KR100468073B1 - Composition comprising from an extract of Salicornia herbacea or isorhamnetin-3-O-β-D-glucoside isolated therefrom - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: Provided is a composition containing the extract of Salicornia herbacea or iso rhamnetin-3-O-β-D isolated therefrom which inhibit rat lens aldose reductase and sorbitol accumulation. Therefore, it is used for prevention and treatment of diabetes. CONSTITUTION: The pharmaceutical composition for prevention and treatment of diabetes is characterized by containing, as an active ingredient, dichloroethylene or ethylacetate soluble extract of Salicornia herbacea, or iso rhamnetin-3-O-β-D isolated from the extract of Salicornia herbacea.

Description

함초 추출물 또는 이로부터 분리된 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드를 포함하는 조성물 {Composition comprising from an extract of Salicornia herbacea or isorhamnetin-3-O-β-D-glucoside isolated therefrom}Composition comprising from an extract of Salicornia herbacea or isorhamnetin-3-O-β-D-glucoside isolated therefrom}

본 발명은 함초 추출물 또는 이로부터 분리된 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드를 포함하는 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition comprising a seaweed extract or isolamnetine-3- O- β-D-glucoside isolated therefrom.

당뇨병이란 인슐린 분비량(量)의 부족으로 혈액 중의 포도당(혈당)이 정상인보다 그 농도가 높아져서 소변에 포도당을 배출하는 만성질환이다. 정상의 경우 섭취한 음식물은 대부분 포도당으로 바뀌고, 혈액은 이 포도당을 각 세포로 운반해 준다. 포도당이 세포 속으로 이동하는 데는 인슐린(호르몬)이 필요하다. 당뇨병은 인슐린이 제대로 만들어지지 않거나 작용을 하지 못하기 때문에 포도당이 세포 내로 이동되지 못해 발생하는 것이다. 세포 속으로 운반되지 못한 포도당은 그대로 혈액 속에 남아 있게 되어 혈액은 당이 많은 '고혈당' 상태가 되고 소변으로 배출되는 것이다.Diabetes is a chronic disease in which glucose is released into the urine due to a lack of insulin secretion (glucose), the concentration of glucose in the blood is higher than normal. In normal cases, most of the food you eat is converted to glucose, and blood carries this glucose to each cell. Glucose needs insulin (hormones) to move into cells. Diabetes is caused by the inability of glucose to move into cells because insulin is not made or working properly. Glucose that was not transported into the cells remains in the blood, so the blood becomes a high blood sugar 'high blood sugar' state and is discharged into the urine.

인슐린은 췌장에서 만들어지는 호르몬으로, 췌장의 내부에는 세포들이 작은 덩어리 모양을 하고 모여 있는 '랑게르한스섬'이 있고 랑게르한스섬 내부에는 인슐린을 분비하는 '베타세포'가 있다. 그런데 혈액 속 포도당이 세포 내로 운반되기 위해서는 인슐린의 도움이 필요하다. 즉, 자물쇠와 열쇠와 같이 세포막에 존재하는 인슐린 수용체(자물쇠)를 인슐린(열쇠)으로 열어줘야만 포도당이 세포 안으로 들어갈 수 있는 것이다.Insulin is a hormone produced by the pancreas. Inside the pancreas is a small clump of cells called Langerhans Island, and inside the Langerhans Island there are beta cells that secrete insulin. But glucose in the blood needs the help of insulin to be transported into the cells. In other words, glucose can enter the cell only by opening the insulin receptor (lock) that is present in the cell membrane with the lock (key).

당뇨병(diabetes)의 비정상적인 당 수치는 혈장내의 헤모글로빈(hemoglobin)의 수치를 높이게 되며, 만성적인 고혈당증(hyperglycemia), 아테롬성 동맥경화증(atherosclerosis), 미세혈관병증(microangiopathy), 신장 질환, 심장 질환, 당뇨병성 망막증(diabetic retinopathy) 및 다른 안과 질환과 같은 일련의 합병증을 야기하게 된다.Abnormal glucose levels in diabetes raise the level of hemoglobin in plasma, chronic hyperglycemia, atherosclerosis, microangiopathy, kidney disease, heart disease, diabetic It causes a series of complications such as diabetic retinopathy and other eye diseases.

당뇨병은 인슐린 생산 여부에 따라 두 가지 유형으로 특징 지워지는데, 인슐린 의존형인 제 I형 당뇨병(insulin dependent diabetes, IDDM)은 혈액 내의 글루코스 조절 호르몬인 인슐린(Insulin)의 분비 결핍으로 야기되며, 주로 10 내지 20대의 젊은 연령층에서 발병되기 때문에 소아당뇨병(juvenile diabetes)이라 불리우기도 한다. 제 Ⅱ형 당뇨병(non-insulin dependent diabetes, NIDDM)은 주로 40대 이후에 발병되며, 우리나라 당뇨병 환자의 대부분을 차지한다. 제 Ⅰ형과는 달리 성인형 당뇨병이라 불리우며 발병 원인은 아직 명확히 밝혀져 있지 않으나, 유전적인 요인과 환경적 요소가 함께 관여되어 발생하는 것으로 알려졌다. 제 Ⅱ형 당뇨병의 병인으로 췌장베타세포에서 인슐린 분비의 장애와 표적세포에서 인슐린 작용의 결함(인슐린 저항성)이 모두 관찰되는데, 이중 어떠한 변화가 일차적 중요성을 갖는지는 아직 확실하지 않다.Diabetes is characterized by two types of insulin production. Insulin dependent diabetes mellitus (IDDM) is caused by a deficiency of insulin, a glucose-regulating hormone in the blood, mainly 10 to It is called juvenile diabetes because it occurs in young people in their 20s. Type II diabetes (non-insulin dependent diabetes, NIDDM) occurs mainly after the age of 40, and occupies most of the diabetic patients in Korea. Unlike type I, it is called adult-type diabetes and the cause of the disease is not known yet, but it is known to be caused by genetic factors and environmental factors. The etiology of type II diabetes has been observed in both pancreatic beta cells with impaired insulin secretion and in target cells with insulin action (insulin resistance), but it is not yet clear which changes are of primary importance.

알도즈 환원 효소는 보조인자로 NADPH를 사용하여 포도당을 극성 당 알콜과 솔비톨로 환원시키는 폴리올 경로(polyol pathway)에 있는 효소이다. 알도즈 환원 효소는 수정체의 백내장 외에도 신경장애, 신장병, 망막증과 같은 당뇨합병증 발병의 중요한 원인이 되는 것으로 알려졌다(Van Heyningen R. Formation of polyol by the lens of the rat with sugar cataract,Nature, 184, pp.194-196,1959),(Beyer-Mears A,et al., Diabetes , 33, pp.604-607, 1984). 당뇨병에서는, 인슐린 비의존성 포도당 수송이 있는 세포에서 일어나는 세포내 포도당의 증가가 솔비톨 생성의 현저한 증가를 가져온다. 솔비톨 축적 증가는 세포 손실을 초래하여(Engerman RL,et al., Diabetes, 33, p.97-100, 1984), 당뇨 합병증과 관련된 조직에서 일어나는 구조적, 기능적 변화가 알도즈 환원 효소 저해제에 의해 정지될 수 있다는 사실이 보고되어 있다(Donkor IO,et al., European Journal of Medicinal Chemistry, 34, pp.235-43, 1999). 이는 효소의 특정한 저해제는 당뇨 합병증의 치료와 예방에 도움이 될 수 있음을 의미한다.Aldose reductase is an enzyme in the polyol pathway that reduces glucose to polar sugar alcohols and sorbitol using NADPH as a cofactor. Aldose reductase is known to be an important cause of diabetic complications such as neuropathy, kidney disease and retinopathy in addition to cataracts in the lens (Van Heyningen R. Formation of polyol by the lens of the rat with sugar cataract, Nature, 184 , pp .194-196,1959), (Beyer-Mears A, et al., Diabetes, 33 , pp. 604-607, 1984). In diabetes, an increase in intracellular glucose that occurs in cells with insulin independent glucose transport results in a significant increase in sorbitol production. Increased sorbitol accumulation leads to cell loss (Engerman RL, et al., Diabetes, 33 , p.97-100, 1984), where structural and functional changes in tissues associated with diabetic complications are arrested by aldose reductase inhibitors Has been reported (Donkor IO, et al., European Journal of Medicinal Chemistry, 34 , pp. 235-43, 1999). This means that certain inhibitors of enzymes can be helpful in the treatment and prevention of diabetic complications.

