JPWO2020100789A1 - インスリン産生細胞の製造方法 - Google Patents
インスリン産生細胞の製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2020100789A1 JPWO2020100789A1 JP2020555671A JP2020555671A JPWO2020100789A1 JP WO2020100789 A1 JPWO2020100789 A1 JP WO2020100789A1 JP 2020555671 A JP2020555671 A JP 2020555671A JP 2020555671 A JP2020555671 A JP 2020555671A JP WO2020100789 A1 JPWO2020100789 A1 JP WO2020100789A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- insulin
- producing
- present
- inhibitor
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 293
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 title claims abstract description 147
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 title claims abstract description 147
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 title claims abstract description 146
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 64
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 160
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 77
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 claims abstract description 75
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 37
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims abstract description 35
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 23
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 18
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims description 36
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 claims description 36
- OHCQJHSOBUTRHG-KGGHGJDLSA-N forskolin group Chemical group C(C)(=O)O[C@H]1[C@H]([C@@H]2[C@@]([C@]3(C(C[C@](O[C@]13C)(C)C=C)=O)O)([C@H](CCC2(C)C)O)C)O OHCQJHSOBUTRHG-KGGHGJDLSA-N 0.000 claims description 32
- 239000000411 inducer Substances 0.000 claims description 30
- 102000001267 GSK3 Human genes 0.000 claims description 28
- XASCINRGTHLHGM-UHFFFAOYSA-N LSM-4550 Chemical group O=C1NC(C2=3)=CC=CC=3C(=O)C3=CC=CC=C3C2=C1NCCC1=CC=CC=C1 XASCINRGTHLHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000012828 PI3K inhibitor Substances 0.000 claims description 20
- 229940043441 phosphoinositide 3-kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 20
- SUZLHDUTVMZSEV-UHFFFAOYSA-N Deoxycoleonol Natural products C12C(=O)CC(C)(C=C)OC2(C)C(OC(=O)C)C(O)C2C1(C)C(O)CCC2(C)C SUZLHDUTVMZSEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- OHCQJHSOBUTRHG-UHFFFAOYSA-N colforsin Natural products OC12C(=O)CC(C)(C=C)OC1(C)C(OC(=O)C)C(O)C1C2(C)C(O)CCC1(C)C OHCQJHSOBUTRHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- DTEKTGDVSARYDS-UHFFFAOYSA-N BI-D1870 Chemical compound N1=C2N(CCC(C)C)C(C)C(=O)N(C)C2=CN=C1NC1=CC(F)=C(O)C(F)=C1 DTEKTGDVSARYDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- AQGNHMOJWBZFQQ-UHFFFAOYSA-N CT 99021 Chemical group CC1=CNC(C=2C(=NC(NCCNC=3N=CC(=CC=3)C#N)=NC=2)C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)=N1 AQGNHMOJWBZFQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 108060006662 GSK3 Proteins 0.000 claims 4
- NFVJNJQRWPQVOA-UHFFFAOYSA-N n-[2-chloro-5-(trifluoromethyl)phenyl]-2-[3-(4-ethyl-5-ethylsulfanyl-1,2,4-triazol-3-yl)piperidin-1-yl]acetamide Chemical compound CCN1C(SCC)=NN=C1C1CN(CC(=O)NC=2C(=CC=C(C=2)C(F)(F)F)Cl)CCC1 NFVJNJQRWPQVOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 abstract description 6
- 238000012546 transfer Methods 0.000 abstract description 5
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 abstract description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 42
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 32
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 29
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 16
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 11
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 11
- -1 Ngn3 Proteins 0.000 description 10
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 10
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 9
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 9
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 8
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 8
- 210000002237 B-cell of pancreatic islet Anatomy 0.000 description 7
