JPWO2009037785A1 - 体液成分の分析器具の検査方法および体液成分の分析器具 - Google Patents

Abstract

保持された試薬の量が確実かつ高精度に検査でき、非破壊的で全数検査が可能となるような体液成分の分析器具の検査方法、および体液成分の分析器具を提供する。体液に含まれる特定の成分と反応して呈色する試薬５と、前記試薬を保持する試薬保持室４が凹設されたプレート部材３とを備える体液成分の分析器具において、前記試薬保持室４に入射光を照射し、そこからの透過光を測定して吸光度を算出し、それに基づき前記試薬５の保持量を算出することができる。

Description

本発明は体液成分の分析器具の検査方法、および体液成分の分析器具に関する。

体液成分の分析器具として、微量の体液の試料を試薬が保持された試験片に滴下し、試料が試薬と反応した後の光学的特性などを測定することによって体液成分の分析が可能となる器具についての技術が知られている（特許文献１、２参照）。この検査器具は、試験片に設けられた試料供給口に体液の試料を供給したのち、当該試料を流路を通じて試薬が備えられた試薬保持室に移送し、当該試薬保持室にて呈色反応を発生させた後、測定室にて吸光度を測定することによって所望の体液成分を測定することができるように構成されている。

当該分析器具は複数のプレート部材の積層によって構成されており、試料供給口から測定室に至る流路は一部の層に設けられた溝などによって形成される。また、前記試薬保持室は一部の層に凹部が設けられることによって形成され、当該凹部の中に試薬が塗布、乾燥されて保持されている。

当該分析器具の製造時、凹部が設けられたプレート部材に前記試薬が一定量滴下され、その後必要に応じて積層工程に移る。製品ごとに分析結果にばらつきが生じてはならないため、個々の製品に保持される試薬の量も一定であることが必要とされる。しかし実際には、試薬を滴下する際に使用されるノズル口の状態は微妙に異なるため、製品個体ごとに試薬保持量にばらつきが生じることは避けられない。

そこで従来から、製品ごとのばらつきを防止し、一定品質を確保するため、製造ロットごとに抜き取り検査を実施し、その時不合格品が発見されれば、不合格品が属するロット全体を不合格品として廃棄するという品質保証手法を採用していた。そのため、特に一つのロットを構成する製品数が多い場合、廃棄する製品も多数に上るため、結果として高コストを招来していた。このときの検査方法は、抜き取った製品に実際に成分が既知の試料を与え、得られた測定値が予め定めておいた許容範囲内に収まっているか否かで合否を判定するというものである。ここでもしも全数検査を適用することができれば、廃棄する製品が最小限の数量となるためこの点でコスト的に有利となるが、上記検査方法を実施すると製品の機能を消尽してしまう、すなわち破壊検査であるため、全数検査を実施することは不可能である。

ところで、前述の通り、試薬はプレート部材に設けられた凹部に保持されている。凹部の範囲の面積が既知であり、試薬が形成する液柱の高ささえわかれば、保持されている試薬の量は乗算により算出できる。しかし、実際には前記液柱の高さは均一とはならないため、当該方法による試薬の量の定量は困難である。
特開平８−１１４５３９号公報 特開２００２−２２４０９０号公報

そこで、保持された試薬の量が確実かつ高精度に検査でき、非破壊的で全数検査が可能となるような体液成分の分析器具の検査方法、および体液成分の分析器具が求められていた。

本発明は、前記課題を解決するためになされたもので、請求項１に記載の発明は、体液に含まれる特定の成分と反応して呈色する試薬と、前記試薬を保持する試薬保持室が凹設されたプレート部材とを備える体液成分の分析器具の検査方法において、前記試薬保持室に入射光を照射する工程と、前記試薬保持室からの透過光または反射光を測定する工程と、前記入射光および前記透過光または反射光に基づき吸光度を算出する工程と、前記吸光度に基づき前記試薬の保持量を算出する工程とを有することを特徴とする体液成分の分析器具の検査方法である。

請求項１に記載の発明によれば、体液成分の分析器具についての検査方法であって、光を使用する非破壊的な検査方法を提供する。したがって低コストで全数検査が可能となり、その結果、不良品のみを除去することができ廃棄数量が減少するためコスト削減が実現する。また製品に保持された試薬の量を高精度に測定することができ、品質の向上および品質の均一化が実現する。

