KR100311556B1

KR100311556B1 - 하이드록삼산유도체

Info

Publication number: KR100311556B1
Application number: KR1019930011598A
Authority: KR
Inventors: 마이클존브로드허스트; 폴앤토니브라운; 윌리암헨리존슨; 제프리로톤
Original assignee: 프리돌린 클라우스너, 롤란드 비. 보레르; 에프. 호프만-라 로슈 아게
Priority date: 1992-06-25
Filing date: 1993-06-24
Publication date: 2002-02-19
Also published as: GB9213473D0; HRP930980A2; MX9303672A; ZA934398B; UY23606A1; KR940005556A; BR9302642A; YU40293A; GB9307081D0; MY134743A; SI9300313A; TW279157B; PL299465A1

Abstract

본 발명은 퇴행성 관절 질환, 예를들어 류마티스성 관절염 및 골관절염의 억제 또는 예방, 또는 침습성 종양, 죽상동맥경화증 또는 다발성 경화증의 치료에 유용한 매트릭스 메탈로프로테이나제 억제제인 하기 일반식(I)의 하이드록삼산 유도체 및 그의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:

상기 식에서,

R¹은 C₁-C₇알킬을 나타내고;

R²는 수소, C₁-C₆알킬, 또는 일반식 -(CH₂)_n-아릴 또는 -(CH₂)_n-Het 의 기를 나타내고, 이때 n 은 1 내지 4를 나타내고, Het 는 (a) N 원자를 통해 결합되고, (b) 임의로, 결합하는 N 원자에 인접하지 않은 위치(들)에서 추가의 헤테로 원자(들)로서 N, O 및/또는 S 를 함유하고, (c) 결합하는 N 원자에 인접한 하나 또는 2 개의 C 원자가 옥소로 치환되고, (d) 임의로, 벤즈-융합되거나 또는 임의로 하나이상의 다른 탄소원자가 C₁-C₆알킬 또는 옥소로 치환되고/되거나 임의의 추가의 N 원자(들)가 C₁-C₆알킬로 치환되는, 5-또는 6-원의 N-헤테로사이클고리를 나타내고;

R³은 존재하는 임의의 작용기가 보호될 수도 있는 천연 또는 비-천연 α-아미노산의 특성화 기를 나타내나, 단 R³가 수소를 나타내지는 않고;

R⁴는 카복실, (C₁-C₆알콕시)카보닐, 카바모일 또는 (C₁-C₆알킬) 카바모일을 나타내고;

R⁵는 존재하는 임의의 작용기가 보호될 수도 있는 천연 α-아미노산의 특성화 기를 나타내고;

R⁶은 수소를 나타내거나; 또는

R⁴, R⁵및 R⁶은 각각 독립적으로 수소 또는 C₁-C₆알킬을 나타낸다.

상기 화합물은, 상응하는 신규한 벤질옥시아미노 화합물을 탈보호시키거나 또는 상응하는 신규한 아미노산 또는 그의 활성화된 유도체를 하이드록스아미드화시킴으로써 일반적으로 공지된 방법에 따라 제조될 수 있다.

Description

하이드록삼산 유도체

본 발명은 하이드록삼산 유도체에 관한 것이다.

본 발명에 의해 제공되는 하이드록삼산 유도체는 하기 일반식(I)의 화합물 및 그의 약학적으로 허용가능한 염이다:

상기 식에서,

R¹은 C₁-C₇알킬을 나타내고;

R²는 수소, C₁-C₆알킬, 또는 일반식 -(CH₂)_n-아릴 또는 -(CH₂)_n-Het 의 기를 나타내고, 이때 n 은 1 내지 4를 나타내고, Het 는 (a) N 원자를 통해 결합되고, (b) 임의로, 결합하는 N 원자에 인접하지 않은 위치(들)에서 추가의 헤테로 원자(들)로서 N, O 및/또는 S 를 함유하고, (c) 결합하는 N 원자에 인접한 C 원자중 하나 또는 둘다가 옥소로 치환되고, (d) 임의로, 벤즈-융합되거나 또는 임의로, 하나이상의 다른 탄소원자가 C₁-C₆알킬 또는 옥소로 치환되고/되거나 임의의 추가의 N 원자(들)가 C₁-C₆알킬로 치환되는, 5-또는 6-원의 N-헤테로사이클 고리를 나타내고;

R⁴는 카복실, (C₁-C₆알콕시)카보닐, 카바모일 또는 (C₁-C₆알킬)카바모일을 나타내고;

R⁶은 수소를 나타내거나; 또는

일반식(I)의 화합물은 귀중한 약리학적 성질을 갖는다. 특히, 상기 화합물은 매트릭스(matrix) 메탈로프로테이나제 억제제이며, 류마티스성 관절염 및 골관절염과 같은 퇴행성 관절 질환의 억제 또는 예방, 또는 침습성 종양, 죽상동맥경화증 또는 다발성 경화증의 치료에 사용될 수 있다.

본 발명의 목적은 일반식(I)의 화합물 및 그의 약학적으로 허용가능한 염 그 자체 및 치료학적으로 활성인 물질로서 사용하기 위한 이들의 용도; 상기 화합물 및 염의 제조방법; 상기 방법에 유용한 중간체: 상기 화합물 및 염을 함유하는 약제 및 상기 약제의 제조방법; 및 질병의 억제 또는 예방, 또는 건강의 증진, 특히 퇴행성 관절 질환의 억제 또는 예방, 또는 침습성 종양 또는 죽상동맥경화증의 치료에 있어서 상기 화합물 및 염의 용도, 또는 퇴행성 관절 질환의 억제 또는 예방, 또는 침습성 종양, 죽상동맥경화증 또는 다발성 경화증의 치료를 위한 약제의 제조를 위한 상기 화합물 및 염의 용도이다.

C₁-C₆또는 C₁-C₇의 알킬 기는 단독으로 또는 예를들어 바람직하게 탄소수 4 이하의 알콕시와 함께 직쇄 또는 측쇄, 예를 들어 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, 이소부틸, 2 급 부틸, 3 급 부틸 등일 수 있다. (C₁-C₆알콕시)카보닐 기의 예로는 메톡시카보닐, 에톡시카보닐, n-프로폭시카보닐, 이소프로폭시카보닐 등이 있다. (C₁-C₆알킬)카바모일 기는 예를들어 메틸카바모일, 에틸카바모일, n-프로필카바모일, 이소프로필카바모일 등일 수 있다 -(CH₂)_n-아릴 기의 아릴 잔기는 예를들어 할로겐, 즉 불소, 염소, 브롬 또는 요오드, C₁-C₆알킬, C₁-C₆알콕시, 트리플루오로메틸 등에 의해 임의로 치환되는 페닐 또는 나프틸일 수 있다.

천연 또는 비-천연 α-아미노산의 특성화 기는 일반식 H₂N-CH(R)-COOH 의 천연 또는 비-천연 α-아미노산에서 기 R 이다. 천연 α-아미노산으로부터 유도되는상기 특성화 기의 예로는 하기와 같은 화합물들이 있으며, 상응하는 천연 α-아미노산은 뒤의 괄호안에 나타내었다: 수소(글리신), 메틸(알라닌), 이소프로필(발린), 이소부틸(류신), 벤질(페닐알라닌), p-하이드록시벤질(티로신), 하이드록시메틸(세린), 머캅토메틸(시스테인), 1-하이드록시에틸(쓰레오닌), 2-메틸티오에틸(메티오닌), 카복시메틸(아스파르트산), 2-카복시에틸(글루탐산) 및 4-아미노부틸(리신), 비-천연 α-아미노산으로부터 유도되는 상기 특성화 기의 예로는 하기와 같은 화합물들이 있으며, 상응하는 비-천연 α-아미노산은 뒤의 괄호안에 나타내었다: 에틸(α-아미노-n-부티르산), n-프로필(α-아미노-n-펜탄산), n-부틸(α-아미노-n-헥산산), 3급 부틸(α-아미노-네오헥산산), 네오펜틸(α-아미노-네오헵탄산), n-헵틸(α-아미노-n-노난산), 사이클로헥실메틸(사이클로헥실알라닌), 페닐(α-아미노-페닐-아세트산), 2-페닐-에틸(호모페닐알라닌), 1-나프틸(α-아미노-1-나프틸아세트산), 2-나프틸(α-아미노-2-나프틸아세트산), 펜에틸(α-아미노-3-페닐부티르산), α-메틸벤질(β-메틸페닐알라닌), α,α-디메틸벤질(β,β-디메틸페닐알라닌) 등.

R³및 R⁵에 존재하는 임의의 작용성(즉, 반응성) 기는 펩티드 화학에 그 자체로 공지된 방식으로 보호될 수 있다. 예를들어, 아미노 기는 3 급 부톡시카보닐, 벤질옥시카보닐, 포르밀, 트리틸, 트리플루오로아세틸, 2-(비페닐일)이소프로폭시카보닐 또는 이소보르닐옥시카보닐 기에 의해, 또는 프탈이미도 기의 형태로 보호될 수 있다. 카복시 기는 예를들어 메틸, 에틸, 3 급 부틸, 벤질 또는 유사한 에스테르와 같이 쉽게 절단할 수 있는 에스테르 형태로 보호될 수 있다. 하이드록시 기는 메틸, 3 급 부틸, 벤질 또는 테트라하이드로피라닐 에테르와 같은 에테르의 형태, 또는 아세테이트와 같은 에스테르의 형태로 보호될 수 있다. 머캅토 기는 예를 들어 3 급 부틸, 벤질 또는 유사한 기에 의해 보호될 수 있다.

일반식(I)의 화합물은 알칼리 금속 수산화물(예: 수산화나트륨 및 수산화 칼륨), 알칼리 토금속 수산화물(예: 수산화 칼슘 및 수산화 마그네슘), 수산화 암모늄 등과 같은 염기와 약학적으로 허용가능한 염을 형성한다. 염기성인 일반식(I)의 화합물은 산과 약학적으로 허용가능한 염을 형성한다. 상기와 같은 염으로서, 할로겐화수소산(예: 염산 및 브롬화수소산), 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산과의 염 뿐만 아니라, 아세트산, 타르타르산, 숙신산, 푸마르산, 말레산, 말산, 살리실산, 시트르산, 메탄설폰산, p-톨루엔 설폰산 등과 같은 유기산과의 염이 고려된다.

일반식(I)의 화합물은 적어도 2 개의 비대칭 탄소원자를 함유하며, 따라서 광학적으로 활성인 에난티오머(enantiomer), 디아스테레오이성체(diastereoisomer) 또는 라세메이트(racemate)로서 존재할 수 있다. 본 발명은 상기 형태 모두를 포함하고자 한다.

상기 일반식(I)의 화합물에서, R¹은 바람직하게 에틸, 이소프로필, n-부틸 또는 n-헥실, 특히 에틸을 나타낸다.

R²는 바람직하게 수소, 메틸, 일반식 -(CH₂)_n- 아릴(여기에서 아릴 기는 페닐이다)의 기, 또는 일반식 -(CH₂)_n-Het(여기에서 n 은 상기 정의한 의미를 가지며, Het 는 추가의 헤테로 원자(들)로서 하나 또는 2 개의 N 원자, 하나의 N 원자 및 하나의 O 원자 또는 하나의 O 원자를 임의로 함유하는 5-또는 6-원 N-헤테로사이클 고리를 나타낸다)의 기를 나타낸다. Het 는 바람직하게 하기 일반식들의 기를 나타낸다:

상기 식들에서,

R⁷및 R⁸은 각각 수소를 나타내거나 또는 함께 추가의 결합 또는 융합된 벤젠 고리의 나머지를 나타내고;

R⁹는 수소 또는 C₁-C₆알킬을 나타내고;

X 는 -CO-, -CH₂-, -CH(C₁-C₆알킬)-, -C(C₁-C₆알킬)₂-, -NH-, -N(C₁-C₆알킬)- 또는 -O- 를 나타내고;

Y 는 -O-, -NH- 또는 -N(C₁-C₆알킬)을 나타낸다.

