JPWO2009091039A1 - 表面プラズモン共鳴測定装置、試料セルおよび測定方法 - Google Patents
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Abstract
Description
単色光の光源1002から放射された光が偏光板1003を通過すると、p偏光光のみが通過する。このp偏光光は、集光レンズ1004で集光されて半円柱状または半球状のプリズム1001に入射する。プリズム1001の上面には、試料セル1000が載置されており、抗体などの被測定物質が固定されている面と反対側の面からp偏光光が入射する。このように、p偏光光をプリズム1001を介して入射角θで試料セル1000に入射させることによって、試料セル1000からの反射光の強度変化をCCDカメラ1005で検出する。
より具体的には、本発明は、試料セルを容易にかつ確実に識別することを目的とする。また、本発明は、液体サンプルの正否を判定することを目的とする。
以下、本発明の実施例について図面を参照して説明する。図1は本発明の第1実施例に係るSPR測定装置の構成を示すブロック図である。
本実施例のSPR測定装置は、プリズム1と、光源2と、偏光板3と、集光レンズ4と、CCDカメラ5と、データ処理装置6と、データベース7と、試料セル10に対して液体サンプルを送り出すポンプ8と、液体サンプルが流れる流路9とを有する。
制御部60は、画像処理部64と、試料セルコード化部65と、試料セル照合部66とを有する。
本実施例では、試料セル10として、透明体100上に形成された金属薄膜101と、金属薄膜101上の被測定物質配置用箇所に固定された被測定物質102と、被測定物質配置用箇所に被測定物質が存在しない空白箇所103とを有するものを用いる。この試料セル10は、被測定物質102が上向きで、透明体100がプリズム1と接するようにプリズム1上に載置される。
CCDカメラ5は、試料セル10からの反射光を検出し、濃淡画像データを出力する(ステップS3)。
図6はCCDカメラ5が撮像した画像を模式的に示す図である。CCDカメラ5が撮像した画像には、試料セル10の各所の光の反射率に応じた濃淡が現れる。図6の201は金属薄膜101に相当する明るい(反射率が高い)領域であり、202は被測定物質102による反射率の谷を示す暗い(反射率が低い)領域である。なお、図6では、空白箇所103(被測定物質配置用箇所)に相当する領域203を点線で示している。
こうして、画像処理部64は、被測定物質配置用箇所に相当するPY座標上で入射角−反射率曲線を導出することを被測定物質配置用箇所毎に行うことにより、入射角−反射率曲線のデータを被測定物質102毎に求めることができる。なお、図6のPY方向は、図1の紙面に対して垂直なY方向に相当する。
図6のような濃淡画像において、試料セル10の被測定物質配置用箇所の位置は既知である。閾値処理部650は、CCDカメラ5から出力された濃淡画像において、被測定物質配置用箇所の輝度値が所定の閾値より暗い場合は、被測定物質有りと判定して、値を例えば「1」とし、被測定物質配置用箇所の輝度値が閾値以上の明るさの場合は、被測定物質無しと判定して、値を例えば「0」とするコード化を行う。閾値処理部650は、このようなコード化を図6のPY方向に沿って被測定物質配置用箇所毎に順番に行う。
データ処理装置6の試料セル照合部66は、データベース7を参照し、試料セルコード化部65から出力された識別コードと一致する識別コードを有する試料セルの配列情報をデータベース7から取得して、この配列情報を表示部63に表示させる(ステップS6)。以上のようにして、本実施例では、試料セルを識別することができ、SPR測定装置の使用者は、被測定物質の内容と被測定物質が試料セル上のどこに配置されているかを認識することができる。
次に、本発明の第2実施例について説明する。本実施例においても、SPR測定装置の構成および処理の流れは第1実施例と同様なので、図1、図3、図5の符号を用いて説明する。
図8Aは本実施例で用いる試料セル10の構造を示す平面図、図8Bは図8Aの試料セル10の一部の個所110を拡大した図である。
なお、本実施例では、金属薄膜101上の複数の被測定物質102のうち1箇所をコード化の対象としたが、複数箇所をコード化の対象として、それぞれ被測定物質配置用箇所104から位置をずらすようにしてもよい。n箇所の被測定物質102をコード化の対象とすれば、試料セル10に4^nの識別コードを付与することができる。
第2実施例では、被測定物質102の位置ずれ量をコード化したが、被測定物質102の幅をコード化してもよい。すなわち、本実施例では、試料セル10の複数の被測定物質102のうち、少なくとも1個のコード化対象の被測定物質102のY方向の幅を、本来の幅から意図的にずらしておくことで、この幅をコード化する。
なお、第2実施例と同様に、金属薄膜101上の複数の被測定物質102をコード化の対象としてもよい。
第3実施例では、被測定物質102の幅をコード化したが、被測定物質102の開始位置、終了位置をコード化してもよい。すなわち、本実施例では、試料セル10の複数の被測定物質102のうち、少なくとも1個のコード化対象の被測定物質102のY方向の開始位置と終了位置を、本来の位置からずらすことで、この開始位置、終了位置をコード化する。
次に、本発明の第5実施例について説明する。図15は本実施例で用いる試料セル10の構造を示す断面図である。金属薄膜101上に被測定物質102を固定することは従来と同様であるが、本実施例では、被測定物質102の中に被測定物質102と屈折率の虚部が異なる特性制御材105を埋め込むことにより、入射角−反射率曲線の最低反射率を意図的にずらし、この最低反射率をコード化して、試料セル10を識別する、
