JPWO2017086443A1 - ６’−シアリルラクトースナトリウム塩の結晶およびその製造方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、取り扱いしやすく、常温および高温条件下における保存安定性が高い、６’−シアリルラクトース（以下、６ＳＬという）の結晶を提供すること、およびその製造方法を提供することを目的とする。本発明は、６ＳＬナトリウム塩の結晶、および該結晶の製造方法に関する。

Description

本発明は、例えば、健康食品、医薬品若しくは化粧品等の製品、原料または中間体等として有用である６’−シアリルラクトースナトリウム塩の結晶、および該結晶の製造方法に関する。

６’−シアリルラクトース[Ｏ−（Ｎ−ａｃｅｔｙｌ−α−ｎｅｕｒａｍｉｎｏｓｙｌ）−（２→６）−Ｏ−β−Ｄ−ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ−（１→４）−Ｄ−Ｇｌｕｃｏｓｅ]（以下、６ＳＬという。）は、シアル酸とラクトースが結合した酸性オリゴ糖である。

６ＳＬは、例えば、健康食品、医薬品若しくは化粧品等の製品、原料または中間体等として有用である。６ＳＬは、ヒト母乳に含まれる重要なオリゴ糖の１つであり、ウイルス若しくは細菌に対する感染防御作用、または乳酸菌増殖活性のような生理活性があるとされている。

６ＳＬの精製方法としては、ゲルろ過カラム（非特許文献１および２）、疑似移動床式クロマト分離装置（特許文献１）等による手法が開示されている。また、特許文献２〜４には、６ＳＬ塩の結晶が取得されたとの記載はあるが、取得された結晶の性質に関する記載はなく、実際に６ＳＬの塩の結晶を取得しうる方法は知られていない。

日本国特開平０８−２５２４０３号公報 日本国特表平１０−５１３４３７号公報 国際公開第２０１０／１１６３１７号 国際公開第２０１１／１００９７９号

Carbohydrate Research., Vol. 337, p473, 2002 Carbohydrate Research., Vol. 345, p1394, 2010

本発明は、取り扱いしやすく、常温および高温条件下における保存安定性が高い、６ＳＬの結晶を提供すること、およびその製造方法を提供することを目的とする。

本発明は、以下の（１）〜（２１）に関する。
（１）６’−シアリルラクトース（以下、６ＳＬという）ナトリウム塩の結晶。
（２）６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶（ただし、ｎは０〜５の任意の数字を表し、ｎ＝０の場合は、６ＳＬナトリウム塩・無水物という）である、上記（１）の結晶。
（３）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、６．７±０．２°、１３．３±０．２°、１７．７±０．２°、１８．５±０．２°、および２０．０±０．２°にピークを有する、上記（２）の結晶。
（４）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、さらに、１６．５±０．２°、２１．３±０．２°、２１．８±０．２°、２３．６±０．２°、および２８．８±０．２°にピークを有する、上記（３）の結晶。
（５）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、さらに、１７．３±０．２°、２３．９±０．２°、２４．０±０．２°、２５．７±０．２°、および２６．７±０．２°にピークを有する、上記（４）の結晶。
（６）アルコール溶液に６ＳＬナトリウム塩のアモルファスを溶解させる工程、該溶液を静置または撹拌することにより、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程、および該溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶の製造法［ｎは上記（２）と同義］。
（７）ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、種晶として６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を添加する工程、該水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程、および該水溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶の製造法［ｎは上記（２）と同義］。
（８）前記水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程が、該水溶液にアルコール溶液を添加または滴下することにより、該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程である、上記（７）の製造法。
（９）前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を乾燥する工程、をさらに含む上記（６）〜（８）のいずれか１つの製造法。
（１０）前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶が下記（i）〜（iii）のいずれか１に記載の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶である上記（６）〜（９）のいずれか１つの製造法。
（i）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が６．７±０．２°、１３．３±０．２°、１７．７±０．２°、１８．５±０．２°、および２０．０±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
（ii）粉末Ｘ線回折において、前記（i）に記載の回折角（２θ）におけるピークに加えて、回折角（２θ）が、さらに１６．５±０．２°、２１．３±０．２°、２１．８±０．２°、２３．６±０．２°、および２８．８±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
（iii）粉末Ｘ線回折において、前記（i）および（ii）に記載の回折角（２θ）におけるピークに加えて、回折角（２θ）が、さらに１７．３±０．２°、２３．９±０．２°、２４．０±０．２°、２５．７±０．２°、および２６．７±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
（１１）前記アルコール溶液が、Ｃ１〜Ｃ６のアルコールの溶液である、上記（６）および（８）〜（１０）のいずれか１つの製造法。
（１２）前記Ｃ１〜Ｃ６のアルコールがメタノールである上記（１１）の製造法。
（１３）前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶が６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶である上記（１２）の製造法。
（１４）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、５．９±０．２°、１１．７±０．２、２０．１±０．２°、２１．０±０．２°、および２３．６±０．２°にピークを有する、上記（２）の結晶。
（１５）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、さらに、１７．８±０．２°、１４．５±０．２°、１７．４±０．２°、１９．７±０．２°、および２４．６±０．２°にピークを有する、上記（１４）の結晶。
（１６）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、さらに、１４．９±０．２°、１８．９±０．２°、２２．１±０．２°、２８．３±０．２°、および３１．５±０．２°にピークを有する、上記（１５）の結晶。
（１７）ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを溶解することにより、該水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を析出させる工程、および該水溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の製造法［ｎは上記（２）と同義］。
（１８）ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、種晶として６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を添加する工程、該水溶液にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを添加または滴下することにより６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を析出させる工程、および該水溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の製造法［ｎは上記（２）と同義］。
（１９）前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶が下記の（iv）〜（vi）のいずれか１に記載の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶である上記（１７）または（１８）の製造法。
（iv）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、５．９±０．２°、１１．７±０．２°、２０．１±０．２°、２１．０±０．２°、および２３．６±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
（v）粉末Ｘ線回折において、前記（iv）に記載の回折角（２θ）におけるピークに加えて、回折角（２θ）が、さらに１７．８±０．２°、１４．５±０．２°、１７．４±０．２°、１９．７±０．２°、および２４．６±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
（vi）粉末Ｘ線回折において、前記（iv）および（v）に記載の回折角（２θ）におけるピークに加えて、回折角（２θ）が、さらに１４．９±０．２°、１８．９±０．２°、２２．１±０．２°、２８．３±０．２°、および３１．５±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
（２０）６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶である、上記（１）の結晶。
（２１）単結晶Ｘ線構造解析において、−１７３℃にて測定した場合、次の概略的単位胞パラメーター：ａ＝９．０６９５Å；ｂ＝１２．４１４６Å；ｃ＝１４．６１７７Å；α＝７１．３２６°；β＝７９．９７２°；γ＝１４．６１７７°；Ｖ＝１５３３．３Å^３；Ｚ＝１；を有し、かつ空間群がＰ１；である、上記（２０）の結晶。