請求項２に記載の発明は、前記試薬保持室の周囲が光非透過性または光非反射性を有することを特徴とする請求項１に記載の体液成分の分析器具の検査方法である。

請求項２に記載の発明によれば、試薬保持室の周囲が光を透過しないまたは光を反射しないため、検査の際入射光として試薬保持室よりもやや大きい面積で光を照射しても、透過光または反射光は試薬保持室の大きさに対応する光束に制限される。したがって、検査の際の入射光照射工程において、試薬保持室の位置と入射光照射位置とのあいだに精密な位置精度が要求されることなく、高精度の検査が可能となる。

請求項３に記載の発明は、前記プレート部材が、光非透過性または光非反射性を備えるとともに開孔を有する膜が基材に貼着されてなり、前記開孔と前記基材とが前記試薬保持室を画成することを特徴とする請求項１に記載の体液成分の分析器具の検査方法である。

請求項３に記載の発明によれば、プレート部材自体に凹欠部を加工する必要がなく、フラットな基板に、開孔を有するパターンを、スクリーン印刷やグラビア印刷などで印刷することによって、試薬保持室となる凹部を相対的に形成することができる。さらに同時に、試薬保持室の周囲に光非透過性または光非反射性を付与することができ、検査の際の入射光照射工程において、試薬保持室の位置と入射光照射位置とのあいだに精密な位置精度が要求されることなく、高精度の検査が可能となる。

請求項４に記載の発明は、前記試薬の光吸収帯に属さない波長の光を少なくとも１つ含む、波長の異なる複数の光のそれぞれについて前記吸光度を算出し、複数の前記吸光度から変換された補正吸光度を算出し、前記補正吸光度に基づき前記試薬の保持量を算出することを特徴とする請求項２または３に記載の体液成分の分析器具の検査方法である。

請求項４に記載の発明によれば、試薬に吸光されない波長の光についての吸光度、すなわち試薬保持室の面積のみの指標となるパラメータを別途測定し、試薬保持室の面積の差異に起因する部分を除去して補正することによって、高精度の試薬量測定が可能となる。すなわち、非透過性または非反射性物質を周囲に配置して区画されている試薬保持室の面積は製造精度により個体差が生じ、試薬保持室の面積のばらつきが与える影響を排除することができる。

請求項５に記載の発明は、前記呈色により吸光度が変化する波長帯と異なる波長帯に光吸収帯を有する色素が前記試薬に含有されていることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の体液成分の分析器具の検査方法である。

請求項５に記載の発明によれば、体液成分の分析のために用いる光の波長と全く異なる波長域に光吸収帯を有する色素を試薬に別途添加し、当該色素の光吸収帯の波長の光を用いることによって、体液成分の分析という製品としての機能に全く影響を及ぼすことなく、高精度な試薬量の測定を行うことが可能となる。

請求項６に記載の発明は、体液に含まれる特定の成分と反応して呈色する試薬と、光非透過性または光非反射性を備えるとともに開孔を有する膜が基材に貼着されてなるプレート部材とを備え、前記開孔と前記基材とから形成される凹部に前記試薬が保持されていることを特徴とする体液成分の分析器具である。

請求項６に記載の発明によれば、体液成分の分析器具を提供することができ、当該分析器具に保持された試薬の量は高精度に検査されるため、高品質でかつ均一な品質の当該器具を提供することができる。また、当該検査方法は光を使用する非破壊的な検査であり、低コストで全数検査が可能となり、さらに不良品のみを廃棄することにより廃棄数量が少なく、コスト削減に寄与する。また、プレート部材自体に凹欠部を加工するかわりに、フラットな基材にスクリーン印刷やグラビア印刷などによって開孔を有するパターンを貼着することによって、試薬保持室となる凹部を相対的に形成することができ、当該部に試薬を保持することができる。それと同時に、試薬保持室の周囲に光非透過性または光非反射性を付与することができるため、検査の際の入射光照射工程において、試薬保持室の位置と入射光照射位置とのあいだに精密な位置精度が要求されることなく、試薬量の高精度な検査が可能となる。

請求項７に記載の発明は、前記試薬は前記特定の成分と反応すると呈色し、前記呈色により吸光度が変化する波長帯と異なる波長帯に光吸収帯を有する色素が前記試薬に含有されていることを特徴とする請求項６に記載の体液成分の分析器具である。