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 6
- 108010011459 Exenatide Proteins 0.000 description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 5
- JUFFVKRROAPVBI-PVOYSMBESA-N chembl1210015 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO[C@]3(O[C@@H](C[C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(C)=O)[C@@H](O)C3)C(O)=O)O2)O)[C@@H](CO)O1)NC(C)=O)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CO)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 JUFFVKRROAPVBI-PVOYSMBESA-N 0.000 description 5
- 229960001519 exenatide Drugs 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 5
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 5
- 102100037263 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 Human genes 0.000 description 4
- 102000038624 GSKs Human genes 0.000 description 4
- 108091007911 GSKs Proteins 0.000 description 4
- 101000600756 Homo sapiens 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 Proteins 0.000 description 4
- 101001117146 Homo sapiens [Pyruvate dehydrogenase (acetyl-transferring)] kinase isozyme 1, mitochondrial Proteins 0.000 description 4
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 4
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 4
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 4
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 4
- 239000000306 component Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 4
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 4
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 4
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 4
- FHCSBLWRGCOVPT-UHFFFAOYSA-N AZD2858 Chemical compound C1CN(C)CCN1S(=O)(=O)C1=CC=C(C=2N=C(C(N)=NC=2)C(=O)NC=2C=NC=CC=2)C=C1 FHCSBLWRGCOVPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 3
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 210000002571 pancreatic alpha cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- JWZZKOKVBUJMES-UHFFFAOYSA-N (+-)-Isoprenaline Chemical compound CC(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 JWZZKOKVBUJMES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N (3z)-3-(3-oxo-1h-indol-2-ylidene)-1h-indol-2-one Chemical compound N/1C2=CC=CC=C2C(=O)C\1=C1/C2=CC=CC=C2NC1=O CRDNMYFJWFXOCH-YPKPFQOOSA-N 0.000 description 2
- SQWZFLMPDUSYGV-POHAHGRESA-N (5Z)-5-(quinoxalin-6-ylmethylidene)-1,3-thiazolidine-2,4-dione Chemical compound S1C(=O)NC(=O)\C1=C\C1=CC=C(N=CC=N2)C2=C1 SQWZFLMPDUSYGV-POHAHGRESA-N 0.000 description 2
- NTSBZVCEIVPKBJ-UHFFFAOYSA-N 1-azakenpaullone Chemical compound C1C(=O)NC2=CC=CN=C2C2=C1C1=CC(Br)=CC=C1N2 NTSBZVCEIVPKBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IKUFKDGKRLMXEX-UHFFFAOYSA-N 2,6-difluoro-4-[4-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl]pyridin-3-yl]phenol Chemical compound C1CN(C)CCN1C1=CC=C(C=2C(=CN=CC=2)C=2C=C(F)C(O)=C(F)C=2)C=C1 IKUFKDGKRLMXEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IUVCFHHAEHNCFT-INIZCTEOSA-N 2-[(1s)-1-[4-amino-3-(3-fluoro-4-propan-2-yloxyphenyl)pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl]ethyl]-6-fluoro-3-(3-fluorophenyl)chromen-4-one Chemical compound C1=C(F)C(OC(C)C)=CC=C1C(C1=C(N)N=CN=C11)=NN1[C@@H](C)C1=C(C=2C=C(F)C=CC=2)C(=O)C2=CC(F)=CC=C2O1 IUVCFHHAEHNCFT-INIZCTEOSA-N 0.000 description 2
- KQDBVHKNIYROHU-UHFFFAOYSA-N 2-[(4-aminopyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)methyl]-5-methyl-3-(2-methylphenyl)quinazolin-4-one Chemical compound CC1=CC=CC=C1N1C(=O)C2=C(C)C=CC=C2N=C1CN1C2=NC=NC(N)=C2C=N1 KQDBVHKNIYROHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IRTDIKMSKMREGO-OAHLLOKOSA-N 2-[[(1R)-1-[7-methyl-2-(4-morpholinyl)-4-oxo-9-pyrido[1,2-a]pyrimidinyl]ethyl]amino]benzoic acid Chemical compound N([C@H](C)C=1C=2N(C(C=C(N=2)N2CCOCC2)=O)C=C(C)C=1)C1=CC=CC=C1C(O)=O IRTDIKMSKMREGO-OAHLLOKOSA-N 0.000 description 2