本発明により、取り扱いしやすく、常温および高温条件下における保存安定性が高い、６ＳＬの結晶およびその製造方法が提供される。

図１は、実施例１で得られた、６ＳＬナトリウム塩・４．０水和物結晶の粉末Ｘ線回折の結果を表わす。 図２は、実施例２で得られた、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶の粉末Ｘ線回折の結果を表わす。 図３は、実施例２で得られた、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶の赤外分光（ＩＲ）分析の結果を表わす。 図４は、実施例３で得られた、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶の熱重量示差熱分析（ＴＧ・ＤＴＡ）の結果を表わす。 図５は、実施例３で得られた、６ＳＬナトリウム塩・３．３水和物結晶の粉末Ｘ線回折の結果を表わす。 図６は、実施例４で得られた、６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶の単結晶Ｘ線構造解析のＯＲＴＥＰ図を表わす。 図７は、実施例５で得られた、６ＳＬナトリウム塩・２．７水和物結晶の粉末Ｘ線回折の結果を表わす。 図８は、実施例７で得られた、６ＳＬナトリウム塩・２．３水和物結晶の粉末Ｘ線回折の結果を表わす。

１．本発明の結晶
本発明の結晶は、６ＳＬナトリウム塩の結晶である。
本発明の結晶としては、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物（ただし、ｎは０〜５の任意の数字、好ましくは０より大きく且つ５以下の任意の数字、より好ましくは０より大きく且つ５以下の任意の少数第一位までの数字である。ｎ＝０の場合は、６ＳＬナトリウム塩・無水物という）の結晶、および６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶が挙げられる。

本発明の結晶が６ＳＬの結晶であることは、後述の分析例に記載のＨＰＬＣを用いた方法により確認することができる。

本発明の結晶がナトリウム塩の結晶であることは、当該結晶中に含まれるナトリウム含量を、後述の分析例に記載の原子吸光光度計を用いて測定することにより確認することができる。

例えば、本発明の結晶が１ナトリウム塩の結晶であることは、該結晶中のナトリウム含量が、通常３．５±１．０重量％、好ましくは３．５±０．５重量％、最も好ましくは３．５±０．３重量％であることにより確認することができる。

本発明の結晶がｎ水和物結晶であることは、後述の分析例に記載のカールフィッシャー法を用いて測定した水分含量が、通常０．０〜１２．０重量％であることにより確認することができる。

６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶は、水と水以外の１種以上の溶媒で形成されるものであればよく、水と水以外の１種の溶媒により形成されるものが好ましい。水と水以外の１種以上の溶媒で形成される溶媒和物結晶を構成する、水以外の溶媒としては、アルコール（例えば、メタノール、エタノール、プロパノールまたはイソプロパノールなど）を挙げることができ、好ましくはメタノールを挙げることができる。

本発明において、例えば、「水と水以外の溶媒から形成される溶媒和物結晶」である場合は「水和物・溶媒和物結晶」と、「水とメタノールとから形成される溶媒和物結晶」である場合は「水和物・メタノール和物結晶」等と表す。

水と１種以上の溶媒で形成される水和物・溶媒和物結晶において、６ＳＬナトリウム塩１モルに対する、水と溶媒の総量のモル比は通常０．６モル〜６モルとすることが好ましい。水と１種以上の溶媒で形成される水和物・溶媒和物結晶において、水と溶媒の構成比は特に限定されず、例えば、水和物・アルコール和物結晶の場合、水：アルコール＝０．５：１〜５０：１の範囲とすることが好ましい。

水と１種以上の溶媒で形成される水和物・溶媒和物結晶としては、水和物・メタノール和物結晶が好ましく、具体例としては、０．５〜５水和物・０．１〜１メタノール和物結晶が挙げられ、２．５水和物・０．５メタノール和物の結晶が特に好ましい。

本発明の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶としては、Ｘ線源としてＣｕＫαを用いた粉末Ｘ線回折パターンが、図１および表１に示す値で規定される６ＳＬナトリウム塩・４．０水和物結晶、図２および表２に示す値で規定される６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶、図５および表６に示す値で規定される６ＳＬナトリウム塩・３．３水和物結晶、図７および表８に示す値で規定される６ＳＬナトリウム塩・２．７水和物結晶、並びに図８および表９に示す値で規定される６ＳＬナトリウム塩・２．３水和物結晶を挙げることができる。

また、本発明の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶としては、後述の分析例に記載の赤外分光（ＩＲ）分析に供した場合、図３に示す赤外吸収スペクトルを示す６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶を挙げることができる。

本発明の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶としては、具体的には、Ｘ線源としてＣｕＫαを用いた粉末Ｘ線回折において、下記（i）に記載の回折角（２θ）にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶が好ましく、下記（i）に記載の回折角（２θ）に加えてさらに下記（ii）に記載の回折角（２θ）にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶がより好ましく、下記（i）および（ii）に記載の回折角（２θ）に加えてさらに下記（iii）に記載の回折角（２θ）にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶がさらに好ましい。
（i）６．７±０．２°、好ましくは６．７±０．１°、１３．３±０．２°、好ましくは１３．３±０．１°、１７．７±０．２°、好ましくは１７．７±０．１°、１８．５±０．２°、好ましくは１８．５±０．１°、および２０．０±０．２°、好ましくは２０．０±０．１°
（ii）１６．５±０．２°、好ましくは１６．５±０．１°、２１．３±０．２°、好ましくは２１．３±０．１°、２１．８±０．２°、好ましくは２１．８±０．１°、２３．６±０．２°、好ましくは２３．６±０．１°、および２８．８±０．２°、好ましくは２８．８±０．１°
（iii）１７．３±０．２°、好ましくは１７．３±０．１°、２３．９±０．２°、好ましくは２３．９±０．１°、２４．０±０．２°、好ましくは２４．０±０．１°、２５．７±０．２°、好ましくは２５．７±０．１°、および２６．７±０．２°、好ましくは２６．７±０．１°

