JPS63500633A - 微生物の感受性検定用装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 微生物の感受性検定用装置 本発明は、密閉性容器、微生物の増殖培地を被覆した四辺形状の担体および、そ の一方の面に物質非存在域によって分離された２つの抗微生物剤物質が適用され かつその他方の面に感受性を直接読み取るための目盛りがつけられる直角四辺形 状、透明性、非多孔質挿入テスト片を備える微生物の感受性検定（テスト）用装 置に関する。

微生物の感受性テストは、テストされる抗生物質および／または化学療法剤を微 生物の増殖培地にさらすことで、行っている。インキュベーション後、微生物増 殖地全体から非増殖環状域を分画する抑制ゾーンの大きさが読み取られる。種々 の抗微生物剤物質につ、いての微生物の感受性は、この方法で確定することがで きる。これは、当該微生物を原因とする感染症処置のための適当な抗微生物剤療 法を選択する際の、指針として使用することができる。微生物の感受性テストは 、純粋な分離体コロニーの懸濁液または感染微生物を含む生物学的流体のいずれ かを増殖培地に直接適用することで、行うことができる。

微生物の感受性の測定装置は、ｔｌｓ−Ａ−３４１，６９９８、ＤＫ−Ｃ−１３ ７０８９および５Ｅ−Ｃ−４０３３８２に記載されている。ＵＳ−＾−３４１６ ９９８は化学療法剤等の活性物質を含浸させた透明な乾燥寒天シートをについて 記載している。これらの寒天薬剤シートは、例えば薬剤を含浸させた寒天をプラ スチック材料の可動シート上に落下させることで、つくることができる。寒天薬 剤シートの乾燥後、このプラスチック材料を取り出し、ついで適当な形状および 寸法の片に切断し、使用に供する。これらは、例えば抗生物質ディスクに置き換 えることをも意図している。ＤＫ−Ｃ−１３７０８９は、吸収性担体からなる微 生物感受性測定用のインジケーターに関するもので、該担体上に殺菌剤を混合さ せた増殖培地を塗布し、その一方の面に耐湿層を適用している。５Ｅ−Ｃ−４０ ３３１１１２には、活性物質を多孔質担体を用いて増殖培地上に適用する方法が 開示されている。活性物質の濃度は該担体の長さ全体に沿って連続的に変化する と、述べている。この特許から明らかなことは、活性物質が多孔質担体から培養 培地に該担体の長手方向に移動することが必須であり、その結果、培養培地にお いて、所定の目盛りに対し濃度変化を読み取ることができるような正確さをもっ て活性物質の濃度変化を達成することはできない。また、この特許に従えば、２ つの活性物質を増殖培地に適用可能ではあるが、かかる方法によれば、単に、相 互に垂直な２つの方向への該活性物質の濃度変化が達成されるだけである。

さらに、生物学的流体を用いる微生物の感受性テストは、抗微生物剤物質に対す る単一の病原体の感受性を測定するための方法を説明することで、より詳細に例 示することができる。この方法では、適当な寒天培地等の微生物の増殖培地を塗 布した直角四辺形状の担体である、いわゆるディップ・スライド（ｄｉｐ−ｓｌ ｉｄｅ）が使用されている。このディップ・スライドは、例えばチューブにはめ 込められる蓋に取り付けられる。ディップ・スライドは尿の検体中に浸漬され、 それによって細菌を含む該検体が寒天表面にさらされる。その後、１つまたは複 数の、いわゆる抗生物質ディスクを寒天表面に適用する。これらは、多孔質材料 の小さなディスクで、所定量の抗微生物剤を含んでいる。これらのディスクを寒 天表面と接触させると、抗微生物剤が寒天培地中に拡散する。該ディスクをディ ップ・スライドに適用したのち、これをチューブ内に入れ、ついで該チューブを 密封する。その後、ディップ・スライドを一夜インキュベーター中でインキュベ ートしく約３７℃の温度）、ついでディップ・スライドをチューブからはずす。

結果は、細菌の増殖がごくわずかであるかあるいは全く生じない抑制域の外観を 調べ、その域の直径を測定することで、読み取られる。これにより、テストされ る抗生物質が当該微生物を原因とする感染症の治療に有効であるか否かについて の指針を得ることができる。この方法は、とりわけケモセラピイ（Ｃｈｅｍｏｔ ｈｅｒａｐｙ）２５巻２２７〜２３２頁（１９７９年）およびブラックショナー （Ｐｒａｃｔｉｏｎｅｒ）２２４巻９３１〜９３４頁（１９８０年９月）に記載 されている。この方法の欠点は、外来患者看護センターにおいてかかる方法の取 り扱いが困難なことである。なぜなら、該抗生物質ディスクは、その寸法が小さ いのでピンセットや針を使用しなければならないからである。

