JPWO2019198126A1 - 管状細胞構造体培養維持装置および管状細胞構造体維持補助具 - Google Patents

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Abstract

内側に中空部を有する管状の細胞構造体について前記中空部を維持しながら所定期間培養するための棒状の管状細胞構造体維持補助具であって、前記管状細胞構造体維持補助具は、前記細胞構造体の前記中空部に挿入可能であって、前記中空部に挿入された際に前記管状細胞構造体維持補助具が前記細胞構造体の内面に密着可能となる外径と、前記管状細胞構造体維持補助具の両端に開口を有し、その開口の間を貫通する貫通通路と、を備え、前記管状細胞構造体維持補助具は、前記貫通通路から前記管状細胞構造体維持補助具の外面への酸素透過構造を有している管状細胞構造体維持補助具により解決する。

Description

本発明は、内側に中空部を有する管状の細胞構造体の維持装置および維持補助具に関する。
従来、特許文献１に開示されるように、隣接するように接触した細胞塊同士が融合する性質を利用し、基板の法線方向に延在するように予め固定されている複数の針状体からなる支持体を利用し、複数の細胞塊が隣接するように細胞塊（たとえば、スフェロイド）を立体的に積層して立体構造体を作製する手法が知られている。ここで、細胞塊とは、単一細胞を結合培養して、複数の細胞の塊として形成されたものをいう。
この手法では、細胞塊５１を取り出してその支持体の複数の針状体の各々にそれぞれに突き刺して細胞塊が串刺しになった状態を製作する手法が開示されている。たとえば、図４Ａのように、たとえば血管用の細胞構造体５として、針状体を管状にならべて、細胞塊５１をそれぞれに穿刺させるものである。一定の時間培養すると、図４Ｂのように、隣接する細胞塊５１が融合して、針状体５２には管状の細胞構造体５が形成される。そして、図４Ｃのように、細胞構造体５を針状体５２から抜き去ると、長さＬの管状の内側に中空部を有する管状の細胞構造体５が取り出される。
特許第４５１７１２５号明細書
細胞構造体５を構成する細胞は隣接する細胞と融合する性質がある。したがって、管状の細胞構造体５を針状体５２から抜き去って自立させ、細胞構造体５の各細胞が死滅することなく所定期間だけ細胞構造体５を保存する際には、細胞構造体５の外表面と内表面に万遍なく酸素を含んだ培養液を行き渡らせる必要がある。また、さらには、その際に、細胞構造体５の中で、対向する管壁同士が接すると、その接触部の細胞が融合して管路が封鎖してしまう問題がある。
内側に中空部を有する管状の細胞構造体について前記中空部を維持しながら所定期間培養するための棒状の管状細胞構造体維持補助具であって、前記管状細胞構造体維持補助具は、前記細胞構造体の前記中空部に挿入可能であって、前記中空部に挿入された際に前記管状細胞構造体維持補助具が前記細胞構造体の内面に密着可能となる外径と、前記管状細胞構造体維持補助具の両端に開口を有し、その開口の間を貫通する貫通通路と、を備え、前記管状細胞構造体維持補助具は、前記貫通通路から前記管状細胞構造体維持補助具の外面への酸素透過構造を有している管状細胞構造体維持補助具により、解決する。
内側に中空部を有する管状の細胞構造体について前記中空部を維持しながら所定期間培養するための管状細胞構造体培養維持装置であって、前記管状細胞構造体培養維持装置は、培養液を満たした培養チャンバであって、その培養液を前記培養チャンバの内部に導入する第一入口および第二入口と、その培養液を前記培養チャンバから排出する第一出口および第二出口と、を備える培養チャンバと、前記培養液を還流させるポンプと、前記第一出口から前記ポンプを経由して前記第一入口に流体的に連通する第一管路と、前記第二出口から前記ポンプを経由して前記第二入口に流体的に連通して第二管路と、前記細胞構造体の前記中空部に挿入可能な棒状体であって、前記棒状体の両端に開口を有し、その開口の間を貫通する貫通通路と、を有する棒状体と、前記第二入口に取り付け可能なアダプタであって、前記貫通通路の一方の開口に挿入されて前記第二入口と流体的に連通可能なアダプタとを備え、前記棒状体は、前記貫通通路から前記棒状体の外面への酸素透過構造を有し、前記中空部に挿入された際に前記棒状体が前記細胞構造体の内面に密着可能な外径を備える管状細胞構造体培養維持装置により解決する。
本発明によれば管状の細胞構造体の中空部を封鎖させることなく維持することが可能となる。
本発明における管状細胞構造体培養維持装置を示した図である。 本発明における管状細胞構造体維持補助具を示した図であって、管状細胞構造体培養維持装置に取り付けられている状態を示した図である。 本発明における管状細胞構造体培養維持装置を示した図であって、管状細胞構造体培養維持装置から分離された状態を示した図である。 細胞構造体を形成する工程において、細胞塊を針状体に穿刺した状態を示した模式図である。 細胞構造体を形成する工程において、隣接した細胞塊が融合して細胞構造体が形成された状態を示した模式図である。 細胞構造体を形成する工程において、形成された細胞構造体を針状体から抜き去る上程を示した状態を示した模式図である。
