KR100715886B1

KR100715886B1 - 토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물, 및 그 제조방법

Info

Publication number: KR100715886B1
Application number: KR1020050089447A
Authority: KR
Inventors: 은재순; 곽용근; 김대근
Original assignee: 우석대학교 산학협력단
Priority date: 2005-09-26
Filing date: 2005-09-26
Publication date: 2007-05-09
Also published as: KR20070034848A

Abstract

본 발명은 토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물, 및 그 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에 따르면, 인체에 안전하고 독성이 적으며, 사람 심방에서 발현하는 K⁺통로를 선택적으로 차단하여 심장 박동수가 빨라졌을 때 그 효과가 증대되고 낮은 박동수에서는 그 효과가 거의 없어 부정맥의 예방 및 치료제로서 우수한 효과를 갖는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물, 및 그 제조방법을 제공할 수 있다.

토릴린, 부정맥, hKv1.5 통로, 사상자

Description

토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물, 및 그 제조방법 {A composition containing torilin for preventing and treating arrhythmia, and a method for preparing the same}

도 1a는 hKv1.5 통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 막전압을 -80 mV로 고정후 +60 mV에서 -80 mV까지 10 mV 간격으로 자극시 기록된 대조 K⁺ 전류를 나타낸 도면이다.

도 1b는 hKv1.5 통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 막전압을 -80 mV로 고정후 +60 mV에서 -80 mV까지 10 mV 간격으로 자극시 기록된 K⁺ 전류에 대한 토릴린의 효과를 나타낸 도면이다.

도 1c는 hKv1.5 통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 막전압을 -80 mV로 고정후 +60 mV에서 -80 mV까지 10 mV 간격으로 자극시 기록된 K⁺ 전류에 대한 토릴린의 효과를, 각 막전압에서 대조전류에 대한 상대적 전류로 나타낸 도면이다.

도 1d는 hKv1.5 통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 막전압을 -80 mV에서 +50 mV로 자극시 마지막에 기록된 안정전류에 대한 토릴린의 용량반응곡선을 나타낸 도면이다.

도 2a는 hKv1.5 통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 hKv1.5 통로의 활성화에 대한 토릴린 (3μM)의 효과를 나타낸 도면이다.

도 2b는 hKv1.5 통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 hKv1.5 통로의 비활성화에 대한 토릴린 (3μM)의 효과를 나타낸 도면이다.

도 3은 hKv1.5 통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 토릴린에 의한 hKv1.5 통로 억제 효과의 막전압 의존성을 나타낸 도면이다.

도 4는 hKv1.5 통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 토릴린에 의한 hKv1.5 통로 억제 효과의 자극빈도수-의존성을 나타낸 도면이다.

도 5는 hKv1.5 통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 토릴린 (1μM)에 의한 hKv1.5 통로 억제 효과의 통로 상태 의존성을 나타낸 도면이다.

본 발명은 토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물, 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 더욱 구체적으로는 사람 심방에 주로 발현되는 hKv1.5 통로를 선택적으로 차단하는데 우수한 효과를 나타내기 때문에 부정맥의 예방 및 치료에 유용하게 사용될 수 있는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물, 및 그 제조방법에 관한 것이다.

부정맥 (arrhythmia)이란, 다양한 원인에 의해 국소부위 심근의 전기생화학 적 특성이 변하여 심장의 비정상적 전기충동 형성 또는 전기충동의 전파 장애가 일어나 심장의 비정상적인 리듬으로 심장의 펌프 기능에 이상이 나타나는 질환이며, 만일 이러한 이상에 의해 심박동 수가 심하게 느려지면 서맥성 부정맥, 비정상적으로 빨라지면 빈맥성 부정맥, 심박동이 예정보다 한박자 빨리 나오는 경우는 조기 박동이라 한다. 일반적으로 부정맥은 다양한 유형의 합병증을 유발하며, 따라서 이의 정확한 진단, 예방 및 치료는 필수적이다.