請求項７に記載の発明によれば、体液成分の定量のために用いる波長と全く異なる波長域に光吸収帯を有する色素を試薬に別途添加し、当該色素の光吸収帯の波長の光を用いることによって、体液成分の分析という製品としての機能に全く影響を及ぼすことなく、高精度な試薬量の検査を行うことが可能な、体液成分の分析器具を提供することができる。

請求項８に記載の発明は、前記色素が可視波長帯に光吸収帯を有することを特徴とする請求項７に記載の体液成分の分析器具である。

請求項８に記載の発明によれば、基材などが光吸収帯を有さない可視波長帯に、前記色素が光吸収帯を有するため、基材の影響を受けることなく、試薬量を精度よく検査することが可能な、体液成分の分析器具を提供することができる。

本発明によれば、体液成分の分析器具についての検査方法であって、光を使用する非破壊的な検査方法を提供することができる。したがって低コストで全数検査が可能となり、その結果、不良品のみを除去することができ廃棄数量が減少するためコスト削減が実現する。また製品に保持された試薬の量を高精度に測定することができ、品質の向上および品質の均一化が実現する。

本発明の実施の形態を示す断面図である。 本発明の実施の形態（光源および受光部を除いて見る）を示す分解斜視図である。 本発明の実施の形態を示す拡大断面図である。 本発明の実施の形態の変形例を示す断面図である。 本発明の実施の形態における試薬保持量と吸光度の関係を示すグラフである。

符号の説明

１ 第１プレート
１１ 試料供給口
２ 第２プレート
２１ 貫通孔
２２ 溝
２３ 貫通孔
３ 第３プレート
３１ 基材
３２ 光非透過性膜
３３ 光非反射性膜
４ 試薬保持室
５ 試薬
６ 測定室
７ 流路
８ 光源
９ 受光部

つぎに、この発明の実施の形態について図面に基づき説明する。

図１および図２に本発明に係る実施の形態を示す。図１は本発明に係る実施の形態を示す断面図であり、図２は本発明に係る体液成分の分析器具の分解斜視図である。本実施の形態は、試薬保持室からの透過光を用いて吸光度を測定し、試薬量を検査する形態となっている。なお、本実施の形態に係る体液成分の分析器具は、血漿試料を適用して体液成分が測定されるよう構成されているが、別途濾過手段を試料供給口に重ね合わせて設け、血球成分を分離濾過してから供給できるよう構成すれば、全血を試料として適用することもできる。さらに、濾過手段の中に、高比重リポ蛋白（ＨＤＬ）以外のリポ蛋白と反応して凝集させる凝集試薬を含有させ、凝集物を当該濾過手段で分離濾過できるよう構成しておけば、全血試料を適用して、高比重リポ蛋白中コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）を選択的に定量することができるような検査器具を実現することができる。

図１および図２のように、本実施の形態に係る検査器具は、第１プレート１と、第２プレート２と、第３プレート３とが、両面テープなどの接着層（図示なし）を介して接着されて構成される。

第１プレート１には貫通孔からなる試料供給口１１が設けられている。第２プレート２には試料供給口１１と略同心位置に貫通穴２１が設けられ、また離隔した位置に貫通穴２３が設けられ、当該２つの貫通穴２１、２３を溝２２が連通している。

第３プレート３は、基材３１に光非透過性膜３２が貼着されて構成される。基材３１は貫通穴などがないフラットで光透過性のある板材であり、光非透過性膜３２は、貫通孔２３と略同心位置に開孔３３を有する。基材３１および開孔３３によって試薬保持室４が形成され、ここに試薬５が保持される。

また、第１プレート１、貫通孔２３および第３プレート３によって、測定室６が画成される。測定室６は、試薬５と反応した試料について測定をおこなうための室である。本実施例では、試薬保持室４と測定室６とが平面上同じ位置で上下に配置されているが、平面上で離隔した位置に配置することも可能である。

さらに、第１プレート１、第３プレート３および溝２２によって、流路７が画成される。流路７は試料供給口１１と測定室６とを結び、試料が移送される経路となる。

第１プレート１および基材３１には、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）やＡＳ樹脂のようなプラスチック材料が、光透過性を有しかつ加工が容易であるため好適である。しかし、光が透過することを妨げず、また試料が漏出することがないよう形成することができれば、これに限定されるものではない。

