JPS6393733A

JPS6393733A - 悪性腫瘍等の治療方法

Info

Publication number: JPS6393733A
Application number: JP24067886A
Authority: JP
Inventors: Kenichi Kawamura; 河村　研一
Original assignee: Sekisui Chemical Co Ltd
Current assignee: Sekisui Chemical Co Ltd
Priority date: 1986-10-09
Filing date: 1986-10-09
Publication date: 1988-04-25

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、悪性腫瘍等の治療方法に関する。

（従来の技術）悪性腫瘍の有効な治療方法のひとつとしてパンセル（Ｂ
ａｎｓａｌ　；　１９７８）　、ターマン（Ｔｅｒｍａ
ｎ　；　１９８０）　。

レイ　（Ｒａｙ　　；　１９８２）らにより、ブドウ状
球菌の一種のスタフィロコッカス　オーレウス　コーワ
ン■株（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ
　Ｃｏｗａｎ　！　）の細胞膜成分であるプロティンＡ
　（Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ａ　）を不活性担体に担持させた
プロティンＡ担持体を用いる方法が報告されている。こ
のプロティンＡ担持体に例えば生体からの血液を分離し
て得られた血漿を接触させ、接触後の血漿を再び血液固
形分と合わせて全血とし、生体に戻すと悪性腫瘍細胞が
速やかに壊死することが確認されている。

Ｂａｎ５ａｌらは悪性Ｍ！！！瘍を有する生体内には、
正常な免疫機能を阻止する因子が増加し、生体にとって
は異物である癌細胞を認識する機能が働かないために悪
性腫瘍の増殖が助長されると考えた。このような阻止因
子（血清阻止因子）としては、悪性腫瘍細胞表面が特異
抗原となり、この特異抗原により生成する抗体、抗原−
抗体結合物にさらに補体が結合して大きなマトリックス
を形成した免疫複合体、免疫抑制酸性糖蛋白質などが挙
げられ。

これらを除去することにより悪性腫瘍の増殖が阻止され
ると考えた。上記プロティンＡは、はとんどの哺乳動物
の免疫グロブリン（Ｔｇ；主として免疫グロブリンＧ　
（ＩｇＧ））のＦｃ部分と結合する性質を有する。その
ため、彼らはプロティンＡ担持体に血漿を接触させると
、上記血清■止置子を包含するＩｇが吸着・除去され、
その結果、正常な免疫系が復活して腫瘍細胞が排除され
るものと考えたやしかし、　Ｔｅｒｍａｎらが用いたプ
ロティンＡの量はわずか数■である。このような微量の
プロティンＡに血清阻止因子が吸着することによりｍｍ
が急速に壊死することを説明することができない。

そのため、　Ｒａｙ　、ベルトラム（Ｂｅｒｔｒａｍ）
らは、上記プロティンＡが原因となりＴ−インターフェ
ロンやナチュラルキラー活性が誘導され、これらが悪性
腫瘍細胞に作用し急速にこれを壊死させる。

という仮説をたてた。しかし、その詳細な機構は不明で
ある。

（発明が解決しようとする問題点）本発明者は上記プロティンＡの作用機構を解明し、より
効果的な悪性腫瘍等の治療方法を開発し本発明を完成し
た。本発明の目的は、効果的な悪性腫瘍等の治療方法を
提供することにある。

（問題点を解決するための手段）発明者は、悪性腫瘍患者から、免疫複合体を多量に含み
濁度の大きな血清を得て、これをプロティンＡ担持体と
接触させたところ、血清が清澄化しかつ血清中に悪性腫
瘍特異抗原と強力な反応性を示すＩｇＧが含有されてい
るのを確認した。このことから１発明者らは、悪性腫瘍
患者の血漿もしくは血清中には本来悪性腫瘍と特異的に
反応してこれを壊死させる悪性腫瘍特異抗体が存在し、
これが上記ＩｇＧに相当すると考えた。さらに、この悪
性腫瘍特異抗体は免疫複合体として存在するため、その
活性能がブロックされているが、プロティンＡの作用に
より悪性腫瘍特異抗体が免疫複合体から遊離し、そのこ
とにより悪性腫瘍特異抗体の悪性腫瘍細胞に対する活性
能が回復するとの仮説をたてた。この仮説が正しいとす
れば、血液中の免疫複合体を解離させて得られる悪性腫
瘍特異抗体を投与すれば悪性腫瘍等を効果的に治療しろ
る。この考えをもとに種々の実験を重ねた結果。