이러한 부정맥의 예방 및 치료를 위한 다양한 약물들이 현재 개발되어 있으나, 부작용들로 인하여 제한적인 범위에서만 사용되고 있다. 부작용이 없는 이상적인 항부정맥제란, 비정상적으로 흥분성을 나타내는 심근세포 (또는 심장박동수가 비정상적인 세포)에만 작용하거나, 심장 내에서도 부정맥 발생원인 조직 (즉 심방, 심실, 퍼킨제섬유 등)에만 작용하는 약물이어야 하지만, 이러한 조건을 충족시키는 약물은 현재 개발되지 못했다. 부작용이 없거나 적은 새로운 항부정맥제를 개발하기 위해서는 항부정맥제의 작용부위, 즉 이온통로에 대한 분자생물학적 수준의 새로운 이해가 뒤따라야 하며, 따라서 분자생물학적 클로닝 기법과 전기생리학적 기법을 병용하여 새로운 이상적 항부정맥제를 개발하기 위한 노력들이 시도되고 있다.

한편, 활동전위 기간은 여러 K⁺ 통로에 의해 조절되며, 심장 각 부위별로 발현하는 K⁺ 통로에 대한 다양한 유전자들이 공지되어 있다. 심장에서 가장 다양한 이온 통로인 K⁺ 통로 전류는 크게 내향성 전류 (IK₁, inward rectifying current; IK_Ach, acetylcholine-activated current; IK_ATP, ATP-sensitive K⁺ channel 등)와 막전압 의존성 (voltage-gated) K⁺ (Kv) 전류로 분류되는데, 대체로 내향성 K⁺ 전류는 안정막 전압조절에 관여하고 Kv 전류는 활동전위기간을 조절한다.

Kv 통로들은 세포의 재분극에 기여하여 활동전위 기간을 조절할 수 있다. 임상적으로, 심실근에서 발생되는 부정맥들은 손상조직부위의 재분극 장애로 초래된다고 알려져 있기에, 부정맥치료의 중요한 표적이 되고 있다. 실제로, 퀴니딘, 베라파밀, 니페디핀, 소타롤, 아미오다론, 프레카니드, 크로피리움 등의 항부정맥제가 이러한 Kv 통로에 작용한다고 알려져 있다 (Katz AM. Selectivity and toxicity of antiarrhythmic drugs: molecular interactions with ion channels. Am J Med 1998, 104:179-195). 그러나, 이러한 약물들은 이온 통로 선택성이 결여되어 많은 부작용을 초래한다고 알려져 있기 때문에 이온 통로 선택성을 갖는 새로운 약물 개발이 필요하다.

한편, Kv 통로는 8종류 (Kv1.1-Kv1.8) 이상이 알려져 있으며 (Grissner S. Potassium channels still hot. TiPS 1997, 18:347-350), 현재 심장조직에서 클로닝된 Kv 통로유전자는 Kv1.1, Kv1.2, Kv1.4, Kv1.5, Kv2.1, Kv4.2, Kv4.3 등 7종류이다 (Deal 등. Molecular physiology of cardiac potassium channels. Physiol Rev 1996, 76:49-67). 이들 유전자 중 사람 심장에 발현하는 중요 Kv 통로 유전자 는 hKv1.4, hKv1.5, Kv4.3 및 HERG 유전자이다. 이러한 유전자들은 주로 심방과 심실에 모두 발현하나, hKv1.5 유전자는 사람 심방에 주도적으로 발현되며, 사람 심방에서 특징적으로 기록되는 I_Kur과 전기생리학적 및 약리학적 특성이 같다고 알려져 있다 (Fedid 등. The 1997 Stevenson Award Lecture. Cardiac K⁺ channel gating: cloned delayed rectifier mechanisms and drug modulation. Can J Physiol Pharmacol 1998, 76:77-89). 따라서, hKv1.5 통로에 대한 선택적인 차단제를 개발할 수 있다면 효과적인 심방성 부정맥 치료제가 될 수 있다 할 것이다.

본 발명자들은, 사람 심방에 주도적으로 발현되는 hKv1.5 통로에 대한 선택적인 차단제를 개발하고자 연구를 거듭한 결과, 사상자에 다량으로 포함된 토릴린이 hKv1.5 통로 전류를 억제하면서도, 심박수에 비례하여 그 효과가 증대됨을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명은 hKv1.5 통로에 대한 선택적인 차단제로서 작용함으로써, 부정맥의 예방 및 치료에 효과적으로 사용될 수 있는 부정맥 치료용 조성물, 및 그 제조방법을 제공하고자 하는 데에 그 목적이 있다.

