4-(2-메톡시-에틸)-피페라진-1-일]-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐}-아미노)-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(8-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(7-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-{[4-(4-메틸-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐]-아미노}-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산 또는 3-{[4-(4-에틸-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐]-아미노}-5-플로로-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산으로 됨이 더욱 바람직하다.
그리고, 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 사용되는 카스파제 관련 질환은 알쯔하이머병, 헌팅턴병, 파킨슨씨병, ALS, AIDS, 쇼크, 국소 빈혈, 외상성 뇌 손상, 척수 손상 또는 골관절염으로 될 수 있 다.
또한, 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 염산염, 브롬산염, 황산염, 질산염, 과염소산염, 푸마르산염, 말레산염, 인산염, 글리콜산염, 락트산염, 살리실산염, 숙신산염, 톨루엔-p-설폰산염, 타르타르산염, 트리플로로아세트산염, 아세트산염, 시트르산염, 메탄설폰산염, 포름산염, 벤조산염, 말론산염, 나프탈렌-2-설폰산염, 벤젠설폰산염, 알칼리금속염 또는 알칼리 토금속염의 형태를 띌 수 있다.
본 발명은 또한, 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 화학식 3의 화합물을 형성하는 단계; 디페닐에테르의 존재 하에, 화학식 3의 화합물을 고리화하여 화학식 4의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 4의 화합물을 할로겐화하여 화학식 5의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 5의 화합물을 RH와 반응시켜 화학식 6의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 6의 화합물을 가수 분해하여 화학식 7의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 7의 화합물을 화학식 8의 화합물과 반응시켜 화학식 9의 화합물을 형성하는 단계; 및 화학식 9의 화합물을 카보닐화하여 화학식 1의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법을 제공한다 :
[화학식 2]
Figure 112007009619646-pat00012
[화학식 3]
Figure 112007009619646-pat00013
[화학식 4]
Figure 112007009619646-pat00014
[화학식 5]
Figure 112007009619646-pat00015
[화학식 6]
Figure 112007009619646-pat00016
[화학식 7]
Figure 112007009619646-pat00017
[화학식 8]
Figure 112007009619646-pat00018
[화학식 9]
Figure 112007009619646-pat00019
[화학식 1]
Figure 112007009619646-pat00020
상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또 는 5 내지 15원의 아릴이고; R은
Figure 112007009619646-pat00021
,
Figure 112007009619646-pat00022
또는
Figure 112007009619646-pat00023
이고;
R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)n- 이고; R4는 C, N, O 또는 S이고; R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고; A는 C, N, O 또는 S이고; Y는 수소, 할로겐, C1 -6 알킬, C1 -6 알콕시, C1 -6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1 -6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; Z는 할로겐이다.
또한, 본 발명은 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 화학식 3의 화합물을 형성하는 단계; 디페닐에테르의 존재 하에, 화학식 3의 화합물을 고리화하여 화학식 4의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 4의 화합물을 할로겐화하여 화학식 5의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 5의 화합물을 R1H와 반응시켜 화학식 10의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 10의 화합물을 가수 분해하여 화학식 11의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 11의 화합물을 화학식 12의 화합물과 반응시켜 화학식 13의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 13의 화합물을 카보닐화하여 화학식 14의 화합물을 형성하는 단계; 및 화학식 14의 화합물에서 보호기 1 및 2를 탈보호화하여 화학식 1의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법을 제공한다 :
[화학식 2]
Figure 112007009619646-pat00024
[화학식 3]
Figure 112007009619646-pat00025
[화학식 4]
Figure 112007009619646-pat00026
[화학식 5]
Figure 112007009619646-pat00027
[화학식 10]
Figure 112007009619646-pat00028
[화학식 11]
Figure 112007009619646-pat00029
[화학식 12]
Figure 112007009619646-pat00030
[화학식 13]
Figure 112007009619646-pat00031
[화학식 14]
Figure 112007009619646-pat00032
[화학식 1]
Figure 112007009619646-pat00033
상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; R은
Figure 112007009619646-pat00034
,
Figure 112007009619646-pat00035
또는
Figure 112007009619646-pat00036
이고; R1은
Figure 112007009619646-pat00037
,
Figure 112007009619646-pat00038
또는
Figure 112007009619646-pat00039
이고; R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)n- 이고; R4는 N이고; R5는 수소이고; n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고; A는 C, N, O 또는 S이고; Y는 수소이고; Z는 할로겐이다.
본 발명은 또한, 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 화학식 3의 화합물을 형성하는 단계; 디페닐에테르의 존재 하에, 화학식 3의 화합물을 고리화하여 화학식 4의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 4의 화합물 을 할로겐화하여 화학식 5의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 5의 화합물을 RH와 반응시켜 화학식 6의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 6의 화합물을 가수 분해하여 화학식 7의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 7의 화합물을 화학식 12의 화합물과 반응시켜 화학식 15의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 15의 화합물을 카보닐화하여 화학식 16의 화합물을 형성하는 단계; 및 화학식 16의 화합물에서 보호기 2를 탈보호화하여 화학식 1의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법을 제공한다 :
[화학식 2]
Figure 112007009619646-pat00040
[화학식 3]
Figure 112007009619646-pat00041
[화학식 4]
Figure 112007009619646-pat00042
[화학식 5]
Figure 112007009619646-pat00043
[화학식 6]
Figure 112007009619646-pat00044
[화학식 7]
Figure 112007009619646-pat00045
[화학식 12]
Figure 112007009619646-pat00046
[화학식 15]
Figure 112007009619646-pat00047
[화학식 16]
Figure 112007009619646-pat00048
[화학식 1]
Figure 112007009619646-pat00049
상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; R은
Figure 112007009619646-pat00050
,
Figure 112007009619646-pat00051
또는
Figure 112007009619646-pat00052
이고; R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)n- 이고; R4는 C, N, O 또는 S이고; R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할 로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고; A는 C, N, O 또는 S이고; Y는 수소이고; Z는 할로겐이다.
또한, 본 발명은 약제학적 유효량의 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하고, 카스파제-3의 활성을 저해하여 카스파제 관련 질환을 치료하기 위해 사용되는 약제학적 조성물을 제공한다 :
이러한 약제학적 조성물이 사용되는 상기 카스파제 관련 질환은 알쯔하이머병, 헌팅턴병, 파킨슨씨병, ALS, AIDS, 쇼크, 국소 빈혈, 외상성 뇌 손상, 척수 손상 또는 골관절염으로 될 수 있다.
이하, 본 발명의 구체적인 구현예에 대한 구성 및 작용을 설명하기로 한다. 다만, 이는 하나의 예시로 제시된 것으로 이에 의해 본 발명의 권리 범위가 정해지는 것은 아니다.
발명의 일 구현예에 따르면, 카스파제-3의 활성을 저해하여 카스파제 관련 질환을 치료하기 위해 사용되는, 하기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 제공된다 :
[화학식 1]
Figure 112007009619646-pat00053
상기 화학식 1에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; R은
Figure 112007009619646-pat00054
,
Figure 112007009619646-pat00055
또는
Figure 112007009619646-pat00056
이고; R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)n- 이고; R4는 C, N, O 또는 S이고; R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고; A는 C, N, O 또는 S이고; Y는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이다.
후술하는 실시예 또는 시험예 등에도 기재된 바와 같이, 본 발명자들의 실험 결과, 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 매우 우수한 카스파제-3 저해 활성을 나타냄이 밝혀졌다. 따라서, 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 카스파제-3에 의해 매개되는 각종 카스파제 관련 질환을 치료하는데 바람직하게 사용할 수 있다.
한편, 본원에서 사용된 각 용어들은 다음과 같이 정의된다.
먼저, 용어 "할로겐"이란 염소, 불소, 브롬 등의 라디칼을 의미한다.
용어 "알킬"이란 직쇄 또는 측쇄의 탄화수소 라디칼을 의미하며, 예를 들어, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 2차-부틸, 이소-부틸, 3차-부틸 등을 포함한다.
용어 "할로게노알킬"은 알킬 그룹의 수소가 할로겐 원자로 치환된 알킬을 의미한다.
용어 "알콕시"란 직쇄 또는 측쇄의 알킬이 산소와 연결된 라디칼을 의미하며, 예를 들어, 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소프로폭시, 부톡시, 이소부톡시 등을 포함한다.
용어 "알콕시알킬"이란 알킬 그룹의 수소가 알콕시 그룹으로 치환된 라디칼을 의미하며, 여기서 알콕시 그룹은 직쇄 또는 측쇄화될 수 있다.
용어 "시클로알킬"이란 비방향족 탄화수소 환을 의미하며, 예를 들어, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 등을 포함한다.
용어 "아릴"이란 모노- 또는 폴리-사이클릭 방향족 환을 의미하며, 특히, 본원에서는 탄소 원자만이 환을 이루는 방향족 환뿐만이 아니라 탄소 원자와 함께 질소 원자, 황 원자 또는 산소 원자 등이 환을 이루는 헤테로 방향족 환도 포괄하는 의미로 사용된다. 또한, 한 개 또는 그 이상의 수소가 다음에서 선택된 그룹으로 치환된 (헤테로) 방향족 환도 포괄하는 의미로 사용된다 : 아실, 아미노, 카보알콕시, 카복시, 카복시아미노, 시아노, 할로, 히드록시, 니트로, 티오, 알킬, 시클로알킬, 알콕시, 아릴옥시, 술폭시, 구아니도.
이러한 아릴의 예로는, 페닐, 나프틸, 피리디닐, 피리미디닐, 퀴놀리닐, 벤조티에닐, 인돌릴, 피라지닐, 이소인돌릴, 이소퀴놀릴, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐(quinoxalinyl), 프탈라지닐(phthalazinyl), 인돌리지닐(indolizinyl), 인다졸릴, 벤조티아졸릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조푸라닐, 티에닐, 피롤릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴(thiadiazolyl), 트리아졸릴(triazolyl), 테트라졸릴, 옥사졸로피리디닐(oxazolopyridinyl), 이미다조피리디닐(imidazopyridinyl), 이소티아졸릴, 시놀리닐(cinnolinyl), 카바졸릴(carbazolyl), 이소크로마닐(isochromanyl), 크로마닐(chromanyl), 테트라히드로이소퀴놀리닐(tetrahydroisoquinolinyl), 이소인돌리닐, 이소벤조테테트라히드로푸라닐(isobenzotetrahydrofuranyl), 벤조테트라히드로티에닐(benzotetrahydrothienyl), 푸리닐(purinyl), 벤조디옥솔릴(benzodioxolyl), 트리아지닐(triazinyl), 페녹사지닐(phenoxazinyl), 페노티아지닐(phenothiazianyl), 프테리디닐(pteridinyl), 벤조티아졸릴(benzothiazolyl), 이미다조피리디닐, 이미다조티아졸릴, 디히드로벤즈이소옥사지닐(dihydrobenzisoxazinyl), 벤즈이소옥사지닐, 벤즈옥사지닐, 디히드로벤즈이소티오피라닐(dihydrobenzisothiopyranyl), 벤조피라닐, 벤조티오피라닐, 쿠마리닐(coumarinyl), 이소쿠마리닐, 크로모닐(chromonyl), 크로마노닐(chromanonyl), 피리딜-N-옥사이드, 테트라히드로퀴놀리닐-N-옥사이드, 디히드로퀴놀리닐, 디히드로퀴놀리노닐, 디히드로이소퀴놀리노닐, 디히드로쿠마리닐, 디히드로이소쿠마리닐, 이소인돌리노닐, 벤조디옥사닐, 벤조옥사졸리노닐, 피롤릴-N-옥사이드, 피리미디닐-N-옥사이드, 피라지닐-N-옥사이드, 퀴놀리닐-N-옥사이드, 인돌릴-N-옥사이드, 인돌리닐-N-옥사이드, 이소퀴놀릴-N-옥사이드, 퀴나졸리닐-N-옥사이드, 퀴녹사니릴-N-옥사이드, 프탈라지닐-N-옥사이드, 이미다졸리닐-N-옥사이드, 이소옥사졸릴-N-옥사이드, 옥사졸릴-N-옥사이드, 티아졸릴-N-옥사이드, 인돌리지닐-N-옥사이드, 인다졸릴-N-옥사이드, 벤조티아졸릴-N-옥사이드, 벤조이미다졸릴-N-옥사이드, 옥사디아졸릴-N-옥사이드, 티아디아졸릴-N-옥사이드, 트리아졸릴-N-옥사이드 또는 테트라졸릴-N-옥사이드를 들 수 있다.
한편, 상기 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은, 상기 화학식 1에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고; R은
Figure 112007009619646-pat00057
,
Figure 112007009619646-pat00058
또는
Figure 112007009619646-pat00059
이고; R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)2- 이고; R4는 C, N, O 또는 S이고; R5는 수소, C1-6 알킬 또는 C1-6 알콕시알킬이고; A는 N이고; Y는 수소로 되는 것임이 바람직하다. 또한, 이러한 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은, 5-플로로-3-[(7-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플 로로 아세트산, 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-8-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페리딘-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(8-플로로-4-피페리딘-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(4-모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-4-옥소-3-[(4-티오모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(8-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-({4-[4-(2-메톡시-에틸)-피페라진-1-일]-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐}-아미노)-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(8-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-[(7-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산, 5-플로로-3-{[4-(4-메틸-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐]-아미노}-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산 또는 3-{[4-(4-에틸-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐]-아미노}-5-플로로-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산으로 됨이 더욱 바람직하다.
이들 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 보다 우수한 카스파제-3 저해 활성을 나타낼 수 있고, 이에 따라, 카스파제 관련 질환을 치료하는 데 더욱 바람직하게 사용될 수 있다.
상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 사용될 수 있는 카스파제 관련 질환의 대표적인 예에는, 알쯔하이머병, 헌팅턴병, 파킨슨씨병, ALS, AIDS, 쇼크, 국소 빈혈, 외상성 뇌 손상, 척수 손상 또는 골관절염 등이 있다. 다만, 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 우수한 카스파제-3 저해 활성을 나타냄에 따라, 이러한 질환들 외에도 카스파제-3에 의해 매개되는 것으로 알려진 임의의 카스파제 관련 질환을 치료하는데 사용될 수 있음은 물론이다.
또한, 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체는 약제학적으로 허용되는 염의 형태를 띌 수 있으며, 이러한 약제학적으로 허용되는 염은 약제학적으로 허용되는 유기산 또는 무기산이나 염기가 부가된 염으로 될 수 있다. 적합한 유기산 또는 무기산의 예로는, 염산, 브롬산, 황산, 질산, 과염소산, 푸마르산, 말레산, 인산, 글리콜산, 락트산, 살리실산, 숙신산, 톨루엔-p-설폰산, 타르타르산, 트리플로로아세트산, 아세트산, 시트르산, 메탄설폰산, 포름산, 벤조산, 말론산, 나프탈렌-2-설폰산 또는 벤젠설폰산을 들 수 있다. 또한, 적합한 염기의 예로는, 나트륨 등의 알칼리 금속, 마그네슘 등의 알칼리 토금속 또는 암모늄을 들 수 있다.
