KR100770511B1 - 상기생 추출물을 포함하는 미백제 - Google Patents

Abstract

본 발명은 상기생 추출물을 포함하는 미백제에 관한 것으로, 상기생 추출물이 미백제 총 건조중량에 대하여 0.0001∼5중량%, 바람직하게는 0.001∼3중량%로 함유되는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따르는 상기생 추출물은 뛰어난 티로시나아제 활성 저해 효과 및 멜라닌 생성 억제 효과를 갖으며, 이를 함유하는 미백제 또한 우수한 미백효과를 제공한다.

상기생 추출물, 미백제

Description

상기생 추출물을 포함하는 미백제{Cosmetics comprising Loranthi Ramulus extracts for skin whitening}

본 발명은 상기생 추출물을 함유하는 미백제에 관한 것이다.

일반적으로 자외선에 피부가 노출되면 피부 표피가 검게 된다. 이는 멜라노사이트내에서 멜라닌이 합성되고 방출되는 것에 기인하며, 멜라닌은, 세포 내의 티로신(Tyrosine)을 기질로 티로시나아제(Tyrosinase)라는 효소가 작용하여 도파퀴논(DOPAquinone)을 생성시키고, 이러한 도파퀴논으로부터 자발적인 산화 반응에 의해 생성된다.

따라서 피부가 검게 되는 것을 막기 위해서는 상기 멜라닌 생성 과정 중의 일부 반응을 저해함으로써 멜라닌의 생성을 감소시켜 주는 방법이 가장 간단하며 일반적이다. 이를 위해 종래에는 히이드로퀴논(Hydroquinone), 아스코르브산(Ascorbic acid), 코직산(Kojic acid), 글루타치온, 상백피 추출물, 알부틴(Arbutin)을 비롯한 다양한 추출물들이 이용되어 왔다.

이 중에서 아스코르브산, 상백피 추출물, 코직산, 글루타치온 등은 피부 흑 색화나 피부병의 치료에 사용되어 왔지만, 피부의 안전성과 화장료 제형의 안정성에 문제점을 가지고 있어 그 사용이 제한되어 왔다. 또한 하이드로퀴논은 기미 치료가 목적인 약으로 이미 미국 시장에서 판매되고 있지만 피부 자극성 있고, 아스코르브산은 광, 열에 대한 안정성의 문제와 사용 비용이 높으므로 사용상에 어려움이 있었다.

본 발명자들은 이러한 현실을 감안하여 종래 알려져 있는 미백 물질이 갖는 문제점을 극복하고 보다 우수한 미백 원료를 찾기 위하여, 안전성이 이미 확보된 생약 및 식물을 추출하여 미백의 효능을 검색한 결과 상기생이 티로시나아제 활성 억제 및 멜라닌 생성 억제 효과가 높아 우수한 미백효과를 갖는 것을 발견하여 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명은 상기생 추출물을 함유하는 미백제를 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 상기생 추출물을 포함하는 미백제에 관한 것으로, 상기생 추출물이 미백제 총 건조중량에 대하여 0.0001∼5중량%, 바람직하게는 0.001∼3중량%로 함유되는 것을 특징으로 한다.

본 발명에 따른 미백제는 티로시나제 활성 억제 성분으로 겨우살이과 (Loranthaceae)식물인 겨우살이(Loranthus tanakae Franchet et.Savatt)의 전초(全 草) 추출물을 포함한다. 겨우살이는 한방에서 생약명으로 상기생(桑寄生)이라고 하며, 풍습성 관절통, 자궁수축, 지혈, 산후 출혈, 월경과다, 종양, 유선암, 요통, 고혈압, 부인병에 등에 사용된다 (참조 : 약초의 성분과 이용(일월서각. 1994. 과학백과사전출판사편), 신 약품식물학(학창사. 1991. 약품식물학 연구회)).

또한 상기생의 성분으로는 베타 아미린(β-amyrin), 루페롤(Lupeol), 메조 이노지톨(meso-Inositol), 에릴알코올(erylalcohol), 빅신(Bixin), 오레아놀릭산( Oleanolic acid), 미리스틱산(Myristic acid), 아라키닉산(Arachinic acid), 베타 아미린과 루페롤의 팔미틱산 에스테르 등이다(참조 : 천연물 화학 연구법(민음사. 1991. 우원식)).

상기 상기생 추출물은 건조된 상기생을 탄소수 1∼3의 무수 또는 함수 알코올, 또는 에틸 아세테이트로 4∼30℃에서 3∼20일간 추출한 다음, 농축하여 제조할 수 있다.

또한, 상기 상기생 추출물은 상기생을 물, 탄소수 1∼3의 무수 또는 함수 알코올, 또는 에틸 아세테이트로 50∼100℃에서 3∼24시간 동안 추출한 다음, 농축하여 제조할 수 있다.

또한, 상기 상기생 추출물은 추출공정의 수행 전 또는 후에 디에틸에테르 가용성분을 제거한 다음, 농축함으로써 더욱 정제된 상기생 추출물로 제조할 수 있다.