본 발명은 상기 목적을 달성하기 위한 일 구현예에서,

토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 목적을 달성하기 위한 다른 구현예에서,

사상자를 음건하여 메탄올로 추출한 다음 여과하여 여액을 감압농축하는 단계;

상기 농축액을 염화메틸렌으로 분획하는 단계;

상기 분획물에 대하여 클로로포름-메탄올을 유출용매로 사용하여 실리카겔 컬럼크로마토그래피를 수행하는 단계; 및

헥산-에틸아세테이트를 유출용매로 사용하여 컬럼정제하는 단계

를 포함하는, 토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물의 제조방법을 제공한다.

또한, 본 발명은 상기 목적을 달성하기 위한 또 다른 구현예에서,

토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물을 포함하는 기능성 식품을 제공한다.

이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명하기로 한다.

본 발명은 일 구현예에서 토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물을 제공하며, 본 발명에 따른 조성물의 유효성분이 되는 토릴린은 하기 화학식 1을 갖는 화합물이다.

일반적으로, 상기 화학식을 갖는 토릴린은 사상자 (Torilis japonica DC)에 다량으로 존재하는 물질로서, 예로부터 간 보호작용, 혈관생성 억제작용, 항암작용 등의 효과를 갖는 것으로 알려져 있으나, 토릴린이 K⁺ 통로 차단작용 및 항부정맥 효과를 갖는다는 사실은 어떠한 문헌에도 기재되거나 암시된 바가 없다.

본 발명자는 토릴린이 hKv1.5 통로 전류를 억제하고, 심박수에 비례하여 그 효과가 증대되기 때문에 K⁺ 통로 매개 질환, 특히 부정맥의 예방 및 치료에 우수한 효과를 나타낸다는 사실을 발견하고 본 발명에 따른 부정맥의 예방 및 치료용 조성물을 완성하게 되었다.

본 발명에 따른 조성물은 유효성분으로서의 토릴린 이외에도, 약제학적으로 허용가능한 담체를 더 포함할 수도 있으며, 이러한 담체로는 부형제, 결합제, 활택제, 붕괴제, 피복제, 유화제, 현탁제, 용제, 안정화제, 흡수조제, 주사용수, 및 등장화제로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 담체를 예로 들 수 있다.

본 발명에 따른 조성물은 경구 또는 주사제 제제로 제형화될 수 있으며, 바 람직하게는, 경구 제제로 제형화될 수 있다. 이러한 경구 제제로는, 과립제, 정제, 캅셀제, 액제 등을 예로 들 수 있다.

본 발명에 따른 조성물의 투여량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 토릴린 중량 기준으로, 2∼5000 mg/일인 것이 바람직하고, 보다 바람직하게는 10∼1000 mg/일인 것이 바람직하다.

본 발명에 따른 조성물은 K⁺ 통로 차단제 및 항부정맥제로 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 쥐, 개, 토끼, 고양이, 닭 등의 온혈 동물 치료에도 응용될 수 있다.

본 발명은 다른 구현예에서, 상기 조성물의 제조방법을 제공한다.

일반적으로 토릴린은 공지의 방법들 (Kang, S. S., Lee, E. B., Kim, T. H., Kim, K. R. and Jung, J. H., The NMR assignment of torilin from Torilis japonica. Arch. Pharm. Res. 1994, 17(4): 284-286)에 의해 제조하여 사용할 수도 있지만, 특히, 사상자에 다량으로 포함되어 있기 때문에 사상자로부터 추출함으로써 제조할 수도 있다.

따라서, 본 발명은, 사상자를 음건하여 메탄올로 추출한 다음 여과하여 여액을 감압농축하는 단계; 상기 농축액을 염화메틸렌으로 분획하는 단계; 상기 분획물에 대하여 클로로포름-메탄올을 유출용매로 사용하여 실리카겔 컬럼크로마토그래피를 수행하는 단계; 및 헥산-에틸아세테이트를 유출용매로 사용하여 컬럼정제하는 단계를 포함하는, 토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물의 제조방법을 제공한다.