한편, 발명의 다른 구현예에 따라, 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 화학식 3의 화합물을 형성하는 단계; 디페닐에테르의 존재 하에, 화학식 3의 화합물을 고리화하여 화학식 4의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 4의 화합물을 할로겐화하여 화학식 5의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 5의 화합물을 RH와 반응시켜 화학식 6의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 6의 화합물을 가수 분해하여 화학식 7의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 7의 화합물을 화학식 8의 화합물과 반응시켜 화학식 9의 화합물을 형성하는 단계; 및 화학식 9의 화합물을 카보닐화하여 화학식 1의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법이 제공된다 :
[화학식 2]
Figure 112007009619646-pat00060
[화학식 3]
Figure 112007009619646-pat00061
[화학식 4]
Figure 112007009619646-pat00062
[화학식 5]
Figure 112007009619646-pat00063
[화학식 6]
Figure 112007009619646-pat00064
[화학식 7]
Figure 112007009619646-pat00065
[화학식 8]
Figure 112007009619646-pat00066
[화학식 9]
Figure 112007009619646-pat00067
[화학식 1]
Figure 112007009619646-pat00068
상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; R은
Figure 112007009619646-pat00069
,
Figure 112007009619646-pat00070
또는
Figure 112007009619646-pat00071
이고;
R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)n- 이고; R4는 C, N, O 또는 S이고; R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고; A는 C, N, O 또는 S이고; Y는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; Z는 할로겐이다.
이러한 제조 방법을 각 단계별로 설명하면 다음과 같다.
먼저, 상기 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시 켜 상기 화학식 3의 화합물을 형성한다. 이러한 화학식 3의 화합물의 형성 단계에서는, 별도의 용매 없이 100-150℃의 온도로 가열하면서 상기 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시키거나, 예를 들어, 톨루엔, 클로로벤젠 또는 자일렌 등의 유기 용매 하에서 이의 비등 온도로 가열하면서 상기 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 상기 화학식 3의 화합물을 형성할 수 있다.
다음으로, 디페닐에테르의 존재 하에, 상기 화학식 3의 화합물을 고리화하여 상기 화학식 4의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계에서는 디페닐에테르의 유기 용매 하에서, 260℃ 내지 상기 유기 용매의 비등 온도로 가열하면서 상기 화학식 3의 화합물을 고리화하여 상기 화학식 4의 화합물을 형성할 수 있다.
이어서, 상기 화학식 4의 화합물을 할로겐화하여 상기 화학식 5의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계에서는, 상기 화학식 4의 화합물을 산화염화인, 삼염화인 또는 오염화인 등의 할로겐화제와 반응시켜 상기 화학식 5의 화합물을 형성할 수 있다.
그리고 나서, 상기 화학식 5의 화합물을 RH와 반응시켜 상기 화학식 6의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계에서는, 예를 들어, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로퓨란, 디옥산, 아니솔, 아세토니트릴, 프로피오니트릴 디메틸포름아미드 또는 디메틸설폭사이드와 같은 유기 용매 내에서, 상온 내지 상기 유기 용매의 비등 온도로 상기 화학식 5의 화합물 및 RH를 반응시켜 상기 화학식 6의 화합물을 형성할 수 있다. 이때, 아민 화합물의 존재 하에 상기 화학식 5의 화합물 및 RH 를 반응시킬 수도 있는데, 사용 가능한 아민 화합물로는, 예를 들어, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 디메틸아닐린, 피리딘 또는 퀴놀린 등을 들 수 있다.
이후, 상기 화학식 6의 화합물을 가수 분해하여 상기 화학식 7의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계에서는, 예를 들어, 메탄올, 에탄올, 디옥산, 아니졸, 아세토니트릴, 프로피오니트릴, 디메틸포름아미드 또는 디메틸설폭사이드 등의 유기 용매와 물의 혼합 용매 내에서, 수산화리튬, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 중탄산나트륨 등의 염기를 사용해 상온 내지 상기 혼합 용매의 비등 온도에서 상기 화학식 6의 화합물을 가수 분해하여 상기 화학식 7의 화합물을 형성할 수 있다.
다음으로, 상기 화학식 7의 화합물을 화학식 8의 화합물과 반응시켜 화학식 9의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계는, 예를 들어, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로퓨란, 디옥산, 아니졸, 아세토니트릴, 프로피오니트릴, 디메틸포름아미드 또는 디메틸설폭사이드 등의 유기 용매 내에서, 상온 내지 상기 유기 용매의 비점 온도에서 상기 화학식 7의 화합물 및 화학식 8의 화합물을 반응시켜 상기 화학식 9의 화합물을 형성할 수 있다. 또한, 1-히드록시벤조트리아졸(HOBt), N-메틸모르폴린(NMM) 또는 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(EDC)의 존재 하에, 상기 화학식 7의 화합물 및 화학식 8의 화합물을 반응시킬 수도 있다.
그리고 나서, 상기 화학식 9의 화합물을 카보닐화하여 화학식 1의 퀴놀린 유도체를 형성한다. 이때, 예를 들어, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로퓨란, 디옥산, 아니졸, 아세토니트릴, 프로피오니트릴, 디메틸포름아미드 또는 디메 틸설폭사이드 등의 유기 용매 내에서, 데스 마틴(Dess Martin) 시약을 사용해 상기 화학식 9의 화합물을 산화시켜 카보닐화함으로서 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체를 형성할 수 있다.
한편, 발명의 또 다른 구현예에 따르면, 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 화학식 3의 화합물을 형성하는 단계; 디페닐에테르의 존재 하에, 화학식 3의 화합물을 고리화하여 화학식 4의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 4의 화합물을 할로겐화하여 화학식 5의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 5의 화합물을 R1H와 반응시켜 화학식 10의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 10의 화합물을 가수 분해하여 화학식 11의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 11의 화합물을 화학식 12의 화합물과 반응시켜 화학식 13의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 13의 화합물을 카보닐화하여 화학식 14의 화합물을 형성하는 단계; 및 화학식 14의 화합물에서 보호기 1 및 2를 탈보호화하여 화학식 1의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법이 제공된다 :
[화학식 2]
Figure 112007009619646-pat00072
[화학식 3]
Figure 112007009619646-pat00073
[화학식 4]
Figure 112007009619646-pat00074
[화학식 5]
Figure 112007009619646-pat00075
[화학식 10]
Figure 112007009619646-pat00076
[화학식 11]
Figure 112007009619646-pat00077
[화학식 12]
Figure 112007009619646-pat00078
[화학식 13]
Figure 112007009619646-pat00079
[화학식 14]
Figure 112007009619646-pat00080
[화학식 1]
Figure 112007009619646-pat00081
상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; R은
Figure 112007009619646-pat00082
,
Figure 112007009619646-pat00083
또는
Figure 112007009619646-pat00084
이고; R1은
Figure 112007009619646-pat00085
,
Figure 112007009619646-pat00086
또는
Figure 112007009619646-pat00087
이고; R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)n- 이고; R4는 N이고; R5는 수소이고; n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고; A는 C, N, O 또는 S이고; Y는 수소이고; Z는 할로겐이다.
이러한 제조 방법에서는, 이미 상술한 다른 구현예에 따른 제조 방법과 마찬가지 과정을 거쳐, 상기 화학식 2의 화합물로부터 상기 화학식 5의 화합물을 제조한다.
그리고 나서, R5 위치에, 예를 들어, 터트-부톡시기 등의 보호기 1이 도입된 R1H과 상기 화학식 5의 화합물을 반응시켜 화학식 10의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계에서는, 예를 들어, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로퓨란, 디옥산, 아니솔, 아세토니트릴, 프로피오니트릴 디메틸포름아미드 또는 디메틸설폭사 이드와 같은 유기 용매 내에서, 예를 들어, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 디메틸아닐린, 피리딘 또는 퀴놀린 등의 아민 화합물의 존재 하에, 상온 내지 상기 유기 용매의 비등 온도로 상기 화학식 5의 화합물 및 R1H를 반응시켜 상기 화학식 10의 화합물을 형성할 수 있다.
이후, 상술한 다른 구현예의 제조 방법에서 화학식 7의 화합물을 형성하는 반응 단계와 마찬가지 조건으로, 상기 화학식 10의 화합물을 가수 분해하여 상기 화학식 11의 화합물을 형성한다.
이어서, Y 위치에, 예를 들어, 터트-부틸기 등의 보호기 2가 도입된 화학식 12의 화합물을 상기 화학식 11의 화합물과 반응시켜 상기 화학식 13의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계는, 예를 들어, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로퓨란, 디옥산, 아니졸, 아세토니트릴, 프로피오니트릴, 디메틸포름아미드 또는 디메틸설폭사이드 등의 유기 용매 내에서, 예를 들어, 1-히드록시벤조트리아졸(HOBt), N-메틸모르폴린(NMM) 또는 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(EDC)의 존재 하에, 상온 내지 상기 유기 용매의 비점 온도에서 상기 화학식 11의 화합물 및 화학식 12의 화합물을 반응시켜 상기 화학식 13의 화합물을 형성할 수 있다.
그리고 나서, 상기 화학식 13의 화합물을 카보닐화하여 화학식 14의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계에서는, 예를 들어, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로퓨란, 디옥산, 아니졸, 아세토니트릴, 프로피오니트릴, 디메틸포름아 미드 또는 디메틸설폭사이드 등의 유기 용매 내에서, 데스 마틴(Dess Martin) 시약을 사용해 상기 화학식 13의 화합물을 산화시켜 카보닐화함으로서 상기 화학식 14의 퀴놀론 유도체를 형성할 수 있다.
이후, 상기 화학식 14의 화합물에서 보호기 1 및 2를 탈보호화하여 화학식 1의 퀴놀린 유도체를 형성한다. 이때, 예를 들어, 트리플로로 아세트산과 같은 산과 반응시켜 상기 보호기 1 및 2를 탈보호화할 수 있으며, 이러한 탈보호화는 디클로로메탄 등의 유기 용매 내에서 진행할 수 있다.
상술한 또 다른 구현예에 따른 제조 방법을 진행하면, 상기 화학식 1에서 R4는 N이고, R5 및 Y가 수소인 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 제조될 수 있다. 이러한 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 R5 또는 Y 위치에 다른 치환기를 도입하여 상기 화학식 1에 의해 포괄되는 다른 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염도 제조할 수 있다.
발명의 다른 또 하나의 구현예에 따르면, 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 화학식 3의 화합물을 형성하는 단계; 디페닐에테르의 존재 하에, 화학식 3의 화합물을 고리화하여 화학식 4의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 4의 화합물을 할로겐화하여 화학식 5의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 5의 화합물을 RH와 반응시켜 화학식 6의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 6의 화합물을 가수 분해하여 화학식 7의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 7의 화합물을 화학식 12의 화합물과 반응시켜 화학식 15의 화합물을 형성하는 단계; 화학식 15의 화합물을 카보닐화하여 화학식 16의 화합물을 형성하는 단계; 및 화학식 16의 화합물에서 보호기 2를 탈보호화하여 화학식 1의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법이 제공된다 :
[화학식 2]
Figure 112007009619646-pat00088
[화학식 3]
Figure 112007009619646-pat00089
[화학식 4]
Figure 112007009619646-pat00090
[화학식 5]
Figure 112007009619646-pat00091
[화학식 6]
Figure 112007009619646-pat00092
[화학식 7]
Figure 112007009619646-pat00093
[화학식 12]
Figure 112007009619646-pat00094
[화학식 15]
Figure 112007009619646-pat00095
[화학식 16]
Figure 112007009619646-pat00096
[화학식 1]
Figure 112007009619646-pat00097
상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; R은
Figure 112007009619646-pat00098
,
Figure 112007009619646-pat00099
또는
Figure 112007009619646-pat00100
이고; R2는 C 또는 N이고; R3는 -(CH2)n- 이고; R4는 C, N, O 또는 S이고; R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할 로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고; n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고; A는 C, N, O 또는 S이고; Y는 수소이고; Z는 할로겐이다.
이러한 제조 방법에서는, 이미 상술한 다른 구현예에 따른 제조 방법과 마찬가지 과정을 거쳐, 상기 화학식 2의 화합물로부터 상기 화학식 7의 화합물을 제조한다.
이어서, Y 위치에, 예를 들어, 터트-부틸기 등의 보호기 2가 도입된 화학식 12의 화합물을 상기 화학식 7의 화합물과 반응시켜 상기 화학식 15의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계는, 예를 들어, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로퓨란, 디옥산, 아니졸, 아세토니트릴, 프로피오니트릴, 디메틸포름아미드 또는 디메틸설폭사이드 등의 유기 용매 내에서, 예를 들어, 1-히드록시벤조트리아졸(HOBt), N-메틸모르폴린(NMM) 또는 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(EDC)의 존재 하에, 상온 내지 상기 유기 용매의 비점 온도에서 상기 화학식 7의 화합물 및 화학식 12의 화합물을 반응시켜 상기 화학식 15의 화합물을 형성할 수 있다.
그리고 나서, 상기 화학식 15의 화합물을 카보닐화하여 화학식 16의 화합물을 형성한다. 이러한 반응 단계에서는, 예를 들어, 디클로로메탄, 클로로포름, 테트라하이드로퓨란, 디옥산, 아니졸, 아세토니트릴, 프로피오니트릴, 디메틸포름아미드 또는 디메틸설폭사이드 등의 유기 용매 내에서, 데스 마틴(Dess Martin) 시약을 사용해 상기 화학식 15의 화합물을 산화시켜 카보닐화함으로서 상기 화학식 16의 퀴놀론 유도체를 형성할 수 있다.
이후, 상기 화학식 16의 화합물에서 보호기 2를 탈보호화하여 화학식 1의 퀴놀린 유도체를 형성한다. 이때, 예를 들어, 트리플로로 아세트산과 같은 산과 반응시켜 상기 보호기 2를 탈보호화할 수 있으며, 이러한 탈보호화는 디클로로메탄 등의 유기 용매 내에서 진행할 수 있다.
상술한 발명의 다른 또 하나의 구현예의 제조 방법을 진행하면, 상기 화학식 1에서 Y가 수소인 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 제조될 수 있다. 이러한 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 Y 위치에 다른 치환기를 도입하여 상기 화학식 1에 의해 포괄되는 다른 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염도 제조할 수 있다.
한편, 발명의 다른 구현예에 따라, 약제학적 유효량의 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하고, 카스파제-3의 활성을 저해하여 카스파제 관련 질환을 치료하기 위해 사용되는 약제학적 조성물이 제공된다.
이러한 약제학적 조성물은 카스파제-3에 대한 우수한 저해 활성을 나타내는 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 활성 성분으로 포함함에 따라, 카스파제-3에 의해 매개되는 카스파제 관련 질환, 예를 들어, 알쯔하이머병, 헌팅턴병, 파킨슨씨병, ALS, AIDS, 쇼크, 국소 빈혈, 외상성 뇌 손상, 척수 손상 또는 골관절염 등의 치료에 바람직하게 사용될 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 상기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 활성 성분으로 포함하는 한편, 이와 함께 약제학적으로 허용되 는 임의의 부형제를 더 포함할 수 있다. 상기 약제학적 조성물에서 사용 가능한 부형제로는, 특히 한정되지는 않지만, 이온교환 수지, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 렉시틴, 혈청 단백질(예, 사람 혈청 알부민), 완충 물질(예, 각종 인산염, 글리신, 소르빈산, 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분 글리세리드 혼합물), 물, 염 또는 전해물질(예, 프로타민 설페이트, 인산수소이나트륨, 인산수소칼륨, 염화나트륨 및 아연염), 교질성 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로즈계 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈, 폴리아릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 또는 양모 지방 등을 들 수 있다.
