KR100380827B1 - 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액으로부터 열수 추출에 의한 이소플라본의 분리방법 - Google Patents

콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액으로부터 열수 추출에 의한 이소플라본의 분리방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 콩배아로부터 열수(熱水) 추출에 의해 이소플라본(isoflavone)을 간편하게 분리하는 방법과 이소플라본 중의 제니스테인(genistein) 유도체를 보다 많이 얻기 위해 콩배아와 두부 순물(waste water of the beancurd)을 혼합하여 이소플라본을 분리하는 방법에 관한 것으로서, 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부 순물의 혼합물을 각각 열수 추출하여 피에치(pH)를 조절한 다음 데칸타(decantor, 연속원심분리기)로 분리된 추출액을 비극성 혹은 약간 극성이 있는 흡착수지가 충진된 칼럼(column)을 통과시켜 이소플라본을 분리하는 방법으로서 종래의 방법에 비해 간단한 공정으로 고함량의 이소플라본과 이소플라본 중에서 제니스테인 유도체를 경제적으로 많이 얻을 수 있다.
본 발명은 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액을 각각 열수 추출공정, 추출액을 데칸타로 고속원심 분리하여 추출액 및 슬러지를 분리하는 분리공정, 분리추출액을 흡착수지가 충진된 칼럼을 통과시키는 흡착 공정, 수세 및 용해공정, 농축 및 건조공정으로 구성됨을 특징으로 하는 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부 순물의 혼합액으로부터 열수 추출에 의한 이소플라본의 분리방법이다.

Description

콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액으로부터 열수 추출에 의한 이소플라본의 분리방법{Separation Method of the Isoflavone by Water Extraction from Hypocoty of the Soybean seed and Mix the Hypoxotyl of soybean seed with Waste Water of the Beancurd}
본 발명은 콩배아로부터 열수(熱水) 추출에 의해 이소플라본을 간편하게 분리하는 방법과 이소플라본 중의 제니스테인(genistein) 유도체를 보다 많이 얻기 위해 콩배아와 두부 순물(waste water of the beancurd)을 혼합하여 이소플라본을 분리하는 방법에 관한 것으로서, 더욱 상세히는 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부 순물의 혼합액을 열수 추출하여 피에치(pH)를 조절한 다음 데칸타(decantor, 연속원심분리기)로 분리된 추출액을 비극성 혹은 약간 극성이 있는 흡착수지가 충진 된 칼럼(column)을 통과시켜 이소플라본을 분리하는 방법으로서 간단한 공정으로 고함량의 이소플라본과 이소플라본 중에서 제니스테인 유도체를 많이 경제적으로 얻을 수 있다.
식생활이 점차로 서구화되고 있는 현대 사회에서는 심혈관계 질환과 암 등 성인병이 사망의 주요 원인으로서, 그 주요인은 이들 서구화된 식품이 콜레스테롤과 포화지방산을 다량 함유하는데 기인하므로 이를 대체하기 위하여 콩과식품을 권장하고 있으며, 특히 콩이 비만증과 동맥경화, 당뇨, 암을 예방하는 것은 물론 항산화, 항균 효과까지 나타내는 등, 다양한 생리적 기능이 밝혀지면서 기능성 식품으로서의 콩의 가치가 날로 증대되고 있다. 한 예로 최근 대두문화권에 있는 아시아인과 대두 섭취가 극히 제한되어 있는 서양인들과의 비교 연구에서 전립선암, 유방암을 비롯한 여러 질환의 발병률에 현저한 차이가 있는 것이 최근의 여러 역학 조사 결과 식이 섭취가 만성 질병의 발병에 큰 영향을 미치고 있다는 사실이 밝혀지면서 대두 내의 생리 활성 물질에 대한 관심이 급격히 높아지고 있다. 