바람직하게는, 상기 메탄올 추출 단계는 3 ~ 5회 수행되며, 상기 클로로포름-메탄올 유출용매의 부피비는 40:1 ~ 20:1이고, 상기 헥산-에틸아세테이트 유출용매의 부피비는 4:1 ~ 2:1이다. 또한, 최종 컬럼정제 단계는, 이에 제한되는 것은 아니지만, 로바-에이 컬럼 (lobar-A column) 등의 정제 컬럼을 사용하여 수행될 수 있다.

또한, 본 발명은 본 발명에 따른 조성물을 포함하는 기능성 식품을 제공하며, 이러한 기능성 식품의 비제한적인 예로는 차, 건강보조 식품류 등을 들 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하되, 본 발명의 범위가 하기 실시예로만 제한되는 것은 아니다.

실시예

실시예 1. 토릴린의 토릴린의 hKv1.5 통로 전류에 미치는 영향 평가

1) 선택적 이온통로 발현 세포주 (cell line)의 제조

심장에 발현하는 K⁺ 통로 유전자를 각각 선택적으로 하나씩만 발현하는 세포주를, 논문 (Yang, et al., Inhibition of cardiac potassium currents by the vesnarinone analog OPC-18790: comparison with quinidine and dofetilide. J Pharmacol Exp Ther 1997, 280:1170-1175; Kwak, et al., Phosphorylation is required for alteration of Kv1.5 K⁺ channel function by the Kvbeta 1.3 subunit. J Biol Chem 1999, 274:25355-25361)에 기재된 방법을 사용하여 제작하였 다. 즉, 덱사메타손 (dexamethasone)에 의해 유도되는 마우스 유암 바이러스 프로모터 (murine mammary tumor virus promotor)를 갖고 있는 pMSVneo에 hKv1.5 및 HERG를 끼워 넣어 마우스 Ltk-세포 (mouse Ltk-cell)에 리포펙타민 (lipofectamine)으로 감염시킨 후, 24 시간 후 G418 0.5 ㎍/㎖을 함유한 DMEM 배지에 단일 콜로니(colony)를 형성할 때까지 2주간 세포를 배양하였다. 개개의 콜로니를 분리하여 G418 0.25 ㎍/㎖를 함유한 배지에 배양하여 노던 (northern) 블롯 및 홀-셀 전압고정 (whole-cell voltage clamp) 방법으로 각 이온통로 발현수준을 검토하여 다음 실험에 사용하였다. 이렇게 선택된 세포주는 G418 0.25 ㎍/㎖를 함유한 배지에서 실험에 사용할 때까지 배양하였다. 안정 세포주(stable cell line)가 아닌 일시 유전자발현(transient transfection)용 세포들은 DMEM 배지에서 배양하였다.

2) 전류기록

사람 심방 세포 및 세포주에서 전류는 막전압고정 (gigaohm-seal patch clamp) 방법 중 홀-셀 (whole cell) 방법으로 기록하는데 (Kwak, et al., Phosphorylation is required for alteration of Kv1.5 K⁺ channel function by the Kvbeta 1.3 subunit. J Biol Chem 1999, 274:25355-25361), 전기적인 신호를 패취 고정(patch clamp) 증폭기(Axon Instruments, Axopatch-1D, Foster, USA)로 증폭 후, 전류의 신호를 신호변환기 (Digidata 1200, Axon Instruments)로 디지털신호로 변환하여 컴퓨터에 저장하였다. 그리고, 전류기록에 사용한 미세전극 (Kimax-51, 1.5-1.8 x 100 mm)은 2-단계 미세전극 제조기 (2-stage pipette puller: Narishige, PP-83)로 뽑아서 미세전극 말단을 열처리하여 사용하였는데, 이때 저항 1-2 MΩ의 피펫을 사용하였다. 한편, 홀 셀 모드 (whole cell mode)의 미세전극 내 용액은 100 mM KCl, 10 mM HEPES, 5 mM K₄BAPTA, 5 mM K₂ATP 및 1 mM MgCl₂ (pH 7.2)을 함유하고, 세포외 용액은 130 mM NaCl, 4 mM KCl, 1.8 mM CaCl₂, 1 mM MgCl₂, 10 mM HEPES 및 10 mM 글루코스(pH 7.35)를 함유하였다.