- QINPEPAQOBZPOF-UHFFFAOYSA-N 2-amino-n-[3-[[3-(2-chloro-5-methoxyanilino)quinoxalin-2-yl]sulfamoyl]phenyl]-2-methylpropanamide Chemical compound COC1=CC=C(Cl)C(NC=2C(=NC3=CC=CC=C3N=2)NS(=O)(=O)C=2C=C(NC(=O)C(C)(C)N)C=CC=2)=C1 QINPEPAQOBZPOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VPVLEBIVXZSOMQ-UHFFFAOYSA-N 3-[[6-(3-aminophenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl]oxy]phenol Chemical compound NC1=CC=CC(C=2NC3=NC=NC(OC=4C=C(O)C=CC=4)=C3C=2)=C1 VPVLEBIVXZSOMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RXRZPHQBTHQXSV-UHFFFAOYSA-N 5-(2-amino-8-fluoro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)-n-tert-butylpyridine-3-sulfonamide Chemical compound CC(C)(C)NS(=O)(=O)C1=CN=CC(C2=CN3N=C(N)N=C3C(F)=C2)=C1 RXRZPHQBTHQXSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007730 Akt signaling Effects 0.000 description 2
- CWHUFRVAEUJCEF-UHFFFAOYSA-N BKM120 Chemical compound C1=NC(N)=CC(C(F)(F)F)=C1C1=CC(N2CCOCC2)=NC(N2CCOCC2)=N1 CWHUFRVAEUJCEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUSYGBPHQBWGAD-PJSUUKDQSA-N Carnosol Chemical compound CC([C@@H]1C2)(C)CCC[C@@]11C(=O)O[C@@H]2C2=C1C(O)=C(O)C(C(C)C)=C2 XUSYGBPHQBWGAD-PJSUUKDQSA-N 0.000 description 2
- 241000938605 Crocodylia Species 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- YUYJEQHNWKQNBT-UHFFFAOYSA-N FC1=C(C(=CC(=C1)C=1C=NC=CC=1C1=CC=C(C=C1)N1CCOCC1)F)O Chemical compound FC1=C(C(=CC(=C1)C=1C=NC=CC=1C1=CC=C(C=C1)N1CCOCC1)F)O YUYJEQHNWKQNBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- FCKJZIRDZMVDEM-UHFFFAOYSA-N N-(7,8-dimethoxy-2,3-dihydro-1H-imidazo[1,2-c]quinazolin-5-ylidene)pyridine-3-carboxamide Chemical compound COC1=C(C2=NC(=NC(=O)C3=CN=CC=C3)N4CCNC4=C2C=C1)OC FCKJZIRDZMVDEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000016222 Pancreatic disease Diseases 0.000 description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- JDSJDASOXWCHPN-UHFFFAOYSA-N TDZD-8 Chemical compound O=C1N(C)SC(=O)N1CC1=CC=CC=C1 JDSJDASOXWCHPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HGVNLRPZOWWDKD-UHFFFAOYSA-N ZSTK-474 Chemical compound FC(F)C1=NC2=CC=CC=C2N1C(N=1)=NC(N2CCOCC2)=NC=1N1CCOCC1 HGVNLRPZOWWDKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000012574 advanced DMEM Substances 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 210000001593 brown adipocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000001054 cardiac fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- VIRRLEDAYYYTOD-YHEOSNBFSA-N colforsin daropate hydrochloride Chemical compound Cl.O[C@H]([C@@]12C)CCC(C)(C)[C@@H]1[C@H](OC(=O)CCN(C)C)[C@H](OC(C)=O)[C@]1(C)[C@]2(O)C(=O)C[C@](C)(C=C)O1 VIRRLEDAYYYTOD-YHEOSNBFSA-N 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 2
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- CRDNMYFJWFXOCH-UHFFFAOYSA-N isoindigotin Natural products N1C2=CC=CC=C2C(=O)C1=C1C2=CC=CC=C2NC1=O CRDNMYFJWFXOCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QQUXFYAWXPMDOE-UHFFFAOYSA-N kenpaullone Chemical compound C1C(=O)NC2=CC=CC=C2C2=C1C1=CC(Br)=CC=C1N2 QQUXFYAWXPMDOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 2
- YAEMHJKFIIIULI-UHFFFAOYSA-N n-(4-methoxybenzyl)-n'-(5-nitro-1,3-thiazol-2-yl)urea Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1CNC(=O)NC1=NC=C([N+]([O-])=O)S1 YAEMHJKFIIIULI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 2
- RZGBUJXSKLDAFE-QYHUGZLJSA-N pacap 1-27 Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)C1=CN=CN1 RZGBUJXSKLDAFE-QYHUGZLJSA-N 0.000 description 2
- 208000024691 pancreas disease Diseases 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 150000003906 phosphoinositides Chemical class 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 2
- 210000003954 umbilical cord Anatomy 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- UFBTYTGRUBUUIL-KPKJPENVSA-N (5e)-5-[[5-(4-fluorophenyl)furan-2-yl]methylidene]-1,3-thiazolidine-2,4-dione Chemical compound C1=CC(F)=CC=C1C(O1)=CC=C1\C=C\1C(=O)NC(=O)S/1 UFBTYTGRUBUUIL-KPKJPENVSA-N 0.000 description 1