さらに、感受性テストの結果を読み取る際に外方デユープからディップ・スライ ドを取り出す必要があるので、ある種の感染の危険が存在する。抑制域の大きさ は手動で測定し、種々の抗生物質のための１組の種々の解釈用テンプレート（ｔ ｅｍｐｌａｔｅ）と比較しなければならず、これは、時間を浪費する手順である 。同時に、多孔質抗生物質ディスクに伴う技術的欠点が存在する。なぜなら、寒 天層の紙の多孔度の変化や種々の抗微生物剤の物理化学的特性の差異に基づき、 そこから寒天層への抗生物質の拡散が、常に均一には起こらないからである。こ れは、全ての多孔質担体について変化し、したがって全ての前記方法について変 化する。

本発明は、透明密閉性容器、゛微生物の増殖に適した培地を被覆した直角四辺形 状の担体、該容器を密閉するための手段（この手段に該担体を所望により取り付 けてもよい）、および微生物が増殖する培地表面に適用される直角四辺形状、透 明、非多孔質不活性テスト片）〔該テスト片の一方の面は、一方の抗微生物剤物 質がテス）・片の一端において極大濃度を有する濃度勾配で存在しかつ他方の抗 微生物剤物質がその反対側の端部において極大濃度を有する濃度勾配で存在する と共に、前記２つの濃度勾配帯の間に該物質が存在しないゾーンが設けられ、か つ２つの物質の濃度勾配が上記物質非存在ゾーンの付近のテスト片上の各部分に おいてその極小濃度を示すような方法で、適用される２種以上の抗微生物剤物質 を有し；前記テスト片の他方の面は、予め決定された濃度勾配がその目盛りの読 み取りに用いられる、感受性を直接読み取るための目盛りがつけられている。〕 を備えることを特徴とする微生物の感受性検定（テスト）用装置を提供するもの である。該テスト片は、所望によりグリップを有する。

第１図は本発明の装置の一興体例を示す斜視図、および第２および３図は該装置 の一部であるテスト片のより詳細な一具体例を示す模式図である。

第１図は、透明チューブ１１寒天層がその上に存在するディップ・スライド形の 直角四辺形状体３およびディップ・スライドに連結される蓋２からなる本発明の 装置の一具体例を示す。該図に示されたディップ・スライドは、例えば尿検体中 に浸漬され、その後抗微生物剤物質を含むテスト片４を寒天表面に適用し、装置 を密封する。

テスト片は、例えば第２および３図により詳しく示したタイプのものである。つ いで、装置全体を一夜約３７℃でインキュベ−１・する。

細菌の増殖は５で示され、他方、細菌増殖の抑制は６て示され、そこに存在する 抗生物質の濃度は細菌増殖の抑制に十分な濃度である。

明らかなように、ディップ・スライドをチューブｌから取り出す必要がなく、結 果を直接読み取るのが簡単である。

第２および３図に示されたテスト片４の一具体例におい°て、テスト片は、テス ト片の一端て所定の角度に曲げられたグリップ・タブを備えている。２種の抗微 生物剤物質は、テスト片の一方の面に、一方の該物質がグリップ・タブと一体連 結されたテスト片の端部において極大の濃度勾配を示すのに対し、他方の該物質 がテスト片の他端において極大の濃度勾配を示すような方法で、適用される。こ れら２つの勾配帯の間に、該物質が全く存在しないゾーン８か設けられている。

テスト片の他方の面に、目盛りがつけられている。第２図は、目盛りがつけられ たテスト片の面を示す。文字Ｒ，ＩおよびＳは、各々当該抗生物質に対する感受 性の耐性カテゴリー、中間しく正確な濃度を示すことができる（第２図の９）。

使用される抗生物質の略号は、１０で示される空間に付することかできる。第３ 図は、抗微生物剤物質が適用されるテスト片の面を示す。２つの抗微生物剤物質 は、１１およびＩ２で示され、該担体の各端部において極大濃度で、およびゾー ン８の各境界において極小濃度で存在する。

具体例において、容器の断面は円形で図示されているが、他の形状、例えば長円 形または四角形も使用することができる。

本発明のテスト片および容器に適した物質は天然および合成原料の、透明、不活 性ポリマー材料、例えばアクリル・プラスチック・スヂレン・プラスチック、塩 化ビニル・プラスチック等またはガラスである。それらは、同一の材料とずべき でない。

