JPWO2014073464A1 - 三日熱マラリアと熱帯熱マラリアの双方を検出するペプチドおよび抗体検査材料 - Google Patents
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Abstract
Description
わが国では、マラリアは全数届出が義務づけられている4類感染症に指定されている。1959年に土着のマラリアは制圧されたが、その後わが国の経済成長によって人の移動が盛んになり、日本人渡航者が流行地で感染する例や、流行地から日本への入国者が国内で、発症する“輸入マラリア”の症例が1980年代から急増した。そして2000年には最多の154例の報告があったが、現在は渡航者のマラリア予防知識の普及などにより、年間50-60症例に抑えられている。また隣国の韓国では、いったん制圧された“土着マラリア”が再興し、2000年には4000症例まで増加、現在でも年間1000-2000症例で推移している。韓国から日本への輸入マラリア症例も報告されている(非特許文献2)。よってマラリア対策は流行地のみならず、日本国の水際でも重要な課題となっている。
したがって、マラリア感染を検出したりマラリアワクチンの効果を確かめたりするための血清抗体価を簡便に測定できる試薬の開発が求められている。
しかしながら、マラリア感染症の現在の感染状況及び最近の感染履歴を測定できる、すなわち、流行地調査などを目的として、簡易検査キットに用いる新しい抗原が、さらに求められていた。
マラリアに対する抗原として、マラリア原虫種内で配列がよく保存されていて抗原変異の少ない蛋白質のペプチドを用いることが知られている。抗体を生成するための抗原として、Lactate Dehydrogenase(LDH、乳酸脱水素酵素)ペプチドが知られている(非特許文献4,5)。
<1>配列番号3のアミノ酸配列を含むペプチドを有効成分とする、マラリア原虫の抗体検査材料。
<2>熱帯熱マラリア原虫及び三日熱マラリア原虫の抗体検査用である、<1>に記載の抗体検査材料。
<3>ペプチドが、担体に固定化されている、<1>又は<2>に記載の抗体検査材料。
<4>担体が、下記化合物(I)と化合物(II)を重合反応により得られる重合体である、<3>に記載の抗体検査材料。
<5><1>〜<4>のいずれかの抗体検査材料を含む、マラリア原虫感染症の検査薬又は診断薬。
<6><1>〜<4>のいずれかの抗体検査材料を含む、マラリア原虫感染症の検査キット又は診断キット。
<7><1>〜<4>のいずれかの抗体検査材料を、マラリア原虫感染症の被験者の試料と反応させる工程を含む、マラリア原虫感染症の検査方法又は診断方法。
本発明の新規抗原ペプチドは、特に感染者の多い熱帯熱マラリアと三日熱マラリアの現在の感染状況及び最近の感染履歴を測定できるタイプの抗原ペプチドである。本発明の新規抗原ペプチドは、過去の(古い)マラリアの感染履歴の影響が少なく、流行地においてもマラリア感染ではない熱発患者(マラリアの疑いがある患者)と、熱帯熱マラリアと三日熱マラリアの感染患者とを判定することが可能である。したがって、流行地調査などを目的とした、簡易検査キットに用いることも可能である。
本発明の新規抗原ペプチドは、高分子ナノ微粒子に固定化することが可能であり、マラリア原虫の抗体価を効率よく測定することができる。
(1)マラリア原虫に対する抗体検査材料
本発明は、配列番号3のアミノ酸配列を含むペプチドを有効成分とする、すなわち、抗原ペプチドとする、マラリア原虫に対する抗体検査材料に関する。
本発明者らは、ヒトに感染する4種類のマラリア原虫種内では配列がよく保存されていて抗原変異の少ない蛋白質であるLactate Dehydrogenase(LDH、乳酸脱水素酵素)に着目して、抗原設計を行った。特に感染者の多い熱帯熱と三日熱マラリアの感染履歴を測定できるタイプの抗原ペプチドを探索した。その結果、三日熱マラリア原虫由来LDHと熱帯熱マラリア原虫由来LDHの共通配列部分ペプチド19残基(pLDH)(配列番号3)が得られたものである。