- ZGRDYKFVDCFJCZ-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[5-[5-amino-6-(5-tert-butyl-1,3,4-oxadiazol-2-yl)pyrazin-2-yl]-1-ethyl-1,2,4-triazol-3-yl]piperidin-1-yl]-3-hydroxypropan-1-one Chemical compound CCN1N=C(C2CCN(CC2)C(=O)CCO)N=C1C(N=1)=CN=C(N)C=1C1=NN=C(C(C)(C)C)O1 ZGRDYKFVDCFJCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XFYYQDHEDOXWGA-UHFFFAOYSA-N 4-[(5-bromopyridin-2-yl)amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)NC1=CC=C(Br)C=N1 XFYYQDHEDOXWGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BLTVBQXJFVRPFK-UHFFFAOYSA-N AZD1080 Chemical compound OC=1NC2=CC=C(C#N)C=C2C=1C(N=C1)=CC=C1CN1CCOCC1 BLTVBQXJFVRPFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 102100027052 Bone morphogenetic protein receptor type-1B Human genes 0.000 description 1
- MDZCSIDIPDZWKL-UHFFFAOYSA-N CHIR-98014 Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C(N)=NC(NCCNC=2N=C(C(=CN=2)N2C=NC=C2)C=2C(=CC(Cl)=CC=2)Cl)=C1 MDZCSIDIPDZWKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N Carnosic acid Natural products CC([C@@H]1CC2)(C)CCC[C@]1(C(O)=O)C1=C2C=C(C(C)C)C(O)=C1O QRYRORQUOLYVBU-VBKZILBWSA-N 0.000 description 1
- MMFRMKXYTWBMOM-UHFFFAOYSA-N Carnosol Natural products CCc1cc2C3CC4C(C)(C)CCCC4(C(=O)O3)c2c(O)c1O MMFRMKXYTWBMOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- CRDNMYFJWFXOCH-BUHFOSPRSA-N Couroupitine B Natural products N\1C2=CC=CC=C2C(=O)C/1=C1/C2=CC=CC=C2NC1=O CRDNMYFJWFXOCH-BUHFOSPRSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 108010001483 Glycogen Synthase Proteins 0.000 description 1
- 102000002254 Glycogen Synthase Kinase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010014905 Glycogen Synthase Kinase 3 Proteins 0.000 description 1
- 102000019058 Glycogen Synthase Kinase 3 beta Human genes 0.000 description 1
- 108010051975 Glycogen Synthase Kinase 3 beta Proteins 0.000 description 1
- 101150113453 Gsk3a gene Proteins 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000984546 Homo sapiens Bone morphogenetic protein receptor type-1B Proteins 0.000 description 1
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 108091008611 Protein Kinase B Proteins 0.000 description 1
- 101710183548 Pyridoxal 5'-phosphate synthase subunit PdxS Proteins 0.000 description 1
- 102100033810 RAC-alpha serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 102000003861 Ribosomal protein S6 Human genes 0.000 description 1
- 108090000221 Ribosomal protein S6 Proteins 0.000 description 1
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000001691 amnion Anatomy 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000012752 auxiliary agent Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- CJGYSWNGNKCJSB-YVLZZHOMSA-N bucladesine Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](OC(=O)CCC)[C@@H]2N1C(N=CN=C2NC(=O)CCC)=C2N=C1 CJGYSWNGNKCJSB-YVLZZHOMSA-N 0.000 description 1
- 229960005263 bucladesine Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229950003628 buparlisib Drugs 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 235000004654 carnosol Nutrition 0.000 description 1
- 210000003321 cartilage cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 210000001100 crypt cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940126513 cyclase activator Drugs 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003074 dental pulp Anatomy 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003890 endocrine cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001900 endoderm Anatomy 0.000 description 1
- 210000004039 endoderm cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004696 endometrium Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 150000004160 forskolin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002570 interstitial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 1
- 229960001317 isoprenaline Drugs 0.000 description 1
- 229940126401 izorlisib Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 210000000277 pancreatic duct Anatomy 0.000 description 1
