KR100613886B1

KR100613886B1 - 항혈전 활성을 갖는 곤달비 추출물

Info

Publication number: KR100613886B1
Application number: KR1020050013241A
Authority: KR
Inventors: 김창진; 이향범; 임치환; 조종운
Original assignee: 한국생명공학연구원
Priority date: 2005-02-17
Filing date: 2005-02-17
Publication date: 2006-08-21

Abstract

본 발명은 항혈전 활성을 갖는 곤달비 추출물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 곤달비 추출물과 이로부터 분리된 클로로제닌산 유도체인 3,5-디카페오일퀴닌산 및 3,4-디카페오일퀴닌산이 항혈전 활성을 나타냄을 확인함으로써, 곤달비 추출물, 이로부터 분리된 클로로제닌산 유도체를 유효성분으로 함유하는 항혈전 조성물에 관한 것이다.

항혈전 활성, 곤달비, 클로로제닌산 유도체, 3,5-디카페오일퀴닌산, 3,4-디카페오일퀴닌산

Description

항혈전 활성을 갖는 곤달비 추출물{Anti-thrombic activity of Ligularia stenocephala M. extract}

도 1은 곤달비(Ligularia stenocephala M.)의 모양을 보여주는 사진이다.

도 2는 곤달비로부터 클로로제닌산 유도체 물질을 분리하기 위한 과정을 나타낸 모식도이다.

도 3은 곤달비로부터 분리된 3,5-디카페오일퀴닌산(화학식 1)의 H¹-NMR를 나타낸 것이다.

도 4는 곤달비로부터 분리된 3,4-디카페오일퀴닌산(화학식 2)의 H¹-NMR를 나타낸 것이다.

도 5는 곤달비 추출물 및 클로로제닌산 유도체의 항혈전활성 검정과정을 나타낸 것이다.

건강에 관한 관심이 많아지면서 천연물 유래 항혈전 물질에 관한 연구가 많이 이루어지고 있다. 윤 등 (1996)은 생강의 진게론(zingerone)이 강력한 항혈전 물질로서 혈전 예방효과가 탁월하며, 녹차유래 카테친(catechin)류는 4가지 혈소판 응집촉진물질(ADP, collagen, epinephrine, ristocetin)에 대해 녹차 카테친류를 10, 100 mg/kg 투여한 실험군에서 용량 의존적으로 항혈전 효과를 나타내 항혈전제로의 개발 가능성을 시사한 바 있다[한국식품위생안전성학회지 Vol. 11, pp. 77-82]. 최근에 곰취와 고삼 등이 항혈전 효과가 있음이 보고된 바 있으나 활성물질의 분리를 통한 연구는 거의 보고된 바 없다. (주)농심은 대두박으로부터 항혈전 펩타이드의 분리 및 활성측정을 추진한 바 있고, 또한 윤 등 (1998)은 목이버섯 추출물의 항혈전 활성을 보고한 바 있다[제 61차 식품과학회 학술발표회 및 정기총회, 한국식품과학회, 1998]. 김 등 (1999)은 톳 열수추출물로부터 분리한 혈액 항응고성 다당류에 관하여 연구한바 있다[J. Kor. Soc. of Food Science and Nutrition Vol. 27: 1204-1210]. 손 등 (1996)은 마이크로플레이트 (Microplate)법에 의한 된장 유래의 항혈전 펩타이드 탐색을 시도한 바 있다[한국식품과학회지 Vol. 28 (4) pp. 684-688].

그러나, 국내에서는 식물로부터 직접 항혈전 활성물질을 분리하여 보고한 예는 거의 없으며, 특히 곤달비 식물로부터 항혈전 활성물질의 분리는 이루어진 바 없다. 클로로제닌산 유도체인 3,4-디카페오일퀴닌산(3,4-dicaffeoyl quinic acid)과 3,5-디카페오일퀴닌산(3,5-dicaffeoyl quinic acid)의 전구물질에 해당되는 퀴닌산(quinic acid) 및 카페익산(caffeic acid)은 트립신 저해제(trypsin inhibitor)의 억제, 혈청 중성지방(serum triglyceride) 및 총 콜레스테롤(total cholesterol) 생성의 저해, 지질퍼옥사이드(lipid peroxide) 억제활성, 그리고 GOT 및 GPT 등의 저해 활성뿐만 아니라 항산화(antioxidant air oxidation) 등의 활성이 보고된 바 있으나, 항혈전 활성에 관한 연구는 아직까지 보고된 바 없다.