특히 바람직한 실시태양으로, Het 는 일반식(b)의 기, 특히 프탈이미도, 또는 (c)의 기, 특히 3-메틸-2,5-디옥소-1-이미다졸리디닐을 나타낸다.

기호 n 은, R²가 일반식 -(CH₂)_n-Het 의 기를 나타낼 때 1 을 나타내고, R²가 일반식 (CH₂)_n-아릴의 기를 나타낼 때 3 을 나타내는 것이 바람직하다.

R³은 바람직하게 메틸, 이소부틸, 3 급 부틸, 보호된 4-아미노부틸, 네오펜틸, n-헵틸, 사이클로헥실메틸, 벤질, α-메틸벤질 또는 α,α-디메틸벤질을 나타낸다. 바람직한 보호된 4-아미노부틸 기는 4-프탈이미도부틸이다.

바람직하게, R⁴는 (C₁-C₆알킬) 카바모일, 특히 메틸카바모일 또는 에틸카바모일을 나타내고, R⁵는 이소부틸을 나타내고, R⁶은 수소를 나타내거나; 또는 R⁴, R⁵및 R⁶은 각각 수소를 나타내거나; 또는 R⁴및 R⁵는 각각 수소를 나타내고, R⁶는 3 급 부틸을 나타내거나; 또는 R⁴, R⁵및 R⁶은 각각 메틸을 나타낸다.

상기 일반식(I)의 특히 바람직한 화합물은 하기와 같다:

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R 또는 S)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R 또는 S)-노닐숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R 또는 S)-헵틸-3(S)-메틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(프탈아미도메틸)-숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-노닐숙시닐]-L-3급부틸글리신 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(프탈이미도메틸)-숙시닐]-L-3 급 부틸글리신 메틸아미드 및

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(3-페닐프로필)-숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드.

상기 일반식(I)의 기타 관심있는 화합물의 예는 하기와 같다:

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-류신 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-류신 네오펜틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-알라닐-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-(N^ε-프탈로일)-리실-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-운데실숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닐-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-노날릴-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닌 3급 부틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-3급부틸글리신 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-호모페닐알라닐-L-류신 에틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-사이클로헥실알라닌 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-이소옥틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(D 또는 L)-β,β-디메틸 페닐알라닌 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(D 또는 L)-쓰레오-β-메틸페닐알라닌 메틸아미드,

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-DL-에르쓰로-β-메틸 페닐알라닌 메틸아미드 및

[4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-[(3-메틸-2,5-디옥소-1-이미다졸리디닐)메틸]숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드.

본 발명에 의해 제공된 방법에 따라, 상기 일반식(I)의 화합물 및 그의 약학적으로 허용가능한 염을,

(a) 하기 일반식(II)의 화합물을 접촉 수소화시키거나, 또는

(b) 하기 일반식(III)의 산 또는 그의 활성화된 에스테르를 하기 일반식(IV)의 화합물과 반응시키고, 필요에 따라, 반응 생성물중에 존재하는 임의의 디페닐(저급 알킬)실릴 기를 절단제거시키고,

필요에 따라, 수득된 일반식(I)의 화합물을 약학적으로 허용가능한 염으로 전환시킴으로써 제조한다:

상기 식들에서,

R¹, R², R³, R⁴, R⁵및 R⁶은 상기 정의한 바와 같고,

B_z는 벤질을 나타내고,

Z 는 수소, 트리(C₁-C₆알킬)실릴 또는 디페닐(C₁-C₆알킬)실릴을 나타낸다.

상기 방법의 실시태양(a)에 따른 일반식(II) 화합물의 접촉 수소화를 그 자체로 공지된 방식으로, 예를들어 귀금속 촉매의 존재하에 수소를 사용하여 불활성 유기 용매중에서 수행할 수 있다. 적합한 불활성 유기 용매의 예로는 C₁-C₆알칸올, 예를들어 메탄올, 에탄올 등이 있다. 상기 촉매는 예를들어 적합한 담체 물질상에 지지될 수 있는 백금, 팔라듐 또는 로듐 촉매일 수 있다. 팔라듐/탄소가 바람직한 촉매이다. 온도 및 압력은 중요하지 않지만, 편의상 접촉 수소화를 실온 및 대기압하에서 수행하는 것이 바람직하다.

상기 방법의 실시태양(b)에 따른 일반식(III)의 산 또는 그의 활성화된 에스테르와 일반식(IV)의 화합물과의 반응은 공지된 방식으로 수행할 수 있다. 예를 들어, 산이 사용되는 경우, 상기 반응은 편의상 약 0℃내지 약 실온에서 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드와 같은 축합제의 존재하에 하이드록시-벤조트리아졸을 사용하여 디메틸포름아미드 등과 같은 불활성 유기 용매중에서 수행할 수 있다. 일반식(III)의 산의 활성화된 에스테르를 사용하는 경우에는, 상기 반응을 편의상 약 0℃ 내지 실온에서 테트라하이드로푸란과 같은 불활성 유기 용매중에서 수행할 수 있다. 일반식(IV)의 바람직한 화합물은 Z 가 수소, 3 급부틸-디메틸실릴 또는 3급부틸디페닐실릴을 나타내는 화합물이다. Z 가 트리(C₁-C₆알킬)실릴을 나타내는 일반식(IV)의 화합물을 사용하는 경우에는, 상기 기를 반응 및 후처리중에 절단제거시키고, 일반식(I)의 화합물을 직접 수득한다. 한편, Z 가 디아릴(C₁-C₆알킬)실릴을 나타내는 일반식(IV)의 화합물을 사용하는 경우에는, 상기 기가 반응 생성물중에 남아있으며 이를 후속적으로 공지된 방식, 예를들어 플루오라이드 이온을 사용하여 절단제거시켜야 한다.

일반식(I)의 화합물을 염기로 처리하여 약학적으로 허용가능한 면으로 전환시킬 수 있으며, 일반식(I)의 염기성 화합물은 산으로 처리하여 약학적으로 허용가능한 염으로 전환시킬 수 있다. 상기와 같은 처리는 통상적인 방식으로 수행할 수 있다.

상기 방법에서 출발물질로서 사용되는 일반식(II) 및 (III)의 화합물들은 신규한 것이며, 이들은 또한 본 발명의 목적이다. 이들은 예를들어 하기 일반식(V)의 화합물을 하기 일반식(VI)의 화합물과 축합시키고, R⁹로 나타낸 보호기를 하기 일반식(VII)의 축합생성물로 부터 절단제거시켜 하기 일반식(IIIa)의 화합물을 수득하고, (i) 일반식(II)의 화합물이 필요한 경우, 임의로 R³⁰, R⁴⁰및 R⁵⁰에 존재하는 보호기(들)를 절단시키기 전 또는 후에, 일반식(IIIa)의 화합물을 O-벤질하이드록실아민과 축합시키거나, 또는 (ii) R³⁰, R⁴⁰및 R⁵⁰에 존재하는 작용성 기(들)가 보호되지 않은 일반식(III)의 화합물이 필요한 경우, 일반식(IIIa)의 화합물에 존재하는 보호기(들)를 절단제거시킴으로써 제조할 수 있다:

상기 식들에서,

R¹, R²및 R⁶는 상기 정의한 바와 같고,

R¹⁰은 보호기를 나타내고,

R³⁰, R⁴⁰및 R⁵⁰은 각각 R³, R⁴및 R⁵에 대해 상기 정의한 바와 같으나, 존재하는 임의의 작용기(들)가 보호된다.

일반식(V)에서 기호 R¹⁰은 임의의 통상적인 카복시 보호기; 예를들어 메틸, 에틸, 벤질 또는 바람직하게 3 급 부틸을 나타낼 수 있다.

일반식(V)의 화합물과 일반식(VI)의 화합물과의 축합은 펩티드 화학에 그 자체로서 공지된 방법에 따라; 예를들어 산 할라이드, 산아지드, 산 무수물, 활성화된 아미드, 혼합된 탄산 무수물 또는 활성화된 에스테르 방법에 따라 수행할 수 있다.

일반식(VII)의 축합 생성물로부터의 보호기 R¹⁰의 절단은 그 자체로 공지된 방법으로; 예를들어 가수분해에 의해서, 또는 3 급 부틸 보호기의 경우에, 무수 트리플루오로아세트산으로 처리함으로써 수행할 수 있다. R³⁰, R⁴⁰및 R⁵⁰에 존재하는 보호기(들)를 상기 기의 성질에 따라 부수적으로 절단제거시킬 수도 있음을 인지하게 될 것이다.

일반식(IIIa)의 화합물과 O-벤질하이드록실아민과의 반응은 통상적인 방식으로; 에를들어 일반식(V)의 화합물과 일반식(VI)의 화합물과의 축합과 관련하여 앞서 언급한 바와 같이 수행할 수 있다.

일반식(II) 및 (III)의 출발물질의 제조에 대한 상기 설명에서 R³⁰, R⁴⁰및 R⁵⁰에 존재하는 보호기의 절단은 펩티드 화학에 그 자체로서 공지된 방법에 따라; 예를들어 보호기의 성질에 따라 비누화, 무수 트리플루오로아세트산으로의 처리 또는 가수소분해에 의해 수행할 수 있다.

일반식(III)의 산을 그 자체로서 공지된 방법, 예를들어 디시클로헥실카보디이미드의 존재하에 N-하이드록시숙신이미드와 반응시켜 N-하이드록시숙신이미드 에스테르를 수득함으로써 상응하는 활성화된 에스테르로 전환시킬 수 있으며, 상기 에스테르는 또한 신규한 것이고 본 발명의 추가의 목적을 형성한다.

상술한 일반식(V) 및 (VI)의 화합물들이 공지된 화합물 또는 공지된 화합물의 동족체가 아닌 한은, 상기 화합물들을 이후의 실시예에 개시된 바와같이 수득하거나 또는 이와 유사하게 수득할 수 있다.

앞서 언급한 바와 같이, 본 발명에 의해 제공된 하이드록삼산 유도체는 매트릭스 메탈로프로테이나제 억제제이다. 이 효소들중 2 개, 즉 스트로멜리신과 젤라티나제에 대한 상기 활성을 하기에 개시된 시험방법을 사용하여 입증할 수 있다:

스트로멜리신(시험 A)

프로스트로멜리신 항체 친화성 크로마토그래피에 의해 인간 섬유아세포 배양물 배지로 부터 프로스트로멜리신을 정제한다[Ganja-Smith Z, Nagase H, Woessner J F Jr., Biochem J. 1989. vol 285(1), pp115-119]. 잠복성 프로-효소를 25℃에서 2 시간동안 트립신(5㎎/㎖)과 함께 배양함으로써 활성화시키고, 그후에 상기 트립신을 10 배 과량의 대두 트립신 억제제를 사용하여 불활성화시킨다. 상술한 하이드록삼산 유도체의 억제 활성을¹⁴C-아세틸화된 β-카제인 기질을 사용하여 측정한다. 스트로멜리신(5nM)을 10mM CaCl₂및 0.05% Brij(등록상표)를 함유하는 25mM 트리스 HCl 완충액(pH 7.5)중의 기질(4㎎/㎖)용액에 가한다. 수득된 용액을 37℃에서 20시간동안 배양시킨다. 상기 기질의 효소 절단을 45% 트리클로로아세트산을 가하여 종료시키고, 침전된 절단되지 않은 기질을 10,000g 에서 0.25 시간동안 원심분리시켜 펠렛화한다. 상등액을 취하고¹⁴C 활성을 액체 섬광 분광계로 측정한다. IC₅₀은 기질 절단을 효소 단독에 의해 성취되는 절단의 50% 까지 감소시키는 효소 절단시의 하이드록삼산 유도체의 농도이다.