- 230000009996 pancreatic endocrine effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 210000002379 periodontal ligament Anatomy 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229950005769 pilaralisib Drugs 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 230000008672 reprogramming Effects 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 108010038379 sargramostim Proteins 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002363 skeletal muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- PMJIHLSCWIDGMD-UHFFFAOYSA-N tideglusib Chemical compound O=C1SN(C=2C3=CC=CC=C3C=CC=2)C(=O)N1CC1=CC=CC=C1 PMJIHLSCWIDGMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950005284 tideglusib Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000636 white adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- QDLHCMPXEPAAMD-QAIWCSMKSA-N wortmannin Chemical compound C1([C@]2(C)C3=C(C4=O)OC=C3C(=O)O[C@@H]2COC)=C4[C@@H]2CCC(=O)[C@@]2(C)C[C@H]1OC(C)=O QDLHCMPXEPAAMD-QAIWCSMKSA-N 0.000 description 1
- QDLHCMPXEPAAMD-UHFFFAOYSA-N wortmannin Natural products COCC1OC(=O)C2=COC(C3=O)=C2C1(C)C1=C3C2CCC(=O)C2(C)CC1OC(C)=O QDLHCMPXEPAAMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0676—Pancreatic cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0656—Adult fibroblasts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/28—Bone marrow; Haematopoietic stem cells; Mesenchymal stem cells of any origin, e.g. adipose-derived stem cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/33—Fibroblasts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
- C12N5/0602—Vertebrate cells
- C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
- C12N5/0662—Stem cells
- C12N5/0668—Mesenchymal stem cells from other natural sources
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/01—Modulators of cAMP or cGMP, e.g. non-hydrolysable analogs, phosphodiesterase inhibitors, cholera toxin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/30—Hormones
- C12N2501/33—Insulin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/30—Hormones
- C12N2501/335—Glucagon; Glucagon-like peptide [GLP]; Exendin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/70—Enzymes
- C12N2501/72—Transferases (EC 2.)
- C12N2501/727—Kinases (EC 2.7.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/999—Small molecules not provided for elsewhere
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2506/00—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells
- C12N2506/13—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from connective tissue cells, from mesenchymal cells
- C12N2506/1307—Differentiation of animal cells from one lineage to another; Differentiation of pluripotent cells from connective tissue cells, from mesenchymal cells from adult fibroblasts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
- C12N2533/50—Proteins
- C12N2533/54—Collagen; Gelatin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Hematology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
この出願は、2018年11月14日に日本国特許庁に出願された日本国出願番号第2018−213448号の利益を主張するものである。当該日本国出願は、その出願書類(明細書、特許請求の範囲、図面、要約書)の全体が本明細書に明示されているかのように全ての目的で参照により本明細書に援用される。
本発明は、人為的な遺伝子導入を行うことなく、低分子化合物の組み合わせにより体細胞からインスリン産生細胞を効率的に直接分化誘導する方法、即ち、一定の低分子化合物により体細胞からインスリン産生細胞を直接製造することができる新たな製造方法を提供することを主な課題とする。
[1]体細胞から直接分化誘導することによりインスリン産生細胞を製造する方法であって、RSK阻害剤の存在下で体細胞を培養する工程を含むことを特徴とする、インスリン産生細胞の製造方法。
[2]前記工程が、さらにGSK3阻害剤の存在下で体細胞を培養する工程である、上記[1]に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
[3]前記工程が、さらにcAMP誘導剤及び/又はPI3K阻害剤の存在下で体細胞を培養する工程である、上記[1]又は[2]に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
[4]RSK阻害剤がBRD7389又はBI-D1870である、上記[1]〜[3]のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
[5]GSK3阻害剤がCHIR99021である、上記[2]〜[4]のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
[6]cAMP誘導剤がフォルスコリン、又はPI3K阻害剤がLY294002である、上記[3]〜[5]のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
[7]前記体細胞が線維芽細胞又は間葉系幹細胞である、上記[1]〜[6]のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
[8]上記[1]〜[7]のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法から製造される、インスリン産生細胞。
[10]さらにGSK3阻害剤を含む、上記[9]に記載の組成物。
[11]さらにcAMP誘導剤及び/又はPI3K阻害剤を含む、上記[9]又は[10]に記載の組成物。
[12]RSK阻害剤がBRD7389又はBI-D1870である、上記[9]〜[11]のいずれか一項に記載の組成物。
[13]GSK3阻害剤がCHIR99021である、上記[10]〜[12]のいずれか一項に記載の組成物。
[14]cAMP誘導剤がフォルスコリン、又はPI3K阻害剤がLY294002である、上記[11]〜[13]のいずれか一項に記載の組成物。
[15]前記体細胞が線維芽細胞又は間葉系幹細胞である、上記[9]〜[14]のいずれか一項に記載の組成物。
本発明に係る、インスリン産生細胞の製造方法(以下、「本発明製法」という。)は、体細胞から直接分化誘導することによりインスリン産生細胞を製造する方法であって、RSK阻害剤の存在下で体細胞を培養する工程を含むことを特徴とする。
上記阻害剤や誘導剤は、それぞれにおいて、1種を用いても2種以上を併用してもよい。
具体的な上記阻害剤等においては、2種類以上の阻害作用等を有するものもあり得るが、その場合、一つで複数の阻害剤等が存在しているとみなすことができる。
