JPWO2014119544A1 - イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法 - Google Patents
イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2014119544A1 JPWO2014119544A1 JP2014559679A JP2014559679A JPWO2014119544A1 JP WO2014119544 A1 JPWO2014119544 A1 JP WO2014119544A1 JP 2014559679 A JP2014559679 A JP 2014559679A JP 2014559679 A JP2014559679 A JP 2014559679A JP WO2014119544 A1 JPWO2014119544 A1 JP WO2014119544A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- plasma protein
- blood
- test strip
- labeled antibody
- antibody
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
- G01N21/77—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator
- G01N21/78—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated by observing the effect on a chemical indicator producing a change of colour
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
- G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
- G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6827—Total protein determination, e.g. albumin in urine
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/4713—Plasma globulins, lactoglobulin
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/4737—C-reactive protein
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/76—Assays involving albumins other than in routine use for blocking surfaces or for anchoring haptens during immunisation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/79—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
Abstract
Description
ヒトから採取された血液を100〜10000倍に希釈する工程;
該希釈した血液をイムノクロマトテストストリップに展開する工程;
該希釈した血液が展開されたイムノクロマトテストストリップの発色を分析する工程;を含み、全血を血漿または血清と血球成分に分離しないものである。
上記イムノクロマトテストストリップは、赤血球が毛細管現象により移動可能な展開膜と、サンプルパッドと、血漿タンパクと結合可能な標識抗体を有するコンジュゲートパッドと、を具備する。上記展開膜に、上記標識抗体と結合した血漿タンパクと結合可能なキャプチャー抗体で形成したテストラインと、血漿タンパクが結合していない上記標識抗体と結合可能な物質で形成したコントロールラインが設けられている。
図1に示されるように、イムノクロマトテストストリップ10は、展開膜11と、サンプルパッド12と、目的物質(本実施形態では、血漿タンパク)と結合可能な標識抗体が設けられたコンジュゲートパッド13と、を有する。また、イムノクロマトテストストリップ10は、余剰の液体を吸収する吸収パッド16と、展開膜11に直接皮膚が触れることを防止するベース素材17と、を有する。なお、吸収パッド16やベース素材17は、必要に応じて適宜設けられる部材であり、必ずしもイムノクロマトテストストリップ10に設けられていなくてもよい。また、イムノクロマトテストストリップ10には、血漿/血清分離パッドは設けられていない。
イムノクロマトテストストリップ10により目的物質を測定する方法は、次の工程に大別される。
(1)ヒトから採取された血液を100〜10000倍に希釈する工程。
(2)希釈された血液をイムノクロマトテストストリップ10に展開する工程。
(3)希釈された血液が展開されたイムノクロマトテストストリップ10の発色を分析する工程。
精度管理用血清を生理食塩水で希釈し、プレアルブミン濃度0、10.1、15.6、20.0および31.4mg/dLの溶液を調製した。値付けは免疫比濁法で行った。
図1に示すイムノクロマトテストストリップ10を製造した。具体的に、展開膜11は、メルク社製のハイフローHF90を、サンプルパッド12はメルク社製のCFSP173000を、コンジュゲートパッド13はメルク社製のGFCP103000をそれぞれ用いた。展開膜11、サンプルパッド12およびコンジュゲートパッド13は、血液の赤色が満遍なく浸透することを予め確認した。コンジュゲートパッド13には、金コロイドで標識したヤギ由来抗プレアルブミンポリクローナル抗体(標識抗体)を含浸した。テストライン14は、ヤギ由来抗プレアルブミンポリクローナル抗体(キャプチャー抗体)のリン酸緩衝液(1.0 mg/mL)を塗布し、自然乾燥することにより形成した。コントロールライン15は、ウサギ由来抗ヤギIgG抗体(血漿タンパクが結合していない標識抗体と結合可能な物質、Rockland Immunochemicals社製)のリン酸緩衝液(0.2 mg/mL)を塗布し、自然乾燥することにより形成した。
標準物質を、生理食塩水により1,200倍に希釈し、イムノクロマトテストストリップ10の展開膜11におけるコンジュゲートパッド13とテストライン14との間の位置に10μLを直接展開し、次いで、サンプルパット12に展開液としてのトリス緩衝液1mLを展開した。得られたテストライン14の発色強度をテストストリップリーダーで測定することにより、検量線を作成した。
免疫比濁法により、プレアルブミンの濃度が予め判明している血液サンプルを25検体準備した。
血液サンプル25検体を、それぞれ生理食塩水により800倍に希釈した液を調製した。次いで、イムノクロマトテストストリップ10の展開膜11におけるコンジュゲートパッド13とテストライン14との間の位置に10μLを直接展開し、次いで、サンプルパット12に展開液としてのトリス緩衝液1mLを展開した。得られたテストライン14の発色強度をテストストリップリーダーで測定した。得られた発色強度と検量線とを比較することにより、それぞれの血液サンプルの濃度を求めた。求められた濃度と、免疫比濁法により測定された血液サンプルの濃度との相関性を評価した結果を図2に示す。その結果、R2の値(相関係数)は0.96であり、本発明の方法により定量的にプレアルブミンの濃度が測定できることが明らかとなった。