또한, 상기 약제학적 조성물은 포유 동물(예를 들어, 사람) 등의 개체에 투여될 때, 경구, 비경구, 흡인, 국소, 직장, 비내, 구강 또는 질내로 투여될 수 있으며 이식 저장기에 함유될 수도 있다.상기 비경구 투여는 피하, 피부 내, 정맥 내, 근육 내, 동맥 내, 활액 내, 흉골 내, 포막 내, 병소 내 또는 두개골 내 주사 또는 흡인 방법 등으로 이루어질 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 멸균 주사 제제(예를 들어, 멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액)의 형태로 될 수도 있다. 이러한 현탁액은 적합한 분산제, 습윤제(예를 들어, 트윈 80) 또는 현탁화제를 사용하여 당업계에서 공지된 방법에 의해 제형화될 수 있다. 또한, 상기 멸균 주사 제제는 비경구적으로 허용되는 무독성 희석제, 용매 중의 멸균 주사 용액 또는 현탁액(예를 들어, 1,3-부탄디올 중의 용액)으로 될 수 있다. 이러한 멸균 주사 제제는 비히클 또는 용매로서 만니톨, 물, 링겔 용액 또는 등장성 염 수용액 등을 포함할 수 있고, 또한, 용매 또는 현탁 매질로서 불휘발성 멸균 오일이 통상적으로 사용될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 합성 모노글리세리드 또는 디글리세리드를 포함하여 어떠한 불휘발성 오일 제품도 사용될 수 있다. 또한, 올레인산 및 이의 글리세리드 유도체와 같은 지방산 또한 올리브유 또는 피마자유와 같은 약제학적으로 허용되는 천연 오일(특히, 이들의 폴리옥시에틸화된 오일)과 마찬가지로 주사제에 유용하다. 이들 오일 용액 또는 현탁액은 또한 장쇄 알콜 희석제 또는 분산제를 함유할 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 또한 캡슐, 정제, 수성 현탁액 또는 용액을 포함하여 경구적으로 허용되는 모든 용량형으로 경구 투여될 수 있다. 경구용 정제의 경우에, 흔히 사용되는 부형제로는 락토즈 및 옥수수 전분을 들 수 있다. 또한, 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제가 첨가될 수도 있다. 캡슐 형태로 경구 투여하는 경우, 유용한 희석제로는 탁토즈 및 무수 옥수수 전분을 들 수 있다. 그리고, 수성 현탁액이 경구 투여될 때, 활성 성분은 유화제 및 현탁화제와 혼합될 수도 있다. 또한, 필요한 경우, 특정 감미제, 풍미제 또는 착색제가 첨가될 수 있다.
또한, 상기 약제학적 조성물은 직장 투여용의 좌제의 형태로 제형화될 수 있다. 이러한 약제학적 조성물은 실온에서 고형을 유지하나 직장 온도에서는 액상으로 변하는 것으로 적합한 무자극성 부형제와 활성 성분을 혼합하여 제조될 수 있다. 상기 무자극성 부형제의 예로는 코코아 버터, 밀랍 또는 폴리에틸렌 글리콜 등을 들 수 있다.
상기 약제학적 조성물의 국소 투여는 목적하는 치료 부위가 국소 적용으로 쉽게 접근 가능한 영역 또는 기관일 때 특히 유용하다. 예를 들어, 피부에 국소 적용하는 경우, 상기 약제학적 조성물은 이를 담체에 현탁 또는 용해된 상태로 함유하는 적합한 연고로 제형화되거나 스프레이의 형태로 될 수 있다. 이러한 약제학적 조성물에 사용 가능한 국소 투여용 담체로는 광유, 유동 와셀린, 백색 와셀린, 프로필렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화성 왁스 또는 물 등을 들 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 또한, 이를 담체에 현탁 또는 용해된 상태로 함유하는 적합한 로션 또는 크림으로 제형화될 수 있다. 적합한 담체로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 광유, 솔비탄 모노스테아레이트, 폴리솔베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴 알콜, 2-옥틸도데카놀, 벤질 알콜 또는 물 등을 들 수 있다.
또한, 상기 약제학적 조성물은 직장 좌제 또는 적합한 관장제에 의해 하부 장관으로 국소 투여 가능하게 제형화될 수도 있다. 또한, 국소 적용된 경피 패치 및 안구 점적제의 형태로서 상기 약제학적 조성물이 제형화될 수도 있다.
상기 약제학적 조성물은 또한, 비내 에어로졸 또는 흡인에 의해 투여될 수도 있다. 이러한 약제학적 조성물은 약제 제형의 분야에 잘 알려진 기술에 따라 제조하며, 벤질 알콜 기타 다른 적합한 보존제, 생체이용성을 증가시키기 위한 흡수 촉진제, 플루오로카본 또는 기타 가용화제나 분산제를 사용하면서 염수 중의 용액으로서 제조할 수 있다.
상기 약제학적 조성물을 통해 투여되는 활성 성분의 양은, 처리되는 대상, 병의 중증도, 투여 모드, 성별 또는 의사 처방 등 여러 가지 요인에 따라 다양할 수 있으며, 당 분야의 통상의 기술을 가진 자에 의해 용이하게 그 유효량을 결정할 수 있다. 통상적으로 0.001 내지 100 mg/kg/일, 바람직하게는 0.001 내지 10 mg/kg/일의 양으로 투여될 수 있다.
이하에서 본 발명의 바람직한 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다.
실시예 1 : 5-플로로-3-[(7-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(8)의 제조
[반응식 1]
Figure 112007009619646-pat00101
제조 공정 1 : 2-[(3-니트로-페닐아미노)-메틸렌]-말로닉산 디에틸 에스테르(1)의 제조
자일렌(600 ml)에 용해된 3-니트로아닐린(87 g, 631 mmol, 1 eq)에 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트(150 g, 694 mmol, 1.1 eq)를 넣고, 130℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 박막 크로마토그래피로 확인하고 냉각하였다. 여과한 후 목적 화합물 1을 얻었다(155 g, 수율 = 80 %).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ : 11.06 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 8.00 - 7.96 (m, 2H), 7.56 - 7.51 (m, 1H), 7.43 - 7.24 (m, 1H), 4.35 - 4.24 (m, 4H), 1.41 - 1.28 (m, 6H).
제조 공정 2 : 7-니트로-4-옥소-1,4-디히드로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸에스테르(2)의 제조
환류 상태의 디페닐 에테르(250 ml)에 화합물 1(85 g, 280 mmol, 1 eq )을 천천히 넣은 후 1 시간 동안 교반하였다. 냉각한 후 천천히 따라 붓고 여과하여 목적 화합물 2를 얻었다(60 g, 수율 = 82 %).
1H NMR (DMSO, 300 MHz) δ : 8.75 - 8.50 (m, 1H), 838 - 8.13 (m, 1H), 7.88 - 7.84 (m, 2H), 7.66 - 7.62 (m, 1H), 4.25 - 4.19 (m, 2H), 1.38 - 1.18 (m, 3H).
제조 공정 3: 4-클로로-7-니트로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(3)의 제조
화합물 2(20 g, 80 mmol, 1 eq)에 산화염화인(123 g, 800 mmol, 10 eq )을 넣고 환류 하에 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 냉각하였다. 20 % NaOH로 중화한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류 한 후 컬럼크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 3을 얻었다(8.4 g, 수율 = 37 %).
1H NMR (CDCl3, 400 MHz) δ : 9.30 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.59 - 8.56 (m, 1H), 8.45 - 8.42 (m,1H), 4.53 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.49 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
제조 공정 4 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-7-니트로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(4)의 제조
디클로로메탄(100ml)에 용해된 화합물 4(7 g, 25.2 mmol, 1 eq)에 터트-부톡시 피페라진(5 g, 27.7 mmol, 1.1 eg) 및 트리에틸아민(5.1 g, 50.4 mmol. 2 eq)을 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼크로마토그래피(에틸 아세테이트 : 헥산 = 1 : 2)로 정제하여 목적 화합물 4를 얻었다(10.2 g, 수율 = 92 %).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ : 9.01 (s, 0.5H), 8.95 (s, 0.5H), 8.31 (s, 1H), 8.31 - 8.30 (m, 1H), 7.33 - 7.31 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 4.49 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.73 - 3.70 (m, 4H), 3.31 - 3.28 (m, 4H), 1.52 - 1.43 (m, 12H).
제조 공정 5 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-7-니트로-퀴놀린-3-카르복시산(5)의 제조
에탄올(40ml) 및 물(40ml)에 용해된 화합물 4(8 g, 18.6 mmol, 1 eq)에 리튬 하이드록사이드(1.18 g, 27.9 mmol, 1.5 eq)를 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 용매를 감압 증류한 후, 1N HCl로 중화하였다. 클로로포름으로 추출하고 감압 증류 한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 5를 얻었다(6.8 g, 수율 = 90 %).
1H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ : 8.92 - 8.77 (m, 2H), 8.50 - 8.41 (m, 1H), 8.33 -8.29 (m, 1H), 3.71 - 3.70 (m, 4H), 3.43 - 3.30 (m, 4H), 1.50 (s, 9H).
제조 공정 6 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-히드록시-프로필 카바모일)-7-니트로-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(6)의 제조
디메틸포름아미드(40 ml)에 용해된 화합물 5(4.5 g, 11.2 mmol, 1 eq)에 N-메틸모르폴린(5.7 g, 56 mmol, 5 eq), 1-히드록시벤조트리아졸(2.3 g, 16.8 mmol, 1.5 eq) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(2.6 g, 13.4 mmol, 1.2 eq)를 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 상기 반응식 1에 표시된 아민계 반응물(2.3 g, 11.2 mmol, 1 eq)을 넣고 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 6을 얻었다(3 g, 수율 = 46 %).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ : 8.97 - 8.41 (m, 2H), 8.34 - 8.21 (m, 2H), 7.40 - 7.33 (m, 1H), 4.67 - 4.50 (m, 3H), 4.51 - 4.48 (m, 1H), 3.70 (brs. 4H), 3.33 - 3.29 (m, 4H), 2.82 - 2.73 (m, 2H), 1.50 - 1.45 (m, 18H).
제조 공정 7 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-옥소-프로필카바모일)-7-니트로-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(7)의 제조
디클로로메탄(30ml)에 용해된 화합물 6(3 g, 5.1 mmol, 1 eq)에 데스 마틴(Dess Martin) 시약(2.6g, 6.1 mmol, 1.2 eq)을 넣고 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후, 디클로로메탄으로 추출하였다. 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 7을 얻었다(1.8 g, 수율 = 60 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ: 8.93 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.31 - 8.26 (m, 2H), 7.46 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.25 - 5.19 (m, 2H), 5.16 - 5.06 (m, 1H), 3.71 (s, 4H), 3.30 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 3.15 - 3.07 (m, 2H), 1.51 (s, 9H), 1.44 (s, 9H).
제조 공정 8 : 5-플로로-3-[(7-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(8)의 제조
디클로로메탄(10ml)에 용해된 화합물 7(1.8 g, 3.05 mmol, 1 eq)에 트리플로로아세트산(10 ml, 38 eq)을 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 8을 얻었다(1.3 g, 수율 = 77 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ : 8.89 - 8.83 (m, 2H), 8.45 - 8.40 (m, 2H), 5.20 - 5.05 (m, 1H), 4.65 - 4.35 (m, 2H), 3.65 -3.49 (m, 8H), 3.00 - 2.55 (m, 2H).
실시예 2 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산(16)의 제조
[반응식 2]
Figure 112007009619646-pat00102
제조 공정 1 : 2-[(3-트리플로로메틸-페닐아미노)-메틸렌]-말로닉산 디에틸 에스테르(9)의 제조
3-(트리플로로메틸)아닐린(10 g, 62.1 mmol, 1 eq)에 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트(19.3 g, 89.4 mmol, 1.2 eq)를 넣고, 130℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 박막 크로마토그래피로 확인하고 냉각하였다. 여과한 후 목적 화합물 9를 얻었다(20 g, 수율 = 97 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 11.1 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 8.51 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 7.60 - 7.49 (m, 1H), 7.41 - 7.28 ((m, 2H), 4.33 - 4.26 (m, 6H), 1.40 - 1.35 (m, 9H).
제조 공정 2 : 4-옥소-7-트리플로로메틸-1,4-디히드로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸에스테르(10)의 제조
환류 상태의 디페닐 에테르(30 ml)에 화합물 9(10 g, 30.2 mmol, 1 eq )를 천천히 넣은 후 1 시간 동안 교반하였다. 냉각한 후 천천히 따라 붓고 여과하여 목적 화합물 10을 얻었다(6 g, 수율 = 70 %).
1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ : 8.70 - 8.53 (m, 1H), 8.34 (d, J = 8.6 Hz, 0.5H), 7.97 - 7.67 (m, 2H), 7.41 - 7.38 (m, 1H), 7.15 - 7.00 (m, 1H), 4.24 - 4.20 (m, 2H), 1.30 - 1.23 (m, 3H).
제조 공정 3: 4-클로로-7-트리클로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(11)의 제조
화합물 10(5 g, 17.5 mmol, 1 eq)에 산화염화인(26.8 g, 175 mmol, 10 eq )을 넣고 환류 하에 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 냉각하였다. 20 % NaOH로 중화한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류 한 후 컬럼크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 11을 얻었다(3 g, 수율 = 57 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 1.30 - 1.23 (m, 3H), 8.57 - 8.54 (m, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.77 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.55 - 4.50 (m, 2H), 1.50 - 1.46 (m, 3H).
제조 공정 4 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(12)의 제조
디클로로메탄(20ml)에 용해된 화합물 11(2 g, 6.6 mmol, 1 eq)에 터트-부톡시 피페라진(1.4 g, 7.3 mmol, 1.1 eg) 및 트리에틸아민(1.3 g, 13.2 mmol. 2 eq) 을 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼크로마토그래피(에틸 아세테이트 : 헥산 = 1 : 2)로 정제하여 목적 화합물 12를 얻었다(2.2 g, 수율 = 73 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.98 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.29 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.74 - 7.72 (m, 1H), 4.48 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.71 (s, 4H), 3.29 (s, 4H), 1.51 (s, 9H), 1.45 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
제조 공정 5 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산(13)의 제조
에탄올(40ml) 및 물(40ml)에 용해된 화합물 12(2 g, 4.4 mmol, 1 eq)에 리튬 하이드록사이드(0.56 g, 13.2 mmol, 3 eq)를 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 용매를 감압 증류한 후, 1N HCl로 중화하였다. 클로로포름으로 추출하고 감압 증류 한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 13을 얻었다(1.7 g, 수율 = 90 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ : 8.84 - 8.74 (m, 1H), 8.45 - 8.37 (m, 1H), 8.18 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.76 - 7.72 (m, 1H), 3.67 - 3.56 (m, 4H), 3.38 -3.12 (m, 4H), 1.48 -1.43 (m, 9H).
제조 공정 6 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-히드록시-프로필카바모일)-7-트리플로로메틸-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(14)의 제조
디메틸포름아미드(40 ml)에 용해된 화합물 13(0.5 g, 1.18 mmol, 1 eq)에 N-메틸모르폴린(0.6 g, 5.9 mmol, 5 eq), 1-히드록시벤조트리아졸(0.24 g, 1.77 mmol, 1.5 eq) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(0.27 g, 1.41 mmol, 1.2 eq)를 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 상기 반응식 2에 표시된 아민계 반응물(0.25 g, 1.18 mmol, 1 eq)을 넣고 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 14를 얻었다(0.4 g, 수율 = 55 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.89 - 8.83 (m, 1H), 8.36 - 8.01 (m, 2H), 7.72 - 7.70 (m, 1H), 7.37 - 7.35 (m, 1H), 4.62 - 4.50 (m, 3H), 4.16 - 4.15 (m, 1H), 3.70 - 3.62 (m, 4H), 3.31 (s, 4H), 2.96 - 2.79 (m, 2H), 1.51 - 1.42 (m, 18H).
제조 공정 7 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-옥소-프로필카바모일)-7-트리플로로메틸-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(15)의 제조
디클로로메탄(30ml)에 용해된 화합물 14(0.3 g, 0.49 mmol, 1 eq)에 데스 마틴(Dess Martin) 시약(0.3g, 0.74 mmol, 1.5 eq)을 넣고 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후, 디클로로메탄으로 추출하였다. 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 15를 얻었다(0.2g, 수율 = 67 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.89 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.26 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.73 - 7.70 (m, 1H), 7.50 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.25 - 5.06 (m, 3H), 3.70 (s, 4H), 3.30 (s, 4H), 3.15 - 3.04 (m, 2H), 1.51 - 1.26 (m, 18H).