알도즈 환원 효소 저해제의 치료상 가능성은 에팔레스타트(epalrestat)와 톨레스타트(tolrestat)를 포함하는 여러 화합물의 임상결과에 의해 증명되었다.The therapeutic potential of aldose reductase inhibitors has been demonstrated by the clinical results of several compounds including epilestat and tollestat.

포도당 물질 대사 작용의 솔비톨 경로(sorbitol pathway)에 있는 효소인 알도즈 환원 효소는 포도당을 솔비톨로의 환원을 촉진시킨다. 알도즈 환원 효소는 포도당에 낮은 기질 친화력을 가지고 있어 솔비톨이 되는 포도당의 전환은 보통의 조직에서 흔히 일어나는 것은 아니다. 그러나 당뇨병에서 인슐린에 반응이 없는 조직에서 포도당의 증가된 유효성은 폴리올 경로를 통하여 솔비톨의 증가를 이끈다. 이러한 경로에서 처음 단계는 알도즈 환원 효소와 NADPH에 의해 포도당이 솔비톨로 변하고, 다음 단계로 솔비톨 탈수소발생효소와 NAD+에 의해 솔비톨의 산화가 일어나서, 결과적으로 과당(fructose)이 얻어진다. 솔비톨의 축적은 신장, 신경, 망막, 수정체, 심장근을 포함하는 당뇨 합병증의 중요한 원인이 된다. 수정체의 백내장의진전과 신경 전도 속도의 감소는 렌즈, 백혈구, 말초신경에서 솔비톨과 과당 수치의 증가와 관련이 있다(Malone JI,et al., an indicator of diabetic control. Diabetes,29, pp.861-864, 1980).Aldose reductase, an enzyme in the sorbitol pathway of glucose metabolism, promotes the reduction of glucose to sorbitol. Aldose reductase has a low substrate affinity for glucose, so the conversion of glucose to sorbitol is not common in normal tissues. However, increased effectiveness of glucose in tissues that do not respond to insulin in diabetes leads to an increase in sorbitol through the polyol pathway. In this route, the first step is glucose to sorbitol by aldose reductase and NADPH, and the next step is oxidation of sorbitol by sorbitol dehydrogenase and NAD + , resulting in fructose. Sorbitol accumulation is an important cause of diabetes complications including kidneys, nerves, retina, lens, and heart muscle. The development of cataracts in cataracts and a decrease in the rate of nerve conduction are associated with increased levels of sorbitol and fructose in the lens, leukocytes and peripheral nerves (Malone JI, et al., An indicator of diabetic control. Diabetes , 29 , pp.861). -864, 1980).

스트렙토조토신(이하, STZ)은 인슐린을 분비하는 췌장 효소의 세포들을 선택적으로 파괴하여 췌장 효소의 활동을 막아 당뇨병을 일으키는 원인이 된다(Gilman AG,et al., Goodman and Gilman's the Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th ed. Pergamon Press, New York, pp.1317-1322, pp.1463-1495, 1990). STZ를 주입한 고혈당증은 고혈당의 병원균 활동을 연구하기 위한 유용한 실험적 모델로 사용된다(Ledoux SP,et al., Diabetes,35: pp.866-72, 1986).Streptozotocin (hereinafter referred to as STZ) causes diabetes by selectively destroying the cells of the pancreatic enzymes that secrete insulin, preventing the activity of pancreatic enzymes (Gilman AG, et al., Goodman and Gilman's the Pharmacological Basis of Therapeutics) , 8th ed.Pergamon Press, New York , pp. 1317-1322, pp. 1463-1495, 1990). Hyperglycemia injected with STZ is used as a useful experimental model for studying pathogenic activity of hyperglycemia (Ledoux SP, et al., Diabetes , 35 : pp.866-72, 1986).

현재 제 Ⅱ형 당뇨병 및 인슐린 저항성 같은 합병증에 사용되는 제제로는 5 종류의 화합물군, 즉 비구아니드(biguanides), 티아졸리딘디온 (thiazolidinediones), 설포닐우레아(sulfonylureas), 벤조산(benzoic acid) 유도체 화합물 및 α-글루코시다제 저해제(α-glucosidase inhibitor) 등이 사용되고 있으며, 이중 메트포르민(metformin)과 같은 비구아니드 화합물은 과도한 혈액내 당신생성(gluconeogenesis)을 예방하는 것으로 알려져 있다. 티아졸리딘디온 화합물은 말초 신경의 글루코스 소비율을 증가시키는 작용을 하는 것으로 생각되며, 톨부타미드(tolbutamide) 및 글리부리드(glyburide)와 같은 설포닐우레아, 레파글리니드(repaglinide) 화합물과 같은 벤조산 유도체 및 아카보스(acarbose)와 같은 α-글루코시다제 저해제는 인슐린 분비를 자극하여 혈장 글루코스를 낮추는 작용을 한다.Agents currently used for complications such as type II diabetes and insulin resistance include five groups of compounds: biguanides, thiazolidinediones, sulfonylureas, and benzoic acid. Derivative compounds and α-glucosidase inhibitors are used. Among these, biguanide compounds such as metformin are known to prevent excessive blood gluconeogenesis. Thiazolidinedione compounds are thought to act to increase glucose consumption in peripheral nerves, benzoic acids such as sulfonylureas, repaglinide compounds such as tolbutamide and glyburide A-glucosidase inhibitors, such as derivatives and acarbose, act to stimulate insulin secretion and lower plasma glucose.

상기의 설포닐우레아 화합물은 인슐린 의존형인 제 Ⅰ형 당뇨병 환자에게는 투여할 수 없으며, 비인슐린 의존형인 제 Ⅱ형 당뇨병 환자는 인슐린 분비를 감소하게 되고, 여성 환자에게 비정상적인 태아 출생, 유산(abortion) 및 사산(stillbirth)과 같은 부작용을 야기할 수 있다. 추가적으로, 대부분의 설포닐우레아 화합물은 설포닐우레아의 대사작용으로 인해 간 및 신장 기능에 장애가 있는 환자에게는 조심스럽게 투여해야 한다.The sulfonylurea compound cannot be administered to insulin-dependent type I diabetic patients, and non-insulin-dependent type II diabetic patients reduce insulin secretion, abnormal fetal birth, abortion and May cause side effects such as stillbirth. In addition, most sulfonylurea compounds should be administered carefully to patients with impaired liver and kidney function due to the metabolism of sulfonylureas.

메트포르민과 같은 비구아니드 함유 제제의 메카니즘은 확실하게 규명되지는 않았으나, 비구아니드 화합물은 췌장의 인슐린 분비를 증가시킬 수 없음에도 불구하고 설포닐우레아 보다 더 효과적으로 혈당을 강하하고 저혈당 유발의 빈도도 낮다. 그러나 투여 초기에 구역질, 구토, 설사 및 발진 등을 야기할 수 있으며, 치명적인 락트산증(lactic acidosis)과 같은 부작용을 야기할 수 있으므로, 미국 내에서는 임상실험용 시약으로만 사용 가능하다.The mechanism of biguanide-containing preparations such as metformin has not been elucidated, but although biguanide compounds are unable to increase pancreatic insulin secretion, they lower blood sugar more effectively than sulfonylureas, and also lower the incidence of hypoglycemia. low. However, it can cause nausea, vomiting, diarrhea and rashes at the beginning of administration, and can cause side effects such as fatal lactic acidosis, so it can only be used as a clinical reagent in the United States.

설포닐우레아 및 비구아니드 함유 제제들은 상기와 같은 결점 및 부작용을 가지고 있으므로, 낮은 부작용 및 높은 안전성을 갖는 탁월한 혈당강하제가 필요한 실정이다.Since sulfonylurea and biguanide-containing preparations have the above drawbacks and side effects, there is a need for an excellent hypoglycemic agent with low side effects and high safety.

