KR100809731B1

KR100809731B1 - (-)-세코이소라리시레시놀을 포함하는 약학 조성물

Info

Publication number: KR100809731B1
Application number: KR1020047001130A
Authority: KR
Inventors: 자나스와미 마두수다나 라오; 아속 쿠마 티와리; 우파라팔리 삼파스 쿠마; 질루 싱 야다브; 콘다푸람 비자야 라가반
Original assignee: 카운실 오브 사이언티픽 엔드 인더스트리얼 리서치; 아리아 바이디아 살라
Priority date: 2001-07-27
Filing date: 2001-08-20
Publication date: 2008-03-06
Also published as: KR20040019365A; EP1411909A1; DE60108272T2; JP2005501886A; CN1329026C; CA2454786A1; CN1536990A; EP1411909B1; CA2454786C; US6489514B1; WO2003020254A1; DE60108272D1; WO2003020254A8

Abstract

본 발명은 산화방지제로서 유용한 유효량의 (-)-세코이소라리시레시놀을 첨가제와 함께 또는 상기 첨가제와 결합시켜 포함하는 약학 조성물; 식물 스테레오스페르뮴 페르소나툼으로부터 (-)-세코이소라리시레시놀을 단리시키는 방법; 및 또한 산화방지제 또는 유리 라디칼 제거제로서 유효 분획 (-)-세코이소라리시레시놀의 용도에 관한 것이다.

(-)-세코이소라리시레시놀, 스테레오스페르뮴 페르소나툼

Description

(-)-세코이소라리시레시놀을 포함하는 약학 조성물{PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING (-)-SECOISOLARICIRESINOL}

본 발명은 새로운 식물 공급원인 스테레오스페르뮴 페르소나툼(Stereospermum Personatum)으로부터 화합물, 즉 (-)-세코이소라리시레시놀을 단리하는 방법에 관한 것이다. 화합물 (-)-세코이소라리시레시놀{2,3 비스-[4-하이드록시-3-(메톡시페닐)메틸]-1,4-부탄디올}을 새로운 공급원으로부터 양호한 수율로 단리한다.

상기는 현재 사용되는 의약으로서 중요한 친지성 산화방지제인 프루부콜 및 α-토코페롤보다 유용하고 양호한 산화방지제 분자인 것으로 입증되었다. 상기는 염증성 질병 상태, 죽상경화증, 당뇨병 합병증, 암, 간독성, 및 증가된 유리 라디칼의 발생으로 인한 또는 유리 라디칼 제거 하의 산화적 압박 및/또는 명백한 산화적 부담을 통해서 매개되거나 또는 이에 의해 촉진되는 다양한 질병 상태에 보다 양호한 치료 능력을 가질 수 있다.

과일 및 채소에 풍부한 음식물과 심혈관 질환 및 몇몇 형태의 암의 감소된 위험성간의 관계를 나타내는 상당량의 역학적 증거들이 존재한다. 일반적으로 이러한 보호 효과에 기여하는 유효 성분들은 처음에는 단지 산화방지성 식물화학물질에 지나지 않는 것으로 추정되었다.

과거 수 십 년 간의 연구는 유리 라디칼 제거제/산화방지제의 돌연변이 억제, 염증 억제, 죽상경화증 억제, 당뇨병 억제, 간독성 억제, 노화방지로서의 이로운 효과 및 다양한 신경학적 질환들에 이로운 효과를 나타내기에 충분한 증거를 축적하였다. 따라서 새로운 산화방지 성분에 대한 연구는 병리 상태들, 예를 들어 백내장, 류마티스 질환, 죽상경화증, 알쯔하이머병 및 다른 신경퇴행성 상태들의 약물학적 치료를 개선시키는데 필수가 되고 있다.

따라서 상기 약물학적 접근법은 산화방지 성분이 풍부한 잠재적인 자원의 조사에 초점을 두어 왔다. 그러므로 산화방지 성분의 비율이 풍부한 식물에 대한 의약으로서의 중요성은 인기 있는 항목이 되고 있다.

스테레오스페르뮴 페르소나툼은 전통적인 인디언 의약 치료 방식에 사용되는 약용 식물이며, 이뇨제, 돌용해제, 거담제, 강심제, 성욕촉진제, 식욕촉진제, 소염제, 항균제의 제조, 소화불량, 설사, 신장 및 방광 결석, 기침, 천식, 과도한 갈증, 치질 및 과산증 질병 상태에 널리 사용이 지지되고 있다(Indian Medicinal Plants, Vol. 5 p 192). 상기는 항균, 항진균, 혈당저하 활성 및 p388 림프구성 백혈구에 대한 활성을 가짐이 추가로 보고되었다(Ind. Jour. of Exp. Biol., 1971, 9, 100). 따라서, 이는 상기와 같은 중요한 생물학적 성질을 갖는 분자에 대한 탐구에 꼭 들어맞는다. 이와 관련하여, 스테레오스페르뮴 페르소나툼에 대한 식 물화학적 조사가 수용되었다. 본 출원인들은 (-)-세코이소라리시레시놀을 양호한 수율로 단리하였다. (-)-세코이소라리시레시놀은 다수의 활성들을 갖는 것으로 공지되었으며, 이를 표 1에 나타낸다.

화합물	활성	참고문헌
(-)-세코이소라리시레시놀	1. 항종양제	일본특허 제 JP0131J17
	2. 강심제	일본특허 제 JP02,101,011
	3. SHBG에 대한 결합	Z.Naturforsch, C.Biosc. 997,52,834-843

발명의 요약

본 발명의 주목적은 (-)-세코이소라리시레시놀을 첨가제와 함께 또는 상기와 결합시켜 함유하고 산화방지제로서 유용한 신규의 조성물을 제공하는 것이다.

또 다른 목적은 (-)-세코이소라리시레시놀을 현저한 수율로 수득하기 위한 새로운 공급원을 제공하는 것이다.

본 발명의 더욱 또 다른 목적은 식물, 즉 스테레오스페르뮴 페르소나툼으로부터 (-)-세코이소라리시레시놀을 생산하는 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 추가의 목적은 산화방지제로서 (-)-세코이소라리시레시놀의 용도에 관한 것이다.

본 발명에 따라, (-)-세코이소라리시레시놀이 새로운 식물 공급원인 스테레오스페르뮴 페르소나툼으로부터 현저한 수율로 단리됨을 발견하였다. 또한, (-)-세코이소라리시레시놀이 산화방지 성질을 나타냄을 발견하였다.

따라서, 본 발명은 (-)-세코이소라리시레시놀을 함유하고 산화방지제로서 유용한 신규의 조성물을 제공한다. 본 발명은 새로운 공급원, 즉 스테레오스페르뮴 페르소나툼으로부터 (-)-세코이소라리시레시놀을 단리하는 방법을 또한 제공한다.

산화방지 화합물들은 최근에 다수 기원의 질환들, 즉 유리 라디칼이 중요한 역할을 하는 관상 심장 질환, 암, 당뇨병, 류마티스 질환 및 염증 상태에 대한 광범위한 활성으로 인해 주목을 끌어왔다. 현재 천연 자원으로부터 산화방지 화합물을 동력화하고 수확하는데 많은 관심이 향하고 있다.

화합물 (-)-세코이소라리시레시놀은 순수한 형태로 사용된다. 따라서, 현재 사용되고 있는 유사한 성질을 갖는 화합물들의 혼합물보다 상기를 사용하는 것이 보다 이로울 수 있다. 또한 (-)-세코이소라리시레시놀의 단리 방법이 매우 경제적임에 주목하는 것도 중요하다.

따라서, 본 발명은 (-)-세코이소라리시레시놀이 순수하고 효능 있는 산화방지제 분자로서 단리되는, 산화방지 성분을 포함하는 유용한 공급원인 스테레오스페르뮴 페르소나툼을 제공한다. (-)-세코이소라리시레시놀은 약물학적으로/치료학적으로 승인된 산화방지제인 프로부콜 및 알파-토코페롤에 비견되어 왔다. (-)-세코이소라리시레시놀이 상기 언급한 비교 약물들보다 양호하고 따라서 약학적으로/치료학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 사용될 수 있는 것으로 밝혀졌다.

본 발명의 하나의 실시태양에서, (-)-세코이소라리시레시놀은 상기 언급한 비교 약물들보다 훨씬 적은 양으로 효과적일 수 있다.

본 발명의 하나의 실시태양은 산화방지제로서 유용한 조성물에 관한 것으로, 상기 조성물은 유효량의 (-)-세코이소라리시레시놀을 약학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 또는 상기와 결합시켜 포함한다.

본 발명의 또 다른 실시태양에서, 상기 약학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기가 (-)-세코이소라리시레시놀의 효능에 영향을 미치지 않거나 또는 이를 방해하지 않는 방식으로 선택된다.

본 발명의 더욱 또 다른 실시태양에서, 상기 첨가제는 영양소, 예를 들어 탄수화물, 당, 단백질, 지방 및 약학적으로 허용 가능한 담체 중에서 선택된다.

본 발명의 더욱 또 다른 실시태양에서, 투여되는 (-)-세코이소라리시레시놀의 양은 하루에 2 회 이상, 투여 용량 당 200 내지 250 ㎎의 범위이다.

본 발명의 하나의 실시태양에서, (-)-세코이소라리시레시놀 대 상기 첨가제의 비는 0.1:10 내지 3:10, 바람직하게는 0.4:10 내지 2:10의 범위이다.

본 발명의 더욱 또 다른 실시태양에서, 상기 조성물을 정제, 캡슐, 시럽 또는 분말의 형태로 경구 경로를 통해 투여한다.

본 발명의 추가의 실시태양은 식물 스테레오스페르뮴 페르소나툼으로부터 (-)-세코이소라리시레시놀을 단리하는 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 하기의 단계들을 포함한다:

a) 스테레오스페르뮴 페르소나툼의 건조된 목재 분말을 헥산으로 추출하는 단계;

b) 단계 a)로부터의 잔사를 클로로포름으로 추가로 추출하는 단계;

c) 단계 b)로부터의 클로로포름 용액을 진공 하에서 농축시키는 단계;

d) 짙은 갈색 추출물을 실리카겔(60 내지 120 메쉬) 상에 흡수시키고 실리카겔(60 내지 120 메쉬) 컬럼(직경 4 ㎝ x 높이 100 ㎝) 상에 장진하는 단계;

e) 상기 컬럼을 클로로포름 메탄올 구배로 용출시키는 단계; 및

f) 상기 용출된 분획을 클로로포름 중의 3% 메탄올로 수거하고 상기 분획을 농축시켜 순수한 (-)-올리빌을 수득하는 단계.

본 발명의 또 다른 실시태양에서, 사용되는 용매를 헥산, 클로로포름 및 메탄올 중에서 선택한다.

본 발명의 또 다른 실시태양에서, 수득된 (-)-세코이소라리시레시놀의 수율은 식물 건조된 물질의 약 0.03%이다.

추가의 실시태양은 동물 및 인간에 대한 산화방지제 또는 유리 라디칼 제거제로서의 (-)-세코이소라리시레시놀의 용도에 관한 것이다.

더욱 또 다른 실시태양은 산화방지제로서 유용한 조성물의 제조를 위한 (-)-세코이소라리시레시놀의 용도에 관한 것이다.

본 발명의 더욱 또 다른 실시태양에서, (-)-세코이소라리시레시놀을 경구로 투여한다.

본 발명의 더욱 또 다른 실시태양은 유효량의 (-)-세코이소라리시레시놀을 유리 라디칼 제거 치료가 필요한 대상자에게 투여하는 단계를 포함하는 유리 라디칼 제거 치료 방법에 관한 것으로, 바람직하게는 (-)-세코이소라리시레시놀을 하루 에 2 회 이상, 200 내지 250 ㎎/용량의 범위로 투여한다.

따라서 스테레오스페르뮴 페르소나툼은 (-)-세코이소라리시레시놀에 대한 신규의 공급원이고 상기 식물 중에 상기 화합물이 양호한 수율로 존재하는 것은 본 발명을 더욱 중요하게 만든다. 상이한 식물들로부터의 (-)-세코이소라리시레시놀의 수율 비교를 표 2에 나타낸다.

식물명	(-)-세코이소라리시레시놀의 수율%	참고문헌
카리사 에둘리스	0.0004	Phytochemistry, 1983,22,749
주니페루스 치넨시스	0.00245	Phytochemistry, 1992,31,3659
스테레오스페르뮴 페르소나툼	0.03	본 발명

본 발명은 새로운 식물 공급원으로부터 산화방지 성분으로서 (-)-세코이소라리시레시놀을 단리하는 방법을 포함하고 의약으로서 중요한 산화방지 약물 분자들과 비교된 그의 유리 라디칼 제거 성질을 확인한다.

도면의 간단한 설명

도 1은 스테레오스페르뮴 페르소나툼과 비교 화합물들로부터의 (-)-세코이소라리시레시놀의 항산화(항-유리 라디칼, DPPH) 활성을 나타낸다.

도 2는 (-)-세코이소라리시레시놀의 구조식을 나타낸다.

본 발명을 하기의 실시예에서 추가로 개시하며, 이들 실시예는 예시에 의해 제공되고 따라서 본 발명을 어떠한 방식으로도 제한하는 것으로서 해석되어서는 안 된다.

실시예-1

실험 프로토콜: 상기 리그난의 단리 방법

스테레오스페르뮴 페르소나툼의 건조된 목재 분말(3 ㎏)을 속슬렛 장치에 장진하였다. 상기 분말을 먼저 헥산으로 추출하였다. 상기 헥산 추출 잔사를 클로로포름으로 추가로 추출하였다. 상기 클로로포름 용액을 진공 하에서 농축시켰다. 짙은 갈색 추출물(22 g)을 실리카겔(60 내지 120 메쉬) 상에 흡수시키고 실리카겔(60 내지 120 메쉬) 컬럼(직경 4 ㎝ x 높이 100 ㎝) 상에 장진하였다.

