JPS638341A - 悪性腫瘍のシンチグラフイ−可視化用診断助剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は悪性腫瘍のシンチグラフィー可視化用診断助剤
、この診断助剤を用いる悪性腫瘍のシンチグラフィー可
視化法、ならびＫかかる診断助剤の製法に関する。

悪性腫瘍の大きさおよび位置を早期に識別しうる診断助
剤を利用したいという要望が長い間存在していたｒ−線
放射性核種と結合した物質の人体中における分布／！！
ターンを感度よく検出しそして像様に可視化しうる核医
学的方法を用いてこの目的を達する試みがなかったわけ
ではない。この方法が成功するか否かは悪性腫瘍中に特
異的にまたは非特異的に濃縮する化合物が見出せるかど
うかにかかつている。

腫瘍のシンチグラフィーにはほとんど追跡できないほど
の数の肺癌会合物質が使用されている。しかしながら、
これら物質は膿瘍特異的でなくそしてその腫瘍に対する
親和性はしばしば知られていない。これには無機物質例
えば、ガリウム−６７サイトレート、インジウム−１１
１クロライド１およびビスマス−２０６クロライドが包
含される。しかしまた、１３Ｎ−グルタメートおよび７
ＳＳｅ−メチオニンのような腫瘍の代謝産物もすでにシ
ンチグラフィーによる腫瘍の検出て用いられている（　
Ｔ１．　Ｈｅｎｚｅ氏のｒＳｚｉｎｔｉｇｒａｐｈｉｓ
ｃｈｅＬＯｋａｌｉＳａｔｉＯｎ日ｄｉａｇｎ０８ｔｉ
ｋ　　ＶＯｎ　　Ｔｕｍｏｒｅｎ（Ｄｌａｇ−ｎｏｓｔ
ｉｃ　　Ｌｏｃａｌｉｚｚｔｉｏｎ　　ｏｆ　　Ｔｕｍ
ｏｒｓ　　Ｊｒ　　５ｃｉｎ　−ｔｉｇｒａｐｈｙ）ｊ
　Ｍｕｎｃｈ、ｍｅｄ、Ｗｓｃｈｒ、１２７，１８２〜
１８４（１９８５）参照）。終りに、５７Ｃ○−プレオ
マイシンのよう表放射性標識された細胞増殖抑制剤また
は１３１ニーアンチフイブリンのような膿瘍会合タンパ
ク質もすでに使用されている。これら物質のすべては、
それらがしばしば低濃度にしか膿瘍に濃縮されず、従っ
て＠瘍の病巣が小さい場合に特に＠瘍の位置の明確な判
定ができないという点で共通している。

しかし々がら、近年、放射性標識された膿瘍特異的なモ
ノクローナル抗体またはそれらの免疫学的に活性な断片
が利用できるようになったことで＠瘍シンチグラフィー
も相当に進歩した（　Ａ、　Ｍ、　Ｋｅｅｎａｎ氏他の
”　Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎ
　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ”　ｌ’−Ｔｈｅ
　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ＮｕｃｌｅａｒＭｅｄｉａｉ
ｎｅＪ　２６．５３１〜５３７　（１９８５）参照）。

これら抗体の生体内力学が改良されたのですでに非常に
有望な成果がもたらされている。利用しうる核医学的方
法により定量的かつ腫瘍の図形的可視化が可能である。

しかしながらこれまで使用された抗体の異種性ゆえに感
度、特異性または副作用に関する臨床経験は比較的少な
い。モノクローナル抗体は、それに正確に対応する抗原
を細胞表面上に担持する腫瘍に対してのみ付着しうると
いう事実を有する。それゆえモノクローナル抗体の特異
性の高さゆえに関心のある腫瘍の一般的検出は何らでき
ない。