また、本発明の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶としては、具体的には、Ｘ線源としてＣｕＫαを用いた粉末Ｘ線回折において、下記（iv）に記載の回折角（２θ）にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶が好ましく、下記（iv）に記載の回折角（２θ）に加えてさらに下記（v）に記載の回折角（２θ）にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶がより好ましく、下記（iv）および（v）に記載の回折角（２θ）に加えてさらに下記（vi）に記載の回折角（２θ）にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶がさらに好ましい。
（iv）５．９±０．２°、好ましくは５．９±０．１°、１１．７±０．２°、好ましくは１１．７±０．１°、２０．１±０．２°、好ましくは２０．１±０．１°、２１．０±０．２°、好ましくは２１．０±０．１°、および２３．６±０．２°、好ましくは２３．６±０．１°
（v）１７．８±０．２°、好ましくは１７．８±０．１°、１４．５±０．２°、好ましくは１４．５±０．１°、１７．４±０．２°、好ましくは１７．４±０．１°、１９．７±０．２°、好ましくは１９．７±０．１°、および２４．６±０．２°、好ましくは２４．６±０．１°
（vi）１４．９±０．２°、好ましくは１４．９±０．１°、１８．９±０．２°、好ましくは１８．９±０．１°、２２．１±０．２°、好ましくは２２．１±０．１°、２８．３±０．２°、好ましくは２８．３±０．１°、および３１．５±０．２°、好ましくは３１．５±０．１°

本発明の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶としては、単結晶Ｘ線構造解析により表７に示す値で規定される６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶を挙げることができる。
また、本発明の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶としては、具体的には、単結晶Ｘ線構造解析において、−１７３℃にて測定した場合、次の概略的単位胞パラメーター：ａ＝９．０６９５Å；ｂ＝１２．４１４６Å；ｃ＝１４．６１７７Å；α＝７１．３２６°；β＝７９．９７２°；γ＝１４．６１７７°；Ｖ＝１５３３．３Å^３；Ｚ＝１；を有し、かつ空間群がＰ１；である６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶が挙げられる。

２．本発明の結晶の製造法
本発明の結晶の製造法（以下、「本発明の方法」ともいう。）としては、以下の２．１〜２．３に記載の製造法が挙げられる。

２．１．本発明の結晶の製造法−１
本発明の結晶の製造法としては、アルコール溶液に６ＳＬナトリウム塩のアモルファスを溶解させる工程、該溶液を静置または撹拌することにより、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程、および該溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶の製造法を挙げることができる。

アルコール溶液は、本発明の方法に使用できる限りにおいて、複数種のアルコールの混合物、またはアルコールと他の有機溶媒もしくは水との混合物であってもよく、好ましくはＣ１〜Ｃ６のアルコールを、より好ましくはＣ１〜Ｃ３のアルコールを、さらに好ましくはメタノール、エタノール、ｎ−プロパノールおよびイソプロピルアルコールからなる群より選ばれるアルコールを、よりさらに好ましくはメタノールまたはエタノールを、最も好ましくはメタノールを挙げることができる。

また、本発明の方法で用いられるアルコール溶液がアルコール水溶液である場合、含水量としては、通常４０重量％以下、好ましくは２０重量％以下、さらに好ましくは１０重量％以下、最も好ましくは５重量％以下を挙げることができる。

アルコール溶液に６ＳＬナトリウム塩のアモルファスを溶解させる方法としては、例えば、６ＳＬナトリウム塩のアモルファスを該溶液に懸濁させた後、得られた溶解液を濾過して濾液を得る方法を挙げることができる。

６ＳＬナトリウム塩のアモルファスは、例えば、後述する参考例に記載の方法によって取得することができる。

６ＳＬナトリウム塩のアモルファスを溶解させて得られた溶解液を、静置または撹拌することにより、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させることができる。静置または撹拌する温度としては、通常０〜８０℃、好ましくは５〜５０℃、最も好ましくは１０〜３０℃を挙げることができる。

静置または撹拌する時間としては、通常１〜１００時間、好ましくは３〜４８時間、最も好ましくは５〜２４時間を挙げることができる。

６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を採取する方法としては、特に限定されないが、例えば、濾取、加圧濾過、吸引濾過または遠心分離等を挙げることができる。さらに結晶への母液の付着を低減し、結晶の品質を向上させるために、結晶を採取した後、適宜、結晶を洗浄することができる。

結晶洗浄に用いる溶液に特に制限はないが、水、メタノール、エタノール、アセトン、ｎ−プロパノール、イソプロピルアルコールおよびそれらから選ばれる１種類または複数種類を任意の割合で混合した溶液を用いることができる。

このようにして得られた湿晶を乾燥させることにより、本発明の結晶を取得することができる。すなわち、本発明の結晶の製造法は、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を乾燥する工程をさらに含んでもよい。

乾燥条件としては、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶の形態を保持できる方法ならばいずれでもよく、例えば、減圧乾燥、真空乾燥、流動層乾燥または通風乾燥等が挙げられる。

乾燥温度としては、付着水分または溶液を除去できる範囲ならばいずれでもよいが、好ましくは８０℃以下、より好ましくは６０℃以下を挙げることができる。

上記の方法によって、高純度の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を取得することができる。当該結晶の純度としては、通常９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、最も好ましくは９９．５％以上を挙げることができる。

上記の製造法によって製造することができる本発明の結晶としては、例えば、Ｘ線源としてＣｕＫαを用いた粉末Ｘ線回折パターンが、図１及び表１に示す値で規定される、６ＳＬナトリウム塩・４．０水和物結晶を挙げることができる。

２．２．本発明の結晶の製造法−２
また、本発明の結晶の製造法としては、ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、種晶として６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を添加する工程、該水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程、および該水溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶の製造法を挙げることができる。

６ＳＬナトリウム塩の水溶液に含有される６ＳＬは、発酵法、酵素法、天然物からの抽出法または化学合成法等のいずれの製造法によって製造されたものであってもよい。

６ＳＬの水溶液に、結晶化の障害となる固形物が含まれる場合には、遠心分離、濾過またはセラミックフィルタ等を用いて固形物を除去することができる。また、６ＳＬの水溶液に、結晶化の障害となる水溶性の不純物または塩が含まれる場合には、イオン交換樹脂等を充填したカラムに通塔する等により、水溶性の不純物または塩を除去することができる。