콩의 이러한 특성은 주로 이소플라본, 단백질 분해효소 억제제, 엽산, 식이성섬유, 사포닌, 식물성 스테롤 및 페놀성 물질 등에 기인하는 것으로 여겨지고 있으며, 그 중에서도 체내 호르몬인 에스트로겐과 유사한 구조를 가진 이소플라본의 존재가 콩에서 규명되고, 이 물질이 피토에스트로겐(phytoestrogen)과 같은 생리적 기능이 있음이 밝혀졌다. 이소플라본(isoflavone)은 C15H10O2의 분자식을 지닌 화합물군으로 제니스테인(genistein), 다이드제인(daidzein), 글리시테인(glycitein) 및 그 글루코스배당체, 나아가서는 아세틸화체, 마로닐화체(malonyl)등 합계 12종류가 천연의 상태로 존재하고 있는 이성체로 알려져 있으며 주로 배당체의 형태로 존재하는 물질이다. 이들 이성체 중에서 제니스테인(genistein)과 다이드제인(daidzein)이 대부분인 것으로 알려져 있으며, 이 중 제니스테인은 일종의 식물성호르몬으로 여성호르몬인 에스트로겐과 유사한 역할을 하는 것으로 대두의 항암성 잠재능력에 가장 크게 기여하는 성분으로서 골다공증의 예방이나 여성의 폐경기 이후에 월경전 증후군을 예방하여 유방암과 같은 여성 암의 발병률을 저하시키는 것으로 알려져 있는데, 이러한 항암 작용은 주로 에스트로겐 길항작용, 세포활성주기 조절작용, 프로테인 티로신 키나제(protein tyrosine kinase)와 DNA 토포이소머라제(topoisomerase)II의 억제작용, 퀴논 리덕타제(quinone reductase)유도작용 및 항균, 항산화 효과에 작용하는 방식으로 이루어지며, 또한 콜레스테롤 저하 효과와 혈소판 생성 억제효과는 동맥성 질환의 억제와도 연계되며, 이들의 반 에스트로겐 효과는 이들의 구조에서 유래되는 성질로서 에스트로겐 리셉터와 경쟁적 역할을 한다. 또한 다이드제인은 뼈의 손실을 저해하는 것으로 밝혀졌다. 콩 중에는 제니스테인 외에도 다른 여러 항암성분이 포함되어 있으나, 유독 제니스테인에 관심을 더 끌고 있는 점은 첫째 지금까지의 연구 결과 제니스테인이 독성이 없으면서 항암효과가 매우 높다는 점이 확인되었고, 둘째는 다른 성분과는 달리 제니스테인은 식품 중에서 유일하게 콩에만 존재하기 때문에 콩 소비가 적은 서구인에 특히 문제가 되며, 셋째 발암 메커니즘의 상당부분을 차지하는 생육인자 의존성 신호전달체계에서 제니스테인의 역할이 규명되었다는 점을 들 수 있다. 이처럼 콩의 항암효과는 생화학적인 메커니즘을 기초로 확인된 사실이기 때문에 여러 분야에서 관심을 끌고 있는데 최근에는 의약분야에서도 상당한 관심을 표명하고 있다
한편, 상기에 서술되어 있는 바와 같이 콩 중에 함유되어 있는 유익성분들을 추출하는 종래의 방법으로서, 미국특허 제 5,679,806 호에서는 대두와 칡으로부터 에탄올이나 메탄올을 이용하여 추출, 정제하는 일련의 공정을 거쳐 이소플라본만을 추출해내는 기술을 제시하였으며, 미국특허 제 4,524,067 호에서는 대두로부터 메탄올을 용매로 하여 사포닌을 얻는 기술을 제안하였으며, 미국특허 제 4,428,876 호에서는 대두에 가성소다를 사용하여 추출한 후 일련의 공정을 거쳐 단백질, 올리고당, 사포닌, 이소플라본 등을 분리하는 방법을 제시하였다
그러나, 상기와 같은 방법들은 알코올과 같은 용매를 사용하거나 가성소다를 사용하여 추출 정제하기 때문에 여과, 농축, 희석, 중화와 같은 다수의 공정을 실시하여 제조 공정이 복잡하고 까다로우며, 또 재활용자원이 아닌 대두 자체를 그대로 사용함으로서 제조비용이 높아지고 알콜이나, 가성소다를 사용하므로 제조공정이 까다로운 문제점이 있었다.
본 발명은 전술한 문제점을 해소하기 위하여 일반적인 문제점인 콩가루에는 이소플라본의 함유량이 콩배아에 비해 적지만 제니스틴 활성이 크며 반면 콩배아에는 전체 이소플라본의 함유율이 콩가루에 비해 높지만 제니스틴 활성이 적은 문제점을 개선하여, 콩배아와 두부 순물을 적절한 비율로 혼합하여 제니스테인의 함량을 높임과 동시에 고함량의 이소플라본을 얻기 위해 열수 추출하는 방식의 분리방법을 선택함으로서 이들 두 가지 문제점을 동시에 해결하고 콩배아와 두부순물의 혼합액으로부터 데칸타를 거처 추출된 액을 단순한 흡착공정 및 제반공정을 사용하여 분리함으로서 간편하고 경제적이며 효과적인 이소플라본의 분리방법을 제공하는데 목적이 있다.