さらに、ヨーロッパ特許出願筒１４２，６４１号には放
射線エミッター、色素または細胞増殖抑制剤で標識され
た免疫モジュレータ−を含有する、腫瘍の診断および治
療のための薬剤が開示されている。この薬剤は好ましく
はアルデヒドおよびアルコールからなるカクテルと一緒
に投与される。好ましい免疫モジュレータ−はある種の
細菌種から得られるムラミルジはプチド誘導体、ｋブチ
ドグリカンまたはにブチドグリカン不含抽出物を包含す
ることが理解される。診断助剤の投与３０分前に前記カ
クテルを飲んだ患者で腫瘍の検出が可能であった。

今、ムレインの酵素処理において得られ、それに放射性
核種が錯体形成剤によって結合している物質を含有する
診断助剤を悪性腫瘍のシンチグラフィー可視化に用いた
場合に、アルデヒドおよびアルコールからなるカクテル
の投与がなくてもすむことが見出された。

ムレインの酵素処理により得られる物質は例えばＢ、　
Ｇｌａｕｎｅｒ氏他の°’　Ｔｈｅ　Ａｎａｌｙｓｉｓ
　ｏｆＭｕｒａｉｎ　ｗｉｔｈ　ＨＰＬＣ”　ｉｎ　Ｔ
ｈｅ　Ｔａｒｇｅｔ　ｏｆ　Ｐｓｎ　−１Ｃ１１１ｎ、
　２９〜３４頁、Ｂｅｒｌｉｎ　（１９８３）に記載さ
れるような成分の混合物である。

これに加え、環状ムロペプチド、例えばＷ。

Ｗｅｌｅ１氏他の［ＡａＶ、　ｉｎ　Ｋｎｚｙｍｏｌ、
　Ｊ　旦、　１９３〜２３２（１９６４）記載のような
ムロにプチドＣ４の寄与および分子量約１００００まで
を有する高分子量ムレイン断片からの寄与も存在する。

この物質はエシエリヒア・コリ細胞から文献上知られた
方法により調製されたムレイ／（１０ｒｒｑ／ｍ／）を
０．０５　Ｍ酢酸アンモニウム中に懸濁しそして１０μ
ｍ／−の鶏卵白リゾチームと３７℃で１８時間インキュ
ベーションすることにより得られる。不溶の成分を５０
０００ｘｒで沈降させたのちクロロホルムで抽出しそし
て水相を乾燥する。酢酸アンモニウムを真空下に５０℃
で６５時間かかつて除去する。

この物質の遊離のアミン基に放射性核種を有する錯体形
成剤１例えばエチレンジアミン四酢酸、ジエチレントリ
アミン五酢酸またはニトリロトリ酢酸が結合する。この
目的にはテクネチウム−９９ｍまたはインジウム−１１
１が用いられるのが好ましい。

本発明による診断助剤が、任意の所望の細菌の細胞壁を
処理することによシ調製できることは特に好都合であゐ
。エシエリヒア・コリは凍結された細胞塊として商業的
に購入できるので、この微生物から得るのが好ましい。

ムレインの酵素処理により得られる物質を室温で複合鋤
形成剤と反応せしめるのが好ましい。過剰の複合体形成
剤を除去したのち溶液を凍結乾燥しそして所望の活性度
の放射性核種と混合する。次に滅菌濾過しセして等張塩
化ナトリウム溶液を用いて所望の活性濃度に調整する。

かくして得られた診断助剤は驚くべきことに広い範囲の
悪性ＭＡ　ｆｉ％の可視化に適する。軟組織膿瘍も骨腫
瘍も良好に識別されうる。

以下の実施例により本発明による診断助剤の調製および
使用について説明する。

実施例　１ ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ　）の結合エシ
エリヒア・コリから得られ、一般的に知られた方法によ
り酵素的に処理されたムレイン１０■をＩ）Ｈａ２のα
０５ｍ重炭酸塩緩衝液Ｃ１，５ｄ中に溶解させ、室温で
二環式ＤＴＰＡ無水物１０■を加えそしてとの混合物を
１０分間室温で放置する。過剰のＤＴＰＡをクロマトグ
ラフィーによシ除去する（支持体物質ニジリカゲルＲＰ
−１８、移動相：１４４．６９の０．１Ｍ燐酸塩溶液お
よびメタノール／水（７０：３０））。得られる生成物
溶液を分割して凍結乾燥する。

実施例　２ インジウム−１１１との反応 前記凍結乾燥物を聞６．５の０１ｍクエン酸アンモニウ
ム緩衝液中に溶解させ、そして所望の活性度例えば１０
０　ＭＢｑのインジウム−１１１サイトレートと室温で
混合する。このインジウム−１１１サイトレートは商業
的に入手しうるインジウム−１１１クロライドをｐ）１
６．５の０．１ｍクエン酸アンモニウムを用いて１：１
に希釈することによシ調製する。室温で１０分間放置後
この溶液をフィルターで滅菌Ｐ適しセして等張塩化ナト
リウム溶液を用いて所望の活性濃度に調整する。

放射化学的純度は高性能液体クロマトグラフィーにより
検査されうる。

支持体物質：シリカケ゛ル　ＲＰ−１８移　動　相：２
０分　　　０．１Ｍ　Ｈ３ｐｏ４．　Ｉｎ　４．６９１
２０分０〜１００％０、ＩＭ　Ｈ３ＰＯ４、ｐＨ４，６
９＋１５％Ｃ１（３０Ｈ この生成物はフィルターで滅菌濾過後はすぐ注射に使用
できる。標識づけ操作は製造者および使用者のいずれに
よっても行われうる。

実施例　６ 動物実験 スプレーグ（Ｓｐｒａｇｕｅ）−ドーリ−（：ｏａｗｌ
ｅｙ）系ラットの右前足の筋肉内にウォーカー（Ｗａｌ
ｋｅｒ）２５６癌（軟質組織腫瘍）を移植した。＠瘍が
正常に発育することを確認したのち、動物にＣＬ５＋ｄ
　（０，３ＭＢｑのインジウム−１１１）の生成物を静
脈注射により投与した。２時間後に得られるシンチグラ
ムを第１図に示す。腫瘍の縁辺は右前足に明らかに判別
されうる。１ｇＩＩ／筋肉比は４であった。

実施例　４ 動物実験 右後足に骨肉腫（骨鋤瘍）を移植されたラット（スプレ
ーグードーリ−系）に生成物０．５−（１３ＭＢＱのイ
ンジウム−１１１）を静脈内投与した。２時間後のシン
チグラム（第２図参照）には、ｍ瘍が明らかに存在する
。伸傷／筋肉比を測定すると同じく４であった。

【図面の簡単な説明】

第１図はラット右前足の癌のシンチグラムヲ写真で示す
ものであり、 第２図はラット右後足の骨肉腫のシンチグラムを写真で
示すものである。 特許出願人　　ヘキスト・アクチェンゲセルシャフトト
ご７１”ｒ− 代理人　弁理士　　旨　木　千　鳥・“゛外２名 Φ ム− へ Φ 匡

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）ムレインの酵素処理により得られる物質に錯体形成
   剤によつて結合した放射性核種を含有する悪性腫瘍のシ
   ンチグラフィー可視化のための診断助剤。 ２）放射性核種としてテクネチウム−９９ｍまたはイン
   ジウム−１１１が用いられた特許請求の範囲第１項記載
   の診断助剤。 ３）ムレインの分解産物がエシエリヒア・コリからのム
   レインから得られた特許請求の範囲第１項記載の診断助
   剤。 ４）錯体形成剤としてジエチレントリアミン五酢酸が用
   いられた特許請求の範囲第１項記載の診断助剤。 ５）特許請求の範囲第１項記載の診断助剤を患者に注射
   しそして身体内の放射能分布を測定することからなる、
   悪性腫瘍のシンチグラフィー可視化法。 ６）ムレインを処理することにより得られる物質を錯体
   形成剤に結合させたのち凍結乾燥し、そして標識化を行
   うに至つてはじめて再溶解させることからなる特許請求
   の範囲第１項記載の診断助剤の製法。