상기에서 제조한 세포주 (Ltk-cell)에, 세포막 전압을 -80 ㎷로 고정하고 +50 ㎷로 250 ms 동안 탈분극 자극을 가한 후, -50 ㎷로 재분극하면서 전류를 기록하였다. 각 화합물의 용량-의존적 hKv1.5 통로 전류 억제효과는 화합물이 존재하지 않을 때의 +50 mV로 탈분극 자극 말기에 측정된 안정전류에 대한 상대적 크기로 표시하여 비교하였다.

도 1a는 hKv1.5 통로를 발현시킨 Ltk-세포에서 기록된 대조전류를 나타내고, 도 1b는 Ltk-세포에 발현시킨 hKv1.5 통로 전류에 대한 토릴린의 효과를 나타낸다. 도 1c는 각 막전압에서 토릴린의 통로억제 효과를 평균적으로 나타낸 도면이고, 도 1d는 탈분극 자극의 마지막에 기록된 안정전류에 대한 토릴린 효과의 용량반응곡선을 나타낸 도면이다.

도 1a 내지 도 1d로부터, 토릴린은 Ltk-세포에 발현시킨 hKv1.5 통로 전류를 농도-의존적으로 억제하는 것을 알 수 있으며, 열려진 이온통로를 우선적으로 차단한다는 사실을 알 수 있다.

50 mV로 탈분극시 토릴린의 hKv1.5 통로 억제작용에 대한 IC₅₀은 2.51±0.34 μM (n=6)이었다. 더불어 용량반응곡선을 힐 (Hill) 방정식으로 피팅 (fitting)시 토릴린의 힐 (Hill) 상수값은 1.29 이었다.

실시예 2. 토릴린에 의한 hKv1.5 통로의 활성화 및 비활성화

도 2a로부터 활성화 중간 전압은 대조군에서 -12.7±3.2 mV (n=6), 토릴린 3 μM 존재하에서 -13.4±3.1 mV (n=6) 이었으며, 도 2b로부터 비활성화 중간 전압은 대조군에서 -25.1±3.0 mV (n=6), 토릴린 3 μM 존재하에서 -30.2±3.3 mV (n=6)임을 알 수 있다.

실시예 3. 토릴린에 의한 hKv1.5 통로 전류억제의 막전압 의존성

이온 통로에 작용하는 많은 약물들의 막전압의존성 여부는 약물의 응용가치를 평가하는 데 중요하다. 도 1 및 2에서 관찰한 억제효과를 전압-전류 관계곡선으로부터 각 막전압에서 약물이 존재하지 않을 때의 대조전류에 대한 토릴린 존재하에서의 전류의 상대적인 크기로 비교하여 도 3을 얻었다. 도 3에 나타난 바와 같이, 토릴린은 -30 ㎷에서 0 ㎷사이에서는 강한 막전압 의존성을 보이고, 0 ㎷와 +60 ㎷사이에서는 막전압 의존성이 소실되었다. 즉, hKv1.5 통로가 열리기 시작하는 막전압에서 약물이 작용이 나타나기 시작하여 최대로 열렸을 때, 그 억제효과가 최고에 달하였다.

실시예 4. 토릴린에 의한 hKv1.5 통로차단 효과의 자극빈도수 의존성

도 4는 토릴린의 hKv1.5 통로차단 효과와 자극빈도수와의 관계를 나타낸 도 면이다. 도 4는 -80 mV로 막전압 고정 후 +50 mV로 1Hz, 2Hz 및 3Hz로 각각 20번씩 자극하였을 때 기록되는 안정전류를 처음 자극시의 전류의 크기로 표준화하여 비교하였다. 대조군에 비해 토릴린 (3μM) 존재하에서 차단 정도가 증가되었고, 자극이 반복될수록 토릴린의 차단효과는 더욱 증가되었다. 즉, 자극빈도수가 증가하였을 때 약물의 차단효과도 증대되었다. 이는 토릴린이 심장박동수가 증가할수록 hKv1.5 통로에 더 잘 결합하여 억제효과가 증대됨을 시사하는 것이다.