光非透過性膜３２は、ブラックカーボンなどの黒色顔料をスクリーン印刷やグラビア印刷などにより印刷することによって、基材３１に貼着される。しかし、光非透過性を確保することができれば、これに限られるものではなく、例えば黒色顔料に代えて酸化チタン粒子などの白色顔料を用いることも可能であり、印刷に代えて塗料を塗布することも可能である。

なお、試薬保持室４は、第３プレート３を一つの単体の部品とし、貫通孔２３と略同心位置に凹部を設けその中に試薬を充填することによって形成されることも可能である。その場合、第３プレート３について、試薬保持室４の位置においては光透過性を有し、試薬保持室４の周囲においては非光透過性を有するよう構成すれば前記と同様の効果を奏するが、そのためには例えば光非透過性を有する塗料を別途塗布したり、試薬保持室４に相当する範囲をくりぬいた光非透過性を有する膜を別途貼着するなどの方法がある。

第２プレート２には、不通水性で通気性のある多孔質材を用いれば、空気抜き孔等を設けることなく試料を測定室３に移送することが可能となる。不通水性で通気性のある多孔質材として、たとえば市販のポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）膜や、市販のセルロースアセテートまたはセルロース混合エステル製の濾紙について撥水処理を施したものが挙げられる。このとき流路７が撥水性を有しているため、毛管現象による自然流入は発生せず、加圧または吸引操作をすることによって、試料供給口１１から溝２２を通り、測定室６まで移送される。ここで加圧操作および吸引操作の方法は任意であるが、例えば加圧操作は、試料供給口１１を覆うような弾性体の栓体を設け、それを加圧することによって実現され、吸引操作は、第２プレート２の一部にポンプを接続して吸引することによって実現される。

一方、第２プレート２に親水性の高い材料を用いても構成可能であるが、その際、毛管現象によって試料が移送されるよう、溝２２の幅など設定しておく必要がある。この場合、試料を試料供給口１１から測定室６に移送するのに、加圧や吸引等の操作力を必要としない。

本実施の形態に係る器具の製造時、試薬５は試薬保持室４に滴下され乾燥される。試薬保持室４は印刷された顔料の厚さを深さとする凹みとなるため、適量に滴下された場合、試薬５は開孔３３の面積内にとどまり、これ以上広がらない。ここで当該部に滴下された試薬５は、図３に示す通り試薬保持室４内において高さが必ずしも一定とならないため、開孔３３の面積に高さを乗じるといった方法で試薬の量を求めることはできない。

試薬５は、体液に含まれる特定の成分と反応して呈色するよう調製されている。ここで、特定の成分としては血中のグルコース、コレステロール、尿酸、尿中のグルコース、蛋白などが挙げられ、これらと反応する試薬として各種の調製が公知となっており、それらを用いることができる。

次に、本実施の形態に係る体液成分の分析器具を用いた、体液成分の分析の手順および当該器具の作用について説明する。

まず試料供給口１１に体液の試料を滴下する。なお、試料供給口１１手前に濾過手段を設け、全血試料を濾過手段に付与し、その中の血球成分その他分析の妨げとなる物質を予め分離濾過してから、試料供給口１１に供給されるような形態に構成することも可能である。

試料供給口１１に試料を滴下した後、加圧操作や吸引操作をすることによって、もしくは毛管現象によって、試料は測定室６まで移送される。試料は測定室６に到達した後、試薬保持室４に保持された試薬５と反応する。ここで第１のプレート１および基材３１は、少なくとも測定室６の位置において透明に構成されている。したがって、反応が完了するのに必要な時間が経過した後、外部の光源８１から測定室６に向け照射した入射光と、受光部８２により測定室６を透過した透過光とを検出することによって、測定室６における吸光度を測定することができ、そして得られた吸光度に基づき、試料中の所望の成分を定量することが可能となる。

本実施の形態では、試薬保持室４と測定室６とが平面上同じ位置で上下に配置されているため、測定室６の中で試料が試薬５と反応するよう構成されている。しかし、試薬保持室４と測定室６の位置はこれに限られるものではなく、試料供給口１１から測定室６に至るまでの中途に、別途反応室（図示なし）となる空間を設け、さらに反応室と同位置に開孔部３３を配置することによって、反応室と試薬保持室４とが平面上同じ位置で上下に並ぶよう構成することができる。これによって、試料を試料供給口１１から移送する際、一端反応室に留め、ここで反応室の下部に位置する試薬保持室４に保持された試薬５との反応を進行させ、反応が終了した後再び移送を開始して測定室６まで移送し、測定室６での測定に供することが可能となる。