이에, 본 발명자들은 식물체로부터 유래되는 천연물을 이용하여 항혈전물질을 탐색하던 중, 곤달비 추출물 및 이로부터 분리된 클로로제닌산 유도체가 높은 항혈전 활성이 있음을 확인하고 천연물 약리물질로서의 이용가능성을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명은 곤달비 추출물 또는 이로부터 분리된 클로로제닌산 유도체를 유효성분으로 함유하는 항혈전 조성물을 제공하는데 그 목적이 있다.

본 발명은 곤달비 추출물을 유효성분으로 함유하는 항혈전 조성물을 그 특징 으로 한다.

또한, 다음 화학식 1로 표시되는 화합물(3,5-디카페오일퀴닌산) 또는 다음 화학식 2로 표시되는 화합물(3,4-디카페오일퀴닌산)을 유효성분으로 함유하는 항혈전 조성물을 포함한다.

이와 같은 본 발명을 더욱 상세하게 설명하면 다음과 같다.

본 발명은 곤달비 추출물과 이로부터 분리된 클로로제닌산 유도체인 3,5-디카페오일퀴닌산 및 3,4-디카페오일퀴닌산이 항혈전 활성을 나타냄을 확인함으로써, 곤달비 추출물, 이로부터 분리된 클로로제닌산 유도체를 유효성분으로 함유하는 항혈전 조성물에 관한 것이다.

본 발명에서 사용하는 곤달비는 다년초 식물로서 깊은 산 습지에 분포하는 것으로 알려져 있으며 연한 순을 묵나물로 하고 뿌리는 부인병에 사용되고 있는 약용식물로도 잘 알려져 있어 독성문제가 없는 것이 특징이다.

본 발명의 곤달비 추출물 및 이로부터 분리된 클로로제닌산 유도체의 제조과정을 설명하면 다음과 같다.

먼저, 곤달비의 잎, 줄기 또는 뿌리부위를 물 또는 유기용매로 추출하여 추출물을 수득한다. 이때, 유기용매는 메탄올, 부탄올, 클로로포름, 아세톤, 톨루엔, 에틸아세테이트, 포름산 등이 바람직하다.

상기에서 수득된 추출물을 감압증발하고 클로로포름과 물로 분획하여 얻은 물층을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 분획물을 수득한다.

상기 수득된 분획물을 물과 에틸아세테이트로 분획하여 얻은 에틸아세테이트층을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 활성분획물을 수득한다.

상기 수득된 활성분획물을 감압 농축하고 고압액상크로마토그래피(HPLC)를 수행하여 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 화학식 2로 표시되는 화합물을 분리, 정제한다.

이렇게 얻어진 곤달비 추출물, 화학식 1의 화합물 및 화학식 2의 화합물이 우수한 항혈전 활성을 가짐을 확인하였다.

본 발명에서 사용한 곤달비 뿌리, 가지, 잎 부위 모두가 예로부터 식용 및 약용으로 사용되어 사람에게 무해함이 입증된 바, 본 발명의 유도체들이 인체에 대한 독성을 유발하지 않는다. 또한, 본 발명의 클로로제닌산 유도체 구조를 기반으로 화학구조를 변형하여 더 활성효과를 가지는 신규화합물을 개발하는 모핵 화합물로 이용할 수 있다.