配列番号3のアミノ酸配列を含むペプチドとしては、配列番号3のペプチド並びに配列番号3のペプチドを構成するアミノ酸が置換、欠失および/また挿入することにより生成されるペプチド類縁体が含まれる。ペプチド類縁体とは、配列番号3のペプチドを構成するアミノ酸が置換、欠失および/また挿入され、免疫学的応答に関して本発明のペプチドと同様の活性を有するペプチドのことをいう。置換、欠失および/また挿入されるアミノ酸の個数は特に制限されないが、1〜3個が好ましく、1〜2個がより好ましい。
配列番号3のアミノ酸配列を含む抗原ペプチドは、好ましくは19〜21残基のペプチドが好ましい。
ペプチドは蛍光物質等で標識されたものでもよいし、非天然アミノ酸を含むものでもよい。
本発明は、本発明のペプチドが、下記化合物(I)と化合物(II)を重合反応により得られる重合体からなる担体に固定化されている、抗体検査材料に関する。
重合開始剤としては、公知のラジカル重合開始剤を使用することができ、例えば、アゾビスイソブチロニトリル(AIBN)、1,1'-アゾビス(シクロヘキサンカルボニトリル)(ABCN)などを使用することができる。
微粒子へのペプチドの導入割合は好ましくは重量比として0.05〜2%である。
本発明は、本発明の抗体検査材料を含む、マラリア原虫感染症の検査薬又は診断薬に関する。また、本発明は、本発明の抗体検査材料を含む、マラリア原虫感染症の検査キット又は診断キットに関する。
本発明のペプチド配列は、特に熱帯熱マラリア及び三日熱マラリア感染マラリア患者の血清抗体と、非常に反応しやすい人工抗原であり、マラリア感染を検査又は診断するための検査薬又は診断薬及び検査キット又は診断キットとして有用である。
本発明の検査薬又は診断薬及び検査キット又は診断キットには、本発明の抗体検査材料以外に、緩衝液等、当業者に公知の検査薬又は診断薬及び検査キット又は診断キットに用いられている各要素によって構成することができる。
本発明の抗体検査材料を用いることにより、試料中のマラリア原虫に対する抗体を検出することができる。
本発明の抗体検査材料により、例えば、被験者の血液試料中のマラリア原虫由来抗LDH抗体を検出でき、マラリアの診断・感染履歴の調査やワクチン投与後の抗体価維持の確認を検査する材料として利用することができる。
試料は、被験者の血液、血清、血漿等を使用することができる。
ペプチド抗原が抗体と反応することにより微粒子が凝集し、目視により抗体の検出が可能である。
下記化合物(i)(市販品、中村化学製)0.4gと化合物(ii)(メタクリル酸クロリドとHOSu(N-ヒドロキシスクシンイミド)の反応生成物を使用)を0.1gを溶媒プロピオン酸エチル10mL中、室温25℃で3時間γ線照射下(30kGy)で反応させ、重合反応を行った。
微粒子表面に結合させるペプチドは以下のものを用いた。
AD22(MAP化した分子量として1.4 kD)Ala Ser Glu Phe Tyr Asn Ser Glu Asn Lys Thr Tyr Asp Leu Asp Phe Lys Thr Pro Asn Asn Asp(配列番号6)
この抗原ペプチド配列に基づき、(AD22)4-MAP (MAP = multiple antigenic peptide))(分子量1.4kD)(図13)を、手動合成装置を用いて合成し、SepPack(waters社製の使い捨てODSカラム)にて精製した。
続いて、活性エステル基(スクシンイミド基)を介して300mgの微粒子表面に熱帯熱マラリア原虫の抗原ペプチド(比較例1:(AD22)4-MAP)3mg)を化学結合させた検査材料を作製した。
このとき化学結合には37℃4時間、さらに物理吸着に37℃20時間の条件にて反応させた。
上記ペプチドの化学結合に伴って遊離するHOSu(N-ヒドロキシスクシンイミド)量をHPLCによってモニターすることで、反応の進行を確認した。
国立国際医療研究センター研究所において保管されている熱帯熱マラリア患者血漿(Pf患者)、正常なボランティア血漿(正常)、熱発患者としてマラリア疑い採血を受けたが抗原検出迅速診断キットと顕微鏡によるスメアー観察から陰性と診断された患者血漿(熱発患者)を用いて凝集試験を行った。