なお、本実施の形態では、透過光により吸光度を測定する形態であるが、反射光により吸光度を測定する形態とすることも可能である。その場合、図４に示すとおり、測定部６に入射した光が透過しないよう、基材１２に光非透過性膜１３貼着させることによって第１プレートを形成し、光非透過膜１３が第２プレート２側を向くよう第１プレートを配置すればよい。試薬の層を通過した光を反射させるため、光非透過性膜１３には反射能の高い白色顔料が好適であり、基材１２にスクリーン印刷やグラビア印刷などで印刷するのが簡便である。また、測定室６の位置にさえ光非透過性膜１２が備えられていれば十分であるが、第１プレート１全面に備えられていてもよい。

次に、本実施の形態に係る体液成分の分析器具の検査方法について説明する。なお、上述の体液成分の分析器具については、器具の内部で試料を移送できるような、積層構造の分析器具の実施の形態について述べてきたが、以下に記す試薬量の検査方法は、例えば第３プレート３のみから構成されるような単層構造の体液成分の分析器具についても適用できる。単層構造の体液成分の分析器具の場合、試薬保持部４に直接試料を滴下し、同じ場所で反応させ、さらに分析に供するという分析手順となる。

試薬５は試薬保持室４に保持されており、試薬５は特定の波長を光吸収帯とする成分を複数含んでいる。すなわち、試薬５の吸光度と試薬５の量は線形の関係にあり、試薬５の吸光度を測定することによって試薬５の量を検査することができる。

試薬５の吸光度を測定するため、試薬保持室４に入射光をを照射し、試薬保持室４からの透過光または反射光を測定することによって、吸光度を測定することができる。あらかじめ試薬量が既知である場合の吸光度を得ておくことによって、吸光度と試薬量の対応関係が得られ、その対応関係に基づき測定された吸光度に応じた試薬量を求めることができる。

具体的には、体液成分の分析のための手順と同様、図１に示すように、外部の光源８１から試薬保持室４に向け照射した入射光と、受光部８２により試薬保持室４を透過した透過光とを検出することによって、試薬５の吸光度を測定することができ、そして得られた吸光度に基づき、試薬５の量を検査することが可能となる。

なお、本実施の形態では、透過光により吸光度を測定する形態であるが、これは体液成分の分析の手順として透過光を用いる形態であるため、試薬量の検査の手順についてもそれに準じるのが、特別な装備を別途用意する必要としないという点で簡便である。その一方で、反射光により吸光度を測定する形態とすることも可能である。その場合、図３のように、体液成分の分析の手順として反射光を用いる形態である場合、試薬量の検査の手順についてもそれに準じて反射光により吸光度を測定するのが、特別な装備を別途用意する必要としないという点で簡便である。

ここで、本実施の形態においては、試薬保持室４の周囲に顔料が印刷されることにより相対的に形成される凹部が試薬保持室４となり、すなわち試薬保持室４の面積は顔料が印刷されていない範囲によって決定される。しかし、印刷精度の問題より試薬保持室４の面積は必ずしも均一とはならず、その結果、透過光または反射光の光量に試薬保持室４の面積の誤差が含まれるため、吸光度測定値にも影響が及び、検査結果の精度低下の要因となる。

ここで、試薬の光吸収帯に属さない波長の光をさらに照射して吸光度を測定することによって、前記の精度低下を回避することができる。その原理は以下の通りである。

試薬の光吸収帯に属する第１の波長λ_１および試薬の光吸収帯に属さない第２の波長をλ_２について、それぞれの波長の光を同じ光量で照射するものとする。第１の波長λ_１の光を光量Ｉ_０で照射した場合、まず試薬保持室４の周囲の光非透過性物質により一部が吸光され、その残りが試薬保持室４に光量Ｉ_２で入射する。その後さらに試薬５により一部が吸光され、そして最終的にＩ_１の光量で透過する。このときの測定される吸光度をＥ_１とすると、以下の式で表わされる。

