JPWO2005113767A1 - ダイオキシン類等応答性プラスミド、ダイオキシン類等測定用遺伝子導入細胞、並びにそれを用いたダイオキシン類等検出方法及びバイオセンサー - Google Patents
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Abstract
Description
P.A. Behnisch、 K. Hosoe、 S. Sakai、 Bioanalytical screening methods for dioxins and dioxin-like compounds:a review of bioassay/biomarker technology、 Environ. Int. 27 (2001) 413-439. 特願2004-135662「ダイオキシン類測定用形質転換体並びにそれを用いたダイオキシン類の検出方法、定量分析方法及びスクリーニング方法」
表-1に示されるように、タバコ煙には極めて高レベルのAhR活性化能が認められた。なお、タール含量とDAP値の間にはほぼ正の相関が認められるが、タール含量が1mgのものと20mgのものを比較した場合、前者のDAP値は後者のそれの1/20ではなく、1/3程度に過ぎない。また、DAP値はタール含量が20mgの銘柄よりも14mgの銘柄のほうが逆に高い。これらの事実は、一般に健康への影響度の指標として用いられているタール含量が、生物学的毒性の指標としては不充分であることを意味しており、より実用的な、新たな指標としてのDAP値の意義は高い。
10 ダイオキシン類応答性プラスミド(pDRE-SEAP)
11 ダイオキシン類高感受性遺伝子配列(MMTV-DRE)
12 分泌型マーカータンパク遺伝子(SEAP)
13 ポリアデニレーションシグナル(polyA)
14 芳香族炭化水素受容体(AhR)
15 コアクチベーター(Arnt)
16 SEAP遺伝子のメッセンジャーRNA
17 リボゾーム
18 SEAPタンパク
19 細胞外へのSEAPタンパクの分泌
20 ダイオキシン類
Claims (10)
- ダイオキシン類、及び/又は多環芳香族炭化水素に応答性を有するプラスミドであって、
ダイオキシン類及び/又は多環芳香族炭化水素に反応して活性化される遺伝子(以下、DRE遺伝子という。)と、
前記DRE遺伝子の下流に分泌型マーカータンパク発現遺伝子
とを含むことを特徴とするプラスミド。 - 前記分泌型マーカータンパク遺伝子は、アルカリホスファターゼ発現遺伝子であることを特徴とする請求項1に記載のプラスミド。
- 前記DRE遺伝子が2つ以上組み込まれていることを特徴とする請求項1又は2に記載のプラスミド。
- 前記DRE遺伝子が所定のプロモーターの一部に組み込まれていることを特徴とする請求項1又は2に記載のプラスミド。
- 前記分泌型マーカータンパク遺伝子の下流にポリアデニレーションシグナルを更に含むことを特徴とする請求項1から4のいずれかに記載のプラスミド。
- ダイオキシン類及び/又は多環芳香族炭化水素を測定するための遺伝子導入細胞であって、
芳香族炭化水素受容体を高発現させる細胞に請求項1から5のいずれかに記載のプラスミドが導入され、
ダイオキシン類及び/又は多環芳香族炭化水素を含む雰囲気に置かれると分泌型マーカータンパクを分泌することを特徴とする遺伝子導入細胞。 - 前記細胞がマウスの癌細胞株(Hepa-1c1c7)であることを特徴とする請求項6に記載の遺伝子導入細胞。
- 請求項6又は7に記載の遺伝子導入細胞を含み、該遺伝子導入細胞をダイオキシン類及び/又は多環芳香族水素の検出に用いることを特徴とするバイオセンサー。
- 請求項6又は7に記載の遺伝子導入細胞を評価対象雰囲気に置いたときに前記遺伝子導入細胞が分泌する分泌型マーカータンパクの活性を測定することによりダイオキシン類及び/又は多環芳香族水素を検出することを特徴とするダイオキシン類及び/又は多環芳香族炭化水素の検出方法。
- 請求項6又は7に記載の遺伝子導入細胞をタバコ煙に曝露させたときに前記遺伝子細胞が分泌する分泌型マーカータンパクの活性を測定することによりタバコ煙の生物学的毒性を評価することを特徴とするタバコ煙の生物学的毒性の評価方法。
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