본 발명은 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액을 사용하여 열수 추출로서 피에이치(pH)를 조절한 뒤 데칸타를 통해 분리 추출된 액을 비극성 혹은 약간 극성이 있는 흡착수지가 충진된 칼럼을 통과하여 이소플라본을 분리한 액을 농축하여 진공건조기로 회수하는 방법에 관한 것으로서, 이하에서 본 발명을 구체적으로 설명한다.
콩배아 분말 40 내지 120 kg을 1.5톤(t) 탱크(tank)에서 물과 두부순물을 각각 0.5 내지 1.2톤(t)에 혼합한 뒤 열수 추출을 하기 위해 온도를 60℃ 내지 100℃에서 30분 내지 3시간정도 스팀 가열을 한 뒤, 추출한 액에다 60 내지 100℃에서 1 내지 5 노르말의 염산으로 피에치(pH)를 3.0 내지 10.0으로 조절한 뒤 바로 고속원심분리기인 데칸타로 R.P.M 6000 이상으로 고속회전 시켜 추출액과 슬러지를 분리하고 30℃ 내지 70℃에서 추출액을 수지인 HP20(DIAION사 제품) 300 내지 500리터 칼럼에 유속이 분당 1내지 4리터(ℓ) 되게 흘려보내 이소플라본이 수지에 흡착되도록 하였다. 흡착수지로는 약간의 극성을 지니고 있거나 비극성의 수지가 사용되며, 구체적으로는 아크릴릭 에스터(acrylic ester), 폴라메타크릴레이트(polymethacrylate)와 같은 아크릴계열의 수지나 폴리스티렌(polystyrene)과 같은 폴리아로마틱(polyaromatic)계열의 수지 등이 사용된다. 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액의 추출액을 각각 모두 통과시킨 칼럼에 증류수를 충분히 흘려보내 수지를 세척한 후, 70 내지 95% 에탄올을 흘러 보내 이소플라본을 회수하였다. 회수의 종료는 260nm 흡광도를 갖는 이소플라본을 기준물질로 하여 흡광도가 0.05 에서 0.1 사이를 기준으로 하였다. 회수된 에탄올 용출액을 온도 40 내지 80℃에서 감압 농축하여 농축물을 얻었으며, 이 농축물을 30 내지 80℃에서 감압 건조를 행하여 옅은 미황색의 이소플라본을 얻었다.
본 발명에서 콩배아와 두부 순물을 적절한 비율로 혼합하여 제니스테인의 함량을 높임과 동시에 고함량의 이소플라본을 얻기 위해 열수 추출하는 방식의 분리방법을 선택한 이유는, 콩 이소플라본은 콩 중에서도 특히 배아 부분에 많이 함유되어 있는 플라보노이드계 화합물로서, 콩과 콩배아 속에 있는 전체 이소플라본 함유량을 비교하면 콩 중에서는 약 0.3%가 함유한데 비해 배아 중엔 약 2.5% 내외가 함유하고 있어 콩배아를 원료로 사용하는 것이 훨씬 유리하지만 이소플라본의 함량이 높으면 높을수록 쓰거나 텁텁한 맛을 내는 단점이 있다. 비근한 예로서 두유공장에서는 두유 제조공정시 비록 전체 이소플라본의 함량이 많지만 이러한 쓴맛을 내게 하는 콩배아 부분을 제거한 콩을 사용하며 제거된 콩배아 부분은 단지 부산물로서 축산 사료로 사용되어지고 있는 실정이다. 이와 같이 콩의 배아는 식품 부산물인 관계로 원재료의 가격이 저렴하며 대두를 직접 원료로 사용하는 것에 비해 함량과 가격 면에서 매우 경쟁력을 지니고 있다. 하지만 제니스테인(genistein)의 함유량을 비교해 보면 한 개의 콩에 제니스테인은 8백53 ∼ 1천3백54 ㎍정도가 함유하고 있으며 다이드제인은 4백36 ∼ 1천1백68 ㎍로 콩 전체에는 다이드제인보다 제니스테인이 활성이 크다는 것이 확인되어지고 있다. 