また、６ＳＬの水溶液に、結晶化の障害となる疎水性の不純物が含まれる場合には、合成吸着樹脂または活性炭等を充填したカラムに通塔する等により、疎水性の不純物を除去することができる。

該水溶液は、６ＳＬの濃度が通常３００ｇ／Ｌ以上、好ましくは４００ｇ／Ｌ以上、より好ましくは５００ｇ／Ｌ以上、最も好ましくは６００ｇ／Ｌ以上となるように調製することができる。該水溶液の濃度を前記濃度とするために、該水溶液を加熱濃縮法または減圧濃縮法などの一般的な濃縮方法により濃縮することができる。

ナトリウム含有化合物としては、例えば、水酸化ナトリウム水溶液のような塩基性化合物、またはナトリウムの炭酸化物、ナトリウムの硫酸化物、ナトリウムの硝酸化物若しくはナトリウムの塩化物のような中性塩を挙げることができる。中性塩としては、例えば、炭酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硝酸ナトリウムまたは塩化ナトリウムを挙げることができる。

ナトリウム含有化合物として塩基性化合物を用いる場合、当該塩基性化合物を使用して６ＳＬの水溶液のｐＨを調整することにより、ｐＨが通常３．０〜９．０、好ましくは４．５〜８．５、最も好ましくは５．５〜８．０であるナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液を取得することができる。

ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、種晶として６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を添加する。種晶として添加する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶としては、本発明の方法で取得した結晶を用いることができる。
種晶は、該水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶が析出する前であれば、結晶を析出させる工程の前に添加しても、結晶を析出させる工程において添加してもよい。
種晶は、水溶液中の濃度が通常０．２〜１５重量％、好ましくは０．５〜１０重量％、最も好ましくは２〜７重量％となるように添加する。

該水溶液中に、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる方法としては、例えば、該水溶液を冷却する方法、該水溶液を減圧濃縮する方法、または該水溶液にアルコール溶液若しくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを添加または滴下する方法等を挙げることができる。また、これらの方法は、１以上の方法を組み合わせて用いることもできる。

該水溶液を冷却する方法における、該水溶液の温度としては、通常０〜５０℃、好ましくは０〜３０℃、最も好ましくは０〜１０℃を挙げることができ、冷却時間としては、通常２〜１００時間、好ましくは３〜５０時間、最も好ましくは５〜３０時間を挙げることができる。

該水溶液を減圧濃縮する方法における、該水溶液の温度としては、通常０〜１００℃、好ましくは１０〜９０℃、最も好ましくは２０〜８０℃を挙げることができ、減圧時間としては、通常１〜１２０時間、好ましくは２〜６０時間、最も好ましくは３〜５０時間を挙げることができる。

該水溶液中にアルコール溶液またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを添加または滴下することにより、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる方法においては、アルコール溶液の添加または滴下を開始した後、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶が析出する前に、種晶を添加してもよい。

アルコール溶液またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの添加または添加を開始した後に種晶を添加する時間としては、アルコール溶液またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの滴下または添加を開始してから、通常０〜５時間後、好ましくは０〜４時間後、最も好ましくは０〜３時間後を挙げることができる。

アルコール溶液としては、上記２．１に記載したものと同じ例を挙げることができる。

アルコール溶液またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを添加または滴下するときの該水溶液の温度としては、６ＳＬが分解しない温度であればいずれの温度でもよいが、溶解度を下げて６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶の結晶化率を向上させるために、通常８０℃以下、好ましくは７０℃以下、より好ましくは６０℃以下、最も好ましくは５０℃以下を挙げることができる。温度の下限値としては、通常０℃以上、好ましくは１０℃以上を挙げることができる。

アルコール溶液またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを添加または滴下する液量としては、該水溶液の通常１〜３０倍量、好ましくは２〜２５倍量、最も好ましくは３〜１０倍量を挙げることができる。アルコール溶液の添加または滴下に要する時間としては、通常１〜４８時間、好ましくは２〜３０時間、最も好ましくは３〜２０時間を挙げることができる。

上記のようにして６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させた後、析出した結晶を採取する工程の前に、さらに析出した結晶を通常１〜７２時間、好ましくは１〜４８時間、最も好ましくは１〜２４時間熟成させてもよい。

熟成させるとは、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程を一旦停止して、結晶を成長させることをいう。結晶を熟成させた後は、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程を再開してもよい。
６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を採取する方法としては、上記２．１に記載した方法と同様の方法を挙げることができる。

上記の方法によって、高純度の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を取得することができる。６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶の純度としては、通常９７％以上、好ましくは９８％以上、より好ましくは９９％以上、最も好ましくは９９．５％以上を挙げることができる。

上記の製造法によって製造することができる６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶としては、例えば、Ｘ線源としてＣｕＫαを用いた粉末Ｘ線回折パターンが、図２および表２に示す値で規定される、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶、図５および表５に示す値で規定される、６ＳＬナトリウム塩・３．３水和物結晶、図７および表８に示す値で規定される、６ＳＬナトリウム塩・２．７水和物結晶、図８および表９で示す値で規定される６ＳＬナトリウム塩・２．３水和物結晶ならびに図３に示す赤外吸収スペクトルを示す６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶を挙げることができる。
また、上記の製造法によって製造することができる６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶としては、例えば、単結晶Ｘ線構造解析において、表７に示す値で規定される、６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物を挙げることができる。

２．３．本発明の結晶の製造法−３
さらに、本発明の結晶の製造法としては、ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを溶解することにより、該水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を析出させる工程、および該水溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の製造法を挙げることができる。

ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液としては、上記２．１に記載したものと同じ例を挙げることができる。

ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを溶解することにより、該水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を析出させる方法としては、例えば、蒸気拡散方法が挙げられる。蒸気拡散方法としては、具体的には、ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に対して、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド蒸気を曝露させる方法が挙げられる。

ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に対して、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド蒸気を曝露させる温度としては、６ＳＬが分解しない温度であればいずれの温度でもよいが、溶解度を下げて６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の結晶化率を向上させるために、通常８０℃以下、好ましくは７０℃以下、より好ましくは６０℃以下、最も好ましくは５０℃以下を挙げることができる。温度の下限値としては、通常０度以上、好ましくは１０℃以上を挙げることができる。

ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に対して、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド蒸気を曝露させる時間としては、通常３日間〜６ヶ月間、好ましくは１４日間〜５ヵ月間、最も好ましくは１〜４ヵ月間を挙げることができる。

前記方法においてナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に曝露させるＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの液量としては、該水溶液に対して、通常０．５〜１０倍量、好ましくは１〜９倍量、最も好ましくは２〜８倍量を挙げることができる。

前記水溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を採取する方法としては、上記２．１および２．２に記載した方法と同様の方法を挙げることができる。

［分析例］
（１）粉末Ｘ線回折
粉末Ｘ線回折装置（ＸＲＤ）Ｕｌｔｉｍａ ＩＶ（リガク社製）を用い、測定は使用説明書に従って行った。
（２）濃度・純度測定
以下のＨＰＬＣ分析条件を用いて、６ＳＬの濃度および純度を測定した。
カラム：ＤｉｏｎｅｘＣａｒｂｏＰａｃ（商標） ＰＡ１ ＢｉｏＬＣ（商標），４×２５０ｍｍ
ガードカラム：ＤｉｏｎｅｘＣａｒｂｏＰａｃ（商標） ＰＡ１ ＢｉｏＬＣ（商標），４×５０ｍｍ
カラム温度：３０℃
流速：１ｍＬ／分
溶離液：水／０．５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液／０．３Ｍ酢酸ナトリウム水溶液
（３）カールフィッシャー法による結晶の水分含量の測定
自動水分測定装置ＡＱＶ−２２００（平沼産業社製）を用い、使用説明書に従って、以下の条件を用いて結晶の水分含量を測定した。
加熱気化法、１１０〜１７１℃、１４分間
（４）ナトリウム含量の測定
原子吸光光度計Ｚ−２３１０（日立ハイテクノロジーズ社製）を用い、６ＳＬナトリウム塩の結晶を１ｍｏｌ／Ｌの硝酸に溶解し、使用説明書に従って、結晶中に含まれるナトリウムイオンの濃度を測定した。
（５）融点の測定
Ｍｅｌｔｉｎｇ Ｐｏｉｎｔ Ｍ−５６５（ＢＵＣＨＩ社製）を用い、使用説明書に従って、以下の条件を用いて融点を測定した。
１４０℃〜２００℃、０．５℃／分
（６）赤外分光（ＩＲ）分析
ＦＴＩＲ−８４００型（島津製作所製）を用い、使用説明書に従って行った。
（７）熱重量示差熱分析（ＴＧ・ＤＴＡ）
ＥＸＳＴＡＲ６０００（セイコーインスツル社製）を用い、使用説明書に従って、以下の条件を用いて重量変化・示差熱を測定した。
３０〜１７５℃、０．５℃／分
（８）単結晶Ｘ線構造解析
ＳｕｐｅｒＮｏｖａ（アジレント社製）を用い、使用説明書に従って行った。

［参考例１］
６ＳＬナトリウム塩の非結晶性アモルファスの取得
６ＳＬのアモルファス２００．５gを水に溶解し、水酸化ナトリウム水溶液を用いてｐＨを６．８０に調整し、６ＳＬナトリウム塩含有水溶液１０００ｍＬとした。この水溶液の一部を凍結乾燥することで、白色の粉末を得た。当該粉末の粉末Ｘ線回折を測定したところ、Ｘ線回折ピークが確認されなかったことから、当該粉末は非結晶性アモルファスであるであることがわかった。

［参考例２］
６ＳＬナトリウム塩の結晶の取得検討―１
特許文献２を参考に６ＳＬナトリウム塩の結晶化を試みた。参考例１で取得した６ＳＬナトリウム塩のアモルファス１００ｇを水２５０ｍＬに溶解し、１ｍｏｌ／ＬのＮａＯＨを用いてｐＨを９．０に調整した。得られた水溶液のうち１７ｍＬを次の工程に供した。

当該水溶液１７ｍＬを濃縮（４５℃、１５ｈＰａ）して得られる８．０ｇの固形物に２００ｍＬの９０％−エタノールを加え、２４時間撹拌した後、上澄みの溶液を除去して白色固形物を得た。該固形物は、偏光顕微鏡で偏光を示さず、非結晶性アモルファスであることを確認し、６ＳＬナトリウム塩の結晶は得られなかった。

［参考例３］
６ＳＬナトリウム塩の結晶の取得検討―２
特許文献３を参考に６ＳＬナトリウム塩の結晶化を試みた。参考例１で取得した６ＳＬナトリウム塩のアモルファス１００ｇを水２５０ｍＬに溶解し、１ｍｏｌ／ＬのＮａＯＨを用いてｐＨを９．０に調整した。得られた水溶液のうち１７ｍＬを次の工程に供した。

当該水溶液１７ｍＬを濃縮（５０℃、２０ｈＰａ）してアメ状のシロップが得られた。得られたシロップに１００ｍＬの１００％−エタノールを添加したところ、白色沈殿が生じ、懸濁液が得られた。

当該沈殿物を濾取して５０ｍＬの１００％−エタノールで２回洗浄し、２５℃にて１０分間通風乾燥させることにより、沈殿物２．０９ｇが得られた。得られた沈殿物は、偏光顕微鏡で偏光を示さず、非結晶性アモルファスであることを確認した。

該沈殿物２．０９ｇに９６％−エタノールを７０ｍＬ加え、２５℃にて３０分間撹拌して白色の懸濁液とした後、該懸濁液を濾過することにより０．５８ｇのアメ状固形物が得られた。得られたアメ状固形物は、偏光顕微鏡で偏光を示さず、非結晶性アモルファスであることを確認し、６ＳＬナトリウム塩の結晶は得られなかった。

［参考例４］
６ＳＬナトリウム塩の結晶の取得検討―３
特許文献４を参考に６ＳＬナトリウム塩の結晶化を試みた。参考例１で取得した６ＳＬナトリウム塩のアモルファス１００ｇを水２５０ｍＬに溶解し、１ｍｏｌ／ＬのＮａＯＨを用いてｐＨを９．０に調整した。得られた水溶液のうち１７ｍＬを次の工程に供した。

当該水溶液１７ｍＬに２００ｍＬの１００％−メタノールを加えたところ、沈殿は生じず、溶液に変化は見られなかった。得られた懸濁液を濃縮（４０℃、１００ｈＰａ）して２０ｍＬとした所、シロップ状の溶液が得られ、結晶は得られなかった。