스트로멜리신(시험 B)

잠복성 프로-효소(30㎍/㎖)를 25℃에서 30 분간 트립신(0.5㎍/㎖)과 함께 배양함으로써 활성화시키고, 이어서 상기 트립신을 20 배 과량의 트립신 억제제를 사용하여 불활성화시힌다. 상기 하이드록삼산 유도체의 억제 활성을 형광 펩티드 기질 (7-메톡시쿠마린-4-일)아세틸-L-프롤릴-L-류실-L-알라닐-L-노날릴-[3-(2,4-디니트로페닐)-L-2,3-디아미노프로필]-L-아르기닐-L-아르기닌을 사용하여 측정한다. 스트로멜리신(최종 농도 35ng/㎖)을 기질(4mM) 용액에 가하고 200mM NaCl, 10mM CaCl₂, 0.05% Brij35 및 5% 메탄올을 함유하는 50mM 트리스 HCl 완충액(pH 7.5)중의 하이드록실아민 유도체의 농도를 변화시킨다. 상기 용액을 37℃ 에서 16 시간동안 배양시킨다. 생성물 형성을 325nm 의 여기 파장 및 395nm 의 방출 파장을 사용하여 분광-형광계로 측정한다. IC₅₀은 기질 절단을 효소 단독에 의해 성취되는 절단의 50%까지 감소시키는 하이드록실아민 유도체의 농도이다.

젤라티나제(시험 C)

인간 호중구로부터 수득된 젤라티나제 B 에 대한 하이드록실아민 유도체의생체외 억제 활성을 하기 시험 방법을 사용하여 입증할 수 있다.

먼저 인간 호중구를 밀도 원심분리 및 덱스트란 침강에 의해 인간 혈액으로부터 분리시킴으로써 프로-젤라티나제 B 를 상기 호중구로부터 정제시킨다. 분리된 호중구를 0.05% 트리톤 X-100(등록상표)과 초음파 처리의 결합된 처리에 의해 분열시킨다. 이어서 세포 조직파편을 고속 원심분리에 의해 제거한다. 프로-젤라티나제 B 를 젤라틴 한천 흡착 크로마토그래피에 의해 상등액으로 부터 정제시키고, 결합된 프로-효소를 10% 디메틸 설폭사이드/완충액 세척물에 의해 상기 친화성 매트릭스로부터 용출시킨다. 정제된 물질의 분석에 의해 SDS-PAGE 로 가시화했을 때 95KDa 의 분자량을 갖는 단일 단백질 밴드가 나타났다. 젤라티니제 B 를 37℃에서 밤새 1mM p-아미노페닐수은 아세테이트와 함께 배양한다. 상기 하이드록실아민 유도체의 억제 활성을 상기 효소에 대한 합성 기질 N-아세틸-Pro-Gln-Gly-Leu-Leu-Gly 에틸 에스테르를 사용하여 측정한다. 젤라티나제를 1mM 염화 칼슘 및 공지된 농도의 하이드록실아민 유도체를 함유하는 50mM 보레이트 완충액(pH 7,5)중의 0.25mM 기질 용액에 가한다, 생성된 용액을 37℃에서 16 시간 동안 배양시킨다. 0.05%(w/v)의 피크릴설폰산을 함유하는 50% 수성 메탄올중의 2%(w/v)탄산수소 나트륨 용액을 동부피로 가하여 효소활성을 종료시킨다. 수득된 용액을 37℃에서 추가로 1 시간동안 배양시키고 이어서 반응을 종료시키고 1N 염산으로 산성화시켜 안정화시켰다. 형성된 트리니트로페닐-Leu-Leu-Gly 에틸 에스테르의 농도를 335nm 에서 분광 광도계로 측정한다. IC₅₀은 기질 절단을 효소 단독에 의해 성취되는 절단의50% 까지 감소시키는 하이드록실아민 유도체의 농도이다.

본 발명에 의해 제공된 대표적인 하이드록삼산 유도체를 사용하여 상술한 시험에서 수득된 결과를 하기 표에 집계했다:

별표 * 는 IC₅₀값이 효소의 상호 소모에 의해 제한되었음을 나타낸다.

화합물 A: [4-(N-하이드록시아미노)-2(R 또는 S)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드.

화합물 B: [4-(N-하이드록시아미노)-2(R 또는 S)-노닐숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드.

화합물 C: [4-(N-하이드록시아미노)-2(R 또는 S)-헵틸-3(S)-메틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드.

화합물 D: [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(프탈이미도메틸)숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드.

화합물 E: [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-노닐숙시닐]-L-3 급-부틸글리신메틸아미드.

화합물 F: [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닌메틸아미드.

화합물 G: [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-프탈이미도메틸)숙시닐]-3 급 부틸글리신 메틸아미드.

화합물 H: [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(3-페닐프로필)숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드.

일반식(I)의 화합물 및 그의 약학적으로 허용가능한 염을 약제로서, 예를들어 약학 제제 형태로 사용할 수 있다. 상기 약학제제를 경구, 예를들어 정제, 코팅 정제, 당의정, 경질 및 연질 젤라틴캡슐, 액제, 유화제 또는 현탁제의 형태로 투여할 수 있다. 그러나, 또한 직장, 예를들어 좌제의 형태로, 또는 비경구, 예를들어 주사 액제의 형태로 투여할 수도 있다.

약학 제제의 제조를 위해서, 일반식(I)의 화합물 및 그의 약학적으로 허용가능한 염을 치료학적으로 불활성인 무기 또는 유기 담체와 배합시킬 수 있다. 락토즈, 옥수수 전분 또는 그의 유도체, 활석, 스테아르산 또는 그의 염을 예를들어, 정제, 코팅 정제, 당의정 및 경질 젤라틴 캡슐에 대한 담체로서 사용할 수 있다. 연질 젤라틴 캡슐에 대한 적합한 담체의 예로는 식물성 오일, 왁스, 지방, 반-고체 및 액체 플리올 등이 있다. 그러나, 활성 성분의 성질에 따라, 연질 젤라틴 캡슐의 경우에는 일반적으로 담체가 필요하지 않다. 액제 및 시럽의 제조에 적합한 담체의 예로는 물, 폴리올, 사카로즈, 전화당, 글루코즈 등이 있다. 주사 액제의 제조에적합한 담체의 예로는 물, 알콜, 폴리올, 글리세린, 식물성 오일 등이 있다. 좌제의 제조에 적합한 담체는 천연 및 경화 오일, 왁스, 지방, 반-액체 폴리올 등이다.

약학 제제는 또한 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 감미제, 착색제, 풍미제, 삼투압 조절용 염, 완충제, 코팅제 또는 산화방지제를 함유할 수 있다.

일반식(I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염 및 치료학적으로 허용가능한 담체를 함유하는 약제 뿐만 아니라, 이러한 약제의 제조방법이 또한 본 발명의 목적이다, 이 방법은 일반식(I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염을 치료학적으로 불활성인 담체 물질과 혼합하고, 이 혼합물을 생약 투여 형태로 만드는 것을 포함한다.

앞서 언급한 바와 같이, 일반식(I)의 화합물 및 그의 약학적으로 허용가능한 염을 질병의 억제 또는 예방, 특히 퇴행성 관절질환의 억제 또는 예방, 또는 침습성 종양, 죽상동맥경화증 또는 다발성 경화증의 치료에 사용할 수 있다. 투여량은 광범위하게 변화시킬 수 있으며, 물론, 각각의 특별한 경우에 개별적인 필요 조건에 따라 조절될 것이다. 일반적으로 성인에게 투여하는 경우, 약 5mg 내지 약 30mg, 바람직하게 약 10mg 내지 약 15mg 의 1 일 투여량이 적합하지만, 적당하다면 상한선을 초과할 수도 있다. 상기 1 일 투여량을 단일 용량 또는 분할 용량으로 투여할 수 있다,

하기 실시예들은 본 발명을 예시한다. 생성물의 구조는 NMR 분광분석법 및 질량 분광분석법으로 확인한다. 박층 크로마토그래피 시스템의 조성은 하기와 같다:

시스템 A : 클로로포름 : 메탄올 : 아세트산 : 물 = 120:15:3:2;

시스템 B : 클로로포름 : 메탄올 : 아세트산 : 물 = 240:24:3:2;

또한, 모든 온도는 섭씨로 나타낸다.

실시예 1

메탄올 10㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(R 또는 S)-헵틸-숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(이성체 1) 0.10g (0.17 밀리몰)을 1 시간동안 5% 팔라듐/탄소 0,05g 의 존재하에서 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고, 잔사를 디에틸 에테르로 세척하고 진공하에서 건조시켜 흡습성 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2-(R 또는 S)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드 0.083g(98%)을 수득한다; Rf(시스템 A) 0.54; MS(M+H)⁺485.

C₂₅H₄₈N₄O₅O.6H₂O 에 대한 원소분석:

계산치 : C, 60.60; H, 10.01; N, 11.31%.

실측치 : C, 60.62; H, 9.75; N, 11.39%.

출발물질로서 사용된 [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(R 또는 S)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드를 하기와 같이 제조한다:

(A) DL-α-아미노-노난산 25.95g(0.15 몰)을 40℃로 가온시키면서 아세트산 900㎖에 용해시킨다. 아질산 나트륨 20.7g(0.3 몰)을, 상기 아질산 나트륨의 약 ⅓을 가한 후 열원을 제거하고, 6 시간에 걸쳐 나누어 가한다. 혼합물을 16 시간동안 실온에서 교반하고, 증발시키고, 물을 가하고, 수득된 오일을 디에틸 에테르(2 x200㎖)로 추출한다. 합한 에테르 추출물을 무수 황산 나트륨상에서 건조시키고 증발시켜 등명한 갈색 오일 31.9g 을 수득한다. 이 오일을 메탄올 150㎖에 용해시키고, 물 150㎖중의 수산화 나트륨 18g 용액을 가하고 혼합물을 2 시간동안 실온에서 교반한다. 메탄올을 증발시키고, 물을 가하고, 용액을 농염산 38㎖로 산성화시킨다. 생성물을 디에틸에테르(2 x 150㎖)로 추출하고, 추출물을 황산 마그네슘 상에서 건조시키고 증발시켜 고형물을 수득한다. 60 내지 80°석유 에테르 120㎖로부터 재결정시켜 융점 67 내지 69°의 2(RS)-하이드록시노난산 20.58g(79%)을 수득한다.

(B) 2(RS)-하이드록시노난산 21.4g(0.123 몰)을 에틸 아세테이트 240㎖에 용해시킨다. 트리에틸아민 17.3㎖(0.123 몰) 및 벤질 브로마이드 14.8㎖(0.123 몰)을 가하고 혼합물을 3 시간동안 가열환류시킨다. 혼합물을 냉각시키고, 여과하고, 2M 염산, 물 및 5% 탄산수소 나트륨으로 세척하고, 이어서 무수 황산 마그네슘상에서 건조시킨다, 용매를 증발시켜 오일로서 벤질 2(RS)-하이드록시노나노에이트 25.4g(78%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트/헥산 1:1) 0.68.

(C) 무수 디클로로메탄 150㎖중의 벤질 2(RS)-하이드록시노나노에이트 24.3g(92 밀리몰) 및 피리딘 8.9㎖(110 밀리몰) 용액을 0.5 시간에 걸쳐 교반하면서 0°에서 무수 디클로로메탄 200㎖중의 트리플루오로메탄설폰산 무수물 18.6㎖(110 밀리몰) 용액에 가한다. 혼합물을 0°에서 추가로 1 시간동안 교반한다. 무수 디클로로메탄 100㎖중의 트리플루오로메탄설폰산 무수물 7.7㎖(46 밀리몰)용액 및 피리딘 3.7㎖(46밀리몰)을 가한다. 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고, 물(2 x 100㎖)로 세척하고, 황산 마그네슘상에 건조시키고 증발시켜 오일을수득한다. 에틸 아세테이트/헥산(1:9)으로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 벤질 2(RS)-트리플루오로메탄설포닐옥시노나노에이트 26.7g(73%)을 수득한다: Rf(헥산/에틸 아세테이트 3:1) 0.66.