또한, 상기 화학식 1 또는 화학식 2로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용가능한 염의 형태를 포함할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산 (free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 상기 화학식 1, 화학식 2의 화합물은 당해 기술 분야에서 통상적인 방법에 따라 약제학적으로 형용되는 산 부가염을 형성할 수 있다. 유리산으로는 유리산과 무기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 황산, 인산 등을 사용할 수 있고 유기산으로는 구연산(citric acid), 초산, 젖산, 주석산(tartaric acid), 말레인산, 푸마르산(fumaric acid), 포름산, 프로피온산(propionic acid), 옥살산, 트리플루오로아세트산, 벤조산, 글루콘산, 메탄술폰산, 글리콜산, 숙신산, 4-톨루엔술폰산, 갈룩투론산, 엠본산, 글루탐산 또는 아스파르트산 등을 사용할 수 있다.

따라서, 본 발명은 곤달비 추출물, 화학식 1의 화합물 또는 화학식 2의 화합물을 유효성분으로 함유하는 항혈전 조성물을 포함한다.

본 발명의 조성물은 임상 투여시에 경구 또는 비경구로 투여, 예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소 적용할 수 있으며, 일반적인 의약품 및 건강식품의 형태로 사용될 수 있다.

본 발명의 약제 조성물은 경구 투여용 제형, 예를 들면 정제, 트로키제 (troches), 로젠지(lozenge), 수용성 또는 유성현탁액, 조제분말 또는 과립, 에멀젼, 하드 또는 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭실제(elixirs)로 제제화된다. 정제 및 캡슐 등의 제형으로 제제하기 위해 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로오스 또는 젤라틴과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트와 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분과 같은 붕괴제; 스테아린산 마그네슘, 스테아린산 칼슘, 스테아릴푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌글리콜 왁스와 같은 윤활유가 함유된다. 캡슐제형의 경우는 상기에서 언급한 물질 이외에도 지방유와 같은 액체 담체를 함유한다.

또한, 본 발명의 약제 조성물은 비경구로 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 피하주사, 정맥주사, 근육 내 주사 또는 흉부 내 주사 주입방식에 의한다. 비 경구 투여용 제형으로 제제화하기 위해서는 상기 곤달비 추출물, 화학식 1 또는 화학식 2의 화합물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제제한다.

또한, 본 발명의 유효성분은 일반적으로 성인 환자 체중 1 kg 당 1 내지 50 mg/일이고, 바람직하기로는 5 내지 20 mg/일의 유효용량을 가지며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간 간격으로 1 일 수회, 바람직하기로는 하루 2 회 내지 3 회 분할하여 투여될 수 있다.

또한, 건강식품이란, 상기 유효성분을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식 품을 원료로 하여 약품의 장기복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다.

이하, 본 발명은 다음 실시예에 의거하여 더욱 상세히 설명하겠는바, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

실시예 1 : 곤달비로부터 클로로제닌산 유도체 분리

곤달비의 잎 20 kg을 음건, 마쇄하여 분말 4 kg을 얻었다. 80% MeOH 72 ℃에 약 96시간씩 2회 침지한 후, 감압 여과하였다. 여액은 감압 농축하여 여기에 물을 적당량 추가하고 동량의 클로로포름, 에틸아세테이트, n-부탄올 및 물 순으로 극성에 따른 용매 분획을 2회에 걸쳐 실시하였다. 이중 에틸아세테이트층(45.2 g)의 활성이 가장 높게 나타났으며 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피 (톨루엔: 에틸아세테이트: 메탄올: 포름산 = 5: 3.5: 0.5: 1, v/v)를 실시하여 7개의 조분획층(F1-F7)을 얻었다. 활성검정을 통해 다시 6번 분획층을 단계적 HPLC 컬럼 크로마토그래피(아세톤: 물 = 1: 9 -> 6: 4, v/v)를 실시하여 6개의 조분획층 (L1-6)을 얻었다. 이중에서 활성이 높은 L3,4 층을 prep-HPLC(ODS, 53% 메탄올, 0.1% 포름산)를 통해 3,5-디카페오일퀴닌산 (화학식 1) 및 3,4-디카페오일퀴닌산 (화학식 2)을 분리하였다[도 2].