96穴プレートに、8個のウェルに、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)で16〜2048倍希釈した被験者血清を50μLずつ、および1個のウェルにリン酸緩衝液のコントロールを50μLを加え、最後に上記微粒子を25μL(0.1mg/mL)ずつ加えた。96穴プレートを1分間振動撹拌後に、室温で8時間静置して反応させることで、凝集反応を検出した。
その結果、Pf患者と正常、Pf患者と熱発患者について一定の違いを表す陽性凝集像と陰性凝集像を得ることに成功した。
本発明者らは、マラリア原虫由来の蛋白質であって、流行地患者血清の区別が可能なペプチド抗原配列を考え、(ヒトに感染する4種類の)原虫種内では配列がよく保存されていて抗原変異の少ない蛋白質であるLactate Dehydrogenase(LDH、乳酸脱水素酵素)に着目して抗原設計を行った。特に感染者の多い熱帯熱と三日熱マラリアの感染履歴を測定できるタイプの抗原ペプチドを探索した。
アミノ酸配列
(Gly-Phe-Thr-Lys-Ala-Pro-Gly-Lys-Ser-Asp-Lys-Glu-Trp-Asn-Arg-Asp-Asp-Leu-Leu)
(配列番号3)-Lys
組成式C102H161O32N29(mw. 2304.19)
pLDH抗原の合成はFmoc固相合成法によりShimadzu PSSM8自動ペプチド合成装置を用いて行った。固相合成で使用した樹脂はFmoc-Lys(Boc)-PEG-resin(0.18 mmol / g)を54 mg用いた。この樹脂を室温にて、3時間DMFで膨潤させた後(条件a)、脱Fmoc反応、保護アミノ酸の縮合反応、を繰り返して行った。合成に用いたFmoc保護アミノ酸の重量を表1に示した(各0.10 mmol、10 当量)。縮合剤は保護アミノ酸と等モルのHCTU/HOBt/DIEAを用い、各反応時間を30 minとした。脱Fmocには3 %DBU/DMF(条件b)を用いた。全アミノ酸縮合後、DMFとCH2Cl2によって樹脂を洗浄、trifluoroacetic acid : H2O : triisopropylsilane = 95 : 2.5 : 2.5の混合試薬2 mLを加えて、室温で20時間静置し(条件c)、樹脂からの切り出しを行った。この溶液を回収し、CH2Cl2で樹脂の洗浄を行い、減圧乾燥によってペプチドを得た。得られたペプチドを冷ジエチルエーテルで洗浄を行い、減圧乾燥によって乾燥させ、粗生成物を得た(粗生成物の収量は表2に記載)。この粗生成物をHPLC(図2)、ESI-MSにより目的物を確認後、ODSカラムの固相抽出(Waters SepPack ODS-5g)によって、15, 20, 25, 30 % アセトニトリル水溶液(0.1 % trifluoroacetic acid)を各50 mLで溶出させ、10 mLずつ分取した。その後、各フラクションをHPLCとESI-MSによる測定を行い、20 %-2のフラクションで目的物を確認し、凍結乾燥によって目的物を得た(精製後の収量は表2に記載)。図3、図4にそれぞれ精製物のHPLCクロマトグラムとESI-MSスペクトルを示した。
分析装置:Shimadzu LC-2010C-HT
分析カラム: YMC-PACK ODS(4 x 100 mm、粒子径3μm)
溶媒条件: 10%-70% アセトニトリル水溶液(0.1 % trifluoroacetic acid)
分析時間: 30分、流速: 1 mL/min
ESI-MS条件
分析装置:AP-SCIEX API-2000
溶媒: 10% アセトニトリル水溶液(0.1 % trifluoroacetic acid)
流速: 10 mL/min