실시예 5. 토릴린에 의한 hKv1.5 통로 전류억제의 통로상태 의존성

토릴린의 hKv1.5 통로 전류 억제효과가 이온통로의 어떤 상태에서 더 잘 작용하는지 분석하여 도 5를 얻었다.

도 5는, 대조군 및 토릴린 1 μM이 존재할 때, -80 ㎷로 막전압 에서 +50 ㎷로 탈분극시킨 후, -50 ㎷로 재분극시킬 때 발생되는 흔적전류 (tail current)를 나타낸 것이다.

대조군에서는 이 흔적전류가 아주 빠르게 감소하는데 반해서, 토릴린 존재하에서는 초기 최대 (peak) 전류는 감소하나, 연속적인 전류의 감소가 대조군에 비해 아주 서서히 일어나 흔적전류의 "교차현상"이 관찰되었다. 이는 토릴린이 hKv1.5 통로에 대해 열린 통로 차단제로 작용함을 강력히 시사한다. 이는 이상적인 항부정맥제가 갖추어야 할 조건 중의 하나이기에 토릴린은 이상적인 항부정맥제로서의 조건을 갖추고 있음을 알 수 있다.

실시예 6. 사상자로부터의 토릴린 추출

사상자를 음건하여 메탄올로 3회 추출한 다음 여과하여 여액을 감압농축하였 다. 농축액을 메틸렌클로라이드로 분획한 후, 클로로포름-메탄올 (30 : 1)을 유출용매로 실리카겔 컬럼크로마토그래피를 실시한 다음, 헥산-에틸아세테이트 (3 : 1)를 유출용매로 로바-에이 컬럼 (lobar-A column)으로 정제하여 토릴린을 수득하였다.

실시예 7. 약제학적 조성물의 제조

하기 조성에 따라서 각각 정제, 캡슐제, 산제 및 주사제를 제조하였다.

1) 정제

토릴린 500.0 ㎎

유당 500.0 ㎎

탈크 5.0 ㎎

마그네슘 스테아레이트 1.0 ㎎

2) 캡슐제

토릴린을 체질하여 부형제와 혼합한 후, 젤라틴 캡슐 중에 하기 조성에 따라 충전함으로써 캡슐제를 제조하였다.

토릴린 500.0 ㎎

전분 1500 10.0 ㎎

스테아르산마그네슘 100.0 ㎎

3) 산제

하기 성분을 통상의 산제 제조방법으로 혼합하고, 봉지에 넣어 밀봉한 후 산제를 제조하였다.

토릴린 500.0 ㎎

유당 100.0 ㎎

탈크 5.0 ㎎

4) 주사제

하기 성분을 통상의 주사제 제조방법으로 2.0 ㎖의 용량의 앰플에 충전하고, 멸균시켜 주사제를 제조하였다.

토릴린 50.0 ㎎

산화방지제 1.0 ㎎

트윈 80 1.0 ㎎

주사용 증류수 ≤2.0 ㎖

Claims

토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물.
제1항에 있어서, 약제학적으로 허용가능한 담체를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물.
제1항에 있어서, 경구 또는 주사제 제제인 것을 특징으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 토릴린은 사상자로부터 추출된 것을 특징으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물.
사상자를 음건하여 메탄올로 추출한 다음 여과하여 여액을 감압농축하는 단계;

상기 농축액을 염화메틸렌으로 분획하는 단계;

상기 분획물에 대하여 클로로포름-메탄올을 유출용매로 사용하여 실리카겔 컬럼크로마토그래피를 수행하는 단계; 및

헥산-에틸아세테이트를 유출용매로 사용하여 컬럼정제하는 단계

를 포함하는, 토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물 의 제조방법.
제5항에 있어서, 상기 메탄올 추출 단계는 3 ~ 5회 수행되는 것을 특징으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물의 제조방법.
제5항에 있어서, 상기 클로로포름-메탄올 유출용매의 부피비는 40 : 1 ~ 20 : 1이고, 상기 헥산-에틸아세테이트 유출용매의 부피비는 4 : 1 ~ 2 : 1인 것을 특징으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물의 제조방법.
토릴린을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물을 포함하는 기능성 식품.