(D) 무수 디클로로메탄 100㎖중의 벤질 Z(RS)-트리플루오로메탄 설포닐옥시노나노에이트 26.5g(67 밀리몰) 용액을 0°에서 무수 디메틸포름아미드 170㎖중의 벤질 3급 부틸 말로네이트 16.75g(67 밀리몰) 및 80% 수소화 나트륨 2.11g(70 밀리몰)의 현탁액에 적가한다. 혼합물을 0°에서 2 시간동안 교반하고, 실온에서 16 시간동안 교반하고, 디클로로메탄으로 희석하고, 물, 5% 탄산 수소나트륨 용액 및 염화나트륨 포화 용액으로 연속 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시켜 디벤질 3- 3급 부톡시-카보닐-2(RS)-헵틸숙시네이트를 함유하는 오일(34.6g)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트/헥산 3:1) 0.49. 오일을 이소프로판을 540㎖에 용해시키고 5% 팔라듐/탄소 0.5g 의 존재하에서 2 시간동안 수소화시킨다, 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고, 톨루엔을 가하고, 혼합물을 증발시켜 미량의 이소프로판올을 제거한다. 틀루엔 400㎖ 및 트리에틸아민 9.1㎖(65 밀리몰)중의 잔사(27.8g)를 2 시간동안 환류시키고, 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시킨다. 용액을 0.5M 염산(2 x 80㎖) 및 물로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고, 증발시켜 4-3급 부틸 수소 2(RS)-헵틸숙시네이트 17.55g(96%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트) 0.63; MS: (M+H)⁺273.

(E) N-3 급 부톡시카보닐-L-류실-L-류신 에틸 아미드 1.5g (4 밀리몰)을 에틸 아세테이트중의 4M 염화 수소 20㎖에 용해시키고, 실온에서 0.75 시간동안 교반하고, 증발시키고 잔사를 진공하에서 건조시킨다. 무수 디메틸포름아미드 10㎖중의 잔사를 0°에서 N-에틸모르폴린 0.51㎖(4 밀리몰), 디클로로메탄 5㎖중의 4-3급 부틸수소 2(RS)-헵틸숙시네이트 1.1g(4 밀리몰) 용액, 하이드록시벤조트리아졸 0.82g(6 밀리몰) 및 디사이클로헥실카보디이미드 0.92g(4.4밀리몰)으로 연속 처리한다. 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고 실온에서 16 시간동안 교반한다. 몇 방울의 2-디메틸아미노에틸아민을 가하고, 현탁액을 0°로 3 시간동안 냉각시키고, 여과하고 증발시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트에 흡수시키고, 5% 시트르산 용액, 물, 5% 탄산 수소 나트륨 용액 및 염화 나트륨 포화 용액으로 연속 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 에틸 아세테이트/헥산(2:1)으로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 백색 고체로서 [4-3 급 부톡시 2(RS)-헵틸-숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드 1.5g(71%)을 수득한다; Rf(디클로로메탄/메탄올 19:1) 0.3; MS:(M+H)⁺526.

(F) [4-3급 부톡시 2(RS)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드 0.8g(1.5밀리몰)을 트리플루오로아세트산 15㎖에 용해시키고 용액을 2 시간동안 교반하고 증발시킨다, 잔사를 톨루엔으로 3 회 증발시키고, 이어서 무수 디클로로메탄 10㎖에 용해시키고 0°로 냉각시킨다. 피리딘 0.37㎖(4.5 밀리몰) 및 디(1-벤조트리아졸릴)카보네이트(70%) 0.64g(1.5 밀리몰)을 가하고 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반한다, O-벤질-하이드록실아민 0.22㎖(1.8 밀리몰)을 가하고 혼합물을 0℃에서 1시간 및 실온에서 16 시간동안 교반한다. 생성된 현탁액을 여과하고, 고형물을 디클로로메탄, 5% 탄산수소나트륨 용액, 물, 2M 염산 및 물로 연속 세척하고, 이어서 진공하에서 건조시킨다. 메탄올/디클로로메탄(1:19)으로 용출시키면서 실라카겔상에서 크로마토그래피시켜 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R 또는 S)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아민(이성체 1) 0.21g(24%)을 수득한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.21; MS(M+H)⁺575; hplc(고속 액체 크로마토그래피)(ODS 역상, 60% 아세토니트릴/트리에틸암모늄 포스페이트 완충액(pH 2.5)으로 용출) Rt 6.4 분.

디클로로메탄 여액을 5% 탄산 수소 나트륨 용액, 2M 염산, 5% 탄산 수소 나트륨 용액 및 염화 나트륨 포화 용액으로 연속 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 메탄올/디클로로메탄(1:40)으로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 이성체들의 혼합물로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(R 또는 S)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드 0.42g(49%)을 수득한다. Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.20; MS: (M+H)⁺575; hplc(ODS 역상, 60% 아세토니트릴/트리에틸암모늄 포스페이트 완충액 (pH 2.5)으로 용출) Rt 6.4 및 11.3 분; 이성체 1/이성체 2 의 비=1:3.7.

C₃₂H₅₄N₄O₅(574.81)에 대한 분석

계산치: C, 66.87; H, 9.47; N, 9.75%

실측치: C, 66.51; H, 9.41; N, 9.68%

실시예 2

메탄올 10㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(RS)-헵틸숙시닐]-L-류신 메틸아미드 0.5g (1.12 밀리몰)을 5% 팔라듐/탄소 0.01g 의 존재하에서 2 시간동안 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고, 잔사를 진공하에서 건조시켜 백색 분말로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2-(RS)-헵틸숙시닐]-L-류신 메틸아미드 0.36g (90%)을 수득한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.47 및 0.39; MS: (M+H)⁺358.

C₁₈H₃₅N₃O₄(357.50)에 대한 분석

계산치: C, 60.48; H, 9.87; N, 11.75%

실측치: C, 60.71; H, 9.93; N, 11.34%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

(A) 1M 염산 3.7㎖ 을 함유하는 메탄올 20㎖중의 벤질옥시카보닐-L-류신 메틸아미드 1.08g 을 2 시간동안 5% 팔라듐/탄소 0.05g의 존재하에 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고 잔사를 톨루엔을 사용하여 재증발시키고 이어서 진공하에서 건조시킨다. 잔사를 디메틸포름아미드 10㎖에 흡수시키고, 0°로 냉각시키고, N-에틸모르폴린 0.5㎖(3.9 밀리몰)로 중화시킨다. 디메틸포름아미드 20㎖중의 4-3급 부틸 수소 2(RS)-헵틸숙시네이트 1.01g(3.7 밀리몰) 용액을 가한 다음, 하이드록시벤조트리아졸 0.6g(4.4 밀리몰) 및 디사이클로헥실카보디이미드 0.84g(4.08 밀리몰)을 가한다. 혼합물을 0°에서 1 시간 및 실온에서 16 시간동안 교반하고 이어서 증발시킨다. 잔사를 디클로로메탄에 흡수시키고, 여과하고, 여액을 2 회 분취량의 5% 탄산 수소 나트륨 용액, 물, 0.5M 염산 및 물로 연속 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시켜 오일을 수득한다. 메탄올/디클로로메탄(3:97)으로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 오일로서 [3급 부톡시 2(RS)-헵틸숙시닐]-L-류신 메틸아미드 0.99g(67%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트) 0.47 및 0.55; MS: (M+H)⁺399.

(B) [3 급 부톡시 2(RS)-헵틸숙시닐]-L-류신 메틸아미드 0.96g(2.4 밀리몰)을 트리플루오로아세트산 20㎖에 용해시키고, 실온에서 2 시간동안 교반하고 증발시킨다. 잔사를 톨루엔을 사용하여 3 회 증발시키고, 이어서 디메틸포름아미드 10㎖에 용해시키고 0°로 냉각시킨다. 용액을 N-에틸모르폴린 0.61㎖(4.8 밀리몰)을 가하여 중화시킨다. 하이드록시벤조트리아졸 0.39g(2.89밀리몰) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카보디이미드 하이드로클로라이드 0.57g(2.97 밀리몰)을 가하고 용액을 0°에서 1 시간동안 교반한다. 디클로로메탄 5㎖중의 O-벤질하이드록실아민 0.35g(2.8 밀리몰) 용액을 가하고, 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고, 실온에서 밤새 교반하고, 이어서 증발시킨다. 오일을 5% 탄산 수소 나트륨과 디클로로메탄사이에 분배시킨다. 유기층을 물, 2M 염산 및 염화 나트륨 포화 용액으로 연속 세척하고, 황산 마그네숨상에서 건조시키고 증발시켜 고형물을 수득한다. 메탄올/헥산(1:9)으로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 백색 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(RS)-헵틸-숙시닐]-L-류신 메틸아미드 0.56g (52%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트) 0.24 및 0.36; MS:(M+H)⁺448.

실시예 3

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(RS)-헵틸숙시닐]-L-류신 네오펜틸아미드로 부터, 포움(foam)으로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-류신 네오펜틸아미드를 제조한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:9) 0.52; MS: (M+H)⁺414.

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 1(E-F)에 개시된 방법과 유사한 방법을 사용하여 N-3급 부톡시카보닐-L-류신 네오펜틸아미드로부터 백색 포움으로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-류신 네오펜틸아미드를 수득한다: Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.59; MS(M+H)⁺504.

실시예 4

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(RS)-헵틸숙시닐]-L-알라닐-L-류신에틸아미드로 부터, 백색고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-알라닐-L-류신 에틸아미드를 제조한다; MS: (M+H)⁺443.

C₂₂H₄₂N₄O₅(442.60)에 대한 분석

계산치: C, 59.70; H, 9.57; N, 12.66%

실측치: C, 59.95; H, 9.59; N, 12.25%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 2(A-B)에 개시된 방법과 유사한 방법을 사용하여 N-벤질옥시카보닐-L-알라닐-L-류신 에틸아미드로부터 유리질 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-알라닐-L-류신 에틸아미드를 수득한다: Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.25 및 0.41; MS: (M+H)⁺533.

실시예 5

실시예 2의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(RS)-헵틸숙시닐]-L-(N^ε-프탈로일)-리실-L-류신 에틸아미드로 부터, 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-(N^ε-프탈로일)-리실-L-류신 에틸아미드를 제조한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.30; MS: (M+H)⁺630.

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 2(A-B)에 개시된 방법과 유사한 방법을 사용하여 N^α-벤질옥시카보닐-N^ε-프탈로일-L-리실-L-류신 에틸아미드로 부터 포움으로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-(N^ε-프탈로일)-리실-L-류신 에틸아미드를 수득한다: Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.41 및 0.50; MS: (M+H)⁺720.

실시예 6

메탄올 20㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(R 또는 S)-노닐-숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(이성체 1) 0.2g(0.33 밀리몰)을 5% 팔라듐/탄소 0.07g 의 존재하에서 80 분간 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고, 잔사를 진공하에서 건조시켜 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R 또는 S)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드 0.166g(98%)을 수득한다; Rf(시스템 B) 0.35; MS: (M+H)⁺513.

C₂₇H₅₂N₄O₅(512.74)에 대한 분석

계산치: C, 63.25; H, 10.22; N, 10.93%

실측치: C, 62.83; H, 10.14; N, 10.74%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

(A) 디벤질 말로네이트 6.25㎖(25 밀리몰)을 질소하에 무수 디메틸포름아미드 25㎖에 용해시키고 80% 수소화 나트륨 0.75g 을 10 분에 걸쳐 가한다. 혼합물을 0.5시간동안 교반하고, 0°로 냉각시키고, 무수 디메틸포름아미드 10㎖중의 1-브로모노난산 4.75㎖(25 밀리몰) 용액을 가한다. 0°에서 1 시간동안 계속 교반하고, 혼합물을 실온에서 64 시간동안 정치시킨다. 용액을 증발시키고 잔사를 디에틸 에테르에 용해시킨다. 유기상을 물 및 염화 나트륨 포화용액으로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 에틸 아세테이트/헥산(1:5)으로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 오일로서 디벤질 노닐-말로네이트 5.85g(56%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트/헥산 1:3) 0.58.