제조 공정 8 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(16)의 제조
디클로로메탄(0.73ml)에 용해된 화합물 15(0.15 g, 0.25 mmol, 1 eq)에 트리플로로아세트산(0.73 ml, 38 eq)을 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박 막 크로마토그래피로 확인하고 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 16을 얻었다(0.1 g, 수율 = 71 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ : 8.86 - 8.80 (m, 1H), 8.42 (t, J = 8.6 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.90 - 7.87 (m, 3H), 4.87 - 4.51 (m, 3H), 3.59 - 3.45 (m, 8H), 2.97 - 2.62 (m, 2H).
실시예 3 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-8-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산(24)의 제조
[반응식 3]
Figure 112007009619646-pat00103
제조 공정 1 : 2-[(2-트리플로로메틸-페닐아미노)-메틸렌]-말로닉산 디에틸 에스테르(17)의 제조
2-(트리플로로메틸)아닐린(10 g, 62.1 mmol, 1 eq)에 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트(19.3 g, 89.4 mmol, 1.2 eq)를 넣고, 130℃에서 4 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 박막 크로마토그래피로 확인하고 냉각하였다. 여과한 후 목적 화합물 17을 얻었다(19 g, 수율 = 93 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 11.36 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 7.66 - 7.59 (m, 2H), 7.38 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.28 - 7.24 (m, 1H), 4.37 - 4.19 (m, 4H), 1.39 - 1.27 (m, 6H).
제조 공정 2 : 4-옥소-8-트리플로로메틸-1,4-디히드로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸에스테르(18)의 제조
환류 상태의 디페닐 에테르(30 ml)에 화합물 17(10 g, 30.2 mmol, 1 eq )을 천천히 넣은 후 1 시간 동안 교반하였다. 냉각한 후 천천히 따라 붓고 여과하여 목적 화합물 18을 얻었다(7.5 g, 수율 = 87 %).
1H NMR (DMSO, 500 MHz) δ : 11. 67 (brs, 1H), 8.49 - 8.47 (m, 2H), 8.21 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.58 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 4.24 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.28 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
제조 공정 3: 4-클로로-8-트리클로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테 르(19)의 제조
화합물 18(5 g, 17.5 mmol, 1 eq)에 산화염화인(26.8 g, 175 mmol, 10 eq )을 넣고 환류 하에 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 냉각하였다. 20 % NaOH로 중화한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류 한 후 컬럼크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 19를 얻었다(4 g, 수율 = 76 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 9.36 (s, 1H), 8.65 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.77 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.54 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 1.47 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
제조 공정 4 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-8-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(20)의 제조
디클로로메탄(20ml)에 용해된 화합물 19(2 g, 6.6 mmol, 1 eq)에 터트-부톡시 피페라진(1.4 g, 7.3 mmol, 1.1 eg) 및 트리에틸아민(1.3 g, 13.2 mmol. 2 eq)을 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼크로마토그래피(에틸 아세테이트 : 헥산 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 20을 얻었다(2.2 g, 수율 = 73 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 9.06 (s, 1H), 8.40 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.61 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 3.70 (s, 4H), 3.28 (s, 4H), 1.51 (s, 9H), 1.43 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
제조 공정 5 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-8-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산(21)의 제조
에탄올(40ml) 및 물(40ml)에 용해된 화합물 20(2 g, 4.4 mmol, 1 eq)에 리튬 하이드록사이드(0.56 g, 13.2 mmol, 3 eq)를 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 용매를 감압 증류한 후, 1N HCl로 중화하였다. 클로로포름으로 추출하고 감압 증류 한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 21을 얻었다(1.7 g, 수율 = 90 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ : 8.89 (s, 1H), 8.77 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.65 - 7.61 (m, 1H), 3.67 (s, 4H), 3.36 - 3.16 (m, 4H), 1.48 - 1.26 (m, 9H).
제조 공정 6 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-히드록시-프로필카바모일)-8-트리플로로메틸-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(22)의 제조
디메틸포름아미드(40 ml)에 용해된 화합물 21(0.5 g, 1.18 mmol, 1 eq)에 N-메틸모르폴린(0.6 g, 5.9 mmol, 5 eq), 1-히드록시벤조트리아졸(0.24 g, 1.77 mmol, 1.5 eq) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(0.27 g, 1.41 mmol, 1.2 eq)를 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 상기 반응식 3에 표시된 아민계 반응물(0.25 g, 1.18 mmol, 1 eq)을 넣고 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트에 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 22를 얻었다(0.5 g, 수율 = 69 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.97 - 8.67 (m, 1H), 8.38 - 8.36 (m, 1H), 8.09 - 8.00 (m, 1H), 7.61 - 7.58 (m, 1H), 7.30 - 7.26 (m, 1H), 4.54 - 4.49 (m, 3H), 4.15 (s, 1H), 3.69 (s, 4H), 3.32 - 3.29 (m, 4H), 3.03 - 2.71 (m, 2H), 1.55 - 1.44 (m, 18H).
제조 공정 7 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-옥소-프로필카바모일)-8-트리플로로메틸-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테 르(23)의 제조
디클로로메탄(30ml)에 용해된 화합물 22(0.3 g, 0.49 mmol, 1 eq)에 데스 마틴(Dess Martin) 시약(0.3g, 0.74 mmol, 1.5 eq)을 넣고 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후, 디클로로메탄으로 추출하였다. 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 23을 얻었다(0.17g, 수율 = 57 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.97 (s, 1H), 8.38 - 8.37 (m, 1H), 8.11 - 8.04 (m, 1H), 7.60 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.43 - 7.37 (m, 1H), 5.21 - 5.06 (m, 3H), 3.70 (s, 4H), 3.29 (s, 4H), 3.15 - 3.01 (m, 2H), 1.52 - 1.41 (m, 18H).
제조 공정 8 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-8-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(24)의 제조
디클로로메탄(0.73ml)에 용해된 화합물 23(0.15 g, 0.25 mmol, 1 eq)에 트리플로로아세트산(0.73 ml, 38 eq)을 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 24를 얻었다(0.1 g, 수율 = 71 %).
1H NMR (CD3OD, 300 MHz) δ : 8.82 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 8.50 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 8.18 (t, J = 8.3 Hz, 1H), 7.78 - 7.73 (m, 1H), 4.87 - 4.58 (m, 3H), 3.56 - 3.46 (m, 8H), 2.93 - 2.67 (m, 2H).
실시예 4 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페리딘-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산(29)의 제조
[반응식 4]
Figure 112007009619646-pat00104
제조 공정 1 : 4-피페리딘-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(25)의 제조
디클로로메탄(20ml)에 용해된 화합물 11(실시예 2의 제조 공정 3에서 형성됨; 2 g, 6.6 mmol, 1 eq)에 피페리딘(0.62 g, 7.3 mmol, 1.1 eg) 및 트리에틸아민(1.3 g, 13.2 mmol. 2 eq)을 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼크로마토그래피(에틸 아세테이트 : 헥산 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 25를 얻었다(2 g, 수율 = 87 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.91 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.27 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.70 - 7.68 (m, 1H), 4.46 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.31 - 3.29 (m, 2H), 1.86 - 1.73 (m, 6H), 1.45 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
제조 공정 2 : 4-피페리딘-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산(26)의 제조
에탄올(20ml) 및 물(10ml)에 용해된 화합물 25(1.9 g, 5.4 mmol, 1 eq)에 리튬 하이드록사이드(0.68 g, 16.2 mmol, 3 eq)를 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반 하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 용매를 감압 증류한 후, 1N HCl로 중화하였다. 클로로포름으로 추출하고 감압 증류 한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 26을 얻었다(1.6 g, 수율 = 90 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ : 8..66 (s, 1H), 8.31 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.71 - 7.69 (m, 1H), 3.39 - 3.37 (m, 4H), 1.81 - 1.70 (m, 6H).
제조 공정 3 : 5-플로로-4-하이드록시-3-[(4-피페리딘-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 터트-부틸 에스테르(27)의 제조
디메틸포름아미드(40 ml)에 용해된 화합물 26(0.5 g, 1.54 mmol, 1 eq)에 N-메틸모르폴린(0.78 g, 7.7 mmol, 5 eq), 1-히드록시벤조트리아졸(0.31 g, 2.31 mmol, 1.5 eq) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(0.44 g, 2.31 mmol, 1.5 eq)를 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 상기 반응식 4에 표시된 아민계 반응물(0.32 g, 1.18 mmol, 1 eq)을 넣고 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 27를 얻었다(0.38 g, 수율 = 48 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.84 - 8.79 (m, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.21 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.67 - 7.65 (m, 1H), 7.43 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.59 - 4.49 (m, 3H), 4.18 - 4.15 (m, 1H), 2.87 - 2.81 (m, 2H), 1.83 - 1.76 (m, 6H), 1.46 (s, 9H).
제조 공정 4 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페리딘-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 터트-부틸 에스테르(28)의 제조
디클로로메탄(10ml)에 용해된 화합물 27(0.28 g, 0.55 mmol, 1 eq)에 데스 마틴(Dess Martin) 시약(0.35g, 0.83 mmol, 1.5 eq)을 넣고 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후, 디클로로메탄으로 추출하였다. 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 28을 얻었다(0.2g, 수율 = 70 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.86 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.25 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.71 - 7.69 (m, 1H), 7.44 - 7.43 (m, 1H), 5.27 - 5.08 (m, 3H), 3.32 - 3.30 (m, 6H), 3.11 - 307 (m, 2H), 1.85 - 1.77 (m, 6H), 1.45 (s, 9H).
제조 공정 5 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페리딘-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산(29)의 제조
디클로로메탄(0.5ml)에 용해된 화합물 28(0.09 g, 0.18 mmol, 1 eq)에 트리플로로아세트산(0.5 ml, 38 eq)을 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 29를 얻었다(0.04 g, 수율 = 40 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ : 8.59 (m, 0.5H), 8.55 - 8.43 (m, 0.5H), 8.21 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 5.20 - 5.00 (m, 1H), 4.60 - 4.40 (m, 0.5H), 4.58 - 4.45 (m, 1.5H), 3.64 - 3.45 (m, 4H), 2.94 - 2.90 (m, 1.5H), 2.62 - 2.55 (m, 0.5H), 1.90 - 1..82 (m. 6H).
실시예 5 : 5-플로로-3-[(4-모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(34)의 제조
[반응식 5]
Figure 112007009619646-pat00105
제조 공정 1 : 4-모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(30)의 제조
디클로로메탄(20ml)에 용해된 화합물 11(실시예 2의 제조 공정 3에서 형성됨; 2 g, 6.6 mmol, 1 eq)에 모르폴린(0.64 g, 7.3 mmol, 1.1 eg) 및 트리에틸아 민(1.3 g, 13.2 mmol. 2 eq)을 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼크로마토그래피(에틸 아세테이트 : 헥산 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 30을 얻었다(2 g, 수율 = 86 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.97 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.30 (d, J = 5 Hz, 1H), 7.74 - 7.72 (m, 1H), 4.49 (q, J = 5 Hz, 2H), 3.98 - 3.97 (m, 4H), 3.37 - 3.35 (m, 4H), 1.47 (t, J = 5 Hz, 3H).
제조 공정 2 : 4-모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산(31)의 제조
에탄올(20ml) 및 물(10ml)에 용해된 화합물 30(1.9 g, 5.4 mmol, 1 eq)에 리튬 하이드록사이드(0.68 g, 16.2 mmol, 3 eq)를 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 용매를 감압 증류한 후, 1N HCl로 중화하였다. 클로로포름으로 추출하고 감압 증류 한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 31을 얻었다(1.6 g, 수율 = 90 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ : 8.66 (s, 1H), 8.31 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.71 - 7.69 (m, 1H), 3.39 - 3.37 (m, 4H), 1.81 - 1.70 (m, 6H).
제조 공정 3 : 5-플로로-4-하이드록시-3-[(4-모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 터트-부틸 에스테르(32)의 제조