得られたシロップをさらに濃縮（５０℃、２０ｈＰａ）して乾固したところ、白色の固体が４．４ｇ得られた。得られた沈殿物は、偏光顕微鏡で偏光を示さず、非結晶性アモルファスであることを確認し、６ＳＬナトリウム塩の結晶は得られなかった。

［参考例５］
６ＳＬナトリウム塩の結晶の取得検討―４
特許文献４を参考に６ＳＬナトリウム塩の結晶化を試みた。参考例１で取得した６ＳＬナトリウム塩のアモルファス１００ｇを水２５０ｍＬに溶解し、１ｍｏｌ／ＬのＮａＯＨを用いてｐＨを９．０に調整した。得られた水溶液のうち１７ｍＬを次の工程に供した。

当該水溶液１７ｍＬに２００ｍＬの１００％−エタノールを加えたところ、白色沈殿が生じ、懸濁液が得られた。得られた懸濁液を濃縮して１００ｍＬとした後、当該沈殿物を濾取し、２５℃にて通風乾燥させることにより、６．３ｇの沈殿物を取得した。得られた沈殿物は、偏光顕微鏡で偏光を示さず、非結晶性のアモルファスであることを確認し、６ＳＬナトリウム塩の結晶は得られなかった。

［参考例６］
６ＳＬナトリウム塩の結晶の取得検討―５
特許文献４を参考に６ＳＬナトリウム塩の結晶化を試みた。参考例１で取得した６ＳＬナトリウム塩のアモルファス１００ｇを水２５０ｍＬに溶解し、１ｍｏｌ／ＬのＮａＯＨを用いてｐＨを９．０に調整した。得られた水溶液のうち１７ｍＬを次の工程に供した。

当該水溶液１７ｍＬに２００ｍＬの１００％−イソプロパノールを加えたところ、白色沈殿が生じ、懸濁液が得られた。得られた懸濁液を濃縮して１００ｍＬとした後、当該沈殿物を濾取し、２５℃にて通風乾燥させることにより、４．９ｇの沈殿物を取得した。得られた沈殿物は、偏光顕微鏡で偏光を示さず、非結晶性アモルファスであることを確認し、６ＳＬナトリウム塩の結晶は得られなかった。

以下に実施例を示すが、本発明は下記実施例に限定されるものではない。

［実施例１］
６ＳＬナトリウム塩・n水和物結晶の取得−１
参考例１で得られた６ＳＬナトリウム塩のアモルファス６．１０ｇを、１００％メタノール１００ｍＬ中に１０分間懸濁させた後、濾過によって濾液を９５ｍＬ得た。得られた濾液のうち３０ｍＬを次の工程に供した。

当該濾液３０ｍＬを２５℃下で１２時間撹拌することによって、結晶を自然起晶させた。当該結晶スラリーをさらに１２時間熟成させた後に当該結晶を濾取し、２５℃にて通風乾燥させることにより、５５０ｍｇの結晶を得た。

当該結晶の粉末Ｘ線回折の結果を表１に示す。表中、「２θ」は回折角（２θ°）を、「相対強度」は、相対強度比（Ｉ／Ｉ_０）を示す。また、相対強度比は５以上を表示する。

当該結晶に含まれる水分量をカールフィッシャー法により測定した結果、９．３重量％であり、理論水分量との比較から、当該６ＳＬナトリウム塩の結晶は６ＳＬナトリウム塩・４．０水和物であることがわかった。

［実施例２］
６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の取得−２
フリー体換算で、６ＳＬのアモルファス２２５．１ｇを水に溶解し、水酸化ナトリウム水溶液を用いてｐＨを６．８１に調整し、１１６６ｍＬとした。この水溶液を濃縮して３２３ｍＬとし、得られた濃縮溶液のうち８１ｍＬを次の工程に供した。

当該８１ｍＬの濃縮溶液を２５℃に維持しつつ、実施例１で得られた結晶を種結晶として３．０ｇ添加した。これに７００ｍＬの９５％−メタノールを４時間かけて滴下添加し、結晶を析出させた。結晶スラリーを１２時間熟成させた後に当該結晶を濾取し、９５％メタノール水溶液で洗浄した後、２５℃にて通風乾燥させることにより、６１．２ｇの結晶を得た。

ＨＰＬＣによる純度測定では９９．６％（面積％）以上の６ＳＬの結晶が得られていることが確認され、当該結晶をもう一度水に溶解して上記の晶析操作を繰り返すことにより、９９．８％（面積％）以上の６ＳＬの結晶を取得することができた。

当該結晶の粉末Ｘ線回折の結果を表２に示す。表中、「２θ」は回折角（２θ°）を、「相対強度」は、相対強度比（Ｉ／Ｉ_０）を示す。また、相対強度比は５以上を表示する。

当該結晶のナトリウム含量を原子吸光法により測定した結果、３．６６重量％であり、１ナトリウム塩の理論値（３．５０重量％）とほぼ一致した。

また、当該結晶に含まれる水分量をカールフィッシャー法により測定した結果、１０．２重量％であり、理論水分量との比較から、当該６ＳＬナトリウム塩の結晶は６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物であることがわかった。

実施例２で取得した結晶の各種物性を表３に示す。ｐＨは、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶として１００ｇ／Ｌの水溶液を測定した。

表３に示すように、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶の融点が１７９．９℃と、既知の６ＳＬナトリウム塩アモルファスの１６０℃付近よりも高いことから、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶は、高温条件下においても安定であることがわかった。

また、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶、および既知の６ＳＬナトリウム塩アモルファスについて、６０℃の熱負荷を与えた場合の着色度を比較した結果を表４に示す。

着色度は、それぞれの物質を６ＳＬの無水和物換算で１００ｇ／Ｌとなるように溶解して測定した透過率Ｔ％４３０ｎｍ＝１００×１０^−Ａ（Ａ＝Ａｂｓ：４３０ｎｍ、１ｃｍ）で表す。

表４に示すように、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶の方が、既知の６ＳＬナトリウム塩アモルファスに比べて保存中の着色度が少なかったことから、６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶は、既知の６ＳＬナトリウム塩アモルファスに比べて保存安定性に優れることが分かった。

