JPS63230632A - リポキシゲナ−ゼ代謝刺激剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は医薬品製剤に関し、特にリポキシゲナーゼ代謝
産物の産生不足に起因する疾患の予防や治療に用いるリ
ポキシゲナーゼ代謝刺激剤に関するものである。

（従来の技術） 近年、細胞膜の構成成分であるリン脂質のグリセロール
骨格の２位にエステルとして結合しているアラキドン酸
は、細胞膜に対する種々の刺激に応じて遊離型脂肪酸と
なり、シクロオキシゲナーゼやリポキシゲナーゼの基質
となり、プロスタグランディン、トロンボキサン、ロイ
コトリエンやリボキシンに酵素的に転換されることが証
明されている。

特にアラキドン酸の炭素鎖の特定位置のみに酸素を添加
する酵素であるリポキシゲナーゼが、血小板や白血球、
リンパ球などの細胞質中に存在することが注目され始め
た。−リポキシゲナーゼは、アラキドン酸の炭素の５．
　８．　９．１１．１２．１５位にヒドロペルオキシ基
を導入して、ヒドロペルオキシエイコサテトラエン酸と
呼ばれるヒドロペルオキシ酸をつくり、このものは、不
安定で水酸基ラジカルを放出してヒドロオキシエイコサ
テトラエン酸と呼ばれるヒドロキシ酸に変化する。

自己免疫疾患などの免疫異常においては、各種の免疫担
当細胞の機能低下が知られている。これらの免疫担当細
胞の活性九進には、免疫異常の予防および治療から多大
の期待がかけられているが、満足すべき薬剤の開発が進
んでいない。

（発明が解決しようとする問題点） リポキシゲナーゼ代謝産物としては、５−リポキシゲナ
ーゼによって５−ヒト゛ロペルオキシエイコサテトラエ
ン酸に変換された後に、ロイコトリエンＡ４を経由して
、５位に水酸基を持ち、６位にグルタチオンのシスティ
ン部分の硫黄がチオエーテル結合しているロイコトリエ
ンＣ４〜Ｆ４の一連の化合物が平滑筋の収縮、血管透過
性や粘膜分泌の亢進に関与することで有名である。

１２−リポキシゲナーゼの代謝産物の１２−ヒドロペル
オキシエイコサテトラエン酸や、１２−ヒドロオキシエ
イコサテトラエン酸や、５　（Ｓ）、　１２（Ｓ）　−
ジヒドロオキシ−６，１０−）ランス−８，１４−シス
−エイコサテトラエン酸は、白血球遊走作用、好中球誘
引作用、血小板のトロンボキサン合成阻害作用などの多
彩な生理作用を示す、さらに、免疫担当細胞が発現する
機能のうち、ナチュラルキラー細胞抑制、スーパーオキ
サイド産生、脱顆粒、プロティンキナーゼＣ活性化の作
用を司るリボキシンは、５−１１５−リポキシゲナーゼ
によって生成された５　（Ｓ）、　１５（Ｓ）−ジヒド
ロオキシ−６，１０−トランス−８，１４−シス−エイ
コサテトラエン酸に、再度各リポキシゲナーゼが作用し
たトリヒドロキシアラキドン酸誘導体である。

以上に述べた如くアラキドン酸のリポキシゲナーゼ代謝
産物は、免疫機能に非常に強く関与していることが知ら
れている。

しかしながら、アラキドン酸の５−リポキシゲナーゼ産
物の５−ヒドロペルオキシエイコサテトラエン酸を経由
するロイコトリエンが平滑筋収縮比活性において、ヒス
タミンよりも１　、０００倍強く、さらに血管透過性亢
進を惹起し、粘膜浮腫や粘膜への細胞浸潤を促し、粘液
分泌を亢進することから炎症や喘息の原因物質と考えら
れるようになった。

さらに生体内の過酸化脂質が内皮障害により動脈硬化病
巣の形成原因物質であり、その産生は、動脈硬化の原因
とも考えられている。

これらの理由により、生体内の過酸化代謝物の産生全般
を危険視するため、多くのりポキシゲナーゼ阻害剤やロ
イコトリエン産生産物の抑制が多数提案され、リポキシ
ゲナーゼ代謝産物の抑制が各病態で必須条件であるかの
如（考えられている。