디메틸포름아미드(40 ml)에 용해된 화합물 31(0.5 g, 1.53 mmol, 1 eq)에 N-메틸모르폴린(0.78 g, 7.7 mmol, 5 eq), 1-히드록시벤조트리아졸(0.31 g, 2.30 mmol, 1.5 eq) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(0.44 g, 2.3 mmol, 1.5 eq)을 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 상기 반응식 5에 표시된 아민계 반응물(0.32 g, 1.53 mmol, 1 eq)을 넣고 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 32를 얻었다(0.5 g, 수율 = 69 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.92 - 8.82 (m, 1H), 8.36 - 8.22 (m, 2H), 8.00 - 7.80 (m, 1H), 7.72 - 7.68 (m, 1H), 7.60 - 7.40 (m, 0.5H), 4.64 - 4.53 (s, 4H), 3.96 (s, 4H), 3.39 (s, 4H), 2.88 - 2.57 (m, 3H), 1.46 - 1.37 (m, 9H).
제조 공정 4 : 5-플로로-3-[(4-모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카 보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 터트-부틸 에스테르(33)의 제조
디클로로메탄(10ml)에 용해된 화합물 32(0.42 g, 0.81 mmol, 1 eq)에 데스 마틴(Dess Martin) 시약(0.51g, 1.2 mmol, 1.5 eq)을 넣고 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후, 디클로로메탄으로 추출하였다. 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 33을 얻었다(0.29g, 수율 = 70 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.91 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.28 (d, J = 10 Hz, 1H), 7.74 - 7.72 (m, 1H), 7.54 (d, J = 5 Hz, 1H), 5.25 - 5.07 (m, 3H), 3.99 - 3.97 (m, 2H), 3.38 - 3.36 (m, 2H), 3.16 - 3.09 (m, 2H), 1.46 (s, 9H).
제조 공정 5 : 5-플로로-3-[(4-모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(34)의 제조
디클로로메탄(0.85ml)에 용해된 화합물 33(0.15 g, 0.29 mmol, 1 eq)에 트리플로로아세트산(0.85 ml, 38 eq)을 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 34를 얻었다(0.1 g, 수율 = 59 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ : 8.80 - 8.60 (m, 1H), 8.48 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 7.94 - 7.92 (m, 1H), 5.30 - 5.10 (m, 1H), 4.79 - 4.39 (m, 2H), 4.03 - 3.93 (m, 4H), 3.79 - 3.65 (m, 3H), 3.20 - 2.70 (m, 1.5H), 2.63 - 2.60 (m, 0.5H).
실시예 6 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-티오모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산(39)의 제조
[반응식 6]
Figure 112007009619646-pat00106
제조 공정 1 : 4-티오모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(35)의 제조
디클로로메탄(20ml)에 용해된 화합물 11(실시예 2의 제조 공정 3에서 형성됨; 2 g, 6.6 mmol, 1 eq)에 티오모르폴린(0.75 g, 7.3 mmol, 1.1 eg) 및 트리에틸아민(1.3 g, 13.2 mmol. 2 eq)을 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼크로마토그래피(에틸 아세테이트 : 헥산 = 1 : 2)로 정제하여 목적 화합물 35를 얻었다(2.3 g, 수율 = 96 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.99 (s, 1H), 8.29 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.76 - 7.73 (m, 1H), 4.50 (q, J = 7.13 Hz, 2H), 3.58 - 3.56 (m, 4H), 2.91 (s, 4H), 1.48 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
제조 공정 2 : 4-티오모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카르복시산(36)의 제조
에탄올(40ml) 및 물(40ml)에 용해된 화합물 35(2 g, 5.4 mmol, 1 eq)에 리튬 하이드록사이드(0.68 g, 16.2 mmol, 3 eq)를 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였 다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 용매를 감압 증류한 후, 1N HCl로 중화하였다. 클로로포름으로 추출하고 감압 증류 한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 36을 얻었다(1.7 g, 수율 = 90 %).
1H NMR (CD3OD3, 300 MHz) δ : 8.73 (s, 1H), 8.35 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.77 - 7.75 (m, 1H), 3.65 - 3.63 (m, 4H), 2.86 (s, 4H).
제조 공정 3 : 5-플로로-4-하이드록시-3-[(4-티오모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 터트-부틸 에스테르(32)의 제조
디메틸포름아미드(40 ml)에 용해된 화합물 36(0.5 g, 1.46 mmol, 1 eq)에 N-메틸모르폴린(0.74 g, 7.3 mmol, 5 eq), 1-히드록시벤조트리아졸(0.30 g, 2.19 mmol, 1.5 eq) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(0.42 g, 2.19 mmol, 1.5 eq)를 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 상기 반응식 6에 표시된 아민계 반응물(0.3 g, 1.46 mmol, 1 eq)을 넣고 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후 클로로포름으로 추출하였다. 감압 증류한 후 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 37을 얻었다(0.25 g, 수율 = 32 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz) δ : 8.94 - 8.86 (m, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.37 - 8.26 (m, 1H), 8.26 - 8.25 (m, 1H), 7.74 - 7.72 (m, 1H), 7.50 - 7.39 (m, 1H), 4.63 - 4.50 (m, 3H), 4.19 - 4.18 (m, 1H), 3.60 - 3.58 (m, 4H), 2.91 - 2.84 (m, 4H), 2.76 - 2.73 (m, 2H), 1.44 (s, 9H).
제조 공정 4 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-티오모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 터트-부틸 에스테르(38)의 제조
디클로로메탄(30ml)에 용해된 화합물 37(0.23 g, 0.43 mmol, 1 eq)에 데스 마틴(Dess Martin) 시약(0.28g, 0.65 mmol, 1.5 eq)을 넣고 2 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨을 넣고 교반한 후, 디클로로메탄으로 추출하였다. 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 목적 화합물 38을 얻었다(0.16g, 수율 = 75 %).
제조 공정 5 : 5-플로로-4-옥소-3-[(4-티오모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산(39)의 제조
디클로로메탄(0.12ml)에 용해된 화합물 38(0.02 g, 0.04 mmol, 1 eq)에 트리플로로아세트산(0.12 ml, 38 eq)을 넣고 1 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 감압 증류한 후, 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 메틸렌클로라이드 = 1 : 4)로 정제하여 목적 화합물 39를 얻었다(0.1 g, 수율 = 71 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz) δ : 8.52 - 8.48 (m, 1H), 8.37 - 8.31 (m, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.88 - 7.86 (m,, 1H), 4.55 - 4.24 (m, 4H), 3.51 - 3.26 (m, 4H), 3.00 - 2.57 (m, 6H),
실시예 7 : 5-플로로-3-[(8-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(54)의 제조
[반응식 7]
Figure 112007009619646-pat00107
제조 공정 1 : 2-[(2-니트로-페닐아미노)-메틸렌]-말로닉산 디에틸 에스테르(47)의 제조
에탄올(100 ml)에 용해된 2-니트로아닐린(20.0 g, 144.8 mmol)에 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트(34 g, 159.3 mmol)를 넣고, 120℃에서 6 시간 동안 교반하였다. 반응 종결을 박막 크로마토그래피로 확인하고 냉각하였다. 여과한 후 헥산(100ml)로 3번 세척하여 목적 화합물 47을 얻었다(31 g, 수율 = 69 %).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ : 12.6-12.53 (m, 1 H), 8.53 ( d, J = 12.0 Hz, 1 H ), 8.13 (d, J = 4.0 Hz, 1 H), 7.73-7.66 (m, 1 H), 7.52-7.48 (m, 1 H), 7.27-7.17 (m, 1 H), 4.48-4.20 (m, 4 H), 1.45-1.26 (m, 6 H)
제조 공정 2 : 8-니트로-4-옥소-1,4-디히드로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸에스테르(48)의 제조
260℃의 환류 상태의 페닐 에테르(400 ml)에 화합물 47(140.0 g, 450 mmol)을 천천히 넣은 후 3 시간 동안 교반하였다. 반응 종결 후 실온으로 냉각하고 석유 에테르(1.4L)에 넣어 교반하면서 결정화하였다. 생성된 화합물을 여과한 후, 석유 에테르로 세척하고 감압 하에서 용매 제거하여 목적 화합물 48을 얻었다(104.4 g, 수율 = 88 %).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ : 9.01 (s, 1 H), 8.37 (d, J = 8.7 Hz, 1 H), 8.01 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.61 (dd, J = 8.4, 7.5 Hz, 1 H), 4.47 (q, J = 7.2 Hz, 2 H), 3.72-3.69 (m, 4 H), 3.31-3.28 (m, 4 H), 1.51 (s, 9 H), 1.43 (t, J = 7.2 Hz, 3 H).
제조 공정 3: 4-클로로-8-니트로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(49)의 제조
화합물 48(50 g, 0.19 mol)에 산화염화인(175ml, 1.91 mol)을 넣고 환류 하에 5 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고, 산화염화인을 감압 하에서 제거한 후, 감압 농축된 화합물을 0℃로 냉각된 물에 넣고 교반하였다. 디클로로메탄(250ml)를 넣어 녹이고 암모니아수로 중화한 후, 유기층을 추출하였다. 포화 탄산수소나트륨 수용액, 포화 소금물로 세척한 후, 황산 마그네슘 무수물로 건조하고, 활성탄을 넣어 30 분간 교반하였다. 여과하고 감압 농축된 혼합물에 메탄올(500 ml)을 부어 결정화한 후, 생성된 고체 화합물을 여과해 목적 화합물 49를 얻었다(38 g, 수율 = 72 %).
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ : 9.33 (s, 1 H), 8.66 (d, J = 8.4 Hz, 1 H ), 8.65 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.80 (t, J = 8.0 Hz, 1 H), 4.53 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.47 (t, J = 7.2 Hz, 3 H).
제조 공정 4 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(50)의 제조
디클로로메탄(15ml)에 용해된 화합물 49(1.6 g, 5.64 mmol)에 터트-부톡시 피페라진(1.3 g, 6.77 mmol 및 트리에틸아민(1.1 g, 11.2 mmol)을 넣고 실온에서 10 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인한 후, 물(15ml)을 넣어 교반하고, 유기층을 추출한 후, 포화 탄산수소나트륨 수용액 및 포화 소금물로 세척하였다. 황산 마그네슘 무수물로 건조하고, 여과한 후 감압 농축하였다. 감압 농축한 혼합물을 컬럼크로마토그래피(에틸 아세테이트 : 헥산 = 1 : 2)로 정제하여 노란색 고체 상태의 목적 화합물 50을 얻었다(2.13 g, 수율 = 88 %).
1H NMR (CDCl3, 300 MHz): δ : 9.01 (s, 1 H), 8.37 (d, J = 8.7 Hz, 1 H), 8.01 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.61 (dd, J = 8.4, 7.5 Hz, 1 H), 4.47 (q, J = 7.2 Hz, 2 H), 3.72-3.69 (m, 4 H), 3.31-3.28 (m, 4 H), 1.51 (s, 9 H), 1.43 (t, J = 7.2 Hz, 3 H).
제조 공정 5 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카르복시산(51)의 제조
에탄올 및 물의 혼합 용매(4 : 1, 20ml)에 용해된 화합물 50(1.5 g, 3.49 mmol)에 리튬 하이드록사이드(0.44 g, 10.46 mmol)를 넣고 실온에서 48 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고, 1N 염산으로 중화하고, 감압 증류하여 용매를 제거하였다. 감압 농축한 혼합물을 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 에틸아세테이트 = 1 : 10)로 정제하여 고체 상태의 목적 화합물 51을 얻었다(1.01 g, 수율 = 72 %).
1H NMR (CD3OD, 300 MHz): δ : 8.73 (s, 1 H), 8.45 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 8.00 (d, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.65 (dd, J = 8.4, 7.6 Hz, 1 H), 3.69 (br s, 4 H), 3.42-3.89 (m, 4 H), 1.49 (s, 9H).
제조 공정 6 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-히드록시-프로필카바모일)-8-니트로-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(52)의 제조
디메틸포름아미드(5 ml)에 용해된 화합물 51(0.5 g, 1.24 mmol)에 N-메틸모르폴린(0.38 g, 1.49 mmol), 1-히드록시벤조트리아졸(0.2 g, 1.49 mmol) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드(0.29 g, 1.49 mmol)를 넣고 30 분간 실온에서 교반하였다. 상기 반응식 7에 표시된 아민계 반응물 51-1을 넣고 실온에서 12 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인 하고, 디클로로메탄(10ml)으로 추출하고, 물(10ml)로 두 번, 포화 소금물로 한 번 세척한 후, 황산 마그네슘 무수물로 건조하고, 여과 후 농축하였다. 감압 농축한 혼합물을 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 2)로 정제하여 연노랑 고체 상태의 목적 화합물 52를 얻었다(0.42 g, 수율 = 57 %).
1H NMR (CD3Cl3, 300 MHz): δ : 8.84 (s, 0.5 H), 8.81 (s, 0.5 H), 8.31 (d, J = 8.7 Hz, 1 H), 7.94 (d, J = 6.9 Hz, 1 H), 7.56 (t, J = 8.4 Hz, 1 H), 7.45 (d, J = 8.4 Hz, 0.5 H), 7.33 (d, J = 8.7 Hz, 0.5 H), 4.64-4.53 (m, 3 H), 4.17-4.12 (m, 1 H), 3.71-3.67 (m, 4 H), 3.41-3.24 (m, 4 H), 2.79-2.71 (m, 2 H), 1.50 (s, 9H), 1.46 (s, 9 H).
제조 공정 7 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-옥소-프로필카바모일)-8-니트로-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(53)의 제조
디클로로메탄(3.5ml)에 용해된 화합물 52(0.34 g, 0.57 mmol)에 데스 마틴(Dess Martin) 시약(0.29 g, 0.68 mmol)을 0℃에서 넣고 10 분간 교반한 후 실온에서 3 시간 동안 교반하였다. 반응 종료를 박막 크로마토그래피로 확인하고 포화 탄산수소나트륨(3ml)을 넣고 30 분간 교반한 후, 디클로로메탄으로 추출하였다. 포화 소금물로 한 번 세척하고, 황산 마그네슘 무수물로 건조한 후, 여과하고 농축하 였다. 감압 농축한 혼합물을 컬럼 크로마토그래피(에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 1)로 정제하여 연노랑 고체 상태의 목적 화합물 53을 얻었다(0.29 g, 수율 = 85 %).
1H NMR (CD3Cl3, 500 MHz): δ : 8.89 (s, 1 H), 8.33 (dd, J = 10, 1.2 Hz, 1 H ), 8.31 (dd, J = 25, 1.2 Hz, 1 H), 7.60 (dd, J = 10, 7.6 Hz, 1 H), 7.35 (d, J = 25 Hz, 1 H), 5.19-5.18 (m, 2 H), 5.09 (q, 1 H), 3.71-3.67 (m, 4 H), 3.30-3.29 (m, 4 H), 3.15-2.84 (m, 2 H), 1.50 (s, 9H), 1.43 (s, 9 H).
제조 공정 8 : 5-플로로-3-[(8-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(54)의 제조
디클로로메탄(1ml)에 용해된 화합물 53(0.2 g, 0.34 mmol)에 트리플로로아세트산(1 ml)을 0℃에서 넣고 10 분간 교반하고 실온에서 2 시간 동안 교반하였다. 감압 하에서 용매 및 트리플로로아세트산을 제거하고, 혼합물을 컬럼 크로마토그래피(메탄올 : 디클로로메탄 = 1 : 10)로 정제하여 고체 상태의 목적 화합물 54를 얻었다(0.15 g, 수율 = 79 %).
1H NMR (CD3OD, 500 MHz): δ : 8.78 (s, 0.5 H), 8.74 (s, 0.5 H ), 8.45 (d, J = 7.4 Hz, 1 H), 8.12 (t, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.77-7.73 (m, 1 H), 5.14-5.11 (m, 1 H), 4.83-4.81 (m, 1 H), 4.60-4.58 (m, 0.5 H), 4.51-4.47 (m, 1 H), 3.62-3.48 (m, 8 H), 2.95-2.55 (m, 2H).
실시예 8 : 5-플로로-3-[(8-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(63)의 제조
[반응식 8]
Figure 112007009619646-pat00108
제조 공정 1 : 2-[(2-플로로-페닐아미노)-메틸렌]-말로닉산 디에틸 에스테 르(56)의 제조
2-플로로아닐린 55를 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 1과 유사한 방법으로 목적 화합물 56을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ : 11.07 ( d, J = 12.9 Hz , 1 H), 8.51 (d, J = 13.6 Hz, 1 H ), 7.29-7.28 (m, 1 H), 7.17-7.28 (m, 2 H), 7.10-7.08 (m, 1 H), 4.33 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 4.26 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.39 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3 H).