(B) 디벤질 노닐말로네이트 5.85g(14 밀리몰)을 단락(A)에 개시된 방법으로80% 수소화 나트륨 0.43g(14 밀리몰) 및 3 급 부틸브로모아세테이트 2.33㎖(14 밀리몰)로 처리한다. 에틸 아세테이트/헥산(1:19)으로 용출시키면서 실라카겔상에서 크로마토그래피시켜 오일로서 벤질 4-3 급 부틸 수소(2-노닐-2-벤질옥시카보닐)숙시네이트 6.24g(83%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트/헥산 1:19) 0.74.

(C) 단락(B)로부터의 벤질 4-3 급 부틸 수소(2-노닐-2-벤질옥시카보닐)숙시네이트를 이소프로판을 80㎖에 용해시키고 5% 팔라듐/탄소 0.2g 의 존재하에 1 시간동안 수소화시킨다. 현탁액을 여과하고, 여액을 증발시키고, 톨루엔 100㎖을 가하고, 혼합물을 3 시간동안 환류시킨다. 이어서, 증발시켜 오일로서 4-3 급 부틸 수소 2(RS)-노닐숙시네이트 3.5g (97%)을 수득한다.

(D) 3 급 부톡시카보닐-L-류실-L-류신 에틸아미드 1.5g(4.0 밀리몰)을 에틸 아세테이트중의 4M 염산 20㎖에 용해시키고, 실온에서 0.5시간동안 교반하고, 증발시키고, 디에틸 에테르로 세척하고 진공하에서 건조시킨다. 고형물을 무수 디메틸포름아미드 10㎖에 흡수시키고, N-에틸모르폴린 0.6㎖(4.7 밀리몰), 4-3급 부틸 수소 2(RS)-노닐 숙시네이트 1.2g(4.0 밀리몰), 하이드록시벤조트리아졸 0.66g(4.9 밀리몰) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드 0.78g(4.0 밀리몰)으로 처리한다. 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고, 실온에서 16 시간동안 정치시키고 증발시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트에 흡수시키고, 5% 탄산 수소나트륨 용액, 물, 5% 시트르산 용액, 물, 5% 탄산 수소 나트륨 용액 및 염화 나트륨 포화 용액으로 연속 세척하고 이어서 증발시켜 고형물을 수득한다. 에틸 아세테이트로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 백색 고체로서[4-3급 부톡시 2(RS)-노닐숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드 1,9g(86%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트) 0.60; MS: (M+H)⁺554.

(E) [4-3급 부톡시 2(RS)-노닐숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드 0.95g(1.7 밀리몰)을 트리플루오로아세트산 15㎖에 용해시키고 상기 용액을 실온에서 2 시간동안 교반하고 증발시킨다. 잔사를 톨루엔으로 증발시키고, 디클로로메탄에 용해시키고, 물로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 잔사를 -15°에서 디메틸포름아미드 10㎖에 흡수시키고, N-에틸모르폴린 0.22㎖(1.7 밀리몰) 및 이소부틸 클로로포메이트 0.22㎖(1.7 밀리몰)로 처리한다. -15° 에서 10 분후에, 0-벤질하이드록실아민 0.42㎖(3.4 밀리몰)을 가하고 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고 실온에서 16 시간동안 정치시킨다. 혼합물을 물로 희석하고, 분리된 고형물을 여과하고, 5% 시트르산 용액, 물 및 5% 탄산 수소 나트륨 용액으로 연속 세척하고 이어서 진공하에 건조시킨다. 잔사를 메탄올/디클로로메탄(3:97)으로 용출시키면서 실리카겔 상에서 크로마토그래피시켜 백색 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-노닐숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드 0.55g(54%)을 수득한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.47; MS: (M+H)⁺603; hplc(ODS 역상, 70% 아세토니트릴/트리메틸암모늄 포스페이트 완충액 pH 2.5 로 용출) Rt 4.7 및 7.7 분.

이성체들을 하기와 같이 분리시킨다.

혼합물 1.0g(1.66 밀리몰)을 고온 디클로로메탄 10㎖에 용해시키고 이 용액을 실온에서 2 시간동안 정치시키고 4°에서 16 시간동안 정치시킨다. 고형물을 여과하고, 디클로로메탄으로 세척하고 진공하에서 건조시켜 고형물로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R 또는 S)-노닐숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(이성체 1) 0.41g(41%)을 수득한다; Rf(시스템 B) 0.46; hplc Rt 4.6 분.

모액을 증발시켜 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R 또는 S)-노닐숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(이성체 2) 0.47g(47%)을 수득한다; Rf(시스템 B) 0.52; hplc Rt 7.5 분.

실시예 7

실시예 6 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-노닐숙시닐]-L-3급 부틸글리신 메틸아미드로부터, 백색 포움으로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-노닐숙시닐]-L-3급 부틸글리신 메틸아미드를 제조한다; Rf(시스템 A) 0.58 및 0.64; MS: (M+H)⁺386.

C₂₀H₃₉N₃O₄O.4CH₃OH 에 대한 분석

계산치: C, 61.51; H, 10.27; N, 10.55%

실측치: C, 61.50; H, 10.13; N, 10.27%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 6(D-E)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, 단, 탈보호된 3 급 부톡시카보닐-L-류실-L-류신 에틸아미드 대신에 L-3 급 부틸글리신 메틸아미드로 출발하여, 포움으로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-노닐숙시닐]-L-3급 부틸글리신 메틸아미드를 수득한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.27 및 0,34; MS(EI): M⁺475.

실시예 8

실시예 6 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-운데실숙시닐]-L-류실-L-류신-에틸아미드로부터, 포움으로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-운데실숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드를 제조한다; Rf(시스템 A) 0.62 및 0.66; MS: (M+H)⁺541.

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 6(A-E)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, 단, 1-브로모노난 대신에 1-브로모운데칸을 사용하여, 겔로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-운데실숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드를 수득한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.70; MS: (M+H)⁺631.

실시예 9

메탄올 50㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R 또는 S)-헵틸-3(S)-메틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.3g(0.536 밀리몰)을 5% 팔라듐/탄소 0.1g 의 존재하에서 1.5 시간동안 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고, 전사를 디에틸 에테르로 연마시켜 백색 고체로서 [4-(N-파이프록시아미노)-2(R 또는 S)-헵틸-3(S)-메틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.23g 을 수득한다; MS: 499(M+H)⁺.

C₂₆H₅₀N₄O₅O.4H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 61.72; H, 10.12; N, 11.08

실측치: C, 61.92; H, 10.50; N, 10.85

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

(A) 디클로로메탄 220㎖중의 L-락트산 벤질 에스테르 2.0g(0.11 몰) 및 피리딘 10.8㎖(0.13 몰)을 0.5 시간에 걸쳐 0°에서 디클로로메탄 250㎖중의 트리플루오로메탄설폰산 무수물 용액에 가한다. 추가로 0.5 시간 후에, 상기 용액을 매번 물 250㎖로 2 회 세척하고 염화나트륨 포화 용액 250㎖로 세척하고, 이어서 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시킨다. 이어서 상기 용액을 0.5시간에 걸쳐 0°에서 디메틸포름아미드 250㎖중의 디-3 급 부틸 소디오 말로네이트 (0.11 몰) 용액(오일중의 디-3급-부틸 말로네이트 22,8g 및 80% 수소화 나트륨 3.48g으로 부터 제조)에 가한다. 혼합물을 실온으로 밤새 가온시키고 용매를 증발시킨다. 잔사를 에틸 아세테이트 200㎖ 및 5% 중탄산 나트륨 용액 200㎖ 사이에 분배시킨다. 유기층을 물(2x200㎖)로 세척하고, 무수 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시켜 황색 오일을 수득한다. 헥산중의 10% 에틸 아세테이트로 용출시키면서 실리카겔상에서 플래시 크로마토그래피시켜 무색 오일로서 1-벤질-4-3급부틸 3(RS)-3급 부톡시카보닐-2(S)-메틸숙시네이트 35.4g(88%)을 수득한다; Rf(헥산중의 30% 에틸 아세테이트) 0.63.

(B) 80% 수소화 나트륨 952㎎ 을 무수 디메틸포름아미드 100㎖ 중의 1-벤질4-3 급 부틸 3(RS)-3급부톡시-카보닐-2(S)-메틸-숙시네이트 10g 의 교반용액에 가한다.

이 용액을 실온에서 2 시간동안 교반하고 이어서 1-브로모헵탄 6.23㎖을 가한다. 혼합물을 60℃에서 4 시간동안 가열하고 이어서 실온에서 밤새 교반한다. 용매를 증발시키고 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시킨다. 이 용액을 5% 중탄산 나트륨 용액, 물 및 염화 나트륨 포화 용액으로 연속 세척하고, 이어서 무수 황산 마그네슘 상에서 건조시킨다. 용매를 증발시키고 잔사를 헥산중의 5% 에틸 아세테이트로 용출시키면서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 무색 오일로서 벤질 3,3(RS)-디-3급 부톡시카보닐-2(S)-메틸데카노에이트 6.83g 을 수득한다; Rf(헥산중의 10% 에틸 아세테이트) 0.5.

(C) 트리플루오로아세트산 20㎖중의 벤질-3,3(RS)-디-3급 부톡시카보닐-2(S)-메틸데카노에이트 6.8g 을 실온에서 1 시간동안 교반시킨다. 용매를 증발시키고 잔사를 톨루엔(2x25㎖)으로부터 재증발시켜 오렌지색 오일을 수득한다. 이 오일을 톨루엔 100㎖에 재용해시키고, N-에틸모르폴린 3.64㎖ 로 처리하고 1 시간동안 가열 환류시킨다. 이 용액은 2M 염산, 물 및 염화나트륨 용액으로 연속 세척하고, 무수 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시켜 갈색 오일을 수득한다. 디클로로메탄중의 2% 메탄올로 용출시키면서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 황색 오일로서 1-벤질-3(RS)-카복시-2(S)-메틸데카노에이트 3.02g을 수득한다; Rf(디클로로메탄중의 5% 메탄올) 0.47, 0.52; MS: 321(M+H)⁺.

(D) 실시예 1 의 단락 (D)∼(F)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, 벤질 3(RS)-카복시-2(S)-메틸데카노에이트 1.5g 으로 부터 회백색 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2-(R 또는 S)-헵틸-3(S)-메틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오 이성체 1) 0.315g 을 수득한다.

실시예 10

디메틸포름아미드 100㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(프탈이미도메틸)숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.25g 을 10% 팔라듐/탄소 100mg 의 존재하에서 24 시간동안 수소화시킨다. 촉매를 여과하고 용매를 증발시킨다. 잔사를 디에틸 에테르로 연마시켜 회색 분말로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3-(R 또는 S)-(프탈이미도메틸)숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.17g 을 수득한다: Rf(디클로로메탄 중의 10% 메탄올) 0.5; MS:644(M+H)⁺.

C₃₄H₅₃N₅O₇O.8H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 62.04; H, 8.36; N, 10.64

실측치: C, 61.99; H, 8.04; N, 10.60

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

(A) 실시예 1 의 단락(A) 내지 (D)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, D-α-아미노-노난산 20g 으로 부터 담황색 오일로서 디벤질 3(RS)-3 급 부톡시카보닐-2(R)-헵틸숙시네이트 10.28g 을 수득한다; Rf(헥산중의 10% 에틸 아세테이트)0.32.

(B) 무수 디메틸포름아미드 100㎖중의 디벤질 3(RS)-3 급 부톡시카보닐-2(R)-헵틸숙시네이트 8.2g 을 80% 수소화 나트륨 분산액 0.49g 으로 처리한다. 2 시간후에 혼합물을 0℃로 냉각시키고 N-브로모메틸 프탈이미드 4.18g 을 적가한다. 혼합물을 0℃에서 추가로 1 시간 동안 교반하고 이어서 실온에서 밤새 교반한다. 용매를 증발시키고 잔사를 에틸 아세테이트와 5%, 중탄산 나트륨 용액사이에 분배시킨다. 유기상을 물 및 염화 나트륨 포화 용액으로 세척하고 이어서 무수 황산 마그네슘상에서 건조시킨다. 용매를 증발시키고 잔사를 헥산중의 20% 에틸 아세테이트로 용출시키면서 실리카겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 디벤질 3(RS)-3급 부톡시카보닐-2(R)-헵틸-3(RS)-(프탈이미도메틸)숙시네이트 6.42g 을 수득한다.