生物の細胞は、体細胞と生殖細胞とに分類できる。本発明製法には、その出発材料として任意の体細胞を使用することができる。体細胞には特に限定はなく、生体から採取された初代細胞、又は株化された細胞の何れでもよい。本発明製法では、分化の種々の段階にある体細胞、例えば、最終分化した体細胞(例、線維芽細胞、臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)、肝細胞(Hepatocytes)、胆管細胞(Biliary cells)、膵α細胞(Pancreatic α cells)、膵腺房細胞(Acinar cells)、膵管腺細胞(Ductal cells)、小腸腺窩細胞(Intestinal crypt cells)など)、最終分化への途上にある体細胞(例、間葉系幹細胞、神経幹細胞、内胚葉前駆細胞など)、又は初期化され多能性を獲得した体細胞を使用することができる。本発明製法に使用できる体細胞としては、任意の体細胞、例えば、造血系の細胞(各種のリンパ球、マクロファージ、樹状細胞、骨髄細胞等)、臓器由来の細胞(肝細胞、脾細胞、膵細胞、腎細胞、肺細胞等)、筋組織系の細胞(骨格筋細胞、平滑筋細胞、筋芽細胞、心筋細胞等)、線維芽細胞、神経細胞、骨芽細胞、軟骨細胞、内皮細胞、間質細胞、脂肪細胞(白色脂肪細胞等)、胚性幹細胞(ES細胞)等が挙げられる。また、これらの細胞の前駆細胞、癌細胞にも本発明製法を適用できる。好ましくは、線維芽細胞又は間葉系幹細胞を使用することができる。
1.2.1 RSK阻害剤
RSK(Ribosomal S6 Protein Kinase)は、広く細胞に発現しており、様々な成長因子に応答するセリン・スレオニンキナーゼの一つである。分子量が70kDaと90kDaのサブファミリーに分かれており、特に90kDaのRSKサブファミリーは、MAPKシグナル伝達経路に属するERKによってリン酸化されることで活性化し、哺乳類では4つの遺伝子が存在している。活性化した90kDaのRSKは、Ribosomal protein S6を含む下流の様々なタンパク質のリン酸化を行い、細胞の生存、細胞増殖、分化などを多様に制御している。
BI−D1870(CAS No.:501437−28−1)
LJH685(CAS No.:1627710-50-2)
LJI308(CAS No.:1627709-94-7)
FMK(CAS No.:821794-92-7)
RMM46(CAS No.:1307896-46-3)
CMK(CAS No.:821794-90-5)
Carnosol(CAS No.:5957-80-2)
Bix 02565(CAS No.:1311367-27-7)
GSK3(glycogen synthase kinase−3、グリコーゲン合成酵素キナーゼ3)は、グリコーゲン合成酵素をリン酸化して不活性化するプロテインキナーゼとして見いだされた。哺乳類では、GSK3は51kDaのα(GSK3α)と47kDaのβ(GSK3β)の二つのアイソフォームに分類される。GSK3は種々のタンパク質をリン酸化する活性を有しており、グリコーゲン代謝のみならず、細胞分裂、細胞増殖等の生理現象にも関わっている。
Kenpaullone(CAS No.:142273−20−9)
A1070722(CAS No.:1384424−80−9)
SB216763(CAS No.:280744−09−4)
CHIR98014(CAS No.:556813−39−9)
TWS119(CAS No.:601514−19−6)
Tideglusib(CAS No.:865854−05−3)
SB415286(CAS No.:264218−23−7)
Bikinin(CAS No.:188011−69−0)
IM−12(CAS No.:1129669−05−1)
1−Azakenpaullone(CAS No.:676596−65−9)
LY2090314(CAS No.:603288−22−8)
AZD1080(CAS No.:612487−72−6)
AZD2858(CAS No.:486424−20−8)
AR−A014418(CAS No.:487021−52−3)
TDZD−8(CAS No.:327036−89−5)
Indirubin(CAS No.:479−41−4)
cAMP(環状アデノシン1リン酸)は、セカンドメッセンジャーとして種々の細胞内シグナル伝達に関わっている物質である。cAMPは、細胞内ではアデニル酸シクラーゼ(adenylate cyclase)によりアデノシン3リン酸(ATP)が環状化されることで生成する。
NKH477(CAS No.:138605−00−2)
PACAP1−27(CAS No.:127317−03−7)
PACAP1−38(CAS No.:137061−48−4)
PI3K(Phosphoinositide 3−kinase)は、イノシトールリン脂質をリン酸化する酵素であり、産生されるホスホイノシチドはPDK1を活性化する。PDK1はさらにAKTをリン酸化し、PDK1/AKTシグナル経路が活性化される。LY294002は、PI3Kに選択的な阻害剤であり、ホスホイノシチドの産生を抑えることでPDK1/AKTシグナル経路の活性化を阻害する。
TGR−1202(CAS No.:1532533−67−7)
PI−103(CAS No.:371935−74−9)
IC−87114(CAS No.:371242−69−2)
Wortmannin(CAS No.:19545−26−7)
ZSTK474(CAS No.:475110−96−4)
AS−605240(CAS No.:648450−29−7)
PIK−90(CAS No.:677338−12−4)
AZD6482(CAS No.:1173900−33−8)
Duvelisib(CAS No.:1201438−56−3)
TG100−115(CAS No.:677297−51−7)
CH5132799(CAS No.:1007207−67−1)
CAY10505(CAS No.:1218777−13−9)
PIK−293(CAS No.:900185−01−5)
CZC24832(CAS No.:1159824−67−5)
Pilaralisib(CAS No.:934526−89−3)
AZD8835(CAS No.:1620576−64−8)
本発明製法における体細胞の培養は、使用する体細胞の種類に応じた培地、温度、その他の条件を選択し、上記の各種の阻害剤(及び、場合により誘導剤ないし活性化剤)の存在下において実施することができる。
本発明製法においては、上記した各種の阻害剤等を含む誘導用培地において体細胞を培養することにより、一段階の培養によって体細胞からインスリン産生細胞を製造することができる。
また、使用する体細胞として培養が容易なものを選択することにより、あらかじめ細胞数を増加させほぼコンフルエントの状態に達した体細胞をインスリン産生細胞に転換することも可能である。従って、スケールアップしたインスリン産生細胞の製造も容易である。
本発明製法の一態様において、分化誘導用培地にインスリンを多く含有して体細胞を培養することが好ましいが、その量としては、例えば5μg/mL以上を挙げることができ、好ましくは20μg/mL以上ないし25μg/mL以上であり、より好ましくは80〜120μg/mLの範囲内である。
基礎となる公知の又は市販の誘導用培地に予め一定のインスリンが含まれている場合には、インスリンが上記の量含有されるようインスリンを添加して調整することができる。
上記した本発明製法により、インスリン産生細胞を含有する細胞集団を得ることができる。本発明製法により製造されるインスリン産生細胞も本発明の範囲内である。本発明製法で製造されるインスリン産生細胞は、最終分化した細胞の他、インスリン産生細胞に分化することが運命づけられた前駆細胞でもよい。
本発明製法により製造されるインスリン産生細胞は、低分子化合物により体細胞から直接誘導される、いわゆる低分子化合物誘導性インスリン産生細胞(ciIPCs)であって、遺伝子導入により分化誘導されるものとは区別される。
本発明製法で製造されるインスリン産生細胞は、さらに、インスリン産生細胞の機能発揮や生着性向上に有効な他の細胞や成分と組み合わせた組成物とすることもできる。
本発明に係る組成物(以下、「本発明組成物」という。)は、体細胞から直接分化誘導することによりインスリン産生細胞を製造するための組成物であって、RSK阻害剤を含むことを特徴とする。
本発明組成物においては、少なくとも上記阻害剤等を含んでいればよく、必要に応じて、任意にさらに他の阻害剤や誘導剤等を含むことができる。
上記阻害剤や誘導剤等は、それぞれにおいて、1種を用いても2種以上を併用してもよい。
具体的な上記阻害剤等においては、2種類以上の阻害作用等を有するものもあり得るが、その場合、一つで複数の阻害剤等を含んでいるとみなすことができる。
上記した阻害剤や誘導剤等の具体例や好ましい例などは、前記と同義である。
本発明組成物に係る培地の一態様において、インスリンを多く含有することが好ましいが、その量としては、例えば5μg/mL以上を挙げることができ、好ましくは20μg/mL以上ないし25μg/mL以上であり、より好ましくは80〜120μg/mLの範囲内である。
基礎となる公知の又は市販の誘導用培地に予め一定のインスリンが含まれている場合には、インスリンが上記の量含有されるようインスリンを添加して本発明組成物を作製することができる。