それに対して、第２の波長λ_２の光を光量Ｉ_０で照射した場合、試薬保持室４の周囲の光非透過性物質により一部が吸光されるが、その残りが試薬保持室４に光量Ｉ_２で入射し、そしてそのままＩ_２の光量で透過する。このときの測定される吸光度をＥ_２とすると、以下の式で表わされる。

したがって、光非透過性物質による吸光分を除外した、すなわち吸光試薬保持室４の面積のばらつきの影響を除外した補正吸光度Ｅは、実際に試薬保持室４に入射した光量Ｉ_２と、透過した光量Ｉ_１との関係から求められ、以下の式で表わされる。

したがって、上記２つの波長の光それぞれについて吸光度Ｅ_１およびＥ_２を算出し、上記式に代入して求められる補正吸光度Ｅが、試薬５の量と線形の関係を有する。ただし、光非透過性膜３２により吸光された光量が、試薬５により吸光された光に比べ十分少ない場合は、試薬保持室４の面積のばらつきによる影響も同様に十分少ないため、吸光度Ｅ_１のままでも試薬５の量と良好な線形関係を示す。

ここで試薬５が、紫外部にのみ光吸収帯を有する成分しか含まない場合があり、このとき試薬量を測定するための照射光として紫外光を選択すべきことになる。ところが、体液成分の分析器具の第１プレート１などのプレート材を形成する樹脂も紫外部に光吸収帯を持つ場合が多い。そのため、試薬量を精度よく検査するためには、照射光として可視領域を用いることが望ましい。可視波長域に光吸収帯を有する成分が試薬に含まれない場合、可視光を吸収する色素などの物質を試薬に添加することによって、試薬量の検査が可能となる。ただし、製品としての機能を損なわないために、すなわち体液成分の分析に影響を与えないために、前記添加される物質は試料に含まれる成分と反応しないことが求められる。また同様の理由により、試薬が試料と反応して呈色して吸光度が変化する波長帯と、添加される物質の光吸収帯が重ならないことが必要である。

なお、前述の通り、本実施の形態においては試薬保持室４の周囲は光非透過性または光非反射性の膜が存在することにより、透過光または反射光の光束の大きさが制限される。したがって、試薬保持室の位置と光源の位置とのあいだに精密な位置精度は不要であり、簡易な装置で検査が可能となる。しかし、高精度な位置精度を実現できる場合、試薬保持室の周囲について光非透過性または光非反射性に仕上げる手当ては不要となる。

ここで、試薬の量が既知である体液成分の分析器具について、本発明に係る検査方法を用いて試薬の吸光度を測定した結果を示す。

ここで使用した体液成分の検査器具の形態は、第３プレート３のみからなる単層構造であり、基材３１としてＰＥＴフィルムを使用し、光非透過性膜３２としてカーボンインキをスクリーン印刷したものを用いている。開孔３３の大きさ直径１．２ｍｍであり、印刷の厚さは約１０μｍである。

試薬５は、体液中のグルコース濃度を分析する構成となっているが、そのままでは可視波長域に光吸収帯を持たないため、別途色素を添加している。試薬５の調製は以下の通りである。

試薬５の調製
黄色４号 １０ｍｇ
グルコース脱水素酵素 ２００Ｕ
ジアフォラーゼ １５０Ｕ
グッド緩衝剤（ＢＥＳ） ２００ｍＭ
界面活性剤（ＣＨＡＰＳ） ５ｍｇ
Ｈ_２Ｏ １ｍＬ

試薬５は試薬保持室４に滴下したのち乾燥させることにより、第３プレート３に保持させた。試薬の量は、２８０ｎＬを基準の１００％とし、５０％から１５０％までの以下の５種についてそれぞれ２０個の標本を作成し、試薬量の検査に供した。

試薬保持量
５０％：１４０ｎＬ
７５％：２１０ｎＬ
１００％：２８０ｎＬ
１２５％：３５０ｎＬ
１５０％：４２０ｎＬ

照射光には第１の波長λ_１が４０５ｎｍの光と、第２の波長λ_２が８１０ｎｍの光の、２種類の波長の光を用いた。ここで、４０５ｎｍの波長は、試薬に含まれる黄色４号の光吸収帯に属しており、一方８１０ｎｍの波長は試薬５に含まれるいずれの成分の光吸収帯にも属していない。全ての標本について上記２つの光に対する吸光度Ｅ_１、Ｅ_２をそれぞれ測定し、補正吸光度Ｅを算出し、さらに平均値、標準偏差および変動係数を求めた。