取得した６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶と、６ＳＬナトリウム試薬（Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ社製、アモルファス）の吸湿性を、以下の条件下で比較した。
保管条件：３０℃、相対湿度８０％（装置：ＴＨＥ０５１ＦＡ、アドバンテック東洋社製）
測定方法：サンプル約１００ｍｇを精密天秤によって秤量後、ガラス容器に充填し、上記条件にて保管後、再度サンプルを秤量して重量変化率を算出した。

結果を表５に示す。なお、試験開始時のそれぞれの重量を１００％として各経過時間のサンプルの重量を測定した。

表５に示すように、取得した６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶の方が、アモルファスと比較して吸湿性が低く、保存安定性に優れていることが確認された。

［実施例３］
６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の取得−３
実施例２で得られた６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物結晶１２．０ｇを、真空乾燥機を用いて室温で２１時間乾燥することにより、１１．６ｇの結晶を得た。

当該結晶に含まれる水分量をカールフィッシャー法により測定した結果、８．３重量％であり、理論水分量との比較から、当該６ＳＬナトリウム塩の結晶は６ＳＬナトリウム塩・３．３水和物であることがわかった。

また、当該結晶の粉末Ｘ線回折の結果を表６に示す。表中、「２θ」は回折角（２θ°）を、「相対強度」は、相対強度比（Ｉ／Ｉ_０）を示す。また、相対強度比は５以上を表示する。

表６に示すように、当該結晶は、実施例１および２で取得した結晶の粉末Ｘ線回折の結果とほぼ一致したことから、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶には、ｎ数の異なる同一の結晶構造が存在することがわかった。

さらに、実施例２で得られた４．６水和物の熱重量示差熱分析の結果（図４）から、４．６水和物の水分子は、温度上昇（３０℃〜１２７℃）に伴って徐々に脱水され、１２７℃にて無水物（ｎ＝０）に至ること、またその過程で吸熱・発熱を伴う結晶転移を確認しなかったことから、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶には、無水物から５．０水和物までの連続したｎ水和物結晶状態が存在することが明らかとなった。

［実施例４］
６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶の取得
参考例１で取得した６ＳＬナトリウム塩のアモルファス１００ｇを水３００ｍＬに溶解し、体積が１５０ｍＬとなるまで濃縮（５０℃、１５ｈＰａ）した。

得られた濃縮液に８３ｍＬの１００％−メタノールを２５℃下で２時間かけて添加した後、実施例２で取得した６ＳＬナトリウム塩・４．６水和物の結晶を種結晶として１．０ｇ添加し、結晶を析出させた。

さらに２５９ｍＬの１００％−メタノールを２５℃下で１２時間かけて添加した後、４０℃にて３日間熟成させることにより６ＳＬナトリウム塩結晶を成長させ、スラリーを取得した。

析出した結晶の構造を決定するために析出した６ＳＬナトリウム塩結晶に対し、測定装置（リガク社製単結晶Ｘ線構造解析装置Ｒ−ＡＸＩＳ ＲＡＰＩＤ）を用いて単結晶Ｘ線回折（ＳＸＲＤ）を実施した。

まず、６ＳＬナトリウム塩の単結晶を回折計に取り付け、室温の大気中または所定の温度の不活性ガス気流中で、所定の波長のＸ線を用いて、回折画像を測定した。

次に、回折画像から算出された面指数と回折強度の組から、直接法による構造決定と最小二乗法による構造精密化［Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ．Ａ６４，１１２（２００８）］を行い、単結晶構造を得た。その結果を表７にまとめる。

表７に示すように、上記測定の結果、当該結晶が６ＳＬナトリウム塩の結晶であり、単位格子内に水分子、およびメタノール分子を有する２．５水和物・０．５メタノール和物であることが確認された。
単結晶Ｘ線構造解析の結果得られた６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶のＯＲＴＥＰ図を図６に示す。

［実施例５］
６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の取得−４
実施例４で取得された結晶スラリーを遠心分離することにより６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶を濾取し、１３７．９ｇの結晶を得た。さらに当該結晶を真空乾燥（３５℃、５０ｈＰａ、２４時間）させることにより、７３．９ｇの結晶を得た。

当該結晶の粉末Ｘ線回折の結果を図７及び表８に示す。表中、「２θ」は回折角（２θ°）を、「相対強度」は、相対強度比（Ｉ／Ｉ_０）を示す。また、相対強度比は５以上を表示する。

また、当該結晶に含まれるメタノール量をガスクロマトグラフにより測定した結果、０．３９重量％であり、６ＳＬナトリウム・２．５水和物・０．５メタノール和物の結晶格子中からメタノールが脱離していることを確認した。

また、当該結晶に含まれる水分量をカールフィッシャー法により測定した結果、６．３重量％であり、理論水分量との比較から、当該６ＳＬナトリウム塩の結晶は６ＳＬナトリウム塩・２．７水和物であることがわかった。

図７のチャート図と実施例２で取得した結晶のチャート図とを比較したところ、これらはよく一致した。よって、当該結晶は、実施例２で取得された結晶と同一の結晶形であることが確認された。

［実施例６］
６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の取得−５
参考例１で取得した６ＳＬナトリウムアモルファス１００ｇを水３００ｍＬに溶解し、体積が１０５ｍＬとなるまで濃縮（５０℃、１５ｈＰａ）した。得られた濃縮液１ｍＬを次の工程に供した。

該水溶液１ｍＬを５ｍＬガラスサンプル瓶へ充填し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦという。）約５ｍＬを充填した５０ｍＬガラスサンプル瓶に静置保管し、該水溶液に対して室温下で３ヶ月間ＤＭＦ蒸気を曝露させた所、該水溶液中から針状の結晶が析出した。

［実施例７］
６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の取得−６
参考例１で取得した６ＳＬナトリウム塩のアモルファス１０ｇを水で溶解して体積を２０ｍＬとした。得られた濃縮液１ｍＬを次の工程に供した。

該水溶液１ｍＬにＤＭＦ２０ｍＬを室温下で１時間かけて添加した後、実施例６で得られた針状の結晶を約１０ｍｇ添加した所、結晶が析出した。該結晶を濾取し、２５℃にて通風乾燥させることにより、７０ｍｇの結晶を取得した。