본 발명에서 사용한 함초(Salicornia herbacea)는 명주아과(Chenopodiaceae)에 속하는 일년초로서, 신농초본경에는 맛이 짜다고 하여 함초(鹹草), 염초(鹽草) 또는 신령스러운 풀로 여겨 신초(神草)라고 적혀있으며, 해안이나 개펄, 염전 주위에 무리지어 자라서 '퉁퉁마디'라고도 불리우며, 1921년에 천연기념물로 지정되었다. 함초는 육지에 자라면서도 바닷물 속에 들어있는 갖가지 미네랄과 효소 성분이 농축되어 있으며, 특히 함초 100g에 칼슘 671㎎, 마그네슘 661㎎, 칼륨 475㎎, 철 441㎎, 인 139㎎, 요오드 65.8㎎, 나트륨 6.5%, 염분 15.7% 등의 성분이 알려져 있고, 식물성 섬유질 5,200㎎ 및 숙변을 분해하는 효소군이 함유되어 있고, 이밖에 90여 가지의 미네랄이 골고루 들어있다. 약리작용으로는 비만증에 효과적이며, 위의 기능을 촉진하고, 신장염, 간염 및 고혈압, 저혈압, 빈혈증에 효과가 있고, 혈당 강하, 갑상선 기능의 향상 등의 작용을 한다. Salicornia herbacea ( Salicornia herbacea ) used in the present invention is a yearly plant belonging to the Cenopodiaceae, and it is said that it is salty, salty, or spiritual grass because it is salty in the new agricultural plant. It is also called a 'stalk' because it grows around the coast, Gaepal, and salt fields. It was designated as a natural monument in 1921. The seaweed grows on land but is enriched with various minerals and enzymes contained in the seawater. Especially, 100g of seaweed contains 671mg of calcium, 661mg of magnesium, 475mg of potassium, 441mg of iron, phosphorus 139mg, iodine 65.8mg, sodium 6.5 %, Salinity 15.7%, etc. are known, and 5,200 mg of vegetable fiber and enzyme group that degrade stool are contained, and about 90 kinds of minerals are evenly contained. Pharmacological action is effective in obesity, promotes the function of the stomach, and is effective in nephritis, hepatitis and hypertension, hypotension, anemia, lowering blood sugar, improving the function of the thyroid gland.

이에 본 연구자는 부작용이 없으며 안전한 천연 제제를 이용한 당뇨병 질환 치료제를 개발하기 위하여 함초의 유기 용매 가용 추출물 및 이로부터 분리된 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드를 포함하는 조성물이 스트렙토조토신 유도 고혈당 래트에서 수정체 알도즈 환원 효소(Rat Lens Aldose Reductase)와 솔비톨 축적(sorbitol Accumulation)을 저해함을 확인하여, 당뇨병 관련 질환의 예방 및 치료에 효능이 있음을 확인하여 본 발명을 완성하였다.In this regard, the present inventors have no side effects, and in order to develop a therapeutic agent for diabetic disease using a safe natural agent, a composition comprising a soluble extract of organic solvent and isoramnetine-3- O- β-D-glucoside isolated from it The present invention was confirmed to inhibit rat lens aldose reductase and sorbitol accumulation in jotosine-induced hyperglycemic rats, thus confirming its efficacy in preventing and treating diabetes-related diseases. .

본 발명의 목적은 스트렙토조토신 유도 고혈당 래트에서 수정체 알도즈 환원 효소와 솔비톨 축적량 측정 실험에서 저해 활성을 나타내는 함초 유기 용매 가용 추출물 및 이로부터 분리된 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드를 포함하는 당뇨병의 예방 및 치료용 조성물을 제공하는 것이다.OBJECT OF THE INVENTION The present invention aims to provide soluble extracts of organic solvent containing seaweed organic solvents exhibiting inhibitory activity in crystalline aldose reductase and sorbitol accumulation assays in streptozotocin-induced hyperglycemic rats and isorametine-3- O- β-D-glucose isolated therefrom. It is to provide a composition for preventing and treating diabetes comprising a seed.

도 1은 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드 또는 에팔레스타트를 각각 위내 튜브를 통하여 25 및 50 mg/kg/day로 주입한 후 스트렙토조토신으로 유도된 래트당뇨 모델에서 수정체내에서 솔비톨의 축적에 미치는 효과를 측정한 도(**P<0.01,*P<0.05)이고,1 is modified in a streptozotocin-induced rat diabetes model after isoramnetine-3- O- β-D-glucoside or epalestat at 25 and 50 mg / kg / day, respectively, via an intragastric tube. Is a measure of the effect on the accumulation of sorbitol in the body ( ** P <0.01, * P <0.05),

도 2는 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드 또는 에팔레스타트를 각각 위내 튜브를 통하여 25 및 50 mg/kg/day로 주입한 후 스트렙토조토신으로 유도된 래트당뇨 모델에서 좌골신경에서 솔비톨의 축적에 미치는 효과를 측정한 도(**P<0.01)이며,Figure 2 is a sciatic model in a streptozotocin-induced rat diabetic model after isoramnetine-3- O- β-D-glucoside or epalestat injection at 25 and 50 mg / kg / day, respectively, via an intragastric tube. A measure of the effect of sorbitol accumulation on nerves ( ** P <0.01).

도 3은 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드 또는 에팔레스타트를 각각 위내 튜브를 통하여 25 및 50 mg/kg/day로 주입한 후 스트렙토조토신으로 유도된 래트당뇨 모델에서 적혈구내에서 솔비톨의 축적에 미치는 효과를 측정한 도(*P<0.05)이다.FIG. 3 shows red blood cells in a streptozotocin-induced rat diabetes model after isoramnetine-3- O- β-D-glucoside or epalestat is injected at 25 and 50 mg / kg / day through an intragastric tube, respectively. It is the degree ( * P <0.05) which measured the effect on the accumulation of sorbitol within.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 함초의 유기 용매 가용 추출물을 유효 성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 및 치료를 위한 약학조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of diabetes mellitus containing the organic solvent soluble extract of the seaweed as an active ingredient.

상기 유기 용매 가용 추출물은 n-헥산, 디클로로에틸렌, 에틸아세테이트, n-부탄올의 유기 용매에 가용한 추출물을 포함하며, 바람직하게는 에틸아세테이트에 가용한 추출물을 포함한다.The organic solvent soluble extract includes an extract soluble in an organic solvent of n-hexane, dichloroethylene, ethyl acetate, n-butanol, and preferably includes an extract soluble in ethyl acetate.

또한, 본 발명은 함초의 유기 용매 가용 추출물로부터 분리된 하기 구조식 A로 표기되는 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드를 포함하는 당뇨병의 예방 및 치료용 약학조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of diabetes, comprising isoramnetine-3- O- β-D-glucoside represented by the following structural formula A isolated from the organic solvent soluble extract of perilla.

(A) (A)

이하 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 함초의 유기 용매 가용 추출물 및 이로부터 분리된 상기 구조식(A)의 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드는 하기와 같이 수득될 수 있다.Soluble extract of the organic solvent of the present invention of the present invention, and isoramnetine-3- O- β-D-glucoside of the formula (A) isolated therefrom can be obtained as follows.

본 발명의 함초 유기 용매 가용 추출물은 본 발명의 함초를 채집하여 건조하고 마쇄기로 분말화한 후, 함초 시료 중량의 약 2 내지 10배, 바람직하게는 약 3 내지 5배에 달하는 부피의 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등과 같은 유기 용매 또는 이들의 약 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합용매로, 바람직하게는 메탄올로실온에서 약 1일 내지 5주간, 바람직하게는 1주 내지 3주간 동안 환류 냉각 추출 등의 추출방법을 사용하여, 진공여과에 의해 상층액을 회수한 다음, 상기의 과정을 2 내지 5회, 바람직하게는 3회 반복 수행하여 상층액을 모으고 감압농축하여 함초 조추출물을 수득할 수 있다.The soluble organic solvent soluble extract of the present invention is collected, dried and pulverized with the crushed seaweed of the present invention, and then water, methanol having a volume of about 2 to 10 times, preferably about 3 to 5 times, the weight of the seaweed sample. , Organic solvents such as ethanol, butanol or the like, or a mixed solvent having a mixing ratio of about 1: 0.1 to 1:10, preferably at about 1 to 5 weeks, preferably 1 to 3 weeks at methanolosilone. The supernatant was recovered by vacuum filtration using an extraction method such as reflux cooling extraction, and then the above procedure was repeated 2 to 5 times, preferably 3 times, to collect the supernatant and concentrated under reduced pressure to obtain a crude seaweed extract. Can be obtained.