전술한 바와 같이 제니스테인이 대두의 항암성 잠재능력에 가장 크게 기여하는 성분으로 여겨지고 있으며, 또한 골다공증의 예방이나 여성의 폐경기 이후에 월경 전 증후군을 예방하여 유방암과 같은 여성 암의 발병률을 저해시키는 것으로 알려져 있기 때문에 제니스테인의 함유량이 많으면 많을수록 훨씬 나은 고단가의 이소플라본을 얻을 수 있다. 이렇듯 제니스테인의 함유량을 비교해 볼 때 콩 전체에서는 약 50% 함유하고 있는데 비해 콩배아 쪽에서는 약 10%만 함유하고 있어, 콩을 통째로 사용하는 것이 보다 많은 제니스테인을 얻는데는 유리하다고 볼 수 있다. 이러한 문제점을 보완하기 위해, 즉 콩배아는 식품부산물인 관계로 원재료의 가격이 저렴하며 대두를 직접 원료로 사용하는 것에 비해 가격 면에서 매우 경쟁력을 지니고 있으며 또한 고함량의 이소플라본을 얻을 수 있는 반면 콩만을 통째로 사용할 경우 전체 이소플라본의 함량은 콩배아에 비해 낮지만 보다 많은 제니스테인 유도체을 얻는데는 유리하다고 볼 수 있어 콩배아와 두부 순물을 적절한 비율로 혼합하여 제니스테인의 함량을 높임과 동시에 고함량의 이소플라본을 얻기 위해 열수 추출하는 방식의 분리방법을 선택한 것이다.
또한 추출용매로 물대신 두부순물을 선택하는 요인에는 두부순물은 대두를 사용하여 두부를 제조한 후 버려지는 두부의 폐액으로 폐자원의 재활용 측면과 분리방법의 간소화에 따른 저 단가화를 목적으로 선택한 것인데, 콩의 열수 추출과 두부제조 후 나온 이들 폐액에는 콩과 마찬가지로 고기능성의 특성을 지닌 성분들을 함유하고 있으며 제조방법에 따라 차이가 있지만 사포닌이 0.05%-0.5%, 이소플라본 0.01 ∼0.3%. 대두올리고당이 0.1∼3% 가량 함유되어 있다. 즉 두부순물은 콩가루와 마찬가지로 거의 비슷한 이소플라본의 함유량을 지니고 있으며 콩배아와 비슷하게 식품 폐액인 관계로 원재료의 가격이 저렴하며 대두를 직접 원료로 사용하는 것에 비해 가격 면에서 매우 경쟁력을 지니고 있으며 또한 고 함량의 이소플라본을 얻을 수 있기 때문에 두부순물을 선택한 것이다. 두부순물을 이용하여 이들 성분들을 분리해 내는 방법에 대해서는 이미 본 출원인의 1999.2.3.자 특허 출원번호(10-1999-0003594)의 "두부 폐액으로부터 사포닌과 이소플라본 및 올리고당의 분리방법" 에서 제시된바 있다.
이하에서 실시예를 들어 본 발명을 좀 더 구체적으로 설명한다
<실시예 1>
콩배아 분말 50 킬로그램(kg)을 1.5톤(t) 탱크(tank)에서 물 1.0톤(t)에 혼합한 뒤 열수 추출을 하기 위해 온도를 95℃에서 1시간정도 스팀 가열을 한 뒤, 추출한 액에다 80℃에서 4 노르말 염산으로 피에치를 4.0으로 조절한 뒤 바로 데칸타로 통과시켜 추출액과 슬러지를 분리한 후 55℃에서 바로 추출액을 수지인 HP20(DIAION사 제품) 400리터(ℓ) 칼럼에 유속을 분당 2리터가 되게 흘려보내 이소플라본이 수지에 흡착되도록 하였다. 한편 흡착수지에 흡착된 이소플라본은 1차적으로 칼럼에 증류수를 충분히 흘려보내 수지를 세척한 후, 에탄올(95%)을 흘러보내 이소플라본을 회수하였다. 회수의 종료는 260nm 흡광도를 갖는 이소플라본을 기준물질로 하여 흡광도가 0.05 에서 0.1 사이를 기준으로 하였다. 회수된 에탄올 용출액을 온도 60℃에서 감압 농축하여 농축물을 얻었으며, 이 농축물을 65℃에서 감압 건조를 하여 이소플라본 2.0킬로그램(kg)을 얻었다. 또한 콩배아로부터 분리한 이소플라본의 총 함량은 50%(중량비)이며, 분리한 이소플라본의 총 함량 중에서 제니스테인 유도체의 함량은 10%(중량비)을 지니고 있는 반면 두부 순물에서 분리한 이소플라본의 총 함량은 30%(중량비)이며, 분리한 이소플라본의 총 함량 중에서 제니스테인의 함량은 17% (중량비)이었다.
<실시예 2>
콩배아 분말 50킬로그램(kg)을 1.5톤(t) 탱크에서 물 1.0톤(t)에 혼합한 뒤 열수 추출을 하기 위해 온도를 95℃에서 1시간정도 스팀 가열을 한 뒤, 추출한 액에다 80℃에서 4 노르말 염산으로 피에치를 4.0으로 조절한 뒤 바로 데칸타로 통과시켜 추출액과 슬러지를 분리한 후 55℃에서 바로 추출액을 수지인 XAD-7(ROHM HASS제품) 400리터 칼럼에 유속을 분당 2리터가 되게 흘려보내 이소플라본이 수지에 흡착되도록 하였다. 한편 흡착수지에 흡착된 이소플라본은 1차적으로 칼럼에 증류수를 충분히 흘려보내 수지를 세척한 후, 에탄올(95%)을 흘러보내 이소플라본을 회수하였다. 회수의 종료는 260nm 흡광도를 갖는 이소플라본을 기준물질로 하여 흡광도가 0.05에서 0.1 사이를 기준으로 하였다. 회수된 에탄올 용출액을 온도 60℃에서 감압 농축하여 농축물을 얻었으며, 이 농축물을 65℃에서 감압 건조를 하여 이소플라본 2.2킬로그램(kg)을 얻었다. 또한 콩배아로부터 분리한 이소플라본의 총 함량은 55%(중량비)이며, 분리한 이소플라본의 총 함량 중에서 제니스테인 유도체의 함량은 12%(중량비)을 지니고 있는 반면 두부 순물에서 분리한 이소플라본의 총 함량은 30%(중량비)이며, 분리한 이소플라본의 총 함량 중에서 제니스테인의 함량은 17% (중량비)이었다.
<실시예 3>
콩배아 분말 50킬로그램(kg)을 1.5톤(t) 탱크에서 두부순물 1.0톤(t)에 혼합한 뒤 열수 추출을 하기 위해 온도를 95℃에서 1시간정도 스팀 가열을 한 뒤, 추출한 액에다 80℃에서 4 노르말 염산으로 피에치를 4.0으로 조절한 뒤 바로 데칸타로 통과시켜 추출액과 슬러지를 분리한 후 55℃에서 바로 추출액을 수지인 HP20(DIAION사)400리터 칼럼에 유속을 분당 2리터가 되게 흘려보내 이소플라본이 수지에 흡착되도록 하였다. 한편 흡착수지에 흡착된 이소플라본은 1차적으로 칼럼에 증류수를 충분히 흘려보내 수지를 세척한 후, 에탄올(95%)을 흘러보내 이소플라본을 회수하였다. 회수의 종료는 260nm 흡광도를 갖는 이소플라본을 기준물질로 하여 흡광도가 0.05에서 0.1사이를 기준으로 하였다. 회수된 에탄올 용출액을 온도 60℃에서 감압 농축하여 농축물을 얻었으며, 이 농축물을 65℃에서 감압 건조를하여 이소플라본 2.5킬로그램(kg)을 얻었다. 또한 콩배아와 두부 순물의 혼합물에서부터 분리한 이소플라본의 총 함량은 50%(중량비)이며, 이소플라본의 총 함량 중에서 제니스테인의 함량은 18%(중량비)을 지니고 있는 반면 두부 순물에서 분리한 이소플라본의 총 함량은 30%(중량비)이며, 이소플라본의 총 함량 중에서 제니스테인의 함량은 17% (중량비)이었다.