〜ヒト線維芽細胞からインスリン産生細胞への直接誘導〜
(1)ヒト線維芽細胞
材料としたヒト線維芽細胞はDSファーマバイオメディカル株式会社から購入した。38才のヒト皮膚に由来する線維芽細胞である。
ヒト線維芽細胞を、ゼラチン(Cat#:190−15805,和光純薬工業社製)でコーティングされた35mmディッシュに5×104個ずつ播種し、10%ウシ胎児血清(Fetal bovine serum;FBS)、100U/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシンを添加したDMEM培地(Gibco社製)で、37℃、5%CO2条件下でコンフルエントになるまで培養した。なおDMEMは、ダルベッコ改変イーグル培地(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)を示す。
・分化誘導用培地:10%ウシ胎児血清(FBS、Hyclone社製)を添加又は添加せずに、ITS-X(Cat#:51500056、Gibco社製)、非必須アミノ酸(NEAA:Non-essential amino acids;Cat#:11140050、Gibco社製)、Glutamine(Gibco社製;終濃度2mmol/L)、ニコチンアミド(Cat#:72340−100G、Sigma-Aldrich社製;終濃度10mmol/L)、Exendin-4(Cat#:av120214、Abcam社製;終濃度100ng/mL)、100U/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシン、インスリン(Cat#:093-06351;Wako社製)、及び下記の低分子化合物を添加したAdvanced DMEM/F-12(Cat#:12634010;Gibco社製)。
その後、3日毎に同組成の培地へ培地交換を行いながら、37℃、5% CO2条件下で培養した。
3μM CHIR99021(Cat#:13122,Cayman Chemical)
7.5μM フォルスコリン(Cat#:063−02193,Wako)
1.5μM BRD7389(Cat#:ab146161,Abcam)
5μM LY294002(Cat#:70920,Cayman Chemical)
上記(2)に従って14日間培養した結果を図1〜4に示す。
図中、「4C」は上記4つの低分子化合物を意味し、「3C」は上記4つの低分子化合物の中、CHIR99021、BRD7389、及びフォルスコリンの3種を意味する。「+FBS」は培地中にFBSを存在させたことを示し、「−FBS」は培地中にFBSを存在させなかったことを示す。「+LY294002(20μM)」は培地中にLY294002を終濃度20μMで存在させたことを示し、「−LY294002」は培地中にLY294002を存在させなかったことを示す(即ち、「4C−LY294002」は3Cと同義)。また、「No Compound」は上記4つの低分子化合物を培地中に存在させなかったことを示す。従って、例えば「No Compound−FBS」は、4Cを存在させず、かつFBSも存在さなかった場合の実験結果を、「4C−FBS−LY294002」は、4Cの中、LY294002を存在させず、かつFBSも存在させなかった場合の実験結果を、それぞれ表す。
なお、分化誘導用培地にウシ胎児血清(FBS)を含まない方が、ヒト線維芽細胞から分泌能の高いインスリン産生細胞が得られた。
〜ヒト間葉系幹細胞からインスリン産生細胞への直接誘導〜
(1)ヒト間葉系幹細胞
脂肪組織から単離されたヒト間葉系幹細胞はタカラバイオ株式会社から購入した。
ヒト間葉系幹細胞を、ゼラチン(Cat#:190−15805,和光純薬工業社製)でコーティングされた35mmディッシュに5×104個ずつ播種し、100U/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシンを添加したMesenchymal Stem Cell Growth Medium 2(Cat#:C-28009;タカラバイオ社製)で、37℃、5%CO2条件下でほぼコンフルエントになるまで培養した。
・分化誘導用培地:10%ウシ胎児血清(FBS、Hyclone社製)を添加又は添加せずに、ITS-X(Cat#:51500056、Gibco社製)、非必須アミノ酸(NEAA:Non-essential amino acids;Cat#:11140050、Gibco社製)、Glutamine(Gibco社製;終濃度2mmol/L)、ニコチンアミド(Cat#:72340−100G、Sigma-Aldrich社製;終濃度5mmol/L)、Exendin-4(Cat#:av120214、Abcam社製;終濃度50ng/mL)、100U/mLペニシリン、100μg/mLストレプトマイシン、及び下記の低分子化合物を添加したAdvanced DMEM/F12(Cat#:12634010;Gibco社製)。
なお、誘導用培地にインスリンを120μg/mL含む実験においては、インスリンが120μg/mL含まれるようヒト組換え体インスリン(Cat#:093-06351; Wako)を添加し調整した。
0.5μM CHIR99021(Cat#:13122,Cayman Chemical)
3.75μM フォルスコリン(Cat#:063−02193,Wako)
0.2μM BRD7389(Cat#:ab146161,Abcam)
2.5μM LY294002(Cat#:70920,Cayman Chemical)
上記(2)に従って14日間培養した結果を図5及び図6に示す。
図中、「4C」は上記4つの低分子化合物を意味する。「+FBS」は培地中にFBSを存在させたことを示し、「−FBS」は培地中にFBSを存在させなかったことを示す。「−LY294002」は培地中にLY294002を存在させなかったことを示す(即ち、「4C−LY294002」は3Cと同義)。また、「No compound」は上記4つの低分子化合物を培地中に存在させなかったことを示す。従って、例えば「No Compound−FBS」は、4Cを存在させず、かつFBSも存在させなかった場合の実験結果を、「4C−FBS−LY294002」は、4Cの中、LY294002を存在させず、かつFBSも存在させなかった場合の実験結果を、それぞれ表す。
また、分化誘導用培地にウシ胎児血清(FBS)を含まない方がヒト間葉系幹細胞から分泌能の高いインスリン産生細胞を直接誘導することができた。更に、高濃度(120μg/mL)のインスリンを分化誘導用培地に含有して誘導すると、インスリン分泌量が顕著に増加し、より分泌能の高いインスリン産生細胞がヒト間葉系幹細胞から直接効率的に誘導された。
Claims (15)
- 体細胞から直接分化誘導することによりインスリン産生細胞を製造する方法であって、RSK阻害剤の存在下で体細胞を培養する工程を含むことを特徴とする、インスリン産生細胞の製造方法。
- 前記工程が、さらにGSK3阻害剤の存在下で体細胞を培養する工程である、請求項1に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
- 前記工程が、さらにcAMP誘導剤及び/又はPI3K阻害剤の存在下で体細胞を培養する工程である、請求項1又は2に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
- RSK阻害剤がBRD7389又はBI-D1870である、請求項1〜3のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
- GSK3阻害剤がCHIR99021である、請求項2〜4のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
- cAMP誘導剤がフォルスコリン、又はPI3K阻害剤がLY294002である、請求項3〜5のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
- 前記体細胞が線維芽細胞又は間葉系幹細胞である、請求項1〜6のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法。
- 請求項1〜7のいずれか一項に記載のインスリン産生細胞の製造方法から製造される、インスリン産生細胞。
- 体細胞から直接分化誘導することによりインスリン産生細胞を製造するための組成物であって、RSK阻害剤を含むことを特徴とする、体細胞からインスリン産生細胞を製造するための組成物。
- さらにGSK3阻害剤を含む、請求項9に記載の組成物。
- さらにcAMP誘導剤及び/又はPI3K阻害剤を含む、請求項9又は10に記載の組成物。
- RSK阻害剤がBRD7389又はBI-D1870である、請求項9〜11のいずれか一項に記載の組成物。
- GSK3阻害剤がCHIR99021である、請求項10〜12のいずれか一項に記載の組成物。
- cAMP誘導剤がフォルスコリン、又はPI3K阻害剤がLY294002である、請求項11〜13のいずれか一項に記載の組成物。
- 前記体細胞が線維芽細胞又は間葉系幹細胞である、請求項9〜14のいずれか一項に記載の組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018213448 | 2018-11-14 | ||