(C) 에탄올 50㎖중의 디벤질 3(RS)- 3급 부톡시카보닐-2(R)-헵틸-3(RS)-(프탈이미도메틸)숙시네이트 3.5g 을 5% 팔라듐/탄소 0.35g 의 존재하에서 수소화시킨다. 촉매를 여과하고 용매를 증발시킨다. 잔사를 톨루엔 50㎖에 용해시키고, N-에틸모르폴린 0.58㎖로 처리하고, 2 시간동안 가열환류시킨다. 상기 용액을 2M 염산, 물 및 염화 나트릅 포화 용액으로 연속 세척하고, 이어서 무수 황산 마그네슘상에서 건조시킨다. 잔사를 디클로로메탄중의 4% 메탄올을 사용하여 실리카겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 정제시켜 오일로서 4-3 급 부틸 수소 2(R)-헵틸-3(RS)-(프탈이미도메틸)숙시네이트 1.54g 을 수득한다; Rf(디클로로메탄중의 5% 메탄올) 0.3.

(D) 실시예 1 의 단자(E)-(F)와 유사한 방식으로, 4-3 급 부틸 2(R)-헵틸-3(RS)-(프탈이미도메틸)숙시네이트 0.6g 으로부터 백색 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(프탈이미도메틸)숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.27g 을 수득한다; MS: 734(M+H)⁺.

C₄₁H₅₉N₅O₇O.6H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 66.12; H, 8.15; N, 9.4

실측치: C, 66.08; H, 8.08; N, 9.53

실시예 11

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닐-L-류신 에틸아미드로부티, 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닐-L-류신 에틸아미드를 제조한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.28 및 0.43; MS: (M+H)⁺519.

C₂₈H₄₆N₄O₅O.3H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 64.17; H, 8.96; N, 10.69%

실측치: C, 64.07; H, 8.77; N, 10.64%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 1(E-F)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, N-3 급 부틸옥시카보닐-L-페닐알라닐-L-류신 에틸아미드로부터 백색 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-피닐 알라닐-L-류신 에틸아미드를 수득한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.64; MS: (M+H)⁺609.

실시예 12

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-노날릴-L-류신-에틸아미드로부터, 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-노날릴-L-류신 에틸아미드를 제조한다; MS: (M+H)⁺527.

C₂₈H₅₄N₄O₅(526.76)에 대한 분석

계산치: C, 63.84; H, 10.33; N, 10.64%

실측치: C, 63.64; H, 10.39; N, 10.63%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 1(E-F)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, N-3 급 부톡시카보닐-L-노날릴-L-류신 에틸아미드로부터, 백색 고체로서 [4-(벤질옥시아미노)-2(RS)-헴틸숙시닐]-L-노날릴-L-류신 에틸아미드를 수득한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.55 및 0.62; MS: (M+H)⁺617.

실시예 13

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐-알라닌 3급 부틸아미드로부터, 흡습성 포움으로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닌 3 급 부틸아미드를 제조한다; Rf(메탄올/클로로포름 1:19) 0.31; MS: (M+H)⁺434.

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 1(E-F)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, N-3급 부톡시카보닐-L-페닐알라닌 3 급 부틸아미드로부터 백색고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닌 3급 부틸아미드를 수득한다; Rf(에틸 아세테이트) 0.75; MS(M+H)⁺524.

실시예 14

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드로부터, 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드를 제조한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.16 및 0.21; MS: (M+H)⁺392.

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 1(E-F)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, N-3 급 부톡시카보닐-L-페닐알라닌 메틸아미드로 부터 백색 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드를 수득한다; Rf(메탄올/클로로포름 1:19) 0.29 및 0.36.

C₂₈H₃₉N₃O₄(481.64)에 대한 분석

계산치: C, 69.83; H, 8.16; N, 8.72%

실측치: C, 69.56; H, 8.05; N, 9.00%

실시예 15

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-3급 부틸글리신 메틸아미드로부터, 포움으로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-3급 부틸글리신 메틸아미드를 제조한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.23 및 0.29; MS: (M+H)⁺358.

C₁₈H₃₅N₃O₄O.3CH₃OH 에 대한 분석

계산치: C, 59.87; H, 9.94; N, 11.45%

실측치: C, 59.80; H, 9.76; N, 11.44%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 1(E-F)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, 단, 탈보호된 벤질옥시카보닐-L-류신 메틸아미드 대신에 L-3 급 부틸 글리신 메틸아미드로 출발하여, 백색포움으로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-3급 부틸글리신 메틸아미드를 수득한다; Rf(메탄올/클로로포름 1:19) 0.29 및 0.36; MS: (M+H)⁺448.

실시예 16

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드로부터, 적색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드를 제조한다; MS: (M+H)⁺372.

C₁₃H₃₇N₃O₄(371.52)에 대한 분석

계산치: C, 61.43; H, 10.04; N, 11.31%

실측치: C, 61.04; H, 09.93; N, 11.13%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 1(E-F)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, N-3 급 부톡시카보닐-L-네오펜틸글리신 메틸아미드로부터 백색 포움으로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드를 수득한다; Rf(메탄올/클로로포름 1:19) 0.47 및 0.55; MS: (M+H)⁺462.

C₂₅H₄₃N₃O₄(461.65)에 대한 분석

계산치: C, 67.65; H, 9.39; N, 9.10%

실측치: C, 67.57; H, 9.12; N, 9.02%

실시예 17

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-호모페닐알라닐-L-류신 에틸아미드로부터, 백색 흡습성 과립 분말로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-호모페닐알라닐-L-류신을 제조한다; MS: (M+H)⁺533.

C₂₉H₄₈N₄O₅O.4H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 64.51; H, 9.11; N, 10.38%

실측치: C, 64.59; H, 8.94; N, 10.14%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 2(A-B)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, N-벤질옥시카보닐-L-호모페닐알라닐-L-류신 에틸아미드로부터 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-호모페닐알라닌-L-류신 에틸아미드를 수득한다; Rf(메탄올/클로로포름 1:19) 0.55; MS:(M+H)⁺623.

C₃₆H₅₄N₄O₅(622.85)에 대한 분석

계산치: C, 69.42; H, 8.74; N, 9.00%

실측치: C, 69.02; H, 8.85; N, 8.87%

실시예 18

실시예 2 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-사이클로헥실알라닌 메틸아미드로부터, 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-L-사이클로헥실알라닌 메틸아미드를 제조한다; MS: (M+H)⁺398.

C₂₁H₃₉N₃O₄(397.56)에 대한 분석

계산치: C, 63.45; H, 09.89; N, 10.57%

실측치: C, 63.24; H, 10.04; N, 10.33%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 1(E-F)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, N-3 급 부톡시카보닐-L-사이클로헥실알라닌 메틸아미드로 부터 백색고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-사이클로헥실알라닌 메틸아미드를 수득한다; Rf(메탄올/디클로로메탄 1:9) 0.30 및 0.37; MS: (M+H)⁺488.

실시예 19

[4-3 급 부톡시 2(RS)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(실시예 1(E)에서 제조) 0.6g(1.14 밀리몰)을 트리플루오로아세트산 10㎖에 용해시키고 이 용액을 3 시간동안 교반하고 증발시킨다. 잔사를 톨루엔으로 부터 4 회 증발시키고, 이어서 메탄올 5㎖을 함유하는 디클로로메탄 200㎖에 용해시키고, 물로 2 회 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 잔사를 0°에서 디메틸포름아미드 1㎖ 및 1,2-디메톡시에탄 10㎖에 용해시킨다. N-하이드록시숙신이미드 0.135g(1.17 밀리몰) 및 디사이클로헥실카보디이미드 0.243g (1.17 밀리몰)을 가하고, 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고, 4°에서 16 시간동안 교반하고, 여과 및 증발시켜 점성 고형물로서 조 N-하이드록시숙신이미드 에스테르를 수득한다. 상기 에스테르를 테트라하이드로푸란 5㎖에 현탁시키고, 물 5㎖중의 하이드록실아민 하이드로클로라이드 0.178g(2.56 밀리몰) 및 수산화나트륨 0.094g(2.35 밀리몰)으로부터 제조된 용액으로 처리하고, 실온에서 16 시간동안 교반하고, 여과 및 증발시킨다. 생성된 검(gum)을 경사분리에 의해 물로 세척하고 톨루엔을 증발시킴으로써 건조시킨다. 디클로로메탄중의 1% 메탄올에 이어서 디클로로메탄중의 2%, 3%, 및 5%, 메탄올로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시키고 증발시켜 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R 또는 S)- 헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드, 이성체 1 및 2 를 수득한다. Rf(메탄올/디클로로메탄 1:12:5) 0.34(이성체 2) 및 Rf 0.26(이성체 1).

이성체 1 을 디클로로메탄 및 에틸 아세테이트로 세척하고 이어서 건조시켜 실시예 1 에서 제조된 것과 동일한 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R 또는 S)-헵틸숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(이성체 1) 0.083g(15%)을 수득한다. Rf(시스템 A) 0.54. MS: (M+H)⁺485.

C₂₅H₄₈N₄O₅O.2H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 61.50; H, 9.99; N, 11.47%

실측치: C, 61.41; H, 10.09; N, 11.48%

실시예 20

메탄올 200㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-이소옥틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드 0.30g(0.6 밀리몰)을 10% 팔라듐/탄소 0.1g 의 존재하에 3 시간동안 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고 여액을 증발시켜 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(RS)-이소옥틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드 0.20g(81%)을 수득한다; MS:(M+H)⁺406.

C₂₂H₃₅N₃O₄(405.54)에 대한 분석

계산치: C, 65.16; H, 8.70; N, 10.36%

실측치: C, 65.04; H, 8.75; N, 10.20%

출발물질로서 사용된 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-이소옥틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드를 하기와 같이 제조한다:

(A) 무수 디메틸포름아미드 50㎖ 중의 디에틸 아세트아미도말로네이트 13.03g(60밀리몰) 용액을 0°에서 질소대기하에 0.5 시간에 걸쳐 무수 디메틸포름아미드 50㎖ 중의 80% 수소화 나트륨 2.16g(72 밀리몰)의 현탁액에 가한다. 혼합물을 실온에서 3 시간동안 교반하고, 무수 디메틸포름아미드 50㎖중의 1-브로모-6-메틸헵탄 15.05g(78 밀리몰)용액을 가하고, 혼합물을 64 시간동안 교반하고 오일로 증발시킨다. 상기 오일을 에틸 아세테이트로 2 회 추출하고, 합한 추출물을 물로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 잔사를 4 시간동안 6M 염산(180㎖)으로 환류시키고, 냉각시키고, 왁스상 고형물을 여과한다. 50% 수성 에탄올 120㎖중의 조 생성물을 여과하고 피리딘 7㎖을 가하고, 혼합물을 얼음으로 냉각시켜 미세한 회백색 분말로서 DL-이소옥틸 글리신 6,49g (57%)을 수득한다.

(B) DL-이소옥틸글리신 6.45g(34.5 밀리몰)을 실온에서 아세트산 200㎖에 현탁시킨다. 아질산 나트륨 4.8g(69 밀리몰)을 3 시간에 걸쳐 적가한다. 등명한 용액을 실온에서 16 시간동안 교반하고, 증발시키고, 물 및 디에틸 에테르를 가하고 혼합물을 여과한다. 에테르 용액을 황산 마그네슘상에서 건조시키고 오일로 증발시킨다. 회수되고 건조된 출발물질(1.76g)을 상기 방법에 따라 재순환시켜 에테르-용해성 오일을 수득한다. 합한 생성물(7.43g)을 메탄올 16㎖에 용해시키고, 물 33㎖중의 수산화 나트륨 3.9g 용액을 가하고 혼합물을 실온에서 2 시간동안 교반한다. 메탄올을 증발시키고, 물을 가하고 용액을 디에틸 에테르로 추출하고 농염산으로 산성화시킨다. 생성물을 디에틸 에테르로 추출하고, 증발시킨 후에 정치시 고형화되는 등명한 오일로서 2(RS)-하이드록시-이소옥탄산 5.88g(91%)을 수득한다.