被測定物質102に対する特性制御材105の濃度を変えることで、図16に示すように入射角−反射率曲線の最低反射率を意図的にずらすことができ、異なる最低反射率に対してそれぞれ値を割りつけておくことにより、コード化することができる。図16の例では、コード160の例として、5段落の最低反射率に応じて「0」、「1」、「2」、「3」、「4」という値が得られる。
次に、本発明の第6実施例について説明する。図18は本実施例で用いる試料セル10の構造を示す断面図である。本実施例では、金属薄膜101と被測定物質102との間に被測定物質102より屈折率の低い材料からなる特性制御層108を挟むことにより、図19に示すように入射角−反射率曲線に本来の反射率の谷300とは別に、もう1つの反射率の谷301を生じさせ、この反射率の谷301の有無をコード化し、試料セル10を識別する。
こうして、本実施例によれば、試料セル10の識別コードを抽出することができ、第1実施例と同様の効果を得ることができる。
次に、本発明の第7実施例について説明する。図22は本実施例で用いる試料セル10の構造を示す断面図である。本実施例では、金属薄膜101上に固定する被測定物質102の膜厚を同一の被測定物質102の中でY方向に沿って変化させることにより、202のPY方向の形状(屈折率分布)を生じさせ、この中に谷、または山があるか、もしくは、谷と山にそれぞれ、コードを割当てて、試料セル10を識別する。
図22に示したような試料セル10を測定すると、図23に示すようにPYの値は、Y方向に被測定物質102の膜厚のパターンに応じた曲線を与える。すなわち、被測定物質102が厚い部分では大きな値になり、非測定物質が薄い部分では小さな値になる。
次に、本発明の第8実施例について説明する。図25は本発明の第8実施例に係るSPR測定装置のデータ処理装置の構成例を示すブロック図である。
本実施例のデータ処理装置6は、第1実施例〜第7実施例と同様に、制御部60と記憶部61と入力部62と表示部63とを備え、さらに制御部60内に試料セル判定部67が追加されたものである。
本実施例では、データベース7に、試料セルの識別コードと、この試料セルの製造日時情報とが対応付けてあらかじめ登録されている。
試料セル判定部67は、データベース7を参照し、試料セルコード化部65から出力された識別コードと一致する識別コードを有する試料セルの製造日時情報をデータベース7から取得して、この製造日時情報を表示部63に表示させる(図26ステップS7)。また、試料セル判定部67は、取得した製造日時情報に基づいて試料セルの有効期限が過ぎていないかどうかを判定し、判定結果を表示部63に表示させる(ステップS8)。
次に、本発明の第9実施例について説明する。第1実施例と同様に、SPR測定装置は、プリズム1と、光源2と、偏光板3と、集光レンズ4と、CCDカメラ5と、データ処理装置6と、データベース7と、ポンプ8と、流路9とを有する。
制御部60は、画像処理部64と、入射角コード化部68と、液体サンプル判定部69とを有する。
本実施例では、試料セル10として、透明体100上に形成された金属薄膜101と、金属薄膜101上の被測定物質配置用箇所に固定された被測定物質102と、金属薄膜101上の検出物質配置用箇所に固定された、液体サンプルの性状で屈折率が変化する液体サンプル検出物質109とを有するものを用いる。液体サンプル検出物質109としては、例えば液体サンプルと反応して減少する物質、液体サンプルと反応して消失する物質、液体サンプルと反応して屈折率が変化する物質が考えられる。
CCDカメラ5は、試料セル10からの反射光を検出し、濃淡画像データを出力する(ステップS3)。
図30A、図30BはCCDカメラ5が撮像した画像を模式的に示す図であり、図30Aは液体サンプル流入前にCCDカメラ5が撮像した画像を示す図、図30Bは液体サンプル流入後にCCDカメラ5が撮像した画像を示す図である。
例えば液体サンプル中の抗原と被測定物質102中の抗体とが反応すると、反射率の谷が現れる入射角が変化し、被測定物質102の入射角−反射率曲線は図31の特性Aから特性Bへと変化する。
したがって、例えば図31のθthを閾値とすれば、正常な液体サンプルと液体サンプル検出物質109との反応と、不正常な液体サンプルの流入による液体サンプル検出物質109の無反応とを区別することができる。
液体サンプル判定部69は、液体サンプルの流入後に入射角コード化部68から出力されるコードに基づいて液体サンプルが正しいかどうかを判定する(ステップS11)。すなわち、液体サンプル判定部69は、入射角コード化部68から出力されたコードがデータベース7に登録されている場合は、正常な液体サンプルが流入したと判定し、入射角コード化部68から出力されたコードがデータベース7に登録されていない場合は、液体サンプルが正しくないと判定する。そして、液体サンプル判定部69は、判定結果を表示部63に表示させる。以上のようにして、本実施例では、液体サンプルの正否を判定することができる。
次に、本発明の第10実施例について説明する。本実施例は、第1実施例〜第8実施例で説明した試料セルの識別技術と、第9実施例で説明した液体サンプルの正否判定技術とを組み合わせたものである。本実施例においても、SPR測定装置は、プリズム1と、光源2と、偏光板3と、集光レンズ4と、CCDカメラ5と、データ処理装置6と、データベース7と、ポンプ8と、流路9とを有する。
制御部60は、画像処理部64と、試料セルコード化部65と、試料セル照合部66と、入射角コード化部68と、液体サンプル判定部69とを有する。