まず、図１から図３を参照して、本発明の管状細胞構造体培養維持装置１について説明する。図１は本発明の実施の形態の管状細胞構造体培養維持装置１の概略図である。管状細胞構造体培養維持装置１は、管状の細胞構造体５の維持補助具たる棒状体２と、培養チャンバ３と、ポンプ４と、第一管路６と、第二管路７と、アダプタ８とを備える。図２は棒状体２を示した図であって、管状細胞構造体培養維持装置１に取り付けられている状態の図を示している。また、図３は棒状体２を示した図であって、管状細胞構造体培養維持装置１から取り外された状態の図を示している。細胞構造体５は、たとえば図４Ａから図４Ｃおよび前記のとおりの工程で形成されたもので、細胞構造体５の内側に、断面の円形状の中空部を有する管状の構造をしている。この明細書では、細胞構造体５の断面の円形状の中空部の半径をＲとして説明する。
培養チャンバ３は密閉された容器であり、内部は培養液３ａで満たされている。培養チャンバ３は、その培養液３ａを培養チャンバ３の内部に導入する第一入口６ｄおよび第二入口７ｄと、その培養液３ａを培養チャンバ３から排出する第一出口６ｃおよび第二出口７ｃとを備える。管状細胞構造体培養維持装置１は、第一出口６ｃからポンプ４を経由して第一入口６ｄに流体的に連通する第一管路６と、第二出口７ｃからポンプ４を経由して第二入口７ｄに流体的に連通する第二管路７とを備えている。培養液３ａは、第一管路６と第二管路７の内部をポンプ４の駆動力で還流する。第一管路６は主に細胞構造体５の内部に培養液３ａを供給するためのものであり、第二管路７は主に細胞構造体５の外部に培養液３ａを行き渡らせるためのものである。
すなわち、培養液３ａで満たされた培養チャンバ３を始点にみると、培養液３ａは第一出口６ｃから第一管路６ｂに流れ出てポンプ４に向かう。また、培養液３ａは第二出口７ｃから第二管路７ｂに流れ出てポンプ４に向かう。その後、ポンプ４にて必要な栄養と酸素が供給された培養液３ａは、ポンプ４の駆動力で、第一管路６ａから第一入口６ｄを経て培養チャンバ３に戻る。また、第二管路７ａから第二入口７ｄを経て培養チャンバ３に戻る。第二入口７ｄ、第一出口６ｃ、第二出口７ｃは、開放端部である。第一入口６ｄにはアダプタ８が取り付けられている。
棒状体２は、断面が円の細長い円筒状の部材である。棒状体２の外径はＲである。細胞構造体５の維持を行う段階で、棒状体２を細胞構造体５に挿入すると、細胞構造体５の内径は棒状体２の外径Ｒより若干大きい。しかし、細胞構造体５の内径は、培養した状態での時間の経過にしたがって細胞構造体５を構成する細胞が成熟する過程で徐々に収縮する性質があるので、棒状体２は、細胞構造体５と棒状体２との間にぴったりと隙間無く細胞構造体５に挿嵌される。その内部には、棒状体２の一端から他端までに至る棒状体２の長手方向の軸方向に沿って貫通するような管路２ａを有する。棒状体２の長さは、棒状体２は、少なくとも細胞構造体５の長さよりも長い。棒状体２の先端２ｂは細胞構造体５の中空部が挿入しやすいようにテーパ形状になっている。
棒状体２は、管路２ａと棒状体２の外表面との間に酸素透過性を有するような構造を有している。たとえば、フッ素系樹脂材料の棒状体２の管路２ａと棒状体２の外表面との間に酸素透過用の小さい貫通孔を穿設させてもよい。または、酸素透過用の小さい貫通孔を配置させることなく、ジメチルポリシロキサン（ＰＤＭＳ）のような酸素透過性材料としてもよい。酸素が溶解した培養液３ａを管路２ａ内に導入することで、その培養液３ａの通過において、酸素が棒状体２の外表面に至って細胞構造体５の全長に行きわたって、細胞構造体５が内面から酸素を受け入れることができる。
棒状体２のテーパが配置された先端２ｂに対して反対側の根元となる後端２ｃはアダプタ８に嵌合可能な構造となっている。棒状体２の後端２ｃにおける管路２ａにはアダプタ８の嵌合口８ａが容易に挿嵌可能であるので、ワンタッチで挿入することが可能となる。たとえば、図２のように、棒状体２はアダプタ８を介して第一入口６ｄに取り付けられるとともに、図３のように容易に棒状体２はアダプタ８を介して第一入口６ｄから取り外すことが可能である。
続いて、管状細胞構造体培養維持装置１および管状細胞構造体維持補助具たる棒状体２を如何に使用するかを説明する。まず、従来の技術で説明した方法に基づき、管状の細胞構造体５を形成させる。そして、棒状体２を管状の細胞構造体５の中空部に挿入して、細胞構造体５との内面が棒状体２の外周面に密着させる。この状態で、棒状体２が細胞構造体５の中空部に挿入された状態で、アダプタ８を介して第一入口６ｄに取り付けて管状細胞構造体培養維持装置１の中に設置し、管状細胞構造体培養維持装置１により、酸素を透過した培養液３ａを棒状体２の管路２ａ内を通して、細胞構造体５の内外を培養液３ａに浸して所定の期間だけ培養して成熟させる。その間の細胞構造体５には十分な培養液３ａが補給される。
１ 管状細胞構造体培養維持装置
２ 棒状体
２ａ 管路
２ｂ 先端
２ｃ 後端
３ 培養チャンバ
３ａ 培養液
４ ポンプ
５ 細胞構造体
６ 第一管路
７ 第二管路
８ アダプタ
８ａ 嵌合口