<실시예 4>
콩배아 분말 50킬로그램(kg)을 1.5톤(t) 탱크에서 두부순물 1.0톤(t)에 혼합한 뒤 열수 추출을 하기 위해 온도를 95℃에서 1시간정도 스팀 가열을 한 뒤, 추출한 액에다 80℃에서 4 노르말 염산으로 피에치를 4.0으로 조절한 뒤 바로 데칸타로 통과시켜 추출액과 슬러지를 분리한 후 55℃에서 바로 추출액을 수지인 XAD-7(ROHM HASS제품) 400리터 칼럼에 유속을 분당 2리터가 되게 흘려보내 이소플라본이 수지에 흡착되도록 하였다. 한편 흡착수지에 흡착된 이소플라본은 1차적으로 칼럼에 증류수를 충분히 흘려보내 수지를 세척한 후, 에탄올(95%)을 흘러보내 이소플라본을 회수하였다. 회수의 종료는 260nm 흡광도를 갖는 이소플라본을 기준물질로 하여 흡광도가 0.05에서 0.1사이를 기준으로 하였다. 회수된 에탄올 용출액을 온도 60℃에서 감압 농축하여 농축물을 얻었으며, 이 농축물을 65℃에서 감압 건조를 하여 이소플라본 3.0킬로그램(kg)을 얻었다. 또한 콩배아와 두부 순물의 혼합물에서부터 분리한 이소플라본의 총 함량은 55%(중량비)이며, 이소플라본의 총 함량 중에서 제니스테인의 함량은 20%(중량비)을 지니고 있는 반면 두부 순물에서 분리한 이소플라본의 총 함량은 30%(중량비)이며, 이소플라본의 총 함량 중에서 제니스테인의 함량은 17%(중량비) 이었다.
상기 실시 예에서 살펴본 바와 같이 본 발명에 의한 이소플라본을 분리방법은 기존의 분리 공정보다 간단하면서도 고함량의 이소플라본을 얻을 수 있으며 이소플라본 중에서 제니스테인 유도체를 보다 많이 얻을 수 있는 공정이 간편하고 경제적이며 자원재활용 효과가 있는 발명이다.

Claims (4)

  1. 두부 제조 공정 중 발생하는 폐액과 콩배아로부터 이소플라본을 분리하는 방법에 있어서, 콩배아 분말 40-120 kg을 추출용매로 물과 두부순물을 각각 500kg-1000kg로 혼합하여 60-100℃에서 30분-3시간 스팀 가열하는 제 1공정, 1공정에서 추출된 추출액에 60-100℃에서 1-5 N-염산으로 피에치(pH)를 3.0-10.0으로 조절하여 R.P.M 6000 이상으로 데칸타를 통과시켜 원심 분리하여 추출액과 슬러지를 분리하는 제 2공정, 제2공정에서 추출된 추출액을 30-70℃에서 흡착수지가 충진된 300-500ℓ칼럼에 유속을 분당 1-4ℓ되게 흘려보내 이소플라본을 수지에 흡착시키는 제 3공정, 콩배아 추출액을 통과 시킨 칼럼에 증류수로 세척하고 70-95% 에탄올을 통과시켜 에탄올 용출액을 회수하는 제 4공정, 4공정에서 회수된 용출액을 40-80℃에서 감압 농축하는 제 5공정 및 농축물을 30-80℃에서 감압 건조하는 제 6공정을 구비하여 이소플라본을 분리함을 특징으로 하는 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액으로부터 열수 추출에 의한 이소플라본의 분리방법
  2. 제 1항에 있어서, 흡착수지는 약간의 극성을 지니고 있거나 비극성의 수지로서 아크릴계열의 수지나 폴리아로마틱(polyaromatic)계열의 수지 중에서 선택된 것임을 특징으로 하는 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액으로부터 열수 추출에 의한 이소플라본의 분리방법
  3. 제 1항에 있어서, 에탄올 용출액의 회수의 종료는 260nm 흡광도를 갖는 이소플라본을 기준으로 흡광도 수치가 0.05에서 0.1사이를 기준으로 함을 특징으로 하는 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액으로부터 열수 추출에 의한 이소플라본의 분리방법
  4. 제 1항에 있어서, 콩배아의 추출용매로는 물과 두부 순물을 각각 선택함을 특징으로 하는 콩배아와 물의 혼합액과 콩배아와 두부순물의 혼합액으로부터 열수 추출에 의한 이소플라본의 분리방법
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