제조 공정 2 : 8-플로로-4-옥소-1,4-디히드로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸에스테르(57)의 제조
화합물 56을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 2와 유사한 방법으로 목적 화합물 57을 얻었다.
1H NMR ( CD3OD, 500 MHz): δ : 12.47 (s, 1 H), 8.63 ( s, 1 H ), 8.12 (d, J = 8.2 Hz, 1 H), 7.58-7.54 (m, 1 H), 7.46-7.42 (m, 1 H), 4.35 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.39 (t, J = 7.1 Hz, 3 H).
제조 공정 3: 4-클로로-8-플로로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(58)의 제조
화합물 57을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 3과 유사한 방법으로 목적 화합물 58을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ : 9.23 (s, 1 H), 8.21 (d, J = 8.1 Hz, 1 H ), 7.68-7.64 (m, 1 H), 7.58-7.54 (m, 1 H), 4.52 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.47 (t, J = 7.1 Hz, 3 H).
제조 공정 4 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-8-플로로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(59)의 제조
화합물 58을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 4와 유사한 방법으로 목적 화합물 59를 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ : 8.93 (s, 1 H), 7.94 (d, J = 8.3 Hz, 1 H ), 7.51-7.42 (m, 2 H), 4.47 (q, J = 7.2 Hz, 2 H), 3.69 (br s, 4 H), 3.29 (br s, 4 H), 1.51 (s, 9 H), 1.44 (t, J = 7.2 Hz, 3 H).
제조 공정 5 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-8-플로로-퀴놀린-3-카르복시산(60)의 제조
화합물 59를 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 5와 유사한 방법으로 목적 화합물 60을 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 500 MHz): δ : 8.65 (s, 1 H),8.27-8.24 (m, 1 H ), 7.53-7.51 (m, 1 H), 7.39-7.35 (m, 1 H), 3.65 (br s, 4 H), 3.37 (br s, 4 H), 1.46 (s, 9 H).
제조 공정 6 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-히드록시-프로필카바모일)-8-플로로-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(61)의 제조
화합물 60을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 6과 유사한 방법으로 목적 화합물 61을 얻었다.
1H NMR (CD3Cl3, 500 MHz): δ : 8.86 (s, 0.5 H), 8.79 (s, 0.5 H), 7.56 (t, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.54-7.37 (m, 3 H), 4.62-4.49 (m, 1 H), 3.68 (brs, 4 H), 3.31-3.29 (m, 4 H), 2.85-2.70 (m, 2 H), 1.50 (s, 9H), 1.46 (s, 9 H).
제조 공정 7 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-옥소-프로필카바모일)-8-플로로-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(62)의 제조
화합물 61을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 7과 유사한 방법으로 목적 화합물 62를 얻었다.
1H NMR (CD3Cl3, 500 MHz): δ : 8.86 (s, 1 H), 7.90 (d, J = 8.4 Hz, 1 H), 7.56 (d, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.51-7.46 (m, 1 H), 7.44-7.40 (m, 1 H), 5.25-5.06 (m, 3 H), 3.69 (brs, 4 H), 3.32-3.27 (m, 4 H), 3.09 (dq, J = 17.9, 4.7 Hz, 2 H), 1.51 (s, 9H), 1.44 (s, 9 H).
제조 공정 8 : 5-플로로-3-[(8-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(63)의 제조
화합물 62를 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 8과 유사한 방법으로 목적 화합물 63을 얻었다.
1H NMR (CD3Cl3, 500 MHz): δ : 8.75 (s, 0.5 H),8.70 (d, J = 4.0 Hz, 0.5 H), 8.03-8.00 (m, 1 H), 7.68-7.62 (m, 1 H), 7.59-7.54 (m, 1 H), 4.59-4.45 (m, 1 H), 3.69-3.65 (m, 1 H), 3.59-3.43 (m, 8 H), 2.96-2.93 (m, 2 H).
실시예 9 : 5-플로로-3-[(7-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(72)의 제조
[반응식 9]
Figure 112007009619646-pat00109
제조 공정 1 : 2-[(3-플로로-페닐아미노)-메틸렌]-말로닉산 디에틸 에스테르(65)의 제조
3-플로로아닐린 64를 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 1과 유사한 방법으로 목적 화합물 65를 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ : 11.06 ( d, J = 13.2 Hz , 1 H), 8.46 (d, J = 13.5 Hz, 1 H ), 7.35-7.32 (m, 1 H), 6.91 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 6.87-6.84 (m, 2 H), 4.31 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 4.26 (q, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.38 (t, J = 7.1 Hz, 3 H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3 H).
제조 공정 2 : 7-플로로-4-옥소-1,4-디히드로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸에스테르(66)의 제조
화합물 65를 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 2와 유사한 방법으로 목적 화합물 66을 얻었다.
1H NMR (DMSO-d6, 500 MHz): δ : 12.30 (s, 1 H), 8.58 ( s, 1 H ), 8.12 (dd, J = 8.9, 6.3 Hz, 1 H), 7.40-7.37 (m, 1 H), 7.29-7.25 (m, 1 H), 4.21 (q, J = 7.0 Hz, 2 H), 1.28 (t, J = 7.0 Hz, 3 H).
제조 공정 3: 4-클로로-7-플로로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(67)의 제조
화합물 66을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 3과 유사한 방법으로 목적 화합물 67을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ : 9.22 (s, 1 H), 8.45 (dd, J = 9.4, 5.9 Hz, 1 H ), 7.78 (dd, J = 9.5 2.5 Hz, 1 H), 7.51-7.47 (m, 1 H), 4.51 (q, J = 7.2 Hz, 2 H), 1.47 (t, J = 7.2 Hz, 3 H).
제조 공정 4 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-7-플로로-퀴놀린-3-카르복시산 에틸 에스테르(68)의 제조
화합물 67을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 4와 유사한 방법으로 목적 화합물 68을 얻었다.
1H NMR (CDCl3, 500 MHz): δ : 8.91 (s, 1 H), 8.19 (dd, J = 9.2, 6.0 Hz, 1 H ), 7.69 (dd, J = 9.7 2.5 Hz, 1 H), 7.35-7.31 (m, 1 H), 4.46 (q, J = 7.2 Hz, 2 H), 3.69 (br s, 4 H), 3.28 (br s, 4 H), 1.51 (s, 9 H), 1.44 (t, J = 7.2 Hz, 3 H).
제조 공정 5 : 4-(4-터트-부톡시카보닐-피페라진-1-일)-7-플로로-퀴놀린-3-카르복시산(69)의 제조
화합물 68을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 5와 유사한 방법으로 목적 화합물 69를 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 500 MHz): δ : 8.67 (s, 1 H),8.01 (d, J = 8.6 Hz, 1 H ), 7.54-7.49 (m, 1 H), 7.42-7.39 (m, 1 H), 3.67 (br s, 4 H), 3.40-3.38 (m, 4 H), 1.48 (s, 9 H).
제조 공정 6 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-히드록시-프로필카바모일)-7-플로로-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(70)의 제조
화합물 69를 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 6과 유사한 방법으로 목적 화합물 70을 얻었다.
1H NMR (CD3Cl3, 500 MHz): δ : 8.86 (s, 0.5 H), 8.78 (s, 0.5 H), 8.16-8.12 (m, 1 H), 7.70-7.67 (m, 1 H), 7.47-7.45 (m, 0.5 H), 7.41-7.39 (m, 0.5 H), 7.34-7.30 (m, 1 H), 4.62-4.48 (m, 3 H), 4.13-4.11 (m, 1 H), 3.68 (brs, 4 H), 3.30-3.29 (m, 4 H), 2.88-2.73 (m, 2 H), 1.51 (s, 9H), 1.45 (s, 9 H).
제조 공정 7 : 4-[3-(1-터트-부톡시카보닐메틸-3-플로로-2-옥소-프로필카바모일)-7-플로로-퀴놀린-4-일]-피페라진-1-카르복시산 터트-부틸 에스테르(71)의 제조
화합물 70을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 7과 유사한 방법으로 목적 화합물 71을 얻었다.
1H NMR (CD3Cl3, 500 MHz): δ : 8.83 (s, 1 H), 8.93 (dd, J = 9.3, 5.9 Hz, 1 H), 7.70 (dd, J = 9.6, 2.6 Hz, 1 H), 7.61 (d, J = 7.4 Hz, 1 H), 7.35-7.31 (m 1 H), 5.26-5.06 (m, 3 H), 3.69 (brs, 4 H), 3.29-3.28 (m, 4 H), 3.08 (dq, J = 17.0, 4.7 Hz, 2 H), 1.51 (s, 9H), 1.44 (s, 9 H).
제조 공정 8 : 5-플로로-3-[(7-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(72)의 제조
화합물 71을 사용해 상기 실시예 7의 제조 공정 8과 유사한 방법으로 목적 화합물 72를 얻었다.
1H NMR (CD3Cl3, 500 MHz): δ : 8.74 (s, 0.5 H),8.69 (d, J = 2.4 Hz, 0.5 H), 8.32-8.28 (m, 1 H), 7.68-7.63 (m, 1 H), 7.53-7.47 (m, 1 H), 5.12-5.95 (m, 1 H), 4.59-4.47 (m, 1 H), 3.59-3.46 (m, 8 H), 2.96-2.93 (m, 2 H).
실시예 10 : 5-플로로-3-{[4-(4-메틸-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐]-아미노}-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(74)의 제조
[반응식 10]
Figure 112007009619646-pat00110
상기 화합물 73을 사용해 실시예 7의 제조 공정 8과 유사한 방법으로 목적 화합물 74를 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 500 MHz): δ 8.73-8.71 (m, 0.5 H), 8.68-8.67 (m, 0.5 H ), 8.46-8.44 (m, 1 H), 8.11-8.09 (m, 1 H), 7.76-7.72 (m, 1 H), 5.22-5.13 (m, 2 H), 3.62-3.30 (m, 8 H), 2.90-2.87 (m, 5 H).
실시예 11 : 3-{[4-(4-에틸-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐]-아미노}-5-플로로-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(76)의 제조
[반응식 11]
Figure 112007009619646-pat00111
상기 화합물 75를 사용해 실시예 7의 제조 공정 8과 유사한 방법으로 목적 화합물 76을 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 500 MHz): δ 8.79-8.75 (m, 1 H),8.45-8.43 (m, 1 H ), 8.13-8.11 (m, 1 H), 7.76-7.74 (m, 1 H), 5.11-5.08 (m, 1 H), 3.70-3.57 (m, 10 H), 3.34-3.31 (m, 3 H), 2.95-2.91 (m, 1 H), 1.43-1.39 (m, 3 H).
실시예 12 : 5-플로로-3-({4-[4-(2-메톡시-에틸)-피페라진-1-일]-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐}-아미노)-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(78)의 제조
[반응식 12]
Figure 112007009619646-pat00112
상기 화합물 77을 사용해 실시예 7의 제조 공정 8과 유사한 방법으로 목적 화합물 78을 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 500 MHz): δ 8.79-8.78 (m, 0.5 H), 8.76-8.75 (m, 0.5 H ), 8.43-8.41 (m, 1 H), 8.13-8.10 (m, 1 H), 7.77-7.73 (m, 1 H), 5.09-5.07 (m, 1 H), 3.79 (br s, 2 H), 3.69-3.66 (m, 8 H), 3.61 (br s, 2 H), 3.48 (s, 3 H), 2.95-2.92 (m, 2 H), 2.65-2.63 (m, 1 H).
실시예 13 : 5-플로로-3-[(8-플로로-4-피페리딘-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산(80)의 제조
[반응식 13]
Figure 112007009619646-pat00113
상기 화합물 79를 사용해 실시예 7의 제조 공정 8과 유사한 방법으로 목적 화합물 80을 얻었다.
1H NMR (CD3OD, 500 MHz): δ 8.59-8.52 (m, 1 H),8.01-8.00 (m, 1 H ), 7.62-7.54 (m, 1 H), 5.08 (br s, 1 H), 4.58-4.56 (m, 1 H), 3.50-3.49 (m, 1 H), 3.41 (br s, 4 H), 3.01-2.91 (m, 2 H), 1.86-1.78 (m, 6 H).
시험예 1 : 초대배양한 뉴런 세포의 OGD모델에서 카스파제-3의 억제 활성 평가
카스파제-3 억제 활성은 OGD유발 in vitro 유사뇌허혈 모델에서 평가되었다. 임신한 후 15-20일 되는 SD 랫을 희생하여 태아의 대뇌 피질을 분리한 후 900rpm 에서 9분간 원심 분리하였다. 침전물을 10% FBS, 5% HS, 1% PS를 함유한 DMEM을 가 하여 완전히 단일 세포로 분리하고, PEI와 라미닌(laminin)으로 미리 코팅해 놓은 플레이트에 1*106 cells/ml로 접종하였다. DIV 10-12일 후, 글루코오스-프리 DMEM을 95% NO2, 5% CO2로 20분 동안 개스 버블하여 배지에 들어있는 산소를 제거한 후, 배양 세포가 있는 배지와 교환하였다. 그 후, 하이폭시아 챔버(Hypoxia chamber)에 넣어 37℃에서 1.5 시간 동안 OGD 상태에 노출시킨 후, 글루코오스가 들어있는 DMEM으로 바꾸어주면서 시료를 처리하였다. 처리 후, 4시간 후에 세포 내 카스파제-3 분석을 수행하였다. 1*106 cell을 100ul의 세포 용해 버퍼로 채취한 후, 얻은 용해물에 직접 카스파제-3 기질인 DEVD-AFC를 20uM 농도로 35℃에서 30분 동안 반응시켰다. 반응 후, 카스파제-3에 의해 기질이 잘려서 생성되는 정도를 ELISA 판독기를 이용해 여기 파장 400nm, 방출 파장 508nm에서 형광 측정하였다. GraphPad Prism 4.0 프로그램을 사용하여 각 시험 대상 화합물에 대한 IC50값을 산출하였다.
이렇게 산출된 각 시험 대상 화합물에 대한 IC50값을 하기 표 1에 표시하였다.
[표 1]
화합물 IC50(μM) 화학 구조
실시예 1의 화합물 8 0.619
실시예 2의 화합물 16 1.69
실시예 3의 화합물 24 15.13
실시예 4의 화합물 29 <0.01
실시예 7의 화합물 54 0.831
실시예 8의 화합물 63 3.89
실시예 9의 화합물 72 0.571
실시예 12의 화합물 78 0.218
실시예 13의 화합물 80 0.323
비교예 1(Merck; JMC (2004) 14, 2466-74 참조, Figure 1의 5번 화합물) 10.5
Figure 112007009619646-pat00114
비교예 2 (Ac-DEVD-CHO; 미국특허 제 5,834,228 호 참조) 3.5
Figure 112007009619646-pat00115
상기 표 1을 참조하면, 상기 실시예 4의 화합물 29는 IC50 가 10nM 정도로 매우 우수한 카스파제-3 억제 활성을 나타내고, 실시예 1, 2, 3, 7, 8, 9, 12 및 13의 화합물들도 대략 200nM~15uM의 IC50 값을 나타내어 종래에 사용되던 물질과 동등하거나 보다 우수한 카스파제-3 억제 활성을 나타냄이 확인되었다.
시험예 2 : 효소 수준의 카스파제-3 억제 활성 평가
시스테인 프로테아제로 알려진 카스파제-3을 이미 보고된 방법 (참조: Rotonda et al., Nat Struct Biol., 1996, 3(7):619)에 의거하여 발현, 정제 및 활성화 단계를 거쳐 얻었고, 이를 사용하여 효소 수준에서 각 시험 대상 화합물의 카스파제-3 억제 활성을 평가하였다.
p12 및 p17 서브유닛을 각각 대장균에서 발현시키고, 니켈 컬럼과 음이온교환 크로마토그래피 단계로 정제한 후 재결합시켜, 형광 기질 Ac-DEVD-AFC를 이용해 각 시험 대상 화합물의 효소 비활성도를 측정하였다.
위 시험 과정에서는, 50 mM NaCl, 10 mM DTT, 1 mM EDTA, 10% 글리세롤 및 0.1% CHAPS를 포함한 완충 용액에서 카스파제-3를 10nM 농도의 Ac-DEVD-AFC와 37C에서 효소 반응시켰으며, 형광 분광기로 바이오 테크(BIO TEK)사의 Synergy HT 형광 분광계를 사용하였고, 여기 파장 400nm, 방출 파장 508nm를 사용하였다.
각 시험 대상 화합물에 대한 IC50값을 하기 표 2에 표시하였다.
[표 2]
화합물 IC50(nM)
실시예 1의 화합물 8 22.0
실시예 4의 화합물 29 7.4
실시예 5의 화합물 34 14.0
실시예 7의 화합물 54 8.4
실시예 9의 화합물 72 18.6
실시예 10의 화합물 74 4.5
실시예 11의 화합물 76 18.2
실시예 12의 화합물 78 1.8
실시예 13의 화합물 80 3.2
상기 표 2를 참조하면, 실시예 1, 4, 5, 7 및 9 내지 13의 화합물들은 대략 1.8~22.0nM의 IC50 값을 나타내어 우수한 카스파제-3 억제 활성을 나타냄이 확인되었다.
상기한 바와 같이 본 발명에 따르면, 우수한 카스파제-3 저해 활성을 나타내 는 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 제공될 수 있다.
따라서, 상기 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이나 이를 포함하는 약제학적 조성물을 사용하여, 카스파제-3 관련 질환, 예를 들어, 알쯔하이머병, 헌팅턴병, 파킨슨씨병, ALS, AIDS, 쇼크/국소빈혈, 외상성 뇌 손상, 척수손상 또는 골관절염 등에 효과적인 치료제를 제공할 수 있다.