실시예 2 : 클로로제닌산 유도체의 구조분석

클로로제닌산 유도체 2종에 대한 화합물의 구조는 질량분석기(EI- 및 FAB-MS), 적외선(IR) 및 자외선(UV) 분광기, 핵자기공명분석기(¹H-¹H COSY, ¹H-¹³C COSY, HMBC) 등의 기기분석 및 문헌 조사를 통하여 동정하였다. FAB-MS(Jeol JMS-BX 303) 측정결과 m/z 539(M+Na)⁺, m/z 517(M+1)⁺ 피크가 관찰되어 분자량이 516임을 확인하였다. 또한, IR 스펙트럼으로부터 3200 cm^-1 부근에서 하이드록시기와 1700 cm^-1 부근에서 알파, 베타-불포화 카보닐기가 확인되었다. ¹H-NMR과 ¹³C-NMR 스펙트럼을 해석한 결과, 두 물질의 분자식이 동일한 C₂₅H₂₄O₁₂인 3,5-디카페오일퀴닌산 및 3,4-디카페오일퀴닌산으로 동정되었다. 즉, 3,4-디카페오일퀴닌산은 3,5-디카페오일퀴닌산이 C-5에 결합된 카페인산 부위가 C-4위치에 결합된 것 이외에는 동일한 구조로 판명되었다[도 3 및 도 4 참조].

실시예 3: 항혈전 활성검정

1) PRP (platelet rich plasma) 제조

사람의 팔에서 전혈 10 ml를 채혈한 후, 스크류-캡 튜브(screw-cap tube)에 3.8% 소듐 시트레이트(0.1 volume citrate 함유)를 넣고 혈액으로부터 백혈구, 적혈구 등 혈소판 이외의 혈구 세포들은 원심분리기를 사용하여 10분 동안, 1500 rpm, 15분간 원심분리를 하여 침전시켜서 제조하고, 대부분의 혈소판들이 상징액인 혈장에 남아 있도록 하여 PRP를 조제하였다.

2) 항혈전 성분의 검색

① 변형 도포법 (Modified thin smear method)

이 실험에 사용된 샘플들 중 수용성인 샘플은 식염수 용액에 용해시켰고, 불용성인 것은 EtOH에 녹여서 1%의 EtOH 용액이 첨가된 식염수 용액에 희석하였다. 그리고, 혈액 응고제의 조제는 1 ㎍ ADP/ml 식염수, 60 ㎍ AA/ml 식염수 및 60 ㎍ collagen/ml 식염수로 조제하였다. 수행한 변형도포법의 절차는 도 5에서와 같다. PRP (160 ㎕)를 첨가하고 37 ℃, 2분간 배양한 다음 시료 20 ㎕를 첨가하고 응혈물질 20 ㎕를 첨가 (ADP, 1 ㎍/ml)한 후 교반 및 배양(37 ℃, 4분)하였다. 도포(smearing)한 뒤 현미경으로 관찰 (× 1000)하였다.

② 전기 임피던스법 (Electrical impedance method)

전혈 (whole blood) 0.45 mL (0.1 volume citrate 함유)에 0.45 mL 식염수를 혼합하고, 여기에 시료용액 0.05 mL를 가한 후 혈소판응집분석기의 전극사이에 넣고 전류를 통하여 준 다음, 0.05 mL ADP (4 ㎍/mL) 또는 콜라겐 (2 ㎍/mL)을 가하여 37 ℃에서 8분 동안에 전극에 부착되는 혈소판 응집괴로 인하여 유발되는 두 전극사이의 임피던스 (impedance) 변화를 측정하였다.

3) 혈액응고 억제활성

혈액 응고반응기 (Blood coagulator)를 이용하여 PRP의 혈액응고시간(Prothrombin time, PT)과 활성화된 혈액응고시간 (activated prothrombin time , APTT) 분석을 통해 혈액응고 지연시간 (Tr)을 검토하였다.

① 혈액응고시간 (PT)

트롬보플라스틴 시약 (Thromboplastin reagent, Sigma Dianostics)을 37 ℃ 증류수를 2 mL 넣어 부드럽게 섞어준 다음 상온에서 10 ~ 15분간 방치 후 얼음에 채워 시약으로 사용하였다. 트롬보플라스틴 용액을 관에 담고 동량의 25 mM CaCl₃를 넣어 37 ℃에서 3분간 배양한 후 트롬보플라스틴/Ca²⁺ 혼합액 0.2 mL를 재빨리 취해 넣고 응고에 필요한 시간을 혈액 응고반응기를 이용해 조사하였다.

② 활성화된 혈액응고시간 (APTT)

APTT 시약(Sigma Diagnostics)을 사용하였으며 구연산 혈장(citrated plasma) 0.1 mL를 37 ℃에서 1분간 배양한 다음 0.1 mL의 APTT 시약을 넣고 37 ℃에서 정확하게 3분간 배양하고 데워진 20 mM CaCl₂용액 0.1 mL를 넣고 응고되기까지의 시간을 혈액 응고반응기를 사용하여 분석하였다.

4) 시료의 조제 및 항혈전 물질의 분리

① 시료의 조제

수집한 식물체는 부위별로 음건 혹은 동결건조한 후 분쇄하였다. 분말시료 20 g에 5배량의 80% MeOH를 가하고 실온에서 24시간 추출한 후 잔사를 다시 40 ℃에서 3시간씩 2회 환류 추출하였으며 추출액은 Whatman No. 4 여지로 여과하여 감압ㆍ농축하였다. 농축한 시료는 동결건조 후 항혈전 활성의 분석을 위하여 생리식염수로 용해하여 사용하였다. 검색한 결과, 항혈전 활성이 제일 높은 곤달비를 선발하였다.

② 항혈전 활성 물질의 탐색

항혈전 성분의 탐색은 응집유도제로 ADP (1 ㎍/ml)와 콜라겐(2 ㎍/ml)의 응집력과 비교하여, 80％ MeOH 추출시료 (0.2 mg/ml)에 의한 사람 혈액 PRP의 응집저해능력을 검색하였다. 변형도포법(Modified Thin Smear Method)에 의해 1차 탐색한 시료 중 혈소판 응집저해 활성이 높은 시료들을 대상으로 전혈을 이용한 전기 임피던스법과 병행하여 항혈전 활성작용을 나타내는 시료가 선발되었다.

5) 활성 검정 결과

곤달비 추출물 및 이로부터 분리된 3,4-디카페오일퀴닌산와 3,5-디카페오일퀴닌산 유도체가 높은 항혈전 활성이 있음을 나타내었다[표 1, 2 참조].

시료	Thin-smear method		임피던스 법 (%)
시료	ADP (1 ㎍/ml)	Collagen (2 ㎍/ml)	ADP (1 ㎍/ml)	Collagen (2 ㎍/ml)
3,4-디카페오일 퀴닌산	-	±	±	±
3,5-디카페오일 퀴닌산	-	-	±	±
곤달비 추출물	-	-	-	-
* -: 응집 없음, ±: <20% 응집, +:21-40% 응집, ++:41-60% 응집, +++: 61% 이상 응집

시료	혈액응고 지연시간 (초)		혈소판 응집저해율 (%)
시료	PT	APTT	ADP	Collagen
대조구 (aspirin, 0.2 ug/ml)	14.2	25.4	94	91
3,4-디카페오일 퀴닌산	13.8	24.9	82	84
3,5-디카페오일 퀴닌산	13.9	25	84	85
곤달비 추출물	14	25	>90	>90

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 응집저해율은 변형도포법 및 임피던스법 모두에서 20% 이하의 낮은 응집반응을 보여 80% 이상의 저해율을 보였다. 특히, 높은 혈전용해력을 갖는 아스피린을 대조구로 사용할 경우 상기 표 2에 나타난바와 같이, prep HPLC를 통해 분리된 클로로제닌산 유도체의 혈소판응집 억제활성과 혈액응고 억제활성(PT와 APTT) 검정은 항혈전 물질로 알려진 아스피린(0.2 ㎍/ml)과 비교한 결과 5 ㎍/ml에서 비슷한 수준의 활성을 보였다.