しかしながら、最も危険視されている気道収縮、喘息発
作に関与している物質としては、ロイコトリエンを始め
として、ヒスタミン、ＰＡＦ、）ロンホキサンＡ！、プ
ロスタグランディンＦ　ｔ＆、最近は、プロスタグラン
ディンＤ２も原因物質として注目されている。従って、
特異的にロイコトリエンの合成を阻害するものやアンタ
ゴニストが作られても、それで本当に喘息の治療が解決
できるか疑問である。

現在の如くロイコトリエン産生阻害薬を全身投与すると
、全身のロイコトリエン産生を阻害することにより、何
らかの予期せぬ副作用を生じる可能性がある。事実、ロ
イコトリエンが脳内で神経内分泌に重要な役割を担って
いることが明らかになった。

結局、リポキシゲナーゼ代謝産物のあるものが、白血球
を誘引し、活性化させる。しかし、ロイコトリエンが異
常に増えると、喘息やアレルギー免疫が引き起こされる
ので、この阻害剤の検討例はあるが、リポキシゲナーゼ
代謝を刺激する例は非常に少なく、こうした薬剤の開発
が待たれている。

本発明者らは、リポキシゲナーゼ代謝産物の産生低下に
起因する疾患に対する予防治療薬を探索した結果、ドコ
サヘキサエン酸とドコサヘキサエン酸誘導体が、血小板
、白血球でリポキシゲナーゼをきわめて強力に刺激し、
その代謝産物の産生を亢進することにより、リポキシゲ
ナーゼ代謝産物の産生低下に起因する疾患の予防治療薬
として有用であることを見出し、本発明を完成した。

（問題点を解決するための手段） すなわち、本発明の代謝刺激剤は、リポキシゲナーゼ刺
激活性を有するドコサヘキサエン酸またはその誘導体を
含有することを特徴とする。

本発明に使用されるドコサヘキサエン酸は、水産動物油
や海産クロレラ等の藻類、卵黄脂質、哺乳類の血球や肝
臓の脂質中に存在することが知られ、これらの単離法も
多数報告されている。

ドコサヘキサエン酸の誘導体には、脂溶性化合物として
トリグリセリド化物、エチルエステル化物、リン脂質化
１’Ｊ　、コレステロ°−ルエステル化物、トコフェロ
ールエステル化物、３−アミノメチルピリジンアミド化
物等があり、水溶性化合物としては、α−アミノ酸誘導
体化物がある。

ドコサヘキサエン酸およびドコサヘキサエン酸誘導体は
、極めて毒性が低く、経口、静注、腹腔投与による急性
毒性から得られるＬＤ、。は、その物理的投与限界量ま
で安全であり、長期間に及ぶ大量投与でも止血時間の延
長が一部に報告されているのみである。

リポキシゲナーゼは、カルシウム依存性であり、アデノ
シントリホスフェートやアデノシンジホスフェートの如
き細胞由来ヌクレオチドで活性化される。その他、細胞
内の数種の蛋白質性因子がアクティベーターとして発見
されているが、外来の刺激因子に関しては、白血球に対
して免疫的刺激、血小板に対してはトロンビン刺激がリ
ポキシゲナーゼ代謝を亢進することが知られているのみ
である。

そこで本発明者らは、エイコサペンクエン酸がリポキシ
ゲナーゼによって、ヒドロペルオキシ酸、ヒドロキシ酸
、５型ロイコトリエンに変換されるがリポキシゲナーゼ
代謝は、それほど強く抑制しないことが知られているの
で、ドコサヘキサエン酸も同様の作用を示すものと考え
た。ドコサヘキサエン酸は、シクロオキシゲナーゼの基
質にはなりえず、かつシクロオキシゲナーゼ反応を強く
抑制する。一方、ドコサヘキサエン酸は、リポキシゲナ
ーゼの基質にはなりえるがリポキシゲナーゼ反応に対す
る効果は、これまで不明であった。

ドコサヘキサエン酸およびドコサヘキサエン酸誘導体の
作用がエイコサペンタエン酸と同様の作用を有するか否
かを確認するために、次のような検討を行った。

ラットの多血小板血漿をアデノシンジホスフェートによ
って誘導される血小板凝集に対しては、ドコサヘキサエ
ン酸、ドコサヘキサエン酸誘導体およびエイコサペンク
エン酸は、いずれも５０μｇ／　ｍ１以上でも凝集抑制
は認められなかった。

培養血管内皮細胞からのプロスタグランディンＩ２放出
に関して、５〜２０μｇ’／ｄで、エイコサペンクエン
酸は、６０％程度の放出抑制が観察されたが、ドコサヘ
キサエン酸やドコサヘキサエン酸誘導体には、１０〜２
０％程度の放出抑制が認められたのみである。

プロスタグランディンＩ２は、各種の生物活性が知られ
ており、特に免疫作用に関与するアナフィラキシ−の抑
制、血管透過性凡退、あるいはライソゾーム膜安定化へ
の応用が期待されている。

ドコサヘキサエン酸やドコサヘキサエン酸誘導体がプロ
スタグランディンＩ２産生に影響しないので生化学的に
好ましい物質である。

血小板から生成されて、血小板凝集を促進するトロンボ
キサンＢ２の合成に及ぼすドコサヘキサエン酸、ドコサ
ヘキサエン酸誘導体、エイコサペンクエン酸の影響につ
いて、ラット洗浄血小板を用いて検討した。

４μｇのアラキドン酸から産生されるトロンボキサンＢ
ｚＭは、１μｇのエイコサペンクエン酸で生成量の７０
％が生成阻害される。ドコサヘキサエン酸やドコサヘキ
サエン酸誘導体は、同−景で、トロンボキサンＢ２生成
量の４０％しか生成阻害しないことが再確認された。

シクロオキシゲナーゼ代謝に対して、ドコサヘキサエン
酸は、エイコサペンクエン酸に類似した効果を持つが、
エイコサペンタエン酸よりもその効果は弱いと考えられ
た。そのため、リポキシゲナーゼ代謝に関しても同様の
傾向を示すものと考えていた。

しかし、本発明者らは、トロンボキサンＢ２の合成に対
する効果を測定する際に、予想外の現象を見出した。

血小板によるトロンボキサン８２合成の測定は、血小板
とラベル化したアラキドン酸をインキユベートシ、その
反応液のエーテル抽出物を薄層クロマトグラフィーで分
離して得た後、オートラジオグラムで行われる。この際
、アラキドン酸は、トロンボキサンＢ２以外に、１２−
ヒドロキシ−５゜８．１０−へブタデカトリエン酸や１
２−ヒドロキシエイコサテトラエン酸や１２−ヒドロペ
ルオキシエイコサテトラエン酸に代謝され□て、それら
がオートラジオグラム上に現れる。何故なら、血小板に
は、トロンボキサンＡ３合成系と１２−リポキシゲナー
ゼ系の二つのアラキドン酸代謝経路が存在するからであ
る。

特に１２−ヒドロキシエイコサテトラエン酸の量がエイ
コサペンクエン酸とドコサヘキサエン酸群に差のあるこ
とに注目して詳細に測定した結果、エイコサペンクエン
酸は、１２−ヒドロキシエイコサテトラエン酸の産生量
を２５％も抑制するが、ドコサヘキサエン酸群は、逆に
３０〜４０％も産生を促進することが判った。そこで、
他の細胞におけるリポキシゲナーゼ代謝を検討するため
、ラット好塩基性白血病細胞、すなわち、ＲＢＬ−１細
胞に対するエイコサペンクエン酸やドコサヘキサエンＭ
群の効果を調べた。ＲＢＬ−１細胞は、５−リポキシゲ
ナーゼに始まるロイコトリエンの生合成系をもち、可溶
性画分に１２−リポキシゲナーゼが存在し、培養によっ
て多くの均一な細胞を得ることができる。

この白血球に対するエイコサペンタエン酸やドコサヘキ
サエン酸群の効果は、血小板に対する効果と全く同一の
傾向を示した。１μｇのアラキドン酸から産生される５
−ヒドロオキシエイコサテトラエン酸量、１２−ヒドロ
オキシエイコサテトラエン酸量、５　（Ｓ）、　１２（
Ｓ）−ジヒドロオキシ−６゜１０−トランス−８，１４
−シス−エイコサテトラエン酸量は、１８ｇのエイコサ
ペンクエン酸で、その産生量を２０〜４０％も抑制する
が、ドコサヘキサエン酸群は、逆に３０〜１００％も産
生を促進することが判った。すなわち、エイコサペンタ
エン酸は、血小板や白血球の５−リポキシゲナーゼ、１
２−Ｉ７ボキシゲナーゼを共に抑制的に作用するが、ド
コサヘキサエン酸群は、両者に促進的に働いていること
が判った。現在まで、これら両方の酵素の活性をあげる
物質は、見つかっていなかった。

（発明の効果）　　・ 本発明によって提供されるリポキシゲナーゼ代謝刺激剤
は、ドコサヘキサエン酸、油溶性ドコサヘキサエン酸誘
導体、水溶性ドコサヘキサエン酸誘導体を含有するので
、リポキシゲナーゼ代謝産物の産生不足に起因する疾患
め予防や治療に有用である。

ドコサヘキサエン酸と油溶性ドコサヘキサエン酸誘導体
は、そのもの単独あるいは、各種の油溶性物質と相溶さ
せて、軟カプセルにすることができ、乳化剤や高圧乳化
機を使用すれば、乳剤、輸液、粉末製剤等ができる。

特に水溶性ドコサヘキサエン酸誘導体は、注射用蒸留水
への溶解のみで注射剤となり、さらにこの油分量やグリ
セリン量を調整すれば、強力な乳化剤や超音波乳化機を
使用せずに、予防治療剤としての脂肪輸液が調製できる
。

（実施例） 以下、調製例、実施例および試験例を示して本発明をさ
らに具体的に説明する。

ここで使用したドコサヘキサエン酸は、アプライドサイ
エン又社製、ドコサヘキサエン酸エチルエステルは、日
本油脂型のＤＨＡ−９０Ｅ　（００面積値９５．７％）
である、水溶性ドコサヘキサエン酸誘導体であるドコサ
ヘキサエン酸のし一α−アミノ酸誘導体の調製法を以下
に記す。

！ＩＪ製法 窒素雰囲気下でＬ−グルタミン酸１４．７　ｇ（０，１
モル）を、６０％含水アセトン中に溶解した。その溶液
に攪拌下、水酸化ナトリウム８．０　ｇ　（０，２モル
）を加えて水冷（２〜５℃）下で反応し、反応液が透明
な二相になるまで行い、Ｌ−グルタミン酸ジナトリウム
溶液とした。次に３０％水酸化ナトリウム水溶液２０ｄ
　（０，１５モル）とドコサヘキサエン酸クロライド４
１．６　ｇ　（０，１２モル）を各々滴下漏斗を通して
同時に約４０分かけて滴下した。さらに水冷下で２時間
攪拌すると白濁し、一部結晶が析出した０次いで５０〜
６０℃で１時間加熱還流し、反応物に水３００−を加え
、６Ｎ塩酸４０ｄでｐＨ１に調整した０反応液中の澄明
なアセトン層を分取し、溶媒を留去してから、この固形
残渣を少量のエタノールに溶解し、無水硫酸ナトリウム
層に通して不溶物を濾別した。この沈澱物をさらに大量
のエタノールで稀釈し、１０％水酸化ナトリウム溶液で
ｐＨ１１に調整し、沈澱が生じたことを確認してから、
エタノールを留去してＮ−ドコサヘキサエノイル−し−
グルタミン酸ジナトリウム塩の白色粉末状結晶を４３．
７　ｇ得た。

分析値　ＩＲニジＭ、、　（ｃｍ−’　）　１３００．
１４２０゜１６５０、１５５０．１０５０〜９４０ｃｍ
−’孤立トランス異性体　痕跡 ＵＶ：２３３＋＋ｌ　　共役ジエン酸　５％２６８ｍμ
　共役トリエン酸Ｏ％ ＦＡＢ−ＭＳ：　　（Ｍ＋Ｈ）″　５０２キャピラリー
カラムＧＣ：カーボワックス２０Ｍ。

液相５０ｍ、　２００℃恒温分析。

加水分解して得たドコサヘキサエン酸をジアゾメタン法
でエステル化した。二重結合のマイグレーションが原因
となるアーティファクトに由来するピークの崩れやシフ
トは認められなかった。

物性：注射用蒸留水に室温で完全溶解し、その溶液は無
色透明であった。

バイオアッセイ：　０．０８８モルのＮ−ドコサヘキサ
エノイル−し−グルタミン酸ジナトリウムの９５％エタ
ノール溶液を４７ｍＭ燐酸緩衝液（ｐ　Ｈ７）で稀釈し
た。ダイズリボキシゲナーゼ（シグマ社製）を、緩衝液
で１■／Ｍ＃１に溶かした０反応は、基質濃度０．００
１　Ｍに対し、酵素１０．０００単位／−を加え、２５
℃で５分間行った。氷冷したエチルエーテル／メタノー
ル１０．２　Ｍクエシ酸（３０／４０／１．　ｖ／ｖ）
で酸性（ｐＨ４）にすることによって反応を停止させた
。有機相からエチルエーテル中の反応生成物を抽出回収
した。低温でシリカゲルの薄層クロマトグラフィープレ
ートに回収した有機相を４℃以下でスポットし、石油エ
ーテル／エチルエーテル／酢酸（１５／８５１０．１．
　ｖ／ｖ）の溶媒で、−１０℃の冷凍庫に展開槽ごと入
れて、５０分間展開した。プレートは、沃素蒸気に暴露
する方法で発色した。

その結果を第１図に示す０図に示すように、Ｎ−ドコサ
ヘキサエノイル−し−グルタミン酸ジナトリウムのドコ
サヘキサエン酸は、リポキシゲナーゼによって、正常な
ドコサヘキサエン酸として基質認識された。

試験例１ ラットの好塩基性白血病（ＲＢＬ−１，ＡＴＣＣＮｏ、
　ＣＲＬ　１３７Ｂ）細胞を白血球として用い、この細
胞と、エイコサペンクエン酸、ドコサヘキサエン酸、ド
コサヘキサエン酸エチル、Ｎ−ドコサヘキサエノイル−
グルタミン酸ジナトリウムとを反応させた。

ＲＢＬ−１細胞は、燐酸緩衝液を含む生理食塩水で２〜
３回洗浄し、浮遊液とした。ＰＢＬ−１細胞（０，２Ｘ
１０６個）をディツシュにまき、５日目に細胞を集め、
２Ｘ１０’個の細胞を２ｎ＋Ｈの塩化カルシウム、１０
μ門カルシウムイオン−イオノフオアＡ２３１８７．１
ｎ　（１−”Ｃ）アラキドン酸と、３０℃で１０分間反
応させ（総量２００μｍ）、氷冷したエチルエーテル／
メタノール１０．２　Ｍクエン酸（３０／４０／１゜ｖ
／ｖ）を０．３−加えて反応を停止し、有機層に反応生
成物を抽出した。４℃でシリカゲル薄層クロマトグラフ
ィープレートに有機層をスポットして、石油エーテル／
エチルエーテル／酢Ｍ（１５：８５：０．１．　ｖ／ｖ
）の溶媒で、展開槽ごと一１０℃で５０分展開した。

展開プレートは、ラジオクロマトグラフィーで放射能の
分布を調べ、標準試料でＲｆ値が確認されている５−ヒ
ドロキシエイコサテトラエン酸（５−ＨＨＴＥ）、　１
２−ヒドロキシエイコサテトラエン酸（１２−ＨＥＴＥ
）　、５　（Ｓ）、　１２（Ｓ）−ジヒドロキシ−６，
１０−トランス−８，１４−シス−エイコサテトラエン
酸（５，１２−ＤＨＥＴＢ）の位置の放射能ピーク量を
コントロール量とした。上記と同一条件にて、ＲＢＬ−
１細胞と１ｎ（１−”Ｃ）アラキドン酸および試験試料
１■を同時に反応させ、各代謝物の放射能ピーク量を測
定した。ラベル化アラキドン酸単独時の各代謝産物の放
射能量をコントロール量とし、その量を１００として試
験試料を併用した場合の放射能量を表示した。その結果
を第１表に示す、この表に示すように、エイコサペンク
エン酸は、各リポキシゲナーゼに対して阻害作用を示し
ているが、ドコサヘキサエン酸群は、各リポキシゲナー
ゼに対して促進作用を示す刺激剤であることが明らかに
なった。このように５−リポキシゲナーゼと１２＝リポ
キシゲナーゼの両方に特異性を示す化合物の報告は今ま
でに見られなかったものである。

第１表 コントロール　　　　１００　　　１００　　　１００
ドコサヘキサエン酸　１７４　　　１５８　　　１３０
試験例２ ３．８％のクエン酸ナトリウム水溶液を加えたラット血
液を室温で１５分間、１２００　ｒｐｍで遠心分離を行
い、多血小板血漿を調製した。多血小板血漿１−に４μ
ｇ　　（１−＋４Ｃ）アラキドン酸を加え、３０℃で４
時間反応した。反応後、多血小板血漿を１５分間３００
Ｏｒｐｍで遠心分離を行い、血小板中に取り込まれた放
射活性を測定した。

得られた血小板にあらかじめ一２０℃に冷やしたエチル
エーテルを加え、ポルテックスミキサーで３０秒攪拌し
た。４℃で３分間１２０Ｏｒｐｍで遠心分離を行った後
、有機層をミクロピペットで薄層クロマトグラフィーの
端から２ｃｍの位置に４℃でスポットした。エチルエー
テル／石油エーテル／酢酸（８５／１５／　０．１．　
ｖ／ｖ）を展開溶媒として、展開槽ごと一１０℃の冷凍
庫で５０分展開した。フジＸ線フィルムに薄層クロマト
グラフィーを密着させ、ＸｖＡフィルム用カセントの中
で一晩暴露してオートラジオグラムを得た。標準試料で
Ｒｆ値が確認されているトロンボキサンＢ２と１２−ヒ
ドロキシエイコサテトラエン酸（１２−Ｈ１ｌ！ＴＥ）
の位置の放射能量をコントロール量とした。上記と同一
条件にて、多血小板血漿１−に−４μｇ　　（１−１４
Ｃ）アラキドン酸および試験試料１μｇを同時に反応さ
せ、各代謝物の放射能量を測定した。ラベル化アラキド
ン酸単独時の各代謝物の放射能量をコントロール量とし
、その量を１００として試験試料を併用した場合の放射
能量を表示した。

その結果、第２表に示すように、エイコサペンクエン酸
やドコサヘキサエン酸群はシクロオキシゲナーゼからト
ロンボキサン合成酵素のいずれかの段階を阻害し、その
阻害程度はエイコサペンクエン酸の方がドコサヘキサエ
ン酸群より約２倍強く阻害することから血小板凝集抑制
効果はエイコサペンクエン酸の方が強く、ドコサヘキサ
エン酸群にはこの効果が低いと思われる。エイコサペン
クエン酸は、アラキドン酸のシクロオキシゲナーゼ代謝
は強く抑制し、リポキシゲナーゼは弱く抑制することは
従来の報告と一致する。

しかし、ドコサヘキサエン酸群は、シクロオキシゲナー
ゼを弱く抑制するのに対して、１２−リポキシゲナーゼ
に対して促進作用を示す刺激剤であることが明らかにな
った。このようにドコサヘキサエン酸が血小板の１２−
リポキシゲナーゼを特異的に刺激するという報告は今ま
でに見られなかった。

第２表 コントロール　　　　１００　　　　　１００ドコサヘ
キサエン酸　　５６　　　　　　１３０試験例 血、　シクロオキシ゛　−ゼに・　る　　の２ラット培
養動脈平滑筋細胞からのプロスタグランディンＩ２放出
に関する測定をした。測定方法は、アイ・モリタ（１，
Ｍｏｒｉｔａ）らが報告した方法に従った（Ｌｉｐｉｄ
、　１８．　（１）　４２〜４９．　（１９８３））。

正常培養条件下で、３７℃にて、１０％ウシ胎仔血清を
補給した１−の培養液中（直径３０ｍｍのペトリ皿）に
本細胞および本細胞と試験試料５〜２０ｐｇ／−を添加
して一夜培養した。この培養細胞を無血清イーグルの最
小必須培養液で２回洗浄し、さらに１０％ウシ胎仔血清
を補給された１艷の培養液で正常条件下で１８時間再培
養した。その後、培養液中に放出された６−ケト・プロ
スタグランディンＦＩＣｘ（プロスタグランディン■２
の加水分解産物）をラジオイムノアッセイで測定した。

その結果を第３表に示す。この表は、血管シクロオキシ
ゲナーゼに対する作用を示しており、表に示されている
ように、エイコサベンクエン酸はシクロオキシゲナーゼ
からプロスタグランディン■２のいずれかの段階を阻害
するが、ドコサヘキサエン酸群はかなり多量に添加して
もその阻害は少ない。すなわち、血管から免疫に至る広
い生物活性を示すプロスタグランディン■２の血管平滑
筋（大動脈）での産生能をドコサヘキサエン酸群は、低
下させないことが明らかになった。

第３表 コントロール　　　　　　　　　　１．４以上の如くド
コサヘキサエン酸とドコサヘキサエン酸誘導体とは、そ
の生理活性効果に差がなく、リポキシゲナーゼに関して
も全くエイコサペンクエン酸と異なる生物活性を示し、
その刺激剤となることがわかった。

実施例１　　く軟カプセル剤〉 ドコサヘキサエン酸５，０００　ｇを真空脱気し、窒素
気流下において、１０％のグリセリンを含むゼラチンカ
プセルのオパール型に常法により、１カプセル当りドコ
サへキサエン酸を３３０　ｍｇずつ充填し、軟カプセル
剤とした。

実施例２　　く注射液〉 Ｎ−ドコサヘキサエノイル−し−グルタミン酸ジナトリ
ウム４００ｇと局方グリセリン１００ｇを注射用蒸留水
に混合して全液量を４１にして、１４５℃にて３秒間、
超高温瞬間加熱（Ｕｌ（Ｔ）殺菌装置で殺菌後、１０ｍ
１ずつ褐色透明アンプル中に真空充填し、１アンプル当
り本則が１　、０００ｍｇ含まれる注射液とした。

実施例３　く脂肪輸液） ドコサヘキサエン酸エチルエステル４００ｇト局方グリ
セリン１００ｇと卵黄リン脂質４８ｇを８０℃に加熱し
た注射用蒸留水に加えて全液量を４１にした。この混合
液をホモミキサーで分散させ、さらに二段式高圧噴射ホ
モゲナイザーにて精乳化した。

この液を１４５℃にて３秒間、超高温瞬間加熱（ＯＨＴ
）殺菌装置で殺菌後、１００−ずつ三層ラミネートのピ
ュアバック包装中に真空充填し、１パフク当り本則が１
０ｇ含まれる脂肪輸液とした。

実施例４　く粉末製剤〉 ５ｇのリン酸水素二ナトリウムを１．５１の水に溶解し
、この液を８０℃に加熱しながら１１０　ｇのカゼイン
ナトリウム、７０ｇの大豆蛋白質、２０ｇの全卵粉末、
６５０ｇのデキストリンおよび７゜５ｇのＮ−ドコサヘ
キサエノイル−し−グルタミン酸ジナトリウムを加え、
その混合液をホモミキサーで分散させた後に、２ｇの卵
黄リン脂質を含むドコサヘキサエン酸１４０．５　ｇを
、上記の水溶液に混合し、規定のビタミン製剤やミネラ
ル製剤をはかりとった。この製剤の固形分１００ｇに対
する栄養素組成が蛋白質２０ｇ、糖質６５ｇ、脂質１５
ｇに調整した。

この混合物を１４５℃にて３秒間、超高温瞬間加熱（Ｕ
　ＨＴ）殺菌装置で殺菌後、二段式高圧噴射ホモゲナイ
ザーにて精乳化した。さらにアトマイザ一式噴霧加熱乾
燥機で約８００ｇの粉末製品を得て、１０ｇずつ三層ラ
ミネート包装中に真空充填し、１バック当り本則が１．
４８ｇ含まれる粉末製剤とした。

この粉末製剤は、水に易溶性であり、２５％水溶液とす
ると、この溶液のエネルギーは、１ｋｃａｌ／＋ｄで、
粘度も２０　ｃ、ｐ、以下である点から、経管栄養素組
成液剤として用いた。

【図面の簡単な説明】

第１図は、１５−ヒドロペルオキシドコサへキサエン酸
（１５−ヒドロペルオキシＤＨＡ）とドコサヘキサエン
酸（ＤＨＡ）の薄層クロマトグラフィーの展開図である
。 図面の浄古（内容に変更なし） 第１図 展　間ｙ巨ル屹　［ｃｍｌ 手続補正書 昭和６２年　６月　１日 特許庁長官　　黒　　１）　明　　雄　　殿１、事件の
表示　　昭和６２年特許願第６４２５９号２、発明の名
称 リポキシゲナーゼ代謝刺激荊 ３、補正をする者 ：″！ 事件との関係　特許出願人 東京都千代田区有楽町１丁目１０番１号（４３４）日本
油脂株式会社 代表者岡本甲子男 ４、代理人

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）リポキシゲナーゼ刺激活性を有するドコサヘキサ
   エン酸またはその誘導体を含有するリポキシゲナーゼ代
   謝刺激剤。