Claims (8)

  1. 内側に中空部を有する管状の細胞構造体について前記中空部を維持しながら所定期間培養するための棒状の管状細胞構造体維持補助具であって、前記管状細胞構造体維持補助具は、
    前記細胞構造体の前記中空部に挿入可能であって、前記中空部に挿入された際に前記管状細胞構造体維持補助具が前記細胞構造体の内面に密着可能となる外径と、
    前記管状細胞構造体維持補助具の両端に開口を有し、その開口の間を貫通する貫通通路と、を備え、
    前記管状細胞構造体維持補助具は、前記貫通通路から前記管状細胞構造体維持補助具の外面への酸素透過構造を有している管状細胞構造体維持補助具。
  2. 請求項１に記載の管状細胞構造体維持補助具であって、
    前記酸素透過構造は前記管状細胞構造体維持補助具が酸素透過性材料による管状細胞構造体維持補助具。
  3. 請求項２に記載の管状細胞構造体維持補助具であって、
    前記酸素透過性材料は、ジメチルポリシロキサンである管状細胞構造体維持補助具。
  4. 請求項１に記載の管状細胞構造体維持補助具であって、
    前記管状細胞構造体維持補助具は、フッ素系樹脂材料でできていて、前記酸素透過構造は前記貫通通路から前記管状細胞構造体維持補助具の外面へ穿設された孔である管状細胞構造体維持補助具。
  5. 内側に中空部を有する管状の細胞構造体について前記中空部を維持しながら所定期間培養するための管状細胞構造体培養維持装置であって、前記管状細胞構造体培養維持装置は、
    培養液を満たした培養チャンバであって、その培養液を前記培養チャンバの内部に導入する第一入口および第二入口と、その培養液を前記培養チャンバから排出する第一出口および第二出口と、を備える培養チャンバと、
    前記培養液を還流させるポンプと、
    前記第一出口から前記ポンプを経由して前記第一入口に流体的に連通する第一管路と、
    前記第二出口から前記ポンプを経由して前記第二入口に流体的に連通して第二管路と、
    前記細胞構造体の前記中空部に挿入可能な棒状体であって、前記棒状体の両端に開口を有し、その開口の間を貫通する貫通通路と、を有する棒状体と、
    前記第二入口に取り付け可能なアダプタであって、前記貫通通路の一方の開口に挿入されて前記第二入口と流体的に連通可能なアダプタとを備え、
    前記棒状体は、前記貫通通路から前記棒状体の外面への酸素透過構造を有し、前記中空部に挿入された際に前記棒状体が前記細胞構造体の内面に密着可能な外径を備える管状細胞構造体培養維持装置。
  6. 請求項５に記載の管状細胞構造体培養維持装置であって、
    前記酸素透過構造は前記棒状体が酸素透過性材料による管状細胞構造体培養維持装置。
  7. 請求項６に記載の管状細胞構造体培養維持装置であって、
    前記酸素透過性材料は、ジメチルポリシロキサンである管状細胞構造体培養維持装置。
  8. 請求項５に記載の管状細胞構造体培養維持装置であって、
    前記棒状体は、フッ素系樹脂材料でできていて、前記酸素透過構造は前記貫通通路から前記棒状体の外面へ穿設された孔である管状細胞構造体培養維持装置。
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