상기 추출공정에 있어서, 상기생을 잘게 세절하여 사용하는 것이 바람직하고, 추출용매는 시료중량에 대하여 1∼15배 부피량으로 가하는 것이 바람직하며, 유효 성분의 증발을 방지하기 위하여 냉각 콘덴서를 장착하여 추출하는 것이 바람직하다.

상기와 같이 제조된 상기생 추출물은 통상적인 기초 화장료, 예를 들면, 유연화장수(스킨), 영양화장수(밀크로션), 영양크림, 맛사지크림, 엣센스, 팩 등에 첨가되어 제조될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시 예 및 실험 예을 통하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1.

상기생 100g을 잘게 세절하여 70% 에틸알코올 1L에 넣고 실온에서 10일간 침적시켜 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 19.74g을 얻었다.

실시예 2.

상기생 100g을 잘게 세절하여 30% 에틸알코올 1L에 넣고 실온에서 10일간 침적시켜 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃로 완전히 농축하여 건조 중량 23.41g을 얻었다.

실시예 3.

상기생 100g을 잘게 세절하여 70% 에틸알코올 1L에 넣고 냉각 콘데서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃에서 완전히 농축하여 건조 중량 30.72g을 얻었다.

실시예 4.

상기생 100g을 잘게 세절하여 30% 에틸알코올 1L에 넣고 냉각 콘데서가 달린 추출기에서 100℃로 8시간 끓여서 추출한 후 300메쉬 여과지로 여과하고 1주일간 방치하여 침전물을 에드벤텍 7번 여과지로 2번 여과하였다. 그리고 감압 농축기를 이용하여 50℃로 완전히 농축하여 건조 중량 35.84g을 얻었다.

실시예 5.

실시예 1의 추출물에 디에틸에테르 1L를 가하여 잘 섞어준 후 두 층으로 완전히 분리시켜 하층인 수층에 다시 1L의 에틸아세테이트를 가하여 잘 섞어준 후 두 층으로 완전히 분리시켜 에틸아세테이트 층을 감압 농축기를 이용하여 50℃로 완전히 농축하여 건조 중량 3.1g를 얻었다.

실험예 1.

실시예 1에서 얻은 상기생 추출물에 대하여 티로시나제 활성 억제 효과를 측정하였으며 비교 물질로 알부틴을 사용하였다.

1) 실험방법

효소 티로시나제는 버섯류에서 추출한 것으로 시그마(SGMA)사의 것을 사용하였다. 먼저 기질인 티로신을 증류수에 0.3mg/ml의 용액으로 만들어서 그 용액을 1ml씩 시험관에 넣고, 여기에 포타슘-포스페이트 완충용액(0.1M, pH 6.8) 1ml와 농도별(0.07, 0.1, 0.5, 1.0(%,w/v)) 시료 0.9ml를 넣은 뒤 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이때 대조군은 각 시료 대신 용매만을 0.9ml 넣었다. 이 반응액에 2500unit/ml 의 티로시나제 용액 0.1ml씩을 넣고 다시 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다. 이 반응액이 든 시험관을 얼음물 속에 넣어서 급냉시켜 반응을 중지시키고 광전 분광분석계로 파장 475nm에서의 흡광도를 측정하였다. 각각 시료의 티로시나제 활성 억제효과는 다음의 공식으로 구하였다.

2) 실험결과

상기생 추출물의 티로시나아제 활성억제 효과

실험농도(%,w/v)	0.07	0.1	0.5	1.0
실시예 1	33.47%	72.73%	78.15%	98.62%
알부틴	20.20%	33.30%	71.90%	97.40%

상기생 추출물의 IC₅₀(Inhibition Concentration 50)은 0.25% 농도인데 반하여 알부틴의 IC₅₀은 0.39%농도 였다.

상기의 결과로부터 상기생 추출물의 티로시나아제 활성 억제 효과가 최고농도 및 50% 억제 농도에서 알부틴에 비하여 우수한 것을 확인할 수 있었다.

실험예 2.

실시예 1에서 얻은 상기생 추출물에 대하여 세포배양을 이용한 멜라닌 생성 억제 효과를 측정하였으며 비교 물질로 알부틴을 사용하였다.

1) 실험방법

세포는 BL6 멜라노사이트를 사용하여 실험하였다. 96 웰 마이크로플레이트 (96 well micro plate)에 5,000/웰(well) 의 BL6 멜라노사이트를 분주하고, 24시간 후에 시료를 농도 별(각각 0.0025, 0.005, 0.01, 0.025(%,W/V))로 처리한 후 72시간 후에 멜라닌 생성량을 475nm에서 흡광도를 측정하였으며, 대조군은 시료를 제외한 세포와 배지로만 하여 동시에 측정 하였다. 결과는 시료의 세포 독성을 측정하여 세포 독성이 없는 농도 범위 내에서 그리고 세포 수를 고려하여 멜라닌 생성억제 효과를 알부틴과 비교하였으며, 그 결과는 하기 표 2와 같다.