測定結果を表１および図５に示す。

図５に示すとおり、試薬保持量が７５％〜１２５％の範囲において、試薬保持量と吸光度の関係が直線となっており、本発明に係る方法により体液成分の分析器具の検査が良好に実施可能であることが判明した。

試薬保持量が５０％の場合と１５０％の場合は直線から外れているが、これは、試薬保持量が５０％の場合は、試薬が試薬保持室４の面積の全面を覆っておらず、試薬保持室４に光を照射しても試薬が存在しない範囲から光が抜けるため、試薬保持室４に光を照射して得られた吸光度と試薬５の量との間に相関が無くなるからである。一方、試薬保持量が１５０％の場合は、滴下した試薬が試薬保持室４の領域を超えて拡がるため、試薬保持室４の吸光度と試薬の量との間に相関が無くなるからである。

しかし、実際の製造工程において、試薬の滴下量に２５％以上もの誤差が生じることは極めてまれである。また、試薬量が正常と判断される上下限を適正に設定しておくことによって、万が一線形域を外れるほどの大幅な誤差が試薬滴下時の発生した製品であっても、不良品として判断され廃棄される。したがって、本発明に係る検査方法は、製品の検査方法として実用上問題ない。

また、表１に示す通りＥ_２はＥ_１に比べ十分小さい。すなわち光非透過性膜３２により吸光された光量が、試薬５により吸光された光量より十分少ないため、波長が４０５ｎｍの光のみで求めた吸光度Ｅ_１によっても試薬５の量は検査可能である。しかし、表１に示す通り、波長が８１０ｎｍの光による吸光度Ｅ_２を加味して補正した補正吸光度Ｅを用いた方が、吸光度Ｅ_１を用いた場合よりも変動係数が小さくなる。すなわち個々の製品における試薬保持室の面積のばらつきの影響が排除され、より正確な試薬量を測定することができる。

Claims (8)

1. 体液に含まれる特定の成分と反応して呈色する試薬と、
   前記試薬を保持する試薬保持室が凹設されたプレート部材と
   を備える体液成分の分析器具の検査方法において、
   前記試薬保持室に入射光を照射する工程と、
   前記試薬保持室からの透過光または反射光を測定する工程と、
   前記入射光および前記透過光または反射光に基づき吸光度を算出する工程と、
   前記吸光度に基づき前記試薬の保持量を算出する工程とを有する
   ことを特徴とする体液成分の分析器具の検査方法。
2. 前記試薬保持室の周囲が光非透過性または光非反射性を有する
   ことを特徴とする請求項１に記載の体液成分の分析器具の検査方法。
3. 前記プレート部材が、光非透過性または光非反射性を備えるとともに開孔を有する膜が基材に貼着されてなり、
   前記開孔と前記基材とが前記試薬保持室を画成する
   ことを特徴とする請求項１に記載の体液成分の分析器具の検査方法。
4. 前記試薬の光吸収帯に属さない波長の光を少なくとも１つ含む、波長の異なる複数の光のそれぞれについて前記吸光度を算出し、
   複数の前記吸光度から変換された補正吸光度を算出し、
   前記補正吸光度に基づき前記試薬の保持量を算出する
   ことを特徴とする請求項２または３に記載の体液成分の分析器具の検査方法。
5. 前記呈色により吸光度が変化する波長帯と異なる波長帯に光吸収帯を有する色素が前記試薬に含有されている
   ことを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の体液成分の分析器具の検査方法。
6. 体液に含まれる特定の成分と反応して呈色する試薬と、
   光非透過性または光非反射性を備えるとともに開孔を有する膜が基材に貼着されてなるプレート部材とを備え、
   前記開孔と前記基材とから形成される凹部に前記試薬が保持されている
   ことを特徴とする体液成分の分析器具。
7. 前記呈色により吸光度が変化する波長帯と異なる波長帯に光吸収帯を有する色素が前記試薬に含有されている
   ことを特徴とする請求項６に記載の体液成分の分析器具。
8. 前記色素が可視波長域に光吸収帯を有する
   ことを特徴とする請求項７に記載の体液成分の分析器具。

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