더욱 구체적으로는 상기 공정으로 수득된 함초 조추출물, 바람직하게는 함초 메탄올 추출물을 동량의 물로 현탁시킨 후 이 현탁액에 n-헥산, 디클로로에틸렌, 클로로포름 또는 에틸아세테이트와 같은 유기 용매로 수차례 반복하여 얻어진 상등액을 감압농축 및 건조하여 유기 용매 가용부를 얻고 남은 물층(하층부)에 다시 부탄올, 프로판올 또는 메탄올 등과 같은 유기 용매를 가하여 추출 분획함으로써 유기 용매 가용부를 수득할 수 있다.More specifically, the crude seaweed extract obtained by the above process, preferably the methanol extract, is obtained by suspending it with the same amount of water and then repeatedly repeated several times with an organic solvent such as n-hexane, dichloroethylene, chloroform or ethyl acetate. The supernatant can be concentrated under reduced pressure and dried to obtain an organic solvent soluble part, and an organic solvent soluble part can be obtained by extracting and fractionating an organic solvent such as butanol, propanol or methanol to the remaining water layer (lower layer part).

또한 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있다(Harborne J.B.,A guide to modern techniques of plant analysis, 3rd Ed. , pp.6-7, 1998).It is also possible to further carry out conventional fractionation processes (Harborne JB, A guide to modern techniques of plant analysis, 3rd Ed. , Pp . 6-7, 1998).

상기 유기 용매 가용 분획물중 활성이 가장 높은 에틸아세테이트 분획물을 전개 용매로서 디클로로에틸렌 및 메탄올의 혼합용매를 사용하여 컬럼 크로마토그래피를 반복 수행함으로써 여러 개의 소분획으로 분리한 후, 상기 소분획물들을 재결정 또는 기타의 컬럼 크로마토그래피를 통한 정제과정을 거쳐 본 발명의 구조식(A)의 화합물을 수득할 수 있다.The ethyl acetate acetate fraction having the highest activity among the soluble fractions of the organic solvent was separated into several small fractions by repeating column chromatography using a mixed solvent of dichloroethylene and methanol as a developing solvent, and then the small fractions were recrystallized or otherwise. Purification through column chromatography may yield the compound of formula (A) of the present invention.

또한 추가로 문헌에 기재된 통상의 플라보노이드 분리 공정을 통하여 플라보노이드 화합물을 분리할 수도 있다(Manguro LOA,et al.,Phytochemistry., 63, pp.497-502, 2003),(Rychlinska I,et al.,Acta Poloniae Pharmaceutica,59,pp.53-6, 2002).Flavonoid compounds can also be separated by further conventional flavonoid separation processes described in the literature (Manguro LOA, et al. , Phytochemistry., 63 , pp . 497-502, 2003), (Rychlinska I, et al. , Acta Poloniae Pharmaceutica , 59 , pp. 53-6, 2002).

본 발명은 상기의 제조공정으로 얻어진 함초 유기 용매 가용 추출물 또는 이로부터 분리된 상기 구조식(A)로 표기되는 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드를 유효성분으로 함유하는 약학조성물을 제공한다.The present invention provides a pharmaceutical composition containing isoramnetine-3- O- β-D-glucoside represented by Structural Formula (A) as an active ingredient, the soluble extract of the organic solvent obtained by the above-mentioned manufacturing process or separated therefrom. to provide.

상기와 같은 방법으로 얻어진 함초 추출물의 당뇨병에 대한 효과를 래트에서의 수정체 알도즈 환원 효소(Rat Lens Aldose Reductase)활성 및 솔비톨의 축적(Sorbitol Accumulation)에 대한 저해를 확인하는 실험을 통하여 본 발명의 추출물 및 화합물들의 당뇨병에 대한 저해활성을 확인할 수 있었다.The extract of the present invention through the experiment to confirm the effect on the effect of diabetes mellitus extract obtained by the above method on the effect of the lens Aldose Reductase (Rat Lens Aldose Reductase) activity and sorbitol accumulation (Sorbitol Accumulation) in rats And the inhibitory activity of the compounds on diabetes could be confirmed.

본 발명의 당뇨병의 예방 및 치료용 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물 또는 화합물을 0.1 내지 50 중량 %로 포함한다.The pharmaceutical composition for preventing and treating diabetes of the present invention comprises 0.1 to 50% by weight of the extract or compound based on the total weight of the composition.

본 발명의 추출물 또는 화합물을 포함하는 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.Pharmaceutical compositions comprising the extract or compound of the present invention may further comprise suitable carriers, excipients and diluents commonly used in the manufacture of pharmaceutical compositions.

본 발명의 추출물 또는 화합물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.Pharmaceutical dosage forms of the extracts or compounds of the present invention may be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, and may be used alone or in combination with other pharmaceutically active compounds, as well as in a suitable collection.

본 발명에 따른 추출물 또는 화합물을 포함하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 추출물 또는 화합물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨,말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트 (calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.The pharmaceutical composition comprising the extract or compound according to the present invention may be prepared according to a conventional method, respectively, in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, oral formulations, external preparations, suppositories, and sterile injectable solutions. It can be formulated and used in the form. Carriers, excipients and diluents that may be included in the composition comprising the extract or compound include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, Calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. When formulated, diluents or excipients such as fillers, extenders, binders, wetting agents, disintegrating agents, and surfactants are usually used. Solid preparations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and the solid preparations may include at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose in the extract. Or lactose, gelatin and the like. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used. Oral liquid preparations include suspensions, solvents, emulsions, and syrups, and may include various excipients, such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives, in addition to commonly used simple diluents such as water and liquid paraffin. . Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solvents, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, suppositories. As the non-aqueous solvent and suspending agent, propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate and the like can be used. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin butter, glycerogelatin and the like can be used.

본 발명의 추출물 또는 화합물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 추출물또는 화합물은 1일 0.0001 내지 100 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 100 mg/kg으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.Preferred dosages of the extracts or compounds of the present invention vary depending on the condition and weight of the patient, the extent of the disease, the form of the drug, the route of administration and the duration, and may be appropriately selected by those skilled in the art. However, for the desired effect, the extract or compound of the present invention is preferably administered at 0.0001 to 100 mg / kg, preferably at 0.001 to 100 mg / kg. Administration may be administered once a day or may be divided several times. The dosage does not limit the scope of the invention in any aspect.

본 발명의 추출물 또는 화합물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.The extracts or compounds of the present invention can be administered to mammals such as mice, mice, livestock, humans, etc. by various routes. All modes of administration can be expected, for example by oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or intracerebroventricular injection.

또한, 본 발명은 당뇨병의 예방 및 개선 효과를 나타내는 상기 함초 추출물 또는 화합물 및 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제를 포함하는 건강기능식품을 제공한다. 상기 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.In addition, the present invention provides a health functional food comprising the above-mentioned seaweed extract or compound and a food acceptable food supplement additive exhibiting a preventive and improving effect of diabetes. Examples of the food to which the extract can be added include various foods, beverages, gums, teas, vitamin complexes, and health functional foods.

또한, 당뇨병의 예방 및 개선 효과를 목적으로 식품 또는 음료에 첨가될 수 있다. 이 때, 식품 또는 음료 중의 상기 추출물 또는 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 내지 15 중량 %로 가할 수 있으며, 건강 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 내지 1 g의 비율로 가할 수 있다.It may also be added to foods or beverages for the purpose of preventing and improving diabetes. At this time, the amount of the extract or compound in the food or beverage may be added to 0.01 to 15% by weight of the total food weight, the health beverage composition is 0.02 to 5 g, preferably 0.3 to 1 g based on 100 ml Can be added.

본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 추출물 또는 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.The health functional beverage composition of the present invention is not particularly limited to other ingredients except for containing the extract or compound as essential ingredients in the indicated ratios, and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional ingredients, such as ordinary drinks. have. Examples of the above-mentioned natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose and the like; And conventional sugars such as polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As flavoring agents other than those mentioned above, natural flavoring agents (tauumatin, stevia extract (for example, rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used. The proportion of said natural carbohydrates is generally about 1-20 g, preferably about 5-12 g per 100 ml of the composition of the present invention.