この発明を完成するに至った。

本発明の悪性腫瘍等の治療方法は、生体から得られた血
液、血漿および血清のうちの少なくとも一種を超音波処
理後、同一または同種の生体内に注入することを包含し
、そのことにより上記目的が達成される。

本発明方法により治療を行うには９例えばまず。

悪性腫瘍を有する生体から一定量の血液を抜きとって１
〜１０”　ｋ）Ｉｚ　、好ましくは１５〜５００ｋｌｌ
ｚの超音波を用いて超音波処理を行う。周波数が低すぎ
ると充分な効果が得られず、高すぎると血球成分が破壊
されたり蛋白成分が過度に変性するおそれがある。血液
の代わりに血ユ２や血清を使用してもよい。この超音波
処理により血液（血禁、血清）中に含有される免疫複合
体が解離し、悪性腫瘍特異抗体が遊離する。処理時間は
特に制限されないが。

免疫複合体を充分に解離させるためには３０秒〜４時間
の範囲が適当である。処理時間が極端に短いと充分な効
果が得られず、極端に長いと血液中の蛋白質が変性する
おそれがある。このような超音波処理の電力は約１０〜
１００ワツト、通常約２５〜７５ワツトである。超音波
処理時の温度は特に限定されないが、！常約１５〜４０
”Ｃに維持することが好ましい。処理後の血液（血漿、
血清）をもとの生体と同一または同一種の生体に注入す
る（例えば。

静脈注射を行う）と、含有される悪性腫瘍特異抗体が悪
性腫瘍細胞に作用してこれを壊死させる。

このように、生体から一定量の血液を抜きとり。

この血液（血清、血清）を処理した後に再び血管内へも
どす（ｏｆｆ　１ｉｎｅ）方式のほか、生体から連続的
に血液を抜きとり、これを超音波処理した後。

連続的に生体内へ返血する体外還流（ｏｎ　１ｉｎｅ）
方式も採用されうる。

例えば２図に示すように、家兎などの生体１がらの血液
は、ヘパリン供給器２がらポンプ２１で送うレルヘハリ
ン（血液凝固阻止剤）と共にポンプ１１により超音波処
理装置３へ供給される。超音波処理された血液にはそこ
に含有される前記ヘパリンを中和するためのプロタミン
がプロタミン供給器４からポンプ４１を介して添加され
る。この処理血液は９次いで、もとの生体（家兎）１の
静脈に戻される。家兎１から得られる全血を血漿成分と
血球成分とに分離し、血漿成分のみの超音波処理を行っ
た後、再び血球成分とあわせて返血しても同等の効果が
得られる。上記超音波処理装置３における超音波照射の
時間はｏｆｆ　１ｉｎｅ方式の場合と同様である。

（作用）このように、従来技術のプロティンＡの作用機構を検討
した結果、効果的な悪性腫瘍等の治療方法を開発するこ
とができた。本発明によれば、悪性腫瘍を有する生体の
血液（血漿、血清）を超音波処理することにより血液（
血漿、血清）中の免疫複合体が解離して悪性腫瘍特異抗
体が遊離する。

この悪性腫瘍特異抗体を含む処理血液（血漿、血清）を
生体にもどすと、悪性腫瘍特異抗体は悪性腫瘍細胞に特
異的に作用してこれを壊死もしくは縮小させる。悪性腫
瘍特異抗体を含む処理血液（血漿、血清）をもとの生体
と同種の生体へ注入しても同等の効果が得られる。

ところで、超音波照射の生体物質に対する影響は、これ
までにいくつかの報告がある。例えば。

細菌やウィルスの培養懸濁液に超音波を照射すると媒質
中にＨＮＯＺが生成し、これにより該細菌やウィルスが
死滅するという報告（雄山平三部ら；「電気評論Ｊ　２
９　（１９４１）　）　　；卵白アルブミン水溶液に９
　ｋＨｚの超音波を照射すると熱変性に類似の構造変化
が生じるという報告〔チェンバーズし。

Ａ、ら（Ｃｈａｍｂｅｒｓ　Ｌ、　Ａ、　ｅｔ　ａｌ　
；　Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｎ＋、　）１１４　（１
９３６）　７５−８３）がある、後者において、特に芳
香族アミノ酸残基の環状部分が変化を受けることが述べ
られている。本発明においては、上記卵白アルブミンの
構造変化にみられる蛋白質の変性が一部で生じる可能性
もあるが、超音波処理の主たる効果は、免疫複合体を解
離し、悪性腫瘍抗体を遊寵させることにある。これは、
後述の実施例に述べられるように、悪性腫瘍患者血清を
超音波処理することにより、（１）ポリエチレングリコ
ール水溶液による沈澱（免疫複合体）量が減少すること
；および（２）超音波処理後の血清が悪性腫瘍抗原とゲ
ル内沈降反応により沈降線を形成すること；により裏づ
けられる。