当該結晶の粉末Ｘ線回折の結果を図８及び表９に示す。表中、「２θ」は回折角（２θ°）を、「相対強度」は、相対強度比（Ｉ／Ｉ_０）を示す。

当該結晶の純度を測定した所、９８．８％であり、当該結晶が確かに６ＳＬナトリウム塩の結晶であることがわかった。また、当該結晶に含まれる水分量をカールフィッシャー法により測定した結果、５．３重量％であり、理論水分量との比較から、当該６ＳＬナトリウム塩の結晶は６ＳＬナトリウム塩・２．３水和物であることがわかった。

図８のチャート図と実施例２で取得した結晶のチャート図とを比較したところ、これらは一致しなかった。よって、当該結晶は、実施例２で取得された結晶と異なる結晶形であることが確認された。
当該結晶の融点を測定した結果、１６９．９℃であった。

本発明を特定の態様を参照して詳細に説明したが、本発明の精神と範囲を離れることなく様々な変更および修正が可能であることは、当業者にとって明らかである。なお、本出願は、２０１５年１１月１８日付けで出願された日本特許出願（特願２０１５−２２５６５２）に基づいており、その全体が引用により援用される。また、ここに引用されるすべての参照は全体として取り込まれる。

本発明により、例えば、健康食品、医薬品若しくは化粧品等の製品、原料または中間体等として有用である６ＳＬナトリウム塩の結晶、およびその製造方法が提供される。

Claims (21)

1. ６’−シアリルラクトース（以下、６ＳＬという）ナトリウム塩の結晶。
2. ６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶（ただし、ｎは０〜５の任意の数字を表し、ｎ＝０の場合は、６ＳＬナトリウム塩・無水物という）である、請求項１に記載の結晶。
3. 粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、６．７±０．２°、１３．３±０．２°、１７．７±０．２°、１８．５±０．２°、および２０．０±０．２°にピークを有する、請求項２に記載の結晶。
4. 粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、さらに、１６．５±０．２°、２１．３±０．２°、２１．８±０．２°、２３．６±０．２°、および２８．８±０．２°にピークを有する、請求項３に記載の結晶。
5. 粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、さらに、１７．３±０．２°、２３．９±０．２°、２４．０±０．２°、２５．７±０．２°、および２６．７±０．２°にピークを有する、請求項４に記載の結晶。
6. アルコール溶液に６ＳＬナトリウム塩のアモルファスを溶解させる工程、該溶液を静置または撹拌することにより、６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程、および該溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶の製造法（ｎは請求項２と同義）。
7. ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、種晶として６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を添加する工程、該水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程、および該水溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶の製造法（ｎは請求項２と同義）。
8. 前記水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程が、該水溶液にアルコール溶液を添加または滴下することにより、該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を析出させる工程である、請求項７に記載の製造法。
9. 前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶または前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶を乾燥する工程、をさらに含む請求項６〜８のいずれか１項に記載の製造法。
10. 前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶が下記（i）〜（iii）のいずれか１に記載の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶である請求項６〜９のいずれか１項に記載の製造法。
    （i）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が６．７±０．２°、１３．３±０．２°、１７．７±０．２°、１８．５±０．２°、および２０．０±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
    （ii）粉末Ｘ線回折において、前記（i）に記載の回折角（２θ）におけるピークに加えて、回折角（２θ）が、さらに１６．５±０．２°、２１．３±０．２°、２１．８±０．２°、２３．６±０．２°、および２８．８±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
    （iii）粉末Ｘ線回折において、前記（i）および（ii）に記載の回折角（２θ）におけるピークに加えて、回折角（２θ）が、さらに１７．３±０．２°、２３．９±０．２°、２４．０±０．２°、２５．７±０．２°、および２６．７±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
11. 前記アルコール溶液が、Ｃ１〜Ｃ６のアルコールの溶液である、請求項６および８〜１０のいずれか１項に記載の製造法。
12. 前記Ｃ１〜Ｃ６のアルコールがメタノールである請求項１１に記載の製造法。
13. 前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物の溶媒和物結晶が６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶である請求項１２に記載の製造法。
14. 粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、５．９±０．２°、１１．７±０．２、２０．１±０．２°、２１．０±０．２°、および２３．６±０．２°にピークを有する、請求項２に記載の結晶。
15. 粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、さらに、１７．８±０．２°、１４．５±０．２°、１７．４±０．２°、１９．７±０．２°、および２４．６±０．２°にピークを有する、請求項１４に記載の結晶。
16. 粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、さらに、１４．９±０．２°、１８．９±０．２°、２２．１±０．２°、２８．３±０．２°、および３１．５±０．２°にピークを有する、請求項１５に記載の結晶。
17. ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを溶解することにより、該水溶液中に６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を析出させる工程、および該水溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の製造法（ｎは請求項２と同義）。
18. ナトリウム含有化合物を含む６ＳＬの水溶液に、種晶として６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を添加する工程、該水溶液にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを添加または滴下することにより６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を析出させる工程、および該水溶液から該６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶を採取する工程、を含む６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶の製造法（ｎは請求項２と同義）。
19. 前記６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶が下記の（iv）〜（vi）のいずれか１に記載の６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶である請求項１７または１８に記載の製造法。
    （iv）粉末Ｘ線回折において、回折角（２θ）が、５．９±０．２°、１１．７±０．２°、２０．１±０．２°、２１．０±０．２°、および２３．６±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
    （v）粉末Ｘ線回折において、前記（iv）に記載の回折角（２θ）におけるピークに加えて、回折角（２θ）が、さらに１７．８±０．２°、１４．５±０．２°、１７．４±０．２°、１９．７±０．２°、および２４．６±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
    （vi）粉末Ｘ線回折において、前記（iv）および（v）に記載の回折角（２θ）におけるピークに加えて、回折角（２θ）が、さらに１４．９±０．２°、１８．９±０．２°、２２．１±０．２°、２８．３±０．２°、および３１．５±０．２°にピークを有する６ＳＬナトリウム塩・ｎ水和物結晶
20. ６ＳＬナトリウム塩・２．５水和物・０．５メタノール和物結晶である、請求項１に記載の結晶。
21. 単結晶Ｘ線構造解析において、−１７３℃にて測定した場合、次の概略的単位胞パラメーター：ａ＝９．０６９５Å；ｂ＝１２．４１４６Å；ｃ＝１４．６１７７Å；α＝７１．３２６°；β＝７９．９７２°；γ＝１４．６１７７°；Ｖ＝１５３３．３Å^３；Ｚ＝１；を有し、かつ空間群がＰ１；である、請求項２０に記載の結晶。

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