なお、第1実施例〜第10実施例のSPR測定装置は、インターネット接続装置を含んでもよく、データベース7は、インターネット上のサーバーにあってもよい。
Claims (27)
- 金属薄膜上の一部に被測定物質及びこの被測定物質と異なる物質の少なくとも一方により光の反射率の特徴的構造がコードとして予め形成された試料セルに対して、前記金属薄膜に前記被測定物質が固定された面と反対側から集光した光を照射する光源と、
前記試料セルからの反射光を検出するカメラと、
このカメラで撮像された画像の特徴から前記コードを抽出するコード化手段とを備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
前記試料セルは、前記金属薄膜上の被測定物質の有無のパターンを試料セル識別用の前記コードとするものであり、
前記コード化手段は、前記カメラで撮像された画像から得られる前記被測定物質の有無のパターンに基づいて前記コードを抽出する手段を備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
前記試料セルは、前記金属薄膜上の被測定物質の規定位置に対する位置ずれ量を試料セル識別用の前記コードとするものであり、
前記コード化手段は、前記カメラで撮像された画像から得られる前記被測定物質の規定位置に対する位置ずれ量に基づいて前記コードを抽出する手段を備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
前記試料セルは、前記金属薄膜上の被測定物質の幅を試料セル識別用の前記コードとするものであり、
前記コード化手段は、前記カメラで撮像された画像から得られる前記被測定物質の幅に基づいて前記コードを抽出する手段を備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
前記試料セルは、前記金属薄膜上の被測定物質の開始位置と終了位置のうち少なくとも一方を試料セル識別用の前記コードとするものであり、
前記コード化手段は、前記カメラで撮像された画像から得られる前記被測定物質の開始位置と終了位置のうち少なくとも一方に基づいて前記コードを抽出する手段を備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
前記試料セルは、前記金属薄膜上の被測定物質に埋め込まれた、前記被測定物質と屈折率の虚部が異なる特性制御材による最低反射率の変化を試料セル識別用の前記コードとするものであり、
前記コード化手段は、前記カメラで撮像された画像から得られる入射角−反射率曲線の最低反射率に基づいて前記コードを抽出する手段を備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
前記試料セルは、前記金属薄膜と前記被測定物質との間に設けられた、前記被測定物質より屈折率が低い特性制御層による反射率の谷の有無を試料セル識別用の前記コードとするものであり、
前記コード化手段は、前記カメラで撮像された画像から得られる入射角−反射率曲線の反射率の谷の有無に基づいて前記コードを抽出する手段を備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
前記試料セルは、前記金属薄膜上の被測定物質の膜厚のパターンを試料セル識別用の前記コードとするものであり、
前記コード化手段は、前記カメラで撮像された画像から得られる入射角−反射率曲線の反射率のパターンに基づいて前記コードを抽出する手段を備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
さらに、前記試料セルの識別用のコードと、この試料セルの被測定物質の配列情報とが対応付けて予め登録されたデータベースと、
前記コード化手段で抽出されたコードと一致するコードを有する試料セルの配列情報を、前記データベースから取得する試料セル照合手段とを備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
さらに、前記試料セルの識別用のコードと、この試料セルの製造日時情報とが対応付けて予め登録されたデータベースと、
前記コード化手段で抽出されたコードと一致するコードを有する試料セルの製造日時情報を前記データベースから取得し、前記試料セルの有効期限を判定する試料セル判定手段とを備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
さらに、前記コード化手段で抽出されたコードに基づいて前記試料セルの取り付けの正否を判定する試料セル判定手段を備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項1記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
さらに、前記試料セルの前記被測定物質が固定された面に液体サンプルを流すポンプと、
前記コード化手段で抽出されたコードに基づいて前記液体サンプルの正否を判定する液体サンプル判定手段とを備え、
前記試料セルは、前記液体サンプルの性状で屈折率が変化する液体サンプル検出物質が前記金属薄膜上に固定されたものであることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項12記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
前記コード化手段は、
前記カメラで撮像された画像から、少なくとも前記被測定物質および液体サンプル検出物質に対する前記光の入射角と反射率との相関関係を求める画像処理手段と、