상기 외에 본 발명의 추출물 또는 화합물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 추출물 또는 화합물들은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 추출물 또는 화합물 100 중량부 당 0 내지 약 20 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the above, the extracts or compounds of the present invention are various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors such as synthetic flavors and natural flavors, coloring and neutralizing agents (such as cheese, chocolate), pectic acid and salts thereof, alginic acid And salts thereof, organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like. In addition, the extracts or compounds of the present invention may contain flesh for the production of natural fruit juices and fruit juice beverages and vegetable beverages. These components can be used independently or in combination. The proportion of such additives is not so critical but is generally selected in the range of 0 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the extract or compound of the present invention.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following Examples and Experimental Examples.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.However, the following Examples and Experimental Examples are only illustrative of the present invention, and the content of the present invention is not limited by the following Experimental Examples.

참고예. 통계 처리Reference example. Statistical processing

모든 실험의 결과들은 평균 ± 표준편차로 나타내었고 통계 처리는 스튜던트 티-테스트(Student t-test)를 실시하여 p<0.05를 기준으로 유의성 여부를 판정하였다(*은 P<0.05, **는 P<0.01, ***는 P<0.001 로 대조군과 유의적으로 다름을 의미함).The results of all experiments were expressed as mean ± standard deviation, and statistical processing was performed by Student's t-test to determine the significance based on p <0.05 (* is P <0.05, ** is P <0.01, *** means P <0.001, which is significantly different from the control).

실시예 1. 함초의 유기 용매 가용 추출물 또는 이소람네틴-3-Example 1 Organic Solvent Soluble Extract or Isoramnetine-3- OO -β-D-글루코시드의 분리Isolation of -β-D-glucoside

1-1. 함초 물 추출물의 제조1-1. Preparation of Seaweed Water Extract

함초(300g)를 마쇄기로 갈아 분말화한 후, 물 1ℓ를 가하여 3회 반복하여 온침(heating)하여 추출한 다음, 감압 농축하여 함초 물 추출물 50g을 수득하였다.The grasswort (300g) was ground into a mill and powdered, and then, 1 L of water was added thereto, repeated three times, followed by heating, followed by extraction.

1-2. 함초 메탄올 추출물의 제조1-2. Preparation of Methanol Extract

함초(2㎏)를 마쇄기로 갈아 분말화한 후, 메탄올 5ℓ를 가하여 3회 반복하여 온침(heating)하여 추출한 다음, 감압 농축하여 함초 메탄올 추출물 215g을 수득하여 하기 실험예에서 시료로 사용하였다.After grinding the vinegar (2 kg) into a grinding mill and powdering, 5 L of methanol was added thereto, repeated extraction was performed by heating three times, followed by extraction under reduced pressure to obtain 215 g of methanol extract of ethanol, which was used as a sample in the following experimental example.

1-3. 함초 용매별 분획물의 제조1-3. Preparation of Fractions by Solvents

상기 실시예 1-2 단계에서 얻은 함초 메탄올 추출물(215g)을 물에 현탁시킨 후에, 각각 n-헥산, 디클로로에틸렌, 에틸아세테이트, n-부탄올, 물 순으로 극성이낮은 용매부터 극성이 높은 용매순으로 순차적으로 용매 분획하였다. 먼저 물에 현탁시킨 함초 메탄올 추출물에 n-헥산을 첨가하여 용해한 다음, 이를 분획여두에서 n-헥산층에 용해되는 성분만 분리해서 진공 건조하였다. 이 과정을 3회 반복 수행하여 헥산 분획물을 수득하였다(128g). 남은 수층에 디클로로에틸렌을 첨가하여 분획여두에서 디클로로에틸렌 층에 용해되는 성분만 분리해서 진공건조하였다. 이 과정을 3회 반복 수행하여 디클로로에틸렌 분획물을 수득하였으며(20g), 남은 수층에 에틸아세테이트를 첨가하여 분획여두에서 에틸아세테이트층에 용해되는 성분만 분리해서 진공 건조하였다. 이 과정을 3회 반복 수행하여 에틸아세테이트 분획물을 수득하였다(10g). 남은 수층에 n-부탄을 가하여 상기와 같은 방법으로 수행하여 n-부탄 분획물을 수득하였다(5g). 각 분획물을 하기 실험예에서 시료로 사용하였다.After the methanol extract (215 g) obtained in step 1-2 of the above-described method was suspended in water, the solvents were then polarized, followed by n-hexane, dichloroethylene, ethyl acetate, n-butanol, and water. Solvent fractionation sequentially. First, n-hexane was added to the methanol extract, which was suspended in water, and dissolved. Then, only components dissolved in the n-hexane layer were separated and dried under vacuum. This process was repeated three times to obtain a hexane fraction (128 g). Dichloroethylene was added to the remaining aqueous layer, and only the components dissolved in the dichloroethylene layer were separated and dried under vacuum. This process was repeated three times to obtain a dichloroethylene fraction (20 g), and ethyl acetate was added to the remaining aqueous layer, and only the components dissolved in the ethyl acetate layer were separated and dried under vacuum. This process was repeated three times to obtain an ethyl acetate fraction (10 g). N-butane was added to the remaining aqueous layer, and the n-butane fraction was obtained in the same manner as above (5 g). Each fraction was used as a sample in the following experimental example.

1-4. 함초로부터 이소람네틴-3-1-4. Isoramnetine-3- from seaweed OO -β-D-글루코시드의 분리Isolation of -β-D-glucoside

상기 실시예 1-3단계에서 얻은 에틸아세테이트 분획물을 하기와 같이 실리카겔 크로마토그래피를 수행하여 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드를 분리하였다. 즉, 컬럼에 실리카겔을 채우고 디클로로에틸렌과 평형을 맞춘 다음, 에틸아세테이트 분획물 20g을 로딩하였다. 이동상으로는 처음에는 디클로로에틸렌을 이용하여 유출시키다가 메탄올의 비율을 1%씩 증가시켰다. 메탄올의 비율이 10% 이후부터는 10%씩 증가시켜 100개의 분획으로 분리하였다. 얻어진 분획중 20 내지 30 소분획에서 가장 활성이 높은 경향이 있었고, 이들 소분획으로부터 유효성분을 확인하였으며,1H-NMR,13C-NMR 스펙트럼을 이용하여 분석한 결과 하기와 같은 물성치를 갖는 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드로 확인하였다.The ethyl acetate fractions obtained in Example 1-3 were subjected to silica gel chromatography to separate isoramnetine-3- O- β-D-glucoside. That is, the column was filled with silica gel, equilibrated with dichloroethylene, and 20 g of an ethyl acetate fraction was loaded. The mobile phase was first distilled off with dichloroethylene and increased the proportion of methanol by 1%. After the ratio of methanol was increased by 10% after 10% it was separated into 100 fractions. Among the fractions obtained, the activity tended to be the highest in the 20-30 subfractions, and the active ingredients were identified from these subfractions, and analyzed using 1 H-NMR and 13 C-NMR spectra. It was confirmed by raminetin-3- O- β-D-glucoside.

1H-NMR(400MHz, DMSO-d 6): δ12.61(1H, s, 50OH), 7.94(1H, d,J=2.0 Hz, H-2`), 7.49(1H, dd,J=8.4, 2.0Hz, H-6`), 6.91 (1H, d,J=8.4Hz, H-5`), 6.44(1H, d,J=2.0Hz, H-8), 6.20 (1H, d,J=2.0Hz, H-6), 5.57 (1H, dJ=7.4Hz, 글루코실 H-1``), 3.83(3H, s, -OCH3) 1 H-NMR (400 MHz, DMSO- d 6 ): δ 12.61 (1H, s, 50OH), 7.94 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2 ′), 7.49 (1H, dd, J = 8.4 , 2.0Hz, H-6`), 6.91 (1H, d, J = 8.4Hz, H-5`), 6.44 (1H, d, J = 2.0Hz, H-8), 6.20 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-6), 5.57 (1H, d J = 7.4 Hz, Glucosyl H-1``), 3.83 (3H, s, -OCH3)