本発明によれば、異なるタイプの解釈用目盛り、例えば数値で示した目盛りを使 用することもできる。

寒天−寒天等のようなゲル化剤を含む増殖培地を直角四辺形担体に適用すること ができる。微生物の増殖に必要な栄養補給物は常法でこの培地に添加することが できる。

本明細書において用いる「微生物」なる語は、エンテロバクテリアセエ（ｅｎｔ ｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）、スタフイロコツシー（ｓｔａｐｈｙｌｏｃ ｏｃｃｉ）、ストレプトコツシー（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）、ヘモフィルス （ｈｅｍｏｆ　１ｌｕｓ）、ナイセリアセエ（ｎｅｉｓｓｅｒｉａｃｅａｅ）、 バクテロイデス（ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）およびクロストリシア（ｃｌｏｓｔ ｒｉｄｉａ）のような細菌、　ウィルス、および真菌、たとえばモールド（ｍｏ ｕｌｄｓ）、イースト（ｙｅａｓｔｓ）、例えばカンジダ（ｃａｎｄｉｄａ）を 包含する。

本明細書において用いる「抗微生物剤物質」なる語は、一種類の、または一種類 以上の組み合わせの抗微生物剤物質を意味する。抗微生物剤物質には抗生物質、 例えばアミノグリコサイド、β−ラクタム抗生物質、マクロライド抗生物質、ポ リミキシン、ポリペプチド、および他の化学療法剤、例えばスルホンアミド、抗 真菌剤、例えばポリエン抗生物質、例えばアムホテリシン、グリセオフルビン、 ５−フルオロシトシンおよびイミダゾール、抗ウィルス剤、例えばアマンタジン およびインターフェロン等が包含される。

該テスト片上に抗微生物剤物質の濃度勾配は、常法、例えば正確なマイクロピペ ット法で適用することができる。

本発明の装置を用いることにより、外来患者の看護センターにおいて感受性テス トを行うことが容易になる。グリップ・タブの使用によりテスト片をディップ・ スライドの寒天表面上に適用することが、ピンセット等の使用により抗生物質デ ィスクを適用するよりも、より容易になる。さらに、テスト片上につけられた解 釈用目盛りによって直接的な答えが得られるので、結果の読み取りを、ディップ ・スライドをチューブから取り出すことなく直接的に行うことができ、したがっ て、テストに従事する作業者の感染の危険が回避される。これにより、正確で再 現可能な結果が得られ、かつ時間を節約できる。なぜなら、本発明の装置では公 知の方法におけるような、抑制域の寸法とＭＩＣ（最小抑制濃度）値の比較から 得られる近似値に基づくテンプレートを、使用する必要がないからである。さら に、テスト片から寒天への、抗微生物剤物質の瞬間的な拡散が、非多孔質テスト 片の使用により達成されるので、本発明では反応層において安定かつ連続的な濃 度勾配が得られ、したがって多孔質担体を使用する際に生じうる妨害を回避する ことができる。正確な量の物質がテスト片に沿って所定の勾配でテスト片表面に 移動するので、テストに使用される抗微生物剤物質に対する微生物の感受性の、 精密かつ正確な測定結果が、良好な再現性をもって得ることができるのである。

ＦＩＧ、１ 国際調査報告

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．透明密閉性容器（１）、微生物の増殖に適した培地を塗布した長方形の担体 （３）、該容器（１）を密閉するための手段（２）（所望によりこの手段に前期 担体（３）を取り付けてもよい。）および微生物が増殖する培地表面に適用され る短冊状、透明、非多孔質テスト片（４）から成り、 前記テスト片の一方の面には、一種の抗微生物物質が該テスト片の一端において 最大濃度を有し、他種の抗微生物物質が該テスト片の他端において最大濃度を有 するような濃度勾配で２種またはそれ以上の抗微生物物質が適用されていると共 に、該２つの濃度勾配の間には抗微生物物質が存在しないゾーン（８）が設けら れており、かつ２種の抗微生物物質の濃度勾配がテスト片上の上記ゾーン（８） に隣る各部分においてその最小濃度を示すように適用されており、前記テスト片 の他方の面には、予め決定された濃度勾配がその目盛りの読み取りに用いられる 、感受性を直接読み取るための目盛りが設けられており、 前記テスト片は所望によりこれを伸張させてグリップ（７）を有していることも ある 微生物の感受性検定用装置。 ２．抗微生物物質が抗生物質、化学療法剤、抗真菌剤または抗ウイルス剤である 特許請求の範囲第１項記載の装置。 ３．テスト片（４）が天然源または合成源の透明、不活性ポリマー材料またはガ ラスからなる特許請求の範囲第１項または第２項記載の装置。 ４．テスト片（４）がアクリル・プラスチック、スチレン・プラスチック、塩化 ビニル・プラスチックまたはガラスからなる特許請求の範囲第３項記載の装置。 ５．テスト片のグリップが該テスト片と一体のグリップ・タブであって、該テス ト片に対し角度をなして曲げられる特許請求の範囲第１項〜第４項の１つに記載 の装置。