前記入射角と反射率との相関関係において最低反射率が得られる光の入射角をコード化する入射角コード化手段とからなることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項12記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
さらに、正常な液体サンプルと前記液体サンプル検出物質とが反応した場合に前記コード化手段が出力すべきコードが予め登録されたデータベースを備え、
前記液体サンプル判定手段は、前記試料セルへの前記液体サンプルの導入後に前記コード化手段で抽出されたコードが前記データベースに登録されている場合に、正常な液体サンプルが導入されたと判定することを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 請求項12記載の表面プラズモン共鳴測定装置において、
前記液体サンプル検出物質は、前記液体サンプルと反応して減少する物質、前記液体サンプルと反応して消失する物質、前記液体サンプルと反応して屈折率が変化する物質のいずれかであることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定装置。 - 金属薄膜上の一部に被測定物質及びこの被測定物質と異なる物質の少なくとも一方により光の反射率の特徴的構造がコードとして予め形成されていることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。
- 請求項16記載の表面プラズモン共鳴測定用試料セルにおいて、
前記金属薄膜上の被測定物質の有無のパターンを試料セル識別用の前記コードとすることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。 - 請求項16記載の表面プラズモン共鳴測定用試料セルにおいて、
前記金属薄膜上の被測定物質の規定位置に対する位置ずれ量を試料セル識別用の前記コードとすることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。 - 請求項16記載の表面プラズモン共鳴測定用試料セルにおいて、
前記金属薄膜上の被測定物質の幅を試料セル識別用の前記コードとすることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。 - 請求項16記載の表面プラズモン共鳴測定用試料セルにおいて、
前記金属薄膜上の被測定物質の開始位置と終了位置のうち少なくとも一方を試料セル識別用の前記コードとすることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。 - 請求項16記載の表面プラズモン共鳴測定用試料セルにおいて、
前記金属薄膜上の被測定物質に埋め込まれた、前記被測定物質と屈折率の虚部が異なる特性制御材による最低反射率の変化を試料セル識別用の前記コードとすることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。 - 請求項16記載の表面プラズモン共鳴測定用試料セルにおいて、
前記金属薄膜と前記被測定物質との間に設けられた、前記被測定物質より屈折率が低い特性制御層による反射率の谷の有無を試料セル識別用の前記コードとすることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。 - 請求項16記載の表面プラズモン共鳴測定用試料セルにおいて、
前記金属薄膜上の被測定物質の膜厚のパターンを試料セル識別用の前記コードとすることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。 - 請求項16記載の表面プラズモン共鳴測定用試料セルにおいて、
試料セル上に導入される液体サンプルの性状で屈折率が変化する液体サンプル検出物質が前記金属薄膜上に固定されていることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。 - 請求項24記載の表面プラズモン共鳴測定用試料セルにおいて、
前記液体サンプル検出物質は、前記液体サンプルと反応して減少する物質、前記液体サンプルと反応して消失する物質、前記液体サンプルと反応して屈折率が変化する物質のいずれかであることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定用試料セル。 - 金属薄膜上の一部に被測定物質及びこの被測定物質と異なる物質の少なくとも一方により光の反射率の特徴的構造がコードとして予め形成された試料セルに対して、前記金属薄膜に前記被測定物質が固定された面と反対側から集光した光を照射する照射手順と、
前記試料セルからの反射光を検出する撮像手順と、
この撮像手順で得られた画像の特徴から前記コードを抽出するコード化手順とを備えることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定方法。 - 請求項26記載の表面プラズモン共鳴測定方法において、
さらに、前記試料セルの前記被測定物質が固定された面に液体サンプルを流す導入手順と、
前記コード化手順で抽出されたコードに基づいて前記液体サンプルの正否を判定する液体サンプル判定手順とを備え、
前記試料セルは、前記液体サンプルの性状で屈折率が変化する液体サンプル検出物質が前記金属薄膜上に固定されたものであることを特徴とする表面プラズモン共鳴測定方法。
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