Claims (12)

  1. 하기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염 :
    [화학식 1]
    Figure 112008007141229-pat00116
    상기 화학식 1에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고;
    R은
    Figure 112008007141229-pat00117
    ,
    Figure 112008007141229-pat00118
    또는
    Figure 112008007141229-pat00119
    이고;
    R2는 C 또는 N이고;
    R3는 -(CH2)n- 이고;
    R4는 C, N, O 또는 S이고;
    R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    A는 C, N, O 또는 S이고;
    Y는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이다.
  2. 제 1 항에 있어서,
    X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고;
    R은
    Figure 112007009619646-pat00120
    ,
    Figure 112007009619646-pat00121
    또는
    Figure 112007009619646-pat00122
    이고;
    R2는 C 또는 N이고;
    R3는 -(CH2)2- 이고;
    R4는 C, N, O 또는 S이고;
    R5는 수소, C1-6 알킬 또는 C1-6 알콕시알킬이고;
    A는 N이고;
    Y는 수소인 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  3. 제 1 항에 있어서,
    5-플로로-3-[(7-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페라진-1-일-8-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-4-옥소-3-[(4-피페리딘-1-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-3-[(8-플로로-4-피페리딘-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-3-[(4-모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-4-옥소-3-[(4-티오모르폴린-4-일-7-트리플로로메틸-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-3-[(8-니트로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-3-({4-[4-(2-메톡시-에틸)-피페라진-1-일]-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐}-아미노)-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-3-[(8-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-3-[(7-플로로-4-피페라진-1-일-퀴놀린-3-카보닐)-아미노]-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산,
    5-플로로-3-{[4-(4-메틸-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐]-아미노}-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산 또는
    3-{[4-(4-에틸-피페라진-1-일)-8-니트로-퀴놀린-3-카보닐]-아미노}-5-플로로-4-옥소-펜타노익산 트리플로로 아세트산인 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  4. 삭제
  5. 제 1 항에 있어서, 염산염, 브롬산염, 황산염, 질산염, 과염소산염, 푸마르산염, 말레산염, 인산염, 글리콜산염, 락트산염, 살리실산염, 숙신산염, 톨루엔-p- 설폰산염, 타르타르산염, 트리플로로아세트산염, 아세트산염, 시트르산염, 메탄설폰산염, 포름산염, 벤조산염, 말론산염, 나프탈렌-2-설폰산염, 벤젠설폰산염, 알칼리금속염 또는 알칼리 토금속염의 형태를 띄는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  6. 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 화학식 3의 화합물을 형성하는 단계;
    디페닐에테르의 존재 하에, 화학식 3의 화합물을 고리화하여 화학식 4의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 4의 화합물을 할로겐화하여 화학식 5의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 5의 화합물을 RH와 반응시켜 화학식 6의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 6의 화합물을 가수 분해하여 화학식 7의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 7의 화합물을 화학식 8의 화합물과 반응시켜 화학식 9의 화합물을 형성하는 단계; 및
    화학식 9의 화합물을 카보닐화하여 화학식 1의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법 :
    [화학식 2]
    Figure 112008007141229-pat00123
    [화학식 3]
    Figure 112008007141229-pat00124
    [화학식 4]
    Figure 112008007141229-pat00125
    [화학식 5]
    Figure 112008007141229-pat00126
    [화학식 6]
    Figure 112008007141229-pat00127
    [화학식 7]
    Figure 112008007141229-pat00128
    [화학식 8]
    Figure 112008007141229-pat00129
    [화학식 9]
    Figure 112008007141229-pat00130
    [화학식 1]
    Figure 112008007141229-pat00131
    상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고;
    R은
    Figure 112008007141229-pat00132
    ,
    Figure 112008007141229-pat00133
    또는
    Figure 112008007141229-pat00134
    이고;
    R2는 C 또는 N이고;
    R3는 -(CH2)n- 이고;
    R4는 C, N, O 또는 S이고;
    R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    A는 C, N, O 또는 S이고;
    Y는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고;
    Z는 할로겐이다.
  7. 하기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조를 위해 사용되는 하기 화학식 7의 중간체 화합물 :
    [화학식 7]
    Figure 112008007141229-pat00135
    [화학식 1]
    Figure 112008007141229-pat00136
    상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고;
    R은
    Figure 112008007141229-pat00137
    ,
    Figure 112008007141229-pat00138
    또는
    Figure 112008007141229-pat00139
    이고;
    R2는 C 또는 N이고;
    R3는 -(CH2)n- 이고;
    R4는 C, N, O 또는 S이고;
    R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    A는 C, N, O 또는 S이고;
    Y는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이다.
    단, R2가 N이고 R5가 수소인 경우, X1 내지 X4 중 어느 하나는 수소가 아니다.
  8. 하기 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조를 위해 사용되는 하기 화학식 9의 중간체 화합물 :
    [화학식 9]
    Figure 112008007141229-pat00140
    [화학식 1]
    Figure 112008007141229-pat00141
    상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고;
    R은
    Figure 112008007141229-pat00142
    ,
    Figure 112008007141229-pat00143
    또는
    Figure 112008007141229-pat00144
    이고;
    R2는 C 또는 N이고;
    R3는 -(CH2)n- 이고;
    R4는 C, N, O 또는 S이고;
    R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    A는 C, N, O 또는 S이고;
    Y는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이다.
  9. 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 화학식 3의 화합물을 형성하는 단계;
    디페닐에테르의 존재 하에, 화학식 3의 화합물을 고리화하여 화학식 4의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 4의 화합물을 할로겐화하여 화학식 5의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 5의 화합물을 R1H와 반응시켜 화학식 10의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 10의 화합물을 가수 분해하여 화학식 11의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 11의 화합물을 화학식 12의 화합물과 반응시켜 화학식 13의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 13의 화합물을 카보닐화하여 화학식 14의 화합물을 형성하는 단계; 및
    화학식 14의 화합물에서 보호기 1 및 2를 탈보호화하여 화학식 1의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법 :
    [화학식 2]
    Figure 112008007141229-pat00145
    [화학식 3]
    Figure 112008007141229-pat00146
    [화학식 4]
    Figure 112008007141229-pat00147
    [화학식 5]
    Figure 112008007141229-pat00148
    [화학식 10]
    Figure 112008007141229-pat00149
    [화학식 11]
    Figure 112008007141229-pat00150
    [화학식 12]
    Figure 112008007141229-pat00151
    [화학식 13]
    Figure 112008007141229-pat00152
    [화학식 14]
    Figure 112008007141229-pat00153
    [화학식 1]
    Figure 112008007141229-pat00154
    상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고;
    R은
    Figure 112008007141229-pat00155
    ,
    Figure 112008007141229-pat00156
    또는
    Figure 112008007141229-pat00157
    이고;
    R1은
    Figure 112008007141229-pat00158
    ,
    Figure 112008007141229-pat00159
    또는
    Figure 112008007141229-pat00160
    이고;
    R2는 C 또는 N이고;
    R3는 -(CH2)n- 이고;
    R4는 N이고;
    R5는 수소이고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    A는 C, N, O 또는 S이고;
    Y는 수소이고;
    Z는 할로겐이다.
  10. 화학식 2의 화합물 및 디에틸에톡시 메틸렌 말로네이트를 반응시켜 화학식 3의 화합물을 형성하는 단계;
    디페닐에테르의 존재 하에, 화학식 3의 화합물을 고리화하여 화학식 4의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 4의 화합물을 할로겐화하여 화학식 5의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 5의 화합물을 RH와 반응시켜 화학식 6의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 6의 화합물을 가수 분해하여 화학식 7의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 7의 화합물을 화학식 12의 화합물과 반응시켜 화학식 15의 화합물을 형성하는 단계;
    화학식 15의 화합물을 카보닐화하여 화학식 16의 화합물을 형성하는 단계; 및
    화학식 16의 화합물에서 보호기 2를 탈보호화하여 화학식 1의 화합물을 형성하는 단계를 포함하는 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염의 제조 방법 :
    [화학식 2]
    Figure 112008007141229-pat00161
    [화학식 3]
    Figure 112008007141229-pat00162
    [화학식 4]
    Figure 112008007141229-pat00163
    [화학식 5]
    Figure 112008007141229-pat00164
    [화학식 6]
    Figure 112008007141229-pat00165
    [화학식 7]
    Figure 112008007141229-pat00166
    [화학식 12]
    Figure 112008007141229-pat00167
    [화학식 15]
    Figure 112008007141229-pat00168
    [화학식 16]
    Figure 112008007141229-pat00169
    [화학식 1]
    Figure 112008007141229-pat00170
    상기 식에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고;
    R은
    Figure 112008007141229-pat00171
    ,
    Figure 112008007141229-pat00172
    또는
    Figure 112008007141229-pat00173
    이고;
    R2는 C 또는 N이고;
    R3는 -(CH2)n- 이고;
    R4는 C, N, O 또는 S이고;
    R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    A는 C, N, O 또는 S이고;
    Y는 수소이고;
    Z는 할로겐이다.
  11. 약제학적 유효량의 화학식 1의 퀴놀린 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하고, 알쯔하이머병, 헌팅턴병, 파킨슨씨병, ALS, AIDS, 쇼크, 국소 빈혈, 외상성 뇌 손상, 척수 손상 또는 골관절염을 치료하기 위해 사용되는 약제학적 조성물 :
    [화학식 1]
    Figure 112008007141229-pat00174
    상기 화학식 1에서, X1, X2, X3 및 X4는 각각 독립적으로 수소, 할로겐, 니트로 또는 C1-6 할로게노알킬이고;
    R은
    Figure 112008007141229-pat00175
    ,
    Figure 112008007141229-pat00176
    또는
    Figure 112008007141229-pat00177
    이고;
    R2는 C 또는 N이고;
    R3는 -(CH2)n- 이고;
    R4는 C, N, O 또는 S이고;
    R5는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    A는 C, N, O 또는 S이고;
    Y는 수소, 할로겐, C1-6 알킬, C1-6 알콕시, C1-6 알콕시알킬, C3-6 시클로알킬, 니트로, 아미노, C1-6 할로게노알킬 또는 5 내지 15원의 아릴이다.
  12. 삭제
KR1020070010137A 2007-01-31 2007-01-31 카스파제-3 저해제로서의 퀴놀린 유도체, 이의 제조방법 및이를 포함하는 약제학적 조성물 KR100844926B1 (ko)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020070010137A KR100844926B1 (ko) 2007-01-31 2007-01-31 카스파제-3 저해제로서의 퀴놀린 유도체, 이의 제조방법 및이를 포함하는 약제학적 조성물
PCT/KR2008/000202 WO2008093940A1 (en) 2007-01-31 2008-01-11 Quinoline derivatives as caspase-3 inhibitor, preparation process for the same and pharmaceutical composition comprising the same