세포 독성 및 증식 실험은 다음과 같이 하였다. 96 웰 마이크로플레이트에 5,000/웰 의 3T3 세포를 분주하고, 24시간 후에 시료를 농도 별(각각 0.0025, 0.005, 0.01, 0.025(%,W/V))로 처리하였다. 44시간 후에 티아졸린 블루(Thiazoline blue)를 투여하고 4시간 후에 570nm에서 흡광도를 측정하였다(시험시 10 % 소태아혈청(Fetal Bovine Serum, FBS) 배지를 함께 사용). 각각 시료의 멜라닌 생성 억제 효과는 다음의 공식으로 구하였다.

대조군 : 시료 대신 배지를 동일량 사용

2) 실험결과

상기생 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과(세포독성을 고려한 결과)

실험농도(%,w/v)	0.0025	0.005	0.01	0.025
실시예 1	12.15%	22.41%.	25.11%	24.50%
알부틴	9.74%	14.9%	20.68%	14.14%

표 2로부터 상기생 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과가 알부틴 보다 우수한 것을 확인할 수 있었다.

처방예 1.

상기생 추출물을 함유한 화장료 중 유연화장수(스킨)의 처방예는 다음과 같다. 여기서 상기생 추출물은 실시 예1에서 얻은 것을 말한다.

성분	함량(중량%)
상기생 추출물	3.0
부틸렌글리콜	4.0
글리세린	8.0
카르복시비닐폴리머	0.06
디소디움 에틸렌디아민테트라아세틱에시드	0.01
에탄올	7.0
트리에탄올아민	0.2
소르비탄모노스테아레이트	0.8
하이드로지네이티드 캐스터 오일	0.4
페닐트리메티콘	3.5
방부제	0.4
향료	0.1
색소	0.01
정제수	잔량
계	100.0

처방예 2.

상기생 추출물을 함유한 화장료 중 로션의 처방예는 다음과 같다. 여기서 상기생 추출물은 실시예 1에서 얻은 것을 말한다.

성분	함량(중량%)
상기생 추출물	3.0
스테아린산	1.0
세틸알코올	1.0
글리세릴모노스테아레이트	1.0
폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트	1.0
솔비탄세스퀴올레이트	1.0
유동파라핀	4.0
스쿠알란	3.0
카르릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
카르복시비닐폴리머	0.1
부틸렌글리콜	5.0
트리에탄올아민	0.2
방부제	0.4
향료	0.1
색소	0.01
정제수	잔량
계	100.0

처방예 3.

상기생 추출물을 함유한 화장료 중 영양크림의 처방예는 다음과 같다. 여기 서 상기생 추출물은 실시예 1에서 얻은 것을 말한다.

성분	함량(중량%)
상기생 추출물	3.0
스테아린산	2.0
세틸알코올	2.0
글리세릴모노스테아레이트	2.0
폴리옥시에틸렌소르비탄모노스테아레이트	0.5
솔비탄세스퀴올레이트	0.5
글리세릴모노스테아레이트/글리세릴스테아레이트/폴리옥시에틸렌스테아레이트	1.0
왁스	1.0
유동파라핀	4.0
스쿠알란	4.0
카르릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
카르복시비닐폴리머	0.3
부틸렌글리콜	5.0
글리세린	3.0
트리에탄올아민	0.5
방부제	0.4
향료	0.1
색소	0.01
정제수	잔량
계	100.0

본 발명에 따른 상기생 추출물은 이미 안전성이 확보된 추출물로서 뛰어난 티로시나제 활성 저해효과 및 멜라닌 생성 억제 효과를 보이기 때문에 피부 자극이 없으면서 효과가 우수하고 제품으로서의 안정성이 뛰어난 미백제를 제공할 수 있다.

Claims (6)

1. 탄소 수 1∼3의 무수 또는 함수 알코올, 또는 에틸 아세테이트로 4∼30℃에서 3∼20일간 추출한 다음, 농축하여 제조되는 상기생 추출물을 총 건조중량에 대하여 0.0001~5 중량%의 양으로 함유하는 것을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
2. 삭제
3. 삭제
4. 제1항에 있어서, 상기생 추출물이 물, 탄소 수 1∼3의 무수 또는 함수 알코올, 또는 에틸 아세테이트로 50∼100℃에서 3∼24시간 동안 추출한 다음, 농축하여 제조된 것임을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
5. 제1항에 있어서, 상기생 추출물이 추출공정의 수행 전 또는 후에 디에틸에테르 가용성분을 제거한 다음, 농축하여 제조된 것임을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.
6. 제1항에 있어서, 상기생 추출물이 유연 화장수, 영양 화장수, 영양크림, 맛사지 크림, 엣센스 또는 팩 중에서 선택된 제형에 첨가된 것임을 특징으로 하는 미백용 화장료 조성물.