生理食塩水による血液サンプルの希釈倍率が80倍であること以外は、実施例1と同様に実施したが、テストライン14の発色が血液の赤色により見えにくく、定性的に判定することは困難であった。
11・・・展開膜
12・・・サンプルパッド
13・・・コンジュゲートパッド
14・・・テストライン
15・・・コントロールライン
16・・・吸収パッド
17・・・ベース素材
Claims (7)
- イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法であって、
ヒトから採取された血液を100〜10000倍に希釈する工程;
希釈した血液をイムノクロマトテストストリップに展開する工程;
希釈した血液が展開されたイムノクロマトテストストリップの発色を分析する工程;
を含み、
全血を血漿または血清と血球成分に分離せず、
上記イムノクロマトテストストリップが、赤血球が毛細管現象により移動可能な展開膜と、サンプルパッドと、血漿タンパクと結合可能な標識抗体を有するコンジュゲートパッドと、を具備しており、
上記展開膜に、上記標識抗体と結合した血漿タンパクと結合可能なキャプチャー抗体で形成されたテストラインと、血漿タンパクが結合していない上記標識抗体と結合可能な物質で形成されたコントロールラインと、が設けられている血漿タンパクの測定方法。 - 上記血漿タンパクが、アルブミン、プレアルブミン、グロブリン、フィブリノーゲン、アンチトロンビン、トランスフェリン、セルロプラスミンまたはC反応性蛋白(CRP)のうちの少なくともいずれか1つを含むものである請求項1に記載の血漿タンパクの測定方法。
- 上記血漿タンパクが、プレアルブミンである請求項2に記載の血漿タンパクの測定方法。
- 上記展開膜が、孔径5〜100μmを有するものである請求項1から3のいずれかに記載の血漿タンパクの測定方法。
- 上記標識抗体が、金属コロイド修飾抗体である請求項1から4のいずれかに記載の血漿タンパクの測定方法。
- 上記金属コロイド修飾抗体が、金コロイド修飾抗体である請求項5に記載の血漿タンパクの測定方法。
- イムノクロマトリーダを用いて上記イムノクロマトテストストリップの発色を分析する請求項1から6のいずれかに記載の血漿タンパクの測定方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2013014804 | 2013-01-29 | ||
JP2013014804 | 2013-01-29 | ||
PCT/JP2014/051772 WO2014119544A1 (ja) | 2013-01-29 | 2014-01-28 | イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018103877A Division JP2018138931A (ja) | 2013-01-29 | 2018-05-30 | イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2014119544A1 true JPWO2014119544A1 (ja) | 2017-01-26 |
JP6361037B2 JP6361037B2 (ja) | 2018-07-25 |
Family
ID=51262258
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014559679A Active JP6361037B2 (ja) | 2013-01-29 | 2014-01-28 | イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法 |
JP2018103877A Pending JP2018138931A (ja) | 2013-01-29 | 2018-05-30 | イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018103877A Pending JP2018138931A (ja) | 2013-01-29 | 2018-05-30 | イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
JP (2) | JP6361037B2 (ja) |
WO (1) | WO2014119544A1 (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106168578A (zh) * | 2016-06-14 | 2016-11-30 | 福州大学 | 基于mtk平台的金免疫层析试条图像检测方法 |
TWI758988B (zh) * | 2020-12-03 | 2022-03-21 | 國立成功大學 | 定量測量血液樣品中兒茶酚雌激素結合的蛋白之方法 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20040241882A1 (en) * | 2001-03-30 | 2004-12-02 | Praxsys Biosystems, Llc. | Prewetting stop flow test strip |
JP2006258777A (ja) * | 2005-03-14 | 2006-09-28 | Biocyber:Kk | 尿蛋白質のクリアランス測定法 |
JP2008544289A (ja) * | 2005-06-28 | 2008-12-04 | ズィービーエックス・コーポレーション | 膜アレイ及び分析用装置 |
JP2009236685A (ja) * | 2008-03-27 | 2009-10-15 | Sysmex Corp | クロマトグラフィー用試験具 |
US20100284857A1 (en) * | 2002-10-08 | 2010-11-11 | Tara Nylese | Portable Diagnostic Device and Method for Determining Temporal Variations in Concentrations |
WO2011016326A1 (ja) * | 2009-08-07 | 2011-02-10 | アークレイ株式会社 | プロゾーン現象検出方法、分析方法、プロゾーン現象検出装置および分析装置 |
JP2011522228A (ja) * | 2008-06-10 | 2011-07-28 | 英科新▲創▼(厦▲門▼)科技有限公司 | ヒトabo/rh/mn血液型を迅速に判定する方法及びキット |
WO2011125877A1 (ja) * | 2010-03-31 | 2011-10-13 | 積水メディカル株式会社 | イムノクロマトグラフィーを利用した測定方法、イムノクロマトグラフィー用テストストリップ及びイムノクロマトグラフィー用測定試薬キット |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA1313616C (en) * | 1987-06-01 | 1993-02-16 | Robert B. Sargeant | Lateral flow, non-bibulous membrane protocols |
US6316205B1 (en) * | 2000-01-28 | 2001-11-13 | Genelabs Diagnostics Pte Ltd. | Assay devices and methods of analyte detection |