(C) 2(RS)-하이드록시이소옥탄산 5.84g(31.3 밀리몰)을 에틸아세테이트 60㎖에 용해시킨다. 트리에틸아민 4.4㎖(31.3 밀리몰) 및 벤질 브로마이드 3.8㎖ (31.3 밀리몰)을 가하고 혼합물을 3 시간 동안 가열환류시킨다. 혼합물을 냉각시키고, 여과하고, 2M 염산, 물 및 5% 탄산 수소 나트륨 용액으로 연속 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 에틸 아세테이트/헥산(3:7)으로 용출시키면서 실리카겔 상에서 크로마토그래피시켜 오일로서 벤질 2(RS)-하이드록시이소옥테노에이트 5.55g(64%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트/헥산 1:1) 0.50.

(D) 무수 디클로로메탄 35㎖ 중의 벤질 2(RS)-하이드록시-이소옥타노에이트 5.45g(19.6 밀리몰) 및 피리딘 1.91㎖(23.5 밀리몰) 용액을 0.5 시간에 걸쳐 교반하면서 0°에서 무수 디클로로메탄 40㎖중의 트리플루오로메탄설폰산 무수물 4㎖(23.5 밀리몰)용액에 가한다. 혼합물을 0°에서 1 시간동안 및 실온에서 1 시간동안 교반한다. 용액을 물로 2 회 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고, 증발시켜 벤질 2(RS)-트리플루오로메탄설포닐옥시이소옥타노에이트 7.32g(95%)을 수득한다. Rf(에틸 아세테이트/헥산 1:4) 0.73.

(E) 무수 디클로로메탄 30㎖ 중의 벤질 2(RS)-트리플루오로메탄설포닐옥시 이소옥타노에이트 7.31g(18.55 밀리몰)용액을 0° 에서 무수 디메틸포름아미드 50㎖중의 벤질 3 급 부틸말로네이트 4.64g(18.55 밀리몰) 및 80% 수소화 나트륨 0.58g(19.5 밀리몰)의 현탁액에 1 시간에 걸쳐 적가한다. 혼합물을 실온에서 6 시간동안 교반하고, 실온에서 16 시간동안 정치시켜 오일로 증발시킨다. 디클로로메탄중의 잔사를 물로 2 회 세척하고, 염화 나트륨 포화 용액으로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 에틸 아세테이트/헥산(1:4)으로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 엷은 황갈색 오일로서 디벤질 3(RS)-3급 부톡시카보닐-2(RS)-이소옥틸 숙시네이트 6.08g(64%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트/헥산 1:3) 0.49.

(F) 이소프로판올 90㎖중의 단락(E)로부터의 트리에스테르 6.02g(11.8 밀리몰)을 10% 팔라듐/탄소 0.2g 의 존재하에서 16 시간동안 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고, 톨루엔을 가하고, 혼합물을 증발시켜 미량의 이소프로판올을 제거한다. 톨루엔 75㎖및 트리에틸아민 1.65㎖(11.8 밀리몰) 중의 잔사를 2시간 동안 환류시키고 증발시키고, 잔사를 에틸 아세테이트에 용해시킨다. 용액을 0.5M 염산 및 물로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시켜 오일로서 4-3급 부틸 수소 2(RS)-이소옥틸숙시네이트 3.23g(96%)을 수득한다.

(G) N-3 급 부톡시카보닐-L-페닐알라닌 메틸아미드 1.25g(4.5 밀리몰)을 에틸 아세테이트 중의 4M 염화 수소 15㎖에 용해시키고, 실온에서 1 시간동안 교반하고, 증발시키고, 진공하에서 건조시킨다. 무수 디메틸포름아미드 10㎖중의 잔사를0°로 냉각시키고, N-에틸모르폴린 0.6㎖(4.7 밀리몰), 디클로로메탄 15㎖중의 4-3급 부틸수소 2(RS)-이소옥틸숙시네이트 0.86g(3 밀리몰)의 용액, 하이드록시벤조트리아졸 0.49g(3.6 밀리몰) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카보디이미드하이드로클로라이드 0.72g(3.75 밀리몰)으로 처리한다. 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고, 4°에서 16 시간동안 정치시키고 증발시킨다. 디클로로메탄중의 잔사를 5% 시트르산 용액, 물, 5% 탄산 수소 나트륨 용액 및 염화 나트륨 포화 용액으로 연속 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 에틸 아세테이트로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 정치시 고형화되는 오일로서 [4-3 급 부톡시 2(RS)-이소옥틸숙시닐]-L-페닐알라닌메틸아미드 1.17g(87%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트/헥산 1:1) 0.34 및 0.44.

(H) [4-3 급 부톡시 2(RS)-이소옥틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드 1.02g(2.28 밀리몰)을 트리플루오로아세트산 10㎖에 용해시키고, 용액을 1.5 시간동안 교반하고 증발시킨다. 잔사를 톨루엔으로 3 회 증발시키고, 클로로포름에 용해시키고, 물로 2 회 세척하고, 건조 및 증발시켜 고체를 수득한다. 고체를 디메틸포름아미드 15㎖에 용해시키고, 0°로 냉각시키고, N-에틸모르폴린 0.6㎖(4.6 밀리몰), 하이드록시벤조트리아졸 0.37g(2.7 밀리몰), 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카보디이미드 하이드로클로라이드 0.54g(2.8 밀리몰) 및 O-벤질 하이드록실아민 0.42g(3.4 밀리몰)으로 처리한다. 혼합물을 0°에서 1 시간 및 실온에서 16 시간동안 교반하고 증발시키고 물을 가한다. 분리된 고체를 5% 탄산 수소 나트륨 용액, 물, 5% 시트르산 용액, 물, 5% 탄산 수소 나트륨 용액 및 물로 연속 세척하고이어서 진공하에서 건조시킨다. 수득된 고형물을 메탄올/클로로포름(1:1)에 용해시키고, 디에틸 에테르를 가한 후에 백색 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-이소옥틸숙시닐]-L-페닐알라닌 메틸아미드 0.71g(63%)을 수득한다; MS:(M+H)⁺496.

C₂₉H₄₁N₃O₄O.2CH₃OH 에 대한 분석

계산치: C, 69.85; H, 8.39; N, 8.37%

실측치: C, 69.81; H, 8.34; N, 8.40%

실시예 21

메탄올 50㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(RS)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드 1.0g(2.17 밀리몰)을 5% 팔라듐/탄소 0.33g 의 존재하에서 1.5 시간동안 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고 여액을 증발시켜 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드 0.8g(99%)을 수득한다; MS:(M+H)⁺372.

C₁₉H₃₇N₃O₄(371.52)에 대한 분석

계산치: C, 61.43; H, 10.04; N, 11.31%

실측치: C, 61.21; H, 10.17; N, 11.35%

출발물질로서 사용된 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드를 하기와 같이 제조한다:

(A) 3 급 부톡시카보닐-L-네오펜틸글리신 5.6g(22.8 밀리몰)을 0°에서 디클로로메탄 50㎖에 용해시킨다. 피리딘 1.85㎖(22.8 밀리몰) 및 70% 디(1-벤조트리아졸릴) 카보네이트 9.67g(22.8 밀리몰)을 가하고 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반한다. 메틸아민의 40% 수용액 3.94㎖(45.6 밀리몰)을 가하고 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고 실온에서 16 시간동안 교반한다. 용액을 5% 탄산 수소 나트륨 용액, 물, 2M 염산 용액, 물, 5% 탄산 수소 나트륨 용액 및 염화 나트륨 포화 용액으로 연속 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 에틸 아세테이트로부터 재결정시켜 백색 고체로서 3 급 부톡시카보닐-L-네오펜틸글리신 메틸아미드 5.26g(89%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트) 0.47.

(B) 3 급 부톡시카보닐-L-네오펜틸글리신 메틸아미드 4.84g (18.8 밀리몰)을 실온에서 1 시간동안 에틸 아세테이트중의 4M 염화 수소 50㎖과 함께 교반하고 증발시킨다. 에틸 아세테이트를 가하고, 용액을 증발시키고, 잔사를 진공하에서 건조시킨다. 수득된 아민 하이드로클로라이드를 0℃에서 무수 디메틸포름아미드 15㎖에 용해시키고, N-에틸모르폴린 3.58㎖(28.2 밀리몰)을 가하여 중화시키고, 0°에서 무수 디클로로메탄 50㎖중의, D-a -아미노-노난산으로부터 출발하여 실시예 1(A-D)와 유사한 방법으로 제조된 4-3급 부틸 수소 2R-헵틸숙시네이트 4.25g(15.6 밀리몰), 하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트 2.87g(18.8 밀리몰) 및 1-에틸-3(3-디메틸아미노프로필)-카보디이미드 하이드로클로라이드 3.74g(19.5 밀리몰)의 냉각(0℃)된 용액에 가한다. 혼합물을 0°에서 1 시간 및 실온에서 16 시간동안 교반하고 이어서 오일로 증발시킨다. 에틸 아세테이트중의 잔사를 5% 시트르산 용액, 물, 5% 탄산 수소 나트륨 용액 및 염화 나트륨 포화 용액으로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 오일로 증발시킨다. 에틸 아세테이트/헥산(1:1)으로 용출시키면서 실리카겔상에서 크로마토그래피시켜 오일로서 [4-3 급 부톡시 2(R)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아민 5.13g(80%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트: 헥산 1:1) 0.49; MS: (M+H)⁺413.

(C) [4-3 급 부톡시 2(R)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드 5.1g(12.4 밀리몰)을 트리플루오로아세트산 5㎖에 용해시키고 용액을 2.5 시간동안 교반하고 이어서 증발시킨다. 잔사를 톨루엔으로 2 회 증발시키고, 디클로로메탄에 용해시킨다. 용액을 물 및 염화나트륨 포화 용액으로 3 회 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 무수 디클로로메탄 25㎖중의 잔사를 0°에서 N-에틸모르폴린 3.2㎖(25 밀리몰), 하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트 2.28g(14.9밀리몰) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카보디이미드 하이드로클로라이드 3.0g(15.6 밀리몰)으로 처리하고, 용액을 0°에서 1 시간동안 교반한다. O-벤질하이드록실아민 3.05g(24.8 밀리몰)을 가하고, 혼합물을 0°에서 1 시간 및 실온에서 16 시간동안 교반하고 이어서 증발시킨다. 물을 가하고, 수득된 고체를 2M 염산, 물, 5% 탄산 수소 나트륨 용액, 물 및 헥산으로 연속 세척하고, 진공하에서 건조시킨다. 수득된 고체를 디에틸 에테르와 함께 가열하고, 헥산을 가하고 냉각시킨 후에, 흡습성 겔로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-L-네오펜틸글리신 메틸아미드 5.2g(91%)을 수득하고, 진공하에서 건조시킨다: MS:(M+H)⁺462.

C₂₆H₄₃N₃O₄O.6H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 66.10; H, 9.43; N, 8.89%

실측치: C, 66.13; H, 9.39; N, 8.74%

실시예 22

메탄올 10㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(D 또는 L)-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드(이성체 1) 0.09g(0.177 밀리몰)을 5% 팔라듐/탄소 30㎎ 의 존재하에서 1.5 시간동안 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고, 잔사를 진공하에서 건조시켜 백색 포움으로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(D 또는 L)-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드 0.075g(100%)을 수득한다; MS: (M+H)⁺420.