（実施例）以下に本発明を実施例につき説明する。

実庭炭上生後６週齢の家兎の背部皮下に腫瘍細胞Ｖｘ２を５Ｘ１
０’個移植し、４週間後に耳介静脈から探血した。これ
を遠心分離し、血球成分を除去して血清を得た。この血
清のうち１−を超音波発振装置を用い、　５０ｋＨｚの
超音波を２時間照射したく電力４５ワツト）、処理後の
血清を７％ポリエチレングリコール（和光純薬社製、　
ＰＥＧ　６０００）　　１　ｎｔｌに溶解し室温でゆる
やかに攪拌した。３０００ｒ、ｐ、ｍ、で１０分間遠心
分離後上清を除去し、沈澱物（主として免疫複合体）を
得た。これに生理食塩水１　ｍｌを加えて再溶解し、再
び７％ポリエチレングリコール水溶液１−を加えて、　
３０００ｒ、ｐ、ｍ、で１０分間遠心分離を行った。上
清を除去し、生理食塩水３１ｎｌを加えて溶解し２分光
光度計を用いて２８０ｎｍの吸光度の測定を行った。未
処理の血清についても同様の方法で処理し、吸光度の測
定を行った。その結果を下表に示す。

このように超音波処理を行った血清は吸光度が低下し、
血清中の免疫複合体の量が減少していることがわかる。

実相■１実施例１と同様の方法で家兎からの血清の超音波処理を
２時間行った。

他方＊　　Ｖ　ｘ　２腫瘍細胞１０７個を３Ｍ塩化カリ
ウムを含有する０、ＯＬＭ　ＰＢＳ　（ｐＨ７，０）に
加え、４℃で１６時時間中かに攪拌した。不溶部分を４
０，０００　Ｇで３０分間遠心処理して除去し、その上
清を０．ＯＬＭＰＢＳ　（ｐＨ７，０）で−晩透析にか
けた。これをさらに４０，０ＯＯＧで３０分間遠心分湘
し、不溶部分を除去した。上清を減圧濃縮して１−のＶ
ｘ２表面抗原溶液を得た。

このＶｘ２表面抗原溶液と上記超音波処理後の血清とで
ゲル内沈降反応を行なったところ沈降線が形成された。

一方、未処理の血清とＶｘ２表面抗原溶液とでゲル内沈
降反応を行なったが沈降線は形成されなかった。

実施■１生後６退動の家兎の背部皮下に腫瘍細胞Ｖｘ２を５Ｘ１
０’個移植し、４週間後に耳介静脈から採血した。これ
を遠心分離し、血球成分を除去して血清を得た。この血
清２０−を超音波発振装置を用い。

５０ｋＨｚの超音波で２時間処理を行った（電力４５ワ
ツト）。これを上記担癌家兎の耳介静脈から１時間をか
けて徐々に注入した。注入開始後３０分で背部皮下に形
成された潰瘍部分が黒灰色に変化し。

潰瘍面の低下をきたした。潰瘍部は周囲の正常組織に比
べてその温度が上昇した。翌日腫瘍径を計測したところ
注入前に比べ約２５％縮小しているのが認められた。こ
こで、腫瘍径は腫瘍部分の長径をφ１．短径をφ２とす
ると仄で示される値である。

（発明の効果）本発明によれば、このように、悪性腫瘍を有する生体の
血液、血漿および血清のうちの少なくとも一種を超音波
処理した後、これを投与することにより悪性腫瘍等が速
やかに壊死・縮小する。血液や血漿の超音波処理は体外
で行われるため副作用も極めて少ない。

４、　ス　　の　　ｔ゛な１第１図は家兎体内からの血液を本発明方法を用いて連続
的に処理し悪性腫瘍の治療を行う説明図である。

１・・・生体、３・・・超音波処理装置。

以上

Claims

【特許請求の範囲】１、生体から得られた血液、血漿および血清のうちの少
なくとも一種を超音波処理後、同一または同種の生体内
に注入することを包含する悪性腫瘍等の治療方法。２、前記超音波の周波数が１〜１０＾３ｋＨｚである特
許請求の範囲第１項に記載の治療方法。３、前記超音波処理が３０秒〜４時間の範囲で行われる
特許請求の範囲第１項に記載の治療方法。