DE10330982A1 (de) * | 2003-07-09 | 2005-02-17 | Prisma Diagnostika Gmbh | Vorrichtung und Verfahren zur simultanen Bestimmung von Blutgruppenantigenen |
-
2014
- 2014-01-28 WO PCT/JP2014/051772 patent/WO2014119544A1/ja active Application Filing
- 2014-01-28 JP JP2014559679A patent/JP6361037B2/ja active Active
-
2018
- 2018-05-30 JP JP2018103877A patent/JP2018138931A/ja active Pending
Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20040241882A1 (en) * | 2001-03-30 | 2004-12-02 | Praxsys Biosystems, Llc. | Prewetting stop flow test strip |
US20100284857A1 (en) * | 2002-10-08 | 2010-11-11 | Tara Nylese | Portable Diagnostic Device and Method for Determining Temporal Variations in Concentrations |
JP2006258777A (ja) * | 2005-03-14 | 2006-09-28 | Biocyber:Kk | 尿蛋白質のクリアランス測定法 |
JP2008544289A (ja) * | 2005-06-28 | 2008-12-04 | ズィービーエックス・コーポレーション | 膜アレイ及び分析用装置 |
JP2009236685A (ja) * | 2008-03-27 | 2009-10-15 | Sysmex Corp | クロマトグラフィー用試験具 |
JP2011522228A (ja) * | 2008-06-10 | 2011-07-28 | 英科新▲創▼(厦▲門▼)科技有限公司 | ヒトabo/rh/mn血液型を迅速に判定する方法及びキット |
WO2011016326A1 (ja) * | 2009-08-07 | 2011-02-10 | アークレイ株式会社 | プロゾーン現象検出方法、分析方法、プロゾーン現象検出装置および分析装置 |
WO2011125877A1 (ja) * | 2010-03-31 | 2011-10-13 | 積水メディカル株式会社 | イムノクロマトグラフィーを利用した測定方法、イムノクロマトグラフィー用テストストリップ及びイムノクロマトグラフィー用測定試薬キット |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP6361037B2 (ja) | 2018-07-25 |
WO2014119544A1 (ja) | 2014-08-07 |
JP2018138931A (ja) | 2018-09-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US8927262B2 (en) | Ovulation predictor test | |
Ching | Lateral flow immunoassay | |
JP5181058B2 (ja) | ヒトabo/rh/mn血液型を迅速に判定する方法及びキット | |
KR102209489B1 (ko) | 바이러스 및 박테리아 감염의 복합 검출을 위한 방법 및 장치 | |
KR20170007773A (ko) | 합성 실 기초된 측방 유동 면역검정 | |
KR20120088342A (ko) | 진단스트립 및 그 제조방법 | |
WO2013122121A1 (ja) | イムノクロマト用検査器具、分析装置、および分析方法 | |
JP6103776B2 (ja) | ヘマトクリット値の測定方法 | |
Mao et al. | Rapid quantitative immunochromatographic strip for multiple proteins test | |
KR20160127876A (ko) | 면역크로마토그래피의 형광반응 또는 유색반응을 측정하기 위한 디바이스 | |
JP2018138931A (ja) | イムノクロマト法で血漿タンパクを測定する方法 | |
JP2007523348A (ja) | クロマトグラフ排除凝集アッセイ法およびそれらの使用法 | |
KR20160120675A (ko) | 래피드 정량 진단 키트 | |
JPWO2014189143A1 (ja) | 対象物質の濃度測定方法、イムノクロマトグラフィーキットおよびイムノクロマトグラフィー装置 | |
JP6404587B2 (ja) | 免疫測定方法及びその装置並びに免疫測定用キット | |
JP4980944B2 (ja) | 免疫学的測定方法 | |
JP7131546B2 (ja) | イムノクロマト試験片およびキットおよび測定方法 | |
JP2009162558A (ja) | イムノクロマト分析法及びイムノクロマト分析キット | |
RU2532352C2 (ru) | Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики | |
CN113113079B (zh) | 一种识别定量免疫层析试验中钩状效应的方法 | |
JP4426122B2 (ja) | 血中抗原検出方法及び装置 | |
JP2019015583A (ja) | イムノクロマト試験片 | |
CN107615061B (zh) | 用于将竖直/侧向流动血液分离技术与可替宁检测组合的系统和方法 | |
KR101406923B1 (ko) | 능삼무늬 형태의 포획자 구획을 구비한 정량적 면역크로마토그래피 분석용 검정스트립 및 이를 이용한 정량적 면역크로마토그래피 분석방법 | |
JP3171942U (ja) | イムノクロマト用キット |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20161205 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170711 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20170907 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20171109 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20180501 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20180531 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6361037 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |