JPH0815427B2 - 微生物の感受性検定用装置 - Google Patents

微生物の感受性検定用装置

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JPH0815427B2
JPH0815427B2 JP61504206A JP50420686A JPH0815427B2 JP H0815427 B2 JPH0815427 B2 JP H0815427B2 JP 61504206 A JP61504206 A JP 61504206A JP 50420686 A JP50420686 A JP 50420686A JP H0815427 B2 JPH0815427 B2 JP H0815427B2
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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/22Transparent or translucent parts
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M37/00Means for sterilizing, maintaining sterile conditions or avoiding chemical or biological contamination
    • C12M37/04Seals
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/81Packaged device or kit

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、密閉性容器、微生物の増殖培地を被覆した
四辺形状の担体および、その一方の面に物質非存在域に
よって分離された2つの抗微生物剤物質が適用されかつ
その他方の面に感受性を直接読み取るための目盛りがつ
けられる直角四辺形状、透明性、非多孔質挿入テスト片
を備える微生物の感受性検定(テスト)用装置に関す
る。
微生物の感受性テストは、テストされる抗生物質およ
び/または化学療法剤を微生物の増殖培地にさらすこと
で、行っている。インキュベーション後、微生物増殖地
全体から非増殖環状域を分画する抑制ゾーンの大きさが
読み取られる。種々の抗微生物剤物質についての微生物
の感受性は、この方法で確定することができる。これ
は、当該微生物を原因とする感染症処置のための適当な
抗微生物剤療法を選択する際の、指針として使用するこ
とができる。微生物の感受性テストは、純粋な分離体コ
ロニーの懸濁液または感染微生物を含む生物学的流体の
いずれかを増殖培地に直接適用することで、行うことが
できる。
微生物の感受性の測定装置は、US−A−3416998、DK
−C−137089およびSE−C−403382に記載されている。
US−A−3416998は化学療法剤等の活性物質を含浸させ
た透明な乾燥寒天シートをについて記載している。これ
らの寒天薬剤シートは、例えば薬剤を含浸させた寒天を
プラスチック材料の可動シート上に落下させることで、
つくることができる。寒天薬剤シートの乾燥後、このプ
ラスチック材料を取り出し、ついで適当な形状および寸
法の片に切断し、使用に供する。これらは、例えば抗生
物質ディスクに置き換えることをも意図している。DK−
C−137089は、吸収性担体からなる微生物感受性測定用
のインジケーターに関するもので、該担体上に殺菌剤を
混合させた増殖培地を塗布し、その一方の面に耐湿層を
適用している。SE−C−403382には、活性物質を多孔質
担体を用いて増殖培地上に適用する方法が開示されてい
る。活性物質の濃度は該担体の長さ全体に沿って連続的
に変化すると、述べている。この特許から明らかなこと
は、活性物質が多孔質担体から培養培地に該担体の長手
方向に移動することが必須であり、その結果、培養培地
において、所定の目盛りに対し濃度変化を読み取ること
ができるような正確さをもって活性物質の濃度変化を達
成することはできない。また、この特許に従えば、2つ
の活性物質を増殖培地に適用可能ではあるが、かかる方
法によれば、単に、相互に垂直な2つの方向への該活性
物質の濃度変化が達成されるだけである。
さらに、生物学的流体を用いる微生物の感受性テスト
は、抗微生物剤物質に対する単一の病原体の感受性を測
定するための方法を説明することで、より詳細に例示す
ることができる。この方法では、適当な寒天培地等の微
生物の増殖培地を塗布した直角四辺形状の担体である、
いわゆるディップ・スライド(dip−slide)が使用され
ている。このディップ・スライドは、例えばチューブに
はめ込められる蓋に取り付けられる。ディップ・スライ
ドは尿の検体中に浸漬され、それによって細菌を含む該
検体が寒天表面にさらされる。その後、1つまたは複数
の、いわゆる抗生物質ディスクを寒天表面に適用する。
これらは、多孔質材料の小さなディスクで、所定量の抗
微生物剤を含んでいる。これらのディスクを寒天表面と
接触させると、抗微生物剤が寒天培地中に拡散する。該
ディスクをディップ・スライドに適用したのち、これを
チューブ内に入れ、ついで該チューブを密封する。その
後、ディップ・スライドを一夜インキュベーター中でイ
ンキュベートし(約37℃の温度)、ついでディップ・ス
ライドをチューブからはずす。結果は、細菌の増殖がご
くわずかであるかあるいは全く生じない抑制域の外観を
調べ、その域の直径を測定することで、読み取られる。
これにより、テストされる抗生物質が当該微生物を原因
とする感染症の治療に有効であるか否かについての指針
を得ることができる。この方法は、とりわけケモセラピ
イ(Chemotherapy)25巻227〜232頁(1979年)およびプ
ラックショナー(Practioner)224巻931〜934頁(1980
年9月)に記載されている。この方法の欠点は、外来患
者看護センターにおいてかかる方法の取り扱いが困難な
ことである。なぜなら、該抗生物質ディスクは、その寸
法が小さいのでピンセットや針を使用しなければならな
いからである。さらに、感受性テストの結果を読み取る
際に外方チューブからディップ・スライドを取り出す必
要があるので、ある種の感染の危険が存在する。抑制域
の大きさは手動で測定し、種々の抗生物質のための1組
の種々の解釈用テンプレート(template)と比較しなけ
ればならず、これは、時間を浪費する手順である。同時
に、多孔質抗生物質ディスクに伴う技術的欠点が存在す
る。なぜなら、寒天層の紙の多孔度の変化や種々の抗微
生物剤の物理化学的特性の差異に基づき、そこから寒天
層への抗生物質の拡散が、常に均一には起こらないから
である。これは、全ての多孔質担体について変化し、し
たがって全ての前記方法について変化する。
本発明は、透明密封性容器、微生物の増殖に適した培
地を被覆した直角四辺形状の担体、該容器を密閉するた
めの手段(この手段に該担体を所望により取り付けても
よい)、および微生物が増殖する培地表面に適用される
直角四辺形状、透明、非多孔質不活性テスト片)〔該テ
スト片の一方の面は、一方の抗微生物剤物質がテスト片
の一端において極大濃度を有する濃度勾配で存在しかつ
他方の抗微生物剤物質がその反対側の端部において極大
濃度を有する濃度勾配で存在すると共に、前記2つの濃
度勾配帯の間に該物質が存在しないゾーンが設けられ、
かつ2つの物質の濃度勾配が上記物質非存在ゾーンの付
近のテスト片上の各部分においてその極小濃度を示すよ
うな方法で、適用される2種以上の抗微生物剤物質を有
し;前記テスト片の他方の面は、予め決定された濃度勾
配がその目盛りの読み取りに用いられる、感受性を直接
読み取るための目盛りがつけられている。〕を備えるこ
とを特徴とする微生物の感受性検定(テスト)用装置を
提供するものである。該テスト片は、所望によりグリッ
プを有する。
第1図は本発明の装置の一具体例を示す斜視図、およ
び第2および3図は該装置の一部であるテスト片のより
詳細な一具体例を示す模式図である。
第1図は、透明チューブ1、寒天層がその上に存在す
るディップ・スライド形の直角四辺形担体3およびディ
ップ・スライドに連結される蓋2からなる本発明の装置
の一具体例を示す。該図に示されたディップ・スライド
は、例えば尿検体中に浸漬され、その後抗微生物剤物質
を含むテスト片4を寒天表面に適用し、装置を密封す
る。テスト片は、例えば第2および3図により詳しく示
したタイプのものである。ついで、装置全体を一夜約37
℃でインキュベートする。細菌の増殖は5で示され、他
方、細菌増殖の抑制は6で示され、そこに存在する抗生
物質の濃度は細菌増殖の抑制に十分な濃度である。明ら
かなように、ディップ・スライドをチューブ1から取り
出す必要がなく、結果を直接読み取るのが簡単である。
第2および3図に示されたテスト片4の一具体例にお
いて、テスト片は、テスト片の一端で所定の角度に曲げ
られたグリップ・タブを備えている。2種の抗微生物剤
物質は、テスト片の一方の面に、一方の該物質がグリッ
プ・タブと一体連結されたテスト片の端部において最大
の濃度を示すのに対し、他方の物質がテスト片の他端に
おいて最大の濃度を示すような方法で、被覆される。こ
れら2つの勾配帯の間に、該物質が全く存在しないゾー
ン8が設けられている。テスト片の他方の面に、目盛り
がつけれている。第2図は、目盛りがつけられたテスト
片の面を示す。文字R、IおよびSは、各々当該抗生物
質に対する感受性の耐性カテゴリー、中間的カテゴリー
および敏感カテゴリーを示すものである。該物質の等し
く正確な濃度を示すことができる(第2図の9)。使用
される抗生物質の略号は、10で示される空間に付するこ
とができる。第3図は、抗微生物剤物質が適用されるテ
スト片の面を示す。2つの抗微生物剤物質は、11および
12で示され、該担体の各端部において極大濃度で、およ
びゾーン8の各境界において極小濃度で存在する。
具体例において、容器の断面は円形で図示されている
が、他の形状、例えば長円形または四角形も使用するこ
とができる。
本発明のテスト片および容器に適した物質は天然およ
び合成原料の、透明、不活性ポリマー材料、例えばアク
リル・プラスチック・スチレン・プラスチック、塩化ビ
ニル・プラスチック等またはガラスである。それらは、
同一の材料とすべきでない。
本発明によれば、異なるタイプの解釈用目盛り、例え
ば数値で示した目盛りを使用することもできる。
寒天−寒天等のようなゲル化剤を含む増殖培地を直角
四辺形担体に適用することができる。微生物の増殖に必
要な栄養補給物は常法でこの培地に添加することができ
る。
本明細書において用いる「微生物」なる語は、エンテ
ロバクテリアセエ(enterobacteriaceae)、スタフィロ
コッシー(staphylococci)、ストレプトコッシー(Str
eptococci)、ヘモフィルス(hemofilus)、ナイセリア
セエ(neisseriaceae)、バクテロイデス(bacteroide
s)およびクロストリジア(clostridia)のような細
菌、ウィルス、および真菌、たとえばモールド(mould
s)、イースト(yeasts)、例えばカンジダ(candida)
を包含する。
本明細書において用いる「抗微生物剤物質」なる語
は、一種類の、または一種類以上の組み合わせの抗微生
物剤物質を意味する。抗微生物剤物質ぴは抗生物質、例
えばアミノグリコサイド、β−ラクタム抗生物質、マク
ロライド抗生物質、ポリミキシン、ポリペプチド、およ
び他の化学療法剤、例えばスルホンアミド、抗真菌剤、
例えばポリエン抗生物質、例えばアムホテリシン、グリ
セオフルビン、5−フルオロシトシンおよびイミダゾー
ル、抗ウィルス剤、例えばアマンタジンおよびインター
フェロン等が包含される。
該テスト片上に抗微生物剤物質の濃度勾配は、常法、
例えば正確なマイクロピペット法で適用することができ
る。
本発明の装置を用いることにより、外来患者の看護セ
ンターにおいて感受性テストを行うことが容易になる。
グリップ・タブの使用によりテスト片をディップ・スラ
イドの寒天表面上に適用することが、ピンセット等の使
用により抗生物質デイスクを適用するよりも、より容易
になる。さらに、テスト片上につけられた解釈用目盛り
によって直接的な答えが得られるので、結果の読み取り
を、ディップ・スライドをチューブから取り出すことな
く直接的に行うことができ、したがって、テストに従事
する作業者の感染の危険が回避される。これにより、正
確で再現可能な結果が得られ、かつ時間を節約できる。
なぜなら、本発明の装置では公知の方法におけるよう
な、抑制域の寸法とMIC(最小抑制濃度)値の比較から
得られる近似値に基づくテンプレートを、使用する必要
がないからである。さらに、テスト片から寒天への、抗
微生物剤物質の瞬間的な拡散が、非多孔質テスト片の使
用により達成されるので、本発明では反応層において安
定かつ連続的な濃度勾配が得られ、したがって多孔質担
体を使用する際に生じうる妨害を回避することができ
る。正確な量の物質がテスト片に沿って所定の勾配でテ
スト片表面に移動するので、テストに使用される抗微生
物剤物質に対する微生物の感受性の、精密かつ正確な測
定結果が、良好な再現性をもって得ることができるので
ある。

Claims (7)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】開口部を有し密封可能な透明容器(1);
    当該容器(1)の開口部に載置され当該開口部を密閉す
    るための蓋(2);微生物の増殖に適した培地からなる
    固体培地層をその表面に有しかつ微生物の感受性検定に
    際し検体に接触させたのち当該容器(1)内に収納され
    る長方形板状の担体(3);および微生物の感受性検定
    に際し微生物が増殖している前記固体培地層の表面に接
    触される短冊状、透明、非多孔質テスト片(4)を備
    え、 担体(3)上の前記固体培地層表面に接触されるテスト
    片(4)の一方の面の長手方向において、当該テスト片
    (4)のほぼ中央に抗微生物物質が存在しないゾーン
    (8)を設けるとともに、当該ゾーン(8)の両側に少
    なくとも一種の抗微生物物質被覆域と、当該抗微生物物
    質とは異なる少なくとも一種の抗微生物被覆域とを設
    け、当該上部被覆域および下部被覆域の各々を、当該物
    質の濃度が段階的に変化する濃度勾配であってテスト片
    (4)の長手方向の一端が最大濃度を示しかつゾーン
    (8)に隣接する部分が最小濃度を示すような濃度勾配
    で、被覆しており、かつ 前記テスト片(4)の他方の面には、前記した段階的に
    変化する濃度を示す、感受性を直接読み取るための目盛
    りを設けている ことを特徴とする微生物の感受性検定用装置。
  2. 【請求項2】抗微生物物質が抗生物質、化学療法剤、抗
    真菌剤または抗ウイルス剤である特許請求の範囲第1項
    記載の装置。
  3. 【請求項3】テスト片(4)が天然源または合成源の透
    明、不活性ポリマー材料またはガラスからなる特許請求
    の範囲第1項または第2項記載の装置。
  4. 【請求項4】テスト片(4)がアクリル・プラスチッ
    ク、スチレン・プラスチック、塩化ビニル・プラスチッ
    クまたはガラスからなる特許請求の範囲第3項記載の装
    置。
  5. 【請求項5】テスト片(4)がグリップ(7)を有する
    特許請求の範囲第1項記載の装置。
  6. 【請求項6】テスト片のグリップが該テスト片と一体の
    グリップ・タブであって、該テスト片に対し角度をなし
    て曲げられる特許請求の範囲第5項記載の装置。
  7. 【請求項7】担体(3)が、容器(1)の開口部を密閉
    するための蓋(2)に付設されている特許請求の範囲第
    1項記載の装置。
JP61504206A 1985-08-01 1986-07-28 微生物の感受性検定用装置 Expired - Lifetime JPH0815427B2 (ja)

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PCT/SE1986/000344 WO1987000858A1 (en) 1985-08-01 1986-07-28 Device for susceptibility testing of microorganisms

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JPS63500633A JPS63500633A (ja) 1988-03-10
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