실시예 4 : 랫트에 대한 경구투여 급성 독성실험

6주령의 특정병원부재 (SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성독성실험을 실시하였다. 군당 2 마리씩의 동물에 곤달비 추출물, 화학식 1의 화합물 및 화학식 2의 화합물을 각각 0.5% 메틸셀룰로즈 용액에 현탁하여 1 g/kg/1 ㎖의 용량으로 단회 경구투여하였다. 시험물질 투여 후 동물의 폐사여부, 임상증상, 체중변화를 관찰하고 혈액학적 검사와 혈액생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강장기와 흉강장기의 이상여부를 관찰하였다. 시험결과, 시험물질을 투여한 모든 동물에서 특기할 만한 임상증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중변화, 혈액검사, 혈액생화학 검사, 부검소견 등에서도 독성변화는 관찰되지 않았다. 이상의 결과, 곤달비 추출물, 화학식 1 및 화학식 2의 화합물 모두 랫트에서 500 mg/kg까지 독성변화를 나타내지 않으며, 경구 투여 최소치사량(LD₅₀)은 500 mg/kg 이상인 안전한 물질로 판단되었다.

제제예 1 : 시럽제의 제조

본 발명의 곤달비 추출물, 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분 2% (중량/부피)로 함유하는 시럽은 다음과 같은 방법으로 제조한다.

곤달비 추출물, 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 사카린, 당을 온수 80 g에 용해시켰다. 이 용액을 냉각시킨 후, 여기에 글리세린, 사카린, 향미료, 에탄올, 소르빈산 및 증류수로 이루어진 용액을 제조하여 혼합하였다. 이 혼합물에 물을 첨가하여 100 ㎖가 되게 하였다. 상기 부가염은 실시예에 의한 다른 염으로 대치시킬 수 있다.

상기 시럽제의 구성성분은 다음과 같다.

유효성분 ·······················2 g

사카린 ······················· 0.8 g

당 ························ 25.4 g

글리세린······················ 8.0 g

향미료 ······················ 0.04 g

에탄올 ·······················4.0 g

소르빈산 ······················0.4 g

증류수 ·······················정량

제제예 2 : 정제의 제조

유효성분 15 mg이 함유된 정제는 다음과 같은 방법으로 제조한다.

곤달비 추출물, 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 또는 이의 염산염 250 g을 락토오스 175.9 g, 감자전분 180 g 및 콜로이드성 규산 32 g과 혼합하였다. 이 혼합물에 10% 젤라틴 용액을 첨가시킨 후, 분쇄해서 14 메쉬체를 통과시켰다. 이것을 건조시키고 여기에 감자전분 160 g, 활석 50 g 및 스테아린산 마그네슘 5 g을 첨가해서 얻은 혼합물을 정제로 만들었다.

상기 정제의 구성성분은 다음과 같다.

유효성분 ····················250 g

락토오스 ···················175.9 g

감자전분 ····················180 g

콜로이드성 규산 ················ 32 g

10% 젤라틴 용액

감자전분 ····················160 g

활석 ······················ 50 g

스테아린산 마그네슘 ··············· 5 g

제제예 3 : 주사액제의 제조

유효성분 10 mg을 함유하는 주사액제는 다음과 같은 방법으로 제조하였다.

곤달비 추출물, 화학식 1의 화합물, 화학식 2의 화합물 또는 이의 염산염 1 g, 염화나트륨 0.6 g 및 아스코르빈산 0.1 g을 증류수에 용해시켜서 100 ㎖을 만들었다. 이 용액을 병에 넣고 20 ℃에서 30 분간 가열하여 멸균시켰다.

상기 주사액제의 구성성분은 다음과 같다.

유효성분 ··················· 1 g

염화나트륨···················0.6 g

아스코르빈산··················0.1 g

증류수·····················정량

이상에서 상세히 설명한 바와 같이, 본 발명은 곤달비 추출물 또는 이로부터 분리된 클로로제닌산 유도체가 항혈전 활성을 가짐을 확인함으로써, 이들을 유효성분으로 함유하는 항혈전 조성물로 유용하게 사용하리라 기대된다.

Claims

곤달비(Ligularia stenocephala M.) 메탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항혈전 조성물.
다음 화학식 1로 표시되는 화합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항혈전 조성물.

[화학식 1]
다음 화학식 2로 표시되는 화합물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항혈전 조성물.

[화학식 2]