13C-NMR (100MHz, DMSO-d6): δ177.4(C-4), 164.3 (C-7), 161.2 (C-5), 156.4 (C-2), 156.3 (C-9), 149.4 (C04`), 146.9 (C-3`), 133.0 (C-3), 122.0 (C-6`), 121.1 (C-1`), 115.2 (C-5`), 113.4 (C-2`), 104.0 (C-10), 100.8 (C-1``), 98.7 (C-6), 93.7 (C-8), 77.5 (C-3``), 76.4 (C-5``), 74.3 (C-2``), 69.8 (C-4``), 60.6 (C-6``), 55.7 (-OCH3) 13 C-NMR (100 MHz, DMSO-d 6 ): δ 177.4 (C-4), 164.3 (C-7), 161.2 (C-5), 156.4 (C-2), 156.3 (C-9), 149.4 (C04`), 146.9 (C-3`), 133.0 (C-3), 122.0 (C-6`), 121.1 (C-1`), 115.2 (C-5`), 113.4 (C-2 `), 104.0 (C-10), 100.8 (C-1``), 98.7 (C-6), 93.7 (C-8), 77.5 (C-3``), 76.4 (C-5``) , 74.3 (C-2``), 69.8 (C-4``), 60.6 (C-6``), 55.7 (-OCH 3 )

IR νmax(KBr): 3383 (OH), 1652 (C=O), 1055 (C-O) ㎝-1 IR ν max (KBr): 3383 (OH), 1652 (C = O), 1055 (CO) cm −1

FAB-MS:m/z479 [M + H]+ FAB-MS: m / z 479 [M + H] +

실험예 1. 시험관 내에서 알도즈 환원 효소 활성도 측정 실험Experimental Example 1. Experiment for measuring aldose reductase activity in vitro

상기 실시예 1로부터 얻어진 조추출물, 용매별 분획물 및 화합물들의 당뇨병에 대한 저해활성을 확인하기 위하여 문헌에 기재된 실험 과정을 변형하여 하기와같은 방법으로 실험을 수행하였다(Sato S,et al., Biochemical Pharmacology.,40, pp.1033-1042, 1992).In order to confirm the inhibitory activity against the crude extracts, solvent-specific fractions and compounds obtained in Example 1 against diabetes, the experiment was carried out by modifying the experimental procedure described in the literature (Sato S, et al., Biochemical). Pharmacology. , 40 , pp. 1033-1042, 1992).

1-1. 효소의 조제 및 활성 측정1-1. Preparation and Activity Measurement of Enzymes

알도즈 환원 효소는 무게 250-280g의 냉동 흰쥐로부터 제거된 수정체로서, 수정체 균질액은 문헌에 기재된 방법에 따라 준비하였고(Hayman S,et al., Journal of Biological Chemistry,240, pp.877-882), 효소는 6.5U/㎎의 특이 활성도를 가지는, 부분적으로 정제된 효소를 사용하였으며, 각각 1.0㎖로 나누어 -40℃에 저장하였다. 알도즈 환원효소에 대한 본 발명의 AR(aldose reductase) 저해실험에서, 기질은 D.L-글리세르알데히드(glyceraldehyde)를 사용하였으며, 효소에 대한 억제활성도는 4분 동안 340㎚에서 NADPH의 흡수가 감소하는 과정을 측정하는 분광학적 방법으로 측정하였다.Aldose reductase is a lens removed from frozen rats weighing 250-280 g. Lens homogenates were prepared according to the methods described in the literature (Hayman S, et al., Journal of Biological Chemistry , 240 , pp. 877-882). ), The enzyme was used partially purified enzyme having a specific activity of 6.5U / mg, each divided into 1.0ml and stored at -40 ℃. In the aldose reductase (AR) inhibition experiment of the present invention on aldose reductase, DL-glyceraldehyde (glyceraldehyde) was used as a substrate, the inhibitory activity for the enzyme is reduced absorption of NADPH at 340 nm for 4 minutes Measured by spectroscopic method to measure the process.

함초로부터 분리된 추출물과 개개 분획물들의 알도스 환원효소 억제효과는 기질인 D.L-글리세르알데히드에 대한 RLAR 효소에 의한 것으로 측정하였으며, RLAR 효소에서 실시예 1의 메탄올 추출물과 물 추출물들의 효소에 대한 저해율(%) 및 개개의 IC50의 값은 각각 표 1에 나타내었으며, 메탄올 추출물로부터 분리된 개개 분획물들의 저해율(%) 및 이들의 IC50의 값은 표 2에 나타내었다.The inhibitory effect of aldose reductase on the extracts and individual fractions from the seaweeds was determined by the RLAR enzyme on DL-glyceraldehyde as a substrate, and the inhibition rate of the methanol and water extracts of Example 1 on the enzyme of the RLAR enzyme The values of (%) and the individual IC 50 are shown in Table 1, respectively, and the inhibition rates (%) of the individual fractions separated from the methanol extract and their IC 50 values are shown in Table 2.

시 료sample 농도density 저해율Inhibition rate IC50 IC 50 (μg/㎖)(μg / ml) (%)(%) (μg/㎖)* (μg / mL) * 테트라메틸렌Tetramethylene 1010 94.794.7 0.510.51 글루타릭산Glutaric acid 1One 81.781.7 0.10.1 10.810.8 메탄올 추출물Methanol extract 1010 58.758.7 4.994.99 55 45.345.3 1One 38.938.9 물 추출물Water extract 100100 52.052.0 13.9013.90 1010 23.123.1 1One 10.810.8 *: 억제 비율은 대조군 대비 비율에 따라 백분율로 계산하였다 * Inhibition ratio was calculated as a percentage according to the ratio compared to the control.

시 료sample 농도density 저해율Inhibition rate IC50 IC 50 (μg/㎖)(μg / ml) (%)(%) (μg/㎖)* (μg / mL) * 테트라메틸렌Tetramethylene 1010 92.792.7 0.520.52 글루타릭산Glutaric acid 1One 68.768.7 0.10.1 19.819.8 n-헥산 분획물n-hexane fraction 1010 48.348.3 -- 디클로로에틸렌Dichloroethylene 1010 94.494.4 2.652.65 분획물Fraction 1One 12.112.1 0.50.5 1.01.0 에틸아세테이트Ethyl acetate 1010 93.693.6 0.260.26 분획물Fraction 1One 72.072.0 0.10.1 35.335.3 n-부탄올 분획물n-butanol fraction 1010 61.961.9 6.466.46 55 38.938.9 1One 22.322.3 *:억제 비율은 대조군 대비 비율에 따라 백분율로 계산하였다 *: Inhibition rate was calculated as a percentage according to the ratio compared to the control

표 1에 나타난 바와 같이, 함초의 메탄올 추출물과 물 추출물은 농도에 따라 효소에 대하여 각각 서로 다른 활성도를 나타내었다. 메탄올 추출물과 물 추출물의 IC50값은 각각 약 4.99㎍/㎖와 13.90㎍/㎖로 측정되는 반면, 종래에 알도즈 환원 효소에 대한 저해제로 잘 알려진 테트라메틸렌 글루타릭산(이하, TMG)의 IC50의 값은 0.51㎍/㎖로 나타났으며, 함초로부터 분리된 메탄올 추출물로부터 얻어진각각의 분획물들의 알도즈 환원 효소에 대한 저해 활성을 측정한 결과, 표 2에서 나타나는 바와 같이 에틸아세테이트 분획물의 IC50이 0.26㎍/㎖을 나타내어 알도즈 환원 효소에 대한 억제 활성이 가장 큰 것으로 확인되었다.As shown in Table 1, the methanol extract and the water extract of the seaweed showed different activities for the enzymes depending on the concentration. IC 50 values of methanol extract and water extract were measured at about 4.99 μg / ml and 13.90 μg / ml, respectively, whereas the IC of tetramethylene glutaric acid (TMG), which is well known as an inhibitor for aldose reductase, is known. The value of 50 was 0.51 µg / ml, and the inhibitory activity of the aldose reductase of each fraction obtained from the methanol extract isolated from seaweed was measured. As shown in Table 2, the IC 50 fraction of the ethyl acetate fraction was shown. 0.26 µg / ml was shown, indicating the largest inhibitory activity against aldose reductase.

이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드의 IC50값 (1.44μM)은 TMG의 IC50값 (1.68μM)과 유사한 저해 활성을 나타내었으므로 알도즈 환원 효소의 중요한 저해제로 보여진다.IC 50 value (1.44 μM) of isoramnetine-3- O- β-D-glucoside was shown to be an important inhibitor of aldose reductase because it showed similar inhibitory activity to IC 50 value of TMG (1.68 μM) .