表2に記載のように、3つの条件a〜cについて変更することで、目的物の収量が12 %から50 %へ大幅に向上した。HPLCクロマトグラムの比較(図2と図6)から、切り出し反応の温度と時間(条件c)によってArg残基側鎖が残ることなく目的物の収量が大幅に向上したことがわかる。さらに(条件a)膨潤時間の延長によって固相反応樹脂へ十分にDMF溶媒を親和させることで反応試薬が十分に樹脂内へ行き渡り、(条件b)脱Fmoc試薬をpiperidineからDBUへ変更することで、脱Fmoc反応収率が向上し、合成中のペプチド鎖にFmoc基が残ることがないため、結果として欠損配列の生成が抑えられたことがわかった。
抗原ペプチドの高分子微粒子への化学修飾は、MAP化しなかったこと以外は上記比較例1と同様にして、抗原ペプチドと高分子微粒子をそれぞれインキュベーター内37℃で24時間反応させた。その後遠心分離し反応をブロッキングした。途中、反応時間4時間、24時間に反応溶液のサンプリングを行い、生成したHOSuを逆相HPLCにより検出することで反応の進行を確認した。
フィリピン大学マニラ校公衆衛生学部において保管されている、熱帯熱・三日熱マラリア混合感染患者血漿(Pf,Pv混合感染患者)、熱帯熱マラリア患者血漿(Pf 患者)、三日熱マラリア患者血漿(Pv 患者)、熱発患者としてマラリア疑い採血を受けた血漿(熱発患者)、の各試料を用いて凝集試験を行った。96穴プレートに、12個のウェルに、リン酸緩衝生理食塩水(PBS-0.1% tween20)で16〜32768倍希釈した血漿試料を25μLずつを加え、最後にpLDH抗原を修飾したナノ微粒子を25μL(0.1mg/mL)ずつ加えた。96穴プレートを1分間振動撹拌後に、室温で8時間静置して反応させることで、凝集反応を検出した。その結果、図7に示すように、マラリア患者(Pf,Pv混合感染患者、Pf 患者、Pv 患者)とマラリアではない熱発患者について有意な違いを表す抗体価を測定することに成功した。
本発明は、このような要望に対応する技術を提供するものである。
より具体的には、以下の検査キットに適用が可能である。
輸送や保管に冷凍冷蔵設備を必要せず、測定時に特別な設備や電源を必要としない流行地やベッドサイドでも使用可能なマラリア検査キット。
流行地のマラリア患者や非流行地における輸入マラリア患者の診断に用いる感染検査キット。(流行地住民へのマラリア対策、流行地から帰国した海外渡航者の検査に有用である。)
Claims (7)
- 配列番号3のアミノ酸配列を含むペプチドを有効成分とする、マラリア原虫の抗体検査材料。
- 熱帯熱マラリア原虫及び三日熱マラリア原虫の抗体検査用である、請求項1に記載の抗体検査材料。
- ペプチドが、担体に固定化されている、請求項1又は2に記載の抗体検査材料。
- 担体が、下記化合物(I)と化合物(II)を重合反応により得られる重合体である、請求項3に記載の抗体検査材料。
- 請求項1〜4のいずれか一項の抗体検査材料を含む、マラリア原虫感染症の検査薬又は診断薬。
- 請求項1〜4のいずれか一項の抗体検査材料を含む、マラリア原虫感染症の検査キット又は診断キット。
- 請求項1〜4のいずれか一項の抗体検査材料を、マラリア原虫感染症の被験者の試料と反応させる工程を含む、マラリア原虫感染症の検査方法又は診断方法。
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奈良武司: "感染症診断の迅速化をめざして−感染症検査のPOCTを中心に 2)迅速キットの実際【原虫】マラリア", 臨床と微生物, vol. Vol.34 増刊号, JPN6014001691, 31 October 2007 (2007-10-31), pages 616 - 618 * |
奥浩之ほか: "凝集反応による抗マラリア原虫抗体検出を目的としたペプチド抗原担持ナノ微粒子の開発", 日本熱帯医学会大会プログラム抄録集, vol. Vol.52nd, JPN6014001690, 4 November 2011 (2011-11-04), pages 1 - 5 * |
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