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020070010137A KR100844926B1 (ko) 2007-01-31 2007-01-31 카스파제-3 저해제로서의 퀴놀린 유도체, 이의 제조방법 및이를 포함하는 약제학적 조성물

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR100844926B1 true KR100844926B1 (ko) 2008-07-09

Family

ID=39674214

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020070010137A KR100844926B1 (ko) 2007-01-31 2007-01-31 카스파제-3 저해제로서의 퀴놀린 유도체, 이의 제조방법 및이를 포함하는 약제학적 조성물

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR100844926B1 (ko)
WO (1) WO2008093940A1 (ko)

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2003224482A1 (en) * 2002-04-30 2003-11-17 Korea Research Institute Of Chemical Technology Quinoline derivatives as caspase-3 inhibitor, preparation for producing the same and pharmaceutical composition comprising the same

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Journal of Pharmaceutical Science, 73(8), pp. 1141-1143(1984)*

Also Published As

Publication number Publication date
WO2008093940A1 (en) 2008-08-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2832763C (en) Tetrahydroquinoline derivatives useful as bromodomain inhibitors
KR101880280B1 (ko) 키나제 억제제로서의 퀴놀린 및 퀴녹살린 유도체
AU686115B2 (en) Imidazo (I,2-a) pyridine derivatives as bradykinin antagonists, pharmaceuticals and processes for their preparation
EP3168213B1 (en) Tetrahydroquinoline derivatives useful as bromodomain inhibitors
JP4252797B2 (ja) Ｈｉｖインテグラーゼ阻害薬として有用なアザ−およびポリアザ−ナフタレニルカルボキサミド類
TWI475020B (zh) The substituted nicotine amide as a KCNQ2 / 3 modifier
JP2004510819A (ja) Ｈｉｖインテグラーゼ阻害薬として有用なアザ−およびポリアザ−ナフタレニルカルボキサミド類
US6534510B2 (en) Thrombin inhibitors
JP2001500864A (ja) トロンビン阻害物質
KR20120125978A (ko) 칼륨 이온 채널 억제제로서의 퀴나졸린
JPWO2004108724A1 (ja) ３環系化合物
KR20030088024A (ko) 치환된 인돌 및 인테그린 길항제로서의 이들의 용도
JP2001508796A (ja) トロンビン阻害薬
TWI796714B (zh) 人類血漿激肽釋放酶抑制劑
AU2019218187A1 (en) Dioxinoquinoline compounds, preparation method and uses thereof
JP2017516776A (ja) 構造的に４（１ｈ）−キノロンに基づく、心血管疾患および炎症性疾患の治療に使用するための剤
WO2004063202A1 (ja) 縮合フラン化合物
EP2138482A1 (en) Bicyclic heterocyclic compound
JP2000503010A (ja) アミジノプロテアーゼ阻害剤
US6387911B1 (en) Pyrazinone thrombin inhibitors
KR100557020B1 (ko) 카스파제-3 저해제로서의 퀴놀린 유도체, 이의 제조방법및 이를 포함하는 약제학적 조성물
KR100844926B1 (ko) 카스파제-3 저해제로서의 퀴놀린 유도체, 이의 제조방법 및이를 포함하는 약제학적 조성물
JP2005533064A (ja) ２，５−ジ置換３−メルカプトペンタン酸
KR20210141930A (ko) 염증성 질환의 치료를 위한 아미노산 유도체
CN110343089A (zh) 苯并咪唑类衍生物及其药学用途

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20130621

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20140702

Year of fee payment: 7

LAPS Lapse due to unpaid annual fee