KR0176711B1 - 대두유래 아밀라아제 저해제 및 그 제조법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 분자량이 약 1,200이고 아라비노우스, 글루코오스, 갈락토오스 및 헥소사민 등의 당질을 약 70% 포함하는 아밀라아제 저해제 및 75℃에서 60분간 및 25℃에서 10일간의 열처리에 안정성을 나타내며 대두중의 단백질을 황산암모늄으로 제거한 후 분자량 4,000 이상 1,000 이하의 물질을 제거하는 공정을 사용하는 상기 아밀라아제 제조법에 관한 것이다.

Description

대두유래 아밀라아제 저해제 및 그 제조법
이 발명은 대두에 유래하는 아밀라아제 저해제와 그 제조법에 관한 것이다.
종자중에는 효소류와 같이 각각에 특이한 저해제가 공존하고 있다. 그중에서도 대두에 대하여는 종래 상세히 연구되어 있고 아밀라아제 저해제도 예외는 아니다.
이미 보고되어 있는 아밀라아제 저해제의 제조법은 매우 복잡하고 공업적인 사용을 시도하였을 경우, 비용 및 수량 등 다방면에 걸쳐서 여러 가지 제약을 받는다.
이 때문에, 발명자 등은 아밀라아제 저해제 제조법의 간략화를 시도하여 왔다. 그동안, 현재까지 알려져 있지 않던 비단백질성의 아밀라아제 저해제를 발견하고, 그 물질을 동정함과 동시에, 매우 간단한 제조법을 창안하고 그 발명을 완성하였다.
[실시예]
1) 제조법
대두를 2배량의 물에 하룻밤 담그고, 마스트로이더 등의 파쇄기를 사용하여 두유를 얻었다. 여기에 황산암모늄을 포화농도가 50~60% 되도록 가한 후, 침전물을 원심분리 또는 여과에 의하여 제거하였다. 얻어진 용액을 분자 사이즈가 4,000의 필터 또는 모듀울을 사용하여 한외여과하였다. 이 여과액을 더욱 분자 사이즈가 1,000 이하의 필터나 모듀울 또는 역침투압(RO)을 사용하여 농축, 탈염한 후, 동결건조하여 아밀라아제 저해제를 얻었다. 수량은 전대두 1kg당 0.75g 였다.
2) 아밀라아제 저해제 활성
아밀라아제 저해제의 활성은 CM-아밀로오스, DEX 법과 요오드 녹말법의 각법에 준하여 행하였다. 즉 대두에서 얻은 아밀라아제 저해제와 사람의 타액 유래 아밀라아제를 37℃, 30분간 풀 인큐베이션한 후, 기질(CM-아밀로오스 또는 녹말)을 가하여, 37℃, 10분간 반응시켰다. 아밀라아제 저해제 제1단위는 아밀라아제 1단위를 50% 저해하는 활성역가로 하였다.
결과를 표 1에 표시한다.
Figure kpo00001
3) 아밀라아제 저해제의 성상
분자량은 겔여과법에 의하여 구하였다. 즉 아밀라아제 저해제를 0.1M 트리스-염산(pH 7.2)에 용해하고, 동일 완충액으로 평형화한 고속 액체 크로마토그래피 컬럼(Asahipak GS-520)에 부하하고, 동일 완충액을 사용하여 용출하였다. 분자량 표준에는 폴리에틸렌 글리콜 (분자량 20K, 7.5K, 3.0K 및 0.6K)을 사용하였다.
본 물질의 총당함량은 페놀 황산법에 입각하여 행하였다. 구성단당의 분석은 본 물질을 가수분해한 후, NH형의 역상계 컬럼 및 85% 아세트니트릴(이동상용매)을 사용하여 행하였다.
또, 헥소사민의 분석에는 아미노산 분석기를 사용하였다. 결과를 표 2에 표시한다.
Figure kpo00002
열안정성은 다음과 같이 행하였다. 즉 아밀라아제 저해제를 탈이온수에 용해하고 각 온도 조건하에서 전자는 60분간, 후자는 10일간 놓아두고 잔존 아밀라아제 저해제 활성을 촉진하였다. 결과를 표 3 및 표 4에 표시한다.
Figure kpo00003
Figure kpo00004

Claims (4)

  1. 대두를 기원으로 하고 분자량이 약 1,200(겔 여과법)의 폴리사카라이드임을 특징으로 하는 아밀라아제 저해제.
  2. 약 70%의 당질을 포함하고, 구성단당이 아라비노우스, 글루코오스, 갈락토오스 및 헥소사민임을 특징으로 하는 아밀라아제 저해제.
  3. 75℃, 60분간 및 25℃, 10일간의 열처리에 안정성을 표시하는 것을 특징으로 하는 아밀라아제 저해제.
  4. 대두중의 단백질을 황산암모늄으로 제거한 후 분자량 4,000 이상 1,000이하의 물질을 제거하는 공정을 사용하는 것을 특징으로 하는 아밀라아제 저해제의 제조법.
KR1019910005288A 1990-04-06 1991-04-02 대두유래 아밀라아제 저해제 및 그 제조법 KR0176711B1 (ko)

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