C₂₃H₃₇N₃O₄O.4H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 64.73; H, 8.93; N, 9.85%

실측치: C, 64.81; H, 8.77; N, 10.14%

출발물질로서 사용된 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(D 또는 L)-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드(이성체 1)를 하기와 같이 제조한다:

(A) DL-β,β-디메틸페닐알라닌 2.3g(11.9 밀리몰)을 0°에서 교반하면서 수산화나트륨 0.48g(12 밀리몰)을 함유하는 물 9㎖에 용해시킨다. 4M 수산화 나트륨 용액 6.0㎖ 및 벤질 클로로포메이트 3.4㎖(23.8 밀리몰)을 0.3 시간에 걸쳐 적가한다. 혼합물을 0°에서 1시간 및 실온에서 16시간동안 교반한다. 용액을 디에틸 에테르로 추출하고, 농염산으로 pH 2 로 산성화시키고 생성물을 에틸 아세테이트로추출시킨다. 유기 용액을 염화 나트륨 포화 용액으로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시켜 오일로서 N-벤질옥시카보닐-DL-β,β-디메틸페닐알라닌 3.86g(99%)을 수득한다; Rf(시스템 A) 0.54 MS: (M+H)⁺328.

(B) N-벤질옥시카보닐-DL-β,β-디메틸페닐알라닌 3.8g (11.6 밀리몰)을 실시예 21(A)에 개시된 방법에 따라 N-벤질옥시카보닐-DL-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드 2.45g (62%)으로 전환시킨다; Rf(에틸 아세테이트) 0.61; MS: (M+H)⁺341.

(C) N-벤질옥시카보닐-DL-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드 2.4g(7.06밀리몰)을 메탄올 30㎖ 및 2M 염산 3.5㎖에 현탁시키고 5% 팔라듐/탄소 0.24g 의 존재하에서 2 시간동안 수소화시킨다. 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고, 잔사를 톨루엔으로 3 회 증발시키고, 이어서 진공하에서 건조시켜 미량의 톨루엔을 함유하는 DL-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드 하이드로클로라이드 1.75g 을 수득한다; Rf(시스템 A) 0.31; MS:(M+H)⁺207.

(D) DL-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드 하이드로클로라이드 0.485g(2 밀리몰)을 무수 디메틸포름아미드 2㎖ 에 용해시키고 용액을 0°로 냉각시킨다. N-에틸모르폴린 0.35㎖(2.8 밀리몰), 4-3급 부틸 수소 2(R)-헵틸숙시네이트 0.544g(2 밀리몰) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카보디이미드 하이드로클로라이드 0.46g(2.4 밀리몰)을 가하고 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고 4°에서 64 시간동안 교반한다. 물을 상기 현탁액에 가하고 백색 고체를 여과하고, 2M 염산, 물, 5% 탄산 수소 나트륨 용액 및 물로 연속 세척하고, 진공하에서 건조시켜 [4-3급 부톡시 2(R)-헵틸숙시닐]-DL-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드 0.72g (78%)을 수득한다; Rf(에틸 아세테이트) 0.56 및 0.61; MS:(M+H)⁺461.

(E) [4-3 급 부톡시 2(R)-헵틸숙시닐]-DL-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드 0.71g (1.54 밀리몰)을 트리플루오로아세트산 7㎖에 용해시키고 용액을 2.5 시간동안 교반하고 증발시킨다. 잔사를 톨루엔으로 2 회 증발시키고 디클로로메탄 30㎖에 용해시킨다. 용액을 물로 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 디메틸포름아미드 5㎖중의 잔사를 0°에서 하이드록시벤조트리아졸 하이드레이트 0.31g(2.02 밀리몰) 및 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카보디이미드 하이드로클로라이드 0.37g(1.93 밀리몰)으로 처리하고 용액을 0°에서 1 시간동안 교반한다. O-벤질하이드록실아민 0.38g(3.08 밀리몰)을 가하고 혼합물을 0°에서 1 시간동안 교반하고 실온에서 16 시간동안 교반하고 이어서 증발시킨다. 에틸 아세테이트중의 잔사를 5% 탄산 수소 나트륨 용액, 물, 2M 염산, 물, 5% 탄산 수소나트륨 용액 및 염화 나트륨 포화 용액으로 연속 세척하고, 황산 마그네슘상에서 건조시키고 증발시킨다. 에틸 아세테이트/헥산(2:1), 이어서 에틸 아세테이트/헥산(3:1), 최종적으로 에틸아세테이트로 용출시키면서 실리카겔 상에서 크로마토그래피시켜 2 개의 이성체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(D 또는 L)-β,β-디메틸페닐알라닌 메틸아미드를 수득한다. 이성체 1, (0.18g; 23%): Rf(에티 아세테이트/헥산 2:1) 0.32; MS:(M+H)⁺510; 및 이성체 2(0.27g; 34%); Rf(에틸 아세테이트/헥산 2:1) 0.22; MS:(M+H)⁺510.

실시예 23

메탄올 10㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(D 또는 L)-쓰레오-β-메틸페닐알라닌 메틸아미드(이성체 1) 0.09g(0.18 밀리몰)을 5% 팔라듐/탄소 0.03g 의 존재하에서 4 시간동안 수소화시킨다, 혼합물을 여과하고, 여액을 증발시키고 잔사를 진공하에서 건조시켜 백색 흡습성 포움으로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(D 또는 L)-쓰레오-β-메틸페닐알라닌 메틸아미드 0.072g(98%)을 수득한다. MS: (M+H)⁺406.

C₂₂H₃₅N₃O₄O.15H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 64.73; H, 8.72; N, 10.29%

실측치: C, 64.69; H, 8.93; N, 10.09%

출발물질로서 사용된 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(D 또는 L)-쓰레오-β-메틸페닐알라닌 메틸아미드(이성체 1)를 실시예 22(A)-(E)에 개시된 방법에 따라 N-벤질옥시카보닐-DL-쓰레오-β-메틸페닐알라닌으로부터 제조한다. 이성체들을 1% 메탄올/디클로로메탄, 2% 메탄올/디클로로메탄 및 최종적으로 3% 메탄올/디클로로메탄으로 용출시키면서 실리카겔 상에서 크로마토그래피에 의해 분리시킨다. 이성체 1, Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.51 및 MS:(M+H)⁺496, 이성체 2, Rf(메탄올/디클로로메탄 1:19) 0.41 및 MS:(M+H)⁺496.

실시예 24

실시에 22 의 첫번째 단락에 개시된 방법과 유사한 방법으로, [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-(DL)-에리쓰로-β-메틸페닐알라닌 메틸아미드로부터 백색 흡습성 포움으로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐-(DL)-에리쓰로-β-메틸페닐알라닌 메틸아미드를 제조한다: Rf(시스템 B) 0.22 및 0.29; MS:(M+H)⁺406.

C₂₂H₃₅N₃O₄O.3H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 64.30; H, 8.73; N, 10.23%

실측치: C, 64.29; H, 8.64; N, 10.09%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 22 (B-E)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, 단, N-벤질옥시카보닐-DL-에리쓰로-β-메틸페닐알라닌으로 출발하여, 백색 고체로서 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸숙시닐]-DL-에리쓰로-β-메틸페닐알라닌 메틸아미드를 수득한다. Rf(메탄올/디클로로메탄 7:93) 0.40 및 0.45; MS:(M+H)⁺496.

실시예 25

메탄올 10㎖중의, 실시예 10(A)-(D)에 개시된 방법과 유사한 방법으로 제조된 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(프탈이미도메틸)숙시닐]-L-3 급 부틸 글리신 메틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.12g 을 16 시간동안 10% 팔라듐/탄소 50㎎ 의 존재하에 수소화시킨다, 촉매를 여과하고 여액을 증발시켜 젤라틴성 고형물을 수득한다. 디클로로메탄중의 5% 메탄올로 용출시키면서 실리카겔 상에서정제시켜 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(프탈이미도메틸)숙시닐]-L-3급 부틸글리신 메틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.06g을 수득한다; Rf(디클로로메탄중의 10% 메탄올) 0.34; MS: (M+H)⁺517.

실시예 26

메탄올 10㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(3-페닐프로필)숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.17g 을 3 시간동안 팔라듐/탄소 55mg 의 존재하에 수소화시킨다. 촉매를 여과하고 여액을 증발시켜 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(3-페닐프로필)숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드 0.13g을 제조한다: Rf(디클로로메탄중의 10% 메탄올)0.36; MS:(M+H)⁺603.

C₃₄H₅₈N₄O₅(602.83)에 대한 분석

계산치: C, 67.74; H, 9.70; N, 9.30%

실측치: C, 68.00; H, 9.93; N, 9.20%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시히 10(B-D)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, 디벤질 3(RS)-3 급 부톡시카보닐-2(R)-헵틸숙시네이트 2.0g 및 신나밀 브로마이드 0.84g 으로부터 회백색 고체로서 [4-(N-벤질옥시 아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-(3-페닐프로필)숙시닐]-L-류실]-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.17 g을 수득한다. Rf(디클로로메탄중의 5% 메탄올) 0.47, MS:(M+H)⁺693.

실시예 27

메탄올 25㎖중의 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-[(3-메틸-2,5-디옥소-1-이미다졸리디닐)메틸]숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.25g 을 6 시간동안 5% 팔라듐/탄소 100㎎ 의 존재하에 수소화시킨다. 촉매를 여과하고 여액을 증발시켜 백색 고체로서 [4-(N-하이드록시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-[(3-메틸-2,5-디옥소-1-이미다졸리디닐)메틸]숙시닐-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.16 g을 제조한다: Rf(디클로로메탄중의 10% 메탄올) 0 25; MS: (M+H)⁺611.

C₃₀H₅₄N₆O₇O.6H₂O 에 대한 분석

계산치: C, 57.91; H, 8.95; N, 13.51%

실측치: C, 58.17; H, 8.99; N, 13.23%

출발물질을 하기와 같이 제조한다:

실시예 10 (B-D)에 개시된 방법과 유사한 방법으로, 디벤질-3(RS)-3급 부톡시카보닐-2(R)-헵틸숙시네이트 2.0g 및 3-브로모메틸-1-메틸히단토인 0.88g으로 부터 [4-(N-벤질옥시아미노)-2(R)-헵틸-3(R 또는 S)-[(3-메틸-2,5-디옥소-1-이미다졸리디닐)메틸]숙시닐]-L-류실-L-류신 에틸아미드(디아스테레오이성체 1) 0.28g을 수득한다. Rf(디클로로메탄중의 10% 메탄올)0.7; MS:(M+H)⁺701.

하기 실시예들은 본 발명에 의해 제공된 하이드록삼산 유도체를 함유하는 약학 제제를 예시한다.

실시예 A

하기 성분들을 함유하는 정제를 통상적인 방식으로 제조할 수도 있다:

실시예 B

하기 성분들을 함유하는 캡슐을 통상적인 방식으로 제조할 수도 있다:

Claims

하기 일반식(I)의 화합물 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염:

상기 식에서,

R¹은 C₂-C₇직쇄 또는 분지쇄 알킬을 나타내고;

R²는 수소, C₁-C₆알킬, 또는 일반식 -(CH₂)_n-페닐 또는 -(CH₂)_n-Het 의 기를 나타내고, 이때 n 은 1 내지 4 이고, Het 는 프탈이미도 또는 3-(C₁-C₆알킬)-2,5-디옥소-1-이미다졸리디닐이고;

R³은 존재하는 임의의 작용기가 보호될 수도 있는 천연 또는 비-천연 α-아미노산의 특성화 기를 나타내나, 단 R³이 수소 또는 비사이클로아릴 메틸렌을 나타내지는 않고;

R⁴는 카복실, (C₁-C₆알콕시)카보닐, 카바모일 또는 (C₁-C₆알킬)카바모일을 나타내고;

R⁵는 존재하는 임의의 작용기가 보호될 수도 있는 천연 α-아미노산의 특성화 기를 나타내고;

R⁶은 수소를 나타내거나; 또는

R⁴, R⁵및 R⁶은 각각 독립적으로 수소 또는 C₁-C₆알킬을 나타낸다.
제 1 항에 따른 화합물 및 치료학적으로 불활성인 담체 물질을 함유하는, 퇴행성 관절 질환의 억제 또는 예방, 또는 침습성 종양, 죽상동맥 경화증 또는 다발성 경화증의 치료를 위한 약제.