구조 변화에 따른 효능을 비교하기 위하여, 이소람네틴-3-O-β-D-루티노시드 및 이소람네틴의 저해 활성을 비교 실험해 보았다. 3-O-모노사카라이드체의 플라보놀은 3번 위치에 수산화기를 가진 플라보놀 화합물보다 더 강한 저해 활성을 나타내었다. 또한 이소람네틴-3-O-글루코시드는 이소람네틴-3-O-루티노시드체보다 활성도가 더 높았다. 각 화합물들의 알도즈 환원 효소에 대한 저해효과를 실험한 결과를 표 3에서 기재하였다. 따라서 3-O-모노사카라이드체의 플라보놀이 AR 효소에 대하여 가장 저해 활성이 탁월함을 확인할 수 있었다.In order to compare the effects of structural changes, the inhibitory activity of isoramnetine-3- O- β-D-lutinoside and isoramnetine was compared. Flavonol of the 3- O -monosaccharide body showed stronger inhibitory activity than the flavonol compound having a hydroxyl group at position 3. In addition, isoramnetine-3- O -glucoside was more active than isoramnetine-3- O -lutinoside. Table 3 shows the results of experiments on the inhibitory effect of each compound on aldose reductase. Therefore, it was confirmed that the most inhibitory activity against flavonol AR enzyme of 3- O -monosaccharide.

시료sample 농도density 억제율Suppression rate IC50 IC 50 (μM)(μM) (%)(%) (μM)* (μM) * 테트라 메틸렌Tetramethylene 1010 79.179.1 1.681.68 글루타릭산Glutaric acid 1One 46.346.3 0.50.5 25.425.4 이소람네틴-Isoramnetine 1010 88.9888.98 1.441.44 3-O-β-D-3- O- β-D- 1One 46.0646.06 글리코시드Glycoside 0.50.5 25.6425.64 이소람네틴-Isoramnetine 1010 73.773.7 2.012.01 3-O-β-D-3- O- β-D- 55 58.258.2 루티노시드Lutinoside 1One 42.142.1 이소람네틴Isoramnetine 1010 68.268.2 3.483.48 55 53.153.1 1One 31.331.3 *: 억제 비율은 대조군 대비 비율에 따라 백분율로 계산하였다 * Inhibition ratio was calculated as a percentage according to the ratio compared to the control.

실험예 2. 동물 실험에서 당뇨 유발 래트의 알도즈 환원 효소 측정 실험Experimental Example 2 Aldose Reductase Determination in Diabetic-Induced Rats in Animal Experiments

본 실험에서 사용하는 실험동물로는 체중 250∼280 g의 SD계 수컷 흰쥐를 일주일 동안 습도 10%, 온도23±0.5℃로 유지되는 동물 사육장에서 명암은 12시간 간격으로 점등 및 소등하여 사육하였으며 먹이와 물은 자유롭게 섭취할 수 있도록 공급하였다. 0.05M 시트르산 (pH 4.5)으로 산성화시킨 인산 완충 염에 용해시킨 스트렙토조토신(streptozotocin, STZ, Sigma Co., USA) 정맥주사를 1회 투여하여 (85mg/Kg) 당뇨를 유발시켰다.The experimental animals used in this experiment were SD male rats weighing 250 to 280 g and were bred on and off at 12 hour intervals in the animal breeding ground where the humidity was maintained at 10% and 23 ± 0.5 ° C for one week. And water were supplied for free intake. Diabetes was induced by a single intravenous injection of streptozotocin (streptozotocin, STZ, Sigma Co., USA) dissolved in phosphate buffered salts acidified with 0.05 M citric acid (pH 4.5) (85 mg / Kg).

STZ를 투약한 후, 4, 7, 24시간째 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드 또는 에팔레스타트(ONO Co. Ltd.)를 각각 25와 50mg/kg의 투약량으로 위내 튜브를 통하여 래트에 주입하였다. 마지막 투여 후 3시간 뒤, 체액 샘플은 모으고 수정체와 좌골 신경을 떼어내었다. 혈장 포도당 수치는 통상적으로 사용되는 문헌에 기재된 포도당 산화 효소 방법을 기초로 하여 측정하였으며(Trinder P.,Annals of ClinicalBiochemistry, 6, pp.24-27, 1969), 헤모글로빈내의 글루코실화 헤모글로빈의 양은 문헌에 기재된 바와 같이 드라킨(Drabkin) 시약 키트 525를 사용하여 측정하였고(Drabkin DS,et al.,Journal of Biological Chemistry, 98, p.719, 1932), 쥐의 수정체, 좌골 신경과 적혈구 내의 솔비톨 함유량은 효소학적으로 측정하였다.Isoramnetine-3- at 4, 7, 24 hours after administration of STZO-β-D-glucoside or Epalestat (ONO Co. Ltd.) were injected into rats via intragastric tubes at dosages of 25 and 50 mg / kg, respectively. Three hours after the last dose, body fluid samples were collected and the lens and sciatic nerve removed. Plasma glucose levels were determined based on the glucose oxidase method described in commonly used literature (Trinder P.,Annals of Clinical Biochemistry, 6, pp.24-27, 1969), the amount of glucosylated hemoglobin in hemoglobin was measured using the Dragin reagent kit 525 as described in the literature (Drabkin DS,et al.,Journal of Biological Chemistry, 98, p.719, 1932). Sorbitol content in the lens, sciatic nerve and erythrocytes of rats was measured enzymatically.

동물 실험에서 함초로부터 나온 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드의 유효성을 확인하기 위해 STZ를 주입하여 고혈당을 유발시킨 래트의 수정체, 좌골 신경과 적혈구내에서의 포도당 축적의 효과를 실험하였다.To examine the effect of glucose accumulation in the lens, sciatic nerve and erythrocytes of rats induced with hyperglycemia by injecting STZ to confirm the efficacy of isorametine-3- O- β-D-glucoside from seaweed in animal experiments Experiment.

당뇨모델 래트에서 혈중 포도당의 수치는 일반 래트에 비하여 현저하게 상승되었으며, 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드의 투여는 STZ 주입 당뇨 쥐에서 현저한 감소를 보였다. 표 4에서는 STZ를 투여하여 당뇨를 유발한 쥐의 혈중 포도당 축적 실험에서 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드는 탁월한 저해 효과를 나타내었다.Blood glucose levels in the diabetic rats were markedly elevated compared to normal rats, and the administration of isoramnetine-3- O- β-D-glucoside was markedly reduced in STZ-injected diabetic rats. In Table 4, isoramnetine-3- O- β-D-glucoside showed an excellent inhibitory effect in blood glucose accumulation experiments of mice induced with diabetes mellitus by STZ administration.

처리process 혈중 포도당Blood glucose (g/ℓ)(g / ℓ) 비당뇨쥐Non-diabetic rat 189.67±19.42189.67 ± 19.42 당뇨쥐Diabetic rats 474.20±15.15474.20 ± 15.15 에팔레스타트Epalestat 413.75±20.60* 413.75 ± 20.60 * 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드Isolamnetin-3- O- β-D-glucoside 390.60±8.34** 390.60 ± 8.34 ** **P<0.01,*P<0.05 ** P <0.01, * P <0.05

실험예 3. 동물 실험에서 당뇨유발 쥐의 솔비톨 함유량 측정 실험Experimental Example 3. Measurement of sorbitol content in diabetic rats in animal experiments

상기 실시예 1로부터 얻어진 조추출물, 용매별 분획물 및 화합물의 당뇨병에 대한 저해활성을 확인하기 위하여 문헌에 기재된 바와 같은 효소학적 어세이법을 변형하여 솔비톨의 축적량을 측정하였다(Clements RS,et al.,Science,166, pp.1007-1008, 1969).In order to confirm the inhibitory activity of the crude extract, the solvent-specific fractions and the compound obtained in Example 1 against diabetes, the enzymatic assay as described in the literature was modified to measure the accumulation of sorbitol (Clements RS, et al. , Science , 166 , pp. 1007-1008, 1969).

0.5㎖의 조직의 단백질 제거 여과액에 0.05M의 글리신 1.0㎖을 포함하는 완충용액(pH 9.4), 0.2mM NAD와 솔비톨 탈수소 효소 0.64 U를 포함한 반응 혼합물을 넣고, NAD 또는 솔비톨 탈수소 효소를 넣지 않은 여과액과 동시에 실험을 수행하였다. NADH에 기인한 상대적 형광도는 여기 상태(366nm) 및 방출 파장(452nm)에서 각각 측정되었다.To 0.5 ml of tissue removal protein filtrate was added a reaction mixture containing 0.05 ml of glycine 1.0 ml (pH 9.4), 0.2 mM NAD and sorbitol dehydrogenase 0.64 U, without adding NAD or sorbitol dehydrogenase. The experiment was performed simultaneously with the filtrate. Relative fluorescence due to NADH was measured in excited state (366 nm) and emission wavelength (452 nm), respectively.

수정체, 좌골 신경과 적혈구내에서의 평균 솔비톨의 축적량은 도 1 내지 도 3에 나타내었다. 당뇨병에 걸린 래트의 수정체내의 솔비톨 축적량(2.01± 0.14 nmol/mg 건조중량)은 일반 래트의 축적량(0.94± 0.06 nmol/mg 건조중량)보다 높았다. 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드 또는 에팔레스타트를 투여한 경우, 수정체 내에서의 솔비톨의 축적량은 각각 34.83%와 32.84%까지 감소하였다. 당뇨병에 걸린 래트에서의 적혈구내의 솔비톨 축적량(309.59± 21.36 nmol/g Hb)은 보통 래트에서의 적혈구내의 솔비톨의 축적량(45.03± 4.78 nmol/g Hb)보다 훨씬 높았다. 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드 또는 에팔레스타트를 투여한 쥐에서 적혈구내의 솔비톨의 축적량은 각각 44.19%와 71.6%를 나타내었다. 좌골신경에서 당뇨병에 걸린 래트의 솔비톨 축적량은 일반적 수치(0.61 nmol/mg 건조중량)에서 증가된 수치(1.09 nmol/mg 건조중량)로 증가함을 확인할 수 있었고, 또한 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드 또는 에팔레스타트는 각각 21.80% 와 24.52%의 솔비톨 축적량을 나타내었다.Mean accumulation of sorbitol in the lens, sciatic nerve and erythrocytes is shown in FIGS. Sorbitol accumulation (2.01 ± 0.14 nmol / mg dry weight) in the lens of diabetic rats was higher than that of normal rats (0.94 ± 0.06 nmol / mg dry weight). When isoramnetine-3- O- β-D-glucoside or epalestat was administered, the accumulation of sorbitol in the lens decreased by 34.83% and 32.84%, respectively. Sorbitol accumulation (309.59 ± 21.36 nmol / g Hb) in erythrocytes in rats with diabetes was much higher than that of sorbitol in erythrocytes (45.03 ± 4.78 nmol / g Hb) in normal rats. Sorbitol accumulation in red blood cells was 44.19% and 71.6%, respectively, in rats treated with isoramnetin-3- O- β-D-glucoside or epalestat. Sorbitol accumulation in the sciatic nerve of a rat with diabetes has been able to check that the value generally increases as the value (1.09 nmol / mg dry weight) increase in (0.61 nmol / mg dry weight), and isopropyl person netin -3- O - β-D-glucoside or epalestat showed sorbitol accumulation of 21.80% and 24.52%, respectively.

하기에 본 발명의 추출물을 포함하는 약학조성물의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Hereinafter, an example of the preparation of a pharmaceutical composition including the extract of the present invention will be described, but the present invention is not intended to limit the present invention, but is intended to be described in detail.

제제예 1. 산제의 제조Formulation Example 1 Preparation of Powder

함초 추출물 분말 20 mgSeaweed Extract Powder 20 mg

유당 100 mgLactose 100 mg

탈크 10 mgTalc 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.The above ingredients are mixed and filled in an airtight cloth to prepare a powder.

제제예 2. 정제의 제조Formulation Example 2 Preparation of Tablet

함초 추출물 분말 10 mgSeaweed Extract Powder 10 mg

옥수수전분 100 mgCorn starch 100 mg

유당 100 mgLactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mg2 mg magnesium stearate

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.After mixing the above components, tablets are prepared by tableting according to a conventional method for preparing tablets.

제제예 3. 캅셀제의 제조Formulation Example 3 Preparation of Capsule

함초 추출물 분말 10 mgSeaweed Extract Powder 10 mg

결정성 셀룰로오스 3 mg3 mg of crystalline cellulose

락토오스 14.8 mgLactose 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mgMagnesium Stearate 0.2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.According to a conventional capsule preparation method, the above ingredients are mixed and filled into gelatin capsules to prepare capsules.

제제예 4. 주사제의 제조Formulation Example 4 Preparation of Injection

함초 추출물 분말 10 mgSeaweed Extract Powder 10 mg

만니톨 180 mgMannitol 180 mg

주사용 멸균 증류수 2974 mgSterile distilled water for injection 2974 mg

Na2HPO4,12H2O 26 mgNa 2 HPO 4, 12H 2 O 26 mg

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조한다.According to the conventional method for preparing an injection, the amount of the above ingredient is prepared per ampoule (2 ml).

제제예 5. 액제의 제조Formulation Example 5 Preparation of Liquid

이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드 20 mgIsolamnetin-3- O- β-D-glucoside 20 mg

이성화당 10 g10 g of isomerized sugar

만니톨 5 g5 g of mannitol

정제수 적량Purified water

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.After dissolving each component in purified water according to the usual method of preparing a liquid solution, adding lemon flavor appropriately, mixing the above components, adding purified water, adjusting the whole to 100 ml by adding purified water, and then filling into a brown bottle. The solution is prepared by sterilization.

제제예 6. 건강 음료의 제조Formulation Example 6 Preparation of Healthy Drink

이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드 100 ㎎Isolamnetine-3- O- β-D-glucoside 100 mg

비타민 C 15 g15 g of vitamin C

비타민 E(분말) 100 g100 g of vitamin E (powder)

젖산철 19.75 gIron lactate 19.75 g

산화아연 3.5 g3.5 g of zinc oxide

니코틴산아미드 3.5 gNicotinamide 3.5 g

비타민 A 0.2 g0.2 g of vitamin A

비타민 B10.25 g0.25 g of vitamin B 1

비타민 B20.3g0.3 g of vitamin B 2

물 정량Water quantification

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간동안 85℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2ℓ 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.After mixing the above components in accordance with a conventional healthy beverage production method, and stirred and heated at 85 ℃ for about 1 hour, the resulting solution is filtered and obtained in a sterilized 2 L container, sealed sterilization and then refrigerated and stored in the present invention For the preparation of healthy beverage compositions.

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.Although the composition ratio is mixed with a component suitable for a favorite beverage in a preferred embodiment, the composition ratio may be arbitrarily modified according to regional and ethnic preferences such as demand hierarchy, demand country, and usage.

상술한 바와 같이, 본 발명의 함초의 유기 용매 가용 추출물 또는 이로부터 분리된 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드는 스트렙토조토신 유도 고혈당 래트에서 수정체 알도즈 환원 효소 및 솔비톨 축적을 억제하는 효과를 나타내므로, 당뇨병의 예방 및 치료용 의약품 및 건강기능식품으로 유용하게 이용될 수 있다.As described above, the organic solvent soluble extract of the present invention or isorametine-3- O- β-D-glucoside isolated from the inhibitory effect of aldose reductase and sorbitol accumulation in streptozotocin-induced hyperglycemic rats Since it shows an effect, it can be usefully used as a medicine and health functional food for the prevention and treatment of diabetes.

Claims (7)

함초(Salicornia herbacea)의 디클로로에틸렌 또는 에틸아세테이트 가용 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 및 치료를 위한 약학조성물.A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of diabetes mellitus containing dichloroethylene or ethyl acetate soluble extract of Salicornia herbacea as an active ingredient. 삭제delete 삭제delete 함초로부터 분리된 이소람네틴-3-O-β-D-글루코시드를 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 및 치료를 위한 약학조성물.A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of diabetes mellitus, containing isoramnetine-3- O- β-D-glucoside isolated from seaweed. 삭제delete 삭제delete 삭제delete
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KR101731065B1 (en) * 2015-08-26 2017-05-02 주식회사 페이스플럭스 Method for preparing novel extract of salicornia herbacea having improved anti-diabetic efficacy and toxicity, and composition comprising the extract of salicornia herbacea

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