JP2018213448 | 2018-11-14 | ||
PCT/JP2019/044058 WO2020100789A1 (ja) | 2018-11-14 | 2019-11-11 | インスリン産生細胞の製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2020100789A1 true JPWO2020100789A1 (ja) | 2021-09-27 |
JP7369347B2 JP7369347B2 (ja) | 2023-10-26 |
Family
ID=70731124
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020555671A Active JP7369347B2 (ja) | 2018-11-14 | 2019-11-11 | インスリン産生細胞の製造方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20210395689A1 (ja) |
EP (1) | EP3882339A4 (ja) |
JP (1) | JP7369347B2 (ja) |
CN (1) | CN113015792A (ja) |
WO (1) | WO2020100789A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPWO2022004822A1 (ja) * | 2020-06-30 | 2022-01-06 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4990446B2 (ja) | 2001-05-28 | 2012-08-01 | 電気化学工業株式会社 | 関節症治療用注入剤 |
EP2857500B1 (en) * | 2012-05-25 | 2018-01-31 | Saitama Medical University | Method for producing pancreatic hormone-producing cell, pancreatic hormone-producing cell, and differentiation/induction promoter |
GB201211606D0 (en) * | 2012-06-29 | 2012-08-15 | Cancer Res Technology | Method for reprogramming somatic cells to pancreatic beta-cells |
US9796962B2 (en) * | 2013-08-07 | 2017-10-24 | Kyoto University | Method for generating pancreatic hormone-producing cells |
EP3521419A4 (en) | 2016-09-30 | 2020-05-27 | Kyoto Prefectural Public University Corporation | METHOD FOR PRODUCING SOMATIC CELLS, SOMATIC CELL AND COMPOSITION |
-
2019
- 2019-11-11 US US17/288,674 patent/US20210395689A1/en active Pending
- 2019-11-11 EP EP19885228.7A patent/EP3882339A4/en active Pending
- 2019-11-11 CN CN201980074904.XA patent/CN113015792A/zh active Pending
- 2019-11-11 WO PCT/JP2019/044058 patent/WO2020100789A1/ja unknown
- 2019-11-11 JP JP2020555671A patent/JP7369347B2/ja active Active
Non-Patent Citations (9)
Title |
---|
CYTOTHERAPY, vol. 15, JPN6023022180, 2013, pages 1228 - 1236, ISSN: 0005073281 * |
ISLETS, vol. 2, JPN6023022179, 2010, pages 112 - 120, ISSN: 0005073280 * |
J. CELL. PHYSIOL., vol. 233, JPN6023022174, February 2018 (2018-02-01), pages 1627 - 1637, ISSN: 0005073278 * |
PNAS, vol. 100, JPN6023022175, 2003, pages 7117 - 7122, ISSN: 0005073279 * |
PNAS, vol. 107, JPN6023022170, 2010, pages 15099 - 15104, ISSN: 0005073277 * |
PNAS, vol. 99, JPN6023022169, 2002, pages 16105 - 16110, ISSN: 0005073285 * |
STEM CELLS, vol. 27, JPN7023002113, 2009, pages 1941 - 1953, ISSN: 0005073282 * |
日本薬理学雑誌, vol. 144, JPN6023022185, 2014, pages 8 - 12, ISSN: 0005073284 * |
昭和大学薬学雑誌, vol. 2, JPN7023002114, 2011, pages 127 - 138, ISSN: 0005073283 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN113015792A (zh) | 2021-06-22 |
WO2020100789A1 (ja) | 2020-05-22 |
EP3882339A1 (en) | 2021-09-22 |
US20210395689A1 (en) | 2021-12-23 |
JP7369347B2 (ja) | 2023-10-26 |
EP3882339A4 (en) | 2022-08-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Pringle et al. | Concise review: Adult salivary gland stem cells and a potential therapy for xerostomia | |
US20220090008A1 (en) | Colony forming medium and use thereof | |
JP6886195B2 (ja) | 体細胞を製造する方法、体細胞、及び組成物 | |
JP2015500810A5 (ja) | ||
JP6968347B2 (ja) | 肝細胞の製造方法 | |
JP2017104091A (ja) | 間葉系細胞の製造方法 | |
JP7406196B2 (ja) | 神経様細胞の製造方法 | |
JP7369347B2 (ja) | インスリン産生細胞の製造方法 | |
JP7369346B2 (ja) | インスリン産生細胞の製造方法、及び組成物 | |
JP7248986B2 (ja) | インスリン産生細胞の製造方法 | |
US20200354680A1 (en) | Method for producing cardiomyocytes | |
Li et al. | Adult stem cells for regenerative medicine: From cell fate to clinical applications | |
GR1009270B (el) | In vitro μεθοδοι αποδιαφοροποιησης των μονοκυτταρων σε βλαστικα κυτταρα, διαφοροποιησης των βλαστικων κυτταρων σε κυτταρα ιστων και οι χρησεις των παραπανω κυτταρων |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220526 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230531 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230719 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230904 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230926 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7369347 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |