JPS635745A - 角膜創傷治癒用組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は眼の創傷治癒を促進するのに有利な効果を有す
る方法および材料に関するものである。

本発明の方法および材料は、放射状角膜切開のような角
膜屈折外科手術中に行われる角膜切開の治癒の促進に特
に有効である。角膜屈折手術において、本発明の方法お
よび材料は屈折の矯正程度を改善し、および（または）
結果をより良（コントロールし、結果を予測せしめ、同
時に廠痕形成を減らし、美容的外観を改善することがで
きる。

眼科医は長い間、眼の幾何学的欠陥による視障害の治療
に関心をもってきた。これらの障害の最も一般的なもの
は、角膜の過剰弯曲による近視および角膜の非対称性に
よって生ずる屈折障害である乱視である。近年、−般に
角膜屈折手術として知られる外科的処１の適用に大きな
関心が集まっている。この処置は角膜の幾何学を外科的
に変えることによってこれらの状態を矯正するものであ
る。もし成功すれば、そのような技術は従来の視力矯正
法、すなわちめがねまたはコンタクトレンズのような補
正レンズの使用にまさる一目瞭然の利益をもたらす。補
正レンズは装着が不便だったり心地良くなかったりする
ことが多く、失くしたり壊れたりする。コンタクトレン
ズには角膜擦傷および（または）感染の危険がある。も
し、予測可能な永久的矯正をもたらす信頼できる角膜屈
折外科手術法が開発されるならば、これらの問題を避け
ることができる。

放射状角膜切開は、角膜過剰弯曲によって生ずる近視を
矯正するのに用いる角膜屈折外科的方法である。この方
法では、−般には角膜の厚さの約９０〜９５％に達する
一連の切開が行われる。

普通は長さ約３ｍの切開が、角膜中心から外側に放射す
る線に沿って延びる。切開の数は少い場合は４から多い
場合は１６までの間にあり、８〜１２が一般に用いられ
る。切開は角膜を弛緩させ、いくらか平らにし、それに
よって近視を軽減または除去する。放射方向以外の方向
に角膜を切開する同様な方法を用いて若干の乱視が矯正
されている。

放射状角膜手術および関連角膜屈折手術はかなり普通の
ものになってきたが、全使用できる技術を用いて得ら結
果を非常によく予測したりコントロールすることは、ど
の患者においても不可能である。特に、ジオプトリーで
あられされる矯正程度は十分にはコントロールされず、
特定の個人に必要なちりより、多いか少いかである。そ
こで手術を繰返さなければならないし、さもなければ矯
正レンズがまだ必要になる。さらに治癒過程は一般に１
２〜２４ケ月を必要とし、その感に成る患者では視力が
不安定になる。すなわち角膜は手術の結果失われた弯曲
の一部をまたとり戻し始めるのである。角膜が最も平坦
になるのは一般には手術の約２日後であり、その後は切
開が治癒するまで弯曲が徐々に増加する。

若干の角膜切開患者には、擦傷による術後外視障害もお
こる。若干の例では治癒した切開部位の廠痕が目の中で
光を反射させ、特に夜にはまぶしさを感する。−日を通
じて視力が変化する結果となる。

角膜屈折手術が遭遇する上記の諸問題は、角膜切開の治
癒の仕方に関係がある。しかし、外科的切開の治癒過程
を著しく変えることによって、角膜屈折手術で得られる
結果を改善しようとする努力がなされているようにはみ
えない。

角膜創傷治癒に関する文献では多数の物質が議論された
。血漿および細胞外基質糖蛋白質であるフィブロネクチ
ンが角膜上皮層の傷または欠陥の治療における局所でき
創傷治癒剤として用いられた〔ファン（Ｐｈａｎ、Ｔ、
Ｍ、　ｅｔ　ａｔ）著、ＡＲＶＯ１９８５Ｓｕｐｐｌｅ
ｍｅｎｔ　ｔｏ　Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ　Ｏｐｈ
ｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ　＆Ｖｉｓｕａｌ　５ｃｉｅｎｃ
ｅ＋　２６巻、Ｎｏ、３．９２ページ（１９８５）　；
ニシダ等、　Ａｒｃｈ、Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ、、　１
０１巻、　１（１４）６−１（１４）８ヘージ（１９８
３）；　＋＋シダ等、　Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ、
　９２巻、　２．２１３−２１６ページ（１９８５）参
照〕。家兎の眼の皮質創傷の端におけるフィブロネクチ
ンの外観をスダ等が報告した〔現代眼科研究（Ｃｒｒｅ
ｎｔ　ＥｙｅＲｅｓｅａｒｃｈ）　、第１巻、９．５５
３−５５６ページ（１９８２）〕。ドウウニツク等（Ｄ
ｗｅｃｋ　ａｎｄ　ｃｏｗｏｒｋｅｒｓ）はｍｃ型コラ
ーゲンおよびフィブロネクチンが家兎の皮質創傷部位に
沈着していることを報告した（Ｐｈａｎ、　Ｔ、Ｍ、等
、ＡＲＶＯ１９８５Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ　ｔｏ　Ｉｎ
ｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ　Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ
　＆　Ｖｉｓｕａｌ　５ｃｉｅｎｃｅ、２６巻。

Ｎｏ、３．９２ページ、　１９８５）。

角膜屈折手術中に行われる切開のような深い支質創傷の
治癒メカニズムは、上皮創傷治癒のメカニズムよりかな
り複雑で、−般にはよく理解されていない。角膜切開中
に行われる切開は、横断面がＶ形を示す。それらは上皮
（外部角膜層）、基底膜、ボーマン膜および支！（角膜
の厚い構造層）の厚みの大部分を透通し、デスメー膜と
内皮のみは完全に無傷のま＼残す。

本発明は、角膜支質の創傷治癒を促進する方法および組
成物を提供する。発明の方法および組成物は、角膜支質
の外科的切開の治癒過程を変えることによって、角膜屈
折手術の結果を本質的に改善することができる。発明の
方法および組成物を用いることによって、角膜屈折手術
で得られる屈折矯正程度を本質的に改善することができ
る。その上、成る患者で得られる屈折矯正程度は、先行
技術の方法を用いた場合より著しくコントロール可能で
あり、予測可能である。本発明の方法および組成物は、
外科的切開のよう明白にコントロールされた治癒を促進
し、施療により生ずるまぶしさを減らし、美容的結果を
改善することもできる。

本発明の方法によると、支質組繊にまで延びている傷に
角膜モルタル組成物を挿入して創傷治癒を促進する。本
発明の角膜モルタル組成物は、角膜細胞が移動して行く
ための、および創傷治癒物質が創傷部位に沈着するため
の基質を提供するはたらきをする。

角膜屈折切開の場合には、角膜モルタル組成物は、創傷
治癒がおこっている間、切開壁間の最初の空間的関係の
維持を助けるはたらきをする。すなわち切開部に沈着し
た角膜モルタルは、治癒して行く間に切開壁が元の状態
に引き戻されそれによって手術の効果が一部後戻りする
のを防ぐ。したがって角膜は、切開によって与えられた
幾何学的変化を保つ傾向を示し、治癒過程を通じて視力
は安定に保たれる傾向を示す。

本発明の実地に用いられる角膜モルタル組成物は、フィ
ブロネクチンのような細胞外基質（ＥＣＭ）物質と、治
癒の間ＥＣＭ物賞を創傷内部に保有させるのに十分大き
い粘度を有する眼科学的に適合するキャリヤー物質とか
ら成る。発明の好ましい実施例において、角膜モルタル
組成物は二種類０ＥＣｈ物質、フィブロネクチンおよび
コンドロイチン硫酸塩と、表皮成長因子のような成長因
子とを含む。

■、　　モル　ル 発明の角膜モルタル組成物は、最低１種類のＥＣ門材料
と、眼科学的に適合するキャリヤー物質とを含んで成り
、その組成物は、傷が治癒するまでの間、創傷内部にＥ
ＣＭ材料を保持するのに十分大きい粘度を有する。ＥＣ
Ｍは、培養細胞によって構成された細胞外基質構造に見
出される物質である。

〔ブシー（Ｐｓｉｅｈ、Ｐ、）およびバウム（Ｂａｕｍ
、Ｊ、）　、Ｉｎｖｅｓｔ、０ｐｈｔｈ、　＆シｉｃ、
ｓｃｉ、＋２６巻：　４５７−４６３ページ（１９８５
）　）。ＥＣＭ材料は細胞外基質蛋白質および細胞外間
質物質を含む。前者は一般に高分子量（＞１５０．００
０ダルトン）線維素性糖蛋白質で、それらにはフィブロ
ふファン、コラーゲン、ヴイトロネクチン、エラスチン
、ラミニン、アクチン、フィブリノーゲンがある。後者
は多糖、グリコシルアミノグリカンで、コンドロイチン
硫酸、ヘパリン、ケラチン硫酸、およびヒアルロン酸ま
たはそのナトリウム塩を含む。

角膜モルタル組成物に使用するのに好ましいＥＣ門材料
はフィブロネクチンである。他のＥＣＭ材料を用いる場
合でも、フィブロネクチンが角膜モルタル組成物中に存
在するのが好ましい。フィブロネクチンは角膜モルタル
組成物中に、約０．５〜約９０重量％、より好ましくは
組成物の約２〜約４０重量％存在する。フィブロネクチ
ンは、約２２０　、０００ダルトンの分子量を有する糖
蛋白質（４−５χ　炭水化物）で、４４０．０００ダル
トンの二量体の形で存在する。フィブロネクチンは血漿
関連型および細胞関連型の二つのタイプがある。それは
、ニシダ等のＪａｐ、　Ｊ、　ｏｐｈｔｈ、、　２６巻
、４１６−２４ページ（１９８５）に記載される方法に
よって、血漿から都合良く抽出される。フィブロネクチ
ンは種々のその他の名称でもよばれている。たとえば低
温下不溶解グロブリン、表面線維芽細胞抗原、細胞表面
蛋白質、バンド１、Ｌ１バンド、バンド１１ゼータ−蛋
白質、主要線維芽細胞糖蛋白質、ガラクトプロティンＡ
、レッツ蛋白質（ｌａｒｇｅｒ　ｅｘｔｅｒｎａｌ　ｔ
ｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓｅｎｓｔｉｖｅ　ｐｒｏ
ｔｅｉｎ）、　ｍ１ｃｒｏ−ｆｉｂｒｉｌｌａｒ蛋白質
、細胞付着蛋白質、細胞粘着因子、抗ゼラチン因子、細
胞進展因子およびオプソニン因子などである。

フィブロネクチンの構造および活性の調査のためには、
バールスタイン等（Ｐｅａｒｌｓｔｅｉｎ　ｅｔ　ａｌ
、）のＭｏ１．　＆　Ｃａ１１．　Ｂｉｏｃｈｅｍ、、
　２９巻；　１０３−１２５ページ（１９８０）を参照
せよ。その上、フィブロネクチンと和動のアミノ酸配列
を著しい程度に有するＥＣＭ蛍白質、たとえばヴイトロ
ネクチン（スズキＳ、。

Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、＋　２５９巻：　１５３０７
−１５３１４ページ、１９８４）を好ましい実施態様で
用いることができる。

本発明の好ましい実施態様において、角膜モルタル組成
物はフィブロネクチンおよびコンドロイチン硫酸塩の両
方を含む。コンドロイチン硫酸塩は動物の結合組織のＥ
ＣＭに見出されるグリコシルアミノグリカンである。そ
れは三糖単位の繰返しによって形成されるポリマーであ
る。繰返し三糖単位の各々は１ケの硫酸基を含む。コン
ドロイチン硫酸塩には３異性体（コンドロイチン硫酸塩
Ａ、コンドロイチン硫酸塩Ｂ、コンドロイチン硫酸塩Ｃ
）があり、それらは三糖単位における硫酸基の位置が異
なる。３異性体すべてが本発明の角膜モルタル組成物に
有効である。コンドロイチン硫酸塩は市販されている。

コンドロイチン硫酸塩は角膜モルタル組成物中に、組成
物の約０．５〜約７５重量％の量で存在し得る。

角膜モルタル組成物はコラーゲンを含むこともできる。

これは正常な支質組織に存在するＥＣＭ物質である。コ
ラーゲンが存在する場合、その量は組成物の約５０重量
％以上にならないことが好ましい。どの型のコラーゲン
も角膜モルタル組成物に使用できるが、Ｉ型ウシコラー
ゲンがより好ましい。

角膜モルタル組成物は、正常支質組織に存在するもう一
つのＥＣＭ物質であるラミニンをも、組成物の約７５重
量％まで含むことができる。

ＥＣＦ物質であるフィブリノーゲンも角膜モルタル組成
物中に、組成物の約４０重量％含まれ得る。

本発明の角膜モルタル組成物が表皮成長因子のような成
長因子をも含むことが好都合である。成長因子は、細胞
分裂誘起蛋白質か、細胞増殖を促進するポリペプチドで
ある。多数の成長因子が知られている。これらには表皮
成長因子（ＥＧＦ）　、形質転換成長因子（ＴＧＦ　′
ｓ　）および神経成長因子（ＮＧＦ）がある。インシュ
リン−ポリペプチドホルモン−は細胞分裂誘起活性を有
し、インシュリンの細胞分裂誘起活性を著しく増加させ
ることが知られている非ペプチド、プロスタグランジン
Ｆ２α、と組み合わせて用いることができる〔ジメネッ
ツ・デ・アスア（Ｊｉｍｅｎｅｚ　ｄｅ　Ａｓｕａ、Ｌ
）等：　Ｃｏ１ｄ　Ｓｐｒｉｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｃｏｎ
ｆ　・細胞増殖（Ｃｅｌｌ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏ
ｎ）６巻、サトー（Ｓａｔｏ）！、、Ｃｏ１ｄ　Ｓｐｒ
ｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｓ２．ニューヨーク（１
９７９）、４０３−４２４ページ）。

インシュリンが線維芽細胞成長因子によっても同様に活
性化されることが、ラドランド（Ｒｕｄｌａｎｄ、　Ｐ
。

Ｓ）等のＰｒｏｃ、Ｎａｔｌ　、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、　
、　Ｕ、Ｓ、Ａ、　、　７６巻：１２７９−１２９３（
１９７４）に報告された。血小板由来　成長因子または
線維芽細胞由来　成長因子についても、インシュリン群
の化合物、たとえばソマトメジンＡおよびＣと組み合わ
せて使用した場合、細胞成長にプラスの影響を与えるこ
とが照明された〔スタイルズ（Ｓｔｉｌｅｓ、Ｃ，Ｄ、
）等のＰｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｅｊ。

、　Ｕ、Ｓ、Ａ、、７６巻、１２７９−１２８３ページ
（１９７９）　）。その上、最近多くの新しいペプチド
成長因子が分離され、特徴づけられた。これはバセルガ
（Ｒ，Ｂａｓｅｒｇａ）　ｍ、「組成成長因子（Ｔｉｓ
ｓｕｅ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｆａｃｔｏｒｓ）　Ｊ（Ｓｐｒ
ｉｎｇｅｒ　Ｖｅｒｌａｇ　Ｐｕｂ、、ニューヨーク、
１９８１）に示されている。本発明は、既知の成長因子
の１種類または複数種類をＥＣＭ物質と組み合わせて、
本発明の角膜モルタル組成物に使用することを考慮して
いる。

本発明の角膜モルタル組成物に使用する好ましい成長因
子は表皮成長因子（ＥＧＦ）である。ＥＧＦはアーデア
（Ｕｒｄｅａ）等のＰＮＡＳ（ＵＳＡ）、８０巻、７４
６１ページに記載されている方法によってヒトの組織か
ら得ることができる。

本発明の角膜モルタル組成物中に成長因子が含まれる場
合、成長因子は創傷部位の支質細胞成長を有効に促進し
得る量で用いられる。−般に成長因子は角膜モルタル組
成物中に、約０．０１μｇ／ｍ１〜約１００μｇ／ｄ、
より好ましくは約０．１μｇ／Ｉｎｉ、〜約１０μｇ／
ｍｌの濃度で存在し得る。この場合、成長因子の濃度の
厳密な上限はない。

本発明の角膜モルタル組成物中には眼科学的に適合する
キャリヤー物質も存在する。キャリヤー物質は粘度調節
剤、−般には希釈剤、として作用し、角膜モルタル組成
物に所望の粘度を与えるように選ばれる。キャリヤーは
普通は生理的ｐＨ，すなわち約６．５から約７．８まで
に緩衝された溶液である。燐酸緩衝塩溶液（ＰＢＳ）が
好ましいキャリヤー物質である。その他の適当なキャリ
ヤー物質としては、蒸留水、眼科用塩溶液、およびその
他の眼科用緩衝液、人工涙材料および粘弾剤、たとえば
ヒアルロン酸ナトリウムがある。

本発明の角膜モルタル組成物は、創傷が治癒する間、Ｅ
ＣＭ物質を創傷中に保持するのに十分な粘度を有する。

すなわち、少なくとも治癒のための基質を形成するのに
十分な量のＥＣ１１物質が創傷中に保持される。ＥＣＭ
物質は支質表面に結合し、かなり速く基質を形成するか
ら、組成物が粘調液の密度を有し、涙液分泌によって傷
から洗い流されさえしなければ十分である。組成物は濃
い、ペースト状粘度を有することが好ましい。フィブロ
ネクチンおよびコンドロイチン硫酸塩は粘調な物質であ
るから、それらは低濃度でも角膜モルタル組成物に所望
の粘度を与えることができる。フィブロネクチンはそれ
だけで、約２％またはそれ以上の濃度で塩溶液に溶解し
たときに所望の粘度を与え始める。組成物の粘度の厳密
な上限はないとはいえ、医者がそれを傷の中に挿入でき
ないほど粘言周であってはいけない。

角膜モルタル組成物中に任意に存在し得るその他の眼科
学的に適合する物質としては、創傷治癒を促進するかも
しくは感染症または炎症を克服することが知られている
物質がある。たとえば抗性物質の既知有効量が組成物中
に含まれ得る。

本発明の位置実施態様において、角膜モルタル組成物は
フィブロネクチンと眼科学的に適合するキャリヤー物質
とから成り、その組成物は傷の中に組成物を十分保持す
ることのできる粘度を有する。次の処方がこの実施態様
の典型例である。

底−一立　　　　　　　１＊ フィブロネクチン　　　％〜０−４０％ＰＢＳ　　　　
　　　　　６０−９８％＊　総組酸物重量を基にしたパ
ーセント別の実施態様では、角膜モルタル組成物はフィ
ブロネクチン、コンドロイチン硫酸塩および眼科学的に
適合するキャリヤー物質から成り、その組成物は創傷中
に組成物を十分保持できる粘度を有する。次の処方がこ
の実施Ｂ様の典型例である。

底−一公　　　　　　　　旦 フィブロネクチン　　　　０．５−４０％コンドロイチ
ン硫酸塩　　０．５−７５％ＰＢＳ　　　　　　　　　
　２５−９９％本発明のまた別の実施態様では、角膜モ
ルタル組成物はフィブロネクチン、成長因子および眼科
学的に適合するキャリヤー物質を含み、その組成物は創
傷内に組成物を十分保持できる粘度を有する。次の処方
はこの実施態様の典型例である。

虞−一部　　　　　　　　ｌ フィブロネクチン　　　　０．５−４０％ＰＢＳ　　　
　　　　　　　６０−９９．５％Ｅ　Ｇ　Ｆ　　、　　
　　　　　　０．０１−１００μｇ／ｒｎ１また別の実
施態様では、角膜モルタル組成物はフィブロネクチン、
コンドロイチン硫酸塩、コラーゲンおよび眼科学的に適
合するキャリヤー物質を含み、その組成物は創傷内に組
成物を保持するのに十分高い粘度を有する。次の組成物
がこの実施態様の典型例である。

双−一部　　　　　　　　ｌ フィブロネクチン　　　　０．５−４０％コンドロイチ
ン硫酸塩　　０．５−７５％コラーゲン　　　　　　　
０．５−５０％ＰＢＳ　　　　　　　　　　２５−９８
．５％好ましい実施態様において、角膜モルタル組成物
はフィブロネクチン、コンドロイチン硫酸塩、成長因子
および眼科学的に容認できるキャリヤー物質から成り、
その組成物は創傷内に組成物を保持するのに十分高い粘
度を有する。次の処方はこの実施態様の典型例である。

威−一部　　　　　　　１ フィブロネクチン　　　　０．５−４０％コンドロイチ
ン硫酸塩　　０．５−７５％ＰＢＳ　　　　　　　　　
　２５−９９％Ｅ　Ｇ　Ｆ　　　　　　　　　　Ｏ，０
１−１００μｇ／戚単独ＥＣＭ物質としてコンドロイチ
ン硫酸塩またはフィブロネクチンを含む本発明の組成物
は、猫実験における放射状角膜切開後の平坦化の改善に
は至らなかった。しかしながら組織学的研究は、単独の
ＥＣＭ物質としてのコンドロイチン硫酸塩またはフィブ
ロネクチンの使用により、治癒組織の構造的−体化の改
善の結果として施療の減少がおこることを示した。

表皮成長因子とコンドロイチン硫酸塩との併用、および
表皮成長因子とフィブロネクチンとの併用はそれぞれ、
角膜平坦化を高める共力効果をもたらした。ＥＧＦは一
般に傷治癒を促進することが知られているとはいえ、放
射状角膜切開後の創傷冶癒剤としてＥＧＦのみを使用す
ると、切開部の治癒を速めるとはいえ、視力に関する　
手術の有効作用を逆戻りさせる傾向がある。さらに単独
ＥＣＭ物質としてのコンドロイチン硫酸塩またはフィブ
ロネクチンは各々、猫実験において対称と比較して平坦
化を減少させる結果になった。しかしＥＧＦをフィブロ
ネクチンまたはコンドロイチン硫酸塩と共に用いた場合
には、角膜平坦化に改善が認められた。

■、ネ１」ト乞友告 発明の方法を、角膜モルタル組成物を使用して角膜屈折
切開を治癒することにより視力の改善を高め、および（
または）施療を減少させることを特に例にとって、以下
に説明する。しかしながら角膜モルタル組成物は支質組
織にまで拡がった非外科的性質の角膜創傷を治癒するた
めにも同様な方法で使用でき、また角膜モルタル組成物
がこのような創傷の治癒に有都合な効果をもたらすこと
は当然である。

本発明の角膜モルタル組成物の角膜屈折手術への適用は
図面を参照して理解される。

第１（ａ）図は完全無傷角膜の一部の横断面図である。

外側層、すなわち角膜の凸面上の層は表皮（１０）で、
普通は細胞約５箇の厚さである。表皮（１０）の下にボ
ウマン膜（１４）がある（霊長類のみに存在）。ボウマ
ン膜（１４）は表皮（１０）を、角膜の比較的厚い構造
層である支質（１６）から分離している。

皮質（１６）は、コラーゲン、コンドロイチン硫酸およ
びケラチン硫酸を含む巨大分子と、細胞とを含んで成る
。デスメー膜（１７）は皮質（１６）を内皮（１８）か
ら分離している。内皮（１８）は細胞１箇の厚さの膜で
、支質（１６）を眼房水（図示してない）から分離し、
液体の支質（１６）への、および支ｉｔ″（１６）から
の運搬を調節する役割を有する。角膜細胞（２０）は皮
質（１６）全体に分布する。

第１（ｂ）図は角膜屈折手術直後の角膜の一部の横断面
図であり、■字形横断面を有する切開が支質（１６）に
行われている。この切開は角膜を弛緩させ、幾分平らに
し、それによって角膜の屈折率を変えて近視を軽減また
は排除する。第１（０１図は、本発明の角膜モルタル組
成物を使用しない手術の約３−５日後にあられれる角膜
の同じ横断部分の図面である。最初の切開壁（２２）を
形成する支質組織面の位置を、第１（Ｃ）図および第１
（ｄ）図に点線で示す。

治癒過程は切開壁（２２）の表面に沿ってのみおこり、
これら表面が上皮化された後にはじめておこる。

すなわち上皮細胞は表皮（１０）から下の方へ増殖して
きて、切開部の壁（２２）の全表面をお＼わなければな
らない。実際、治癒がおこるためには、上皮が切開の■
字形の底まで延びてこなければならない。第１（Ｃ）図
に示されるように、切開傷の閉鎖はＶの底から始まり、
上方へ進む。傷がＶの底から治癒するにつれて、傷の中
に入り込んでいた上皮細胞は第１（Ｃ）図の矢印で示す
方向に、傷から押し出される。傷から上皮細胞を追出す
能力が、創傷治癒における速度制限因子である。

切開部の正常の治癒過程において、すなわち角膜モルタ
ル組成物を使用しない場合において、切開部の壁（２２
）は■の底から始まって、ジッパ−のように元に引き戻
される傾向がある。これは手術後約２８日の切開傷の典
型的状態を説明する第１（ｄ）図に、より明らかに示さ
れる。傷が底部から上方に向って治って行（のにつれて
、切開の最初の壁（２２）を形成していた支質組織表面
は、幾分より近（、すなわち第１（ｄ）図の矢印（２６
）によって示される方向に引張り合わされた。

本発明の方法によると、角膜屈折手術の間に角膜モルタ
ル組成物を切開部に挿入する。角膜モルタル組成物を切
開部の壁（２２）上のコーディング剤として傷内に挿入
することができる。しかし切開部に挿入される角膜モル
タル組成物の量は、切開部壁（２２）を被覆するのみな
らず、切開部の壁（２２）の間の空所の少なくとも一部
を埋めるのにも十分であることが好ましい。

第２図は、発明の角膜モルタル組成物を切開傷に沈着さ
せた角膜屈折手術後約２８日の角膜の一部の横断面を示
す。切開部の壁（２２）の間の空間の最低的１％が充填
されるのが好ましい。切開の後部部分、すなわち°■°
°の底部にあたる切開部分が完全に埋まるのが特に好ま
しい。

角膜モルタル組成物は、創傷治癒物質が沈着するための
、そして細胞が移動して増殖するための基質を提供する
。すなわち、創傷治癒過程はもはや切開部の表面に限っ
てあられれるのでなく、むしろ角膜モルタル組成物によ
って占められた空間の全容積に同時にあられれ得る。角
膜モルタル組成物の切開部への挿入は、角膜細胞（２０
）を切開部壁（２２）間の空所へ移動せしめてそこで増
殖させ、コラーゲンのような創傷治癒物質を沈着せしめ
る。

角膜屈折率手術の結果を改善するという観点から重要な
ことは、切開部内の角膜モルタル組成物が治癒過程を通
じて、切開部の壁（２２）の間に空間を維持することで
ある。すなわちそれは、最初の切開壁（２２）を形成す
る皮質組織面が第１（Ｃ）図および第１（ｄ）図に例証
するように引き寄せられて合一することを阻止する。こ
れは第２図に、最初の壁（２２）を示す点線の位置によ
って示される。これらの壁には手術後引き寄せられて合
一することな（、切開の基部でいくらか離れるように移
動した。したがって角膜の弯曲を調節する手術の効果は
治癒過程によって後戻りすることはない。

本発明の角膜モルタル組成物を使用するもう一つの利点
は、治癒組織の構造的−体性に関係する。

はイ円盤状の形をもつ角膜細胞は、正常皮質組織の「木
目（ｇｒａｉｎ）　Ｊの面に方向づけられる。したがっ
て正常角膜の横断面を顕微鏡で見ると、それらα端の方
が見え、第１図に見られるように比較的細長い。角膜モ
ルタル組成物の効果を受けないで治癒過程が進むと、第
１（ｄ）図に見られるように、角膜細胞（２０）は治癒
領域にランダムな方向で分布し、それらの若干は顕微鏡
試験で丸く見える。このランダムな方向をとる結果、コ
ラーゲンは支質組織の「木目」に沿って並ばずに、角膜
細胞（２０）の端から渦巻き状に形成される。他方、本
発明の角膜モルタル組成物が創傷内に沈着する場合は、
それは第２図に示されるように角膜細胞（２０）を正し
く方向づける基質となり、そのためコラーゲンは支質組
・織の木目と共に形成される。対称動物における角膜細
胞（２０）の方向性の欠如は、施療の増加および美容的
に良くない治癒結果をおこした。

本発明の角膜モルタル組成物の使用は治癒過程を速める
かも知れない。既述のように、この組成物は治癒過程か
ら創傷面の幾何学的圧迫を排除する。その上この組成物
は、治癒過程でおこるべき切開表面の上皮化を促進する
。

角膜モルタル組成物は外科医によって、便利な手段、た
とえば孔の大きい針による注入または適当なこて状器具
の使用によって手術切開部に入れ。

られる。最も良い特定の方法は角膜モルタル組成物の粘
度に大きく依有する。

所望ならば、ガスおよび湿気を透過することのできるソ
フトコンタクトレンズを術後、角膜上に置き、角膜モル
タル組成物を切開部に確実に保持したま＼水分（湿気）
を透過せしめる。別法として、角膜の形をコンタクトレ
ンズの幾何学的形に合わせることのできるハードコンタ
クトレンズを角膜上に置き、治癒過程の間、角膜を所望
の形に固定することもできる。

本発明の方法を用いて、多くの例において屈折矯正度の
実質的増加が得られる。たとえば放射状角膜切開を家兎
で行った。その家兎の一方の眼を対照とし、角膜モルタ
ルを用いず、他の眼の切開部は、５０ｍｇフィブロネク
チン、２．６ｇコンドロイチン硫酸および１３−１５ｍ
ｇコラーゲンを燐酸緩衝液中に含む角膜モルタル組成物
を充填した。治癒７日後、角膜鏡検査で、角膜モルタル
組成物を充填した角膜の平坦化は１２〜１５ジオプトリ
ーで、対照の眼はわずか３〜４ジオプトリーであること
がわかった。さらに、角膜平坦化程度は、対照の眼では
治癒２日目以後徐々に小さくなったが、角膜モルタル組
成物を受けた眼ではわづかな増加がおきた。

発明の方法により平坦化程度が著しく増加するため、多
くの例で所望の屈折矯正程度を得るために必要な切開の
数を減らし、および（または）切開の深さを減らすこと
ができる。切開の深さを減らすことは、それはそれで手
術中の角膜穿孔の危険性を減らす。

以下の実施例は発明の実際をさらに詳しく説明するため
のものであって、発明の範囲を限定するものではない。

夫」１１−上 放射状角膜切開を多数の猫で行った。術前処置は、体重
測定、細隙灯試験、反射顕微鏡試験、角膜検鏡であった
。角膜の中心に大々（ｔａ　ｔｏｏ）を行った。

放射状角膜切開を行うために、各動物をケタミンーキシ
ラジン筋肉注射で鎮静し、その後各々の眼を局所麻酔剤
で処理した。保存剤を含まない眼科用塩溶液で眼を潅注
した。放射状角膜切開のために中心角膜の刺青のところ
で３１１Ｉ［Ｉｌ穿孔器によって光学的領域を定めた。

ルビーナイフを用いて、切る前に計った厚さ計の読みを
基にして最低角膜厚さの深さの９０％の切開を行った。

放射状角膜切開は１２．３．６．９時の方向に行い、３
ｍｍｊ＋］域の端から縁まで延ばした。

各カットを、保存剤を含まない眼科用塩溶液を入れた注
射器とつながっている２７ｇ？！注用カニユーレを用い
て潅注した。切開部を綿棒アプリケータまたはガーゼで
乾かした。放射状角膜切開後、対照の眼を除く各々の眼
に種々の組成物の一つを挿入した。対照の眼はその処置
を受けなかった。

表１は使用した種々の組成物を示す。この表で略語ｒＦ
ｎ」はフィブロネクチンを示し、ｒｃｓＪはコンドロイ
チン硫酸塩Ａ　；　ｒＥＧＦ　Ｊは表皮成長因子を示し
；　　ｒＰＢｓ　Ｊは燐酸緩衝塩溶液を示す。

表１ Ｋ 治療せず　　　０．２５ｍｇＦｎ＋１．５ｍｆ塩溶液液
体 ４　　　匹　　　　Ｆｎ＋Ｃ５Ｆｎ＋Ｃ５＋ＥＧＦ２５
ｍｇＦｎ　　　　　　　　　１ノ３ｇ、　　Ｃ３１／３
ｇｍＣ５２５ｍｇＦｎ ０．１ｍｌ塩？容ン夜　　１５ｍｇＥＧＦ非常に濃い　
　０．７戒塩溶液 非常に濃い ４　　匹　　　Ｃ３＋ＥＧＦ　　　　　　　　ＥＧＦ１
５μｇＥＧＦ　　　１５μｇ　ＥＧＦ１．３ｍｇ　ＣＳ
　　　　１．５　ｍＩｌ塩溶液１．１−１．２戚塩溶液
　　液　体 濃いペースト ４四　ＣＳ 片眼のみ　１．３ｇｍ　ＣＳ １．３　ｄ塩溶液 濃いペースト状 ３　匹　　　対照 片眼のみ　　ＲＫ ５６日後、角膜鏡を用いて冬眠の平坦化を測定した。ジ
オプトリーであられした平均平坦化量を治癒群と対照群
とで測定した。結果を表２に示す。

表−１ ５６日後の角膜の平坦化＊ 治　療　群　　　　　平坦化ジオプトリー表皮成長因子
（ＥＧＦ）　　　　　　　　１．５フイブロネクチン　
　　　　　　　１．５コンドロイチン硫酸塩　　　　　
　２．７対照　　　　　　３．１ コンドロイチン硫酸塩＆ＥＧＦ　　　　　３．８＊それ
ぞれの群における全部の眼の平均値光顕微鏡および電子
顕微鏡による猫組織試料の組織学的試験の結果、切開部
の構造的−体性は対照群に比較して全治療群で改善され
ることが判明した。治療動物では、程度の差はあるが、
支質的角膜細胞群が第２図に示されるように支質帯の間
に平らに形成されていた。これに比べて、対照動物の多
くの角膜細胞は丸い形を示し、あまりよく組織化されて
いなかった。治療動物における平らな分布は、正常角膜
の天然の木目に沿って走るコラーゲン沈着をおこし、そ
れに反し施療のある対照眼ではより環状の渦巻き状の分
布をおこした。

１旅斑−工 放射状角膜切開を４霊長類で行った（％〜治療、％〜対
照）。術前および手術処置は実施霊１の猫に用いたもの
と同じであった。外科的処置の終りに、治療群では本発
明の角膜モルタル組成物（ＣＭ）を切開部に充填した。

ばば、５０ｍｇフィブロネタチン、２．６ｇコンドロイ
チン硫酸、１．３ｄ１％コラーゲンおよび１０μｇ表皮
胃腸因子の混合物を全容量２．５−になるように塩溶液
に溶かしたものである。

対照群は塩溶液キャリヤーのみを受けた。

角膜鏡を用いて角膜の平坦化を７日間隔で測定した。ジ
オプトリーであられした平均平坦化を治療および対照眼
で測定した。第３図は平坦化のジオプトリーを手術後の
時間に対してプロントしたものである。第３図から、治
魚眼は、対照眼に比べて、術後期間を通じて角膜平坦化
をより著しい程度に維持することがわかる。７７日後、
対照眼が平均０．１ジオプトリーの平坦化しか示さなか
ったのに対し、治療眼は平均２．２ジオプトリーの平坦
化を示した。

【図面の簡単な説明】

第１（ａ）図は完全無傷角膜の一部の横断面図である。 第１（ｂ）図は角膜屈折手術直後の角膜の一部のＦまた
角月火、屯Ｐｒ４．存了ｕ’Ｊ３〜Ｓ”Ｊの角パ久の一
部の袂Ｖｎ′向図　て′ｈう　。 １１　（ｄ）＠１１　Ｓノ！明ノ３７Ｌ　ｈ・より゛組
成物＆）Ｉ（”Ｊかった角膜屈折手術後約２８日の角膜
の一部の横断図面である。 第２図は発明の角膜モルタル組成物を切開部に挿入した
角膜屈折手術後約２８日の角膜の一部の横断図面である
。 第３図は霊長類の放射状角膜切開術において術後時間に
対する角膜平坦化をプロットしたグラフ圀である。　■
プロットは、発明の角膜モルタル組成物を外科的切開部
に挿入した霊長類における角膜平坦化を示す。他のプロ
ットは塩溶液キャリヤーのみを切開部に入れた対照を示
す。 １０・・・表皮、１４・・・ボウマン膜、１６・・・支
質、１７・・・デスメー膜、１８・・・内皮、２０・・
・角膜細胞、２２・・・切開壁。 特許出願人　　アラ−ガン・インコーポレイテッド代理
人　弁理士　　１）　澤　　博　　昭（外２名） ＦＩＧ　／αノ ＦＩＧ、　２゜ 手続補正書（自発）

Claims (30)

【特許請求の範囲】
1. （１）角膜支質の創傷治癒を促進する方法であって、最
   低１種類の細胞外基質物質と眼科学的に適合するキャリ
   ヤー物質とを含んで成る角膜モルタル組成物を創傷内に
   置くことから成り、前記組成物は創傷治癒条件下におい
   て細胞外基質材料を創傷内に保持するのに十分高い粘度
   を有している方法。
2. （２）角膜支質を切開する角膜屈折手術後の角膜治癒を
   増進する方法であって、最低１種類の細胞外基質物質と
   眼科学的に適合するキャリヤー物質とを含んで成る角膜
   モルタル組成物を切開部に入れることから成り、前記組
   成物は創傷治癒条件下で細胞外基質物質を切開部内に保
   持するに十分高い粘度を有している方法。
3. （３）角膜モルタル組成物が細胞外基質物質と成長因子
   と眼科学的に適合するキャリヤー物質とを含んで成る特
   許請求の範囲第１項または第２項記載の方法。
4. （４）成長因子が表皮成長因子である特許請求の範囲第
   ３項記載の方法。
5. （５）細胞外基質物質がフィブロネクチン、コンドロイ
   チン硫酸塩およびコラーゲンの中から選ばれる特許請求
   の範囲第１項または第２項記載の方法。
6. （６）角膜モルタル組成物がフィブロネクチンおよび眼
   科学的に適合するキャリヤー物質を含んで成る特許請求
   の範囲第１項または第２項記載の方法。
7. （７）角膜モルタル祖成物が約０．５〜約９０重量％の
   フィブロネクチンを含む特許請求の範囲第１項または第
   ２項記載の方法。
8. （８）角膜モルタル組成物がフィブロネクチン、コンド
   ロイチン硫酸塩および眼科的に適合するキャリヤー物質
   を含んで成る特許請求の範囲第１項または第２項記載の
   方法。
9. （９）角膜モルタル組成物が、フィブロネクチン、成長
   因子および眼科学的に適合するキャリヤー物質を含んで
   成る特許請求の範囲第１項または第２項記載の方法。
10. （１０）角膜モルタル組成物が、フィブロネクチン、コ
    ンドロイチン硫酸塩、コラーゲンおよび眼科学的に適合
    するキャリヤー物質を含んで成る特許請求の範囲第１項
    または第２項記載の方法。
11. （１１）角膜モルタル組成物が、フィブロネクチン、コ
    ンドロイチン硫酸塩、成長因子および眼科学的に適合す
    るキャリヤー物質を含む特許請求の範囲第１項または第
    ２項記載の方法。
12. （１２）角膜モルタル組成物が、組成物の総重量に基づ
    いて約２％〜約４０％のフィブロネクチンと、約９８％
    〜約６０％の眼科学的に適合するキャリヤー物質とを含
    む特許請求の範囲第６項記載の方法。
13. （１３）角膜モルタル組成物が、組成物の総重量に基づ
    いて約０．５％〜約４０％のフィブロネクチン、約０．
    ５％〜約７５％のコンドロイチン硫酸塩および約２５％
    〜約９９％の眼科学的に適合するキャリヤー物質を含ん
    で成る特許請求の範囲第８項記載の方法。
14. （１４）角膜モルタル組成物が、組成物の総重量に基づ
    いて約２％〜約４０％のフィブロネクチンと、約６０％
    〜約９８％の眼科学的に適合するキャリヤー物質と、約
    ０．０１μｇ／ｍｌ〜約１００μｇ／ｍｌの成長因子と
    を含んで成る特許請求の範囲第９項記載の方法。
15. （１５）角膜モルタル組成物が約０．５％〜約４０％の
    フィブロネクチン、約０．５％〜約７５％のコンドロイ
    チン硫酸塩、約０．５２％約５０％のコラーゲンおよび
    約３５％〜約９８．５％の眼科学的に適合するキャリヤ
    ー物質を含んで成る特許請求の範囲第１０項記載の方法
    。
16. （１６）角膜モルタル組成物が、組成物の総重量に基づ
    いて約０．５％〜約４０％のフィブロネクチン、約０．
    ５％〜約７５％のコンドロイチン硫酸塩、約２５％〜約
    ９９％の燐酸緩衝塩溶液と、約０．０１μｇ／ｍｌ〜約
    １００μｇ／ｍｌ成長因子とを含んで成る特許請求の範
    囲第１１項記載の方法。
17. （１７）細胞外基質物質と眼科学的に適合するキャリヤ
    ー物質とから成り、創傷治癒条件下で細胞外基質物質を
    支質創傷内に保持するに十分高い粘度を有する角膜モル
    タル組成物。
18. （１８）角膜モルタル組成物が、細胞外基質物質、成長
    因子および眼科学的に適合するキャリヤー物質を含んで
    成る特許請求の範囲第１７項記載の角膜モルタル組成物
    。
19. （１９）成長因子が表皮成長因子である特許請求の範囲
    第１８項記載の角膜モルタル組成物。
20. （２０）約２〜約９０重量％のフィブロネクチンを含む
    特許請求の範囲第１７項記載の角膜モルタル組成物。
21. （２１）角膜モルタル組成物がフィブロネクチン、コン
    ドロイチン硫酸塩および眼科学的に適合するキャリヤー
    物質を含む特許請求の範囲第１７項記載の角膜モルタル
    組成物。
22. （２２）角膜モルタル組成物がフィブロネクチン、成長
    因子および眼科学的に適合するキャリヤー物質を含む特
    許請求の範囲第１８項記載の角膜モルタル組成物。
23. （２３）角膜モルタル組成物がフィブロネクチン、コン
    ドロイチン硫酸塩、コラーゲンおよび眼科学的に適合す
    るキャリヤー物質を含む特許請求の範囲第１７項記載の
    角膜モルタル組成物。
24. （２４）角膜モルタル組成物がフィブロネクチン、コン
    ドロイチン硫酸塩、成長因子、および眼科学的に適合す
    るキャリヤー物質を含む特許請求の範囲第１８項記載の
    角膜モルタル組成物。
25. （２５）角膜モルタル組成物が、組成物の総重量を基に
    して約２％〜約４０％のフィブロネクチンと約６０％〜
    約９８％の眼科学的に適合するキャリヤー物質とを含む
    特許請求の範囲第１７項記載の角膜モルタル組成物。
26. （２６）角膜モルタル組成物が組成物の総重量に基づい
    て約０．５％〜約４０％のフィブロネクチン、約０．５
    ％〜約７５％コンドロイチン硫酸塩および約２５％〜約
    ９９％の眼科学的に適合するキャリヤー物質を含む特許
    請求の範囲第１７項記載の角膜モルタル組成物。
27. （２７）角膜モルタル組成物が組成物の総重量に基づい
    て約０．５％〜約４０％のフィブロネクチンおよび約９
    ９．５％〜約６０％の眼科学的に適合するキャリヤー物
    質と、約０．０１μｇ／ｍｌ〜約１００μｇ／ｍｌの成
    長因子とを含む特許請求の範囲第１７項記載の角膜モル
    タル組成物。
28. （２８）角膜モルタル組成物が約０．５％〜約４０％の
    フィブロネクチン、約０．５％〜約７５％のコンドロイ
    チン硫酸塩、約０．５％〜約５０％のコラーゲンおよび
    約２５％〜約９８．５％の眼科学的に適合するキャリヤ
    ー物質を含む特許請求の範囲第１７項記載の角膜モルタ
    ル組成物。
29. （２９）角膜モルタル組成物が組成物の総重量に基づい
    て約０．５％〜約４０％のフィブロネクチン、約０．５
    ％〜約７５％コンドロイチン硫酸塩、約２５％〜約９９
    ％の燐酸緩衝塩溶液と、約０．０１μｇ／ｍｌ〜１００
    μｇ／ｍｌの成長因子とを含む特許請求の範囲第１７項
    記載の角膜モルタル組成物。
30. （３０）成長因子が表皮成長因子である特許請求の範囲
    第２９項記載の角膜モルタル組成物。