상기 컬럼을 클로로포름 메탄올 구배로 용출시켰다. 상기 클로로포름-메탄올 구배는 특정 분획이 수득되고 이에 의해 목적하는 화합물이 수득되도록 선택된다. 본 발명의 경우에, 클로로포름 중의 3% 메탄올에서 용출되는 분획들을 별도로 수거하고 농축시켰다.

상기 분획들을 클로로포름 메탄올 구배를 사용하여 실리카겔 컬럼(>200 메쉬, 직경 2.5 ㎝ x 길이 50 ㎝)으로 추가로 정제시켰다. 클로로포름 중의 3% 메탄올에서의 용출로 순수한 (-)-세코이소라리시레시놀(0.9 g)이 수득되었다. (-)-세코이소라리시레시놀에 대한 분광화학 데이터를 하기에 나타낸다:

(-)-세코이소라리시레시놀

1. 분자식: C₂₀H₂₆O₆

2. ¹HNMR: δ1.82(2H,m), 2.6(2H,dd), 2.7(2H,dd), 3.55(2H,dd), 3.80(6H,s), 3.85(2H,d), 5.4(Ar-OH,brs), 6.55(2H,s), 6.6(2H,d), 6.8(2H,d).

3. ¹³CNMR: δ34.02(C-7), 42.55(C-8), 55.51(2xOCH₃) 60.32(C-9), 113.07(C-2), 115.09(C-5), 121.17(C-6), 132.26(C-1), 144.31(C-4), 147.26(C-3).

4. MS: 362(M⁺)

5. IR: 3422 ㎝^-1(OH).

실시예 2

유리 라디칼 소거 산화방지 효능에 대한 생체 외 평가:

화합물들의 산화방지 활성을 가장 널리 사용되는 유리 라디칼 1,1-디페닐-2-피크릴 하이라질 라디칼(DPPH)을 제거하는 그들의 능력/효능에 대해 시험하였다. 널리 인정되고 시험된 산화방지제, 즉 프로부콜과 α-토코페롤을 비교 화합물로서 취하였다. 1 ㎎/㎖ DMSO 농도의 화합물을 제조하고 후속적으로 DMSO로 보다 낮은 농도로 희석하였다. 시험 화합물 200 ㎕를 트리스-HCl 완충액(pH 7.4) 중에 1 ㎖로 재 조성하였다. 이를 에탄올에 용해된 동 부피의 500 μM의 DPPH 라디칼과 반응시켰다. 암실에서 45 분간 배양시킨 후에, 517 ㎚에서 흡광도가 기록되었다. 라디칼 제거 활성%를 상응하게 계산하였다: 모든 판독은 3 중으로 수행하였다. 결과(도 1 및 표 3)는 고려 중인 화합물이 효능 있는 산화방지/유리 라디칼 제거 성질을 가짐을 보인다.

화합물의 50% 라디칼 제거 농도
산화방지제	농도(㎍/㎖)
CHCl₃ 추출물	40.09
(-)-세코이소라리시레시놀	13.72
프로부콜	28.71
DL α-토코페롤	47.80

Claims

식물 스테레오스페르뮴 페르소나툼(Stereospermum Personatum)으로부터 유효 성분인 (-)-세코이소라리시레시놀을 단리하는 방법으로,

a) 스테레오스페르뮴 페르소나툼의 건조된 목재 분말을 헥산으로 추출하는 단계;

b) 단계 a)로부터의 잔사를 클로로포름으로 추가로 추출하는 단계;

c) 단계 b)의 클로로포름 용액을 감압 하에서 농축시켜 짙은 갈색 추출물을 수득하는 단계;

d) 단계 c)의 짙은 갈색 추출물을 실리카겔(60 내지 120 메쉬) 상에 흡수시키고 실리카겔 컬럼 상에 장진하는 단계;

e) 단계 d)의 생성물을 클로로포름-메탄올 구배의 혼합물로 용출시키는 단계; 및

f) 상기 용출된 분획을 클로로포름 중의 3% 메탄올로 수거하고 상기 수거된 분획을 농축시켜 순수한 (-)-세코이소라리시레시놀을 수득하는 단계

를 포함하는 방법.
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제 1 항에 있어서, (-)-세코이소라리시레시놀의 수율이 건조된 식물 물질의 0.03%인 방법.
제 1 항에 있어서, (-)-세코이소라리시레시놀을 새로운 공급원인 스테레오스페르뮴 페르소나툼으로부터 수득하는 방법.
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